Tcnicas de aislamiento de microorganismos.

Fundamento

Siembra por
estra Cruzada.

Diluciones y
siembras.

A partir de un
elevado nmero de
bacterias, un
nmero reducido de
ellas, distribuidas
individualmente
sobre la superficie
de la placa. Al
incubar esta, cada
una de las bacterias
originara una
colonia.
Los mtodos de
siembra en placa
son en general
satisfactorio para el
aislamiento de
bacterias y hongos
ya que la mayora
crece bien en
medios slidos, sin
embargo algunas
bacterias, protozoos
y algas son
cultivables en
medios lquidos.

Metodologa

Aplicacin
respecto al tipo de
microorganismo.

1- ) Flamear el asa
bacteriolgica hasta el
rojo vivo.
2- ) Enfriar el asa.
3- ) Tomar una gota del
cultivo y repartirlo
uniformemente por la
placa en forma zigzag.

A bacilos y cocobacilos
Gram negativos (p. ej.

Al principio se usaba el
mtodo de diluciones
pero Koch se dio cuenta
que era muy tedioso y
opto por mejorarlo, para
esto modifico la tcnica
solidificando un medio
lquido bien conocido
aadiendo sustancia
clara produciendo un
gel translucido as
tambin se modificaban
los nutrientes para los
diferentes
microorganismos.
1-) Usando gelatina
para solidificar
2- ) Despus se
sembraba en ella con
una aguja de platino
estril en llama a este
proceso se le denomino
siembra por estra.
3-) Los cultivos puros
eran transferidos a un
tuvo estril que
contena gelatina
nutricional tapados con
algodn y solidificado
en posicin inclinada

Aislamiento de
bacterias y hongos
que crecen en medios
slidos y en algunas
bacterias, protozoos y
algas que son
cultivables en medios
lquidos.

Escherichia Coli,
Salmonella, Serratia) y

cocos Gram positivos

(p. ej. Staphyllococcus,
Streptococcus,
Enterococcus).

Medios
Selectivos.

Estn diseados
para suprimir el
crecimiento de
bacterias no
deseadas y
favorecer el
crecimiento de las
deseadas.
Por ejemplo, el agar
sulfito de bismuto
se utiliza para aislar
la bacteria Gram
negativa que
produce la fiebre
tifoidea, Salmonella
typhi, de las heces.

Metodologa agar
sulfito de bismuto:
1- ) Disolver 47.5 g en 1
L de agua
desmineralizada.
2- ) Mezclar
cuidadosamente y
calentar hasta que
empiece a hervir
agitando al mismo
tiempo.
3-) Enfriar a 45-50 C
Agitar y verter las
placas para que queden
capas gruesas (25 mL).
4- ) No esterilizar en
autoclave.
5-) Valor de pH 7.6 +0.2 a 25C
6- ) El medio preparado
es turbio con un
precipitado floculado y
color verde grisceo.
7- ) El medio recin
preparado tiene una
gran potencia inhibidora
y es apropiado para
muestras muy
contaminadas como
heces.
8-) Segn el FDA- BAM
el medio debe ser
preparado un da antes
de usarlo y almacenarse
en un lugar obscuro.
Perdida selectividad
despus de 48h.

Se emplean
extensamente para
detectar E. coli y
bacterias relacionadas
en suministros de
agua y otros medios.
Se pueden aislar las
bacterias incubndolas
con nutrientes que
puedan utilizar de
forma especfica.
Favorecer el
crecimiento de
salmonellas y frenar el
del resto de entero
bacterias (medio
selectivo es el caldo
selenito).