ESBOZO DE MIEMBRO

Poblacin celular embrionaria que dar origen a un

determinado rgano.
Acta como un campo morfogentico: Grupo de clulas que interpretan su posicin en base a un
mismo punto de referencia. Este grupo de clulas estn determinadas a formar parte de una
estructura particular. En el caso del esbozo, las poblaciones involucradas son el miotoma de los
somitas que van a dar lugar a los msculos, la hoja parietal de mesodermo lateral que dar lugar a
los huesos y el ectodermo general.
Morfognesis Para el embrin significa la perdida de simetra y de la homogeneidad celular,
esto significa que se van a establecer ejes y se va a llevar a cabo la diferenciacin celular. A su vez,
la formacin de una nueva estructura requiere de la organizacin espacial de la diferenciacin
celular, lo que se denomina establecer un patrn y es una de las propiedades ms importantes de
los embriones.
El esbozo de miembro es un sistema de autodiferenciacin, es decir que no se deja influenciar por
el ambiente. Una vez que la interaccin epiteliomesenquimtica ha comenzado, el primordio de la
extremidad contiene suficiente informacin para producir un miembro incluso si se encuentra
aislado del resto del cuerpo.
Adems, el esbozo, posee capacidad regulativa:
o
o
o

Cuando la masa se reduce, la estructura no resulta afectada y se forma una extremidad

normal.
Cuando se divide en dos, ambas partes formarn una extremidad completa.
Si se juntan dos masas, parcial o completamente, se formar una extremidad completa.

Induccin del esbozo

La hoja parietal del mesodermo lateral secreta FGF. Antes de que se formen las extremidades, esta
expresin se restringe a las regiones del ML donde se formarn los esbozos de los miembros. Esta
restriccin es causada por las protenas Wnt (expresadas en el mesodermo intermedio).
Adems de sta restriccin, los genes Hox contribuyen a la especificacin del lugar donde se
formarn los esbozos.
Las clulas de la hoja parietal del ML que continan expresando FGF inducen a las del miotomo a
migrar junto a ellas para formar los esbozos.
FGF especifica el lugar de formacin del esbozo pero no da identidad de miembro, esto se logra
mediante la expresin de los genes Tbx-5 (miembro superior) y Tbx-4 (miembro inferior).

Antonella Salazar- M. del Rosario Sanchez Volpe Carla Zamora

Ejes
La organizacin del miembro suele referirse a un sistema de coordenadas de ejes cartesianos. El
primero es el eje prximo-distal que se extiende desde la base del miembro hasta la punta de los
dedos. El segundo es el eje dorso-ventral, las palmas de las manos y plantas de los pies son
ventrales mientras que los nudillos son dorsales. El ltimo eje es el antero-posterior, el pulgar
marca el lado anterior mientras que el meique est en el lado posterior.
o

Eje prximo-distal: Cuando las clulas mesenquimticas ingresan en el campo de la

extremidad, inducen al ectodermo que las rodea a formar una estructura denominada
cresta apical ectodrmica (engrosamiento del ectodermo). Esta cresta corre a lo largo del
margen distal del miembro y ser el principal centro sealizador para la formacin de este
eje.
La seal generada por la CAE para promover el crecimiento es un FGF (factor de
crecimiento fibroblstico). Esta mantiene al mesnquima que est debajo en una fase
proliferativa que permita el crecimiento en longitud de la extremidad. El mesnquima
directamente ubicado debajo de esta zona es denominado zona de progreso que induce u
mantiene a la CAE y, adems, determina el tipo de extremidad a ser formada. Sin embargo,
la CAE es la responsable de la evaginacin y desarrollo continuo del miembro.
A medida que crece la extremidad se forman tres segmentos: el estilopodio (brazo), el
zeugopodio (antebrazo) y el autopodio (mano).

Eje dorso-ventral: La polaridad de este eje es determinada por el ectodermo que la

recubre. La CAE se posiciona en el lmite donde se encuentran el ectodermo dorsal y
ventral.
Lo que formar el ectodermo dorsal produce una molcula seal denominada Wnt-7a, que
estimula al mesnquima subyacente para que exprese un factor de transcripcin que le
confiere el carcter dorsal en el mesodermo. En el ectodermo ventral no se expresa este
gen y se diferencia posiblemente por un patrn de defecto.
Si Wnt-7a no se expresa, resultan palmas de pies en ambas superficies. Si se expresa en
ambos lados, las clulas ventrales desarrollan un fenotipo dorsal.

Eje antero-posterior: Este eje es especificado tempranamente por un pequeo bloque de

clulas mesodrmicas cerca de la unin posterior del esbozo con el ectodermo. Esta regin
ha sido denominada zona de actividad polarizante.
Cuando se elonga el miembro, la ZAP se desplaza distalmente quedando rodeada por una
zona ancha de clulas que participan en la formacin de los dedos.

Experimento: Duplicacin de dgitos

Tras el descubrimiento de la ZAP se quiso saber qu molcula estaba involucrada en la polaridad
de esta regin. En 1993, Riddle y otros colegas demostraron mediante hibridacin in situ que Sonic
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Hedgegoh se expresaba especficamente en la zona de actividad polarizante. Sin embargo, para

comprobar que esto era ms que una correlacin, recurrieron a otro experimento:
1 Tomaron un gen shh y lo insertaron adyacente a un promotor activo de un virus de pollo
2 Transfectaron [1] fibroblastos embrionarios de pollo con el vector viral [2]
3 El gen shh fue expresado y traducido en los fibroblastos que luego fueron insertados bajo el
ectodermo anterior de una extremidad temprana de pollo
4 Se produjo la formacin de dgitos duplicados en imagen espejo

Por qu se insertaron los fibroblastos (con el gen expresado) bajo el ectodermo anterior?

Porque la ZAP se encuentra en la regin posterior de la unin entre el esbozo y el ectodermo.

Como ya haban descubierto que en esta zona se encontraba shh buscaban demostrar que no
era casualidad que estuviera all, entonces insertaron los fibroblastos en el ectodermo
anterior para ver qu pasaba con shh, qu funcin desempeaba en la ZAP.
o

Qu conclusin se obtiene tras el experimento?

Antonella Salazar- M. del Rosario Sanchez Volpe Carla Zamora

La protena secretada era la que otorgaba la polaridad a la ZAP.

Sin embargo, surgieron dos nuevos interrogantes

Cmo se expresa shh solamente en la regin posterior del esbozo? Qu hace shh una vez
expresada?

La cresta apical ectodrmica (CAE) recin formada induce a la ZAP a secretar shh mediante un
factor de crecimiento fibroblstico (FGF-8).
FGF-8 no activa a todas las clulas mesenquimticos ubicadas por debajo de la CAE ya que slo
algunas clulas poseen competencia diferencial para responder a l.
Hay dos factores de transcripcin que se encuentran en la regin posterior de esbozo de la
extremidad que no son expresados en la porcin anterior, por lo que solamente las clulas
mesodrmicas posteriores pueden expresar shh:
[1] La transfeccin es una tcnica empleada para introducir fragmentos de ADN adicional en clulas de mamferos
[2] Un vector viral es un virus modificado que hace de vehculo para introducir material gentico exgeno en el ncleo de una clula.

Factores de transcripcin involucrados

Protena Hoxb-8
Se expresa en la mitad posterior
del esbozo anterior.
Si se expresa en la regin anterior
se producen dos ZAP y la duplicacin
de la extremidad anterior.

Gen dHAND
Expresado en el mesodermo
posterior del esbozo antes de
que se exprese shh.
Si no se expresa la extremidad
queda truncada. Si lo hace
ectpicamente (fuera del lugar
apropiado, en este caso en la
regin anterior) se genera una
segunda ZAP y duplicacin de
de dgitos.

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Se pensaba que shh actuaba como un morfgeno [3], es decir, que se difunda desde la ZAP donde
estaba siendo sintetizada y formaba un gradiente de concentracin desde la regin posterior hacia
la anterior del esbozo de la extremidad. Sin embargo, shh no se difunde fuera dela ZAP.
Shh inicia y sostiene un gradiente de protenas como BMP2 Y BMP7 y estas protenas son las que
actan para especificar los dgitos.
La identidad de los dgitos es especificada por las membranas interdigitales donde la regin de
mesnquima experimentar apoptosis (muerte celular programa) para liberar cada dgito. El
tejido interdigital especifica la identidad del dgito que se est formando anteriormente a ella.

Polidactilia
Recordar: Shh debe expresarse en la parte posterior de la unin del ectodermo y el esbozo para
lograr un desarrollo normal. Si por algn motivo se expresa en la regin anterior, se produce una
segunda ZAP y, como consecuencia, la duplicacin de dgitos en imagen espejo.

La polidactilia es un trastorno que se caracteriza por la existencia de dedos supernumerarios. El

defecto es inherente al mesodermo. En los humanos esta patologa se hereda como un rasgo
gentico recesivo.

Recordar: Para que haya dedo pulgar no debe haber shh.

[3] Sustancia soluble que otorga identidad posicional a las clulas a travs de un gradiente

Antonella Salazar- M. del Rosario Sanchez Volpe Carla Zamora

Antonella Salazar- M. del Rosario Sanchez Volpe Carla Zamora