FACULTAD DE INGENIERIA

ESCUELA DE INGENIERIA QUIMICA

CATEDRATICO: Ing. Qumico M. Sc. Carlos S. Wong Davi

CURSO DE MICROBIOLOGA
Concepto:
Microbiologa: es la ciencia que se dedica al estudio de
microorganismos,

su

estructura,

su

forma,

tamao,

reproduccin, su relacin con otros microorganismos, sus

efectos benficos y perjudiciales con el ser humano.

Segn Hackel (1886) los reinos se dividian en:

ANIMAL
VEGETAL
PROTISTA
Refirindose a protista como: seres microscpicos que no tienen caractersticas
de ninguno de los anteriores
(no tienen clorofila, no son pluricelulares y no se transportan)

El reino protista los dividi en :

PROCARIOTES: microorganismos cuyas clulas no tienen sus estructuras

definidas (Ej. algas verde-azules y bacterias)
EUCARIOTES:

tienen

sus

partes

estructurales

bin

definidas

(Ej.

Protozoos, hongos y algas)

Posteriormente Whittaker en 1969 organiz de nuevo los organismos de acuerdo
a la siguiente manera:

Reino Monera : procariotes de Hakel

Reino Protista: eucariotes de Hackel
Reino Fungi de los Hongos: mohos y levaduras.
La divisin la hizo de acuerdo a :
Estructura y niveles de evolucin celular
Forma de alimentacin: FOTOSNTESIS
INGESTION
ABSORCION

BACTERIOLOGIA
Es la ciencia que trata del estudio y conocimiento de un
conjunto de microorganismos conocidos con el nombre de
baterias.

Es una rama de la microbiologa,

bacteriologa se lilmita al Phyllum schizomycetes.

el

trmino

BACTERIAS
Son organismos unicelulares que pertenecen al reino
Monera,

no

poseen

clorofila,

pueden

presentarse

aisladas o bin formando grupos pluricelulares que se

denominan colonias. Las bacterias que forman colonias
son fisiolgicamente independientes entre si.

MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA FINA

MORFOLOGA DE LAS BACTERIAS.
La morfologa es el estudio de la forma de las bacterias las cuales han sido
cultivadas en forma artificial en un medio de cultivo apropiado, a una
temperatura ptima a un grado determinado de humedad y en un tiempo de
incubacin especfico. La variacin de stos factores ejerce influencia en la
forma de las bacterias. Por su morfologa se dividen en:
1. Cocos: forma oval o esfericas.

2. Bacilos: forma cilindrica o bastn.

3. Espirilos: forma de espirales.

Agrupacin de las bacterias

Cocos:

Monococos

Diplococos

Tetracocos

Streptococos

Staphylococos

Sarcinas

BACILOS
Monobacilos

Diplobacilos

Estreptobacilos

ESPIRILOS
VIBRIONES

ESPIRILOS

TAMAO DE LAS BACTERIAS

COCOS
0.75 a 2x10-6 m

BACILOS
2 a 10 microm.
0.75 a 2 microm

CITOLOGIA BACTERIANA
Las bacterias se dividen en 3 partes principales

MEMBRANA, PROTOPLASMA Y NUCLEO

A) MEMBRANA
La membrana se divide en 3 partes:

a) Membrana citoplasmtica: se observa en clulas jvenes, se hace densa y reacciona con

la tincin de GRAM, esta compuesta de subastancias lipoides, adentro hay
una membrana fina conocida como, protoplasmtica, o simplemente
membrana plasmtica,

sta es una estructura de extrema importancia funcional,

es una membrana semipermeable selectiva,

regula los pasos de los nutrientes y productos de desecho dentro y fuera de la clula,

en ella se encuentran varias enzimas como los citocromos (enzimas que sintetizan lquidos

complejos) y enzimas que intervienen en el transporte de electrones.

b) Pared celular:
Fuera de una delicada membrana tiene una gran rigidez que se demuestra fcilmente
sometiendo a las bacterias de formas diferentes a condiciones fsicas extremas como presiones
osmticas muy altas o muy bajas o temperaturas inferiores a la de congelacin.
La pared celular de la bacteria es escencial para el desarrollo y divisin bacteriana, dentro del
aislamiento de fragmentos de la pared celular figuran dos tcnicas:
a)
b)

Desintegracin mecnica por exposicin de ondas snicas y

ultrasnicas.
Lisis y desintegracin del protoplasma.

b.1 COMPOSICIN QUIMICA DE LA PARED CELULAR

La pared celular est compuesta de cido diaminopihlico, cido murmico y cido teicoico,
aminocidos, azcares, carbohidratos, lpidos, PEPTIDOGLUCN (polmero que proporciona
RIGIDEZ, a la pared celular.
Membrana que se encuentra entre las sustancias extracelulares y el citoplasma; esta
tiene una gran rigidez. Su grosor vara de 10 a 25 nm. Constituye una porcin apreciable del
peso seco total de la clula. Parecen ser esenciales para el desarrollo y divisin bacterianas.
Tienen compuestos qumicos de inters, como cido diaminopimlico (ADP), cido murmico y
cido teicoico. Otros compuestos son aminocidos, azcares aminados, carbohidratos y lpidos.
El peptidoglucn proporciona la estructura rgida a la pared. Hay diferencia entre la composicin
de la pared celular de las diferentes especies.
ESTRUCTURAS INTERNAS DE LA PARED CELULAR
1. Protoplastos y esferoplastos
Es una membrana frgil citoplsmica derivada de una clula vegetativa derivada de la
separacin de toda la pared celular, se llama protoplasto. Son cuerpos redondos que toman la
forma esfrica desde el momento que carecen de la pared celular. Se caracterizan por ser

inmviles, esfricos, no se dividen, no forman nuevas paredes celulares y por lo general no son
susceptibles a la infeccin de bacteriofagos.
Los esferoplastos son clulas bacterianas gramnegativas a la que se ha quitado el
pptido glucano, dejandola sin rigidez.
En bacterias gram negativas cuando se separa el petidoglucan otras capas de la
envoltura se adhieren a los cuerpos redondos y son esferoplastos.

2. Membrana Citoplsmica (Protoplsmica):

Membrana fina o envoltura que se encuentra inmediatamente por adentro de la pared
celular. Es una membrana semipermeable selectiva que regula el paso de nutrientes y productos
de desecho dentro y fuera de la clula; en ella se encuentran varias enzimas, entre ellas los
citocromos.

El dao a esta membrana ocasiona la muerte de la clula aunque no haya

alteranciones morfolgicas detectables.

3. Intrusiones membranosas y Sistemas de membranas (Mesosomas) :

Intervienen en varios procesos metablicos y de la reproduccin. El sistema de los mesosomas
est conectado de manera compleja con el material nuclear y su replicacin; adems esta
relacionado con algunas procesos enzimticas.

4. Citoplasma:
Es el material contenido dentro de la membrana citoplasmtica, se divide en:
-el rea citoplasmtica de aspecto granular rica en RNA, ribosomas.
-el rea cromosmica o nuclear rica en DNA
-la parte lquida que disuelve las sustancias nutritivas.
En ella se encuentran las ribosomas, los cuales son partculas protenicas en
combinacin con RNA; contiene las enzimas que intervienen en la sntesis de las protenas.
5. Inclusiones Citoplasmticas:
En algunas clulas se descubren depsitos concentrados de ciertas sustancias. Los
granulos de volutina son conocidos como granulos Metacromticos, se encuentran en muchas
bacterias, hongos, algas y protozoos.
alimentos.
6. Material Nuclear:

Se supone que los granulos sirven de reservas de

Son cuerpos dentro del citoplasma que se considera como estructura nuclear y, el DNA
de la bacteria est confinado en esta rea. Por no ser un ncleo definido se ha sugerido que
esta estructura se llame cuerpo cromatnico, nucleoide, equivalente nuclear o cromosoma
bacteriano, no hay membrana nuclear que separe el ncleo del citoplasma.
C. Envoltura: considerada como una capa externa modificada de la pared celular, de las dos
estructuras, (envoltura y pared) poseen iguales reacciones microqumicas y ambas tienen poca
afinidad a los colorantes.
B. PROTOPLASMA
Sistema coloidal en la clula y esta rodeado por la estructura antes mencionada, se divide en:
Ectoplasma: de aspecto granular, rica en ARN (por lo
que se le llaman ribosomas a los grnulos)
Endoplasma: o rea cromosmica la cual es rica en
ADN
C. NUCLEO O MATERIAL NUCLEAR
Las clulas bacterianas no contienen el ncleo caracterstico de las clulas de las plantas y
animales, si bin contienen cuerpos dentro del citoplasma que se consideran como estructura
nuclear y el ADN de la bacteria est confinada en sta rea no es un ncleo definido . Se ha
sugerido que esta estructura se llame cuerpo cromatnico o nucleoide, equivalente nuclear y hasta
cromosoma bacteriano (desde el punto de vista gentico).

Formaciones Intracelulares
a) Vacuolas: son cavidades en el protoplasma sobre todo en las jvenes y tienen lquido
nutricional.
b) Grnulos metacromticos: son las inducciones del protoplasma mejor conocidas con el
nombre de granulos de volutina. Se originan de la membrana protoplasmtica de las clulas
jvenes, muestran afinidad por colorantes bsicos.
c) Globulos de grasa: existen en algunas especies de bacterias que al crecer en medios como
agar con glicerol son globulos refrigerantes. Al microscopio stos se tien con un colorante
llamado SUDAN II.

Formaciones Extracelulares

1. Flagelos
Son los apndices capilares sumamente finos que salen a travs de la pared celular y
que se originan en una estructura granular ( cuerpo basal ) en el citoplasma inmediatamente por
debajo de la membrana celular.
Tiene tres partes :
-estructura basal
-estructura en forma de gancho

-filamento largo fuera de la pared ceular

No se presentan en todas las bacterias; de las eubacterias o bacterias verdaderas,
muchas de las especies de bacilos tienen flagelos, pero muy rara vez se aprecian en los cocos.
Se componen de subunidades de protena llamada flagelina. Causan movilidad a las bacterias.
Las bacterias en base al nmero de flagelos que tienen se dividen en:
Montricos
Loftricos
Anftricos

Pertricos

2. Fimbrias o vellos
Son apndices filamentosos que no son flagelos, son ms pequeos, cortos y
numerosos y no tienen movimiento ondulares regulares. No tienen funcin de motilidad y se
encuentran en especies no mviles y mviles. Hay diferentes tipos de fimbrias, por ejemplo la
fimbrias F, fimbria sexual. Tambin desempean funciones de sitios de adsorcin.
3.Capsulas
Es una cubierta o envoltura compuesta por una sustancia viscosa que se encuentra
alrededor de la clula.

Tambin se le conoce como capa mucosa.

Estn compuestos de

polisacaridos y algunos polmeros.

ENDOSPORAS
Son cuerpos ovales de pared gruesa, que es una clula de alta resistencia, tambin se
les denomina esporas.
Algunas bacterias tienen la facultad de producir cuerpos ovales de pared gruesa, una por
clula, a estas formas tambin se les denomina endoesporas. Todos los organismos de los
gneros Bacillus y Clostridium forma esporas.
Las bacterias que forman esporas se desarrollan y reproducen durante muchas
generaciones como clulas vegetativas. Sin embargo, en alguna etapa del desarrollo del cultivo

en un medio nutritivo adecuado, dentro del citoplasma vegetativo se sintetiza un nuevo

citoplasma destinado a convertirse en espora. Contienen grandes cantidades cido dipiclinico,
su presencia esta limitada a las clulas bacterianas. Contienen tambin grandes cantidades de
calcio y se piensa que el complejo Ca +2-cido dipicolnico-peptidoglucan forma la capa cortical.
Es una capa inmermeable de alta resistencia.
Cuando las esporas se transfieren a un medio favorable para el desarrollo, ocurre la
germinacin de la espora con la ruptura de la pared esporular. Al crecer la espora para formar
una nueva clula vegetativa, la envoltura se desprende. La localizacin y el tamao de las
esporas no es el mismo para todas las especies; hay esporas que son centrales, terminales o
subterminales. Tiene un diametro mayor o menor que el de la bacteria. Representan una fase
durmiente, de reposo, de la clula bacteriana.

Citologia Bacteriana
Las bacterias se dividen en 3 partes:
Membrana
Protoplasma
Ncleo
MEMBRANA
La membrana se divide en 3 partes que son:
Membrana Citplasmatica, se observa en celulas jovnes, y se hace densa y reacciona con
la tintion de Gram, esta compuesta de sustancias lipoides, adentro hay una membrana
fina conocida como protoplasmatica o plasmatica, esta es una estructura de extrema
importancia funcional, es semipermeable , selectiva ya que regula los pasoso de los
nutrientes y productos de desecho dentro y fuera de la celula, en ella se encuentran
varias enzimas como los citocromos y enzimas que intervienen en el transporte de
electrones.
Pared Celular: fuera de una delicada membrana tiene gran rigidez que se demuestra
sometirendo a las bacterias de formas diferentes a condiciones fisicas extremas como
presiones osmticas muy altas o muy bajas o temperaturas inferiores a la de
congelacin. Las paredes celulares bacterianas parecen ser escenciales para el
desarrollo y division bacteriana, dentro del aislamiento de fragmentos de la pared celular
figuran dos tecnicas 1. Desintegracion mecanica de las celulas por exposicin de ondas
sonicas y ultrasonicas. 2. Lisis y desintegracion del protoplasma. La composicin
quimica de la pared celular esta compuestan de acido diaminopihelico, acido muramico,
acido teicoico, aminocidos, azucares aminados, carbohidratos,lipidos, y peptidoglucan
(polimero que le proporciona rigidez a la pared celular)
Envoltura: es considerada como una capa externa modificada de la pared celular, las dos
estructuras (envoltura y pared) poseen iguales reacciones microquimicas y ambas tienen
poca afinidad por los colorantes.
PROTOPLAMA

Es un sistema coloidal en la celula y esta rodeado por la estructura antes mencionada se divide
en:
Ectoplasma: de aspecto granular, rica en ARN (por lo que se llaman ribosomas a los
granulos)
Endoplasma: o area cromosomita la cual es rica en ADN.
NUCLEO O MATERIAL NUCLEAR
Las celulas bacterians no contienen en el ncleo caracteristico de las celulas de plantas y
animales, si bien contienen cuerpos dentro del citoplasma que consideran como estructura
nuclear y el ADN de la bacteria esta confinada en esta area no es un ncleo definido. Se ha
sugerido que esta estructura se llame cuerpo cromatinico, nucleoide, equivalente nuclear y hasta
cromosoma bacteriano (desde el punto de vista genetico).
Metabolismo: es el conjunto de reacciones quimicas que una celula viva ejecuta ya sea en
estado de reposo o actividad con el objetivo de : obtener energia para sus funciones y para
obtener material nutritivo del medio ambiente para la contruccion del su protoplasma.
Se divide en:
Anabolismo y Catabolismo
Anabolismo: es la etapa de asimilacin y sntesis del protoplastma.
Catabolismo: es la etapa de desasimilacion y desintegracin del protopalasma.
Las primeras etapas del crecimiento de una celula bacteriana se denominan anabolicas, y
posterior a esto predominan las etapas catabolicas.
Ejemplo de funciones anaolicas: fijacin del nitrofeno (ciclo del nitrogeno), formacin de
pigmentos en bacterias, como las sulfobacterias y las bacterias ferroquimicas.
Las actividades catabolicas consisten en fenmenos de desasimilacion y destruccin del
protoplasma, asi como la desintegracin de proteinas, carbohidratos y graasas, esta ultima
accion se lleva a cabo por medio de sustancias especializadas llamadas enzimas o fermentos
bacterianos, estas sustancias producicdas por una celula viva tienen la propiedad de acelerar
notablemente la velocidad de ciertas reacciones quimicas que en otras condiciones se
efectuarian en forma muy lenta.
Enzimas o Fermentos
Las enzimas son catalizadores organicos y constan de las siguientes partes:

Apoenzima: que es la parte que indica donde se va a efectuar la reaccion, y son

compuestos de alto peso molecular, algunos consideran que es inactiva y no dializable.
Es importante porque le da la especificidad a la enzima.
Coenzima: es la parte de la enzima que indica que reaccion quimica se llevara a cabo,
es una molcula de bajo peso molecular, es dializable y se puede separar de la enzima.
Por ejemplo: DPP(proporciona fosfatos en forma de dioxido de difosfato), DPN (difosfato
de adenosina que es un nucleotido que transfiere alta energia), ATP (fosfatos de alta
energia), coenzima A ( estructura complja responsable de la division nuclear), vitamina
B6 etc.
Activador Metalico: dirije el encaje perfecto al sustrato, compuesto de iones metalicos
como Co, Mg, Zn, Mo etc.

Lectura dirijida para el 19 febrero, parte 5 preguntas, 3,4,5,6,7,8,10,12,13,14

INTRODUCCION

Todas las plantas tienen o deben tener programas especiales

para controlar y prevenir la contaminacin identificando los lugares,
situaciones o materiales donde la contaminacin es ms probable.
Las inspecciones son de tipo visual, biolgico y qumico para
determinar donde los microorganismos pueden contaminar. Estas
inspecciones son o deben ser hechas diariamente (inspeccin
bsica) y de forma peridica (inspeccin completa). Visualmente se
pueden ver residuos, suciedad, agua, polvo y otras fuentes de
contaminacin. Es por esta razn que el control microbiologico toma
un papel muy importante en los procesos de una industria y en la
calidad de los productos finales. En este resumen se presentan los
mtodos fsicos y qumicos mas comunes utilizados en la industria,
tambien se hace un breve resumen de los antibioticos los cuales son
un medio de controlar los microorganismos en el cuerpo humano, lo
cual es un campo de importancia dentro de la microbiologia.
Qumicamente , se realizan anlisis para determinar los niveles
de conservantes, los componentes de los alimentos, etc.
Desde el punto de vista economico el control microbiologico toma
un papel importante, por ejemplo en la industria alimenticia, los
alimentos procesados que contienen microorganismos peligrosos deben
ser destruidos. Si ya estn distribuidos y puestos a la venta deben ser
retirados e intervenidos. Cuando un producto es intervenido se notifica la
marca, el tamao del envase, el lote y el tipo de peligro.
Se puede prevenir el crecimiento de los microorganismos en los
alimentos controlando las condiciones de almacenamiento
(principalmente de temperatura y humedad) as como reduciendo el
tiempo que los alimentos estn en la planta hasta su procesado.

CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS:

ESTERILIZACION Y DESINFECCION

I.- DEFINICIONES Y CONCEPTOS

Esterilizacin:
proceso de destruir los agentes infecciosos o
microorganismos incluyendo sus formas de resistencia, por
medio de agentes fisicos o quimicos.
Es el proceso de destruir todas las formas de vida microbiana. Por
tanto, genera una situacin en la que la probabilidad de que el objeto
tratado contenga siquiera un superviviente es infinitamente pequea.
As, un objeto esterilizado, en sentido microbiolgico, est libre de
microorganismos vivos. El nico criterio vlido de muerte en el caso
de un microorganismo es la prdida irreversible de la capacidad de
reproducirse.
Eiminacin de toda forma de vida, includas las esporas.
Desinfeccin:
proceso de destruir los agentes infecciosos o
microorganismos pero no sus formas de resistencia, por medio
de agentes fisicos o quimicos.
Sanitizacion:

proceso por el cual se destruyen los microorganismos a

niveles tales que son inocuos para el proceso industrial en que
se relacionan o para los seres humanos que alli operan.
Un compuesto por lo general qumico que mata o interfiere con
el crecimiento y actividad de los microoganismos. Se clasifica de
acuerdo a su aplicacin y a como acta.
Agente antimicrobial:
es un compuesto por lo general qumico que mata o interfiere
con el crecimiento y actividad de los microoganismos. Se clasifica de
acuerdo a su aplicacin y a como acta.
Germicida:
es un agente qumico que mata los microorganismos pero no
necesariamente las esporas (ej. Los bactericidas matan bacterias,
los fungicidas matan hongos, los viricidas matan virus).
Agente microbiosttico:
es uno que inhibe el crecimiento de los microoganismos pero
no los mata (ej. bacteriosttico inhibe el crecimiento bacterial).
Antisepsia:
operaciones o tcnicas encaminadas a crear un ambiente que
impida el desarrollo de los microorganismos e incluso pueda
matarlos.
Asepsia:
tcnicas empleadas para impedir el acceso de
microorganismos al campo de trabajo.
Antibiosis:

fenmeno biolgico en el que existe una detencin o

destruccin del crecimiento microbiano debido a sustancias
producidas por otro ser vivo.
Microbicidas:
sustancias que matan las formas vegetativas, pero no
necesariamente las esporas de un microorganismo (bactericida,
fungicida, etc.).
Microbiostticos:
sustancias que inhiben el crecimiento de microorganismos
(bacteriostticos, fungistticos, etc.).
Antispticos:
se refiere a sustancias que se aplican sobre el cuerpo.
Desinfectantes:
se refiere a sustancias empleadas sobre objetos inanimados.
Agentes teraputicos:
antimicrobianos empleados en el tratamiento de infecciones.
Agentes quimioteraputicos:
sustancias qumicas empleadas en el tratamiento de
enfermedades infecciosas o enfermedades causadas por la
proliferacin de clulas malignas.
Antibiticos:
sustancias producidas por un ser vivo que se oponen a la vida
de otro ser vivo.
Medio de cultivo:

substrato ptimo para el mantenimiento y crecimiento de

microorganismos en el laboratorio. El medio variar dependiendo del
tipo de microorganismo.
Un cultivo que contiene solamente una clase de
microorganismo se conoce como cultivo puro o axnico. Un cultivo
que contiene ms de una clase de microorganismo se conoce como
cultivo mixto; en el caso especial de que contenga slo dos clases de
microorganismos, deliberadamente mantenidos en mutua asociacin,
se trata de un cultivo bimembre.
Aislamiento:
es la separacin de un microorganismo determinado de las
poblaciones mixtas que existen en la naturaleza; el cultivo, es el
crecimiento de poblaciones microbianas en ambientes artificiales
(medios de cultivo) bajo condiciones de laboratorio.
II. MUERTE DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS Y CURVAS
DE SUPERVIVENCIA
Criterio de muerte de un microorganismo:
prdida irreversible de la capacidad de reproduccin en un
medio adecuado. Para poder determinar la eficacia antimicrobiana (la
muerte de los microorganismos) se utilizan tcnicas que descubran a
los sobrevivientes es decir, a los capaces de reproducirse; ya que los
incapaces de reproducirse estn muertos. Esto se determina
generalmente mediante mtodos cuantitativos de siembra en placa
en los que los supervivientes se detectan porque forman colonias.
Cuando una poblacin microbiana se expone a un agente letal,
la cintica de la muerte es casi siempre exponencial ya que el
nmero de supervivientes disminuye de forma geomtrica con el
tiempo. Si representamos grficamente el logaritmo del nmero de
supervivientes frente al tiempo se obtiene una lnea recta cuya
pendiente negativa define la tasa de mortalidad. Esta tasa de
mortalidad nos dice slamente que fraccin de la poblacin inicial

sobrevive a un determinado perodo de tratamiento. Para determinar

el nmero real de sobrevivientes es necesario conocer adems el
tamao inicial de la poblacin. De acuerdo con esto, para establecer
los procedimientos de esterilizacin hay que tener en consideracin
dos factores: la tasa de mortalidad y el tamao de la poblacin inicial.
En la prctica de la esterilizacin la poblacin microbiana que ha de
ser destruida es mixta. Como los microorganismos difieren
ampliamente en su resistencia a los agentes letales, los factores que
se hacen significativos son el tamao de la poblacin inicial y la tasa
de mortalidad de los miembros ms resistentes de la poblacin
mixta. Para asegurar la fiabilidad de los mtodos de esterilizacin se
utilizan suspensiones de esporas de resistencia conocida. Los
procedimientos rutinarios de esterilizacin se disean siempre de
forma que proporcionen un amplio margen de seguridad.
Fundamentos del control de los microorganismos
Las razones principales para controlar los microorganismos
son: prevenir la transmisin de enfermedades, evitar el deterioro de
los alimentos y evitar la contaminacin tanto en procesos industriales
que requieran cultivos puros, como en laboratorios de diagnstico o
investigacin.

III. CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCION

ANTIMICROBIANA
Concentracin del agente qumico
Intensidad del agente fsico- cuanto ms intenso es el agente fsico
(calor o radiacin ) mas rpidamente mata a los micoorganismos.
Tiempo de exposicin- a mayor tiempo de exposicin, mayor es el
nmero de organismos destrudos.
Temperatura a mayor temperatura se acelera la destruccin de los
organismos.

Nmero de organismos- mientras mayor sea la poblacin

microbiana, ms tiempo se requeire para matarla
Clase de organismo las clulas vegetativas son ms suceptibles
que la esporas.
Estado fisiolgico de las clulas mientras ms viejas sean las
clulas, ms rpido se destruyen.
Ambiente:
El calor es ms eficaz en un medio cido que en uno alcalino.
La consistencia del material, acuoso o viscoso, influye
marcadamente en la penetracin del agente.
Las concentraciones altas de carbohidratos aumentan, por lo
general, la resistencia trmica de los organismos.
La presencia de materia orgnica extraa reduce notablemente
la eficacia de los agentes qumicos antimicrobianos por
inactivar stos o proteger al microorganismo.

IV.- AGENTES ESTERILIZANTES FISICOS

1.- Altas Temperaturas
La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad
es uno de los mtodos ms efectivos para destruir microorganismos.
Hay que distinguir entre calor hmedo y calor seco. El hmedo mata
los microorganismos porque coagula sus protenas siendo ms
rpido y efectivo que el calor seco que los destruye al oxidar sus
constituyentes qumicos. La accin letal del calor es una relacin de
temperatura y tiempo afectada por muchas condiciones. Por ejemplo,
las esporas de Clostridium botulinum son destruidas en 4 a 20
minutos a 120 C en calor hmedo, mientras que se necesitan
alrededor de 2 horas de exposicin al calor seco para obtener los
mismos resultados.
A.- Esterilizacin por calor hmedo: (se utiliza para soluciones
acuosas)

Autoclave:
El calor en la forma de vapor a saturacin y a presin es el
agente ms prctico para esterilizar ya que el vapor a presin
proporciona temperaturas superiores a las que se obtienen por
ebullicin. El aparato utilizado se llama autoclave (una olla que
regula la presin interna y el tiempo). Los autoclaves de laboratorio
se emplean generalmente a una presin de vapor de una atmsfera
por encima de la presin atmosfrica lo cual corresponde a una
temperatura de 120 C. El tiempo de exposicin depende del
volumen del lquido, de tal manera que para volmenes pequeos
(hasta unos 3 litros) se utilizan 20 minutos a 120 C; si los volmenes
son mayores debe alargarse el tiempo de tratamiento. Algunos
materiales no se deben esterilizar en el autoclave. Sustancias que no
se mezclan con el agua no pueden ser alcanzadas por el vapor
sobreviviendo los microorganismos que contengan. Otras sustancias
se alteran o son destruidas por tratamientos prolongados de calor
emplendose en estos casos otros mtodos de esterilizacin.
Tindalizacin:
Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden
calentarse por encima de 100 C sin que resulten daadas. Consiste
en el calentamiento del material de 80 a 100 C hasta 1 hora durante
3 das con sucesivos perodos de incubacin. Las esporas
resistentes germinarn durante los perodos de incubacin y en la
siguiente exposicin al calor las clulas vegetativas son destruidas.
Pasteurizacin:
La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y vino) se
someten a tratamientos de calor controlado que slo matan a ciertos
tipos de microorganismos pero no a todos. La leche pasteurizada no
es estril. La temperatura seleccionada para la pasteurizacin se
basa en el tiempo trmico mortal de microorganismos patgenos (es
el tiempo ms corto necesario para matar una suspensin de
bacterias a una temperatura determinada). Mycobacterium
tuberculosis es de los microorganismos patgenos ms resistentes al
calor que puede transmitirse por la leche cruda y se destruye en 15
minutos a 60 C. Posteriormente se descubri que Coxiella burnetti,
agente causal de la fiebre Q, se encuentra a veces en la leche y es

ms resistente al calor que Mycobacterium tuberculosis por lo que la

pasteurizacin de la leche se realiza a 62,8 C durante 30 minutos o
a una temperatura ligeramente superior, 71,7 C durante 15
segundos (Flash-Pasteurizacin).
B.- Esterilizacin por calor seco: (se utiliza para materiales slidos
estables al calor)
Horno Pasteur:
El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar material
de vidrio y otros materiales slidos estables al calor. El aparato que
se emplea es el horno Pasteur. Para el material de vidrio de
laboratorio se consideran suficientes dos horas de exposicin a 160
C.
Incineracin:
La destruccin de los microorganismos por incineracin es una
prctica rutinaria en los laboratorios. Las asas de siembra se
calientan a la llama de mecheros Bunsen. La incineracin tambin se
utiliza en la eliminacin de residuos hospitalarios.
2.- Bajas Temperaturas
En general, el metabolismo de las bacterias est inhibido a
temperaturas por debajo de 0 C. Sin embargo estas temperaturas
no matan a los microorganismos sino que pueden conservarlos
durante largos perodos de tiempo. Esta circunstancia es
aprovechada por los microbilogos para conservar los
microorganismos indefinidamente. Los cultivos de microorganismos
se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en tanques de
nitrgeno lquido a -196 C.
3.- Radiaciones

A.- Radiaciones ionizantes

Rayos gamma:
Las radiaciones gamma tienen mucha energa y son emitidas
por ciertos istopos radiactivos como es el Co60 pero son difciles de
controlar ya que este istopo emite constantemente los rayos gamma
en todas direcciones. Estos rayos gamma pueden penetrar los
materiales por lo que un producto se puede empaquetar primero y
despus esterilizar.
Rayos catdicos (Radiacin con haz de electrones):
Se usan para esterilizar material quirrgico, medicamentos y
otros materiales. Una ventaja es que el material se puede esterilizar
despus de empacado (ya que stas radiaciones penetran las
envolturas) y a la temperatura ambiente.

B.- Radiaciones no ionizantes

Luz ultravioleta:
La porcin ultravioleta del espectro incluye todas las
radiaciones desde 15 a 390 nm. Las longitudes de onda alrededor de
265 nm son las que tienen mayor eficacia como bactericidas (200 295 nm). Se usan para reducir la poblacin microbiana en
quirfanos, cuartos de llenado aspticos en la industria farmacutica
y para tratar superficies contaminadas en la industria de alimentos y
leche. La luz UV tiene poca capacidad para penetrar la materia por lo
que slo los microorganismos que se encuentran en la superficie de
los objetos que se exponen directamente a la accin de la luz UV son
susceptibles de ser destrudos.
4.- Presin osmtica
La pared celular de las bacterias las protege de cambios en la
presin osmtica del medio.Sin embargo si la presin osmtica
externa es alta el organismo puede morir. Altas concentraciones de

sal interrumpen los procesos de transporte a travs de la

membrana y desnaturalizan las protenas
5.- Ondas ultrasnicas (sonicacin)
En general, los microorganismos suspendidos en un lquido y
sometidos a la accin de ondas ultrasnicas de altas intensidades
(20,000 ciclos/seg.) durante cierto tiempo se destruyen porque se
rompe la pared celular y se pierde el contenido de la clula.
6.- Filtracin
Algunos materiales como los lquidos biolgicos (suero de
animales, soluciones de enzimas, algunas vitaminas y antibiticos)
son termolbiles. Otros agentes fsicos como las radiaciones son
perjudiciales para estos materiales e imprcticos para esterilizarlos,
por lo que se recurre a la filtracin a travs de filtros capaces de
retener los microorganismos. Los microorganismos quedan retenidos
en parte por el pequeo tamao de los poros del filtro y en parte por
adsorcin a las paredes del poro durante su paso a travs del filtro
debido a la carga elctrica del filtro y de los microorganismos. Debido
al pequeo tamao de los virus, nunca es posible tener certeza de
que, por los mtodos de filtracin que dejan libre de bacterias una
solucin, se van a eliminar tambin los virus.
A.- Filtros de membrana
Los filtros de membranas son discos de steres de celulosa
con poros tan pequeos que previenen el paso de los
microorganismos. Existen distintos tipos de filtro dependiendo del
tamao de poro. Estos filtros son desechables. Adems de utilizarse
en la esterilizacin de lquidos se usan en el anlisis microbiolgico
de aguas ya que concentran los microorganismos existentes en
grandes volmenes de agua.
B.- Filtros HEPA
Un filtro HEPA (High Efficiency Particulate Air) est compuesto
por pliegues de acetato de celulosa que retienen las partculas
(includos los microorganismos) del aire que sale de una campana de
flujo laminar.

7.- Desecacin
La desecacin de las clulas vegetativas microbianas paraliza
su actividad metablica. Este proceso fsico se utilizaba ampliamente
antes del desarrollo de la refrigeracin. El tiempo de supervivencia
de los microorganismos despus de desecados depende de muchos
factores, entre ellos la especie microbiana. En general, los cocos
Gram (-) son ms susceptibles a la desecacin que los cocos Gram
(+). Las endoesporas bacterianas son muy resistentes a la
desecacin pudiendo permanecer viables indefinidamente.

V.- AGENTES ESTERILIZANTES QUIMICOS

1.- Oxido de etileno:
El requerimiento esencial para un agente qumico esterilizante
es que sea voltil as como txico para los microorganismos, de
manera que pueda ser fcilmente eliminado del objeto esterilizado
despus del tratamiento. Normalmente se utiliza el xido de etileno,
un lquido que hierve a 10,7 C. Se usa en la industria para la
esterilizacin de placas Petri, jeringas y otros objetos de plstico que
se funden a temperaturas superiores a los 100 C. Debido a su alto
poder de penetracin estos objetos se empaquetan primero y
despus se esterilizan. El xido de etileno acta inactivando enzimas
y otras protenas que contienen grupos sulfidrilos (R-SH) mediante
una reaccin llamada alquilacin (R-S-CH2CH2O-H).
2.- Glutaraldehido:
Una solucin acuosa al 2% presenta una amplia actividad
antimicrobiana. Es efectivo frente a virus, clulas vegetativas y
esporas de bacterias y hongos. Se usa en medicina para esterilizar
instrumentos urolgicos y pticos.

VI.- DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS

Esterilizacin:
es el proceso de destruccin de todas las formas de vida
microbiana.
Desinfeccin:
es el proceso de destruccin de los agentes infecciosos.
Desinfectantes:
son aquellas sustancias qumicas que matan las formas vegetativas
y no necesariamente las formas de resistencia de los
microorganismos patgenos. Se refiere a sustancias empleadas
sobre objetos inanimados.
Ningn agente qumico antimicrobiano slo es el mejor o ideal para
uno o todos los propsitos. Existen diferencias en sus mecanismos
de accin y muchos tipos de clulas microbianas que pueden ser
destrudas. No obstante, existen una serie de caractersticas que
debe de tener un buen desinfectante, y son las siguientes:
- Actividad antimicrobiana: el primer requerimiento es la capacidad
de la sustancia para matar microorganismos. As, la sustancia
qumica a baja concentracin deber tener un amplio espectro de
actividad antimicrobiana.
- Solubilidad: la sustancia deber ser soluble en agua y/u otros
disolventes en la medida necesaria para un uso eficaz.
- Estabilidad: los cambios en la restbilidad de la sustancia debern
ser mnimos y no afectar considerablemente la accin germicida.
- No deber ser txica para el hombre u otros animales: de manera
ideal, la sustancia deber ser letal para los microorganismos y no
para el hombre u otros animales.
- Homogeneidad: la preparacin deber ser uniforme en su
composicin de manera que los ingredientes activos se encuentren
en cada aplicacin.

- No deber reaccionar con material orgnico extrao: muchos

desinfectantes tienen afinidad por las protenas y otros materiales
orgnicos. Cuando se usan estos desinfectantes en situaciones en
las que adems de bacterias hay cantidades considerables de
material orgnico, muy poco desinfectante estar disponible para
actuar contra los microorganismos.
- Toxicidad para los microorganismos a la temperatura del ambiente
donde se usar.
- Capacidad de penetracin: a menos que la sustancia pueda
penetrar a travs de las superficies, su accin germicida se limitar al
sitio de aplicacin.
- No deber corroer ni teir.
- Propiedad desodorante: es deseable que tenga atributos
desodorantes, as como desinfectantes. Lo ideal es que el
desinfectante tenga por s mismo olor agradable o sea inodoro.
- Capacidad detergente: un desinffectante que a la vez sea
detergente (agente limpiador) aumentar la eficacia del
desinfectante.
- Disponibilidad: el compuesto deber estar dispnible en grandes
cantidades y a precio razonable.
Antispticos:
son aquellas sustancias qumicas que previenen el crecimiento o
accin de los microorganismos ya sea destruyndolos o inhibiendo
su crecimiento y actividad. Se refiere a sustancias que se aplican
sobre el cuerpo.
A.- INORGANICOS
1.- Metales:

Los ms efectivos son el mercurio, plata ,cobre y zinc. Actan

inactivando las protenas celulares al combinarse con ellas. Entre los
compuestos de mercurio que se emplean como antispticos en
heridas superficiales de la piel y mucosas estn el mercurocromo
(mercromina) y el mertiolato. Entre los compuestos de plata
utilizados como antispticos est el nitrato de plata (AgNO3) que en
solucin al 1% se ha utilizado para prevenir infecciones gonoccicas
en los ojos de los recin nacidos aunque actualmente se est
reemplazando por antibiticos como la penicilina. Entre los
compuestos de cobre se encuentra el sulfato de cobre (CuSO4) que
se utiliza como algicida en los recipientes abiertos que contienen
agua. Tambin es fungicida por lo que se utiliza para controlar las
infecciones fngicas de plantas (Mezcla Bordolesa). Los compuestos
de zinc tambin son fungicidas por lo que se utilizan para tratar el pi
de atleta.
2.- Acidos y lcalis:
Actan alterando la permeabilidad y coagulando las protenas.
En general los cidos son ms eficaces que los lcalis. Dentro de
estos compuestos se encuentran el sulfrico (H2SO4), ntrico
(HNO3), hidrxido sdico (NaOH) e hidrxido potsico (KOH).
Tienen aplicacin limitada debido a su naturaleza custica y
corrosiva. An as el NaOH se utiliza en la industria del vino para
limpiar las cubas de madera.
3.- Compuestos inorgnicos oxidantes:
actan oxidando los componentes de la membrana y enzimas.
El agua oxigenada (H2O2) al 6% (20 volmenes) se utiliza como
antisptico en pequeas heridas de la piel.
4.- Halgenos:
Los halgenos especialmente el cloro y el iodo son
componentes de muchos antimicrobianos. Los halgenos son
agentes fuertemente oxidantes por lo que son altamente reactivos y
destructivos para los componentes vitales de las clulas microbianas.

Cloro:
La muerte de los microorganismos por accin del cloro se debe
en parte a la combinacin directa del cloro con las protenas de las
membranas celulares y los enzimas. As mismo en presencia de
agua desprende oxgeno naciente (O) que oxida la materia orgnica:
Cl2 + H2O ----------------> HCl + HClO (cido hipocloroso)
HClO ----------------> HCl + O (oxgeno naciente)
El gas cloro licuificado se utiliza en la desinfeccin del agua de
bebida y piscinas. El hipoclorito sdico (leja) al 1% se puede utilizar
como desinfectante domstico.
Iodo:
El mecanismo mediante el cual el iodo ejerce su accin
antimicrobiana es debido a su accin oxidante. Adems la habilidad
que tiene el iodo para combinarse con el aminocido tirosina resulta
en la inactivacin de enzimas y otras protenas. El iodo se puede
utilizar como antisptico bajo dos formas: i) tintura de iodo, es una
solucin alcohlica (tintura) de iodo (I2) ms ioduro potsico (KI) o
ioduro sdico (NaI). ii) iodforos, son mezclas de iodo (I2) con
compuestos que actan como agentes transportadores y
solubilizadores del iodo. Por ejemplo, la povidona iodada (Betadine)
es un complejo de iodo y polivinil pirrolidona (PVP). Los iodforos
tienen la ventaja de que no tien la piel. Las preparaciones de iodo
se utilizan principalmente para desinfectar la piel as como en la
desinfeccin de pequeas cantidades de agua. Los vapores de iodo
se utilizan a veces para desinfectar el aire.
B.- ORGANICOS
1.- Alcoholes:
El alcohol metlico (1C) es menos bactericida que el etlico (2C)
y adems es altamente txico. Hay un aumento en el poder

bactericida a medida que aumenta la longitud de la cadena

carbonada; pero como los alcoholes con peso molecular superior al
del proplico (3C) no se mezclan en todas las proporciones con el
agua, no se suelen utilizar como desinfectantes. Los alcoholes
actan desnaturalizando las protenas, disolviendo las capas lipdicas
y como agentes deshidratantes. El etanol al 96% se usa como
antisptico de la piel y como desinfectante en los termmetros
clnicos orales y algunos instrumentos quirrgicos.
2.- Fenol y compuestos fenlicos:
Una solucin acuosa al 5% de fenol mata rpidamente a las
clulas vegetativas de los microorganismos. Sin embargo, las
esporas son mucho ms resistentes al fenol. Debido a que el fenol es
txico y tiene un olor desagradable ya casi no se usa como
desinfectante o antisptico, siendo reemplazado por compuestos
fenlicos que son sustancias derivadas del fenol menos txicas y
ms activas frente a los microorganismos. Lysol es una mezcla de
compuestos fenlicos que se utiliza para desinfectar objetos
inanimados como los suelos, paredes y superficies. El fenol y
compuestos fenlicos actan alterando la permeabilidad de la
membrana citoplsmica as como desnaturalizando protenas.
VII.-

EVALUACION

DE

LA ACTIVIDAD

ANTIMICROBIANA

DE

LOS

DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS

Para el estudio de los microorganismos es necesario cultivarlos

en condiciones de laboratorio. Para ello hay que conocer los
nutrientes y condiciones fsicas que requieren, informacin que
disponemos tras investigaciones extensas y con las que se han
desarrollado numerosos medios de cultivo.
Condiciones generales de un medio de cultivo:
- presentar todos los elementos necesarios y en sus
proporciones/cantidades necesarias.
- pH adecuado.
- condiciones osmticas adecuadas.

- debe de ser estril y preservado de cualquier contaminacin.

- medio fresco (ya que se desecan y pierden humedad,
concentrndose el resto de componentes).
Componentes de los medios de cultivo:
- Agua
- Extracto de levadura:
fuente rica en vitaminas B; tambin contiene
nitrgeno orgnico y compuestos de carbono.
- Peptonas:
es el producto que resulta de la digestin de
materiales proteicos. Constituye una fuente principal de
nitrgeno orgnico; contiene tambin algunas vitaminas,
y a veces carbohidratos. Distinguimos dos tipos,
dependiendo del tipo de digestin que hayan sufrido:
- Hidrlisis qumica (cida o alcalina)
- Hidrlisis enzimtica
- Infusiones y extractos:
contienen las sustancias solubles en agua de
tejidos animales (carbohidratos, compuestos orgnicos
nitrogenados, vitaminas solubles en agua y sales).
Mientras que un caldo se obtiene por ebullicin de los
tejidos, una infusin implica un "colado" del lquido
obtenido. Un extracto es un concentrado de un caldo.
- Azcares:
actuarn como fuente de energa (cuando su
proporcin es de 1 g/l) o como substrato de prueba (12%)
- Sales minerales:

podemos distinguir dos tipos, atendiendo a la

funcin que desempean. Estos son:
Sales para el mantenimiento de la presin osmtica (NaCl).
Tampones: carbonatos y fosfatos (este ultimo ms eficaz).
- Indicadores de pH:
son sustancias que cambian de color cuando el
medio alcanza algn valor determinado de pH. Los ms
utilizados son:
-Azul de timol (Rojo 1,2 Azul 2,8 Amarillo)
- Prpura bromocresol (Amarillo 5,2 Anaranjado
6,8 Prpura)
- Azul de bromotimol (Amarillo 6,0 Verde 7,6
Azul)
- Rojo fenol (Amarillo 6,8 Rojo claro 8,4 Rojo
cereza)
- Rojo neutro (Rojo intenso 6,8 Rojo 8,0 Amarillo)
- Azul de bromofenol, rojo de metilo, rojo de
cresol, fenolftaleina, etc...
- Indicadores REDOX:
son sustancias que cambian de color cuando se
producen este tipo de reacciones. Distinguimos:
Azul de metileno (azul-incoloro)
Cloruro de trifenil (incoloro-rojo)
- Agentes selectivos:
son sustancias que inhiben el crecimiento de
determinados microorganismos en decrimento de otros.
Encontramos varios tipos:
- Colorantes (antimetabolitos): cristal violeta,
verde brillante, etc...
- Azida sdica: inhibe el metabolismo aerobio
(inhibe la cadena respiratoria); esto afecta
principalmente a bacterias Gram negativas.

- Sales biliares y detergentes: son agentes

tensoactivos, depresores de la tensin
superficial. En este caso son las bacterias Gram
negativas las que resisten ms su accin.
- Cloruro sdico: a elevadas concentraciones
son perjudiciales para aquellos microorganismos
no halfilos.
- pH: cada tipo de microorganismo tiene su
rango de pH ptimo y sus valores crticos.
- Antimicrobianos: sustancias capaces de matar
a microorganismos.
- Suplementos (factores de crecimiento):
consiste en uno o mas compuestos orgnicos que un
microorganismo requiere como precursor o como constituyente
de su material orgnico celular, pero que no puede sintetizar a
partir de fuentes de carbono ms sencillas, y debe ser
administrado como nutriente. Hay tres clases: aminocidos,
pirimidinas y vitaminas.
- Agentes solidificantes:
permiten solidificar un medio previamente lquido.
Pueden ser de:
- agar-agar (a partir de 10-14 g/l es un medio de
cultivo slido; para valores inferiores, medios
semislidos).
- gel de slice
- geles poliacrlicos
- Agentes reductores:
estos disminuyen el contenido de O2, obtenindose as
un ambiente de anaerobiosis. Los ms usados son:
- cido ascrbico
- Tioglicolato sdico
- cido tiomlico
- Cisteina

- Agentes quelantes:
son agentes que forman complejos solubles con los
metales, impidiendo as que estos formen un complejo
insoluble con los fosfatos. El ms utilizado es el EDTA (cido
etilendiamino tetraactico).
Clasificacin de los medios de cultivo: atiende a distintos criterios.
Estos son:
- Composicin qumica:
- Definidos o sintticos
- Indefinidos o complejos
- Origen de sus componentes:
- Artificiales
- Naturales
- Mixtos
- Estado fsico:
- Slidos: rebanadas de pan, etc...
- Lquidos (caldos): caldo nutritivo, leche desnatada, etc...
- Semislidos: con pequeas cantidades de agar
(consistencia de "natilla")
- Slidos reversibles a lquidos: agar nutritivo.
- Uso o aplicacin:
- Comunes
- Especiales:
- Medios enriquecidos: adicin de componentes, como
sangre, suero, etc..., para proporcionar sustancias
nutritivas complementarias para que el medio pueda
soportar el crecimiento de los hetertrofos exigentes.
- Medios selectivos: medio con ciertas sustancias
qumicas especficas que no permitirn el desarrollo de
un grupo de bacterias, sin inhibir a su vez el crecimiento
de otros grupos.
- Medios diferenciales: ciertos reactivos o sustancia

qumicas que dan lugar a determinado tipo de

crecimiento bacteriano o cambios para diferenciar las
bacterias.
- Medios de prueba: para el ensayo de vitaminas,
aminocidos y antibiticos se utilizan medios de
composicin experimental. Tambin se utiliza este tipo de
medio para probar desinfectantes.
- Medios para recuento: utilizado para el recuento de
microorganismos en una muestra.
- Medios de caracterizacin bacteriana: para determinar
el tipo de crecimiento producido por los organismos y la
capacidad de la bacteria para producir cambios qumicos.
- Medios de mantenimiento: para conservar al
microorganismo durante un elevado tiempo sin daar su
estructura.
Un medio de cultivo ha de estar libre de microorganismos (solo
queremos aquellos que vamos a estudiar). Por ello se debe de
utilizar material y componentes esterilizados.
1.- Tcnica de dilucin en tubo:
Primero se realizan diferentes diluciones del agente qumico. El
mismo volumen de cada dilucin se dispensa en tubos estriles. A
cada tubo se le aade la misma cantidad de una suspensin del
microorganismo utilizado como prueba. A determinados intervalos de
tiempo se transfiere una alcuota de cada tubo a otro tubo que
contenga medio de cultivo.
Estos tubos inoculados se incuban a la temperatura ptima de
crecimiento del microorganismo utilizado como prueba durante 24 a
48 horas. Al cabo de este tiempo se examina el crecimiento del
microorganismo mediante la aparicin de turbidez en el tubo
(crecimiento +) o ausencia de turbidez (crecimiento -). Aquellos tubos
que presenten crecimiento negativo indican la dilucin a la cual ese
agente qumico mata al microorganismo utilizado como prueba
cuando este microorganismo es expuesto al agente qumico durante
ese perodo de tiempo.

2.- Tcnica de la placa de agar:

Se inocula una placa que contenga medio de cultivo slido con
el microorganismo utilizado como prueba. El agente qumico se
coloca en el centro de la placa, bien dentro de un cilindro o
impregnado en un disco de papel. Al cabo de 24 a 48 horas se
observan zonas de inhibicin (crecimiento -) alrededor del agente
qumico. Una modificacin de esta tcnica es la incorporacin del
agente qumico en el medio de cultivo antes de verterlo sobre la
placa. Una vez solidificado se inocula con el microorganismo
utilizado como prueba, se incuba y se examina el crecimiento
microbiano.
3.- Tcnica del coeficiente fenlico:
Es una tcnica estandarizada que se utiliza para comparar el
poder desinfectante de un agente qumico frente al del fenol. Es una
modificacin de la tcnica de dilucin en tubo tal como se describe a
continuacin: (i) Se prepara una serie de tubos conteniendo cada
uno 5 ml de diferentes diluciones del desinfectante. (ii) A la vez se
prepara una segunda serie de tubos que contengan diferentes
diluciones de fenol. (iii) Cada tubo de las dos series se inocula con
0,5 ml de un cultivo de 24 horas del microorganismo utilizado como
prueba (cepas especficas de Salmonella typhi o Staphylococcus
aureus). (iv) A los 5, 10 y 15 minutos se recoge una alcuota de cada
tubo que se inocula en otro tubo que contenga medio de cultivo
estril. (v) Estos tubos inoculados se incuban durante 24 a 48 horas
y se observa el crecimiento del microorganismo (aparicin de
turbidez). (vi) La mayor dilucin del desinfectante que mate a los
microorganismos en 10 minutos pero no los mate en 5 minutos se
divide por la dilucin mayor de fenol que d los mismos resultados.
El nmero obtenido es el coeficiente fenlico de ese desinfectante.
4. TECNOLOGIA PARA EL CONTROL MICROBIOLOGICO
BetzDearborn ha elaborado un sistema para medir de control microbiolgico,
denominado BioscanTM2, que consigue eliminar el periodo de incubacin que requieren los
mtodos de cultivo tradicionales. Funciona midiendo la luz que se produce cuando los reactivos
enzimticos reaccionan con el ATP del microorganismo, sustancia que se encuentra en todas las

clulas vivas. Se dispone de resultados inmediatos en campo que indican la poblacin

microbiolgica total de bacterias aerbicas y anaerbicas, hongos, levaduras, algas y protozoos.
Como resultado, se pueden reducir los costes de limpieza y de mantenimiento, disminuir el
nmero de paros no programados y mejorar considerablemente la productividad.

VIII.- ANTIBIOTICOS
1.- Determinacin del espectro de accin de un antibitico:
Los antibiticos son una clase especial de agentes
quimioterapeuticos, obtenidos generalmente de organismos vivos. La
palabra antibitico se refiere a un producto metablico de un
organismo que es perjudicial o inhibitorio, en muy pequeas
cantidades para otros microorganismos. Para que un antibitico sea
til como agente quimioteraputico debe reunir las siguientes
cualidades:
- Amplio espectro de accin: debe ser capaz de destruir o
inhibir
muchas especies de microorganismos
patgenos.
- Impedir la aparicin rpida de formas resistentes del parsito.
- No debe producir efectos secundarios: reacciones de
sensibilidad o alergia, dao al sistema nervioso o irritacin de
los riones y conducto gastrointestinal son posibles efectos
colaterales indeseables en el huesped.
- No debe eliminar la flora microbiana normal del huesped.
2.- Pruebas de susceptibilidad (antibiograma):
La susceptibilidad de un microorganismo a un antibitico y a otros
agentes quimicoterapeuticos se determina por las tcnicas de
dilucin en tubo o por la del disco en placa.
-. Mtodo de disco en placa de agar (difusin en disco):
Este mtodo es el que se usa comnmente para determinar la
susceptibilidad de los microorganismos a los agentes
quimioteraputicos.

Se colocan pequeos discos de papel impregnados con cantidades

conocidas del agente (disponibles en el comercio) sobre la superficie
de una placa sembrada (cesped bacteriano). Ocurren, pues, dos
procesos: el microorganismo empieza a crecer y el antibitico
difunde, de tal forma que alrededor del disco hay un gradiente de
concentacin de antibitico.
Despus de la incubacin se examina la placa buscando zonas de
inhibicin del desarrollo alrededor de los discos (halo de inhibicin).
Una zona de inhibicin (rea clara) alrededor del disco indica que el
organismo fue inhibido por el agente difundido en el agar desde el
disco. El dimetro del halo nos indica si la bacteria es resistente "R",
presenta resistencia intermedia "I", o es sensible al antibitico "S".
Factores que influyen en el resultado:
a) Tipo de medio de cultivo: para que no influya, se usa siempre
"Agar Mueller-Hinton". Si hay que suplementar este hay que realizar
un control utilizando una cepa de referencia para ver si el suplemento
provoca cambios. Se prueba con las siguientes cepas de referencia:
Escherichia coli
Staphylococcus aureus
Pseudomona aeruginosa
Si los halos no son iguales a los definidos, entonces el suplemento
est provocando cambios en el resultado.
b) Volumen del medio de cultivo: el antibitico no solo difunde en
superficie, sino tambin en profundidad. Por ello tambin se
estandariza la altura de cepa de agar, y este es de 4 mm.
c) Carga o concentracin de antibitico en los discos: la cantidad de
antibitico vendr expresado en mg o U.I. Los discos han de
conservarse entre 4C - 8C, y una vez que vayan a ser utilizados
hay que dejar que se estabilicen a temperatura ambiente.
d) Inculo y siembra: el inculo tambin influye (cuantas ms
bacterias, el halo ser de menor tamao). El nmero de clulas que
se deben de poner en una placa se estandariza mediante la "escala

de MacFarland". Se ajusta la turbidez a 0'5 de escala MF (cuando

este nmero es mayor mas concetracin de sal de bario tiene la
escala). En cuanto a la forma de sembrar: hay que conseguir un
cesped homogeneo. Para ello sembramos pasando un bastoncillo
impregnado con la bacteria en primer lugar en un sentido, se gira 60
y se hacen estras cruzando las anteriores. Repetimos el giro y la
siembra. Finalmente inoculamos el borde de la placa.
Colocacin de los discos: con unas pinzas flameadas con alcohol
ponemos los discos en la placa, procurando ponerlos separados
unos de otros y del borde de la placa. Los discos han de ir sobre el
agar (damos un golpe suave). Pasados 15 minutos invertimos la
placa e incubamos.
El mtodo del disco nico para cada antibitico es la prueba de
susceptibilidad recomendada usualmente por la FDA de Estados
Unidos (Administracin de alimentos y drogas)
- Tcnica de dilucin en tubo:
Consiste en lo siguiente: en una serie de tubos que contienen
el medio de cultivo adecuado y sembrados con el organismo que se
prueba, se ponen cantidades crecientes del antibitico que se
estudia. Despus de la incubacin se determina la concentracin de
la droga necesaria para inhibir el desarrollo del organismo que se
prueba por la falta de desarrollo.
3.- Conjugacin bacteriana:
La conjugacin es un proceso mediante el cual ciertas clulas
bacterianas transfieren DNA a una segunda clula con la que entran
en contacto. La capacidad para transferir DNA por conjugacin
depende de la presencia de una entidad citoplasmtica denominada
factor de fertilidad o F. Las clulas portadoras de F se conocen como
F+, y las clulas que no contienen F se conocen como F -.
El factor F se trata de un pequeo elemento circular que funciona
como un minicromosoma (contiene aprox. 100 genes). Las clulas
portadoras de F producen pili ( pilus en singular), que son pequeos
tbulos proteicos que permiten a las clulas F+ adherirse y mantener
contacto con las clulas F-. La transferencia del factor F se produce

siempre (logicamente) de las clulas F+ a las clulas F-. Existen las

denominadas "cepas de alta frecuencia de recombinacin" (Hfr). Esto
ocurre cuando, ocasionalmente, F deja el citoplasma y se integra en
el cromosoma de la clula hospedadora.
Los pili o fimbrias son muy lbiles, con lo cual es muy dificil que se
transfiera todo el factor F (que para Escherichia coli requiere un
tiempo de 60-90 minutos). Ademas, la transferencia del "cromosoma"
se realiza por un punto concreto de inicio. Por tanto, la distancia y el
orden de entrada de los genes se puede conocer por mtodos como
conjugacin interrumpida (se recogen muestras a intervalos de
tiempo concretos despus de realizar la mezcla) o por frecuencia de
recombinacin.
4.- Aglutinacin bacteriana:
Los anticuerpos son sustancias especficas formadas por el
cuerpo en respuesta a un estmulos antignico. Quimicamente son
proteinas. Estas se unen especificamente a un antgeno (la sustancia
que cuando se introduce en el cuerpo origina la produccin de los
anticuerpos), formanto un entramado o "rejilla" de antgenos y
anticuerpos, que son visibles a simple vista como grumos.
Esta propiedad se utiliza para determinar si un microorganismo
problema es o n la especie que estamos buscando mediante la
aplicacin de anticuerpos especficos para esa especie o, a partir de
una especie ya conocida, determinar si en un suero problema existen
o no anticuerpos especficos para ese microorganismo. La

proporcin adecuada para que los grumos sean visibles es la que se

seala en la siguiente grfica como "regin de equivalencia":

Y = Aglutinacin
X = [Antgeno]
La reaccin de aglutinacin se lleva a cabo de la siguiente forma: en
un portaobjetos se ponen dos gotas (5ml) separadas de una
suspensin bacteriana. En una de las gotas se aade 5ml de
antisuero, y en la otra, 5ml de PBS (tampn fosfato salino), y
mezclamos con un palillo de dientes. Los resultados posibles son los
siguientes:
- Si solo aparecen grumos en la gota con antisuero: la bacteria
tiene el antgeno para ese anticuerpo.
- Si no aparecen grumos en ambas gotas: la bacteria no tiene
el antgeno especfico de ese anticuerpo.
- Si aparecen grumos en ambas gotas: la prueba no puede
leerse (los grumos no se forman por la unin antgenoanticuerpo).
CONTROL DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS:
ESTERILIZACION Y DESINFECCION
I.- DEFINICIONES Y CONCEPTOS
II.- MUERTE DE LAS POBLACIONES MICROBIANAS Y CURVAS
DE
SUPERVIVENCIA.

III.- CONDICIONES QUE INFLUYEN EN LA ACCION

ANTIMICROBIANA
IV.- AGENTES ESTERILIZANTES FISICOS
1.- Altas Temperaturas
A.- Esterilizacin por calor hmedo
Autoclave
Tindalizacin
Pasteurizacin
B.- Esterilizacin por calor seco
Horno Pasteur
Incineracin
2.- Bajas Temperaturas
3.- Presion Osmotica
4.- Ondas Ultrasonicas
5.- Radiaciones
A.- Radiaciones ionizantes
B.- Radiaciones no ionizantes
6.- Filtracin
A.- Filtros de membrana
B.- Filtros HEPA
7.- Desecacin
V.- AGENTES ESTERILIZANTES QUIMICOS
1.- Oxido de etileno
2.- Glutaraldehido
VI.- DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS
A.- Inorgnicos

1.- Metales
2.- Acidos y lcalis
3.- Compuestos inorgnicos oxidantes
4.- Halgenos
B.- Orgnicos
1.- Alcoholes
2.- Fenol y compuestos fenlicos
VII.- ACCION DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LOS
DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS
1.- Tcnica de dilucin en tubo
2.- Tcnica de la placa de agar
3.- Tcnica del coeficiente fenlico
VIII.- ANTIBIOTICOS.
1.- Determinacion del espectro de accion de un antibiotico.
2.- Pruebas de susceptibilidad.
3.- Conjugacion bacteriana.
4.- Aglutinacion bacteriana.

BIBLIOGRAFIA

1. http://www.atl-gestion.com/Asepsia y desinfeccion.htm
2. http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/entrada.html
3. http://edicion-micro.usal.es/Web/haccp99/Unidades/CURSO/UNI_04/images/4010201.gif
4. http://www.encolombia.com/orto12398contenido.htm
5. http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/micro2/tema08.html#anchor171586

6. http://orbita.starmedia.com/~sohail/micro1.htm

HONGOS
I. Caractersticas:

Son hetertrofos, Algunos son saprfitos y otros parsitos, Son

microorganismos eucariticos quimioorganotrficos, Su reproduccin natural
es por medio de esporas, No tienen clorofila, Son usualmente alargados o
filamentosos y ramificados, Su tamao es de 5 a 10 micrmetros de grosor,
Los hongos filamentosos poseen pared celular que contienen quitina o
celulosa, o las dos., La mayor parte son inmviles, Pueden tener clulas
reproductoras mviles

Son hetertrofos

Algunos son saprfitos y otros parsitos

Son microorganismos eucariticos quimioorganotrficos

Su reproduccin natural es por medio de esporas

No tienen clorofila

Son usualmente alargados o filamentosos y ramificados

Su tamao es de 5 a 10 micrmetros de grosor

Los hongos filamentosos poseen pared celular que contienen quitina o

celulosa, o las dos.

La mayor parte son inmviles

Pueden tener clulas reproductoras mviles

II. Importancia:
Los hongos resultan importantes en las fermentaciones industriales
involucradas en el proceso de preparacin de la cerveza, el vino, el pan y el
curado de quesos. Tambin resulta importante analizarlos debido a que son la
causa de la mayor o menor fertilidad de la tierra, de la destruccin de artculos
alimenticios, maderas y plantas superiores, como los cereales. Los hongos
sirven de instrumentos a fisilogos, biofisicos, genetistas y bioqumicos para
estudiar algunos procesos biolgicos que se relacionan con la produccin de
antibiticos (penicilina), vitaminas y cidos orgnicos.
III. Morfologa Bsica de los Hongos
1. Talo: Es todo el hongo en forma individual, incluidas las porciones
vegetativas o
no sexuales y todas las estructuras especializadas.
2. Hifas: Son filamentos tubulares microscpicos que forman el talo de los
hongos y su pared es semirgida. Las hifas de acuerdo a la presencia de
tabiques o ncleos en cada compartimiento se dividen en: Hifas no septadas
o cenocitica, hifas septadas con clulas mononucleadas y hifas septadas con
clulas multinucleadas.
3. Micelio: Conjunto de hifas. Existen dos tipos de micelio de acuerdo a la
funcin que desempean:
El micelio vegetativo que es responsable de
obtener los nutrientes del suelo y el micelio reproductor que es el
responsable de la produccin de esporas y casi siempre se extiende en el
aire.

IV. Clasificacin
Divisin: Mycota
Subdivisin y Clases:
1. Eumycotina
1.1 Chytridiomycetes
1.2 Hyphochytridiomycetes
1.3 Plasmodiophoromycetes
1.4 Oomycetes
1.5 Trichomycetes
1.6 Zygomycetes
1.7 Ascomycetes
1.8 Basidiomycetes
1.9 Deuteromycetes
2. Myxomycotina
2.1 Myxomycetes

V. Formas de Reproduccin de los Hongos

1. Reproduccin Asexual
1.1 Estructuras Reproductoras Asexuales

Esporforo: Estructura productora de esporas.

Esporangio: Saco formado en la porcin terminal del esporforo y que al

hacer erupcin libera las esporangiosporas. Clases: Zooesporangio

Esporangiforo: Esporforo con esporangio o hifas que producen esporas.

Esporangiosporas: Esporas producidas dentro de un esporangio.

Clases:

Zoosporas (tienen movilidad debido a sus flagelos), Aplanosporas o Conidias

(No tienen movilidad).

Cuerpos Fructificantes asexuales: Son estructuras muy especializadas

productoras de esporas y cada tipo tiene su propio nombre, ejemplo:
acrvulo, sinema y picnidio.

Conidias: Son esporangiosporas que no tienen movilidad y debido a variedad

de tamaos, aspectos y colores se utilizan como criterio de clasificacin.
Existen varias clases de conidias entre ellas estn:

1. Microconidias: que son unicelulares y pueden tener forma redonda, oval,

piriforme, de maza o clava.
2. Macroconidias: Son multicelulares y existen de formas alargadas o
fusiformes, de maza con tabicaciones transversales, longitudinales o ambas
(muriformes).
3. Ssiles: Conidias que se forman en un lado de la hifa sin conidiforos
detectables. Estas tienen tejido de soporte y proteccin.

Talosporas: Forman parte de la hifa vegetativa y las tienen las levaduras y los
microorganismos

levaduriformes.

Clases:

yemas,

blastosporas,

clamidosporas y artrospora u oidio.

1. Blastosporas: Clulas germinativas de pared delgada que se forman por la
gemacion de una pseudohifa ( no es un filamento verdadero y se compone
de clulas gemantes alargadas que no sean separado).
2. Clamidosporas: Son redondas, de pared gruesa y se las encuentra en las
hifas en forma terminal, lateral o intercalado.
3. Artrospora u oidio: se forman por fragmentacin de las hifas dando origen a
las esporas rectangulares.
2. Reproduccin Sexual
2.1 Estructuras Reproductoras sexuales:

Oosfera: Son estructuras femeninas especiales contenidas en un oogonio

ubicado en el micelio.

Esperma Masculino: Se produce en el anteridio pegado al microorganismo.

Basidio: Son partes del micelio reproductor que se forman en la parte

terminal de una estructura.

Ascocarpo: Es un cuerpo fructificante definido y cada tipo tiene un nombre

propio como Cleistotecio, peritecio y apotecio.

2.2 Mecanismo y Formas de Reproduccin Sexual

Las esporas sexuales se producen en menor frecuencia que las
asexuales debido a que requieren de ciertas condiciones especiales para
reproducirse. Los pasos en su reproduccin sexual son.
1. Plasmogamia: Es un mecanismo por medio del cual se juntan dos ncleos
compatibles para formar un solo protoplasto de varias maneras.
2. Cariogamia: Es la fusin efectiva de los dos ncleos.

En esta etapa de

produce el zigoto de ncleo diploide.

3. Meiosis o reduccin cromatinica: En esta etapa se restablece el estadio
haploide del ncleo.
Tambin existen diferentes formas o modos para la reproduccin sexual de
esporas las cuales se describen a continuacin:

1. Por fecundacin de las oosfera por esperma masculino.

La espora as

producida se llama OOSPORAS.

2. Por la unin de dos hifas que se juntan y funden sus contenidos de las
puntas. La espora as producida se llama ZIGOSPORA.
3. Se forman por un saco llamado ASCA. La espora as producida se llama
ASCOSPORAS.
4. Se forman a partir de un basidio. Las esporas que se forman de un basidio
se llaman BASIDIOSPORAS.

A. LOS MOHOS

I. Caractersticas:

Se adaptan a condiciones ms severas que los otros microorganismos

No son tan sensibles a la presin osmtica elevada.

Toleran y se desarrollan en concentraciones de acidez relativamente

elevadas.

El pH ptimo para casi todas las especies es 5.6.

Necesitan humedad para su desarrollo pero pueden vivir en ambientes

deshidratados.

Casi todos son estrictamente aerobios.

Se desarrollan en condiciones de temperatura muy variadas pero su

temperatura ptima es de 22 a 30 oC.

Son capaces de catabolizar y utilizar una gran variedad de sustratos

orgnicos.

Son altamente eficientes en transformar material nutritivo en sustancia

celular.

En condiciones apropiadas transforman carbohidratos a alcoholes y cidos

orgnicos.

II. Importancia
Los mohos son importantes porque su actividad bioqumica modifica la
fertilidad del suelo, deterioran algunos materiales y son decisivos en la
maduracin del queso, produccin de penicilina y descomposicin de alimentos.
III. Fisiologa de los Mohos y su nutricin

Los mohos pueden adoptar dos formas diferentes dependiendo de sus

necesidades alimenticias, estas son:

Escletoria: Son cuerpos inactivos duros cuyos productores son muy

resistentes al calor y sus principales fuentes alimenticias son la glucosa,
maltosa, almidn, celulosa. sales de amonio o nitratos y peptona. Tambin
necesita pequeas cantidades de hierro, fsforo, potasio, cinc, cobre,
manganeso y molibdeno.

Hastorias: Son hifas ramificadas que producen los hongos parsitos y

penetran la clula husped para obtener alimento del citoplasma.

IV. Cultivos de los Mohos

Los tipos generales de medios de cultivo para los mohos son tres:
Medios Naturales: son como pedazos o infusiones de frutas, vegetales, granos
de cereales o tejidos animales, Ejemplo: infusin de maz con agar y glucosa,
infusin de papa con agar y glucosa.
Medios de Cultivo preparados con peptonas, extractos de plantas, agar y otros
compuestos de composicin desconocida o variable.
Medios de cultivo sintticos de composicin qumica definida.
V. Mohos de inters Microbiologico
1. Mucor

Distribucin en la naturaleza: suelo, estircol, frutas, vegetales y fculas.

Importancia: Intervienen en la elaboracin de quesos u otros productos

alimenticios y en la descomposicin de alimentos.

Especies ms conocidas: M. racemosus, M. rouxii

Morfologa:

1. Sus micelios pueden ser blancos o grises y sin tabiques.

2. Sus esporangiosporas pueden ser ramificadas.
3. Tienen una estructura estril en el esporangio de forma redonda, cilndrica u
oval llamada COLUMELLA.
4. Sus esporas son de color caf o negro y su apariencia es lisa.
5. Forman zigosporas
6. No se producen estolones o rizoides en sus estructuras.

2. Rhizopus

Lugar de Desarrollo: pan, vegetales, frutas y otros.

Morfologa:

1. No son tabicados
2. Micelio algodonoso con esporangiosporas en los ndulos donde se forman
los rizoides.
3. Tiene esporangios muy grandes y negros.
4. Su columella es hemisfrica.
5. La apohysis (bases del esporangio) tiene forma de copa.
6. Producen rizoides (racimos de hifas parecidas a races de sostn) y
estalones o tallos rastreros (filamentos con aspecto de raz que conectan
organismos individuales.

Especies ms comunes: R. Stolonifer, R. Orizae

Importancia: Intervienen en la industria y horticultura porque son tiles en la

produccin de alcoholes, cido frmico, cido lctico y cido oxalico.

3. Aspergillus

Lugar de Desarrollo: frutas, vegetales u otros sustratos que le sirven de

alimento.

Importancia: Su importancia radica en que deterioran los alimentos y se les

usa en la fermentacin que incluye produccin de cido ctrico y glucnico (A.
Niger).

Morfologa:

1. Micelio tabicado, ramificado, con la parte vegetativa introducida en el

nutriente.
2. Hifas frtiles.
3. Son conidias de colores negro, caf y verde su estructura reproductora
asexual.
4. Se desarrollan en concentraciones altas de azcar.

4.

Otros

son:

Cladosporium,

Penicillium,

Neurospora,

Alternaria, Fusarium.

B. LAS LEVADURAS

Sporotrichum,

Trichoderma,

I. Caractersticas:

Son aptas para efectuar cambios qumicos porque su rea superficial es

mayor en relacin a su volumen.

Se diferencian de las algas porque no realizan fotosntesis.

Se diferencian de los protozoos por que su pared celular es rgida.

Se diferencian de los mohos porque su velocidad de reproduccin es mayor y

es por gemacin, adems su forma dominante es unicelular.

Se diferencian de las bacterias por el tamao relativamente grande y la

morfologa.

Su tamao puede tener entre 1 - 5 micrmetros de ancho por 5 a 30

micrmetros o ms, de largo

Generalmente son ovoides, si bien algunas son esfricas y otras alargadas

No tiene flagelos u otros organelos de locomocin

Se reproducen por esporulacin, gemacin o fisin.

Tienen gran capacidad para sobrevivir en ambientes diversos en los que

varan la composicin del suelo, temperatura, luz, humedad y otros factores.

II. Importancia
Su importancia radica en que se les utiliza para fermentar jugos de frutas,
pan o elaborar muchos y nutritivos alimentos.

Tambin en procesos

fermentativos y por sintetizar algunas vitaminas, grasas y protenas a partir de

azcares simples y amoniaco. Para los cientficos constituyen un buen modelo
de estudio y aclaracin de los procesos bioqumicos y metablicos bsicos de
las clulas eucariticas vivas.

Sin embargo algunas causan enfermedades a

plantas y animales, y otras descomponen los alimentos o detrioran los

materiales textiles y algunos similares.

LAS ALGAS

I. Caractersticas En su mayoria son vegetales a excepcion de las verd-azules

que pertenecen al reino monera, generalmente son unicelulcares y muy
pequenas, pero presentan gran variedad dre tamanos, Poseen pigmentosw
como la clorofila, xantofila etc, generalmente viven sumergidas en el agua
dulce o de mar, algunas flotan libremente en el agua, otras crecen libremente
sobre piedras, pantanos o suelo humedo y en plantas y animales, se
encuentran generalmente donde hay mucha luz, son parte del plancton
(fitoplacton y zooplancton), causan problemas en los suministros de agua,
como mal olor, obstaculizan los filtros y entorpecen la fotosinsisntesis de otras
plantas como no permiten la aireacin de cuerpos de agua produciendo
muerte de peces.

Se dividen de acuerdo al pigmento;

MIXOPHYTAS o CIANOPHYTAS son las algas verdeazules se presentan
aisladas o en colonias agrupadas en masas irregulares, no tienen ncleo
organizado, la clorofila se encuentra enmascarada por otros pigementos , la
mayoria son acuaticas y almacenan el almidon en forma de glucogeno.
CHLLOROPHYTAS son las algas verdes, tambien se llamanan cloromicophytas,
la mayoria son de agua dulce, unicelulares moviles, formas colonias
espefecias o filamentosas o aplanadas de color verde, debido a la clorofila.

CHRYSOPHYTAS
o algas doradas o amarillas , en su mayoria son
microscopias y presentan esqueleto de slice, la clorofila se enmascara por
pigmenetos amarillos y la almacena en forma de aciete, a este grupo
pertenecen las Diatomaceas que son usadas en la industria como tierras
filtrantes.
PHAEPHYTAS o algas pardas o cafes, son especies mayormente
macroscopicas, marinas de tamano gigantesco, son de estructura compleja,
su clorofila esta enmascarada por carotenos, xantofilas y fucoxantina, tiene
importancia industrial ya que son usadas como alimento para humanos
(sushi), se utiliza en preparacin medicinales y cosmeticos.
RHODOPHYTAS son algas rojas, abundan en agua dulce y salada son
microscopicas, cuando se reproducen en gran cantidad en agua de mar se
conocen como la marea roja, muchas de estas presentan la formas mas
primitvas de algas, entre estas algas destaca el Gellidium rubrum, de la que
se extrae medio de cultivo para bacterias, entre los piegmentos que contiene
etan la fucoeretrina y ficocianida.

VIRUS
Los virus constituyen un grupo grande y hetrogeneo de agentes infecciosos, parasitos
intracelulares obligados de las celulas de sus huespedes seleccionados. Son tan
pequenos que atraviesan los poros de los filtros que impiden el paso de bacterias. Los
virus se reproducen ddentro de las celulas de las plantas y animales, asi como en las de
otros microorganismos. Causan enfernmedades a sus huespedes. Los virus no tienen
capacidad para el metabolismo, tampoco movilidad independiente, Se reproducen por
replicacion dentro de una celula huesped y tienen la facultad de la mutacion.
Clasificacion de los virus animales
Al principio los virus fueron clasificados segn el huesped que afecta, pero este
sistema no es aceptado cientificamente. Actualmente los virus se clasifican segn el
tejido que atacan:
Neurotropicos

nervioso

Dermotropicos

piel

Viscerotropicos

Tejido intestinal y organos internos

Neumotropicos

Vias y tejidos respiratorios

Pantotropicos
Oncogenicos

Muchos tipos de celulas y tejidos

Promueven el desarrollo tumoral

Cuerpos de inclusion
Son en la mayor parte de los casos, caracteristicos de los virus causan infeccion y
senalan alteraciones patologicas definidas en la celula. Los cuerpos de inclusion son
agregados de subunidades virales no ensambladas y de viriones intactos de las celulas
infectadas.

Virion (particula viral) estructura y composicion:

La capside y la envoltura: El virion se compone de acido nucleico que le da su

capacidad infectante. Este acido esta rodeado por una cubierta proteinica llamada
capside, formada por subunidades de proteinas llamada acapsomeros. La proteina
confiere la especificidad del virus. Las particulas completas de virus, o unidades
virales, se llaman viriones. Los viriones estan o no protegidos por una envoltura que
contiene lipidos o lipoproteinas. Los viriones que tienen envoltura son disolventes de
lipidos como el eter y el cloroformo y a agentes emulsificantes como las sales biliares
y los detergentes. Cuando no tienen envoltura se llaman viriones desnudos.

Acidos nucleicos: contienen DNA o RNA pero nunca los dos. Pueden tener uno de
cuatro tipos de Acidos nucleicos, una cadena y doble cadena.

Formas de los virus:

Icosaedrica

Helicoidal

Envueltos: son pleomorficos que tienen varias formas.

Complejos

Replicacion:
Las particulas viriales no tienen actividad metabolica independiente y son
incapaces de reproducirse por fison o gemacion u otros procesos similares. La
multiplicacion tiene lugar por replicacion en la cual dos partes, proteina y acido nucleico
virales, se incrementan dentro de las celulas huespedes susceptibles. Cuando las celulas
se infectan con el acido nucleico viral, se sintetizan particulas virales completas.
1. Adsorcion: Adhesion ionica preliminar y es reversible por un cambio de pH. Segundo
paso aparece mas firme e irreversible.
2. Penetracion y Desnudamiento: Se fusiona la envoltura de lipoproteina viral y la
membrana superficial de la celula huesped.
3. Replicacion bioquimica: Los virus necesitan el ATP de la celula, los ribososmas, el RNA
de transferencia, enzimas y algunos procesos biosisnteticos.
4. Ensamble y Maduracion:
5. Salida o liberacion
Cultivo de los virus
Embriones de Pollo
Coagulos de Plasma
Cultivo de tejidos

CAPTULO #14
RICKETTSIAS Y CHLAMYDIAS

RICKETTSIAS:

Las rickettsias son parsitos intracelulares obligados de artrpodos como

pulgas, garrapatas, piojos y caros, a los que parasitan sin producirles dao y,
con frecuencia son patgenas para el hombre. Las rickettsias son transmitidas
al hombre y a otros animales por picaduras de artrpodos vectores y por sus
excreciones. Actualmente a las rickettsias y a las chlamydias se les considera
como bacterias.

El nombre de rickettsias se dio en honor a Howard Taylor

Ricketts quien investig el tifo y muri de

esa enfermedad por contagio

accidental.

Morfolgicamente las rickettsias son bacilos cortos, cocos en cadenas o

filamentos y cocobacilos pleomrficos . Son inmviles y no forman esporas; se
tien dbilmente con las anilinas y son gramnegativas. Sus paredes celulares
contienen cido murmico y se reproducen por fisin binaria. Las rickettsias
contienen enzimas metablicas intracelulares.

El tifo epidmico lo produce la Rickettsia prowazekii ( en honor a S.

von Prowazek, pionero en investigacin de tifo que muri de esa enfermedad) y

lo transmite al hombre el piojo del cuerpo, siempre se le ha asociado con la

miseria y sufrimiento humano, en el siglo XV y XVI mat a decenas de miles de
personas.
CLASIFICACIN:
A. Rickettsiales con tres familias:
-

Rickettsiaceae incluye tres familias: Rickettsieae, Ehrlichieae y

Wolbachieae
-

Bartonellaceae

Anaplasmataceae

B. Rickettsias patgenas:
Las ms importantes y mejor conocidas son las que
producen enfermedad en el hombre y se agrupan as:
Grupo tifo representado por la Rickettsia prowazekii y la Rochalimaea quintana
que produce la fiebre de las trincheras.
Los roedores que albergan insectos transmisores son relativamente
resistentes a las rickettsias y sirven como reservorios naturales de la infeccin.

Despus de enfermedad por rickettsias, el paciente adquiere inmunidad

duradera y se puede adquirir inmunidad artificial al tifo

y a las fiebres

manchadas mediante vacunas muertas o atenuadas.

Los agentes

quimioteraputicos ms eficaces contra rickettsias son las tetraciclinas y el

cloranfenicol. Hay algunas rickettsias no patgenas a los insectos y mamferos.

MORFOLOGA:
La mayor parte tienen aspecto de bacilos, cocos o cocobacilos
algunas son pleomrficas.

Poseen pared celular rgida, generalmente son

gramnegativas e inmviles. Los mtodos de tincin ms adecuados son los de

Giemsa y Macchiavello.
COMPOSICIN QUMICA:
Contienen protenas, lpidos, fosfolpidos y cidos
nucleicos con cantidades relativamente constantes de ADN y cantidades
variables de ARN. Su pared celular contiene aminocidos, polisacridos y cido
murmico.
CULTIVO:
Son similares a los mtodos y tcnicas para el cultivo de los virus,
tales como embriones de pollo y cultivos de tejidos adecuados.
FISIOLOGA:
Las rickettsias dependen de la clula husped, pero son capaces
de efectuar reacciones metablicas limitadas en forma independiente, por

ejemplo, con sus propias enzimas pueden utilizar cido glutmico, piruvatos y
succinatos.
RESISTENCIA:
Antibiticos como las tetraciclinas, el cido p-aminobenzoico y
el cloramfenicol inhiben su crecimiento. Las rickettsias son atacadas por los
desinfectantes qumicos y las destruyen el calor y la deshidratacin.
DIAGNSTICO DE LABORATORIO:
Para la identificacin de rickettsias en
el laboratorio se pueden utilizar las siguientes tcnicas:
1- Por el aislamiento e identificacin del agente etiolgico.
2- Por la demostracin de anticuerpos especficos.
3- Por inoculacin animal.
1. Aislamiento e identificacin del agente etiolgico:
Se utilizan sacos vitelinos de
huevos embrionados de gallina y tambin cultivos de tejido. Posteriormente se
utilizan pruebas serolgicoas.

La primera y ms sencilla que se desarroll de

las pruebas serolgicas fue la de Weil-Felix.

2. Inoculacin animal:
Se usa para detectar infecciones humanas de tifo
epidmico, tifo endmico y fiebre manchada de las Montaas Rocosas,
inoculando sangre de pacientes en coballos machos.

CHLAMYDIAS
Son

parsitos

intracelulares

obligados

(intracitoplasmticos),

son

inmviles, son gramnegativos, son basfilos, cocoides o esfricos. Varan de

tamao entre 200 a 350 nm de dimetro, los cuerpos iniciales alcanzan a
veces 800 nm., y son considerados como bacterias.

Producen ornitosis

(antiguamente llamada psitacosis), linfogranuloma venreo y el tracoma.

Se clasifican a las chlamydias en el grupo de las rickettsias, en el orden

Chlamydiales, familia Chlamydiaceae, gnero Chlamydia. Slo se reconocen
dos especies.

Chlamydia del griego Chlamydion significa capa o manto

pequeo.
La diferencia principal entre las chlamydias y las rickettsias, es que las
chlamydias dependen de la clula husped para obtener energa, por eso se les

conoce como parsitos de energa.

vuelven no infectantes ponindolas a 60

Las chlamydias son termolbiles , se

o

C por 10 minutos. No les afectan

temperaturas bajas y se preservan mediante liofilizacin . Se inactivan con

fenol, formol o ter. Las tetraciclinas son eficaces contra las chlamydias.
Las chlamydias son ricas en lpidos (especialmente fosfolpidos),
contienen protenas con 18 o ms aminocidos, tienen RNA y DNA que se
determinan tindolas con anaranjado de acridina o rodamina y observando
con microscopio de luz ultravioleta. Tinciones diferenciales como la Giemsa y
Macchiavello

ayudan a identificar los cuerpos iniciales y

cuerpos

elementales.
REPRODUCCIN Y DESARROLLO:
1. El cuerpo elemental posee un nucleoide electro denso.
2. Es fagocitada por la clula husped , que la engloba en una vacuola.
3. El cuerpo elemental se reorganiza a cuerpo inicial.
4. La reproduccin se realiza en las partculas grandes por fisin binaria. La
clula revienta, dejando en libertad las partculas para infectar otras clulas
del husped.
SEROLOGA E INMUNIDAD:
Las chlamydias producen antgenos de grupo
y especficos de especie.

Tratamientos prolongados de dosis altas de

antibiticos eliminarn el microorganismo patgeno del husped.

La

inmunizacin inducida en humanos y animales no ha sido til.

INFECCIONES POR CHLAMYDIAS:
Ornitosis (psitacosis):
Los microorganismos estn presentes en los
excrementos de pjaros y aves de corral,

presentndose como infeccin

intestinal. Al hombre se transmite mediante aerosoles por las vas respiratorias,

provocndole infeccin septicmica y neumona atpica.
Linfogranuloma venreo:
Se transmite por contacto sexual, los sntomas son
estrechez rectal, abscesos, fstulas anales y vaginales. Cuando la enfermedad
avanza se presenta fiebre, escalofro y cefalea.
Tracoma y conjuntivitis de inclusin:
Los agentes etiolgicos son
similares. El tracoma presenta queratoconjuntivitis crnica y se transmite por
contacto directo con pacientes y objetos.
La conjuntivitis de inclusin se presenta como blenorrea de inclusin en los
recin nacidos o en los nadadores de albercas y como conjuntivitis purulenta
aguda.

Protozoos
Los protozoos son protista eucarioticos que se presentan como
celulas aisladas o en colonias.

Su nombre se deriva de las

palabras griegas protos y zoon, que significa primero y animal.

Cuando

forman

filamentos

colonias,

los

citoplasmaticos

individuos

incluidos

estan
en

unidos

una

por

sustancia

intercelular comun. La movilidad es un criterio muy importante

en la diferenciacion de los grupos.

Ecologia de los protozoos

Protozoos de vida libre

Los estadios vegetativos (troficos) de estas especies de vida libre existen en
cualquier clase de aguas y en la arena, tierra o materia organica en descomposicion.
Los factores que influyen en la distrivbucion geografica y numero en un habitat
determinado son la humedad, luz, alimentos disponibles y otras condiciones fisicas y
quimicas.
Temperatura
Durante ele enquistamiento los protozoos soportan grandes variaciones de
temperaturas, que varia desde 30 a 56 grados, la temperatura optima esta entre 16 y 25
grados, y la maxima fluctua entre 36 y 40.
Luz

Solo aquellos que son fotosinteticos y aquellos que se nutren de otros

organismos fotosinteticos.
Concentracion de hidrogenos
Pueden vivir entre 3.2 a 8.7. Pero el pH optimo esta entre 6 y 8.
Alimentos
Una poblacion de protozoos en un ambiente acuatico esta influenciado por los
constituyentes quimicos del agua. La abundancia de alimentos en un habitat, es el
factor determinante principale en el numero y distribucion de los protozoos que viven en
este.
Protozoos simbioticos
Simbiotico describe coexistencia entre individuos. Comensalismo es el que el
huesped no se beneficia pero el comensal si, en el caso del ecto comensalismo los
protozoos se adhieren al cuerpo del huesped, y en el endocomensalismo viven dentro
del cuerpo sdel huesped. El mutualismo es donde ambas especies se ven beneficiadas.
El parasitismo es cuando uno vive al expensas de otro. Los esporozoos son parasitos
estrictos y para productores de enfermedades son los mas importantes.
Morfologia de los protozoos

Estructuras celulares

Citoplasma: Es una sustancia mas o menos homogenea compuesta de moleculas de

proteina globulares relacionadas entre si formando una trama molecular tridimensional.
Contiene fibrillas protreinicas submicroscopicas. Las contracciones de los protozoos
probablemente se deben a estas fibrillas.

Los pigmentos estan difundidos en el

citoplasma y tienen muchos matices de caf, azul, morado o rosa.

El ectoplama tiene aspecto de gelatina. El endoplasma es mas fluido y
voluminoso. En el endoplamsa se encuentran las estructuras. Un sistema de
membranas forman una pared mas o menos continua de lagunas que forman el reticulo
endoplasmatico. Otras estructuras en el citoplasma son los ribosomas, complejos de
golgi o dictosomas, mitocondrias, cinetosomas o blefaroplastos, vacuolas alimenticias,,
vacuolas contractiles y nucleo.
Nucleo
Todos los protozoos tienen un nucleo eucariotico, pero la mayoria tiene mas de
uno. El macronucleo controla todas las actividades metabolicas y el proceso de
regeneracion, mientras que el micronucleo le corresponde la actividad reproductora.

Cubierta celular
Funciona como protectora ademas de controlar el intercambio de sustancias y
es el sitio de percepcion de los estimulos quimicos y mecanicos.

Organelos de locomocion
Sedudopodos
Son proyecciones temporales de una parte del citoplasma de los protozoos que
no contienen cuticula rigida. Ej. Amebas.

Flagelos y cilios
El flagelo es una extension del citoplasma muy fina, se compone de dos partes
axonema (filamento elastico) y la cubierta citoplasmatica contractil que rodea a esta.
Cuando la membrana vibra se le llama membrana ondulante.
Los cilios ademas de su funcion de locomocion, participan en la ingestion y
sirven frecuentemente como organelos tactiles. Se presentan como extensiones
celulares fibrosas finas y cortas.

Procesos de Reproduccion de los prootozoos

Reproduccion Asexual: Fision binaria, fision transversal, fision multiple y gemacion.
Reproduccion Sexual: Singamia o gametogamia, conjugacion.
Caracteristicas de los principales grupos
Las amebas: Reciben su nombre de la palabra amoibe, que significa cambio, ya que su
forma cambia constantemente. Se mueve por medio de pseudopodos, con los cuales
tambien se alimenta. El material de desecho se excreta por medio de la membrana
celular.
Las amebas se reproducen por medio de fision binaria.
Los ciliados: Son del genero paramecium, se encuentran en aguas dulces de charcas y
lagos, en donde se encuentran fuentes adecuadas de alimentos. Esta rodeado de cilios,
los cuales son los organos de locomocion y le sirven para orientar el alimento hacia el
poro bucal. Se reproducen asexualmente por fision binaria y sexualmente por
conjugacion.
Los flagelados: Se dividen en dos grupos: los que tienen aspecto de planta
(fitoflagelados) y los que tienen forma animal (zooflagelados). Los fitoflagelados son
fotosinteticos y contienen clorofila.

Los zooflagelados son heterotrofos.

Los esporozoos: Comprende grupos de protozoos formadores de esporas que son

relativamente pequenos. Las formas adultas no poseen formas de moviemiento. Se
alimentan principalmente dre la celula huesped o de los liquidos corporales en los que
viven.
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE INGENIERA
ESCUELA DE INGENIERA QUMICA
CURSO DE MICROBIOLOGA
TRATAMIENTOS DE DESECHOS INDUSTRIALES

INTRODUCCIN
Los desechos industriales son los lquidos descargados de una planta manufacturera hacia los drenajes
pblicos o bien en Guatemala y C.A. hacia ros, lagos o barrancos. Los desechos industriales son pagados
por todo el conglomerado de la nacin, debido a que de una forma u otra tendrn que ser eliminados con el
tiempo cuando stos causen daos ecolgicos o bien cuando afecten de una forma u otra el desarrollo de
un conglomerado de ciudadanos. Podra decirse que es parte de la industrializacin y vienen a ser parte de
las civilizaciones con alto estndar de vida.
Las plantas industriales producen gran cantidad y variedad de desechos slidos, lquidos y gaseosos, los
que son descargados al ambiente sin ningn control, deber considerarse que que los desechos
industriales son nicamente aquellos que contaminan o deterioran el ambiente, p. ej. el agua utilizada con
fines de enfriamiento en las plantas industriales y que son botados a los ros no constituyen un
contaminante, siempre y cuando no haya sido agregada al agua ninguna substancia txica o deletrea, o
bien substancias naturales o artificiales que interfieran con el proceso natural de autopurificacin o
degradacin biolgica.
El Ingeniero Qumico del futuro, no debe estar ajeno a los problemas que conlleva la contaminacin
ambiental, debido que si bien es el encargado de modificar la materia en las plantas industriales. tambin
es responsable de hacer su trabajo con tica, es decir sin daar su entorno.
TRATAMIENTOS INDUSTRIALES MAS COMUNES
1.

AEROBIOS

2.

ANAEROBIOS

DEFINICIONES
DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGENO: Es la cantidad de oxgeno necesario, para la degradacin de la
materia por medio de microorganismos en condiciones aerbicas, a 20C y una atmsfera de presin se
expresa en mg/L.
DEMANDA QUMICA DE OXIGENO: Es la cantidad de oxgeno necesario para la degradacin de la
materia orgnica ms la inorgnica, se expresa en mg/L.
1. TRATAMIENTOS AEROBIOS O AEROBICOS.
1.1

FILTRO PERCOLADOR: es un tratamiento en el cual el agua o efluente ingresa en la parte

superior, de forma tal que pasa por un lecho de piedras de aproximadamente 6 cm de dimetro, donde a
travs del tiempo se forma una capa de bacterias sobre la superficie de las piedras a esta capa de bacterias
se le denomina ZOOGLEA, y contiene gran variedad de microorganismos como protozoos, y bacterias.
Principales ventajas: Sencillez de diseo, no necesitan equipo mecnico-elctrico, puede ubicarse en
laderas y barrancos. Desventajas produce olores , desarrollo de moscas, no es aconsejable para zonas
ssmicas.
1.2

LODOS ACTIVADOS:

es un proceso en el cual el flculo biolgico responsable de la oxidacin

biolgica, est

constituido por gran cantidad de microorganismos, el tipo de desecho predominante

caracterizar

de

igual

manera

las

especies

dominantes

en

los

lodos.

El principal grupo de protozoos que se encuentran son ciliados, es un proceso muy eficiente desde todo
punto de vista de degradacin biolgica. Sus principales ventajas son alta eficiencia, ocupa poco espacio
fsico. Desventajas, necesita alta inversin, mantenimiento peridico, consumo de energa elctrica.
1.3

ZANJAS DE OXIDACIN: es una excavacin del suelo en forma de foso largo y angosto, cerrado

sobre si mismo, semejante a las pistas de atletismo, utiliza un equipo mvil para aireacin artificial, a veces
es llamado proceso de lodos activados modificado. Entre sus ventajas se encuentran: alta eficiencia para
manejo de slidos, manejo de grandes cantidades de desechos, Desventajas: alta inversin en espacio y
dinero, mantenimiento peridico, y consumo de energa elctrica.
2. TRATAMIENTOS ANAEROBIO O ANAEROBICOS
Los procesos anaerobios se caracterizan por la descomposicin de materia orgnica por la accin de
microorganismos ante la ausencia de oxgeno, obtenindose como productos finales principales metano y
bixido de carbono. La primer etapa en forma general es cacterizada por la formacin de distintos cido
carboxlicos, y en el paso ulterior se forma el metano y bixido de carbono.
2.1 FOSA SPTICA: Es un proceso de tratamiento utilizado donde comnmente no existe red de
alcantarillado, en general es utilizado para tratar aguas residuales de tipo domstico. Cuando el agua se
deja en reposo sin que penetre la luz ni aire, se origina, despus de
un tiempo determinado, un fenmeno consistente en la desaparicin de materias slidas,
quedando en su lugar un lquido negruzco que al agitarlo desprende el olor peculiar de la materia en
descomposicin. Entre sus ventajas estn: necesita un espacio reducido, y comnmente se puede construir
en forma subterrnea. Desventajas: necesidad de remover lodos 1 vez al ao.
2.2 TANQUE DE IMHOFF:

es un tanque cnico, que podra considerarse como una fosa sptica

modificada.
2.3 REACTOR ANAEROBICO DE FLUJO ASCENDENTE (RAFA)
Es un tanque digestor en cuya parte superior tiene un sistema de sedimentacin y un sistema de deflexin
de gases, el agua residual entra uniformemente distribuida por el fondo y el flujo es hacia arriba, durante el
ascenso hay sedimentacin, y el lodo prcticamente s estratifica en toda la altura, ubicndose lo mas denso
en la parte inferior, su proceso esta basado en la accin de bacterias anaerobias sobre la materia orgnica
del agua residual. Sus principales ventajas son que no requiere equipo electrico-mecnico, genera metano
que puede ser aprovechable, genera productos purgados que pueden ser usados como fertilizante, es
utilizable a bajas o altas escalas. Desventajas no remueve nitrgeno ni fsforo, trabaja para
concentraciones altas de demanda bioqumica de oxigeno, es sensible a cambios de temperatura en el
ambiente.