PREPARACIN DE COLORANTES COMUNES PARA TCNICAS

DE MICROSCOPA

LIC 1
Semestre 2015-1
M. EN C. GUADALUPE EUGENIA DALETH GUEDEA FERNNDEZ
1. Acido-Alcohol: (decolorante para tincin Ziehl-Neelsen)
o cido clorhdrico concentrado ..........................................................3 ml
o Etanol 95% ....................................................................................97 ml
2. Alcohol Acetona para Tincin de Gram
o Alcohol al 95% 250 ml
o Acetona...250 ml
3. Azul de metileno: Colorante de contraste para tincin de flagelos.
o Azul de metileno................................................................................1 g
o Agua destilada...............................................................................100 ml
4. Azul de metileno de Loeffler: Tinciones simples.
o Solucin de hidrxido potsico al 1%.................................................1 ml
o Azul de metileno, sol. saturada en etanol al 95%...............................30 ml
o Agua destilada...............................................................................100 ml
5. Colorante para esporas:
o Solucin acuosa saturada de verde malaquita
6. Colorante para flagelos de Leifson:
o Solucin A
Fucsina bsica .........................................................................1,2 g
Etanol 95%.............................................................................100 ml
o Solucin B
cido tnico................................................................................3 g
Agua destilada.........................................................................100 ml
o Solucin C

Cloruro sdico....................................................................1,5 g

Agua destilada........................................................................100 ml
Para preparar la solucin de uso, se mezclan cantidades iguales de las soluciones A, B y C y
se guarda en frasco cerrado hermticamente en la nevera donde es estable durante varias
semanas.
7. CRISTAL VIOLETA: PARA TINCIN GRAM Y TINCIN SIMPLE.
o Cristal violeta (violeta de genciana)....................................................0,5 g
o Agua destilada.................................................................................100 ml
8. SOLUCIN VIOLETA CRISTAL PARA GRAM MODIFICADO
Solucin A
o Violeta cristal 85%..............................................................................20 g
o Etanol al 95%....................................................................................100 ml
Solucin B
o Oxalato de aminio ..1 g
o Agua destilada .100 ml
Diluir solucin A en agua destilada -1:10- y mezclar con 4 volmenes de solucin B en un frasco
ambar
9. Eosina: Para observacin de clulas sanguneas.

Eosina...............................................................................................0,3 g
o cido actico glacial......................................................................0,025 ml
o Agua destilada...................................................................................100 ml
Fucsina diluida: Para tincin Gram y tincin simple.
o Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen......................................................10 ml
o Agua destilada.................................................................................100 ml
Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen: Para tincin cido-alcohol resistente.
o Fucsina bsica......................................................................................1 g
o Etanol 95%........................................................................................10 ml
o Fenol 5% en solucin acuosa............................................................100 ml
Hematoxilina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Hematoxilina.........................................................................................2 g
o Agua destilada......................................................................................1 l
Lactofenol: Para preparaciones microscpicas en fresco de mohos.
o cido lctico.....................................................................................100 ml
o Fenol................................................................................................100 g
o Glicerol.............................................................................................200 ml
o Agua.................................................................................................100 ml
Lactofenol al Azul Algodn: Para preparaciones en fresco y tinciones de mohos.
Solucin A o Solucin . saturada de azul algodn
o Azul anilina soluble (azul de algodn)........................10 ml
o Glicerol.................................................................................10 ml
o Agua.......................................................................................80 ml
Solucin B
Lactofenol (13).100 ml
Mezclar solucin a con b a partes iguales
LUGOL: SOLUCIN DE YODO PARA TINCIN GRAM.
o Yodo...................................................................................................1 g
o Yoduro potsico..................................................................................2 g
o Agua destilada.................................................................................300 ml
Orcena A: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico..................................................................................45,8 ml
o cido clorhdrico 1 mol/l..................................................................8,3 ml
o Agua..................................................................................................45,8 ml
Orcena B: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................55 ml
o Agua..................................................................................................55 ml
Safranina: COLORANTE DE CONTRASTE PARA TINCIN GRAM (PREFERIBLE A LA FUCSINA) Y
ESPORAS.
o Safranina.........................................................................................0,25 g
o Agua destilada..................................................................................100 m
SAFRANINA STOCK PARA TINCIN DE GRAM
o Safranina O .2.5 g
o Etanol al 95%.....................................................................................100 ml
Mezclar los dos ingredientes anteriores y diluir 1:5 2:10 con agua destilada y se
almacena en frasco ambar
Sudn III: Tincin especfica de grasas.
o Alcohol etlico................................................................100 ml
o Agregar Sudn III...........................................................hasta saturacin
Verde de metilo actico: Igual composicin que la eosina (num. 7)
YODURO DE GRAM
o

10.

11.

12.

13.

14.

15.

16.

17.

18.

19.

20.

21.
22.

 SOLUCIN A
o Yodo en cristales..1 g
o Yoduro de Potasio 2 g
o Agua destilada ..5 ml
Solucin B
o Bicarbonato de Sodio..5 g
o Agua destilada 100 ml
Agregue 240 ml de Solucin A y 60 de Solucin B, mezcle y almacene en un frasco
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