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FACULTAD DE CIENCIAS

VETERINARIAS
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL
NORDESTE

GUA DE TRABAJOS PRCTICOS


CTEDRA DE BIOQUMICA

AO 2015

GUIA DE TRABAJOS PRACTICOS - BIOQUIMICA - AO 2015


FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS - UNNE

INDICE
Organizacin de la Ctedra
Condiciones para aprobar la materia
Objetivos Generales de la Materia
Programa de la materia
Programa analtico
Cronograma de clases de bioqumica
Bibliografa recomendada y complementaria
Instructivo para confeccin de monografa
Normas de Bioseguridad
Materiales de Laboratorio
Laboratorios
Laboratorio de Protenas
Reaccin del Biuret
Prueba de Heller
Laboratorio de Enzimas
Reconocimiento y Desnaturalizacin de la Catalasa
Laboratorio de cidos Nucleicos
Electroforesis de ADN
Bioseguridad (1)
Laboratorio de Glcidos
Molisch
Lugol
Fehling
Laboratorio de Lpidos
Formacin de emulsiones
Saponificacin
Bioseguridad (2)
Laboratorio de Metabolismo de Lpidos
Caracterizacin de Cuerpos Cetnicos en orina
Laboratorio de Hormonas
Determinacin de glucosa en orina con tiras reactivas
Laboratorio de Vitaminas
Det. del poder reductor deL cido ascrbico (Vitamina C):
Reaccin de Fehling
Reaccin de Lugol
Bioseguridad (3)
Laboratorio de digestin de Rumiantes Monogstricos y Aves
Hidrlisis del almidn
Determinacin de Tripsina en Mat. Fecal de aves
Deteccin de microorganismos yodfilos
Anlisis del Licor Ruminal:
Bioseguridad (4)
Ejercicios de Seminario

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7
9
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Organizacin de la Ctedra de Bioqumica
Nmina de Docentes de la Ctedra
Apellido y Nombres
Cargo Docente
Dedicacin
Dra. GLADIS LILIA SANDOVAL (GLS)
Prof. Titular.
Exclusiva
M.V. ENRIQUE CELSO ALMIRN (ECA)
Prof. Adjunto.
Semiexclusiva
MSc Bioq. GRACIELA P. ESQUIVEL (PEL)
Jefe de trabajos Prcticos Simple
Dra. MSc SILVANA LICIA MARUAK (SLM)
Aux. Docente de I
Exclusiva
MSc Bioq. MARA BRBARA DE BIASIO (MBDB)
Aux. Docente de I
Exclusiva
M.V. GLADYS ROXANA E. OBREGN (GREO)
Aux. Docente de I
Simple
M.V. VALERIA INS AMABLE (VIA)*
Aux. Docente de I
Simple
M.V. GABRIELA LAFFONT (GVL)
Aux. Docente de I
Simple
M.V. MARIANO PINO (MSP) **
Aux. Docente de I
Semiexclusiva
Sr CLAUDIO R. ROMERO
Ayudante Alumno
Simple
Srta MARA EUGENIA DIAZ BURATOVICH
Ayudante Alumno
Simple
Srta. DANIELA ELIZABETH CARROCINO
Ayudante Alumno
Simple
*En uso de licencia sin goce de haberes. **Dedicacin simple completando una semidedicacin
hasta finalizar la licencia*.
Iniciacin y finalizacin del Ciclo lectivo 2013:
Fecha de Iniciacin
06/04/15
Fecha de Finalizacin
06/07/15

Clase Inaugural
Evaluacin Integral

Modalidad: Cursado promocional Primer cuatrimestre.


El presente rgimen promocional de la materia incluye la opcin de regularizarla para ser aprobada
en las sucesivas mesas de examen.
Das y Horarios de Clases: lunes y jueves entre las 8:00 y las 16:00 o 18hs
Horarios, Salones y Docentes a cargo de clases
Clase
Comisin de
Horario
TP
Clases Tericas (IT)
Todas
10:00-12:00
Clases Prcticas
ulicas

Clases de la
modalidad
semipresencial

8:00-10:00

2
3

8:00-10:00
12:00-14:00

4
5
6
7

12:00-14:00
14:00-16:00
14:00-16:00
A convenir

CLASES DE BIOQUMICA
TERICOS: LUNES Y JUEVES 10 A 12 hs

Docente a cargo
Sandoval/Almirn/
Doc.Asignado
Mara B. De Biasio
Silvana L. Maruak
Gabriela Valeria
Laffont
Gladys Obregn
Mariano Pino
Claudio Romero
Patricia Esquivel

Saln
Lunes / Jueves
Modular B
Modular B /
Saln Schiffo
Modular C
Modular B
Modular C
Modular B
Modular C
Modular B/a
convenir

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SEMINARIOS
EN DAS COMUNES (SIN LABORATORIO NI RECUPERATORIO DE PARCIALES)
LUNES Y JUEVES
DOCENTE
COMISIN HORARIO
A/C
LUNES
JUEVES

1
2
3
4
5
6
7

8,00 A 10,00 MBDB

MODULAR B A.sCHIFFO

8,00 A 10,01 SLM

MODULAR C MODULAR C

12 A 14

GVL

MODULAR B MODULAR B

12 A 14

GREO

MODULAR C MODULAR C

14 A 16

MSP

MODULAR B MODULAR B

14 A 16

CRR

MODULAR C MODULAR C

16 PEL

MODULAR B MODULAR B

EN DAS CON LABORATORIO Y SEMINARIOS

LUNES

JUEVES
SEMINARIOS (CP Sem)

COMISIN

HORARIOS

DOCENTES A/C

COMISIN

HORARIOS

DOCENTES A/C

1
2
3

8 A 10

MBDB

12 A 14

GREO

8 A 10

SLM

14 A 16

MSP

12 A 14

GVL

4
5
6

14 A 16

CRR

8,00-9,30

MBDB

12,00-13,30

MBDB

13,30 - 15,00

SLM

15,00 - 16,30

SLM

16,30 - 18,00

GVL

18,00 - 19,30

GVL

LABORATORIOS (L)
COM 4a
COM 4b
COM 5a
COM 5b
COM 6a
COM 6b

8,00-9,30

GREO

12,00-13,30

GREO

13,30 - 15,00

MSP

15,00 - 16,30

MSP

16,30 - 18,00

CRR

18,00 - 19,30

CRR

COM 1a
COM 1b
COM 2a
COM 2b
COM 3a
COM 3b

Modalidad: Cursado promocional Primer cuatrimestre.


El presente rgimen promocional de la materia incluye la opcin de regularizarla para ser aprobada
en las sucesivas mesas de examen.
Desarrollo de las clases
La materia se desarrolla segn dictado cuatrimestral y rgimen promocional para los alumnos
inscriptos. Son diecisis (16) unidades temticas (UT) del Programa Analtico vigente, distribuidas
en 4 unidades modulares (UM) las que incluyen 15 introducciones tericas, 15 clases prcticas

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ulicas y 4 de Laboratorio, 4 evaluaciones parciales, con sus recuperatorios (uno para cada una +
uno extraordinario) y una evaluacin integral (VER CRONOGRAMA).
Introducciones Tericas (IT)
Das LUNES y JUEVES de 10:00 a 12:00 a cargo de la Profesora Titular, el Profesor
Adjunto, con la colaboracin de los dems docentes diplomados (segn asignacin de temas). Se
desarrollan los conceptos centrales de los temas del programa analtico vigente, remarcando los
aspectos ms importantes, utilizando diferentes recursos didcticos, a los cuales los alumnos tienen
acceso para consultar, copiar o fotocopiar, como por ejemplo archivos informticos, lminas y
transparencias. Todo el material para los alumnos est accesible en la direccin web del Blog de la
Ctedra: www.catbioquimicavet.ecaths.com
Las clases tendrn una duracin de 2 horas reloj y son de carcter optativo en general.
Clases Prcticas ulicas (CP)
Clases de 2 horas reloj de duracin, desarrolladas los das LUNES y JUEVES en aulas
Modular B, Modulares C y aula Schiffo, en forma simultnea en tres turnos, segn comisiones (N
1 a 6). Se requiere asistencia mnima de un 80 % para los alumnos que desean promocionar la
materia y 75 % para la regularizacin.
Se evalan mediante cuestionarios o trabajos prcticos que se resuelven y discuten en el contexto de
la clase. Con la participacin en los trabajos indicados en cada clase prctica, se califican con escala
de 1 a 10. Estas actividades tendrn evaluaciones en cada UM.
Trabajos Prcticos de Laboratorio (L)
Clases de 2 (dos) horas reloj de duracin (cuatro L en total), desarrolladas en das LUNES y
JUEVES en el Laboratorio de Ciencias Bsicas, en forma sucesiva en turnos a partir de las 8:00
horas, segn las 6 (seis) comisiones de laboratorio. De asistencia y aprobacin obligatoria, se
requieren 4/4 para los alumnos promocionales de la materia y 3/4 para los regulares. La calificacin
se corresponder con nota del 1 al 10.
Los requisitos son vestimenta adecuada (guardapolvo, guantes, etc.), participacin en prcticos,
presentacin de protocolos completos y aprobacin de una evaluacin oral o escrita sobre los
trabajos prcticos de cada L. Esta instancia tambin debe ser aprobada para acceder al examen
escrito de cada evaluacin parcial (el 100 % para los alumnos que desean promocionar la materia y
el 75 % para los que la vayan a regularizar).
Evaluacin del proceso
Como se desprende de lo anteriormente expuesto, cada evaluacin parcial tiene varias
instancias de aprobacin:
Actividad intra-aula
Cada clase prctica requiere de la lectura previa del tema, se efectuarn diferentes
modalidades de evaluacin (oral o escrita, individual y/o grupal). Adems, de la misma manera los
alumnos deben aprobar los Laboratorios implementados. En ambos casos (CP y L), los alumnos que
desean promocionar la materia debern aprobar el 100 % de las clases asistidas y los que la vayan a
regularizar el 75 % de las clases dadas; dicha aprobacin los habilita para responder el cuestionario
escrito. Las notas obtenidas correspondern con una escala de aprobacin de entre 6 a 10; notas
inferiores sern insuficientes y de ser necesario, el trabajo prctico deber ser recuperado con
actividades ad hoc.
Actividad extra-aula
Paralelamente al desarrollo de las clases en el aula, se utilizarn dos modalidades de trabajo
grupal extra-aula: 1) produccin escrita (monografa) y defensa oral sobre temas puntuales;
actividad denominada exposiciones grupales, que son presentadas en 10 a 15 min por cada grupo
en diferentes clases prcticas durante el cursado. 2) Adems, se requiere a los alumnos una bsqueda
de trabajos de investigacin sobre temas asignados previamente, con lectura grupal, interpretacin y

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exposicin en clases segn normas explcitas. Estas actividades tambin sern evaluadas en la
misma forma que las actividades intra-aula y con los mismos efectos.
Evaluacin escrita (cuestionario)
Se implementarn en los horarios que se informan en transparentes, una por cada UM, en
nmero de cuatro en total, cada una con un recuperatorio (para alumnos regulares). Se deber
aprobar con nota 7 (siete) o ms para la promocin y nota de 6 (seis) o ms para la regularizacin.
Evaluaciones recuperatorias (oral)
Los alumnos que no alcancen el puntaje requerido para la promocin y cumplan con los
dems requisitos de la materia, podrn recuperar una sola evaluacin parcial en una sola
oportunidad. De no alcanzar ese objetivo solo podrn acceder a regularizar la materia.
Para los alumnos que vayan a regularizar cada parcial desaprobado tiene un recuperatorio y,
tendrn derecho a una evaluacin recuperatoria extraordinaria en caso de que adeudaren un solo
parcial para regularizar la materia.
Evaluacin integral
Los alumnos que cuenten con una asistencia del 80% o mayor, que obtengan nota igual o
superior a siete en todas las evaluaciones parciales y cumplan con las dems condiciones para la
promocin de la materia accedern al examen integral. Este consistir en una evaluacin escrita
integradora, debiendo contestar correctamente el 60% como mnimo de los contenidos; este
resultado determinar la nota final para la aprobacin de la materia con calificaciones de 6 a 10.

CONDICIONES PARA APROBAR LA MATERIA


Alumnos promocionados
La condicin de alumno promocionado en Bioqumica se alcanza al finalizar cada dictado
intensivo de esta materia cumpliendo las siguientes exigencias.
a) Asistencia al 80% de las clases como mnimo (se incluyen las CP y, segn disponibilidad de
salones, las IT).
b) Aprobacin del 100 % de los parciales (los trabajos prcticos de laboratorio deben aprobarse en
su totalidad ya que son parte de las evaluaciones parciales), habiendo obtenido un puntaje para la
evaluacin escrita de 7 (siete) o superior en cada UM.
c) Para permitir el acceso a los mecanismos descriptos de promocin, los alumnos que hayan
obtenido nota inferior a siete en una sola evaluacin parcial tendrn derecho a un solo
recuperatorio.
d) Aprobacin de una Evaluacin Integral con un puntaje mnimo de seis (6).
Alumnos regulares
Si no cumplieren con los requisitos de la promocin pero asistieran al 75% de las clases y
aprobaran con un mnimo de seis (6) puntos el 75 % de las Evaluaciones Parciales y de los
Laboratorios (3 de 4 parciales y L aprobados) quedarn en condicin de alumnos regulares. En
esta ltima condicin podrn aprobar la materia en las mesas constituidas al efecto, en la forma
establecida segn reglamentacin vigente.
Las evaluaciones parciales con nota inferior a seis tendrn sus respectivos recuperatorios,
tenindose una segunda posibilidad en el caso de que el alumno adeudare solo una para regularizar
la asignatura.
Si no cumpliesen con las condiciones descritas para la regularizacin de la materia, los
alumnos quedarn en condicin de Libres, con posibilidad de rendir un examen.
Alumnos libres
Los que no renan las condiciones para la promocin o la regularizacin de la materia se
considerarn alumnos libres y podrn rendir un Examen Libre segn la reglamentacin vigente
(con actividad prctica, un escrito y un oral sin bolillero).

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OBJETIVOS GENERALES DE LA MATERIA


Los objetivos generales de la Bioqumica son que el alumno conozca las estructuras de los
compuestos presentes en los organismos vivos, sus roles y los esquemas metablicos de valor
universal que dan lugar a los procesos vitales; y que pueda identificar aspectos que destaquen las
implicancias de esos conocimientos en Veterinaria.
Estos objetivos se alcanzarn mediante:
1) El estudio de a) la terminologa, el ambiente de las reacciones bioqumicas vitales y los
mtodos de estudio de la materia; b) las estructuras, propiedades y roles de los componentes
orgnicos e inorgnicos de la matriz vital; c) la bioqumica de la digestin, la absorcin, el
transporte, almacenamiento y los destinos metablicos principales de las molculas presentes en los
organismos vivos; y d) los mecanismos de regulacin e integracin metablicos.
2) La incorporacin de destrezas en: a) tcnicas que permitan comprobar algunas de las
propiedades de los componentes orgnicos e inorgnicos de la matriz vital e incorporar aspectos
fundamentales de la metodologa de trabajo y del rol del laboratorio en el mbito de competencia del
mdico veterinario; y b) ensayos de bsqueda y anlisis bibliogrfico y exposicin oral de temas
relacionados con las estructuras y metabolismos de las distintas molculas biolgicas
CONTENIDOS MNIMOS
Definicin y alcances de la Bioqumica estructural y la Bioqumica dinmica. Terminologa y
mtodos de estudio.
Formas qumicas, propiedades y roles de los compuestos inorgnicos del organismo animal.
Estructuras, propiedades e importancia del material gentico, protenas, glcidos, lpidos y
algunos de sus compuestos derivados o asociados.
Estructuras, propiedades y mecanismos de accin de las enzimas, vitaminas y otras coenzimas.
Bioenergtica: estructura y metabolismo de las molculas responsables del transporte,
almacenamiento y cesin de energa.
Principales rutas metablicas que siguen los cidos nucleicos, protenas, glcidos, lpidos y sus
respectivas molculas constituyentes o asociadas.
Procesos bioqumicos de la digestin en animales monogstricos, aves y rumiantes, que
conducen al aprovechamiento de los alimentos.
Naturaleza qumica, propiedades de los principales grupos, mecanismos de accin e importancia
de las hormonas en la regulacin e integracin metablica.
PRERREQUISITOS
Conocimientos bsicos de Qumica General, Inorgnica y Orgnica y Fsico-Qumica;
especialmente en cuanto a lo concerniente a: tomo, materia, sustancia, elementos, istopos,
valencia, uniones qumicas entre tomos y entre molculas. Iones, cidos y bases; pH y sistemas
buffer. Estados fsicos de la materia. Soluciones, molaridad, molalidad, normalidad. Anlisis
qumico cuali y cuantitativo. Conceptos de energa, tipos, reacciones qumicas, equilibrio de las
reacciones. Sistemas fsicos, entalpa, entropa, energa libre.
Compuestos orgnicos, hidrocarburos, funciones orgnicas. Isomera plana y estereoisomera.
Nociones de la estructura microscpica y molecular de las clulas eucariticas y procariticas.
Unidades base del sistema SI y otras de uso comn en fsico-qumica.
PROGRAMA
PLAN DE ESTUDIOS 2008 VIGENTE DESDE EL AO 2009 (Resolucin N 451/2008)
OBJETIVOS DE LA ASIGNATURA
Unidad Temtica N 1: BIOQUMICA Y BIOMOLCULAS
Delimitar el campo que abarca la Bioqumica, conocer sus implicancias, su importancia en
Medicina Veterinaria, la terminologa que emplea y los mtodos de estudio.

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Comprender la importancia del ambiente acuoso en los procesos bioqumicos que tienen lugar
en la matriz vital y el rol de los compuestos inorgnicos y orgnicos.
Unidad Temtica N 2: PROTEINAS
Reconocer la estructura, las propiedades, los criterios de clasificacin y la importancia biolgica
de los aminocidos, pptidos y protenas y de algunos compuestos derivados.
Unidad Temtica N 3: ENZIMOLOGA
Reconocer la naturaleza, propiedades, nomenclatura y mecanismos de accin de las enzimas y
deducir su importancia en el organismo y sus aplicaciones en ciencias mdicas.
Unidad Temtica N 4: METABOLISMO DE AMINOCIDOS Y PROTEINAS
Reconocer las principales rutas metablicas en las que estn implicadas las protenas, los
aminocidos y las molculas asociadas o derivadas y reconocer las estructuras, propiedades y
productos de aminocidos y bases nitrogenadas en diferentes especies animales.
Unidad Temtica N 5: ACIDOS NUCLEICOS
Conocer la naturaleza de la estructura del material gentico en diferentes tipos celulares y las
propiedades e importancia de las molculas componentes de las nucleoprotenas y nucletidos
libres.
Unidad Temtica N 6: METABOLISMO DE CIDOS NUCLEICOS
Conocer las principales rutas metablicas en las que estn implicados los cidos nucleicos y sus
molculas constituyentes.
Unidad Temtica N 7: GLUCIDOS
Conocer clasificacin, estructura, propiedades, importancia de los glcidos y de los compuestos
derivados y las tcnicas para su caracterizacin.
Unidad Temtica N 8: METABOLISMO GLUCDICO
Comprender los roles, orgenes y destinos de los glcidos en el organismo animal e identificar
las principales rutas de su metabolismo y las conexiones con los dems compuestos no glucdicos.
Unidad Temtica N 9: LIPIDOS
Conocer clasificacin, estructura, propiedades, importancia de los lpidos y las sustancias
asociadas a ellos y las tcnicas para su caracterizacin
Unidad Temtica N 10: METABOLISMO LIPDICO
Comprender los roles de los lpidos y sustancias asociadas o derivadas en el organismo animal y
conocer las principales rutas del metabolismo de los cidos grasos y los lpidos y los destinos de
dichas molculas en los diferentes organismos vivos.
Unidad Temtica N 11: VITAMINAS
Reconocer las estructuras, propiedades y reacciones qumicas en las que intervienen las
vitaminas y deducir su importancia en el organismo animal, en especial en su rol como coenzimas.
Unidad Temtica N 12: ASPECTOS MOLECULARES DE LA ACCIN HORMONAL:
BIOQUMICA DE LAS HORMONAS
Diferenciar la distinta naturaleza qumica de las hormonas y las propiedades de los principales
grupos, reconocer las estructuras bsicas, los mecanismos de accin y su importancia en la
regulacin e integracin metablicas.

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Unidad Temtica N 13: UTILIZACION DE LA ENERGIA POR LOS ORGANISMOS VIVOS
Reconocer las molculas responsables del transporte, almacenamiento y cesin de energa para
el normal funcionamiento orgnico, las rutas aerbicas y anaerbicas y la sntesis de compuestos
ricos en energa.
Unidad Temtica N 14: BIOQUMICA DE LA DIGESTION EN MONOGSTRICOS Y AVES
Identificar los procesos bioqumicos de la digestin en animales monogstricos y aves, los
mecanismos de accin, sustratos y productos de las enzimas de las diferentes partes del tracto
digestivo y sus particularidades.
Unidad Temtica N 15: BIOQUMICA DE LA DIGESTION EN EL RUMIANTE
Conocer el rol de los microorganismos ruminales, las condiciones y particularidades de los
procesos bioqumicos digestivos de los rumiantes y su importancia en el aprovechamiento de los
alimentos, en especial de la celulosa y el nitrgeno no proteico.
Unidad Temtica N 16: INTEGRACIN Y CONTROL DE LOS PROCESOS METABLICOS
Reconocer los esquemas metablicos de valor universal que dan lugar a los procesos vitales y su
integracin en el metabolismo intermedio, profundizando en ejemplos para comprender la
interrelacin y control de las vas metablicas.
Adquirir el concepto de lesin bioqumica y la nocin de la importancia de su identificacin
para poder predecir las consecuencias de la alteracin de los procesos bioqumicos normales y
para reconocer las armas disponibles en bioqumica clnica y el rol del laboratorio en el mbito de
competencia del mdico veterinario.
PROGRAMA ANALITICO
Unidad Temtica N 1
BIOQUMICA Y BIOMOLCULAS
a) Definicin, alcances como disciplina y como ciencia interdisciplinaria. Bioqumica descriptiva y
bioqumica dinmica. Objeto e importancia de la Bioqumica actual. Fuentes bibliogrficas.
Bioqumica y Medicina Veterinaria. Terminologa cientfica. Mtodos de estudio. Bioseguridad.
b) Bioelementos. Clasificacin y funciones de los principales bioelementos. Biomolculas:
organizacin jerrquica molecular en las clulas. Medios extra e intracelular. Agua y electrolitos.
Estructuras molecular y macromolecular del agua; rol en los sistemas biolgicos, accin como
disolvente, ionizacin de la molcula y participacin en el equilibrio inico. Distribucin del agua
en el organismo animal; proporciones en los diferentes tejidos.
Unidad Temtica N 2
PROTEINAS
a) Concepto. Aminocidos: definicin, clasificacin. Estructuras y propiedades de los aminocidos
que constituyen las protenas y de los aminocidos no proteicos; importancia del tamao y polaridad
de las cadenas laterales. Aplicacin en el estudio de las protenas. In bipolar. Comportamiento
cido base de los aminocidos, propiedades elctricas. Punto isoelctrico. Propiedades pticas,
estereoisomera. Aminocidos esenciales. El enlace peptdico.
b) Polipptidos y protenas: importancia y diversidad funcional de las protenas. Clasificacin segn
su funcin. Clasificacin segn su forma: fibrosas y globulares. Estructura de las protenas; fuerzas
covalentes y no covalentes determinantes. Niveles de organizacin estructural: primaria, secundaria,
terciaria y cuaternaria. Propiedades generales. Factores fsico-qumicos que condicionan la
conformacin de las protenas. Desnaturalizacin: agentes que alteran la estructura nativa.
Hidrlisis. Diferencias entre protenas animales y vegetales. Pptidos, polipptidos y protenas de
inters en medicina. Protenas transportadoras de oxgeno: mioglobina y hemoglobina.
Inmunoglobulinas: tipos, zona variable, sitio de unin al antgeno, regin constante y regin

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variable. Glucoprotenas: estructura molecular de los sistemas de transportadores de membrana,
canales inicos y receptores.
Unidad Temtica N 3
ENZIMOLOGIA
a) Definicin. Naturaleza qumica de enzimas, coenzimas, cofactores, zimgenos e isoenzimas.
Nomenclatura y clasificacin segn la Unin Internacional de Bioqumica. Propiedades de las
enzimas. Diferencias con catalizadores inorgnicos. Sitio cataltico y otras regiones de la superficie
de las enzimas. Especificidad. Asimetra de la unin enzima-sustrato. Compartimentalizacin celular
de las enzimas. Sistemas enzimticos extracelulares. Asociaciones multienzimticas.
b) Mecanismo de accin enzimatica: unin enzima-sustrato; modelos de llave y cerradura o de
Fischer y de ajuste inducido o de Koshland. Mecanismos catalticos: catlisis cido-base,
covalente, de iones metlicos, de proximidad y orientacin y unin preferencial del complejo de
estado de transicin. Velocidad de la reaccin enzimtica. Factores que influyen sobre la reaccin
enzimtica: concentracin del sustrato, pH, temperatura, cofactores y coenzimas. Activacin.
Induccin y represin enzimtica. Inhibicin competitiva y no competitiva. Regulacin metablica y
alostrica. Enzimas en el diagnstico clnico y como insumos de laboratorio. Cuantificacin de la
actividad enzimtica. Unidades.
Unidad Temtica N 4
METABOLISMO DE AMINOCIDOS Y PROTEINAS
a) Relaciones entre el nitrgeno inorgnico y el orgnico. Fijacin biolgica de nitrgeno.
Asimilacin de amonaco por los organismos vivos; biosntesis de glutamato, glutamina,
asparragina y carbamoil fosfato. Fuentes de aminocidos. Protelisis, vida media de las protenas.
Pozo comn de aminocidos. Destinos metablicos de los aminocidos. Caractersticas comunes de
las vas de degradacin de aminocidos. Desaminacin y descarboxilacin. Funcin precursora de
los aminocidos: formacin de aminas bigenas. Metilacin. Metionina activa. Transferencia de
metilos. Rol del cido tetrahidroflico. Transaminacin y mecanismo de accin del fosfato de
piridoxal. Interconversin de aminocidos. Metabolismo de triptfano, fenilalanina e histidina.
b) Destino del residuo no nitrogenado. Aminocidos glucognicos y cetognicos. Degradacin de la
cadena carbonada de los aminocidos. Rutas que conducen a cido pirvico, a intermediarios del
ciclo de los acidos tricarboxlicos y a acetil-CoA. Destinos del nitrgeno amnico. Animales
ureotlicos, uricotlicos y amoniotlicos. Biosntesis de urea; vas de eliminacin y recuperacin en
diferentes especies animales.
Unidad Temtica N 5
ACIDOS NUCLEICOS
a) Definicin. Importancia en los procesos vitales y como base de la herencia. Bases puricas y
pirimdicas. Unin con ribosa y fosfatos. Nuclesidos y nucletidos. Estructura del ATP, UTP, GTP.
Propiedades fisicoqumicas de los cidos nucleicos. Unin entre nucletidos.
b) cidos nucleicos. Estructura y rol biolgico. RNAm, RNAt y ribosoma. Estructura del DNA
procaritico y eucaritico. Modelo de Watson y Crick. Diferencias entre DNA nuclear (cromatina),
mitocondrial, bacteriano y viral.
Unidad Temtica N 6
METABOLISMO DE CIDOS NUCLEICOS
a) Definiciones de terminologa gentica, cdigo gentico y mutaciones. Flujo de la informacin
gentica. Duplicacin del ADN, mecanismo en procariotas; diferencias con eucariotas. Naturaleza
secuencial, direccin, enzimas. Transcripcin del ADN en procariotas. Biosntesis de cidos
ribonucleicos (ARNm, ARNt y ARNr).
b) Biosntesis de protenas: esquemas bsicos; etapas: iniciacin, elongacin, terminacin.
Nucletidos libres. Importancia biolgica. Su relacin con los metabolismos. Catabolismo de bases
puricas y pirimdicas. Sntesis y eliminacin de cido rico y beta-alanina.

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Unidad Temtica N 7
GLUCIDOS
a) Definicin. Clasificacin y funcin biolgica de los glcidos. Monosacridos y oligasacridos
de inters, estructuras, propiedades. Isomera de monosacridos. Compuestos estructuralmente
relacionados y derivados de monosacridos: steres fosfricos de los monosacridos; deoxiazcares;
alcoholes; aminoazcares; N-acetil aminoazcares; cidos derivados de los monosacridos:
aldnicos, urnicos y aldricos; lactonas.
b) Disacridos: maltosa, isomaltosa, celobiosa, sacarosa, lactosa. Polisacridos de reserva y
estructurales. Homopolisacridos: almidn, celulosa, pectinas, glucgeno. Heteropolisacridos;
Mucopolisacridos: cido hialurnico, condroitn sulfato, queratn sulfato, dermatn sulfato,
heparn sulfato. Glicoprotenas. Glicolpidos. Pared celular vegetal, estructura y funcin biolgica.
Unidad Temtica N 8
METABOLISMO GLUCDICO
a) Importancia de los glcidos de la dieta en el metabolismo. Absorcin y destinos metablicos de la
glucosa dentro de las clulas procariotas y eucariotas. Gluclisis. Fermentacin y respiracin
aerbica: destinos metablicos del cido pirvico; descarboxilacin oxidativa, complejo piruvato
deshidrogenasa; formacin y destinos del Acetil CoA. Sntesis de cido actico por las bacterias.
Sntesis de cido lctico por las bacterias y el msculo. Formacin de cido propinico por las
bacterias. Utilizacin del cido propinico por el animal.
b) Otras rutas de degradacin de la glucosa: Va de las pentosas fosfato. Gluconeognesis; necesidad
fisiolgica de sntesis de glucosa por los animales. Ciclo de Cori. Biosntesis de glucgeno;
glucgeno sintasa. Glucgenolisis. Papel del almacenamiento muscular y heptico de glucgeno.
Unidad Temtica N 9
LIPIDOS
a) Definicin. Propiedades generales. Clasificacin. Estructura qumica. Glicerol y otros alcoholes
grasos. Acidos grasos saturados y no saturados; propiedades, frmulas. Importancia biolgica.
Formacin de sales o jabones. Hidrlisis qumica. Lpidos simples: acilglicridos de importancia
biolgica. Grasas y aceites. Propiedades fsico-qumicas de los acilglicridos. Actividad ptica.
Ceras. Galactoglicridos.
b) Lpidos complejos. Glicerofosfolpidos no nitrogenados y nitrogenados. Esfingolpidos y
glicoesfingolpidos. Estructura y funcin. Propiedades fsicas e importancia. Sustancias asociadas a
lpidos: compuestos de estructura terpenoide y esteroidea. Esteroles y esteroides. Clasificacin
general. Nomenclatura y frmulas. Colesterol. Importancia biolgica. Lpidos en la estructura de
membranas. Lipoprotenas. Biomembranas: modelos estructurales. Componentes lipdicos. Fluidez
de las membranas, rol de esteroles. Componentes proteicos; ubicacin en la membrana; protenas
perifricas e integrales.
Unidad Temtica N 10
METABOLISMO LIPDICO
a) Productos de la digestin de lpidos y absorcin. Sntesis y transporte de triglicridos en la
mucosa intestinal. Transporte de los lpidos a los tejidos; roles de las lipoprotenas. Captacin
celular de los lpidos circulantes. Tejido adiposo; Grasa blanca y Grasa parda. Movilizacin de
cidos grasos almacenados. Factores Lipotrpicos. Catabolismo de los glicridos. Degradacin de
los cidos grasos: activacin de cidos grasos, la acil-CoA ligasa. Lanzadera de la carnitina. Betaoxidacin de los cidos grasos; rendimiento energtico. Oxidacin de cidos grasos insaturados y de
nmero impar de tomos de carbono. Formacin y metabolismo de los cuerpos cetnicos.
b) Anabolismo de los lpidos. Biosntesis de cidos grasos (sistema mitocondrial); lipognesis.
Biosntesis de cidos grasos por el sistema de la malonil S.CoA o protoplasmtico. Esquema del
metabolismo de lpidos simples y complejos. Metabolismo de esteroides; transporte de colesterol y

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su utilizacin en animales. Estructuras y metabolismos de otros compuestos isoprenoides:
Eicosanoides (prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos).
Unidad Temtica N 11
VITAMINAS
a) Generalidades. Estructuras qumicas, funciones y fuentes de las vitaminas. Vitaminas
liposolubles: A (retinol), A2 (3- dehidrorretinol), D2 (ergocalciferol), D3 (colecalciferol), E
(tocoferol), K (factor de coagulacin). Vitaminas hidrosolubles: B1 (tiamina) B2 (riboflavina), B6
(piridoxina), B12 (cianocobalamina), C (cido ascrbico), Niacina, cido pantotnico, cido flico,
colina, carnitina.
b) Importancia de las vitaminas como coenzimas. Biosntesis de coenzimas que utilizan nucletidos
de adenina (FAD, NAD, NADP y coenzima A). Sntesis de vitaminas en rumen.
Unidad Temtica N 12
ASPECTOS MOLECULARES DE LA ACCIN HORMONAL: BIOQUMICA DE LAS
HORMONAS
a) Comunicacin intercelular: endcrina, parcrina y autcrina. Aspectos generales de la
bioqumica de las hormonas. Concepto. Clasificaciones segn su naturaleza qumica, su origen, el
sitio de accin y duracin del efecto, ejemplos. Esquema general de la biosntesis de hormonas
proteicas y no proteica; ejemplos. Secrecin, transporte y degradacin.
b) Mecanismos de accin de las hormonas: receptores y efectores, conceptos y clasificaciones.
Mecanismos de transduccin de seales por receptores de membrana plasmtica: proteinas G.
Segundos mensajeros: adenilciclasa, guanilciclasa, in calcio; metabolismo del fosfatidilinositol 4,5difosfato: generacin de IP3, diacilglicerol y cido araquidnico. La calmodulina. Caractersticas
generales de los receptores de hormonas esteroideas y tiroideas. Mecanismos de accin de las
prostaglandinas. Otras seales qumicas extracelulares: conceptos y ejemplos de feromonas,
prostanoides, neurotransmisores y factores de crecimiento.
Unidad Temtica N 13
UTILIZACION DE LA ENERGIA POR LOS ORGANISMOS VIVOS
a) Catabolismo y anabolismo. Concepto de energa: reacciones exergnicas y endergnicas. Energa
libre y reacciones qumicas. Enlaces ricos en energa. Potencial de transferencia de grupos.
Acoplamiento energtico. Fuentes de energa en los sistemas biolgicos. Rol central del ATP como
transportador de energa libre. Oxidacin biolgica, la mitocondria como escena de la accin. Etapas
de la respiracin. Generacin de acetil coenzima A. Ciclo de los cidos tricarboxlicos o de Krebs:
reacciones, enzimas, balances y rol biosinttico de algunos compuestos intermedios.
b) Cadena respiratoria y fosforilacin oxidativa. Introduccin. Componentes principales de la
cadena respiratoria. Deshidrogenasas. Flavoprotenas. Ubiquinona. Coenzima Q. Citocromos,
transporte de electrones. Fosforilacin oxidativa, complejo ATPasa, localizacin, sistema de
enzimas, mecanismo. Control respiratorio, acoplamiento de la fosforilacin oxidativa con el
transporte de electrones. Sistema mitocondrial de transporte para substratos respiratorios y sus
productos. El oxgeno como substrato para otras reacciones metablicas; oxidasas y oxigenasas;
citocromo P-450. Incompleta reduccin del oxgeno; antioxidantes naturales.
Unidad Temtica N 14
BIOQUMICA DE LA DIGESTION EN MONOGSTRICOS Y AVES
a) Los alimentos, clasificacin. Composicin qumica de la dieta de las especies animales. Procesos
qumicos de la digestin en monogstricos: carnvoros y omnvoros (protenas, cidos nucleicos y
nucleoprotenas, hidratos de carbono y lpidos). Actividad de las enzimas y composicin de las
secreciones digestivas. Absorcin de agua, sales minerales, glcidos, lpidos, aminocidos y bases
pricas y pirimdicas en el tracto digestivo.
b) Procesos qumicos de la digestin en las aves, generalidades. Composicin de la saliva.
Bioqumica de la digestin en: buche, proventrculo y molleja. Enzimas de los jugos pancretico e
intestinal.

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Rol digestivo de la bilis. Fenmenos qumicos de la digestin en intestino grueso y ciegos.
Caractersticas y composicin de las heces.
Unidad Temtica N 15
BIOQUMICA DE LA DIGESTION EN EL RUMIANTE
a) Condiciones del rumen como cuba de fermentacin. Micropoblacin ruminal, clasificacin segn
localizacin y sustratos. Digestin microbiana de los hidratos de carbono: celulosa, almidn,
pectina, disacridos y monosacridos; importancia del fsforo. Importancia de los cidos grasos
voltiles producidos por bacterias. Aprovechamiento y metabolismo de los AGV en el rumiante.
b) Hidrlisis de las protenas en el rumen. Protenas vegetales. Importancia de la solubilidad y
estructura. Accin bacteriana en el metabolismo proteico. Utilizacin de los aminocidos.
Importancia de la protena bacteriana y de los infusorios. Absorcin del nitrgeno en el rumen.
Importancia del amonaco y la urea en el metabolismo ruminal. Ciclo de recuperacin de la urea.
Degradacin y absorcin de los lpidos en el rumen. Fermentacin de la galactosa y glicerina e
hidrogenacin de los cidos grasos insaturados. Importancia de los cidos grasos microbianos.
Alimentos que escapan a la degradacin ruminal. Degradacin y aprovechamiento de diversos
sustratos en librillo, cuajar e intestino.
Unidad Temtica N 16
INTEGRACIN Y CONTROL DE LOS PROCESOS METABLICOS
a) Metabolismo especfico de tejidos. Interdependencia entre los principales rganos en el
metabolismo energtico de los animales. Divisin de tareas metablicas entre los rganos ms
importantes. Metabolismo intermedio. Nociones de la regulacin del metabolismo por hormonas.
Principal regulacin hormonal del metabolismo energtico.
b) Adaptacin metablica: regulacin de los niveles de nutrientes en los tejidos ante diferentes
estados nutricionales y hormonales. Control hormonal de la glucemia: acciones hormonales a corto
y a largo plazo (efectos en los metabolismos de glcidos, lpidos y protenas). Cambios del
metabolismo energtico: estrs metablico del ayuno y la diabetes como ejemplos para la
comprensin de la integracin metablica. Concepto de Lesin bioqumica.
Dra Gladis Lilia Sandoval de Grando
Profesora Titular

PROGRAMA DE TRABAJOS PRCTICOS


CLASES PRCTICAS ULICAS (CP)
CP1: Unidad Temtica N 1 y 2
Taller sobre el trabajo en laboratorio de qumica, bioseguridad y prevencin de accidentes.
Reconocimiento de materiales utilizados y su conservacin.
Ejercitacin de estructuras y nomenclatura de aminocidos, su clasificacin y propiedades, unin
peptdica y pptidos de inters en medicina.
CP2: Unidad Temtica N 2b
Resolucin de ejercicios de opcin mltiple referentes a propiedades fsico-qumicas de
aminocidos y protenas de inters en medicina.
CP3: Unidad Temtica N 3
Ejercitacin en reconocimiento de enzimas, nomenclatura, mecanismos de accin y ubicacin en la
clasificacin de la UIB. Interpretacin de grficos de actividad enzimatica segn influencia de
factores que afectan su actividad. Trabajo grupal de anlisis e interpretacin de publicaciones
cientficas seleccionadas previamente sobre actividad de enzimas e isoenzimas y mtodos de
estudio, con exposicin oral ante la clase.

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CP4: Unidad Temtica N 4
Ejercitacin sobre reacciones comunes del metabolismo de aminocidos y protenas en diferentes
especies animales.
CP5: Unidad Temtica N 5
Ejercicios de aplicacin para fijacin de conceptos acerca de estructuras, nomenclaturas,
propiedades e importancia biolgica de nuclesidos, nucletidos y cidos nucleicos.
CP6: Unidad Temtica N 6
Trabajo grupal sobre metabolismo de cidos nucleicos y sntesis de protenas, basado en lectura y
anlisis de trabajos cientficos. Anlisis comparativo del catabolismo de bases pricas y pirimdicas.
Sntesis y eliminacin de cido rico, orgenes y valores normales en el suero de especies
ureotlicas y uricotlicas.
CP7: Unidad Temtica N 7
Glcidos: reconocimiento e interpretacin de las formas isomricas. Ejercitacin sobre estructuras
de glcidos y derivados por reduccin, oxidacin y sustitucin.
CP8: Unidad Temtica N 8
Resolucin de crucigramas e incgnitas en esquemas metablicos centrales en el metabolismo de los
glcidos, con discusin sobre respuestas correctas e incorrectas.
CP9: Unidad Temtica N 9
Ejercicios de aplicacin para fijacin de conceptos acerca de estructuras, nomenclaturas y
propiedades de lpidos simples, complejos y sustancias asociadas.
CP10: Unidad Temtica N 10
Anlisis e interpretacin de esquemas sobre composicin y metabolismo de las lipoprotenas
plasmticas. Comparacin entre anabolismo y catabolismo de cidos grasos.
CP11: Unidad Temtica N 11
Lecturas complementarias sobre importancia y rol de las vitaminas liposolubles e hidrosolubles.
Elaboracin de cuadros comparativos.
CP12: Unidad Temtica N 12
Exposiciones grupales de temas seleccionados por los alumnos a partir de ttulos sugeridos
previamente en relacin con las estructuras y los mecanismos de accin hormonales.
CP13: Unidad Temtica N 13a
Ciclo de Krebs: trabajo grupal de estudio y anlisis del ciclo, con prctica de frmulas e
identificacin de las conexiones de los diferentes intermediarios con otras vas metablicas.
Resolucin de crucigramas.
CP14: Unidad Temtica N 13b
Exposiciones grupales de temas seleccionados por los alumnos a partir de ttulos sugeridos
previamente y en relacin con los substratos y vas para la obtencin de energa; respiracin aerobia
y anaerobia. Cadena respiratoria y fosforilacin oxidativa.
CP15: Unidad Temtica N 13b
Resolucin de incgnitas en esquemas del metabolismo intermedio.
Exposiciones grupales de temas seleccionados por los alumnos a partir de ttulos sugeridos
previamente y con relacin a la regulacin hormonal del metabolismo energtico.
CP16: Unidad Temtica N 13b
Elaboracin de cuadros comparativos referentes a sustratos, enzimas y productos en los diferentes
niveles del tubo digestivo de monogstricos y aves.
CP17: Unidad Temtica N 13b
Elaboracin de cuadros comparativos referentes a sustratos, enzimas y productos en los diferentes
niveles del tubo digestivo de rumiantes. Condiciones de una cuba de fermentacin, analogas con el
rumen. Ciclo de recuperacin del nitrgeno: esquematizacin.

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CLASES PRCTICAS DE LABORATORIO Segn Unidades Temticas (UT 1 a UT 16)

Laboratorio de UT 1 a 6: Prcticas de Laboratorio sobre ambiente celular, Aminocidos,


Protenas, Enzimas y Metabolismo nitrogenado.
Laboratorio de UT 7 a 10: Prcticas de Laboratorio sobre Glcidos, Lpidos y sus
Metabolismos.
Laboratorio de UT 11 a 13: Prcticas de Laboratorio sobre Vitaminas, Bioqumica de las
Hormonas y Oxidaciones biolgicas.
Laboratorio de UT 14 a 16: Prcticas de Laboratorio sobre Bioqumica de la Digestin en
monogstricos, aves y rumiantes. Metabolismo Intermedio.
PROGRAMA DE EXAMEN
UT = Unidad Temtica
Bolilla 1: UT 1a- 11a-16a

Bolilla 7: UT 4a-7a-15b

Bolilla 2: UT 1b- 11b-13a

Bolilla 8: UT 4b-7b-15a

Bolilla 3: UT 2a- 10b-14a

Bolilla 9: UT 5a-8b -13b

Bolilla 4: UT 2b- 10a-14b

Bolilla 10: UT 5b-8a -14a

Bolilla 5: UT 3a- 9b-16b

Bolilla 11: UT 6a-12b-13a

Bolilla 6: UT 3b- 9a-16a

Bolilla 12: UT 6b-12a-15b

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Antoine-Laurent de Lavoiser
(1743-1794). Considerado el
padre de la qumica moderna
por sus trabajos sobre
combustin, composicin
qumica del agua y del aire,
entre otros.

CRONOGRAMA DE CLASES-CTEDRA DE BIOQUMICA 1 cuatrimestre AO 2015


Clase
N

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3
4
5
6

7
8
9
10
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12

13
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Fecha

CTEDRA DE BIOQUMICA 1 cuatrimestre AO 2015 - CRONOGRAMA

L 6 ABRIL
GLS/PEL

IT y CP de UT 1: Introduc. a la Bioqumica. Matriz Vital. Agua. Bioelementos y biomolculas.


Materiales de laboratorio y bioseguridad.
Clase inicial a semi-presenciales: Inscripcin, condiciones de cursado, formacin de grupos de
trabajo. Manejo del blog de la Ctedra. Acuerdos sobre modos de comunicacin, plazos para los
trabajos y formas de evaluacin.

J 9 ABRIL
MBDB
L 13 ABRIL
SLM / GLS
J 16 ABRIL
ECA
L 20 ABRIL
MBDB

IT y CP de UT 2 y 3: Protenas
IT y CP de UT 3 y 4: Enzimas
IT y CP de UT 4: Metabolismo de Aminocidos y Protenas
IT y CP de UT 5: cidos Nucleicos.

IT de UT 6: Metabolismo de cidos nucleicos.


CP: Comisiones 1, 2 y 3
Lab 1 de UT 1 a 6: Prcticas de Lab. 1 s/ ambiente celular, AA, Protenas, Enzimas y
Metabolismo nitrogenado: Comisiones 4a, 4b, 5a, 5b, 6a y 6b
CP: Metabolismo de cidos nucleicos. Comisiones 4, 5 y 6
Lab 1 de UT 1 a 6: *1Prcticas s/ambiente celular, AA, Protenas, Enzimas y Metabolismo
L 27 ABRIL
nitrogenado: Comisiones 1a, 1b, 2a, 2b, 3a y 3b.
J- 30 ABRIL Evaluacin Parcial N 1 de UT 1 a 6
L 4 MAYO
IT y CP de UT 7: Glcidos
ECA/SLM
J - 7 MAYO
IT y CP de UT 8: Metabolismo de Glcidos
GLS
L - 11 MAYO IT y CP de UT 9: Lpidos
GREO
IT de UT 10: Metabolismo de Lpidos.
CP: Comisiones 1, 2 y 3.
J 14 MAYO
Lab de UT 5 a 8: Prcticas de Laboratorio sobre Glcidos, Lpidos y sus Metabolismos:
MSP
Comisiones 4a, 4b, 5a, 5b, 6a y 6b
CP: Metabolismo de Lpidos. Comisiones 4, 5 y 6.
L - 18 MAYO
Lab de UT 7 a 10: Prcticas de Laboratorio sobre Glcidos, Lpidos y sus Metabolismos:
Comisiones 1a, 1b, 2a, 2b, 3a y 3b.
IT y CP de UT 11 y 12: Bioqumica de Vitaminas y Hormonas - Exposiciones Grupales
J 21 MAYO
(ORAL)
L 25 MAYO FERIADO REVOL. DE MAYO
J -23 ABRIL
MBDB

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J 28 MAYO
Evaluacin Parcial N 2 de UT 7 a 10
SLM / GVL
L 1 JUNIO IT y CP de UT 13 (1ra parte): Utilizacin de Energa en los Organismos Vivos - Oxidaciones
biolgicas Ciclo de Krebs
GLS
IT de UT 13 (2da parte): Cadena Respiratoria Fosforilacin Oxidativa. CP: Cadena
J 4 JUNIO Respiratoria Fosforilacin Oxidativa: Comisiones 1, 2 y 3.
Lab de UT 11 a 13: Prcticas de Laboratorio sobre Vitaminas, Bioqumica de las Hormonas y
MBDB
Oxidaciones biolgicas: Comisiones 4, 5 y 6.
Sb. 6 JUNIO Recuperatorio evaluaciones parciales N 1 y 2
CP de UT 13 (2da parte): Cadena Respiratoria Fosforilacin Oxidativa: Comisiones 4, 5 y 6.
L 8 JUNIO Lab de UT 11 a 13: Prcticas de Laboratorio sobre Vitaminas, Bioqumica de las Hormonas y
Oxidaciones biolgicas: Comisiones 1, 2 y 3.
J - 11 JUNIO
IT y CP de UT 14 y 15: Bioqumica de la Digestin en Monogstricos, Aves y Rumiantes
GREO / MSP
L 15 JUNIO Evaluacin Parcial N 3 de UT 11 a 13
IT de UT 16: Metabolismo Intermedio e Integracin. CP: Metabolismo Intermedio e Integracin.
J 18 JUNIO Comisiones 1, 2 y 3.
Lab de UT 14 a 16: Prcticas de Laboratorio sobre Bioqumica de la Digestin en monogstricos,
ECA
aves y rumiantes. Metabolismo Intermedio: Comisiones 4, 5 y 6
CP de UT 16: Metabolismo Intermedio e Integracin: Comisiones 4, 5 y 6.
L 22 JUNIO Lab de UT 14 a 16: Prcticas de Laboratorio sobre Bioqumica de la Digestin en monogstricos,
aves y rumiantes. Metabolismo Intermedio: Comisiones 1, 2 y 3.
J 25 JUNIO Evaluacin Parcial N 4 de UT 14 a 16
L 29 JUNIO Recuperatorio Evaluaciones Parciales N 3 y 4
J 2 JULIO Recuperatorio Extraordinario de Evaluaciones Parciales
L - 6 JULIO Evaluacin Integral (ESCRITO / ORAL)

Fecha de iniciacin del ciclo: 6/04/15 Clase Inaugural


Fecha de finalizacin: 6/07/15 Evaluacin Integral

BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA (*) Y COMPLEMENTARIA


1. (*)BERG JM TYMOCZKO JL & STRYER L. BIOCHEMISTRY. Fifth Edition, 2002. W.H.
2. (*)BLANCO, A.: Qumica Biolgica, 7ma. ed., El Ateneo, Buenos Aires, 2000.
3. (*)BOREL, J.P.; RANDOUX, A.; MAQUART, F.X.; LE PEUCH, C. & VALEIRE, J.:
Bioqumica Dinmica, 1ra. ed. en espaol, Ed. Mdica Panamericana, Buenos Aires, 1989.
4. (*)CAMPBELL, NA & REECE, JB. Biologa. 7 ed., Ed. Mdica Panamericana, University of
California, Riverside, Berkeley, California, 2007. http://www.medicapanamericana.com/campbell/
5. (*)CURTIS H y BARNES N S. Autores de la actualizacin de la 6 ed.: CURTIS, H; BARNES,
NS; SCHNEK, A; FLORES, G. Biologa. 7. Ed., Panamericana, Buenos Aires, 2007.
http://www.curtisbiologia.com/
6. (*)HERRERA, E.: Elementos de Bioqumica, 1ra. ed. en espaol, Interamericana, Mxico,
1993.
7. (*)LEHNINGER, A., NELSON, D.L. y COX, M.M. "PRINCIPIOS DE BIOQUIMICA",
editorial Omega, 3 Edicin, 2002.
8. (*)McGILVERY, R.W. & GOLDSTEIN, G.W.: Bioqumica - Aplicaciones Clnicas, 3ra. ed. en
ingls y 2da. En espaol, Nueva Editorial Interamericana, Mxico, 1986.
9. (*)MURRAY, R; GRANNER, D; MAYES, P & RODWEL, V: Bioqumica de Harper, 15ta.
ed., El Manual Moderno, Mxico, 2000.
10. (*)ROSKOSKI, R. Bioqumica. McGrow-Hill. 2000.

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FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS - UNNE
11. (*)VOET, D. y VOET, J. G. "BIOQUIMICA", 3 ed., Ed. Mdica Panamericana, Buenos Aires,
2006. www.medicapanamericana.com
12. (*)VOET, D; VOET, JG & PRATT, ChW. Fundamentos de Bioqumica. La vida a nivel
molecular. 2 ed., Ed. Mdica Panamericana, Buenos Aires, 2007. www.medicapanamericana.com
13. BRESCIA, F.; ARENTS, J.; MEISLICH, H. & TURK, A.: Fundamentos de Qumica, 3ra. ed.,
Compaa Editorial Continental, Mxico, 1980.
14. CHURCH, D.C.: Fisiologa digestiva y
Zaragoza, Espaa, 1983.

nutricin de los rumiantes, Vol. 1, 2 y 3, Acribia,

15. CONN, E.E. & STUMPF, P.K.: Bioqumica fundamental, 3ra. ed., Limusa, Mxico 1977.
16. DE ROBERTIS, NOWINSKI, SAEZ. Biologa Celular. 12da. Ed. Bs. As., El Ateneo, 1998.
17. DEVLIN T. Bioqumica, libro de texto con aplicaciones clnicas. 2 Tomos. 3 Edicin. Editorial
Revert 1999, 2000.
18. HENRY, J.B.: Todd-Sanford-Davidsohn Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el
Laboratorio, Tomos I y II, 8va. ed., Promotora Editorial, Mxico, 1991.
19. KOLB, GURTHER, KETZ, SCHRODER, Y SEIDEL. Fisiologa Veterinaria. 2a. ed. espaola.
Zaragoza, Acribia, 1976.
20. LEHNINGER, Albert. Bioqumica. 3a. ed. Barcelona, Omega, 1979.
21. LINDQUIST R. Bioqumica, problemas. Interamericana Mc Graw- Hill (1991).
22. MAIDANA, Sergio. Bioqumica de la digestin ruminal. 1a. ed. Resistencia, Moro, 1982.
23. MATHEWS C., VAN HOLDE K., AHERN K G. Bioqumica. 3 Edicin. Addison Wesley,
2002.
24. MAYNARD. Nutricin animal. 7ma. Ed, 1981.
25. MONTGOMERY. Bioqumica, casos y texto, 6ta. Ed, 1998.
26. MONTGOMERY; DRYER; CONWAY & SPECTOR: Bioqumica Mdica, 1ra. ed. en espaol,
Salvat Editores, Barcelona, Espaa, 1984.
27. NIEMEYER, H.: Bioqumica, 2da.ed., Intermdica, Buenos Aires, 1974.
28. RAWN J. D. Tomos I y II.. Bioqumica-1ra. Edicin. Ed. Interamericana - McGraw-Hill.
1989.
29. STRYER L. Bioqumica. Ed. Revert, 1995.
30. VILLEE S. Biologa. 4ta. ed, 1998.
31. W.H. Freeman, New York. EN:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?call=bv.View..ShowTOC&rid=stryer.TOC&depth=10

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Instructivo para confeccin de monografa
"Una monografa estructura en forma analtica y crtica la informacin recogida en distintas fuentes
acerca de un tema determinado. Exige una seleccin rigurosa y una organizacin coherente de los
datos recogidos. Dicha seleccin y organizacin sirve como indicador del propsito que orient la
escritura" (en Kauffman y Rodrguez; 1994, pgina 47).
La monografa debe estar organizada en:
1. Cartula: la cartula es la primer hoja, donde debe constar
a. asignatura
b. ttulo del tema
c. autores
d. ao
2. Introduccin: enmarca el tema y destaca su importancia.
3. Desarrollo: exposicin del contenido temtico
4. Conclusin: proporciona un resumen del tema expuesto que cierra el planteo de la introduccin.
Debe ser sinttica pero completa.
5. Bibliografa: Las referencias bibliogrficas deben escribirse siguiendo las normas contenidas en
este documento. stas normas pueden consultarse, para su ampliacin y mayor comprensin en:
http://www.hospitalitaliano.org.ar/docencia/biblioteca/attachs/vancouver%20N%ba%201.pdf
Para la entrega de la monografa en Bioqumica se tendrn en cuenta los siguientes aspectos:

Deben consignarse al menos tres fuentes bibliogrficas consultadas, las cuales NO deben
pertenecer a una sola de las 5 categoras sealas (A, B, C, D, E). La extensin del trabajo no
debe superar las 10 pginas en letra 12 y doble espacio.

La monografa ser evaluada en funcin a su pertinencia al tema, presentacin, ortografa


(ms de 10 errores ortogrficos implicarn el descuento de un punto en la calificacin) y
caligrafa en el caso de los manuscritos.

La nota de la monografa es la misma para todos los integrantes del grupo.

Este trabajo debe ser presentado el mismo da en que el grupo haga su exposicin oral.

*Normas para la escritura de Referencias bibliogrficas


Las referencias bibliogrficas se numerarn correlativamente segn el orden en el que aparecen por
primera vez en el texto. Se identificarn en el texto, en las tablas y en las leyendas mediante
nmeros arbigos entre parntesis. Las referencias citadas nicamente en las tablas o en las leyendas
de las figuras se numerarn de acuerdo con el orden establecido por la primera identificacin dentro
del texto de cada tabla o figura en particular.
Se utilizar el estilo de los siguientes ejemplos, que se basan en los formatos que emplea la National
Library of Medicine (NLM) de los Estados Unidos en el Index Medicus. Los ttulos de las revistas
debern abreviarse, segn el estilo empleado en el Index Medicus. Debe consultarse la List of
Journals Indexed in Index Medicus, que publica anualmente la NLM por separado y en el nmero
correspondiente al mes de enero del Index Medicus. El listado tambin se puede obtener a travs de
Internet: http://www.nlm.nih.gov.
Se evitar la utilizacin de resmenes como referencias. Las referencias a originales aceptados pero
todava no publicados se designarn con expresiones comoen prensa o de prxima aparicin;
los autores debern obtener autorizacin por escrito para citar dichos artculos y comprobar que han
sido admitidos para su publicacin. La informacin procedente de artculos remitidos pero

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rechazados, se mencionar en el texto como observaciones no publicadas, previa autorizacin por
escrito de la fuente.
Se evitarn las referencias del tipo comunicacin personal, salvo cuando ofrezcan informacin
esencial no disponible en fuentes pblicas, en cuyo caso figurarn entre parntesis en el texto el
nombre de la persona y la fecha de la comunicacin. Si se trata de artculos cientficos, los autores
debern obtener de la fuente de la comunicacin personal la autorizacin por escrito y la
confirmacin de su exactitud.
Las referencias bibliogrficas debern ser cotejadas por el (los) autor(es) con los documentos
originales.
El estilo de los requisitos de uniformidad (estilo Vancouver) se basa en gran medida en el estilo
normalizado ANSI adoptado por la NLM para sus bases de datos (por ejemplo, MEDLINE). Se han
aadido notas en los casos en que el estilo Vancouver difiere del estilo utilizado por la NLM.

A) Artculos de revista
(1) Artculo estndar (Se mencionan los 6 primeros autores y, si su nmero excede de 6, se aade
la expresin et al.) [Nota: La NLM incluye actualmente hasta 25 autores; si hay ms de 25, la
NLM cita los 24 primeros, luego el ltimo autor y finalmente aade et al.].
Vega KJ, Pina I, Krevsky B. Heart transplantation is associated with an increased risk for
pancreatobiliary disease. Ann Intern Med 1996 Jun 1;124(11):980-3.
Como opcin, si una revista lleva paginacin continua a lo largo del volumen (como sucede con
muchas revistas mdicas) pueden omitirse el mes y el nmero. [Nota: Por coherencia, esta
alternativa se emplea en los ejemplos de este documento. La NLM no aplica esta opcin.]
Vega KJ, Pina I, Krevsky B. Heart transplantation is associated with an increased risk for
pancreatobiliary disease. Ann Intern Med 1996;124:980-3.
En el caso de ms de 6 autores:
Parkin DM, Clayton D, Black RJ, Masuyer E, Friedl HP, Ivanov E, et al. Childhood leukaemia in
Europe after Chernobyl: 5 year follow-up. Br J Cancer 1996;73:1006-12.
(2) Autor institucional
The Cardiac Society of Australia and New Zealand. Clinical exercise stress testing. Safety and
performance guidelines. Med J Aust 1996;164:282-4.
(3) No se menciona autor
Cancer in South Africa [editorial]. S Afr Med J 1994;84:15.
(4) Artculo en idioma distinto del ingls [Nota: La NLM traduce el ttulo al ingls, cita el ttulo
original entre corchetes y aade una indicacin del idioma original en abreviatura.]
Ryder TE, Haukeland EA, Solhaug JH. Bilateral infrapatellar seneruptur hos tidligere frisk kvinne.
Tidsskr Nor Laegeforen 1996;116:41-2.
(5) Suplemento de un volumen
Shen HM, Zhang QF. Risk assessment of nickel carcinogenicity and occupational lung cancer.
Environ Health Perspect 1994;102 Suppl 1:275-82.
(6) Suplemento de un nmero
Payne DK, Sullivan MD, Massie MJ. Women's psychological reactions to breast cancer. Semin
Oncol 1996;23(1 Suppl 2):89- 97.
(7) Parte de un volumen
Ozben T, Nacitarhan S, Tuncer N. Plasma and urine sialic acid in non-insulin dependent diabetes
mellitus. Ann Clin Biochem 1995;32(Pt 3):303-6.
(8) Parte de un nmero
Poole GH, Mills SM. One hundred consecutive cases of flan lacerations of the leg in ageing patients.
N Z Med J 1994;107(986 Pt 1):377-8.
(9) Nmero sin volumen
Turan I, Wredmark T, Fellander-Tsai L. Arthroscopic ankle arthrodesis in rheumatoid arthritis. Clin
Orthop 1995;(320):110- 4.
(10) Sin nmero ni volumen
Browell DA, Lennard TW. Immunologic status of the cancer patient and the effects of blood
transfusion on antitumor responses. Curr Opin Gen Surg 1993:325-33

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(11) Paginacin en nmeros romanos
Fisher GA, Sikic BI. Drug resistance in clinical oncology and hematology. Introduction. Hematol
Oncol Clin North Am 1995 Apr;9(2):xi-xii.
(12) Indicacin del tipo de artculo segn corresponda
Enzensberger W, Fischer PA. Metronome in Parkinson's disease [carta]. Lancet 1996;347:1337.
Clement J, De Bock R. Hematological complications of hantavirus nephropathy (HVN) [resumen].
Kidney Int 1992;42:1285.
(13) Artculo que contiene una retractacin
Garey CE, Schwarzman AL, Rise ML, Seyfried TN. Ceruloplasmin gene defect associated with
epilepsy in EL mice [retractacin de Garey CE, Schwarzman AL, Rise ML, Seyfried TN. In: Nat
Genet 1994;6:426-31]. Nat Genet 1995;11:104.
(14) Artculo retractado
Liou GI, Wang M, Matragoon S. Precocious IRBP gene expression during mouse development
[retractado en Invest Ophthalmol Vis Sci 1994;35:3127]. Invest Ophthalmol Vis Sci 1994;35:10838.
(15) Artculo sobre el que se ha publicado una fe de erratas
Hamlin JA, Kahn AM. Herniography in symptomatic patients following inguinal hernia repair [fe de
erratas en West J Med 1995;162:278]. West J Med 1995;162:28-31.
B) Libros y otras monografas
[Nota: En versiones anteriores de las normas de estilo de Vancouver figuraba incorrectamente una
coma, en lugar de un punto y coma, entre el editor y la fecha.]
(16) Personas como autores
Se coloca en este orden: Autor/es. Ttulo del libro. Edicin. Lugar de publicacin: Editorial; ao.
Nota: la primera edicin no es necesario consignarla. La edicin siempre se pone en nmeros
arbigos y abreviatura: 2 ed. 2nd ed. Si la obra estuviera compuesta por ms de un volumen,
debemos
citarlo a continuacin del ttulo del libro: .. . Vol. 3
Ringsven MK, Bond D. Gerontology and leadership skills for nurses. 2nd ed. Albany (NY): Delmar
Publishers; 1996.
(17) Directores de edicin y compiladores como autores
Norman IJ, Redfern SJ, editores. Mental health care for elderly people. New York: Churchill
Livingstone; 1996.
(18) Organizacin como autor y editor
Institute of Medicine (US). Looking at the future of the Medicaid program. Washington: The
Institute; 1992.
(19) Captulo de libro [Nota: En versiones anteriores de las normas de estilo de Vancouver
figuraba una coma, en lugar de una p. delante de las pginas]
Phillips SJ, Whisnant JP. Hypertension and stroke. In: Laragh JH, Brenner BM, editors.
Hypertension: pathophysiology, diagnosis, and management. 2nd ed. New York: Raven Press; 1995.
p. 465-78.
(20) Actas de congreso
Kimura J, Shibasaki H, editores. Recent advances in clinical neurophysiology. Proceedings of the
10th International Congress of EMG and Clinical Neurophysiology; 1995 Oct 15-19; Kyoto, Japan.
Amsterdam: Elsevier; 1996.
(21) Ponencia presentada a congreso
Se coloca en este orden: Autor/es de la comunicacin/ponencia. Ttulo de la
comunicacin/ponencia. En: Ttulo oficial del congreso. Lugar de publicacin. Editorial; ao.
Pgina inicial-final de la comunicacin/ponencia.
Nota: es frecuente que la fecha y ciudad de celebracin formen parte del ttulo del congreso. Esta
misma estructura se aplica a Jornadas, Conferencias, Simoposios, Reuniones, etc.
Bengtsson S, Solheim BG. Enforcement of data protection, privacy and security in medical
informatics. En: Lun KC, Degoulet P, Piemme TE, Rienhoff O, editores. MEDINFO 92.
Proceedings of the 7th World Congress on Medical Informatics; 1992 Sep 6-10; Geneva,
Switzerland. Amsterdam: North-Holland; 1992. p. 1561-5.

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(22) Informe cientfico o tcnico
Se coloca en este orden: Autor/es. Ttulo del informe. Lugar de publicacin. Organismos/Agencia
editora; ao. Nmero o serie identificatoria del informe.
Publicado por el organismo financiador o patrocinador:
Smith P, Golladay K. Payment for durable medical equipment billed during skilled nursing facility
stays. Final report. Dallas (TX): Dept. of Health and Human Services (US), Office of Evaluation and
Inspections; 1994 Oct. Report No.: HHSIGOEI69200860.
Publicado por el organismo realizador:
Field MJ, Tranquada RE, Feasley JC, editors. Health ser-vices research: work force and educational
issues. Washington: Nacional Academy Press; 1995. Contract No.: AHCPR282942008. Patrocinado
por la Agency for Health Care Policy and Research.
(23) Tesis doctoral (o similar)
Se coloca en este orden: Autor. Ttulo de la tesis [tesis doctoral]. Lugar de edicin: Editorial (si est
editada); ao.
Kaplan SJ. Post-hospital home health care: the elderly's access and utilization [tesis doctoral]. St.
Louis (MO): Washington Univ.; 1995.
(24) Patente
Larsen CE, Trip R, Johnson CR, inventores; Novoste Corporation, assignee. Methods for procedures
related to the electrophysiology of the heart. US patente 5,529,067. 1995 Jun 25.
C) Otros trabajos publicados
(25) Artculo de peridico
Se coloca en este orden: Autor del artculo*. Ttulo del artculo. Nombre del peridico** ao mes
da; Seccin***: pgina (columna).
* Autor del artculo, si figura
** Los nombres de peridicos o diarios se colocan completos
*** Si existiera identificada como tal
Navarra, Gabriela. Patentar genes plantea un grave riesgo: entrevista con el coordinador del
Programa Latinoamericano del Genoma Humano. La Nacin 2001 Junio 21. p. 14 Lee G.
Hospitalizations tied to ozone pollution: study estimates 50,000 admissions annually. The
Washington Post 1996 Jun 21;Sect.A:3 (col. 5).
(26) Material audiovisual
Se coloca en este orden: Autor/es. Ttulo del video [video]. Lugar de edicin: Editorial; ao.
Aplicable a todos los soportes audiovisuales.
HIV+/AIDS: the facts and the future [video]. St. Louis (MO): Mosby- Year Book; 1995.
(27) Mapa
North Carolina. Tuberculosis rates per 100,000 population, 1990 [mapa demogrfico]. Raleigh:
North Carolina Dept. of Environment, Health, and Natural Resources, Div. of Epidemiology; 1991.
(28) Diccionario y obra de consulta similar
Stedman's medical dictionary. 26th ed. Baltimore: Williams & Wilkins; 1995. Apraxia; p. 119-20.
D) Trabajos inditos
En prensa [Nota: La NLM prefiere la expresin de prxima aparicin ("forthcoming"), puesto
que no todos los trabajos sern impresos.]
Leshner AI. Molecular mechanisms of cocaine addiction. N Engl J Med. En prensa 1996.
E) Material informtico
Artculo de revista en formato electrnico
Se coloca en este orden: Autor. Ttulo. Nombre de la revista abreviado [tipo de soporte] ao, [fecha
de acceso]; volumen (nmero): pginas o indicador de extensin. Disponible en: Morse SS. Factors
in the emergence of infectious diseases. Emerg Infect Dis [serie en lnea] 1995 Jan-Mar [citado 1996
Jun 5];1(1):[24 pantallas]. Disponible en: URL: http://www.cdc.gov/ncidod/EID/eid.htm
Monografa en formato electrnico
Se coloca en este orden: Ttulo [tipo de soporte]. Editores o productores. Edicin. Versin. Lugar de
publicacin: Editorial; ao.
CDI, clinical dermatology illustrated [monografa en CD-ROM]. Reeves JRT, Maibach H. CMEA
Multimedia Group, producers. 2nd ed. Version 2.0. San Diego: CMEA; 1995.

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Archivo informtico
Se coloca en este orden: Autor. Ttulo [tipo de soporte]. Versin. Lugar: Editorial; ao.
Hemodynamics III: the ups and downs of hemodynamics [programa informtico]. Version 2.2.
Orlando (FL): Computerized Educational Systems; 1993.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD
INTRODUCCIN
El trabajo en el laboratorio en mayor o menor grado, est sujeto a riesgos de todo tipo, que
debemos conocer para poder minimizarlos. La concientizacin del personal basada en la discusin e
informacin permanente es la mejor manera de minimizar los riesgos de ocurrencia de accidentes.
Es as que es necesario conocer algunos conceptos:
BIOSEGURIDAD: es la seguridad y proteccin de lo viviente.
ACCIDENTE: Segn la Organizacin Mundial de la Salud (OMS), Accidente es todo
suceso inesperado que en forma veloz y repentina, ocasiona interrupcin o interferencia en la tarea,
pudiendo ocasionar una lesin al trabajador, prdidas de material, deterioro del ambiente, prdida de
tiempo, etc.
Al estudiar un accidente se deben valorar todas sus etapas:

CAUSAS

ACCIDENTE

CONSECUENCIAS

Entre los causales podramos mencionar a factores:


-Tcnicos: infraestructura e insumos necesarios.
-Sociales: inestabilidad laboral, sobrecarga de horas de trabajo, bajos salarios, etc.
-Personales: pueden ser a su vez: individuales (desequilibrio emocional), colectivos (fallas en las
relaciones interpersonales).
RIESGOS
Los riesgos pueden clasificarse para su estudio en diferentes tipos
RIESGO DE INCENDIO
El laboratorio es un lugar de riesgo potencial alto de incendio debido a la existencia de:
-instalaciones y aparatos elctricos.
-almacenamiento de lquidos inflamables.
-gases inflamables comprimidos.
-material de plstico (fcilmente combustible, productor de grandes cantidades de humo y gases
txicos)
Un programa de lucha contra el fuego debe comprender aspectos de prevencin de manera de evitar
que el incendio se produzca; proteccin, para que una vez iniciado el fuego se minimicen las
consecuencias; y control.
Pautas bsicas para prevenir el riesgo de incendio:
Los lquidos inflamables deben almacenarse en pequeas cantidades, en recipientes seguros
y en armarios especiales.
Cuando se trabaja con lquidos inflamables debe ser en zonas ventiladas y lejos de cualquier
llama o fuente de calor.
Los recipientes que han contenido material inflamable deben ser lavados convenientemente
antes de eliminarlos.

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No se deben arrojar solventes orgnicos ni lquidos inflamables por el desage.


Nunca se fumar en el laboratorio.
Se deben revisar peridicamente las instalaciones de gases comprimidos, para detectar
posibles fugas.
Todo el personal debe conocer las salidas de emergencia y debe ser capaz de alcanzarlas an
a oscuras.

CLASES DE FUEGO
CLASE SIMBOLO
Tringulo verde
A
letra blanca

Cuadrado rojo
Letra blanca

Crculo azul
Letra blanca

C
D

Estrella amarilla
Letra blanca

CARACTERISTICAS
Fuegos que se desarrollan
sobre combustibles slidos:
madera, papel, tela, goma,
plstico, etc.

FORMAS DE EXTINCION
Por enfriamiento. Matafuego
aconsejado:
agua
muy
eficiente, polvo o anhdrido
carbnico
relativamente
eficiente.

Fuego sobre lquidos y gases: Por sofocacin. Matafuego


gasolina, solventes, grasas, aconsejado:
polvo
o
pinturas, aceites, ceras, etc.
anhdrido carbnico muy
eficiente, agua no eficiente.

Fuegos que se desarrollan


sobre materiales, equipos o
instalaciones sometidas a
corriente elctrica.

Con
sustancias
no
conductoras.
Matafuego
aconsejado:
polvo
o
anhdrido carbnico. AGUA
NO DEBE USARSE.
Fuegos que se desarrollan La extincin no se realiza
sobre metales combustibles: con
los
agentes
sodio, potasio, magnesio, etc. convencionales sino con
polvos especiales para cada
uno de ellos.

Reglas elementales de ataque y modo de utilizar el matafuego:


Ataque el fuego en la direccin del viento.
Al combatir fuegos en superficies lquidas, comience por la base y parte delantera del fuego.
Al combatir en derrames, empiece a extinguir desde arriba hacia abajo.
Es preferible usar siempre varios extinguidores al mismo tiempo, en vez de emplearlos uno
tras otro.
Est atento a una posible reiniciacin del fuego, no abandone el lugar hasta ste quede
completamente apagado.

RIESGO ELECTRICO
Se debe a la existencia de aparatos elctricos que pueden ser causa de accidentes, tanto por
accin directa de la electricidad sobre las personas, como de la posibilidad de originar fuegos y
explosiones. Es necesario recordar algunas definiciones para entender el vocabulario:
Electricidad: agente fsico que se manifiesta como una diferencia de potencial elctrico entre dos
puntos de una sustancia. Si estos dos puntos se unen se produce una circulacin de corriente
elctrica.
La corriente elctrica puede ser de dos tipos:
Continua: tiene intensidad, diferencia de potencial y sentido de circulacin constantes.
Alterna: su intensidad, diferencia de potencial y sentido de circulacin, varan en forma peridica
regular.

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Intensidad de corriente: es el nmero de cargas que circula por unidad de tiempo, su unidad es el
Ampere.
Diferencia de potencial: es la diferencia de nivel elctrico entre dos puntos de un sistema, es la
fuerza impulsora del movimiento de cargas. La unidad es el voltio.
Resistencia: es la dificultad que opone el circuito a la circulacin de corriente, su unidad es el Ohm.
De acuerdo a la forma en que afectan el cuerpo humano, las intensidades de corriente se
clasifican en:
-corrientes peligrosas: hasta 25mA.
-corrientes muy peligrosas: desde 25mA.
La resistencia del cuerpo humano depende de los siguientes factores:
Piel: es la superficie de contacto (a menor superficie mayor resistencia), importan tambin su
humedad (a mayor humedad menor resistencia), su grosor (mayor grosor mayor resistencia) su
temperatura y lesiones (disminuye la resistencia).
Estado general del individuo: el hambre, ser, fatiga, sueo, preocupaciones, etc. disminuyen la
resistencia que presenta el cuerpo.
Entonces, de acuerdo a lo dicho, la severidad del dao depender de la cantidad de corriente
recibida, del estado previo del individuo y del tiempo de exposicin.
Las lesiones pueden variar desde una contraccin muscular refleja (quedarse pegado) con
corrientes menores a 25mA. Quemaduras y paro respiratorio con corrientes entre 25 y 70mA. Con
corrientes del orden de 100mA, paro cardaco, fibrilacin cardaca daos al sistema nervioso y
muerte.
Los medios de proteccin lo constituyen las conexiones a tierra, los transformadores de seguridad,
etc. siendo el medio ms idneo los disyuntores diferenciales.
RIESGO QUIMICO
Es la posibilidad de sufrir daos a travs de un accidente con un reactivo.
Un reactivo es toda sustancia qumica que se utiliza para investigar o reconocer otra sustancia, segn
la reaccin que se produzca. Se pueden clasificar en orgnicos o inorgnicos o en generales y
especiales.
Existe el riesgo qumico en la forma de almacenamiento, transporte, manipulacin y descarte de
reactivos.
Almacenamiento: en trminos generales, las drogas deben guardarse en lugares secos, frescos,
protegidos del polvo y la luz. Estos lugares deben preservarse del acceso de personas ajenas al
trabajo especfico para evitar accidentes por imprudencia o desconocimiento.
Transporte: el personal debe estar capacitado acerca de los peligros que poseen los reactivos que
manipula y de cul es la forma de proceder en casos de derrames o fugas.
Manipulacin: existen una serie de normas bsicas:
- En el lugar de trabajo se deben disponer solo de las disoluciones a utilizar, o bien los reactivos
puros fraccionados en recipientes adecuados.
- No se deben regresar fracciones excedentes de reactivos a los frascos originales.
- Los tapones nunca deben dejarse sobre la mesada.
- Se debe disponer de material absorbente en el lugar de trabajo, para casos de derrames.
- Cuando se realizan reacciones que produzcan vapores o gases txicos, se debe trabajar bajo
campana.
- Nunca se deben oler directamente de la boca del frasco, sino con la mano dirigir los vapores
hacia la nariz.
- Nunca se deben gustar los productos con los que trabaja.
- Los lquidos inflamables no se calientan a la llama directamente, y no se descartan en las piletas.
- No se deben arrojar a la pileta, ni a papeleros los restos de sodio o potasio.
- Nunca se arrojara agua sobre metales alcalinos o fundidos, porque puede producirse una
explosin.
- Cuando se calienten sustancias en tubos de ensayo, dirigir la boca del tubo hacia un lugar
despejado flameando el tubo sobre la llama.
- Los restos de cianuro nunca se arrojaran a la pileta, ya que si hay restos de cidos se producira
cido cianhdrico, gas toxico mortal.

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- Al trasvasar reactivos conviene hacerlo con embudos.
Descarte: cuando se eliminan los reactivos, primero deben inactivarse de manera tal que no sea
peligroso para la comunidad o para el medio ambiente.
Efectos de las sustancias qumicas sobre el organismo.
De acuerdo a su peligrosidad los reactivos qumicos se clasifican segn el siguiente cuadro:
Pictograma

Clasificacin y Precaucin
Evitar choque, percusin, friccin, formacin de chispas, fuego y accin
del calor.
Perxidos orgnicos, sustancias y mezclas que en contacto con materiales
combustibles pueden llevar a estos a la combustin de explosin.
Evitar cualquier contacto con sustancias inflamables.
Evitar cualquier contacto con el cuerpo humano, ya que pueden provocar
graves daos para la salud posiblemente irreversibles y con consecuencias
mortales.
Se hace referencia especial a la accin cancergena, teratgena o riesgos de
alteraciones genticas.
Evitar contacto con el cuerpo humano, tambin inhalacin de vapores.
Posibles daos para la salud en caso de empleo inadecuado. No se descarta
accin cancergena, teratgena o riesgos de alteraciones genticas.
Lquidos con punto de inflamacin inferior a 0C y punto de ebullicin
mximo de 35C.
Mantener lejos de llamas abiertas, chispas y fuentes de calor.
Lquidos con punto de inflamacin inferior a 21C. Gases licuados con
punto de inflamacin a presin normal. Sustancias y mezclas que en
contacto con agua y aire hmedo liberan gases fcilmente inflamables.
Mantener lejos de llamas abiertas, chispas y fuentes de calor.
Destruccin de la piel en su total grosor, en piel sana e intacta.
Evitar contacto con los ojos, la piel y la ropa mediante medidas protectoras
especiales. No inhalar vapores.

Claros daos en los ojos e irritacin de la piel, que se mantienen como


mnimo 24 hs posteriores a la accin, o irritacin de las vas respiratorias.
Evitar contacto con los ojos, la piel y la ropa mediante medidas protectoras
especiales. No inhalar vapores.

Cabe destacar que los pictogramas se encuentran en todos los rtulos de los reactivos qumicos, de
all la importancia de conocer su significado y las precauciones a tomar en cada caso.
RIESGO BIOLOGICO
Es la posibilidad de contraer enfermedades infecciosas a partir del manipuleo de material
biolgico. El material biolgico se puede definir como el conjunto de materia orgnica que es o
potencialmente puede ser, reservorio de agentes infecciosos, por ejemplo: sangre, orina, tejidos,
fluidos y secreciones corporales, etc.

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En medicina veterinaria se suma el riesgo de contraer enfermedades infecciosas transmitidas por
animales (zoonosis), por lo tanto se debe considerar tambin dentro de las normas de bioseguridad,
el correcto manejo de animales. Existen una serie de normas que varan segn la especie y la
finalidad, no es lo mismo el manejo de animales con objetivos clnicos que con fines de
experimentacin para la investigacin. En este ltimo caso se siguen Procedimientos Operacionales
Estandarizados, son efectivos para realizar una determinada labor y lograr su objetivo y que se
realizan de forma estndar.
Las normas prcticas en el manejo de las distintas especies animales sern vistas en las materias
correspondientes. En el presente curso nos limitaremos a dar las posibles formas de infeccin
accidental y las precauciones generales a tener en cuenta.
En el siguiente cuadro se resumen las posibles vas de ingreso al organismo, los accidentes ms
frecuentes y las precauciones a tomar.

Accidentes ms frecuentes

Vas de ingreso

Precauciones

Inhalacin de aerosoles

RESPIRATORIA

Evitar produccin de
aerosoles. Utilizar material de
proteccin adecuado (barbijos)

Ingestin accidental de material


biolgico.

Inoculacin parenteral de material


biolgico. Herida cortante y
contacto directo con el material
biolgico. Mordeduras accidentales
de animales infectados o peligrosos.

DIGESTIVA

CUTNEA

Evitar pipetear con la boca.


Utilizar pro-pipetas o
dispensadores.
Evitar contacto directo con el
material biolgico (usar
guantes descartables). Correcto
manipuleo de animales.

Normas bsicas de higiene y seguridad-Laboratorio de Bioqumica


Las medidas de Seguridad en Laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a
proteger la salud de los que all se desempean frente a los riesgos propios derivados de la actividad,
para evitar accidentes y contaminaciones tanto dentro de su mbito de trabajo, como hacia el
exterior. Las reglas bsicas aqu indicadas son un conjunto de prcticas de sentido comn realizadas
en forma rutinaria.
1. Durante su estancia en el laboratorio, el alumno deber utilizar vestimenta apropiada para
realizar trabajos de laboratorio y cabello recogido (guardapolvo preferentemente de algodn y de
mangas largas, zapatos cerrados, evitando el uso de accesorios colgantes).
2. No se permitir comer, beber, fumar o maquillarse.
3. Es imprescindible mantener el orden y la limpieza. Cada persona es responsable directa de la
zona que le ha sido asignada y de todos los lugares comunes. Al finalizar el laboratorio los alumnos
dejarn todo el material ordenado y limpio.
4. Las manos deben lavarse cuidadosamente despus de cualquier manipulacin de laboratorio y
antes de retirarse del mismo.
5. Se debern utilizar guantes apropiados para evitar el contacto con sustancias qumicas o
material biolgico. Toda persona cuyos guantes se encuentren contaminados no deber tocar
objetos, ni superficies tales como: telfonos, lapiceras, manijas de cajones o puertas, cuadernos, etc.
6. No pipetear con la boca.
7. No se permitir correr en los laboratorios.

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8. Dado que muchas prcticas requieren el uso de corriente elctrica, se deber tener especial
cuidado de evitar la manipulacin de elementos hmedos o reactivos inflamables en sus
proximidades.
9. Siempre que sea necesario proteger los ojos y la cara de salpicaduras o impactos se utilizarn
anteojos de seguridad, viseras o pantallas faciales y otros dispositivos de proteccin. Cuando se
manipulen productos qumicos que emitan vapores o puedan provocar proyecciones, se evitar el
uso de lentes de contacto.
10. Se requerir el uso de mascarillas descartables cuando exista riesgo de produccin de aerosoles
(mezcla de partculas en medio lquido) o polvos, durante operaciones de pesada de sustancias
txicas o biopatgenas, apertura de recipientes con cultivos despus de agitacin, etc.
11. Se deber verificar la ausencia de vapores inflamables antes de encender una fuente de
ignicin. Para calentamiento, slo se utilizaran resistencias elctricas o planchas calefactoras
blindadas. Se prestar especial atencin al punto de inflamacin y de autoignicin del producto.
12. El material de vidrio roto no se depositar con los residuos comunes. Ser conveniente ubicarlo
en cajas resistentes, envuelto en papel y dentro de bolsas plsticas. El que sea necesario reparar se
entregar limpio al taller.
13. Ser necesario que todo recipiente que hubiera contenido material inflamable, y deba ser
descartado sea vaciado totalmente, escurrido, enjuagado con un solvente apropiado y luego con agua
varias veces.
14. Est prohibido descartar lquidos inflamables, txicos, corrosivos o material biolgico por los
desages de las piletas, sanitarios o recipientes comunes para residuos.
15. Los laboratorios contarn con un botiqun de primeros auxilios con los elementos
indispensables para atender casos de emergencia.
16. En el laboratorio slo podrn estar los alumnos del grupo correspondiente. No se admitirn
visitas.
MATERIALES DE LABORATORIO
Definicin: comprende todos los elementos que se utilizan corrientemente en los
laboratorios de qumica. Describiremos aqu los ms comunes y los que sern manipulados por
los alumnos en forma ms frecuente a lo largo del curso de Bioqumica y otras materias
afines dentro de la carrera.
Clasificacin:
1) De acuerdo a su constitucin
Material de vidrio: Este rubro constituye la mayor parte de los elementos
de un laboratorio, debiendo reunir ciertas propiedades de resistencia. El vidrio es una mezcla de
silicatos y existen variedades con mayor o menor termorresistencia (se refiere a la capacidad que
poseen para soportar elevadas temperaturas), con diferentes proporciones de xidos en su
composicin, etc. Los vidrios termorresistentes son mezclas polimricas de boratos (BO 3') y
silicatos (SiO 4"), los cuales se encuentran eslabonados (unidos) tridimensionalmente en forma
desordenada (ya que se considera un lquido enfriado hasta solidificar, sin cristalizar). Slo son
atacados por los cidos fluorhdrico y fosfrico concentrados y en caliente, y tambin por
algunos lcalis como el hidrxido de sodio (NaOH) en las mismas condicionesLimpieza: El material de vidrio debe estar siempre perfectamente limpio, ya que su contaminacin
puede conducir a resultados errneos. En general deben lavarse con detergente y enjuagarse con
agua destilada.
En caso de efectuarse pruebas en las que interfiera la presencia de iones (Ca3+, Fe2+,
PO4H2) el lavado debe efectuarse con detergentes no inicos y enjuagarse una vez con cido
clorhdrico (HCI) y repetidamente con agua bidestilada o desionizada. Para quitar restos de
material no removible con el procedimiento anterior, se pueden utilizar mezclas qumicas ms
agresivas.
Ellas pueden ser soluciones de:
Bicromato de sodio o potasio (50 g) y cido sulfrico (100 ml) en agua (llevando el volumen
final a 1000 ml). Esta mezcla se denomina sulfocrmica

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cido sulfrico concentrado y cido ntrico, llamada mezcla sulfontrica
Jabn y agua en caliente
Soluciones de hidr6xido de sodio o de potasio
El material se sumerge en estas soluciones y se deja actuar durante un tiempo variable y se lava
nuevamente.
Material de goma
Material de metal
Material de madera
Instrumental (el desarrollo de ste apartado escapa al alcance del presente apunte).
2) De acuerdo a su capacidad para medir volmenes
Volumtricos
No volumtricos
Esta clasificacin se basa en la posibilidad que brindan diferentes elementos de vidrio para medir
volmenes de lquidos con precisin. Los materiales no volumtricos, no estn calibrados para
cuantificar volmenes exactos.
Los elementos que se usan en volumetra tienen ciertas caractersticas que se describen a continuacin:
Lneas de Graduacin: Divisiones representadas por lneas, que abarcan parte o todo
el contorno del elemento volumtrico y responden a las fracciones del volumen total a medir. As,
una pipeta o una probeta se pueden encontrar divididas en diez grandes fracciones; entre cada una
de estas fracciones se pueden presentar a su vez diez subdivisiones. Si una probeta contiene un
volumen total de 100ml, cada divisin ser equivalente a 10ml y cada subdivisin a 1ml. Si se
tratara de una pipeta de 10ml, cada divisin sera 1ml y cada subdivisin 0,1ml.
Aforo: Es la marca (lnea) que poseen ciertos materiales volumtricos, la cual indica el
volumen total que pueden contener a una temperatura determinada (generalmente a 20 C). Estos datos
deben estar registrados en el recipiente y se refieren a la "capacidad" del mismo.
Materiales volumtricos:
Probeta
Matraz aforado
Micropipeta
Pipetas
Bureta
Materiales no volumtricos:
Pipeta Pasteur
Erlenmeyer
Embudo
Kitasato
Baln
Mortero
Tubo de ensayo
Frasco gotero
Vaso de precipitacin
Ampolla de decantacin
Caja de Petri
Vidrio de reloj
Capsula de porcelana
Frasco de reactivos
Otros trminos a tener en cuenta para la utilizacin de material volumtrico son:
Menisco: Este trmino no hace referencia al material de laboratorio, sino que corresponde a la
forma que adopta la superficie del lquido contenido en el recipiente, al "mojar" el vidrio. Esta forma,
depende de la mayor o menor tensin superficial y de si se trata de lquidos polares (como el agua) o
no polares (como los hidrocarburos).
Enrase: Es el procedimiento por el cual se hace coincidir el menisco con el aforo o lnea
de graduacin al medir un lquido. Estos elementos deben estar a la altura del ojo del
observador durante el proceso de medicin, teniendo la precaucin de apoyar el recipiente sobre
una superficie plana horizontal (para las probetas) o de mantenerlo perpendicular a dicha superficie
(para las pipetas).
Descripcin de materiales de vidrio volumtricos
Probeta: Recipiente cilndrico graduado, con borde superior terminado en pico de jarra. Posee
una base que puede ser de vidrio, madera o plstico. Para utilizarlas se apoyan sobre las mesadas,

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se carga el lquido hasta un volumen ligeramente inferior al requerido, y luego se completa
lentamente hasta enrasar.

Matraz aforado: Recipiente con una porcin esfrica y base plana y cuello generalmente largo,
donde se halla el aforo- De capacidad variable, sirven para preparar y guardar soluciones. Se
cargan generalmente con embudo y en forma similar a las probetas.

Bureta: Tubo terminado en punta afinada y graduado. Por medio de un robinete o llave (debe
estar lubricado) permite la salida del liquido contenido en forma gradual, generalmente por
goteo. De capacidad variable, son usadas para medir volmenes exactos, por ejemplo al efectuar
titulaciones. Se cargan por arriba con embudo. Se sostienen en soportes adecuados. El robinete
tiene dos posiciones extremas (cerrado y abierto) e intermedias. Se usa en operaciones en que se
necesita medir volmenes con gran exactitud.

Pipetas bola o de traslado: En su parte media poseen una dilatacin o bulbo; puede
tener uno o dos aforos y estn calibradas para un volumen fijo de lquido. No son
graduadas.

Micropipetas: Llevan este nombre pipetas de capacidad inferior al


mililitro. Se clasifican en manuales y automticas. Las primeras son
de vidrio, aforadas, se conectan a una manguera de goma con
boquilla para cargar por succin y descargar por soplado. Se debe
secar la parte de la punta que fue sumergida, ya que se trabaja con
volmenes tan pequeos que una gota que pudiera quedar (30-50l)
introducira un error considerable. Su uso fue desplazado por las
micropipetas automticas.
Las micropipetas automticas (dibujo) son calibradas en fbrica;
pueden ser de volumen fijo o regulable. Tienen dos posiciones, una
para la carga y otra para la descarga. Se usan con "tips" (picos de
plstico) descartables, uno para cada muestra. Tienen amplia
difusin por la practicidad, rapidez y exactitud en la medicin de
volmenes.

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Descripcin de materiales NO volumtricos


1) De vidrio
Pipeta Pasteur: Consisten en un tubo de vidrio o plstico no graduado ni
calibrado que consta de dos partes de diferentes dimetros (la inferior se
denomina capilar, por su delgadez). El extremo superior se conecta a una
pera de goma que se aprieta o deja expandir para expulsar o cargar el
lquido. Se fabrican con facilidad a partir de tubos de vidrio blandos.
Tubos de ensayo: Recipiente cilndrico con un extremo cerrado (convexo) y el otro con borde
redondeado o liso. Los hay de diferentes tamaos, cada uno de los cuales tiene nombres diferentes.
Los utilizados en el laboratorio de Bioqumica usualmente son de aproximadamente 18mm de
dimetro por 15cm de largo y hasta 20ml de capacidad. Deben tener relativa resistencia a los golpes
y al calor. Esto se puede comprobar dejndolo caer en forma vertical y con el extremo cerrado hacia
abajo a unos 5cm de la superficie dura, debiendo resistir el impacto. Para calentarlo, se lo coloca en
ngulo de 45 (sostenindolo con una pinza) y se expone a la llama su pared inferior movindolo
constantemente para evitar que se rompa y para un calentamiento homogneo. Si se debe llegar a la
ebullicin, no puede cargarse ms de dos tercios de su capacidad.

Embudo: De medidas variables, puede ser liso o estriado. Este ltimos se usan para filtracin con
conos de papel de filtro; las estras permiten la entrada de aire, lo que facilita el filtrado.

Ampolla de decantacin: Es un recipiente esfrico con un orificio superior para su llenado (con
un tapn). Por debajo se contina con un tubo al que se interpone un robinete o llave; este
mecanismo permite separar mezclas de dos o ms fases.

Balones: Recipiente esfrico sin base, con cuello cilndrico largo o corto (que en algunos casos
presenta una salida lateral para trabajos de destilacin). Se presenta con distintas capacidades;
necesita estar sujeto a un soporte y pueden ser utilizados para calentar sustancias o para
destilaciones.

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Erlenmeyer: Son recipientes de forma cnica, con vrtice superior terminado en un cuello corto y
una base plana. Se los utiliza para preparar y guardar soluciones.

Kitasato: Son similares a los anteriores, pero poseen una tubuladura lateral corta en la base del
cuello. Tienen paredes gruesas y muy resistentes y capacidad variable. Se pueden emplear para
filtrar al vaco.

Vidrio reloj: Vidrios en forma cncava. Pueden servir para depositar sustancias en pequeas
cantidades, mezclarlas o pesarlas y evaporar.

Cajas de Petri: Recipientes cilindrico de altura muy inferior a su dimetro. Constan de dos partes:
la caja propiamente dicha y la tapa que cubre a la caja (de igual forma pero mayor dimetro). Tiene
variada utilidad, pero es especialmente empleada para cultivos en microbiologa.

Vaso de precipitacin: Recipiente con el borde superior terminado en jarra. Tienen capacidad
variable y pueden ser lisos o graduados.

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Frascos goteros: Son frascos de plstico o vidrio grueso (generalmente oscuros), casi siempre de
capacidad inferior a los 100 ml. Los de vidrio tienen tapones de vidrio acanalados y terminados en
pico que permiten el goteo.

Frascos de reactivos: Similares a los anteriores pero pueden ser de mayor capacidad. Hay
oscuros (para reactivos sensibles a la luz) y claros, generalmente son de boca ancha y tienen
tapones de vidrio en forma de hongo (esmerilados).

Cpsula de porcelana: Recipiente similar al vidrio de reloj pero de mayor capacidad (y no es


de vidrio).Tambin se usa para evaporar sustancias.

Mortero: Consta de dos partes; un recipiente con relativa profundidad y grosor de sus paredes
(resistentes), que pueden ser de diferentes tamaos y un piln o mazo, que se utiliza para triturar
sustancias slidas por medio de presin o pequeos golpes, pueden ser de vidrio o porcelana

Desecadores: Los desecadores de vidrio tienen paredes gruesas y forma cilndrica, presentan
una tapa esmerilada que se ajusta hermticamente para evitar que penetre la humedad del medio
ambiente. En su parte interior tienen una placa o plato con orificios que vara en nmero y
tamao. Estos platos pueden ser de diferentes materiales como: porcelana o nucerite (combinacin
de cermica y metal).

2) Materiales de goma
Tapones: Existen de varios colores y tamaos, clasificados por nmeros cuyos dimetros
coinciden con los de tubos, balones, erlenmeyers, etc.

Tubuladuras: Tambin existen de variadas clases (de plstico, goma negra o roja opacas,
ltex transparente, mas o menos resistentes al calor, etc.). Se emplean como medio de conexin
al armar ciertos aparatos (como el de destilacin y filtrado al vaco), o tambin como tubuladura
de gas o agua. Su longitud y dimetro varan segn la necesidad; el dimetro se toma midiendo la
luz y se expresa en cm o subunidad de pulgada.

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Propipetas: Dispositivo que consiste en una pera de goma con 2 tubuladuras de salida. La
superior se utiliza para hacer ingresar o salir aire de la pera. La inferior contacta con la boquilla de
la pipeta y contiene una seccin transversal. Posee una vlvula que regula la entrada de lquido a
la pipeta y otra para descargarlo. Es un sistema muy ingenioso y simple que evita los accidentes
del operador por aspiracin del contenido de las pipetas y permite enrasar y descargar fcilmente.
Los pipeteadores son dispositivos o instrumentos para el trasvase o medicin de fluidos.

3) Materiales metlicos v de madera


Trpode y mantilla con amianto: El trpode consta de un sostn circular de hierro con tres
patas, utilizados para apoyar recipientes que sern calentados con un mechero. La mantilla es una
rejilla metlica cuadrada con un centro impregnado con amianto (silicato de calcio y magnesio)
que se interpone entre el recipiente a calentar y el mechero (sobre el trpode), as el calor se
distribuye en forma pareja.

Cepillos de cerda: Estn constituidos por dos trozos de alambre enroscados uno sobre el otro
entre los cuales se sostienen trocitos de cerda (en la porcin inferior) que se disponen en forma
espiral y perpendicular al alambre. Existen de diversos tamaos para poder ser introducidos en los
diferentes elementos de vidrio y efectuar una cmoda y adecuada limpieza.

Mechero de Bunsen: Tubo metlico por el cual circula gas que entra por una conexin lateral.
El gas se mezcla con aire que entra por dos orificios de la base, cuyo tamao puede ser regulado.
El uso ms frecuente que se dar al mechero es el calentamiento de tubos de ensayo; para ello se
usar una llama no mayor de 10 cm, en lo posible de color azulado para evitar el depsito de
carbn en las paredes del tubo.

Soportes universales: Estos elementos de hierro constan de una base rectangular plana y,
perpendicularmente inserto en ella, el soporte propiamente dicho. Este es un vstago de metal al
que se adosan pinzas que sujetan diversos materiales (buretas, balones, tubos refrigerantes, etc.)

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Pinzas de Bunsen: Tambin llamadas de "doble nuez". Sus dos extremos actan como pinzas.
De un lado se sujetan al soporte y por el otro se adecuan al recipiente a sostener. El ajuste se
efecta con tornillos mariposa o similares.

Pinzas de Mohr: Son llaves hechas de una varilla de metal doblada a la mitad de manera que
sus brazos se superponen y queda formado un ojal. Este se puede abrir presionando los extremos
de los brazos de la varilla para enhebrar un tubo de goma. La pinza sirve para cerrar o abrir a
voluntad la luz del tubo de goma.

Pinzas de madera: Son broches parecidos a los usados para sostener ropa, pero con un brazo
de mayor longitud para comodidad del operador. Tambin los hay de metal y para diferentes
dimetros de tubos. Se usan para sostenerlos durante el calentamiento.

Gradillas portatubos: Son de metal, madera, acrlico o alambre forrado en plstico. Consisten
en soportes con mltiples perforaciones de diferentes dimetros donde van insertos los tubos.
Mantenindolos en forma vertical. Algunas son para tubos de ensayo y otras para tubos de
hemlisis o Kahn.

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LABORATORIO N1
PROTEINAS
Introduccin: Los aminocidos son compuestos orgnicos con un grupo cido (carboxilo -COOH)
y un grupo bsico (amina -NH2), unido al carbono (carbono inmediato al carboxilo), es decir son
- aminocidos. Presentan actividad ptica (excepto la glicina) y la configuracin L es la de
mayor inters bioqumico.
Los aminocidos pueden establecer enlaces covalentes entre el grupo carboxilo de uno y el
grupo amina de otro, denominados uniones peptdicas, de tipo amida y que se producen con
prdida de agua. Los polmeros formados por hasta diez aminocidos unidos por uniones peptdicas
se llaman pptidos, los que poseen ms de 10 residuos de aminocidos pero menos de 50 se
denominan polipptidos y los que superan ese nmero se denominan protenas.
Las protenas son macromolculas formadas por un gran nmero de aminocidos. Poseen
una estructura muy compleja, por lo que se la describe en distintos niveles de organizacin:
- Estructura Primaria: se refiere al nmero e identidad de los aminocidos que componen la
molcula y al ordenamiento de estas unidades en la cadena polimrica (secuencia de aminocidos).
Las cadenas son lineales, no poseen ramificaciones por la naturaleza de la unin peptdica.
- Estructura Secundaria: es la disposicin espacial regular y repetitiva que adopta la cadena
polimrica. Puede ser -hlice, -lmina o lmina plegada, o bien disponer la cadena en una
estructura irregular, en tal caso se habla de una disposicin al azar. Estas estructuras se mantienen
unidas por puentes de hidrgeno.
- Estructura Terciaria: se refiere a la arquitectura tridimensional completa de una cadena de
resduos de aminocido. De acuerdo con la forma final se clasifican en globulares y fibrosas. Estas
conformaciones se mantienen unidas por fuerzas de atraccin o repulsin electrosttica, enlaces de
hidrgeno, presencia de cadenas hidrofbicas e hidroflicas y puentes disulfuro segn el tipo de
aminocidos que constituyan la molcula.
- Estructura Cuaternaria: es la disposicin espacial de las subunidades polipeptdicas
constituyentes de las protenas formadas por ms de una cadena polipeptdica o monmero
(protenas oligomricas, mero: parte). Las fuerzas responsables de mantener en posicin a las
diferentes subunidades son las mismas que en el caso anterior.
La secuencia de aminocidos de una protena es el principal determinante de su
conformacin espacial, propiedades y caractersticas funcionales. Los requerimientos estructurales
para que una protena cumpla su papel fisiolgico son muy rigurosos, no solo es necesario mantener
el nmero y tipo de aminocidos constituyentes, adems, cada uno de ellos debe ocupar una
posicin definida en la cadena. Alteraciones en ese ordenamiento o sustituciones de aminocidos
pueden afectar la capacidad funcional de la molcula hasta tornarla intil.
Cuando las protenas son sometidas a la accin de agentes fsicos como calor, agitacin
mecnica, radiaciones, etc., o agentes qumicos como cidos o lcalis fuertes, detergentes inicos,
agentes caotrpicos (urea, guanidina), solventes orgnicos, metales pesados, etc., pueden sufrir
alteraciones en su conformacin al modificarse las fuerzas que mantienen unidas las estructuras.
Esta desorganizacin estructural resulta en la prdida de las propiedades naturales y funcionalidad
de la protena. El proceso se denomina desnaturalizacin y se pierden las estructuras cuaternaria,
terciaria y secundaria de la protena, de modo irreversible en la mayora de los casos. La estructura
primaria no se ve afectada ya que los agentes desnaturalizantes no atacan la unin peptdica. Sin
embargo, experimentalmente se comprob que la desnaturalizacin proteica en algunos casos puede
ser reversible cuando los tratamientos desnaturalizantes no son tan drsticos. Las protenas
desnaturalizadas (ej. la clara de huevo calentada) son menos solubles y precipitan, pierden su
capacidad de cristalizar, tienen mayor reactividad qumica y son ms fcilmente atacadas por
enzimas.
1- Reaccin de Biuret
Fundamento: Los pptidos y protenas forman complejos de coordinacin con el in cprico
(Cu++). Cada ion Cu++ se liga a la cadena aminoacdica por 4 valencias de coordinacin aportadas
por pares electrnicos libres de tomos de nitrgeno (figura 1). Los iones Cu++ reaccionan tanto con

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los N de las uniones peptdicas (dando color rojo) como con los N de grupos amino libres (dando
color azul) lo que da por resultado un color violceo.
Utilidad: Esta reaccin es muy utilizada para poner en evidencia la presencia de polmeros de
aminocidos e incluso cuantificarlos en fluidos biolgicos (orina, sangre, lquido cefalorraqudeo,
etc.). La cuantificacin se basa en el hecho que los complejos coloreados absorben energa, de
modo que a mayor cantidad de complejo coloreado formado, mayor ser la cantidad de energa
absorbida. Esta energa, de una longitud de onda especfica (540nm) para cada compuesto, se puede
determinar utilizando un equipo de laboratorio.
O C

C O

HN

NH

R CH

HC R
Cu2+

O C

C O

HN

NH

R CH

HC R

Figura 1: Complejo de coordinacin entre Cu2+ y nitrgeno proteico


Materiales:
- Tubos de ensayos
- Pipetas
- Propipetas
- Bao termosttico
- Gradillas
Reactivos:
- Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en NaOH 875 mmol/l y alquil aril
politer (AAP)
- Agua destilada
- Muestra: suero
Procedimiento: Rotular tres tubos de ensayo: 1, 2 y 3 y proceder segn el siguiente esquema de
trabajo:
- Tubo1: 50 l de agua destilada + 3,5 ml del reactivo EDTA/Cu. (control negativo)
- Tubo2: 50 l de suero + 3,5 ml del reactivo EDTA/Cu.
- Tubo3: 50 l de suero diluido al medio con solucin fisiolgica + 3,5 ml del reactivo EDTA/Cu.
Mezclar por agitacin e incubar durante 15 minutos a 37C en bao termosttico. Observar los
colores generados en cada tubo y las intensidades.
Resultados:
- Tubo1: coloracin azul del reactivo EDTA/Cu.
- Tubo2: coloracin violeta intenso del complejo protena Cu.
- Tubo3: coloracin violeta plido del complejo protena Cu.
2- Prueba de Heller
Fundamento: Es una prueba especfica e importante por su facilidad de realizacin. Se fundamenta
en la accin desnaturalizante de un agente qumico (cido Ntrico: HNO3) sobre las protenas
presentes en una muestra, ponindose en evidencia el resultado por la disminucin de la estabilidad
de las mismas en disolucin, lo cual provoca su precipitacin.
Utilidad: Se trata de una prueba para la deteccin de protenas en orina utilizando cido ntrico
como reactivo. Los fluidos biolgicos poseen una cantidad de protenas que los caracterizan, por
ejemplo en el plasma de un individuo normal (caninos, felinos, equinos, etc.) en ayunas hay 68g/dL, pero en la orina no debera detectarse protenas, ya que durante el proceso de formacin de la
misma se realiza un filtrado de la sangre, siendo retenidas en el cuerpo evitando que se pierdan. Sin
embargo en determinadas situaciones fisiolgicas y patolgicas las protenas pueden aparecer en la
orina y por ello hay pruebas de laboratorio que permiten detectarlas.
Materiales:
- Tubos de ensayos
- Pipetas
-Propipetas
- Gradillas

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Reactivos:
- cido Ntrico concentrado
- Agua destilada
- Muestra: Orina
Procedimiento: Rotular tres tubos de ensayo con los nmeros 1 (control negativo), 2 (control
positivo) y 3 (Muestra problema). Colocar en el tubo 1, 4ml de agua destilada, en el tubo dos 4ml de
muestra control positivo y en el tubo 3, 4 ml de muestra problema. Inclinar los tubos a 45 sobre la
mesada y agregar a cada uno, lentamente por las paredes, 1 ml de cido ntrico concentrado.
Reservar los tubos en una gradilla y observar el resultado.
Resultado: La visualizacin de un anillo insoluble blanquecino en la zona de separacin de ambas
fases lquidas, pone en evidencia la presencia de protenas desnaturalizadas indicando positividad de
la prueba.
ENZIMAS
Introduccin: Las enzimas son catalizadores biolgicos en la mayora de los casos de naturaleza
proteica, ya que se ha descripto la actividad cataltica en molculas de ARN (Ribozimas), que
aumentan la velocidad de reacciones qumicas en seres vivos. Actan disminuyendo la energa de
activacin de la reaccin qumica.
Como todo catalizador, no se consume durante las reacciones que cataliza y a diferencia de los
catalizadores inorgnicos, son especficas para cada reaccin qumica y permiten que stas ocurran
en condiciones de temperatura, presin y pH compatibles con la vida.
Las enzimas se clasifican segn el tipo de reaccin que catalizan en seis grupos:
- oxidorreductasas
- transferasas
- hidrolasas
- liasas
- ligasas
- isomerasas
Estructuralmente, las enzimas poseen un sitio activo, que es la regin mediante la cual se une a su
sustrato. Esta regin posee una estructura tridimensional determinada por residuos de aminocidos
distribuidos espacialmente de manera precisa.
La actividad enzimtica puede modificarse al variar la concentracin enzimtica, concentracin del
sustrato, por accin de cambios de temperatura, pH y presencia de inhibidores entre otros.
1- Reaccin de Reconocimiento y Desnaturalizacin de Catalasa
Fundamento: La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos animales y
vegetales que posee la funcin de catalizar la hidrlisis de un producto txico que se genera durante
el metabolismo celular, el perxido de hidrgeno (H2O2) generando agua y oxgeno segn la
siguiente reaccin. Pertenece a la categora de las oxidorreductasas (EC1.11.1.6)

Utilidad: Realizaremos las siguientes pruebas para poner en evidencia la presencia de catalasa en
tejido animal (visualizando los productos finales de la reaccin que cataliza) y para destacar la
importancia de la estructura tridimensional de las enzimas para mantener su funcionalidad. La
existencia de catalasa en los tejidos animales, se aprovecha para utilizar el agua oxigenada como
desinfectante cuando se aplica sobre una herida. Como muchas de las bacterias patgenas son
anaerobias (no pueden vivir en presencia de oxgeno), mueren con el desprendimiento de oxgeno
que se produce cuando la catalasa de los tejidos acta sobre el agua oxigenada.
Materiales:
- Tubos de ensayos
- Pipetas
- Pinza
- Propipetas
- Gradillas
Reactivos:
- Perxido de Hidrgeno (Agua oxigenada)

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- Muestra: Tejido heptico de ave fresco y hervido previamente
Procedimiento: Rotular dos tubos de ensayo: 1 y
2. Introducir en el tubo 1 trocitos de hgado
fresco y en el 2 trocitos de tejido heptico
previamente hervido en agua.
Aadir a cada tubo 5 ml de agua oxigenada.
Observar

Figura 2: Esquema del procedimiento de la Reaccin


de Reconocimiento y Desnaturalizacin de Catalasa

Resultados: la observacin de burbujas se corresponde con la presencia de oxgeno, uno de los


subproductos de la reaccin. Dicha observacin correlaciona con la presencia de la enzima
funcional. La ausencia de burbujeo puede asociarse con prdida de funcionalidad enzimtica por
desnaturalizacin trmica de la catalasa.
ACIDOS NUCLEICOS
Introduccin: son sustancias del ms alto rango biolgico, a ellos se atribuyen importantes
funciones tales como ser reservorio de la informacin gentica y responsables de su transmisin de
una clula a otra clula hija o de una individuo a otro. Poseen un rol fundamental en el proceso de
sntesis proteica ya que dirigen el ensamblaje correcto de aminocidos.
Los cidos nucleicos, ADN y ARN son estructuras polimricas de doble y simple cadena
respectivamente. En el ADN el monmero constituyente recibe el nombre de desoxirribonucletido
mientras que para ARN, su denominacin es ribonucletido y qumicamente estn constituidos por
un azcar, una base nitrogenada (prica o pirimidica) y un grupo fosfato que al pH celular le
confiere cargas negativas. Al azcar se unen las bases nitrogenadas por enlace N-glicosdicos y los
grupos fostato por enlaces de tipo fosfoster. Luego cada nucletido se une a otro mediante enlaces
fosfodister establecidos entre el grupo fosfato de un nucletido con el oxhidrilo 3de otro. Se
genera de este modo una monohebra que se mantiene unida a otra cadena Complementaria por
enlaces Puente de hidrgeno, en el caso de ADN.
Electroforesis de ADN
La electroforesis es una tcnica empleada para separar molculas basndose en propiedades
como tamao, conformacin o carga elctrica. Consiste en utilizar una matriz o soporte semislido
con una estructura molecular porosa, a travs de la cual pueden migrar molculas de diferentes
tamaos cuando se aplica un campo elctrico, en un medio conductor de la corriente elctrica
(buffer de corrida). Las molculas ms pesadas migran ms lentamente que las ms livianas o de
menor tamao. Por tener las molculas de ADN y ARN cargas negativas, estas molculas se mueven
hacia el polo positivo del soporte semislido (agarosa en nuestro caso).
Las matrices que se utilizan son muy variadas y su eleccin depende de la finalidad de la
electroforesis. Una de las ms utilizadas es la compuesta por agarosa (polisacrido obtenido de
algas), polvo blanco, que se disuelve en un medio inico a altas temperaturas. A la agarosa disuelta,
en caliente, se le agrega un colorante que permita la visualizacin de las molculas separadas
(tradicionalmente, Bromuro de etidio) y luego se vierte en una plataforma cuadrada o rectangular
que contiene un dispositivo similar a un peine cuyos dientes servirn como impresin para generar
un hueco (pocillo) donde se depositarn las muestras a separar. Una vez solidificada la matriz con el

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colorante, se retira el peine con sumo cuidado. Se traslada el gel a la cuba de electroforesis que
contiene el buffer de corrida y se cargan (siembran) las muestras problemas en cada pocillo
generado. Antes de la siembra, se mezcla la muestra problema con un buffer de siembra que
contiene entre otros componentes, un colorante (en general azul de bromofenol) que posibilita la
visualizacin del cargado como as tambin el avance del frente de corrida. Se aplica un campo
elctrico y se espera a que la separacin ocurra.
Cuando se ha completado la electroforesis, se procede a la etapa de revelado mediante la
visualizacin por transiluminacin con luz UV, ya que el bromuro de etidio adems de intercalarse
entre las bases de los cidos nucleicos, emite una radiacin fluorescente al ser irradiado con luz
ultravioleta, observndose en caso positivo, bandas rojo- anaranjadas.
Si se siembran varias muestras una junto a otra en el gel, se producirn separaciones
paralelas, mostrando cada una bandas de distintos tamaos correspondientes a cada componente de
la mezcla. Si las separaciones son incompletas, se dar un solapamiento entre bandas haciendo
indistinguibles dos o ms componentes.
Existen marcadores especiales que contienen una mezcla de molculas de ADN de tamaos
conocidos, llamados marcadores de peso molecular, que se siembran en cada proceso de separacin
electrofortica con la finalidad de comparar las alturas de las bandas de dicho marcador con aquellas
provistas por las muestras problema para determinar su tamao.
1- Electroforesis de cido Desoxirribonucleico
Preparacin de Agarosa 1,5%
Pesar 1,5g de agarosa y agregar buffer TBE (EDTA, cido brico, tris) 1.0X hasta alcanzar un
volumen final de 100ml. Disolver la agarosa por calentamiento en microondas. Agregar 3l de
solucin de Bromuro de etidio (10mg/ml) y volcar sobre plataforma de acrlico con peine. Dejar
solidificar. Retirar el peine y disponer en cuba de electroforesis con buffer TBE 1.0x.
Siembra, Corrida y Revelado
Mezclar 2l de buffer de siembra (azul de bromofenol, glicerol y agua) y 10l de solucin de ADN.
Homogeneizar con pipeta automtica y sembrar en cada pocillo del gel preparado con anterioridad.
Correr a 100voltios durante 25minutos. Retirar el gel y observar el ADN por transiluminacin con
luz UV.

Foto 1: electroforesis en gel de agarosa

BIOSEGURIDAD DEL LABORATORIO N1


Riesgos qumicos:
ACIDO NITRICO: Ingestin: Corrosivo. Dolor abdominal, sensacin de quemazn, shock.
Inhalacin: Sensacin de quemazn, tos, dificultad respiratoria, prdida del conocimiento.
Piel: Puede causar severas quemaduras.
Ojos: Quemaduras graves e irritacin ocular.
PERXIDO DE HIDROGENO: El perxido de hidrgeno es muy irritante en concentraciones altas,
ya que causa quemaduras temporales al desprenderse en la reaccin el oxgeno.
La ingestin de soluciones diluidas de perxido de hidrgeno puede inducir vmitos, leve
irritacin gastrointestinal, distensin gstrica, y en raras ocasiones, erosiones o embolismo (bloqueo
de los vasos sanguneos por burbujas de aire) gastrointestinal. Ingerir soluciones de 10-20% de
concentracin produce sntomas similares, sin embargo, los tejidos expuestos pueden tambin sufrir

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quemaduras. Ingerir soluciones an ms concentradas, adems de lo mencionado anteriormente,
puede tambin producir rpida prdida del conocimiento seguido de parlisis respiratoria.
BROMURO DE ETIDIO: Es una sustancia fuertemente mutagnica y es irritante a los ojos, piel,
mucosas y el tracto respiratorio. Los efectos sanitarios de la exposicin a este compuesto no han
sido todava investigados profundamente. Se sospecha que puede ser cancergeno y teratognico por
su cualidad de mutagenicidad, aunque no hay ninguna prueba concluyente de ninguno de estos
efectos. Si se ingiere, se inhala o se absorbe por la piel, esta sustancia puede tener efectos nocivos.
Riesgo de Incendio: En estos laboratorios trabajaremos con mecheros de Bunsen por lo que
tendremos que tomar las medidas necesarias para evitar quemaduras e incendios.
Riesgo elctrico: Verificar las instalaciones elctricas as como el mantenimiento de los equipos
empleados. En estos laboratorios utilizaremos el bao termosttico.
Riesgos Biolgicos: TEJIDOS (hgado), SUERO Y ORINA: Siempre que se manipule material
biolgico se deben tomar ciertas precauciones como el uso de guantes, barbijos, antiparras,
guardapolvos o delantales y evitar ingestin y contacto con mucosas.

LABORATORIO N2
GLCIDOS
Introduccin: Los azcares son polihidroxialdehdos o polihidroxicetonas. El grupo carbonilo es un
grupo muy reactivo y forma hemiacetales al reaccionar con un grupo OH propio o de otra
molcula. En el caso de que la cadena del azcar sea lo suficientemente larga (4-6 tomos de
carbono), uno de los grupos hidroxilo de la misma molcula puede reaccionar con el grupo
carbonilo para formar un hemiacetal cclico, que se halla en equilibrio con la forma de aldehdo o de
cetona libre. Los grupos funcionales aldehdo y ceto libres o potencialmente libres (comprometidos
en la unin hemiacetlica) pueden oxidarse, reduciendo a diversas sustancias. Esta posibilidad es
utilizada para su caracterizacin en diferentes reacciones qumicas.

Los glcidos pueden clasificarse teniendo en cuenta varios aspectos:


Aldosas/ Cetosas: grupo funcional
Glcidos Tener el grupo funcional libre o comprometido: reductores o no reductores
Monosacridos/Disacridos/ Oligosacridos /Polisacridos: nmero de subunidades
monomricas que los constituyan
Homopolisacridos/ Heteropolisacridos: semejanzas entre sus constituyentes
Los diferentes grupos de glcidos poseen caractersticas estructurales propias y por lo tanto
comportamientos diferentes frente a distintos reactivos qumicos, lo cual posibilita que mediante
tcnicas de laboratorio y seleccionando analticamente las reacciones, se pueda conocer la
composicin de una muestra problema.
Por ejemplo si dispusiramos de una muestra incgnita que se presume contiene glcidos, siguiendo
una marcha analtica podramos descifrar frente a cual grupo de glcidos estamos presentes.
1- Molisch
Fundamento: Se basa en la accin hidrolizante y deshidratante del cido sulfrico sobre los
hidratos de carbono. En dicha reaccin el cido sulfrico cataliza la hidrlisis de los enlaces
glucosdicos de la muestra y la deshidratacin a furfural (en las pentosas) o hidroximetil furfural (en
las hexosas). Estos furfurales se condensan con el -Naftol del reactivo de Molisch, dando un
producto coloreado Violeta (Ver reacciones abajo). La reaccin es exotrmica, pues libera calor al
reaccionar.

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Utilidad: Diferenciar glcidos libres o combinados, de otros grupos moleculares como lpidos y
protenas. Para determinar la cantidad y naturaleza especfica del azcar es necesario recurrir a otras
pruebas.
Materiales:
-Tubos de ensayo
-Gradilla
-Pipetas
- Propipetas
-Pipetas Pasteur
-Bao termoesttico
- Pinzas de madera.
Reactivos:
-Muestra: Solucin al 5% de Hidratos de carbono y muestra problema -Agua destilada
-Reactivo de Molisch (-naftol al 5-10% en etanol)
-Acido Sulfrico (H2SO4) concentrado
Procedimiento: Rotular tres tubos de ensayo: 1, 2 y 3 y dispensar a cada uno 10ml de solucin 5%
de un hidrato de carbono conocido (glucosa), agua y solucin al 5% de la muestra problema
respectivamente. Aadir a cada tubo 2-3 gotas de reactivo de Molisch (-naftol al 5-10% en etanol,
preparado en el momento) y mezclar el contenido. Inclinar los tubos y dejar resbalar
cuidadosamente 1ml de cido sulfrico concentrado a lo largo de la pared del tubo de manera que
se forme una capa bajo la fase acuosa. A continuacin calentar los tubos en bao termosttico unos
minutos (60C durante 10 minutos).
Resultado: ante la presencia de glcidos, luego de unos instantes, aparece un disco color violeta en
el lmite de separacin entre ambos lquidos (Abajo: cido sulfrico)
2- Lugol
Fundamento: El reactivo de Lugol no reacciona qumicamente con los polisacridos, sino que
forma con ellos un complejo de inclusin termolbil (en fro) que se caracteriza por presentar
distintos colores segn las ramificaciones que presente la molcula de polisacrido.
Utilidad: Se utiliza como indicador para identificar polisacridos como los almidones, glucgeno y
ciertas dextrinas. El Lugol no reacciona con azcares simples como la glucosa o la fructosa.
Materiales:
- Tubos de ensayo
-Pipetas
-Propipetas
- Pipetas Pasteur
- Gradillas
Reactivo:
- Lugol: disolucin de yodo molecular I2 y yoduro potsico (KI) en agua destilada.
- Muestras: engrudo de almidn y solucin de glucosa 5% en agua
- Agua destilada
Procedimiento: rotular 3 tubos de ensayo, agregar a uno de ellos 3ml de engrudo de almidn, a otro
3ml de solucin de glucosa al 5% y al otro 3ml de agua, agregar unas gotas de Lugol. Observar.
Resultado: Aparicin de un color azul intenso o violeta: indicativo de presencia de almidn.

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Aparicin de color rojo-violeta: indicativo de existencia de dextrinas
Ausencia de color (con Molisch positivo): Presencia de mono o disacridos
3-Reaccin de Fehling: El reactivo de Fehling es un reactivo moderadamente oxidante, que
consiste en dos soluciones acuosas llamadas Fehling A y Fehling B. Ambas se guardan separadas
hasta el momento de su uso para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre (II). Al mezclar
cantidades iguales de las dos soluciones, se forma un complejo soluble de tartrato cprico, de
color oscuro, el cual proporciona una pequea cantidad de iones Cprico (Cu2+).
El hidrxido de sodio y el tartrato que contiene el reactivo, actan como quelantes (secuetradores) y
son empleados para evitar que el ion cprico precipite como hidrxido cprico e interfiera en la
reaccin (Ver imagen inferior)

El tartrato no pude formar complejos con el in cuproso (I) de manera que la reduccin del ion
cprico a cuproso al reaccionar con los carbohidratos, provoca la formacin de un precipitado rojo
ladrillo, procedente del xido cuproso cuando la reaccin es positiva.
Las cetosas tambin dan positiva la reaccin de Fehling, ya que en condiciones bsicas tautomerizan
a aldosas debido a un equilibrio ceto-enlico, catalizado por el medio bsico (NaOH) y la adicin de
energa (Calor). As, la fructosa isomeriza a glucosa y manosa.
Fundamento: El ensayo se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehdo.
ste se oxida a un cido carboxlico y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido cuproso,
que forma un precipitado de color rojo ladrillo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la
forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si
un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor.
Utilidad: se utiliza para identificar azcares reductores (galactosa, glucosa, lactosa, levulosa,
maltosa, pentosas).
Materiales:
- Tubos de ensayo
-Gradillas
-Pipetas
-Bao termosttico o mechero
-Propipetas
Reactivo:
- Agua destilada
- Reactivo de Fehling A:
- Sulfato cprico cristalizado (azul): 35g
- Acido Sulfrico concentrado: 5ml
- Agua destilada: hasta 1000ml.
- Reactivo de Fehling B:
- Sal de Seignette o de Rochelle (tartrato mixto de potasio y sodio): 150g
- Solucin de hidrxido de sodio al 40%: 5ml
- Agua Destilada: hasta 1000ml.
- Muestra: engrudo de almidn y solucin de glucosa 5% en agua
.
Procedimiento: Rotular tres tubos de ensayo y agregar a cada uno de ellos 1 ml de reactivo de
Fehling (A+B). Dispensar al primero de ellos 2ml de solucin de glucosa 5% en agua, al segundo,
2ml de engrudo de almidn y al ltimo 2ml de agua. Calentar suavemente (BM o Fuego directo)
(40C durante 10 minutos). Observar
Resultado: Se observar aparicin de precipitado color rojo-ladrillo en presencia de glcidos
reductores.

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Inicio de la reaccin

Lquido azul

si da positivo:

ejemplos (dos positivos y uno


negativo)

Lquido rojo

LPIDOS
Introduccin: Los lpidos estn ampliamente distribuidos en animales y vegetales, comprenden un
grupo heterogneo de sustancias que se caracterizan por su escasa o nula solubilidad en agua y su
solubilidad en solventes orgnicos. En agua forman emulsiones, que son dispersiones inestables de
una fase dispersa (de menor volumen) en una fase dispersante (de mayor volumen).
No forman estructuras polimricas como los polipptidos y polisacridos.
Son de fundamental importancia desde el punto de vista biolgico, ya que
constituyen parte fundamental de las membranas celulares, forman parte de las reservas energticas
(grasas neutras), actan como vehculo de vitaminas liposolubles y se relacionan con numerosas
molculas con acciones fisiolgicas diversas como hormonas, vitaminas, cidos biliares, etc., como
aislante trmico entre otras funciones.
De acuerdo a la complejidad de sus molculas se clasifican en lpidos simples
(acilgliceroles y ceras) y complejos (fosfolpidos, glicolpidos y lipoprotenas), como as tambin se
describen sustancias asociadas a lpidos tales como esteroles, terpenos, vitaminas liposolubles, etc.
En la molcula de casi todos los lpidos se encuentran cidos orgnicos monocarboxlicos
denominados genricamente cidos grasos y se utiliza esta caracterstica para clasificar a los lpidos
en dos grupos, atendiendo a que posean en su composicin cidos grasos (lpidos saponificables) o
no los posean (lpidos insaponificables).
Lpidos saponificables
- Simples. Son los que contienen carbono, hidrgeno y oxgeno.
Acilglicridos. Son steres de cidos grasos con glicerol. Cuando son slidos se les
llama grasas y cuando son lquidos a temperatura ambiente se llaman aceites.
Cridos (ceras): son esteres de alcoholes y cidos grasos de cadena larga
- Complejos. Son los lpidos que, adems de contener en su molcula carbono, hidrgeno y
oxgeno, contienen otros elementos como nitrgeno, fsforo, azufre u otra biomolcula
como un glcido. Son abundantes como constituyentes de membranas (Fosfolpidos,
Glucolpidos).
Lpidos insaponificables: Terpenoides, Esteroides, Prostaglandinas
1- Solubilidad. Formacin de Emulsiones
Fundamento: Los lpidos son insolubles en agua y pueden formar emulsiones inestables con ella.
Una emulsin es una mezcla transitoria de dos sustancias no miscibles entre s. Cuando sustancias
lipdicas se agitan fuertemente en medio acuoso se dividen en pequesimas gotas formando una
emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupacin de las
gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua.
Utilidad: El objetivo del presente trabajo prctico consiste en poner en evidencia algunas
propiedades de lpidos relacionadas a su estructura, por ejemplo la solubilidad en solventes
orgnicos e insolubilidad en solventes acuosos, mediante la formacin de emulsiones.
Materiales:

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- Tubos de ensayo
-Pipetas
-Propipetas
- Gradillas
Reactivo:
- ter o Cloroformo
- Muestras: Aceite
- Agua destilada
Procedimiento: Rotular dos tubos de ensayo, colocar 2ml de aceite en cada uno. Aadir a uno de
ellos 5ml de agua y al otro 5ml de ter o cloroformo. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar
reposar. Observar.
Resultados: Se observar que el aceite se ha disuelto en el ter formando una nica fase y en
cambio no lo hace si la fase dispersante es agua (el aceite subir debido a su menor densidad). En
este ltimo caso se forma una solucin de aspecto lechoso que luego de reposar unos minutos a
temperatura ambiente sobre la mesada se separa en dos fases inmiscibles entre s.
2- Saponificacin: Es la hidrlisis termo alcalina de una grasa o aceite, obtenindose como
resultado jabones. Los jabones poseen un extremo hidrfobo (cadena carbonada) y un extremo
hidrfilo (dado por el extremo polar), esto le permite interactuar entre molculas que no son solubles
entre s estabilizando la emulsin que han formado.

Fundamento: En esta reaccin los cidos grasos se separan del alcohol al que estn esterificados
(glicerol o esfingol) y se forman sus sales que pueden ser de sodio o potasio, dependiendo de la base
que se utilice. Los jabones poseen una porcin polar y otra no polar, y por ser molculas anfipticas
poseen la particularidad de tener accin emulsificante y por tanto accin limpiadora.
Utilidad: poner en evidencia propiedades qumicas de las grasas, atribuibles al grupo carboxilo de
los cidos grasos. Cuando una cido graso reacciona en medio alcalino, forman sales llamadas
jabones.
Materiales:
- Tubos de ensayo
-Pipetas
-Propipetas
- Bao termosttico
- Gradillas
-Pinzas de Madera
Reactivo:
- Etanol
- Hidrxido de sodio o potasio
- Agua destilada
- Muestras: grasa
Procedimiento: Colocar en un tubo de ensayo de vidrio un trocito de grasa y solubilizarla con 5ml
de etanol. Agregar 5ml de NaOH o KOH al 40% (en agua destilada). Llevar a ebullicin en bao
termosttico durante 15 minutos, agitando regularmente. Dejar enfriar y comprobar las propiedades
jabonosas y formacin de espuma del producto obtenido.
Resultado: cuando se forman jabones (sales de acidos grasos y metales alcalinos como Na o K), tras
la hidrlisis termoalcalina, al agitar el tubo de ensayo se genera espuma.

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BIOSEGURIDAD DEL LABORATORIO N2
Riesgos qumicos:
ACIDO SULFURICO: La preparacin de una disolucin de cido puede resultar peligrosa por el
calor generado en el proceso. Es vital que el cido concentrado sea aadido al agua (y no al revs)
para aprovechar la alta capacidad calorfica del agua. En caso de aadir agua al cido concentrado,
pueden producirse salpicaduras de cido.
ALCOHOL ETLICO: La ingestin del etanol puede afectar al sistema nervioso central,
provocando estados de euforia, desinhibicin, mareos, somnolencia, confusin (alguno habr
sentido sus efectos el fin de semana). Al mismo tiempo, baja los reflejos.
HIDROXIDO DE SODIO: Ingestin: puede causar daos graves y permanentes al sistema
gastrointestinal. Inhalacin: Irritacin con pequeas exposiciones, puede ser daino o mortal en altas
dosis. Piel: Peligroso. Los sntomas van desde irritaciones leves hasta lceras graves.
Ojos: Peligroso. Puede causar quemaduras, daos a la crnea o conjuntiva.
Riesgos biolgicos, Riesgos elctricos y Riesgos de incendios: idem laboratorios anteriores.

LABORATORIO N3
METABOLISMO DE LPIDOS
Introduccin: La insulina es una hormona proteica que permite el ingreso de glucosa a las clulas
para poder ser utilizada como fuente de energa. Durante la inanicin o en determinados trastornos
metablicos en los cuales no hay suficiente insulina o hay prdida de funcionalidad de la misma, la
clula no puede utilizar glucosa, catabolizando grasas en su lugar. A medida que aumenta el
metabolismo de las grasas para generar energa, se forman molculas llamadas cuerpos cetnicos,
que son cetocidos (cetonas y cidos carboxlicos) que se acumulan en sangre y orina y que resultan
txicos en altos niveles (Acetona, acetoacetato y -hidroxibutirato).

1- Caracterizacin de cuerpos cetnicos en orina: La deteccin de cuerpos cetnicos se realiza


habitualmente mediante la utilizacin de tiras reactivas. Estas consisten en una cinta de
material plstico o papel, de aproximadamente 5mm de ancho. Las cintas de material plstico
constan de unas almohadillas impregnadas de sustancias qumicas (Ejemplo: Nitroprusiato de sodio
para la deteccin de cetocidos) que reaccionan con los compuestos presentes en la orina
produciendo un color caracterstico. En las cintas de papel, los reactivos se encuentran adsorbidos
directamente sobre la misma. Estas ltimas frecuentemente son especficas para una nica reaccin
(por ejemplo medicin de pH), mientras que las cintas con almohadillas permiten realizar varias
determinaciones simultneamente. Existen tiras reactivas con diferentes objetivos, algunas
son cualitativas y solo determinan si la muestra es positiva o negativa para un metabolito de inters
y otras son semicuantitativas, adems de brindar una reaccin positiva o negativa aproximan un
resultado cuantitativo; en estas ltimas las reacciones de color son aproximadamente proporcionales
a la concentracin de sustancia presente en la muestra. La lectura de los resultados se realiza
comparando los colores obtenidos con una escala de colores provista por el fabricante, no
necesitando de aparatos adicionales. La prueba se puede leer a partir de los pocos segundos y hasta
30 minutos despus de la inmersin de la tira en la muestra de orina (dependiendo de la marca del
producto que se est utilizando). Se pueden informar valores semicuantitativos, expresados
usualmente como trazas, 1+, 2+, 3+ y 4+.

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Fundamentos (Tiras reactivas Urine Strip 10): En esta reaccin el cido acetoactico en medio
alcalino reacciona con el nitroprusiato (nitroferricianuro) de sodio y sulfato de magnesio para
producir un complejo de color magenta. El color resultante vara desde tostado cuando no hay
reaccin, a distintos tonos de purpura para reacciones positivas. La prueba no detecta cido
hidroxibutrico, y es solo dbilmente sensible a acetona cuando se adiciona glicina a la reaccin, sin
embargo como estos compuestos provienen del cido acetoactico, puede presuponerse su existencia
y no es necesaria una demostracin selectiva. Las medicaciones que contienen grupos sulfhidirlo,
tales como el mercaptoetanol y la levodopa u otras sustancias que colorean la orina, pueden dar
resultados atpicos. En muestras conservadas inadecuadamente puede ocurrir una disminucin falsa
de los valores debido a volatilizacin y degradacin bacteriana.
Utilidad: Por lo general en la orina no aparecen cantidades cuantificables de cetonas pues todas
estas sustancias se metabolizan completamente para producir energa, dixido de carbono y agua.
Sin embargo en determinadas condiciones fisiolgicas como lactancia o cuando el metabolismo de
los hidratos de carbono se encuentra alterado, se producen desbalances metablicos que conducen a
la aparicin de cetonas en orina como producto del metabolismo de las reservas grasas del
organismo.
Materiales:
- Vidrio de reloj o caja de Petri
-Pipetas Pasteur
Reactivo:
- Tiras reactivas Urine Strip 10
- Agua destilada
- Muestras: orina
Procedimiento: se dispondr de 3 tubos o frascos con muestras de orina de pacientes. Con pipeta
Pasteur aspirar aproximadamente 1-2ml de cada muestra de orina problema y dispensar sobre una
tira reactiva (sobre un vidrio de reloj o caja de Petri) para cada muestra. Esperar el tiempo indicado
por el fabricante y comparar la tira con la imagen de referencia presente en el envase comercial de
las mismas. Repetir la operacin utilizando agua en lugar de muestra. Observar.
Resultado: se compararn las intensidades de colores obtenidas para cada muestra con los valores
de referencia provistos por el fabricante.

HORMONAS
El sistema endcrino est constituido por una gran diversidad de clulas, agrupadas en glndulas o
dispersas en diferentes tejidos que elaboran y secretan productos activos. En muchos casos estos
productos se denominan hormonas y se vierten a la circulacin en respuesta a estmulos especficos,
llegando as a clulas efectoras (blanco, target o diana) en las cuales producen un efecto
determinado. Tambin secretan sustancias que no llegan a la sangre, sino que actan sobre la misma
clula de origen o sobre clulas contiguas, llamndose efectos autcrinos y parcrinos
respectivamente.
De acuerdo a la naturaleza qumica, las hormonas pueden clasificarse en cinco grupos:
- Esteroideas: derivan del colesterol y debido a su naturaleza poco polar, estas hormonas
atraviesan fcilmente la membrana celular. Ejemplos: glucocorticoides, hormonas sexuales.

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- Derivadas de aminocidos: Ejemplos: Adrenalina y Noradrenalina derivadas de la mdula
suprarrenal y Hormonas tiroideas. Las primeras son hormonas solubles en agua y no penetran las
clulas blanco y las segundas son poco solubles en agua y atraviesan la membrana por difusin.
- Derivadas de cidos grasos: Ejemplos: prostaglandinas, tromboxanos y leucotrienos. Se originan
de cidos grasos poliinsaturados. Sus acciones primarias son de tipo autcrinas y parcrinas
- Pptidos: Ejemplos: Factores reguladores hipotalmicos, oxitocina, glucagn, etc.
- Protenas: Ejemplo: insulina, prolactina, tirotrofina, etc. Las hormonas proteicas y peptdicas son
sintetizadas por ribosomas asociadas al retculo endoplasmtico rugoso (RER). Estas hormonas se
almacenan en vesculas intracelulares y son liberadas por exocitosis, son solubles en medio acuoso y
en su mayora circulan libres en sangre.
Acciones hormonales de regulacin de la Glucemia
Los niveles de glucemia (Glucosa en sangre) son mantenidos en un rango estrecho de variacin,
debido a la accin concertada de un sistema multihormonal de regulacin. Existen permanentemente
procesos que tienden a disminuir los valores de glucemia y otros que tienden a aumentarlos, estando
ambos procesos en equilibrio en estado de salud.
Son procesos Hipoglucemiantes:
- Facilitacin del ingreso de glucosa a las clulas
- Estimulacin de la glucogenognesis
- Estimulacin de las vas de degradacin de glucosa (gluclisis, va de las pentosas)
- Conversin de glucosa en otro tipo de compuestos (Ejemplo: en cidos grasos)
La insulina es el principal factor hipoglucemiante y todos los procesos que operan en este sentido
son activados por esta hormona.
Son procesos Hiperglucemiantes:
- Glucogenlisis heptica
- Gluconeognesis
- Absorcin de glucosa intestinal.
El glucagn, entre otras acciones, activa la glucogenlisis heptica y la gluconeognesis. La
adrenalina activa la glucogenlisis muscular y heptica, pero solo el hgado libera glucosa a la
circulacin para aumentar la glucemia. El cortisol aumenta la gluconeognesis en hgado y
disminuye la utilizacin de glucosa en tejidos extrahepticos. La hormona del crecimiento
disminuye el ingreso de glucosa al msculo y la utilizacin de glucosa en general.
1- Determinacin de glucosa en orina con tiras reactivas
Fundamentos (Tiras reactivas Urine Strip 10): En esta reaccin la glucosa se transforma
secuencialmente por reacciones enzimticas. Primero la glucosa oxidasa cataliza su oxidacin a
acido glucnico y perxido de hidrogeno. Luego, la peroxidasa cataliza la reaccin del perxido de
hidrogeno con ioduro de potasio formndose productos coloreados que van desde celeste verdoso a
marrn verdoso intermedio y marrn.
Utilidad: Por lo general en la orina no aparecen cantidades cuantificables de glucosa, pero en
determinadas situaciones, por ejemplo: cuando el nivel de este azcar aumenta en sangre, podra
detectarse en muestras de orina. Por lo tanto su deteccin en orina y su cuantificacin en sangre,
pueden ser informativas para orientar al mdico veterinario en la bsqueda de la causa de la afeccin
presentada por un paciente.
Materiales:
- Vidrio de reloj o caja de Petri
-Pipetas Pasteur
Reactivos:
- Tiras reactivas Urine Strip 10.
- Agua destilada
- Muestras: orina
Procedimiento: se dispondr de 3 tubos o frascos con muestras de orina de pacientes. Con pipeta
Pasteur aspirar aproximadamente 1-2ml de cada muestra de orina problema y dispensar sobre una
tira reactiva (sobre un vidrio de reloj o caja de Petri) para cada muestra. Esperar el tiempo indicado

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por el fabricante y comparar la tira con la imagen de referencia presente en el envase comercial de
las mismas.
Resultado: se compararn las intensidades de colores obtenidas para cada muestra con los valores
de referencia provistos por el fabricante.

VITAMINAS
Introduccin: Las vitaminas son compuestos orgnicos de estructura qumica relativamente simple
y variada. La mayora de las vitaminas esenciales no pueden ser sintetizadas por el organismo, por
lo que ste no puede obtenerlas ms que a travs de la ingesta equilibrada de alimentos naturales.
Las vitaminas son compuestos qumicos que junto con otros elementos nutricionales actan como
catalizadoras de todos los procesos fisiolgicos y no poseen funciones plsticas o energticas, pero
son esenciales para mantener la salud y el buen funcionamiento corporal. De acuerdo a la
solubilidad se las puede clasificar en liposolubles (A, D, E y K) e hidrosolubles (B y C).
* Vitaminas liposolubles: a este grupo pertenecen: el Retinol o Vitamina A (antixeroftlmica), los
Colecalciferoles o Vitamina D (antirraqutica), los Tocoferoles o vitamina E (antioxidante), y la
Vitamina K (antihemorrgica).
Generalidades:
- Son molculas hidrfobas.
- Solo pueden absorberse con eficiencia si la absorcin de lpidos es normal
- Su transporte en sangre se realiza por unin a lipoprotenas o protenas fijadoras especficas.
- Qumicamente se trata de lpidos insaponificables, caracterizados por su incapacidad para
formar jabones; ya que carecen en sus molculas de cidos grasos unidos mediante enlaces ster.
Las mismas son poco alterables y el organismo puede almacenarlas como reserva, su carencia
estara basada en malos hbitos alimentarios o en falta de exposicin a la luz solar.
* Vitaminas hidrosolubles: a este grupo pertenecen: el Complejo B y la Vitamina C o cido
Ascrbico.
Generalidades:
-Debido a su solubilidad en agua, sus excesos se excretan por orina.
-Rara vez se acumulan en concentraciones txicas.
-Su almacenamiento es limitado (excepto cobalamina), por lo que deben recibirse con
regularidad.
1- Determinacin del poder reductor de cido Ascrbico (Vitamina C): La vitamina C
pertenece al grupo de las hidrosolubles, permitiendo eliminar sus excesos del organismo a travs de
la orina. Su almacenamiento es limitado, por lo que debe recibirse un aporte con regularidad. Se
encuentra en ctricos, hortalizas y leche vacuna. Participa en la sntesis de colgeno y la formacin
de matriz extracelular. Es antioxidante y participa en procesos de defensa contra agentes infecciosos.
Qumicamente, el cido ascrbico se relaciona con las hexosas, solo que a diferencia de los glcidos
metabolizables en el organismo, es la conformacin L de la vitamina la biolgicamente activa. Es un
cido dbil y un enrgico reductor que cede dos de sus hidrgenos con suma facilidad generando
como producto cido deshidroascrbico, el cual es inestable en medio alcalino y se oxida
irreversiblemente en forma espontnea incorporando agua y generando 2,3-diceto-L-Gluconato.

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Utilidad: La capacidad del cido ascrbico de poder reducir (oxidndose) a otras sustancias se
puede utilizar en el laboratorio para su identificacin. El poder reductor se puede poner en evidencia
mediante la reaccin de Fehling o de modo indirecto, mediante la reaccin de Lugol.
1-a Reaccin de Fehling
Fundamentos: Ver Laboratorio N 2
En esta reaccin se pone en evidencia el poder reductor del acido ascrbico, mediante la reduccin
del catin cprico a cuproso y la precipitacin del mismo como xido cuproso color rojo ladrillo.

+ Cu2+
In Cprico

cido L ascrbico

+ Cu2O
Oxido cuproso
(Rojo Ladrillo)
cido L Deshidroascrbico

Materiales:
- Tubos de ensayo
-Gradillas
-Pipetas
-Mechero
-Propipetas
-Pinzas de Madera
Reactivos:
- Agua destilada
- Reactivo de Fehling A:
- Sulfato cprico cristalizado (azul): 35g
- Acido Sulfrico concentrado: 5ml
- Agua destilada: hasta 1000ml.
- Reactivo de Fehling B:
- Sal de Seignette o de Rochelle (tartrato mixto de potasio y sodio): 150g
- Solucin de hidrxido de sodio al 40%: 5ml
- Agua Destilada: hasta 1000ml.
- Muestra: solucin de Vitamina C y Jugo de naranjas.
Procedimiento: Rotular tres tubos de ensayo: M (muestra), P (positivo) y N (Negativo). Colocar en
cada tubo 1 ml de solucin Fehling A y 1 ml de solucin Fehling B. Estas soluciones se mezclan en
volmenes iguales al momento de su uso.
Agregar al tubo rotulado M, 2 ml de jugo de naranja en solucin acuosa, al rotulado P igual volumen
de suspensin de Vitamina C en agua y al tubo N, igual volumen de agua. Calentar a fuego directo,
flameando el tubo evitando que entre en ebullicin. Observar el resultado

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Resultado: se observa un precipitado color rojo ladrillo de xido cuproso cuando existen en el
medio sustancias reductoras, como el cido L ascrbico.
(*) Antes de utilizar el reactivo de Fehling, se debe controlar que est en buenas condiciones, porque
los reactivos viejos se reducen solos. Entonces, colocar en un tubo de ensayo una parte del reactivo
y cuatro de agua destilada, llevar a ebullicin durante medio minuto. Si el lquido permanece azul, el
reactivo est en buenas condiciones.
1-b Reaccin de Lugol
Fundamentos: Esta prctica se basa en la reaccin clsica del yodo con almidn. El almidn como
se estudi en el captulo correspondiente a glcidos es un homopolisacrido de origen vegetal que
est compuesto por dos polmeros distintos de glucosa; amilosa y amilopectina. El componente
macromolecular amilosa tiene forma helicoidal y es capaz de formar un complejo de coloracin azul
violcea con el yodo. Al reaccionar el complejo coloreado yodo-amilosa (solucin indicadora) con
el cido L- ascrbico presente en los jugos de los ctricos o con la vitamina C obtenida de un
producto comercial, la solucin indicadora pierde el color. Esto se debe a que la vitamina C es
oxidada por un oxidante suave como la solucin de yodo para dar lugar al cido deshidroascrbico y
a iones yoduro. De esta forma el almidn, que se tornaba violceo en presencia de yodo, se vuelve
incoloro en contacto con yoduro.

+ I3

cido L- ascrbico
Materiales
Tubos de ensayo
Pipetas.
Pro-pipetas.
Gradillas porta tubos.

+ 2H+ + 3Icido deshidroascrbico

Vasos de precipitado.
Goteros.
Bao termosttico

Reactivos
Solucin Indicadora
Agua destilada
Jugos de ctricos como fuente de vitamina C
Suspensin de vitamina C comercial en agua
Procedimiento: Previamente se prepar una solucin indicadora del contenido de vitamina C,
consistente en un complejo coloreado constituido por almidn y yodo (solucin de Lugol). Para ello
se disolvi almidn con suficiente agua y se agreg solucin de Lugol (Yodo, KI en agua) hasta
observar un color azul violceo.

Solucin indicadora

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Luego, para poner en evidencia el poder reductor de la vitamina C, se rotularon tres tubos de ensayo
M (muestra), P (positivo) y N (Negativo). A cada tubo se agregaron 5ml de la solucin indicadora
junto con 10 gotas de jugo de ctrico al tubo M, 10 gotas de suspensin de Vitamina C al tubo P y 10
gotas de agua destilada al tubo N, agitar suavemente cada uno de los tubos para luego comparar la
coloracin de la mezcla frente a un fondo blanco organizndolos en orden de color (del ms claro al
ms oscuro).
Resultados: La coloracin menos intensa o ms clara, hace referencia a un mayor contenido de
vitamina C en la muestra. La razn es porque la vitamina hace que la solucin indicadora pierda el
color.

Tubos de ensayo conteniendo


solucin indicadora

Tubos de ensayo en los que se


observan los resultados de la prueba

BIOSEGURIDAD DEL LABORATORIO N3


Riesgos biolgicos, Riesgos elctricos y Riesgos de incendios: idem laboratorios anteriores.

LABORATORIO N4
LABORATORIO DE LA DIGESTION DE MONOGASTRICOS, AVES Y
RUMIANTES
Los animales monogstricos poseen tubos digestivos adaptados a las dietas que consumen.
As, un carnvoro (que ingiere alimentos fcilmente digestibles con las enzimas que secreta)
tiene un tracto digestivo ms corto que un omnvoro o un herbvoro. Estos ltimos poseen
en el intestino grueso regiones colonizadas por grmenes fermentadores. Las aves poseen
para este fin dos ciegos. Los lugares donde se digieren en mayor proporcin los alimentos
son el estmago (en el caso de las aves son dos: glandular y muscular) y el intestino
delgado, donde se vierten enzimas pancreticas, intestinales y la bilis, para digerir los
distintos sustratos (glcidos, lpidos y protenas): pepsina, tripsina, quimotripsina, amilasa,
lipasa, carboxi y aminopeptidasas, etc.
Los rumiantes se caracterizan por su capacidad para alimentarse de pasto o forraje. Esta
caracterstica se basa en la posibilidad de poder degradar los hidratos de carbono
estructurales del forraje que son muy poco digestibles para las especies de estmago simple
o no-rumiantes por no producir Beta-glucosidasas. La degradacin del alimento se realiza
mayoritariamente por digestin fermentativa (no por accin de enzimas digestivas
secretadas por el rumiante) llevada a cabo por diferentes tipos de microorganismos
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(bacterias, protozoos y hongos) a los que el rumiante aloja en sus divertculos


estomacales. Al alimentar a los rumiantes, se alimenta indirectamente a los
microorganismos ruminales, los que para un buen desarrollo requieren un medio favorable.
De esta forma hay una simbiosis entre los grmenes y el animal. Aunque existen otros
microorganismos en el rumen, las bacterias representan la fraccin de la poblacin ruminal
imprescindible para la vida del rumiante. Si bien existe una amplia variedad y alternativas
para clasificarlas, resulta til agruparlas en base a los sustratos que emplean para nutrirse y
a los productos finales de su fermentacin, por ej.:
Celulolticas: fermentan hidratos de carbono estructurales de la pared celular
(celulosa, hemicelulosa y pectinas) produciendo AGV (especialmente acetato)
Amilolticas: fermentan hidratos de carbono de reserva de los granos (almidn)
produciendo AGV (especialmente propionato)
Proteolticas: degradan las protenas produciendo AGV y amonaco (NH3)
El tipo de hidrato de carbono predominante en la dieta condiciona el desarrollo (aumento de
la poblacin) del tipo de flora adecuada para su fermentacin y el ajuste del pH a su rango
ideal. As, una racin rica en almidn es fermentada por una flora amiloltica que
desarrolla mejor a un pH de 5,5 a 6,0; mientras que una racin compuesta por forraje con
alto contenido de hidratos de carbono estructurales (celulosa, hemicelulosa y pectinas) ser
fermentada por una flora celuloltica que desarrolla mejor a pH de 6 a 6,9 (ms alcalino).
1-Hidrlisis del almidn. La degradacin del almidn se produce in vivo por accin de
enzimas hidrolticas del tubo digestivo. Los animales monogstricos poseen amilasas (alfa 1-4 glucosidasas), dextrinasas y disacaridasas, capaces de fragmentar el almidn,
glucgeno, maltosa e isomaltosa, hasta glucosa.
Fundamentos: In Vitro se puede lograr la degradacin no enzimtica (cida en caliente) del
almidn, obtenindose progresivamente molculas intermedias, de pesos moleculares cada
vez menores, segn el siguiente esquema.
Almidn

almidn soluble

amilodextrinas

maltosa

acrodextrinas

glucosa

Dichos productos de digestin pueden ponerse en evidencia mediante la reaccin de Lugol


Utilidad: poner en prctica una reaccin qumica in vitro (comparable a la digestin
enzimtica in vivo) para asociar la coloracin obtenida como punto final de la reaccin con
el grado de digestin de almidn producida.
Materiales:
- Tubos de ensayo
-Pipetas
-Propipetas
- Pipetas Pasteur
- Gradillas
Reactivo:
- Lugol: disolucin de yodo molecular I2 y yoduro potsico (KI) en agua destilada.
- Muestras: engrudo de almidn
- Agua destilada
- HCl

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Procedimiento: Rotular 12 tubos de ensayo y colocar 1 gota de solucin de Lugol a cada


uno de ellos. Luego, en un vaso de precipitado con 750 ml de agua hirviendo (bao
termosttico), se prepara como sustrato de la reaccin de Lugol una solucin de almidn al
5% + 2 ml de HCl (previamente mezclados) en un tubo de ensayo. Posteriormente se toman
del fondo del recipiente muestras de sustrato a intervalos de 2 minutos y se depositan en
cada uno de los 12 tubos con solucin de Lugol. Este procedimiento debe repetirse hasta
que la coloracin obtenida con Lugol mas la muestra permanezca uniformemente amarilla.
Luego se agrega a todos los tubos 10 ml de agua y se separan los que tengan colores
netamente diferenciales a simple vista.
Resultados: se obtendr la siguiente escala y resultados asociando la presente prueba con la
reaccin de Fehling (Ver tabla inferior). Esta comparacin nos permite asociar ambos
resultados (Lugol y Fehling) con el tipo de molculas obtenidas tras la digestin qumica.
Coloracin
Compuesto
Fehling
Pardo sucio y precipitado
almidn insoluble
(-)
Azul intenso
almidn soluble
(-)
Violeta
amilo dextrinas
(-)
Rojo pardo
eritodextrinas
(-)
Incoloro
acrodextrinas
(-)
Incoloro
maltosa
(+)
Incoloro
glucosa
(+)
2- Determinacin de Tripsina en materia fecal de aves: Test de la gelatina. La
tripsina es una endopeptidasa que tiene selectividad por enlaces que contienen el grupo
carboxilo de aminocidos diaminados (arginina y lisina). Sus productos son polipptidos
con aminocidos bsicos en el extremo Cterminal. La tripsina activa todos los zimgenos
producidos por el pncreas.
Utilidad: La evaluacin de la actividad proteoltica de la tripsina en las heces es una de
las pruebas que pueden reflejar enfermedades pancreticas.
Fundamentos:
este test se fundamenta en la habilidad de la tripsina para atacar a la
gelatina (protena) de tal manera que, luego de la incubacin de la enzima con la gelatina,
la solucin no podr solidificar.
Materiales:
- Tubos de ensayos
- Gradilla
- Pipetas
- Propipetas
- Bao termosttico
Reactivos:
- Gelatina sin sabor al 7,5%
- Bicarbonato de sodio al 5%
- Agua destilada
- Muestra: materia fecal de aves (dilucin 1 en 9 con agua destilada).
Procedimiento: rotular dos tubos de ensayo 1 y 2. Colocar en cada uno de ellos 2 ml de
gelatina al 7,5% que actuar como sustrato de la enzima, 1ml de bicarbonato de sodio 5%
para dar el pH necesario para que la enzima acte y luego al tubo rotulado 1, agregar 1ml de
dilucin fecal (muestra que contiene a la enzima a evaluar) y al rotulado 2, 1ml de agua
destilada como control negativo de reaccin. Incubar ambos tubos a 37C por 1 hora a
temperatura ambiente por 2 horas y media. Refrigerar los tubos 20 minutos y observar los
resultados.
Resultados:
- Tubo 1: se observa falta de solidificacin en caso de presencia de tripsina (prueba
positiva).
- Tubo 2: se observa la gelatina solidificada.
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3- Anlisis del contenido ruminal: coloracin con yodo de bacterias y protozoarios


yodfilos. Los protozoos del rumen son anaerbicos estrictos, aprovechan diversos hidratos
de carbono para obtener energa y los degradan con formacin de cidos grasos voltiles
(AGV: cido actico, propinico, butrico, lctico, CO2 e H2). Todos los microorganismos
ciliados (Holtricos) sintetizan un hidrato de carbono de reserva semejante al almidn
(hasta 70% de su peso seco) que es metabolizado con formacin de los mismos productos
finales. Al almacenar grandes cantidades de este carbohidrato en su citoplasma, se hacen
ms pesadas, de mayor peso especfico que el licor ruminal y precipitan. As, adicionando
glucosa a nuestra muestra de lquido ruminal e incubando un tiempo determinado,
sedimentan los protozoos holtricos por su mayor peso especfico. Estos grmenes
proliferan en rumiantes bien alimentados y desaparecen en el ayuno. Poseen un
metabolismo hidrocarbonado propio, independiente de la presencia de las bacterias.
Realizan hidrlisis cida completa de la amilopectina muy ramificada (pura) hasta glucosa,
que es degradada en cido lctico, AGV, CO2 e H2.
Algunas cepas de bacterias ruminales tambin poseen la capacidad de formar hidratos de
carbono de reservas intracelulares (almidn o glucgeno bacteriano) por lo que darn
positivas a esta coloracin.
La flora sacaroltica del intestino o del fermento que se eliminan con las materias fecales
(an en monogstricos), tambin dan positiva la reaccin, por lo que esta prueba se puede
efectuar con muestras de materias fecales en suspensin.
Fundamento: ver gua TP N2: reaccin de Lugol
Utilidad: destacar la importancia de las condiciones qumicas para el desarrollo de
grmenes ruminales y la utilizacin de azcares por los mismos.
Materiales:
- Tubos de ensayo
- Pipetas
- Propipetas
- Bao Termosttico
- Centrfuga
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Microscopio ptico
- Pipetas Pasteur
- Gradillas
Reactivos:
Muestra: Licor ruminal (obtenidos por zonda o fstulas)
Dextrosa 5%
lcali, para llevar a pH alcalino
Formol
Solucin de Lugol
Procedimiento: rotular tres tubos de ensayo: 1, 2 y 3 y agregar a cada uno de ellos 2ml de
licor ruminal y 2ml de solucin de dextrosa 5%. Agregar al tubo 2, lcali en cantidad
necesaria para alcalinizar la mezcla y al tubo 3 una gota de formol. Incubar 30 minutos a
40C, centrifugar a 1500rpm y descartar el sobrenadante. Agregar a cada uno de los
sedimentos 1ml de solucin de Lugol. Incubar 10 minutos a 37C y colocar de cada tubo
una gota de sedimento sobre un portaobjetos. Cubrir cada uno de los tres vidrios con un
cubreobjetos y observar al microscopio ptico en 40X.
Resultados: Se observan grnulos de almidn de color pardo amarillento contenidos en los
microorganismos del tubo 1, mientras que en los del tubos 2, al cual agregamos lcali y por
lo tanto llevamos a una condicin de pH desfavorable para el crecimiento de bacterias, por
lo cual no se observar coloracin. En el anlisis de los grmenes del tubo 3, dado que se ha
agregado un agente desnaturalizante de protenas (formol), los grmenes se mueren y no se
observa coloracin.

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4- Estudio del jugo ruminal: La digestin fermentativa depende del normal desarrollo de
los microorganismos que la realizan. Por esta razn, el rumiante crea y mantiene las
condiciones ideales para su crecimiento y multiplicacin, convirtindose en un gigantesco
medio de cultivo lquido o cuba de fermentacin.
Utilidad: realizar un anlisis detallado para orientar el diagnstico de patologas digestivas.
Extraccin:
Cantidades importantes: sonda de calibre bastante grueso, de unos 2m de longitud;
inclinando la cabeza del animal o mediante una bomba de vaco.
Cantidad pequea: puncin por debajo del pliegue de la babilla, puncionando en
direccin craneal, hacia delante. Recoger lquido y filtrar.
Se puede dejar a temperatura ambiente cierto tiempo o en bao termosttico durante varias
horas.
Anlisis:
1.- COLOR: verde-grisceo, en funcin del tipo de alimentos.
Verde oliva-pardo alimentacin con pasto.
Gris: remolacha.
Amarillo-pardo: ensilados.
Gris lechoso: acidosis ruminal.
Negruzco: indigestin con podredumbre de panza.
Grisceo y grumoso: indigestin lctea en terneros/corderos.
2.- OLOR: aromtico, al menos no repelente.
Repugante-mohoso-ptrido: putrefaccin proteica (ingiere demasiada protena y se
produce una fermentacin anormal de esa protena).
cido-picante: cido lctico (hidratos de carbono de fcil digestin).
Inodoro-mohoso: inactividad del jugo ruminal.
Olor a cuajar (cido): alteracin del trnsito pilrico.
3.- CONSISTENCIA: ligeramente viscosa (aspecto de sopa).
Acuosa: inactividad ruminal.
Viscosa: contaminacin con saliva.
Burbujas pequeas: fermentacin espumosa.
4.- pH: 5,5 - 7,4
Ms altos: alimentacin con fibra y/o protena en exceso.
Ms bajos: alimentacin rica en hidratos de carbono (cido lctico).
Alcalinidad: ayuno, inactividad de la flora ruminal.
Muy bajos: acidosis ruminal (exceso de HC o reflujo del cuajar).
5.- SEDIMENTACIN/FLOTACIN: agitar y ver si las partculas finas caen al fondo; las
partculas groseras flotan. Normalmente se separan en 4-8 minutos.
Jugo inactivo sedimentacin rpida, flotacin retardada o ausente.
Putrefaccin/fermentacin espumosa flotacin muy rpida, mezcla de slidos y
lquidos.
6.- PROTOZOOS:
Funciones degradacin de HC, regulacin de la poblacin bacteriana, sntesis de
protenas de alto valor biolgico.
Realizar el examen con material recin extrado.
Gran variabilidad: 105-107/ml.
N total / tamao / vivos-muertos: da una idea de la funcionalidad de ese lquido
ruminal.
Trastornos: van muriendo; primero desaparecen los grandes, luego los medianos y
finalmente los pequeos. En trastornos graves la muerte es uniforme. En procesos
recientes y moderados aparecen vivos y muertos.
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7.- BACTERIAS:
Funciones / n variable
107-1012 grmenes / ml / g segn alimentacin, animal, etc.
Menor nmero: alimentacin con hidratos de carbono.
Acidosis lctica: predominio de Gram positivos.
Alcalosis: aumentan el nmero de Gran negativos.
Indigestin y ayuno: disminucin del nmero de bacterias.
8.- HONGOS:
Funciones poco claras.
Mantienen la anaerobiosis a nivel ruminal.
Su nmero aumenta en caso de acidosis ruminal.

BIOSEGURIDAD DEL LABORATORIO N 4


Riesgos qumicos:
ACIDO CLORHDRICO: El cloruro de hidrgeno es irritante y corrosivo para cualquier
tejido con el que tenga contacto. La exposicin breve a bajos niveles produce irritacin de la
garganta. La exposicin a niveles ms altos puede producir respiracin jadeante,
estrechamiento de los bronquiolos, coloracin azul de la piel, acumulacin de lquido en los
pulmones e incluso la muerte. La exposicin a niveles an ms altos puede producir
hinchazn y espasmos de la garganta y asfixia. La mezcla del cido con agentes oxidantes
de uso comn, como la leja, tambin llamada lavandina en algunas partes, (hipoclorito de
sodio, NaClO) o permanganato de potasio (KMnO4), produce el txico gas cloro.
A pesar de estas caractersticas los jugos gstricos en el estmago humano contienen
aproximadamente el 3 % de cido clorhdrico. All ayuda a coagular las protenas y
desempea un papel importante como coenzima de la pepsina en su digestin. Tambin
ayuda en la hidrlisis de los polisacridos presentes en la comida. Es secretado por las
clulas parietales. stas contienen una extensiva red de secrecin desde donde se secreta el
HCl hacia el lumen del estmago.
Riesgos:
Ingestin: Puede producir gastritis, quemaduras, gastritis hemorrgica, edema, necrosis. Se
recomienda beber agua o leche y NO inducir el vmito
Inhalacin: Puede producir irritacin, edema y corrosin del tracto respiratorio, bronquitis
crnica. Se recomienda llevar a la persona a un lugar con aire fresco, mantenerla caliente y
quieta. Si se detiene la respiracin practicar reanimacin cardio- pulmonar
Piel: Puede producir quemaduras, lceras, irritacin. Retirar de la zona afectada toda la
vestimenta y calzados y lavar con agua abundante durante al menos 20 minutos
Ojos: Puede producir necrosis en la crnea, inflamacin en el ojo, irritacin ocular y nasal,
lcera nasal. Lavar el o los ojos expuestos con abundante agua durante al menos 15 minutos
BICARBONATO DE SODIO: La Inhalacin del polvo o niebla puede causar daos al
sistema respiratorio y al tejido pulmonar lo cual puede producir desde una irritacin a las
vas respiratorias superiores hasta la neumona qumica. El contacto prolongado causa
irritacin a la piel con enrojecimiento y formacin de ampollas, lo cual puede agravarse en
personas con lesiones previas a la piel. La severidad del ataque a la piel va en relacin
directa y proporcional a la concentracin y tiempo del contacto.
FORMOL:
HIDROXIDO DE SODIO: Ingestin: puede causar daos graves y permanentes al sistema
gastrointestinal. Inhalacin: Irritacin con pequeas exposiciones, puede ser daino o
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mortal en altas dosis. Piel: Peligroso. Los sntomas van desde irritaciones leves hasta
lceras graves.
Ojos: Peligroso. Puede causar quemaduras, daos a la crnea o conjuntiva.
Riesgo de Incendio, Riesgo Elctrico, Riesgo Biolgico: Idem laboratorios anteriores

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EJERCICIOS DE SEMINARIO:
Seminario unidad temtica 1: Bioelementos y molculas de inters biolgico

1. Explique el rol del agua como solvente en el organismo animal


2. Explique la importancia del conocimiento de la bioqumica como parte de la curricula de la
Carrera de Veterinaria.
3. Complete las oraciones
Las propiedades del material a estudiar que permiten efectuar los siguientes estudios biolgicos son:
La ______________ separa clulas, molculas o lquidos no miscibles, esto es posible por las
diferencias en cual propiedad de los mismos:
La colorimetra permite identificar y cuantificar sustancias segn dichas sustancias
puedan_____________ o ___________________la luz.
La electroforesis posibilita la separacin de molculas segn stas tengan: diferentes
________________ ________________________________________.
4. Bioelementos primarios, en conjunto 95% de la materia viva, principales constituyentes de las
biomolculas, son:
C= 20 %, H= 9.5 %, O= 62 %, N= 2,5 % /// P, S

5. Bioelementos secundarios: 4,5% de la materia viva, son:


Na, K, Ca, Mg, Cl

6. Oligoelementos, son inferiores al 0,1%, no son los mismos en todos los seres vivos y son
indispensables para el desarrollo armnico del organismo. Se han aislado unos 60
oligoelementos en los seres vivos, pero solamente 14 de ellos pueden considerarse comunes para
casi todos; son:
Fe, Mn, I, F, Co, Si, Cr, Zn, Li, Mo

7. Cul de las siguientes caractersticas NO es comn a los llamados bioelementos primarios?:


a) entre tales elementos pueden establecerse enlaces covalentes sencillos y mltiples.
b) la combinacin de tales elementos produce compuestos, generalmente, con cierta o bastante
reactividad qumica.
c) sus combinaciones originan una rica variedad de funciones qumicas.
d) al ser pocos, el nmero de compuestos a que su combinacin da lugar es bastante limitado.
e) son imprescindibles para formar las principales biomolculas orgnicas.
8. Complete los siguientes enunciados referentes a las propiedades del agua:
-Los lquidos orgnicos (citoplasma, lquido tisular, plasma, linfa, savia, etc) son disoluciones
acuosas que sirven para el transporte de sustancias y como medio en el que se producen las
reacciones metablicas. El agua interviene en muchas de reacciones como la fotosntesis, en las
hidrlisis y en las condensaciones.
- A diferencia de otras sustancias de peso molecular semejante, el agua es_____________ a

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temperatura ambiente.
Debido a su polaridad el agua es buen disolvente de los compuestos ___________________ y
__________________.
- El _______________________(calor necesario para elevar 1C la temperatura de 1 g) es
Relativamente ____________________, as como el _________________________. Gracias a
estas dos propiedades el agua interviene en la t_________________________.
- Mxima densidad a 4C. Como consecuencia el hielo ___________________el agua lquida, lo
que impide los ocanos y otras masas menores de agua se congelen de abajo a arriba.
- En el agua son elevadas las fuerzas de cohesin (atraccin entre las molculas de agua) y de
adhesin (atraccin entre el agua y una superficie) lo cual origina los fenmenos de
__________________ por los que el agua asciende en contra de la gravedad por conductos de
dimetro muy fino (capilares). Estos fenmenos contribuyen al transporte de sustancias en los
vegetales.

9. El agua al ionizarse produce...


a) iones H3O+ y OH-;
b) iones H3O- y OH+;
c) iones H3O+ y OH+;
d) iones H3O- y OH-.
e) Ninguna de las opciones anteriores
BIOMOLCULAS ORGNICAS
1.

Escriba la estructura de los grupos funcionales enumerados:

Grupos Funcionales Hidrfilos


Carboxilo
Hidroxilo o Alcohol
Carbonilo
Amino

Grupos Funcionales Hidrfobos


- COOH

Radical Alqulico

- CH2 - R

- OH

Radical etilnico

- CH = R

Radical fenilo

- C6 H5

>C=O
- NH2

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2. Complete los espacios en blanco:
Los grupos funcionales polares son s________________ en agua o _________________. Los no polares son
____________________ o ___________________.

3. Complete los espacios en blanco del siguiente cuadro observando las molculas debajo del mismo.
Identifique los diferentes tomos que componen estas estructuras y clasifquelos en primarios, secundario u
oligoelemento.

Figura

Elementos
Secundario Oligoelemento

Primario

Grupos funcionales
presentes

Ribosa 5 P
Cistena
6-mercaptopurina
Fluoroacetato
Colesterol
Acetil CoA
Ribosa 5 P

6-mercaptopurina

Cistena

Colesterol

Fluoroacetato

Acetil CoA

4. Observe la estructura de las siguientes molculas y deduzca su solubilidad frente al agua


(hidroflica, hidrofbica, anfiptica). Seale con una X en la grilla.

hidroflico hidrofbico anfiptico


Lpido complejo
Molcula de jabn
Glucosa
Triacilglicrido
Fosfato de Dexametasona
Vitamina A
Vitamina B1- (Tiamina)
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Lpido complejo

Triacilglicrido

Molcula de jabn

Vitamina B1- (Tiamina)

Glucosa

Vitamina A

Seminario unidad temtica 2: aminocidos, pptidos y protenas


1. Observe las frmulas y diga; de que compuesto se trata? Qu tipo de isomera puede observar?
Cmo se indica en el nombre del compuesto?

2. Qu diferencias hay entre protenas Simples y Conjugadas? Cmo se las subclasifica?


3. Existe alguna diferencia entre las protenas de origen animal y las de origen vegetal? Justifique
su respuesta.
4. Aplicacin de conocimientos a Protenas de inters. Explique para el colgeno y la hemoglobina:
a. Funcin
b. Localizacin
c. Particularidades acerca de la estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria (si la tuviera)
de cada una.
d. Clasificacin (simples o complejas)
5 - Cules de las siguientes afirmaciones describen a la cadena lateral del aminocido serina:
a) Contiene un grupo hidroxilo
b) Puede formar uniones disulfuro
c) Puede participar de uniones puente de hidrgeno
d) Esta cargada a pH fisiolgico

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6 - Cules de los siguientes aa posee una cadena lateral cargada a pH fisiolgico.
a) cido asprtico
b) Lisina
c) Acido glutmico
d) Asparragina
7 - La glutamina:
a) Contiene 3 grupos titulables
b) Contiene un grupo amida
c) Es un aa cido
d) Contiene una cadena lateral que puede formar puentes de hidrgeno en protenas
8 - Cules de las siguientes afirmaciones acerca de los aminocidos son correctas:
a) La glicina contiene 2 hidrgenos disociables
b) La tirosina es un sitio de unin de grupos fosfatos en protenas
c) La cistena es un aminocidos que contiene azufre
d) La glutamina es clasificada como un aminocido bsico.
9 - La unin peptdica
a) Es un tipo especial de unin amida
b) Posee un carcter parcial de doble ligadura
c) No est ionizada a pH fisiolgico
d) Se rompe por agentes que desnaturalizan protenas , tales como solventes orgnicos o altas
concentraciones de urea.
10 - El pptido alanil-glicil- serina
a) Contiene alanina con un grupo alfa amino libre
b) Contiene tres enlaces peptdicos
c) Es pticamente activo.
d) Es un dipptido
11 Escribir la estructura inica predominante de la Gly a pH 3; 7 y 13
12 Las protenas son macromolculas biolgicas constituidas bsicamente por:
a) C, H, O, P
b) C, H, O, N
c) C, H, O, Fe
13 Los alfa L aminocidos se caracterizan por:
a) la disposicin del grupo carboxilo a la izquierda del carbono
b) la disposicin del grupo amino a la derecha del carbono
c) la disposicin del grupo amino a la izquierda del carbono
14 El comportamiento anftero de los aminocidos se refiere a .
a) el pH que exista en una disolucin acuosa determina su ionizacin
b) el pH que exista en una disolucin acuosa determina su actividad ptica
c) el pH impide que se solubilicen en una disolucin acuosa
15 Un ejemplo de polipptido es :
a) Ala Glu- Tyr Met- Pro
b) Cys Pro His- Ala Ile Phe Gly
c) Ninguna es correcta
16 En cuanto al enlace peptdico, es cierto que:
a) se estable entre los grupos amino de dos aminocidos contiguos

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b) se establece entre los grupos carboxilos de dos aminocidos contiguos
c) se estable entre los grupos amino y carboxilo de dos aminocidos.
17 Escriba la frmula desarrollada del siguiente dipptido: Lis Asn
18 - El punto isoelctrico de un aminocido es:
a)
b)
c)
d)
e)

El pH en el cual las cargas positivas son iguales a las cargas negativas.


La temperatura a la cual la disociacin del aminocido es la mxima
El pH en el cual la disociacin del aminocido es la mxima
Las opciones a, b y c son correctas.
Las opciones a, b y c son incorrectas

19 - En cuanto a la estructura de los aminocidos:


a) Alanina y tirosina poseen un anillo bencnico
b) Lisina y arginina poseen ms de un tomo de nitrgeno en su estructura
c) La metionina posee un tomo de azufre en su estructura
d) Las opciones a, b y c son correctas.
e) Las opciones a, b y c son incorrectas

Seminario unidad temtica 3: Enzimas

Interpretacin de grficos
1. El grfico 1 ilustra las energas de activacin de una determinada reaccin en presencia y
ausencia de una enzima. Cul es la curva que grafica el curso de la reaccin en presencia de la
enzima?

GRFICO 1

2. Qu propiedades de las enzimas permiten considerarlas como catalizadores? Qu es un centro


activo?
3. Representa grficamente la cintica de los enzimas sealando el valor de Vmax y Km. Explica
brevemente la inhibicin competitiva.

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Seleccione la opcin correcta:
4. Los enzimas alostricos suelen tener estructura cuaternaria, formados por varios protmeros
a) Verdadero
b) Falso
5. Si un producto final provoca el cambio de conformacin del enzima inicial a la forma inactiva, el
proceso se llama...
a) induccin enzimtica
b) inhibicin no competitiva
c) retroinhibicin
d) regulacin conformacional
6. Las molculas reguladoras de las enzimas alostricas se unen al centro activo del enzima,
modificando su actividad
a) Falso
b) Verdadero
7. Las enzimas alostricas se sitan preferentemente al final de las rutas metablicas como sistema
de control final.
a) Verdadero
b) Falso
8. El producto final de una ruta metablica es normalmente un regulador positivo de las enzimas
alostricas del inicio de la ruta.
a) Verdadero
b) Falso
9. Las enzimas alostricas tienen dos conformaciones, y slo una de ellas es activa.
a) Falso
b) Verdadero
10. De la lectura del abstract trascripto a continuacin extraiga las respuestas a las siguientes
preguntas:
a) Cul es la estructura qumica de la protena identificada?
b) Cul es la actividad enzimtica asignada a dicha protena? Escriba la estructura del sustrato.
c) Cul de las dos enzimas descriptas mostr mayor afinidad por el sustrato? Fundamente su
respuesta.
d) Qu conclusin puede sacar de la comparacin de las dos Vmax?

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Abstract:
Manzanares, P., Van den Broeck, H.C., De Graaff, L.H. and Visser, J.
Purification and characterization of two different -L-rhamnosidases, RhaA and RhaB, from
Aspergillus aculeatus.
Applied and Environmental Microbiology. 67(5), 2230-2234 (2001).
Abstract: Two proteins exhibiting -L-rhamnosidase activity, RhaA and RhaB, were identified upon
fractionation and purification of a culture filtrate form Aspergillus aculeatus grown on hespiridin.
Both proteins were shown to be N glycosylated and had molecular masses of 92 and 85 kDa, of which
approximately 24 and 15%, respectively, were contributed by carbohydrated. RhaA and RhaB,
optimally active at pH 4.5 to 5, showed Km and Vmax values of 2.8 mM and 24 U/mg (RhaA) and 0.30
mM and 14 U/mg (RhaB) when tested for p-nitrophenyl- -L-rhamnopyranoside. Both enzymes were
able to hydrolyze -1,2 and -1,6 linkages to -D-glucosides. Using polyclonal antibodies, the
corresponding cDNA of both -L-rhamnosidases, rhaA and rhaB, was cloned. On the basis of the
amino acid sequences derived from the cDNA clones, both proteins are highly homologous (60%
identity).

Seminario unidad temtica 4: metabolismo de aminocidos y protenas.


1. Indique en las celdas correspondientes de la grilla siguiente Verdadero (V) o Falso (F) segn
corresponda, para cada afirmacin, en relacin al metabolismo de aminocidos y protenas.

Los aminocidos pueden ser utilizados como combustible, pero como funcin
secundaria, reemplazados por carbohidratos y grasas
Los niveles de aminocidos dependen del equilibrio entre biosntesis y
degradacin de protenas corporales
Cuando el exceso de aminocidos se utiliza en sntesis de nuevos constituyentes,
se dice que el balance nitrogenado es negativo
La prdida del grupo carboxilo de aa da lugar a formacin de aminas bigenas,
de intensa accin fisiolgica
El principal donante de metilo es la metionina activa o S-adenosil metionina
A travs de transaminaciones, el organismo puede generar aminocidos si
dispone de los cetcidos correspondientes
2. Cul es la funcin de la S - adenosil metionina? Esquematice su estructura.
3. Mecanismo de las reacciones de transaminacin ( formacin de Bases de Schiff).
4. Escriba las frmulas correspondientes a las reacciones catalizadas por las enzimas ALAT (GPT)
y ASAT (GOT).
5. Escriba las reacciones de formacin de cadaverina y putrescina. Qu tipo de reacciones son?
6. Cules son los aminocidos precursores de las siguientes aminas bigenas?: histamina,
tiramina y triptamina?
7. Qu es una reaccin de transpeptidacin? Escriba la ecuacin correspondiente a la formacin de
glutatin.
8. Esquematice el metabolismo de triptfano, fenilalanina e histidina.

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9. El esquema siguiente ejemplifica una reaccin bsica de la degradacin de los aminocidos.
Complete los espacios en blanco del mismo (sustrato/s, producto/s, enzima, coenzima).

Seminario unidad temtica 5: cidos nucleicos


1. Qu otra funcin poseen los nucletidos libres, aparte de actuar como eslabones de cadenas
polimricas? Dibuje la estructura del ATP y explique su composicin.
2. Cuantos tipos de ARN conoce? Qu diferencia estructural con el ADN poseen? Cules son
sus funciones y en que parte de la clula se encuentran? Cules son sus estructuras? Graficar.
3. Mencione diferencias entre el ADN de procariotas y eucariotas.
4. Explique quienes poseen ADN circular y cmo es el genoma de los virus.
5. Escribir la frmula de los siguientes compuestos:
(Identifique las uniones entre las diferentes partes de la molcula)
CMP (5 monofosfato de citidina)
dGMP (5 monofosfato de desoxiguanosina)

6. Dibuje la estructura de los anillos de purina y pirimidina y coloque la numeracin correcta de sus
tomos.
________________________________________________________________________________
Seminario unidad temtica 6: metabolismo de cidos nucleicos
1- Explique como ocurre el catabolismo de bases pricas y pirimdicas, cules son sus productos y
como se eliminan del organismo.
2- Mencione las enzimas que participan en el proceso de duplicacin del cido Desoxiribonucleico
y mencione sus funciones.
3.
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)

Metabolismo de bases pricas


Nombrar los compuestos precursores de la sntesis del anillo de purina
Dibujar la estructura de la ribosa 5 fosfato
Esquematizar la biosntesis de los nucletidos de purina a partir de la ribosa 5 fosfato
D ejemplos de otras vas para la sntesis de nucletidos de purina en el organismo
Cules son los productos del catabolismo de las purinas?
Explique el comportamiento del cido rico en pH sanguneo normal
Explique la importancia de los uratos y sus orgenes en las especies animales.

4. Metabolismo de pirimidinas
a) Nombrar los precursores de la sntesis del ncleo de pirimidina

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b) Esquematice la biosntesis del ncleo de pirimidina
c) Esquematice el catabolismo del ncleo de pirimidina
5. Biosntesis de nuclesidos di y trifosfatos
Complete las siguientes ecuaciones
a) GMP + _________
b) GDP + _________

GDP + ADP
GTP + ADP

Indique las enzimas implicadas en las reacciones y los cofactores necesarios


6. Biosntesis de cidos nucleicos
a) Esquematice la replicacin del ADN
b) Esquematice la sntesis de los 3 tipos de ARN
7. Cmo eliminan el Nitrgeno en exceso los mamferos, las aves, los reptiles y los peces?

Seminario unidad temtica 7: Glcidos


Dado el siguiente compuesto:

CHO
H

OH

HO

HO

OH

CH2OH
D-Galactosa
1. Identifique el grupo de molculas de inters biolgico al que pertenece.
2. Describa las isomeras que advierte en dicha estructura
3. Forme el hemiacetal (furansido y piransido) correspondiente, con los dos ismeros que se
generan en cada caso.
4. Qu producto obtendra si hace reaccionar dicho compuesto con una molcula de metanol?
Escriba la ecuacin correspondiente. Ubique al producto de la reaccin dentro de la
clasificacin de glcidos.
5. Qu tipos de isomera puede presentar la fructosa?
6. Describa con frmulas la unin ster entre un glcido y un cido fosfrico.
7. Cules son las caractersticas generales de los heteropolisacridos?
8. Describa ubicacin en el organismo y funcin de cada uno de ellos.
9. Por qu se comportan como polianiones y qu caracterstica le otorga a la molcula?
10. Describa la funcin y estructura de los proteoglicanos.
11. Forme una glicoprotena de 8 residuos de glcidos. Cul podra ser su funcin?
12. cules son los glicolpidos ms abundantes y en qu se diferencian bioqumicamente?

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13. Describa la estructura de la pared vegetal y explique la disposicin y funcin de los glcidos
que la forman.
14. Compare estructuralmente a las molculas de almidn y celulosa.

Seminario unidad temtica 8: Metabolismo de glcidos


1.- Ingreso de

2.-

3.-

4.-

5.-

la Glucosa a las clulas: naturaleza qumica y ubicacin celular de los


Transportadores de Glucosa. Diferencias entre SGLT y GLUT. Clases de GLUT segn su
distribucin tisular. Propiedades cinticas.
La Glucosa 6 fosfato constituye lo que se denomina un punto de encrucijada metablica,
cules son los posibles destinos de este metabolito? En qu condiciones se ve favorecido cada
uno de ellos? Esquematice.
Glucgeno: Para qu sirve? Por qu el organismo deposita glucosa como glucgeno y no
como glucosa 6 fosfato, siendo que la formacin de este ltimo demanda menor gasto
energtico. Existe alguna analoga estructural con el almidn? Esquematice formacin y
degradacin.
A qu se denomina gluconeognesis? En qu situaciones se produce? A partir de qu
sustratos? Por qu no es el camino inverso de la gluclisis? Esquematice los tres desvos que
posibilitan esta va, sealando las enzimas involucradas y su ubicacin celular. Balance
energtico. Es una va catablica o anablica?
Explique el proceso observado en el esquema de la figura, en qu condiciones y dnde se
produce.

6.- Nombre los siguientes compuestos y explique qu relacin tienen con el metabolismo de
carbohidratos:

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7.- Marque en el siguiente esquema los dos posibles caminos para la produccin del propionato por
las bacterias ruminales.

8.- Mencione tres procesos que aportan glucosa a la sangre y tres procesos que la extraen. El banco
de respuestas lo ayudar en la seleccin.
SUSTRAEN
APORTAN
a)
a)
b)

b)

c)

c)

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Banco de respuestas
va de las Pentosas-Fosfato - absorcin intestinal gluclisis glucogenlisis gluconeognesis heptica glucogenognesis
Seminario unidad temtica 9: Lpidos
Escribir las frmulas de los siguientes compuestos:
a) cido esterico
b) cido oleico
c) 1,2 dilauril 3 esteaoril L glicerol.
d) 1,2,3 trilinoleil D glicerol
e) cido 9,10 dicloro linoleico
f) Araquidato de sodio
g) cido fosfatdico
h) Ceramida
Escribir las ecuaciones correspondientes a las siguientes reacciones:
a) Saponificacin de triesteaoril D glicerol
b) Hidrogenacin del cido palmitoleico
Deduzca la variacin relativa de las propiedades fsicas entre el cido esterico y el oleico
Seminario unidad temtica 10: Metabolismo de lpidos
1- Cetognesis: Realice un esquema con los tejidos involucrados en la formacin, utilizacin y
excrecin de cuerpos cetnicos. En qu situaciones se produce? Esquematice las etapas de
formacin y utilizacin de cuerpos cetnicos (con frmulas). Qu es la cetosis?
2- Biosntesis de cidos grasos: situaciones en las que se produce. Describa el funcionamiento del
complejo cido graso sintetasa. Esquematice las etapas. Balance energtico. Se pueden
sintetizar cidos grasos insaturados?

3- Eicosanoides: grupo de compuestos que comprende, funciones biolgicas que realizan.


4- Cul es el intermediario comn en la biosntesis de triglicridos y fosfolpidos; enumere los
pasos de la biosntesis de fosfolpidos?
5- Cules son los factores Lipotrpicos?
6- Utilizacin y transporte del colesterol en los animales.
7- Describa en orden de mayor a menor los componentes de las siguientes lipoprotenas y las
funciones de la mismas.

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Seminario unidad temtica 11: Vitaminas


1. El cido nicotnico, la vitamina D, y la vitamina K. tienen cierta independencia de la dieta,
pudiendo ser sintetizadas por el organismo. De qu manera ocurre esto?
2. Describa la participacin del pirofosfato de tiamina (PPT) en la descarboxilacin oxidativa
del piruvato.

Seminario unidad temtica 12: Bioqumica de las hormonas


De estas seis actividades, deben resolverse en clases por lo menos cuatro. Las dems podrn
completarse luego para ser consideradas en la siguiente clase prctica.
1.
2.
3.
4.

Esquematice el Sistema del AMPcclico y el Sistema Calmodulina-Calcio.


Esquematice el Sistema de la proopiomelanocortina (POMC).
A que se denomina vida media de las hormonas, de qu factores depende?
Esquematice la biosntesis de hormonas tiroideas y describa las acciones. De qu aminocidos
derivan estas hormonas?
5. Hormonas derivadas del colesterol: realice las estructuras qumicas sealando las diferencias en
cada caso.
6. Esquematice el mecanismo de accin de hormonas esteroideas.
7. Nombrar las acciones de la insulina y del glucagn y explica la regulacin de su secrecin.

Seminario unidad temtica 13: Utilizacin de la energa. CICLO DE KREBS: Catabolismo


del Acetil CoA. CADENA RESPIRATORIA. FOSFORILACION OXIDATIVA
1. Que son las especies reactivas del oxgeno y como se generan?
2. Qu efectos tienen las especies reactivas del oxgeno en el organismo?

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3. Qu mecanismos de defensa posee el organismo contra dichas espacies reactivas? Sistemas
endgenos y exgenos.
4. El Acetil CoA constituye un punto de encrucijada metablica, cules son los posibles
orgenes y destinos de este metabolito? Esquematice.
5. Ciclo del Acido Ctrico, de Acidos Tricarboxilicos o de Krebs: Ubicacin celular. Papel
funcional. Reacciones: describa cada una de ellas (con frmulas), indicando las enzimas
que intervienen y los principales puntos de regulacin. Balance energtico. Es una va
catablica o anablica?
6. Cadena respiratoria y fosforilacin Oxidativa: de qu manera se acoplan? Para que sirven?
Esquematice indicando los complejos, las bombas de protones, las coenzimas que
interaccionan y la ATP sintetasa. Rdito de ATP: rinde lo mismo un NADH + H+ y un
FADH2? Por qu?
7.- Identifique la reaccin de la figura siguiente, a qu va metablica pertenece y si es una
reaccin endergnica o exergnica.

8.- Defina y ejemplifique acoplamiento energtico en las vas metablicas.


9.- Complete el cuadro, donde para cada una de las reacciones del ciclo de Krebs presentadas se
detallan el sustrato, el producto y la enzima actuante.

N de Orden de
la Reaccin (R)

Sustrato

Enzima

Producto

Oxalacetato (o cido
oxlico)
Isocitrato
deshidrogenasa
Oxalacetato

10.- Mencione y ejemplifique el rol biosinttico de algunos compuestos intermedios del ciclo de
Krebs.
11.- Identifique los Sistemas de provisin de energa muscular (Sistema Creatnfosfato Sistema de cido lctico - Sistema Oxidativo) y complete el cuadro

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Sistema de provisin Perodo


Sistema Creatnfosfato0-30 s
Sistema de cido lcti30 s - 5 min
Sistema Oxidativo

1 min - 4-5 h

Energa
La energa en forma de 'combustible' empleada en los
msculos (procedente del ATP muscular)
Energa en forma de 'combustible' empleada en los
msculos procedente del glucgeno
Energa procedente de la oxidacin de los lpidos y del
glucgeno.

Seminario unidad temtica 14 y 15: Bioqumica de la digestin en monogstricos, aves y


rumiantes
1. Construya un cuadro comparativo de las enzimas presentes en cada rgano del sistema
digestivo de monogstrico y de aves.
2. Clasifique las enzimas anteriores en endo o exo enzimas, y explique brevemente el modo de
accin de cada una de ellas y las condiciones necesarias para las catlisis en las que
intervienen.
3. Elija un sustrato (glcido, lpido, protena) y esquematice la digestin en los diferentes
niveles del tubo digestivo de monogstricos y de aves.
4. Clasificar a las distintas aves segn el tipo de dieta que ingieren.
5. Describir brevemente las principales diferencias del aparato digestivo de las aves con
respecto a las otras especies domsticas.
6. Resuma en un esquema las condiciones necesarias para la fermentacin en el rumen y en
una cmara de fermentacin.
7. Esquematice la degradacin de celulosa y almidn en el rumen.
8. Nombre los productos de la fermentacin de azcares, que son absorbidos por las paredes
del rumen y algunos de sus destinos en el rumiante.
9. Esquematice el ciclo de recuperacin de la urea por el rumiante.
10.
Seminario unidad temtica 16: Integracin y control del metabolismo
generando energa y poder reductor til para
1. Sobre la organizacin del metabolismo es
las rutas anfiblicas.
cierto que:
a) Todas las rutas metablicas estn formadas
2. Las vas metablicas que requieren energa
por secuencias de reacciones irreversibles
y conducen a molculas complejas a partir de
catalizadas por enzimas.
precursores, se conocen colectivamente como:
b) Las rutas anablicas generan intermediarios
a) Anabolismo.
metablicos, productos de desecho, ATP y
b) Autotrofismo.
poder reductor que pueden ser utilizados en
c) Catabolismo.
las rutas catablicas.
d) Heterotrofismo.
c) Las rutas anfiblicas ocurren
e) Metabolismo.
preferencialmente en anfibios, pero no en
3. En los procesos catablicos, el conjunto de
microorganismos.
las reacciones son:
d) Las rutas catablicas generan
a. Endergnicas.
intermediarios metablicos, productos de
b. De sntesis.
desecho, ATP y poder reductor que pueden ser
c. Exergnicas.
utilizados en las rutas anablicas.
d. El proceso requiere energa.
e) Las rutas anablicas permiten la biosntesis
de productos de excrecin para el organismo,

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4. Seale sobre la figura siguiente las rutas metablicas que se encuentran aceleradas o estimuladas

en la diabetes mellitus (poniendo signos + junto a las flechas).

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5.

Complete el siguiente esquema con las frmulas, enzimas, coenzimas que correspondan.

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