MICROBIOLOGIA

OBSERVACION DE
MICROORGANISMOS

INTRODUCCIN:
Como ya lo hemos estudiado anteriormente en su mayor parte los
microorganismos son demasiado pequeos para observarse a simple vista:
protozoos, algas, hongos, bacterias y virus.
Estos microorganismos son diferentes en caractersticas tales como forma de
nutricin, estructura, tamao, composicin entre otros aspectos; es por ello que
se emplea el estudio microscpico el facilita notablemente la observacin;
principalmente en las bacterias se facilita al tratarlas con colorantes o tintes los
cuales facilitan tambin la observacin de ciertas estructuras celulares.
En este informe vamos a distinguir la estructura intracelular de algunos
microorganismos, tal es el caso de la sarcina, Klecciela, Bacilo Serium entre
otros. Desarrollamos los mtodos de tincin y damos a conocer un anlisis de
los resultados obtenidos en la prctica.
MECANISMOS DE COLORACIN:

La coloracin celular y tejidos son una combinacin de fenmenos fsicos y

qumicos de absorcin: los fenmenos fsicos de absorcin, capilaridad y
smosis participan en cierto grado. La afinidad de colorantes bsicos por los
tejidos cidos y viceversa indican que hay reaccin qumica.
LOS COLORANTES:
Son compuestos, orgnicos que contienen radicales cromforos esto es que
producen color y grupo de anxocromos que forman sales los grupos nitrito (NO2) y azo (-N = N) son cromforos. Los radicales hidroxilo (-OH) y amino (NH2) son grupos anxocromos. Los cromforos imparten la propiedad
cromgena al colorante y los anxocromos permiten que el colorante se una con
la fibra o tejido.
PREPARACIN DE FROTIS BACTERIANO PARA COLORACIN:
Entes de la tincin las bacterias suelen encontrarse en agua o en otro lquido
en un porta objeto limpio y son extendido en una pelcula uniforme y delgada.
Se deja que la pelcula seque en el aire y los microorganismos son fijados por
sustancias qumicas o por el calor moderado.
TINCIONES:
Es un mtodo utilizado para estudiar microorganismos. (no vivos); en estas
tinciones se observa morfologa, estructura y agrupamientos de
microorganismos.
La tincin de Gram o coloracin Gram es un tipo de tincin diferencial
empleado en microbiologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo en
muestras clnicas. Debe su nombre al bacterilogo dans Christian Gram, que
desarroll la tcnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la
morfologa celular bacteriana como para poder realizar una primera
aproximacin a la diferenciacin bacteriana, considerndose Bacteria Gram
positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y Bacteria Gram
negativa a las que se visualizan de color rosa.

OBJETIVO
El objetivo principal de esta prctica es utilizar el material y equipo de
laboratorio para la identificacin de bacterias en muestras de saliva, aguas
residuales y una fruta pasada.

MARCO TEORICO
Encontramos microorganismos en todas partes, en el suelo, en el agua,
en el aire y sobre y dentro de organismos multicelulares incluyendo los
humanos.

A este grupo de microorganismos se les llama la flora normal

microbiana. Hay algunos microorganismos que permanecen por pocos das o

hasta meses en nuestro cuerpo, a este tipo de flora se le llama transitoria. La
asociacin entre dos organismos se llama simbiosis y esto ocurre con nuestra
flora bacteriana, al igual que con la asociacin de otros organismos. La relacin
puede ser beneficiosa o prejudicial. Algunas bacterias beneficiosas para
nosotros son el gnero Lactobacillus y Escherichia coli, esta ltima nos provee
vitamina K y ciertas vitaminas del complejo B. Las siguientes partes del cuerpo
contienen su propia flora microbiana: nariz, boca, conjuntiva, odo externo,
estmago, piel, uretra, vagina, intestino delgado e intestino grueso. Si estas
bacterias pasan de su lugar natural del cuerpo a otra parte del cuerpo pueden
ocasionar enfermedades. Esto ya sera una relacin prejudicial.
Podemos obtener bacterias de nuestro ambiente o de diferentes partes
de la piel, boca, nariz y garganta. La boca contiene millones de bacterias en
cada mililitro de saliva y en distintos organismos puede varios de acuerdo a su

rgimen alimentario. Algunas de ellas son bacterias transitorias que llegan aqu
con los alimentos.

PROCEDIMIENTO

Primero se preparo el material y equipo que se utilizo.

Se extrajeron las muestras de aguas residuales, saliva y fruta.
Se colocaron las muestras en los porta objetos.
Como se iban a realizar diferentes pruebas tuvimos que realizar tres

frotis de cada una de las muestras.

Uno fue en fresco, otro con azul de metileno y otro con el violeta yodo.
Se fijaron con calor en el porta y se pusieron al microscopio.
Se decoloraron con mezcla de alcohol etlico(acetona)
Se escurrieron las muestras con safranina durante 20 segundos.
Para el mtodo fresco solo se coloco la muestra en el portaobjetos y se

le coloco un cubre.
Se localizaron los microorganismos y se identificaron.

OBSERVACIONES
Todos los microorganismos tienen caractersticas diferentes y por lo tanto
diferentes aspectos que los diferencian a unos de otros y esto fue lo que se
observo en el microscopio. Por ejemplo, en la fruta se vean partculas
alargadas, en las aguas residuales solo se vea un conjunto de puntos
agrupado en un solo lugar y en la saliva se observaron pequeas burbujas.

Pltano

BIBLIOGRAFIA

Aguas residuales

Saliva

Pollack, R.A., Findlay, L., Mondschein, W. and Modesto R.R. 2002.

Laboratory Exercises in Microbiology. John Wiley & Sons, Inc. 232 pp.
Cappuccino, J. G. and Sherman,

N. 2001. Microbiology a Laboratory

Manual 5 th edition. Benjamn Cumming Publishing.