PREINFORME DE PRCTICAS DE LABORATORIO

BIOQUIMICA METABOLICA

Presentado:
Yesid Gerardo Corredor Amaya

PRESENTADO A:
JAIRO GRANADOS
MORENO
MARIA GABRIELA
ROMERO

TEMA N1 : ACTIVIDAD URESICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLGICO

INTRODUCCIN
La ureasa se encuentra presente en varios tejidos pertenecientes a los vegetales, por lo
tanto es fcil su determinacin de urea existente en diferentes materias primas vegetales,
por el mtodo la ureasa es rpida y sencilla, razones por las que su uso se ha
generalizado. Los resultados se expresan en unidades de pH, pudiendo variar desde 0,0
hasta un mximo de 2,0 a 2,5 unidades grano crudo.
de Kjeldhal o por titulacin del amonio liberado, titulando hidrxido de aluminio que es
producido por la hidrolisis, utilizando el mtodo estequiometrico ya que se producen
producen 2 moles de NH4OH por cada mol de urea desdoblada.
1. MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2. MATERIALES Y METODOS
2.1 Materiales y equipos requeridos
Materiales
Tubos de ensayo con
gradilla.
Erlenmeyer de
125mL
Pipetas de 5 y 10mL
matraz aforado de 100mL
Bao termostatado
Beaker de
400mL
Bureta de 25mL
Soporte universal
Pinzas para bureta
Probeta

Equipos
Balanza analtica
Agitadores magnticos
Cronometro
Cmara fotogrfica

2.2 Reactivo requeridos

Reactivo
Ureasa
Urea
Cloruro de mercurio
cido clorhdrico
Buffer fosfato
Indicador de Tashiro

Frmula

Conc.
0.1%
0,25M
1%

CO(NH2)2
HgCl2
HCl 0,1N

pH 7.0

2. 3 Procedimiento
2.3.1 En campo: en la toma de muestra se quiere saber cul es la calidad de la materia
prima con la que estamos trabajando, o cuando se quiere analizar el contenido de urea
que contienen los alimentos, la sangre, orina, o tejidos vegetales se realizar toma de
muestra de forraje o de suelo calculando el peso en gramos.
2.3.2 En el laboratorio:
Peso muestras: Wm; Extraccin con NaCl 1%; Centrifugacin; Filtracin; medida
sobrenadante: Vs; Titulacin con HCl; Registro de mL gastados: VHCl; Tabla de datos
3. DIAGRAMA DE FLUJO
Agregar 1,0
g de
muestra

Pasar a
tubo de
ensayo

En tubo
centrifuga

Filtrar
medir
en probeta

Agregar 1o
ml de Na Cl
al 1 %

Medir,
descartar

Agitar

Centrifugar
a 3500 rpn

Indicadore
s

Muestras analzadas
Forraje
Concen
trado

Rotular

Obtener
extracto

Suelo

Origen

Wm (g)
Vf (mL)
V HCl
(mL)

4. RESULTADOS ESPERADOS
Al aparecer un color rosado-violceo, en la muestra que contiene el color blanco
indica que los equivalentes-gramo del hidrxido de amonio fueron neutralizados
por los equivalentes-gramo del cido clorhdrico.
Realizar el procedimiento con los dems tubos y registrar el HCl que fue empleado
para cada tubo

5. GLOSARIO
TITULACIN: es un mtodo de anlisis qumico cuantitativo en el laboratorio, que
se utiliza para determinar la concentracin desconocida de un reactivo conocido
Sustrato: El trmino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente
de cultivo y que, en cierto modo, es el sustituto de la tierra
ureasa: es una enzima que cataliza la hidrlisis de urea a dixido de carbono y amonaco.
Centrifugacin : Es un mtodo por el cual se pueden separar slidos de lquidos de
diferente densidad por medio de una fuerza giratoria.
REFERENCIAS
https://es.wikipedia.org/wiki/An%C3%A1lisis_volum%C3%A9trico
https://es.wikipedia.org/wiki/Centrifugaci%C3%B3n
Jairo Enrique Granados Moreno. MSc. Protocolo de prctica. Bioqumica Metablica.
Universidad
Nacional
Abierta
y
a
Distancia.
UNAD.
2014
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/352001/GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_201
5-_Contextualizacion_practica_-BM-2X.pdf
www.juntadeandalucia.es/averroes/.../06/.../apuntes_formulacion.pdf
www.horturba.com/castellano/cultivar/ficha_manejo.php?ID=19

TEMA N2 . CARBONO ORGNICO, MATERIA ORGNICA Y CAPACIDAD

AMORTIGUADORA () DE SUELOS
INTRODUCCIN
las reacciones enzimticas, las cuales pueden ser con sustancias acidas o bases, con las
cuales debemos tener mucho cuidado ya que las especies vegetales y animales deben

tener un pH adecuado de tal manera que se podr obtener un ptimo rendimiento y

desarrollo de los organismos, en el caso de las plantas si el cultivo establecido no cuenta
con un pH optimo ser muy difcil lograr que las plantas asimilen los nutrientes, causando
que las reacciones catalizadas por enzimas no tengan una velocidad constante y se
dificulte el proceso de sobrevivencia en la planta
Para lograr un perfecto balance se requiere una buena capacidad amortiguadora, o
potencial qumico que tienen los sistemas edficos para regular y controlar su pH, cuando
son sometidos a procesos de acidificacin o alcalinizacin.
MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL
HUMNEDA
D

SUELO

BALANCE
ELECRROLITICO
MATERIA
ORGANICA

HUMOS

HUMINAS

MICROORG
ANISMOS

ACIDO
ORANICO
RESULTADO
DE
PROCESOS
BIOQUIIMICO
S

1. MATERIALES Y METODOS
2.1 Materiales y equipos
Material/Equipo
Potencimetro
Pipetas graduadas
Equipo de titulacin
Bureta graduada
Erlenmeyer
Beaker
Soporte universal
Muestras
Esptula
Agitador
Probeta graduada
Balanza

Caractersticas.
10 mL
Pyrex medianos
25mL
De 125mL
250 ml
Metlico, con pinza para
bureta
Concentrado, orina, sangre y
forraje.
metlica
De vidrio
100ml
digital

2.2. Reactivos requeridos

Dicromato
potasio

de

H2SO4
concentrad
o
K2Cr2O7

1N

FeSO4
NaOH

1N
0,1

Difenilamin
a
Sulfato de hierro
Hidrxido
de

REACCION
ES
BIOQUIMIC
AS
ENZIMATIC
AS

sodio
cido
Clorhidrico

HCl

Fenolftale
na

C20H14O4
C6H4COOC(C6
H4--HOH)2

0,1N

Agua
destilada
HPO4/H3PO4
Solucin
buffer
fosfato
2.3 Procedimiento
Variable(indicador)
Tcnica analtica utilizada campo :
En el
evaluada(o)
Realizar
toma de
pH
Mtodo potenciomtrico
muestra
Capacidad Amortiguadora
Mtodo titulacin
2.3.2 En el
laboratorio:
volumtrica
Para
Carbono
Orgnico (CO), aplicar el Mtodo de titulacin volumtrica, Para Carbono Orgnico
(CO) Mtodo Espectrofotomtrico, para La Capacidad amortiguadora el Mtodo
Potenciomtrico.
2. DIAGRAMA DE FLUJO

2.3.1

ADICIONAR +/- 20
GRAMOS DE
SUELO Y 40 ML
DE AGUA
DESTILADA

REGISTRAR
TODOS LOS
VALORES

ESPERAR 60
SEGUNDOS Y
OBSERVAR EL
PH, CON EL
ELECTRODO DEL
POTECIOMETRO

AGITAR EN
AGITADOR
MAGNTICO
POR 5MIN

AGREGAR 5 ML
DE NAOH 0,1N ,
AGITAR MEDIR PH

ESPERAR 60
SEGUNDOS
TOMAR EL PH

AGREGAR 5 ML DE
NAOH 0,1N , AGITAR
DE NUEVO POR UN
MINUTO Y MEDIR EL
PH2

TERCER Y CUARTO
BEAKERS,
ADICIONAR 20ML
DE AGUA
DESTILADA Y 20
ML DE SOLUCIN
BUFFER PH 7,0,

TABLA DE DATOS
Carbono orgnico, mtodos volumtricos y para capacidad amortiguadora de
muestras biolgicas espectrofotomtrico.
Muestras
Wm (g)

Valores Evaluados
Vm (ml)
pH 1

pH 2

Concentrad
o
Harina
Forraje

Datos potenciomtricos para capacidad amortiguadora de Suelos

Muestras
Suelo 1

Suelo 2

Peso
(Wm)

Vol
(mL)

pH1

pH2

Agua
destilada
Solucin
Buffer

TABLA 3. Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas.

Muestras

(mEq
HCl
/pH)

(mEqNaOH
/pH)

P ()
HCl

P ()
NaOH

Concentrad
o
Harina
Forraje

3. RESULTADOS ESPERADOS
Al Colocar el Erlenmeyer beaker que contiene la solucin diluida de suelo debajo de la
bureta y Titular lentamente, adicionando el sulfato sobre la solucin hasta debe aparecer y
permanecer un color verde esmeralda brillante.
Carbono orgnico
Materia Orgnica
Nitrgeno total.
4

GLOSARIO

ESPECTROFOTMETRO : es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve

para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma
magnitud fotomtrica relativos a dos haces deradiaciones y la concentracin o reacciones
qumicas que se miden en una muestra.
CAPACIDAD AMORTIGUADORA: La capacidad amortiguadora de un tampn es la
cantidad de cido o de base que se puede agregar, antes de que el pH comience a
cambiar de modo apreciable, y est determinada por el valor real de las concentraciones
de los componentes del par cido/base conjugado.
MTODO POTENCIOMTRICO: Sirve para medir el Ph de una solucin.
5 REFERNCIAS
https://es.wikipedia.org/wiki/Espectrofot%C3%B3metro
http://docencia.udea.edu.co/cen/QuimicaAnaliticaII/pot1.html
Jairo Enrique Granados Moreno. MSc. Protocolo de prctica. Bioqumica Metablica.
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TEMA N3. DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE),

EN FORRAJES, POR EL MTODO DE NELSON-SOMOGYI
INTRODUCCIN
por el mtodo de fenol-cido sulfrico es un procedimiento que nos ayuda a conocer
dichas proporcionas en alimentos lquidos, extractos lquidos, materiales de celulosa,
entre otros, esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio, ya que los
azucares simples, oligosacridos, polisacridos, y sus derivados dan una coloracin al
entrar en contacto con fenol cido sulfrico.
Las plantas vegetales estn compuestos por carbohidratos estructurales y no
estructurales, los no estructurales se almacenan en rganos vegetativos como races,
rizomas, estolones, coronas y parte inferiores del tallo Los principales CNET en los tejidos
de especies forrajeras son monosacridos como glucosa y fructosa, disacridos como
sucrosa y maltosa y polisacridos como almidones y fructosanos .
1. MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

2 MATERIALES Y METODOS
Materiales y equipos

Materiales
Vidriera

Equipos
Tubos de ensayo
Gradilla
pinzas para bureta
erlenmeyer de 125mL
pipetas de 5 y 10mL
matraz aforado de 100mL
bao termostatado
Beaker de 400mL
bureta de 25mL
soporte universal

Filtrado
para carbohidratos
no estructurales

Reactivos requeridos
Reactivo
Fenol
cido sulfrico
Hidrxido de sodio
Agua destilada
Glucosa

Frmula
C6H5OH
H2SO4
NaOH
H2O

C6H12O6
.

Concentracin
5%
1N
O,6N
20 mL
1%

Procedimiento
En el campo: Realizar toma de muestras
En el laboratorio:
Pesar +/- 2.0g de muestra en balanza analtica y registrar como: (Wm), depositarla
luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucin de HCl 0,6N. Agitar
constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos.
Llevar el beaker con la solucin al bao termostatado y calentar a 90C,durante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro.
Medir el volumen del filtrado(Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo, adicionar a ste
5mL de NaOH 0,6N, agitar por 15 segundos, tapar y rotular as: FFCNE: Filtrado de
forraje para carbohidratos no estructurales.

Lectura espectrofometrica:
Alistar el espectrofotmetro a una , calibrar el aparato con el tubo blanco, ajustando a
100% de Transmitancia (%T) y 0,000 de Absorbancia (A)
Leer la Absorbancia (A) de los tubos st y m; registrar en su tabla de datos

3 DIAGRAMA DE FLUJO
PESAR +/- 2.0G
DE MUESTRA Y
REGISTRAR

AGREGAR 50 ML
DE SOLUCIN DE
HCL 0,6N

AGITAR
DURANTE 3
MINUTOS

LLEVAR EL
BEAKER CON LA
SOLUCIN AL
BAO
TERMOSTATADO

CALENTAR A
90C,DURANTE
20 MIN

DEJAR ENFRIAR
POR 5 MIN Y
FILTRAR SOBRE
PAPEL FILTRO

MEDIR EL
VOLUMEN DEL
FILTRADO(VF) Y
PASAR 5ML A UN
TUBO DE
ENSAYO

ADICIONAR A
STE 5ML DE
NAOH 0,6N,
AGITAR POR 15
SEGUNDOS

TAPAR Y
ROTULAR

4. TABLA DE DATOS
Datos para la cuantificacin de CNE
Indicadores

Descripcin

wm

Peso de la
muestra

VF

Volumen del
filtrado

A st

Absorbancia del
estndar

Am

Absorbancia del
tubo que contena
el FFCNE

Valor

5. RESULTADOS ESPERADOS
La determinacin cantidad de carbohidratos totales No estructurales, basndose en su
contenido de almidones hidrolizables y azcares solubles
6. GLOSARIO
ALMIDONES HIDROLIZABLES: Son los que producen azcares (principalmente,
glucosa) para el metabolismo. Este grupo incluye azcares simples, sacarosa y algunos
almidones que son fcilmente digeridos en el intestino delgado y producen fluctuaciones
en la glucosa en sangre despus de ingerirlos.

ESPECTROFOTOMTRICA: Es la medicin de la cantidad de energa radiante que

absorbe o transmite un sistema qumico en funcin de la longitud de onda; es el mtodo
de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y bioqumicas.
El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o
transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
http://www.horse1.es/es/inicio/39-publicaciones/cientificos/117-los-carbohidratos
https://es.wikipedia.org/wiki/Espectrofotometr%C3%ADa
Jairo Enrique Granados Moreno. MSc. Protocolo de prctica. Bioqumica Metablica.
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TEMA IV: ACTIVIDAD CATALTICA DE LA CATALASA

INTRODUCCIN
La catalasa se obtiene fundamentalmente a partir de microorganismos y su funcin es
convertir el agua oxigenada (H2O2) en agua (H20) y oxgeno
El uso de esta enzima permite alargar la vida til de zumos de ctricos, cerveza y vino ya
que, al degradar el agua oxigenada (un agente oxidante) en sustancias no reactivas (agua
y oxgeno) se inhiben las reacciones oxidativas sin problemas secundarios.
1. MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

MTODO
PERMANGANO
MTRICO

SE OBTIENE A
PARTIR DE
MICROORGANI
SMOS

CATALASA

ENZIMA, QUE
PERMITE
PERDURAN LA
VIDA DE
ALGUNOS
ALIMENTOS

INHIBE LAS
REACCIONES
OXIDATIVAS

GENERA POR
LA OXIDACIN
DE CIDOS
GRASOS(AG)
EN LOS
PEROXISOMAS

2. MATERIALES Y METODOS
2.1 Materiales y equipos
Soporte Universal
Bureta
Pinzas
Elenmeyer
Montaje
de
Titulacin

Pipeta graduada
Probeta graduada
beaker de 400mL
Tubo de ensayo
Gradilla

2.2 Reactivos requeridos

Reactivo

Frmula

Perxido de
Hidrogeno
cido sulfrico
Perganmanato
de potasio
Extracto de
catalasa

H2O2

Concentrac
in

H2SO4
KMnO4

2N

(ECAT)

0,01M
gr

2.3 Procedimiento
2.3.1 En el campo: Recoger las muestras
2.3.2 En el laboratorio Pesar ms o menos 2g de muestra picada pulverizada, registrar
el valor como: Wm y colocarla en un tubo de centrifuga, luego adicionar 10mL de solucin
fra de buffer fosfato 0,05M, pH=6,8-7,0, agitar, con agitador de vidrio (3min) y centrifugar
a 2500rpm durante 5min. Sacar el sobrenadante, filtrar y medir su volumen, registrarlo
como: Vf y tomar 5 mL de ste para depositarlo en un tubo de ensayo, taparlo, rotularlo
como: EVCAT(extracto de verdura para catalasa ) EFCAT(extracto de fruta para
catalasa), ECCAT (extracto de concentrado para catalasa), ESCAT, colocarlos
inmediatamente en bao de hielo.
3

DIAGRAMA DE FLUJO

PESAR MS O
MENOS 2G DE
MUESTRA PICADA
PULVERIZADA

REGISTRAR EL
VALOR COMO: WM

COLOCARLA EN
UN TUBO DE
CENTRIFUGA

ADICIONAR 10ML
DE SOLUCIN
FRA DE BUFFER
FOSFATO 0,05M,
PH=6,8-7,0,
AGITAR

CENTRIFUGAR A
2500RPM
DURANTE 5MIN

FILTRAR Y MEDIR
SU VOLUMEN,
REGISTRARLO
COMO: VF

TOMAR 5 ML
,DEPOSITARLO EN
UN TUBO DE
ENSAYO,
TAPARLO,
ROTULARLO.

COLOCARLOS EN
BAO DE HIELO

4. TABLA DE DATOS
Muestras /
tubos

Indicadores
Wm (g)

Suelo
Harina
Forraje
Verdura
Blanco
Tipo de
muestras
analizadas

Vf (mL)

VKMnO4
(mL)

Origen, ubicacin geogrfica,

regin, agroclimatologa

4. RESULTADOS ESPERADOS
Se determin la actividad de la catalasa por mtodo permanganomtrico, y se cuantifico la
actividad enzimtica de la catalasa en muestras de origen vegetal
5. GLOSARIO
CATALASA La catalasa es una catalaza perteneciente a la categora de
las oxidorreductasas que cataliza la descomposicin delperxido de hidrgeno (H202)
en oxgeno y

H2O

REACCIONES OXIDATIVAS:
Es una reaccin qumica en la que uno o ms electrones se transfieren entre los
reactivos, provocando un cambio en sus estados de oxidacin
6 REFERENCIAS
https://es.wikipedia.org/wiki/Catalasa
Fuente Internet: http://www.2bachillerato.es/biologia/tema13/tema13.pdf

Es propiedad:
www.profesorenlinea.Cl
- Registro N 188.540
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TEMA V: CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTECO EN

SUELOS Y PASTOS, MTODO ATA, DE VAN SOEST

INTRODUCCIN
Los pastos contienen compuestos nitrogenados de origen proteico y no proteico, que
pueden variar dependiendo de la madurez de la planta (Church y Fontenot, 1979, el
contenido total de este nitrgeno (N) no siempre resulta completamente utilizable a nivel
digestivo, ya que parte de este N se encuentra incrustado en la pared celular indigestible
(Pichard y Van Soest, 1977; Van Soest, 1982), lo que puede reducir el aprovechamiento
del nitrgeno ingerido. En este laboratorio se pretende cuantificar por el mtodo de Van
Soest el nitrgeno no proteico contenido en una muestra de forraje.
1. MENTEFACTO O DIAGRAMA CONSEPTUAL

(FRACCIN
A DE VAN
SOEST )

REACTIVOS

ACIDO
TRICLOROACTIC
O (ATA) AL 10%
( CL3-C-COOH )

AGUA DESTILADA

CUANTIFICACIN
DE NITROGENO
NO PROTEICO
FORRAJES Y
SUELO

PUEDE SER
ASIMILADO O NO
ASIMILADO POR
EL ANIMAL

2. MATERIALES Y METODOS
2.1 Materiales y equipos
Balanza Analtica
nevera
Vaso
de espectrofotmetro

precipitado
tubo de ensayo
2.2 2 Reactivos requeridos
Reactivo

Frmula

cido
Tricloroactico
(ATA

( Cl3-CCOOH )

Concentrac
in
Al 10 %

Agua destilada

2.3 procedimiento
En el campo: Toma de muestras
En el laboratorio: Extraccin con cido Tricloroactico (ATA)
Pesar +/- 2,0 g de muestra (Suelo, forraje) (picada pulverizada) , en balanza

analtica y registrar como ( y colocar en vaso de precipitado

Adicionar 20 mL de agua destilada fra, agitar por 1min
Dejar reposar la mezcla por 15 min
Adicionar 30 mL de sol.
Reposar a Temperatura ambiente por 20 min
Filtrar sobre papel filtro en probeta

Medir el volumen del filtrado(Vf)

Recolectar 5 mL del filtrado, colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo: FFNNP:
filtrado de forraje para nitrgeno no proteico o FSNNP (Filtrado de suelo para
nitrgeno no proteico
Tapar los tubos y guardar en nevera a refrigeracin, hasta ser utilizados en la mezcla
reactiva.

3. DIAGRAMA DE FLUJO
PESAR +/2,0 G DE
MUESTRA
(SUELO,
FORRAJE)

REGISTRAR Y
COLOCAR EN
VASO
PRECIPITADO

ADICIONAR
20 ml DE
AGUA
DESTILADA
FRIA

DEJAR
REPOSAR
POR 15
MINUTOS

MEDIR
VOLUMEN
FILTRADO

FILTRAR

REPOSAR OR
20 MINUTOS

ADICIONAR
30 ml DE
SOLUCIN DE
ATA Y
AGITAR POR
UN MINUTO

ROTULAR Y
GUARDAR
REFRIGERAD
O

APLICAR
SOLUCION
INDICADA

OBTENER
ABSORVANCI
A

4. TABLA DE DATOS
Datos para Nitrgeno no proteico (NNP)
Muestras /
tubos

Indicadores
Wm
(g)

Vf (mL)

Absorbancia
(A)

Suelo
Forraje
Standar
Tipo de
muestras
analizadas

Origen, ubicacin geogrfica,

regin, agroclimatologa

5. RESULTADOS ESPERADOS
Cuantificar el nitrgeno no proteico (NNP).
Determinacin del contenido de NNP y Protena verdadera (PV) en forrajes y
concentrados.
GLOSARIO
ANLISIS KJELDAHL: Las determinaciones de nitrgeno de Kjeldahl se realizan sobre una
variedad de sustancias alimentarias. El mtodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos
principales: digestin, destilacin y valoracin.
NITRGENO NO PROTEICO: Se denomina Nitrgeno no proteico a los compuestos de nitrgeno
que pueden ser convertidos en protenas por algunos organismos vivos. Muchos organismos
superiores no pueden obtener aminocidos de otras formas, ms que absorbindolos de la dieta.
Los cuales pueden ser convertir algunos aminocidos en otros diferentes. Los compuestos que
forman el NNP son los que contienen amonaco, nitritos y nitratos y otros como la urea, el biuret o
el cido rico. Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos,
las plantas y algas, bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos.
BIBLIOGRAFIA
http://sian.inia.gob.ve/repositorio/revistas_tec/ceniaphoy/articulos/n8/arti/obispo_n/obispo_
n.htm

Granados Moreno. Jairo Enrique MSc. Protocolo de prctica. Bioqumica Metablica.

Universidad
Nacional
Abierta
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a
Distancia.
UNAD.
2014
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/352001/GUIA_ACTIVIDADES_MOMENTO_3_201
5-_Contextualizacion_practica_-BM-2X.pdf