Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
Talbi et al.
Laboratoire Agroalimentaire et Sant, Facult des Sciences et Techniques. Universit Hassan 1er. Route de Casablanca
Km 3,5 BP 539. Settat- Maroc. hayattalbi@yahoo.fr.
3
Laboratoire de Biochimie et Neuroscience Facult des Sciences et Techniques. Universit Hassan 1er. Route de
Casablanca Km 3,5 BP 539. Settat- Maroc.
2
Dpartement De Biologie Animale Facult Des Sciences de la nature et de la vie Universit Mentouri-Constantine.
4
Laboratoire national de la Police scientifique, Casablanca-Maroc. talbija@gmail.com
5
Institut Suprieur des Sciences de la Sant. Universit Hassan 1er. Route de Casablanca Km 3,5 BP 539. Settat- Maroc.
hilalia@hotmail.com.
Abstract
Nigella sativa L., known by the common name "black cumin" is a medicinal plant from the Ranunculaceae family, widely
used in traditional medicine across the Arab world and as a food condiment. In this work aqueous and methanolic extracts
were prepared from the seeds of this plant. The quantitative estimation of total flavonoids and phenols by the colorimetric
method showed that the extracts are rich in these compounds. Evaluation of antioxidant power was performed using the
method of DPPH free radical trapping. The result indicated that the methanol extract showed more antioxidant power
(EC50 = 0.64 0.08 mg / ml), than the ascorbic acid (EC50 = 0.13879 0.00112 mg / ml).
Keywords: Nigella Sativa L., flavonoids, antioxidant activity, polyphenols.
Rsum
Nigella Sativa L., connue sous le nom vernaculaire cumin noir est une plante mdicinale de la famille des
Ranunculaceae, largement utilise en mdecine traditionnelle lchelle du monde Arabe et comme condiment alimentaire.
Dans le prsent travail deux extraits ont t prpars, partir des graines de cette plante : lun mthanolique et lautre
aqueux. Lestimation quantitative des flavonodes et des phnols totaux par la mthode colorimtrique a montr que les
extraits sont riches en ces composs. Lvaluation du pouvoir antioxydant qui a t ralise en utilisant la mthode du
pigeage du radical libre DPPH a indiqu que lextrait mthanolique a montr une bonne efficacit antioxydante (EC50 =
0,64 0.08 mg/ml), suprieure a celle enregistre de lacide ascorbique (EC50 = 0,13879 0,00112 mg/ml).
Mots cls: Nigella Sativa L., flavonodes, activit antioxydante, Polyphnols.
1. Introduction
Lutilisation des molcules antioxydantes de synthse est actuellement remise en cause en raison des risques
toxicologiques potentiels. Dsormais, de nouvelles sources vgtales dantioxydants naturels sont recherches
[1,2]. En effet, les polyphnols sont des composs naturels largement rpandus dans le rgne vgtal qui ont une
1111
Talbi et al.
importance croissante notamment grce leurs effets bnfiques sur la sant [3]. Leur rle dantioxydants
naturels suscite de plus en plus dintrt pour la prvention et le traitement du cancer, des maladies
inflammatoires et cardiovasculaires [4]. Ils sont galement utiliss comme additifs en industrie agroalimentaire,
pharmaceutique et cosmtique [1]. Des recherches scientifiques ont t dveloppes pour lextraction,
lidentification et la quantification de ces composs partir des diffrentes sources telles que les cultures
agricoles et horticoles ou les plantes mdicinales [5-7].
La Nigella sativa est une plante de grande notorit, surtout lchelle du monde Arabe. Sa renomme en tant
que plante mdicinale et condimentaire dans les pays allant du Proche au Moyen Orient remonte plusieurs
sicles. Elle est maintenant cultive dans plusieurs rgions du monde surtout dans le bassin mditerranen et
en Inde [8, 9]. Au Maroc, elle est cultive ou subspontanne dans les champs et les jardins du Rif et dans les
oasis du sud. Cest une dicotyldone appartenant la famille des Ranunculaceae, utilise depuis des milliers
d'annes comme une pice pour la conservation des aliments, ainsi en tant qulment protecteur et curatif
contre plusieurs troubles, et connue pour avoir de nombreux proprits mdicamenteuses dans la mdecine
traditionnelle [10]. Cette plante a t largement tudie et de nombreuses proprits biologiques favorables ont
t signales comme antioxydant [11], antimutagene [12], hpatoprotecteurs [13], anti-corrosion [14] et les
effets anti-inflammatoires [15].
Le prsent travail sinscrit dans le cadre de la recherche et la valorisation des substances bioactives telles que les
substances naturelles doues dactivit antioxydante qui prsentent un intrt dans le domaine de la bio
pharmacologie. Lobjectif principal de ce travail est dvaluer in vitro lactivit anioxydante de lextrait
mthanolique des graines de Nigella Sativa selon la mthode de pigeage du radical libre DPPH.
2. Matriel utilis
2.1. Les graines de Nigella sativa L.
Les graines constituent la partie utilise de cette plante dans cette tude. Elles ont t cultives dans la rgion dArfoud
(Maroc). Les graines ont t broyes dans un mixeur pour lobtention dune poudre qui est par la suite conserve jusquau
moment dutilisation.
3. Methods
3.1. Prparation de lextrait methanolique
Les graines de Nigella sativa pralablement nettoyes et broyes sont mises macrer dans un mlange mthanol/eau (7 :3
V/V) un rapport de 1/10 (P/V), sous agitation douce pendant une nuit temprature ambiante. Lextrait hydro-alcoolique
est rcupr aprs filtration du mlange laide dun papier filtre, le mthanol est limin du filtrat par vaporation sous
pression rduite dans un rota-vapeur (BCHI). Permettant ainsi dobtenir un extrait caractris par une couleur brune
fonce, qui est considr comme tant lextrait brut.
3.2. Prparation de lextrait aqueux:
Une quantit de 5mg de la poudre des graines de Nigella sativa est mise macrer dans 10 ml dE.D un rapport de 1/2
(P/V), pendant 10 min temprature ambiante. Lextrait aqueux est rcupr dans un premier temps aprs filtration du
mlange laide dun papier filtre. Permettant ainsi dobtenir un extrait caractris par une couleur gristre, qui est
considr comme tant lextrait brut.
1112
Talbi et al.
4. Rsultats et Discussion
4.1. Teneurs en phenols totaux.
La dtermination de la teneur en phnols totaux dans les deux extraits de Nigella Sativa L. est estime par la
mthode de Folin- Ciocalteu [19] qui est base sur la rduction en milieu alcalin de la mixture
phosphotungstique (WO42-) phosphomolybdique ( MoO42-) du ractif de Folin par les groupements oxydables
des composs phnoliques, conduisant la formation de produits de rduction de couleur bleue. Ces derniers
prsentent un maximum dabsorption 760 nm dont lintensit est proportionnelle la quantit de polyphnols
prsents dans lchantillon [20]. Les teneurs ont t rapportes en g quivalent dacide gallique/mg dextrait du
matriel vgtal. Les rsultats montrent que la teneur moyenne en phnols totaux de lextrait aqueux est de
(163,3310,26 g/mg) alors que celle de lextrait mthanolique est de (163,333,05 g/mg) (Tableau 1). Les
rsultats de la courbe dtalonnage dacide gallique sont reprsents dans la Figure 1.
Tableau 1: Dosage des polyphnols totaux dans les extrais des graines de Nigella sativa.
Extraits
Teneur en phnols Totaux a
Mthanolique
163,333,05
Aqueux
163,3210,26
a
1113
Talbi et al.
Les valeurs des phnols totaux dans les deux extraits sont plus leves que les teneurs trouves par [21]
(27,07 0,58 g/mg) et par [22] (23,81 2,67 g/mg) dans lextrait aqueux de la nigelle. De mme la valeur du
dosage des polyphnols de lextrait methanolique sont beaucoup plus leve que celle trouve par [21] (33,64
0,34 g EAG/mg). Cependant les valeurs notes dans la prsente tude sont inferieures que les teneurs
enregistres par [22] (191,06 23,34 g/mg) dans lextrait du chloroforme de la Nigelle Sativa L.,
3
2.5
Y = 8,4884x + 0,0525
R = 0,9973
2
1.5
1
0.5
0
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
Absorbance 415 nm
2.5
2
Y = 5,996x + 0,1844
R = 0,9309
1.5
1
0.5
0
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
Talbi et al.
Tableau 2: Dosage des flavonoides dans les extrais des graines de Nigella sativa.
Extraits
Teneur en flavonodes b
Mthanolique
26643,4
Aqueux
169,265,78
b
N
+ Antioxydant -OH
NH
N
NO2
NO2
NO2
+ Antioxydant-O
NO2
DPPHH (Jaune)
DPPH (Violet)
1115
Talbi et al.
Selon les rsultats trouvs, lextrait mthanolique est dot dun pouvoir antioxydant modr, leur EC50 est de
160 mg/ml ce qui est largement suprieure celle de lacide ascorbique dont la valeur est de lordre de 34,69
mg/ml. Il a t dmontr que les molcules antioxydantes telles que lacide ascorbique, la tocophrol, les
flavonodes et les tanins rduisent et dcolorent le DPPH en raison de leur capacit cder lhydrogne [24].
Les polyphnols contenus dans les extraits de Nigella Sativa L. sont probablement responsables de lactivit
antioxydante de ces extraits dautant plus que lactivit antioxydant de lextrait thanolique trouv est toujours
suprieure que celle de lextrait aqueux [25]. Ceci est en accord avec les travaux mens sur les extraits de
Nigella Sativa L. qui ont mis en vidence une forte activit antioxydante de lextrait alcoolique, de lhuile, de
lhuile essentielle et de la Thymoquinone TQ extraits des graines de la Nigelle. Les mme tudes montrent que
la Nigella Sativa L., est une espce riche en composs phnoliques qui sont responsables de nombreuses
activits biologiques notamment lactivit antioxydante, anticancreux et antimicrobienne [25].
% dinhibhition
100
Y= 188,57x + 23,905
R = 0,6883
80
60
40
20
0
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
Conclusion
Ltude de lactivit antioxydante des extraits issus de lespce Nigella Sativa L., selon la mthode du pigeage
du radical libre DPPH a montr que lextrait mthanolique possde une activit antioxydante modre. Cet
extrait pourrait donc constituer une alternative certains additifs synthtiques. Il convient dattirer lattention
sur le fait que ces rsultats sont obtenus in vitro seulement. Leur intrt rside dans le fait quils permettent ainsi
de rechercher directement lactivit antioxydante ou prooxydante des composs ou des extraits in vivo pour
corrler les rsultats observs dans les deux cas.
References
1. Suhaj, M., Spice antioxidants isolation and their antiradical activity: a review. J. Food Compos. and Analys.
19 (2006) 531537.
2. Tadhani, M.B., Patel, V.H., et Subhash, R., In vitro antioxidant activities of Stevia rebaudiana leaves and
callus. J. Food Compos. and Analys. 20 (2007) 323-329.
3. Koechlin-Ramonatxo C., Oxygen, oxidative stress and antioxidant supplementation, or another way of
nutrition in respiratory diseases. Nutr. Clin. et Mtab. 20 (2006) 165-177.
4. Vrban D.I., Duda M., Vrban R., et Muntean S., Research Concerning the Organic Technology for Satureja
Hortensis L. Culture.Bulletin UASVM Agriculture. 66(2) (2009) 225- 229.
5. Huang, D., Ou, B., Prior, R. L., The chemistry behind antioxidant capacity assays. J. Agric. and Food
Chemist. 53 (2005) 1841-1856.
1116
Talbi et al.
6. Marc Fr., Davin A., Deglne-Benbrahim L., et Ferrand C., Mthodes dvaluation du potentiel antioxydant
dans les aliments. Erudit, M/S: mdecine sciences. 20(4) (2004) 458-463.
7. Sanchez-Moreno C., Methods used to evaluate the free scavenging activity in foods and biological systems,
Food Sci. and Technol. Inter. 8(3) (2002) 121-137.
8. Antuono, F., Hamaza, K., Composition of Nigella sativa and Nigella damascene from Egypt. Planta medica.
27 (2002) 142 -149.
9. Badary, O.A., Taha, R.A., Gamal El-Din, A.M., Abdel-Wahab, M.H., Thymoquinone is a potent superoxide
anion scavenger. Drug and chem. toxicol.. 26 (2003) 87-98.
10. Chopra R, Nayar S, Chopra I., In: Glossary of Indian medicinal plants. New Delhi, India: CSIR (1956) 175.
11. Suboh, S.M., Bilto, Y.Y., Aburjai, T.A., Protective effects of selected medicinal plants against protein
degradation, lipid peroxidation and deformability loss of oxidatively stressed human erythrocytes. Phytother.
Res. 18 (2004) 280284.
12. Bourgou S., Ksouri R., Bellila, A., Skandrani I., Falleh H., Marzouk B., Phenolic composition and
biological activities of Tunisian Nigella sativa L. shoots and roots. Comptes Rendus Biologies 331(2008) 48.
13. Kanter, M., Coskun, O., Budancamanak, M., Hepatoprotective effects of Nigella sativa L. and Urtica dioica
L. on lipid peroxidation, antioxidant enzyme systems and liver enzymes in carbon tetrachloride-treated rats.
World J. Gastroenterol. 11, (2005) 66846688.
14. Emad M., Al-Rasheedi M., J. Mater. Environ. Sci. 6 (1) (2015) 201-206.
15. Khadera, M., Bresgena, N., Eckla, P.M., Antimutagenic effects of ethanolic extracts from selected
Palestinian medicinal plants. J. Ethnopharm. 127 (2010) P: 319324.
16. Bahorun, T., Gressier, B., Trotin, F., Brunete, C., Dine, T., Vasseur, J., Gazin, J.C., Pinkas, M., Luycky, M.,
Gazin, M., Oxygen species scavenging activity of phenolic extracts from hawthorn fresh plant organs and
pharmaceutical preparations. Arzneim. Forsch. 46 (1996) 1086-1089.
17. Mansouri, A., Embarek, G., Kokkalou, E., Kefalas, P., Phenolic profile and antioxidant activity of the
Algerian ripe date palm fruit (Phoenix dactylifera). Food Chemist.. 89 (2005) 411-420.
18. Sanchez-Moreno, C., Methods used to evaluate the free radical scavenging activity in foods and biological
systems. Inter. J. Food Sci. and Technol.. 8 (2002) 121-137.
19. Li, H.B., Cheng, K.W., Wong, C.C., Fan, K.W., Chen, F., Jiang, Y., Evaluation of antioxidant capacity and
total phenolic content of different fractions of selected microalgae. Food chemist. 102 (2007) 771-776.
20. Georg, S., Brat, P., Alter, P., Amiot, J.M., Rapid determination of polyphnols and vitamin C in plantderived products. J. Agric. and Food Chemist.53 (2005) 1370-1373.
21. Meziti, A., Activit antioxydante des extraits des graines de Nigella sativa L tude in vitro et in vivo.
Mmoire de magistre. Universit el-haj lakhdar batna. Dpartement des Sciences Biologiques. (2009) P,
41-49.
22. Boudiaf, K., Etude des effets anti-xanthine oxydorductase et anti-radicalaires des extraits des graines de
Nigella sativa. Thse de magistre. Dpartement de biologie. Universit Ferhat abbas. (Stif) Algrie
(2006).
23. Majhenic L., kerget M.S., et Knez Z., Antioxidant and antimicrobial activity of guarana seed extracts. Food
Chemist. 104 (2007) 12581268.
24. De Pooter H.L. et Schamp N., Comparaison of the volatils composition of some Calamintha satureja species.
In : Progress in essential oil research. Ed. E-J. Brunk, Walter De Gruyter, Berlin. (1986) 139-150p.
25. Fabienne, O.L.,. La Nigelle, une pice dintrt mdicinal. Thse. (2013) P, 44-45.
(2015) ; http://www.jmaterenvironsci.com
1117