DEPARTAMENTO: CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA

LABORATORIO DE BIOQUMICA I

TEMA: HIDROLISIS DE ALMIDON

NOMBRE: GABRIELA AYALA

PAL JCOME

NRC: 2348

OCTUBRE 2015-FEBRERO 2016

INTRODUCCIN
Los polisacridos son polmeros de carbohidratos sencillos unidos por uniones
glucosdicas. Normalmente contienen un gran nmero de monmeros, que pueden ser
de un tipo, o de dos o ms tipos distintos unidos siempre de forma alternada. Por lo
general, la molcula tiene un solo termino reductor y muchos trminos no reductores,
por lo que en si la molcula no muestra caractersticas reductores. Las uniones
glucosdicas pueden hidrolizarse, sea con un cido mineral o con enzimas.
El almidn es un polisacrido que es reserva alimenticia de las plantas, pero las clulas
para la obtencin de su energa no pueden metabolizar el almidn como tal, sino que es
necesario que lo degraden por hidrolisis hasta sus constituyentes monosacridos o
glucosas, para que estas puedan metabolizarse en los caminos energticos.
A medida que el nmero de monmeros aumenta, las caractersticas reductoras se van
haciendo ms y ms lenta. De ah que los polisacridos, a pesar de tener su ultimo
monmero, con carbono anomrico, potencialmente libre, en la prctica nunca son
reductores. Pero si los polisacridos se hidrolizan, entonces si mostraran las
caractersticas reductoras de sus monmeros constituyentes. (Vjar, E, 2005)
El curso de la hidrolisis se puede seguir de dos maneras: o por la desaparicin de la
reaccin con el yodo a medida que avanza la hidrolisis, o por la formacin de azucares
reductores. Mientras ms hidrolizado este el almidn, mas azucares reductores habr, y
menor ser la reaccin con el yodo hasta hacerse totalmente negativa. (Vjar, E, 2005)
El reservorio nutricional de las plantas es el almidn, del cual existen dos formas. La
amilosa, el tipo no ramificado del almidn, consta nicamente de residuos de glucosa
con uniones alfa 1-4. La amilopectina, la forma ramificada, tiene un enlace alfa 1-6, por
cada 30 enlaces alfa 1-4, de estructura semejante al glucgeno, excepto en su menor
grado de ramificacin. Ms de la mitad de los carbohidratos ingeridos por el hombre
son almidn. Tanto la amilopectina como la amilosa se hidrolizan rpidamente por la
alfa amilasa, una enzima que secretan las glndulas salivales y el pncreas. (Berg. J,
Tymoczko. J, Stryer. L, 2010)
OBJETIVOS:
Obtener la hidrlisis de una muestra que contiene almidn.
Demostrar que la hidrlisis del almidn se produjo al obtener maltosa y luego glucosa
que se identifica con el reactivo de Fehling
METODOLOGIA
Muestras: Almidn procedente de muestras vegetales
Equipos: Balanza analtica.
Materiales de proteccin personal: Mandiles. Mascarillas con filtro de gases.
Guantes de ltex.
Reactivos:
Reactivo de Fehling A: En un matraz de 500 mL se disolvieron 34.5 g de sulfato de
cobre pentahidratado (Cu SO4. 5H2O), primero en una pequea cantidad de agua
destilada y luego se la llev hasta el enrase.

Reactivo de Fehling B: En un matraz de 500 mL se disolvieron en agua destilada el

tartrato de sodio y potasio, se aadi 62 g de hidrxido de sodio, disuelta en 100 mL de
agua destilada se mezcl bien y el volumen se lo llev hasta la raya de enrase.
Solucin de almidn al 1%
Solucin de lugol: En 100 mL de agua destilada se disolvieron 20 g de yoduro potsico
y 10 g de yodo.
cido clorhdrico concentrado.
Hidrxido de sodio al 10 %
Preparado de saliva: A 1 o 2 mL se lo diluy en cuatro a cinco veces su volumen
Materiales e insumos:
Gradilla
Tubos de ensayo
Vasos de precipitado
Gotero
Pinzas de madera
Pipetas
Mecheros
Varillas de vidrio
Esptulas
Plancha de calentamiento
Piceta
Bureta
Papel aluminio.
Tiras de papel indicador.
Termmetro.
Bao Mara
Peras de succin
Organismos: No aplica
Procedimiento:
Hidrlisis de almidn
En un tubo de ensayo se verti de 3 a 5 mL de solucin de almidn.
1. Se aadi al tubo varias gotas de cido clorhdrico concentrado.
2. Se mezcl y se hirvi con Bao Mara
3. Se hizo hervir por 2 a 3 minutos y luego se tom una muestra para la reaccin
con iodo.
4. La cantidad que se extrajo son varias gotas que a su vez fueron depositadas en
un tubo de ensayo que contena 5 a 6 mL de agua destilada y se aadi 2 gotas
de lugol.
5. Si exista coloracin azul era por la presencia de amilodextrinas.
6. El tubo de ensayo con la disolucin se hirvi de 1 a 2 minutos ms y se repiti la
misma prueba con iodo.
7. Apareci entonces la coloracin rojo pardiza de las dextrinas
8. Se hirvi nuevamente la disolucin de almidn por 2 a 3 minutos de hervor

9. Se realizan nuevamente las pruebas con iodo.

10. El almidn se desintegr al final en glucosa produciendo productos
intermediarios acrodextrina, maltodextrinas, maltosa.
11. Finalmente se aadi el reactivo de Fheling para confirmar la hidrlisis
completa y obtencin de la glucosa.
Hidrlisis enzimtica de almidn
1. En un tubo de ensayo se verti de 3 a 5 mL de solucin de almidn
2. Se aadi de 0,5 a 1 mL de saliva.
3. Se mezcl cuidadosamente y se puso en el bao Mara a 10 a 15 minutos y a una
temperatura de 37 a 40 grados centgrados.
4. Se hizo las pruebas de manera repetida con el iodo hasta la ausencia de coloracin
caracterstica porque la hidrlisis haya terminado.
5. La presencia de glucosa se determina con la utilizacin de reactivo de Fehling.
RESULTADOS
Resultados primarios: Comprensin de las estructura de un polisacrido que pasa por
compuestos intermedio como las dextrinas, maltosa y finalmente obtener glucosa que se
identifica con el reactivo de Fheling.
Clculos matemticos y estadsticos: No aplica
Reporte de resultados
Tabla de resultados observados
Hidrlisis de almidn
Muestra
Almidn + HCl +
lugol
Almidn + saliva +
lugol
Almidn + HCl +
saliva + Fheling

Amilodextrinas

Dextrinas

Glucosa

Negativa

Positiva

Positiva

Muestra: procedencia de la disolucin de almidn utilizada.

Amilodextrinas: positivo (coloracin azul) o negativo segn si se observ la coloracin
de reaccin.
Dextrinas: positivo (coloracin pardo rojiza) o negativo segn si observo la coloracin
de reaccin.
Glucosa: positivo (rojo ladrillo) o negativo segn la reaccin caracterstica con Fehling
DISCUSION

A medida que el nmero de monmeros aumenta, las caractersticas reductoras

se van haciendo ms y ms lenta. De ah que los polisacridos, a pesar de tener
su ultimo monmero, con carbono anomrico, potencialmente libre, en la
prctica nunca son reductores. Pero si los polisacridos se hidrolizan, entonces si
mostraran las caractersticas reductoras de sus monmeros constituyentes.
(Vjar, E, 2005). En la prctica esto pudimos comprobar, ya que realizamos la
hidrolisis del almidn con enzima amilasa (saliva), la prueba dio positiva para
glucosa con Fheling, y positiva para dextrinas en la prueba con yodo.
La obtencin de una sustancia colorida al reaccionar con el yodo con el almidn,
el yodo se coloca centralmente en las hlices que se forman de cadenas
polisacridos enrollados. El color depende del largo de la seccin linear de la
molcula del almidn. La amilosa pura (amilodextrinas) que es el polisacrido
exclusivamente linear, dar con el yodo el color ms intenso de un azul
profundo. Las dextrinas formadas por hidrolisis del almidn dan un color que
vara de caf a la ausencia de color, dependiendo del tamao de la molcula.
(Vjar, E, 2005). Ninguna de las muestras de almidn tomaron un color azul,
debido a que no haba presencia de amilodextrinas, en la prctica a la solucin
donde aadimos saliva, se produjo una hidrolisis enzimtica, y con ayuda de la
temperatura la muestra se torn de un color caf oscuro a un amarillo hasta casi
desaparecer el color., dando positiva la presencia de dextrinas.
El color disminuye cuando la temperatura aumenta, hasta desaparecer por
completo, y se intensifica al bajar nuevamente la temperatura. Esto indica la
formacin y destruccin de los complejos de coordinacin entre el yodo y el
almidn. (Vjar, E, 2005). En la prctica pudimos comprobar esto, ya que al usar
una temperatura alta, mayor a 40 grados, la disolucin se decolor rpidamente,
y al repetir la prueba con temperatura no mayor a la indicada, la muestra no se
decoloraba rpidamente, lo cual indica que no estaba totalmente hidrolizado el
almidn.

CONCLUSIONES
Se obtuvo la hidrlisis de una muestra que contena almidn.
Se demostr que la hidrlisis del almidn se produjo al obtener maltosa y luego
glucosa que se identific con el reactivo de Fehling
La hidrolisis del almidn pudo comprobarse por la desaparicin del color en la
reaccin con yodo a temperaturas no mayores a 40 grados, caso contrario se
destruyeron, por la temperatura demasiado alta.
CUESTIONARIO:
Cul es la enzima que de la saliva que permite la hidrlisis del almidn en
el ser humano?
Ptialina o Amilasa salival secretada por los 3 pares de glndulas salivales, inicia
la degradacin primaria del Almidn en Maltosa (Disacrido) en la Boca
mediante la Insalivacin.
Explique cmo se puede llegar a identificar la glucosa a partir de almidn?
Al tener la muestra disuelta de almidn procedemos a colocar unas gotitas de
cido clorhdrico concentrado, este ara que las cadenas de glucosa del almidn
se destruyan y queden libres las glucosas para que esta reaccin suceda debemos
calentar la muestra por 10min en hervor.

La prueba del yodo nos permitir identificar la presencia de almidn pues

tomar un color azul, por otra parte, cuando pase de azul a amarillento las
cadenas de almidn se desintegran al final en glucosa produciendo productos
intermediarios acrodextrina, malto dextrinas, maltosa. Y finalmente aadir el
reactivo de Fheling para confirmar la hidrlisis completa y obtencin de la
glucosa.
Cmo acta la enzima de la saliva para hidrolizar el almidn?
La amilasa romper los enlaces de almidn y dar como resultado la amilosa,
amilo pectina y finalmente glucosa. Debemos calentar la muestra a temperatura
corporal que es de 370 C ya que si aumentamos a temperatura las enzimas de la
saliva se destruirn.
La prueba del yodo nos permitir identificar la presencia de almidn pues
tomar un color azul, por otra parte, cuando pase de azul a amarillento las
cadenas de almidones han sido destruidas y finalmente convertidas a glucosas.
Si queremos ver si es reductor o no reductor debemos colocar el reactivo de
Fheling A y Fheling B y al calentarlo pasara de un color azulado a un color rojo
ladrillo si es reductor.
La reaccin con el cido clorhdrico frente al almidn fue eficiente como la
reaccin de hidrlisis provocada por la enzima?
Las dos reacciones fueron eficientes tanto con el cido clorhdrico, como con la
enzima de la saliva, estas dos pruebas destruyeron las cadenas de almidn la que
comprobamos al poner lugol y luego calentarlas que nos dieron un color
amarillento comprobando la hidrlisis y obtencin de glucosa.

ANEXOS

Disolucin de almidon y HCl

Prueba negativa para amilodextrinas

Prueba positiva para dextrinas

Prueba positiva para glucosa con Fheling

REFERENCIAS:
Vjar Rivera, E. (2005). Practicas de bioquimica descriptiva. Mxico: Universidad de
Sonora :
Tymoczko, J., Berg, J. and Stryer, L. (2010). Biochemistry. New York: W.H. Freeman.