INFORME DE LA PRCTICA N 4.

a
IDENTIFICACIN MORFOLGICA DE LAS FASES DE MADURACIN
DEL ERITROCITO
FECHA:_______________________________________________________.
NOMBRE:_____________________________________________________________

I. CONTESTE CORRECTAMENTE LAS SIGUIENTES PREGUNTAS:

1. Cul es la competencia a desarrollar en la presente Prctica de Laboratorio?
2. Realice un diagrama de flujo del mtodo que utiliz para identificar los eritroblastos en la
extensin sangunea.
3. Escriba sus observaciones y resultados de la prctica realizada.
Al hacer la identificacin morfolgica, no olvide:
Anotar el nmero de la muestra.
Realizar el dibujo de la clula observada.
Escribir el nombre del eritroblasto, acorde al proceso de maduracin del eritrocito.
Anotar el nombre de la escuela que eligi para asignarle el nombre al eritroblasto.
Escribir el nombre y tipo de colorante utilizado en la prctica (por ejemplo si es
policromtico, supravital, etc.)

1. Cul es la competencia a desarrollar en la presente Prctica de Laboratorio?

Identificar la morfologa de cada una de las fases del eritrocito, dibujando cada una de ellas
( 4.a) y observando una muestra problema con eritroblastos (4.b).
Prctica 4.a
Diagrama de flujo del mtodo que utilizado para identificar los eritroblastos en la extensin
sangunea.

INFORME DE LA PRCTICA N 4.b

1. IDENTIFICACIN MORFOLGICA DEL PRONORMOBLASTO, PROERITROBLASTO O
RUBRIBLASTO:

MICROSCOPIO PTICO

COLORACIN: POLICROMTICA
DIBUJO

TAMAO: 20 a 25 micrmetros de dimetro.

NCLEO: grande, redondo u ovalado. Contiene
de uno a dos nucleolos indistintos, azul claro.
CROMATINA: forma una red delicada que da al
ncleo un aspecto reticular y deja solo pequeos
puntitos de paracromatina rosada que brillan a
travs de los intersticios.
CITOPLASMA: Forma solo un borde estrecho
azul oscuro. Es mas condensado y menos abundante que el de los mieloblastos o promielocitos.
Es posible se presente una aureola perinuclear.
PROPORCIN NCLEO-CITOPLASMA de 8:1
2. IDENTIFICACIN MORFOLGICA DEL NORMOBLASTO BASFILO,
ERITROBLASTO BASFILO O PRORUBRICITO:
MICROSCOPIO PTICO
TAMAO: De 16 a 18 micrmetros de dimetro.

COLORACIN: POLICROMTICA
DIBUJO

NCLEO: Redondo u ovalado y mas pequeo que

en la etapa anterior.
CROMATINA: forma racimos delicados por lo que
su aspecto general aparece mas denso y grueso que
en el pronormoblasto. No se ven nucleolos en el
eritroblasto basfilo.
PARACROMATINA:se dispone en puntitos rosados e irregulares.
CITOPLASMA: presenta un anillo un poco ms
ancho de citoplasma que el del pronormoblasto
de color azul obscuro. Presenta aureola perinuclear.
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PORCIN NCLEO-CITOPLASMA de 6:1

3. IDENTIFICACIN MORFOLGICA DEL NORMOBLASTO POLICROMTICO
ERITROBLASTO POLICROMTICO O RUBRICITO:
COLORACIN: POLICROMTICA
MICROSCOPIO PTICO
TAMAO: 9 a 12 micrmetros de dimetro.

DIBUJO

NCLEO: es ms pequeo que en las clulas

anteriores, posee una gruesa membrana y
contiene masas rugosas de cromatina.
CROMATINA:Con pequeas reas irregulares
en forma de alfiler en los intersticios.
CITOPLASMA : la banda de citoplasma se
ensancha a medida que el ncleo se reduce y
tiene un color lila ( policromtico ) por la
incipiente hemoglobinizacin.
RELACIN NCLEO-CITOPLASMA 2:1 a 4:1.

4. IDENTIFICACIN MORFOLGICA DEL NORMOBLASTO ORTOCROMO

ERITROBLASTO ORTOCROMO O METARUBRICITO
MICROSCOPIO PTICO

COLORACIN: POLICROMTICA
DIBUJO

TAMAO: de 7 a 10 micrmetros de dimetro.

La clula es algo mas pequea que el normoblasto
policromtico.
NCLEO: pequeo, central o excntrico, con una
cromatina condensada homogenea sin estructura.
Nota: El ncleo se vuelve picntico
CITOPLASMA: rosado y muy amplio que rodea
al ncleo que va decreciendo de tamao.
PORCIN NCLEO / CITOPLASMA 1:2 a 1:3

5. A) IDENTIFICACION MORFOLGICA DEL RETICULOCITO:

MICROSCOPIO OPTICO
COLORANTE: POLICROMTICO
DIBUJO:
TAMAO: de 8-10 micras de dimetro.
NCLEO: ausente.
CITOPLASMA: Presenta basoflia difusa.

B) IDENTIFICACION MORFOLGICA DEL RETICULOCITO:

MICROSCOPIO OPTICO
COLORANTE: AZUL DE CRESILO BRILLANTE
DIBUJO:
TAMAO: de 8-10 micras de dimetro.
NCLEO: ausente.
CITOPLASMA: Se observan retculos de RNA.

6.

IDENTIFICACIN MORFOLGICA DEL ERITROCITO O GLBULO ROJO.

MICROSCOPIO OPTICO
COLORANTE: POLICROMTICO
DIBUJO
TAMAO: alrededor de 7.5 a 8.3 micrmetros
de dimetro y con 1.7 micrmetros de espesor.
NCLEO: no existe.
FORMA: disco bicncavo.
CITOPLASMA : rosa anaranjado con un centro
mas claro que ocupa 1/3 del rea celular.

PRCTICA N 5
IDENTIFICACIN Y RECUENTO
DE RETICULOCITOS
5.1 INTRODUCCIN
Los reticulocitos son eritrocitos jvenes que acaban de abandonar la mdula sea, pero que
todava contienen RNA residual, los cuales permanecen de 1 a 1.5 das en la sangre, el rango normal
en los adultos es de 0.5 a 1.5 %.
Cuando los reticulocitos son teidos con colorantes supravitales exhiben retculos azulados por
la precipitacin del RNA residual facilitando su identificacin y recuento en

extensiones

sanguneas. Los reticulocitos pueden expresarse en valor relativo (tantos por ciento de hemates) o en
valor absoluto (numero de reticulocitos por litro de sangre).
Para el diagnostico Clnico de las anemias este es un excelente mtodo porque valora las
variaciones y eficacia de la produccin eritrocitaria. Sin embargo los reticulocitos no siempre
reflejan la actividad eritroide absoluta debido a que puede existir una liberacin prematura o
retardada a partir de la medula sea, as como diferentes grados de maduracin.
5. 2 INTERPRETACION DE LAS FASES DE MADURACIN DEL RETICULOCITO
Para identificar con facilidad el proceso de maduracin del reticulocito en un frotis de sangre
teida supravitalmente debemos de tomar en cuenta que cuanto mas joven es el reticulocito
presenta ms filamento y abundante retculo de RNA, el cual se tie intensamente de azul en
algunos casos rojizo. Los reticulocitos con colorante supravital se observan de color diferente al
teirse con una coloracin policromtica, generalmente se presentan de color azul plido o verdoso.
Actualmente la mayora de los hematlogos estn de acuerdo en clasificarlos tomando en
cuenta su grado de maduracin observando las caractersticas de sus filamentos reticulares. En base a
lo anterior se sealan los siguientes cuatro tipos:
Tipo I

Los ms jvenes son reticulocitos con trama cerrada.

Tipo II

Trama reticular definida y abierta

Tipo III

Trama reticular incompleta.

Tipo IV

Con ms granulaciones que trama reticular.

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5.3 METODOS DE LABORATORIO PARA LA IDENTIFICACIN DE RETICULOCITOS

EMPLEANDO SANGRE CAPILAR O VENOSA
5.3.1 MATERIAL Y EQUIPO DE LABORATORIO
MATERIAL BIOLGICO
Sangre capilar o venosa con EDTA como anticoagulante.
MATERIAL
Gradilla
Tubos de ensaye 10 x 75mm.
Contador manual de clulas
Portaobjetos
Microscopio
Nota: Boquilla y pipeta de Thoma si la muestra es capilar.
REACTIVOS

Vacutainer con EDTA.

Colorante de Azul de Cresilo brillante
Nuevo azul de metileno 1%
Aceite de inmersin

5.3.2 TCNICA DE TINCIN

EMPLEANDO SANGRE VENOSA
1. En un pequeo tubo de ensaye, colocar primeramente 5 gotas de solucin colorante de Azul de
Cresilo brillante y despus igual cantidad de sangre.
2. Mezclar perfectamente y reposar de 15 a 25 min. Se recomienda sea a bao Mara.
3. Preparar varias laminillas y dejar secar al aire, para su posterior observacin microscpica bajo
inmersin. (En algunos laboratorios acostumbran realizar despus de la coloracin supravital una
coloracin de contraste utilizando el colorante de Wright).
EMPLEANDO SANGRE CAPILAR

La

toma de muestra se hace utilizando una boquilla y pipeta de Thoma para recuento de

reticulocitos. Primeramente se llena la pipeta de Thoma, hasta la mitad del bulbo con la solucin
colorante y despus se completa con sangre capilar hasta la marca 11.
1. Mezclar perfectamente y reposar 15 min.
2. Una vez transcurrido el tiempo del reposo, preparar varias laminillas para su posterior
observacin microscpica bajo inmersin.

5.4 RECUENTO PORCENTUAL Y ABSOLUTO DE RETICULOCITOS:

a) Calcular el recuento % de reticulocitos observando 1000 eritrocitos en 5 campos utilizando el
microscopio ptico y el objetivo CIA (campo de inmersin en aceite) de 100X (aumento de 1000 al
multiplicar 10X del ocular y 100 X del objetivo). Seleccionar el campo con el objetivo de 40X
procurando escoger para la cuenta % una zona en donde los eritrocitos no estn empalmados o se
toquen unos a otros.
Al contar los eritrocitos cuente los reticulocitos por separado.
b) Determinar el recuento absoluto de reticulocitos multiplicando el porcentaje de reticulocitos
obtenidos por el recuento de eritrocitos /mm 3 y posteriormente dividir el resultado entre 100. As
obtendremos una expresin ms real de la eritropoyesis.

V. A = % R X Gr / mm3
100
El valor relativo viene siempre referido a una cifra normal de hemates, por lo que,
cuando existe Anemia con disminucin del nmero de hemates, dicho valor debe ser corregido de
acuerdo con la intensidad de la misma para poder ser considerado como real.
La correccin suele realizarse a partir del valor de hematocrito (VH.) mediante la siguiente frmula:
RETICULOCITOS CORREGIDOS (%) =
Reticulocitos observados (%) X

VH del paciente
VH normal
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En caso de Anemia intensa, el nmero de reticulocitos en sangre perifrica es

generalmente superior al que corresponde al grado de regeneracin eritroblstica.
Ello obedece a que la Anemia se acompaa siempre de un estimulo eritropoytico compensador que
facilita una salida precoz de reticulocitos desde la medula a la sangre perifrica y un acortamiento del
periodo de maduracin perifrica. Este fenmeno se le conoce como

Desviacin

reticulocitaria(Fenmeno Shift ).
5. 5 CAUSAS DE ERROR
1. Emplear una relacin sangre-colorante insuficiente (Ej. en una Anemia intensa)
2. Efectuar el recuento sobre un nmero reducido de hemates (se hallan mal distribuidos o mal
individualizados).
3. Confundir los precipitados de RNA con cuerpos de Heinz, siderocitos o precipitados del propio
colorante.
4. En caso de esplenectoma, confundir las inclusiones intraeritrocitarias con reticulocitos.

5.6 INFORME.
Elabore correctamente el reporte de la prctica de laboratorio N 5 y entrguelo el da establecido.