UNIVERSIDAD MARIANO GLVEZ DE GUATEMALA

1
FACULTAD DE MEDICINA
QUETZALTENANGO
Microbiologa I

Pgina No.

1 De

Nombre: Kimberly Jurez

Nombre: Nohemy Lpez
Fecha: 08/02/16

REPORTE DE LABORATORIO
PRCTICA No. 3

PRESENCIA DE MICROORGANISMOS Y COLORACIN

SIMPLE
1. Objetivos:

Familiarizar
el manejo del microscopio ptico para la visualizacin de
microorganismos as como las tinciones ms habituales en el laboratorio de
Microbiologa.
Aprender las tcnicas de preparacin de diferentes medios de cultivo.
Comprobar la presencia de bacterias en diferentes superficies.
Aprender a preparar frotis y as mismo poder distinguir algunas caractersticas de
los microorganismos.

2. Resumen:
Una caracterstica importante de las bacterias es la ubicuidad. Esto significa
que estn presentes en todo lugar dentro de la Biosfera. Existen bacterias
adaptadas a ambientes en los cuales ninguna otra forma de vida sobrevive. Se
afirma que las bacterias son la forma de vida ms antigua, simple y numerosa.
Son organismos unicelulares y en muchos casos se agrupan en colonias. A pesar
de que habitan por millones a nuestro alrededor, slo es posible verlas con ayuda
de un microscopio y de tcnicas especficas de tincin y aislamiento.
En la prctica de presencia de microorganismos y coloracin simple se trabaj
con 5 cajas Petri por grupo, siendo una muestra de ambiente entre la pareja, la
muestra de manos y superficie se trabaj individual.
La muestra de ambiente que fue tomada en una esquina del laboratorio, se
observ un crecimiento bacteriano de colonias vistosas por sus colores y
tamaos, adems se encontr la presencia de un hongo que creci en todo el
agar y se asume que es por la humedad del sitio en que fue colocada la caja.
En las muestras de manos se encontraron variedad de colonias en ambos lados
de la caja Petri, habiendo una pequea reduccin bacterias en el lado limpio
aunque no fue tan significativa y que pudo deberse a que la tcnica de lavo no
fue la adecuada.
En las muestras de superficie antes de la asepsia se encontraron varias colonias
despus se redujo significativamente el nmero, ya que las del lado sucio fueron
las que invadieron el lado limpio.
Por lo que concluimos que todos los objetos y reas tienen bacterias y su
nmero solamente se puede reducir con una asepsia adecuada, adems
aprendimos sobre la realizacin de un frotis adecuado y se pudo observar al

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microscopio algunas de las caractersticas de los cocos, aunque no se pudo

distinguir la especie por el tipo de tincin que utilizamos.

3.

1) Muestra: Cocos en racimos, coloreado con safranina.

Objetivo: 100
Aumento: 1000x
Mezcla: Aceite de Inmersin

R
e
s
u
l
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a
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o
s
:

2) Muestra: Cocos en racimos

Preparacin: coloreado con Azul de metileno.
Objetivo: 100
Aumento: 1000x
Mezcla: Aceite de Inmersin

Lectura de Cultivos:
Muestra de Superficie (dispensador de papel):

Sucia: est invadida por un hongo que contamino el lado limpio. Adems se
encuentran bacterias de color amarillo, blanco, rosado y caf; son brillantes y se
encuentran aisladas unos de las otras.
Muestra de superficie (Mesa de Trabajo):
Sucio: Presencia de bacterias blancas, amarillas y una blanca con centro
amarillo y se observa el color brillante y mucoso.
Limpio: Se redujo la presencia de bacterias pero an se encuentra una colonia
de color blanco que fue resistente a la asepsia.
Muestra de Manos (Nohemy)

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Sucio: Se encuentra la presencia de bacterias blancas, en racimos, brillantes

con una colonia amarilla que no est aislada y se observa con sus bordes bien
delimitados.
Limpio: Colonias ms grandes de las que se observan en el agar sucio, blancas
y amarillas con aspecto brillante y bordes bien delimitados.

Muestra de Manos (Kim)

Sucio: Colonias blancas, pequeas, brillantes y en algunas no se encuentran los
bordes bien delimitados.
Limpio: las colonias se encuentran ms grandes, colonias de color blancas y
con bordes bien delimitados.
Muestra de Ambiente
Hay presencia de colonias con aspecto radiado, otras con aspecto ondulado y
elevada con centro solvente, existe presencia de colonias con centro cremoso de
menor dimetro y otro tipo de colonias brillantes elevada con bordes regulares y
lisas.

4. Discusin:
En la muestra del ambiente que fue tomada en una esquina del laboratorio, se
observ un crecimiento bacteriano de colonias vistosas por sus colores y tamaos,
con formas muy llamativas ya que tenan apariencia radiada y con centro cremoso y
brillante, aunque tambin la presencia de un hongo que creci en todo el agar y se
asume que es por la humedad del sitio en que fue colocada nuestra caja de Petri.
En la muestra de manos de ambas integrantes, se observaron varias colonias,
variando el tamao de una muestra con la otra en la parte sucia, pero en el rea
limpia se pudo observar en la muestra de Kimberly que las colonias redujeron su
nmero despus del lavado de manos, pero no fue una cantidad significativa ya que
las colonias se vean ms grandes en comparacin del lado sucio y esto puede
deberse a que por la presencia de menos colonias estas mismas tienden a crecer
ms en un ambiente apropiado para ellas.
En la muestra de la superficie de trabajo en el rea antes de la asepsia si se logr
un recuento de 5 colonias bien definidas con bordes bien marcados de color blanco
y amarillo aunque en el lado asptico, se encontr presencia de bacterias de mayor
tamao y de color blanco. Si se redujo la presencia de colonias del lado limpio a
comparacin del lado sucio eso se debe a que la limpieza es efectiva con alcohol y
cloro para reducir el crecimiento bacteriano.

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5. Conclusiones:

Las muestras obtenidas en el rea de trabajo nos indican que todos los
objetos y reas tienen bacterias y su nmero solamente se puede reducir con
una asepsia adecuada.

El observar las distintas caractersticas de las bacterias en el microscopio

ayuda al aprendizaje visual y no solamente terico de las caractersticas
bacterianas.

Gracias a la prctica ya se puede realizar un frotis y aplicar la tcnica de

coloracin simple.

6. Cuestionario:

A qu se refiere el trmino Tcnica asptica ?

o Se refiere a las prcticas que reducen la posibilidad de que los
microorganismos entren en el cuerpo durante procedimientos clnicos,
reduciendo as a su vez el riesgo de que los usuarios se infecten ms tarde.

Por qu no se debe hablar durante los procedimientos de determinacin

de presencia de microorganismos?
o Porque la boca es una entrada de cualquier agente infeccioso que podra
contagiarnos y provocar una enfermedad.
o Entre las enfermedades infecciosas que son posibles contagiarse a travs de
la cavidad oral, se encuentran enfermedades respiratorias como tuberculosis,
de transmisin sexual como hepatitis B, sfilis, e infecciones producidas por
sp. Streptococcus, sp. Staphylococcus, sp. Pseudomonas y Cndida
albicans. La transmisin de estas enfermedades se produce preferentemente
por exposicin a sangre o fluidos corporales de los pacientes. No obstante,
los agentes requieren ingresar y multiplicarse en el organismo de otra
persona para producir la enfermedad. Hoy en da, se considera inaceptable
que el personal del equipo de salud adquiera enfermedades de este tipo,
porque todas ellas pueden prevenirse con medidas universales como el
lavado de manos, uso de barreras protectoras, correcta aplicacin de la
tcnica asptica y de las precauciones estndar.

Por qu se debe dejar los cultivos 48 horas en la incubadora?

o Porque es el tiempo en el cual se presentaran colonias visibles si se cultiva
en condiciones ptimas. Algunos microorganismos tienen un perodo de
tiempo similar, en las condiciones adecuas o necesitan ms tiempo para
mostrar las colonias visibles.

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Por qu en la mayora de muestras se obtuvo un recuento bacteriano tan

bajo?
o Fue por el tiempo de incubacin ya que a las 48 horas se detuvo el
crecimiento bacteriano sacndolo de la incubadora y metindolo a un
refrigerador.
Cules son las bacterias consideradas MMN para la piel humana?
o La flora normal es una coleccin de organismos que se encuentra
habitualmente en el individuo sano normal y que coexisten en forma bastante
pacfica en una relacin equilibrada con su husped. La mayora de los
organismos de la flora son bacterias.
o FLORA DE LA PIEL
Staphilococcus (estafilococos):
epidermidis (90 % del total de germenes aerobios de la piel).
aureus: presente en cara y manos de portadores nasales de dicho
germen.
Streptococcus (estreptococos).
Difteroides (corinebacterias), en folculos pilosos, glndulas sebceas y
sudorparas.
Propionibacterium cnes.
Micrococcus.
Candida: sobre todo en personal sanitario.
o ZONAS DE LA PIEL CON MAYOR FLORA
Cuerto cabelludo, cara y oido.
Axilas.
Regiones urinarias y anal.
Plantas y espacios interdigitales de los pies.
o FLORA DE LA NARIZ
Staphilococcus (Estafilococos).
aureus (20 % de la poblacion).
epidermidis.
Micrococcus.
Streptococcus (Estreptococos).
Difteroides.
o FLORA DE LA CONJUNTIVA
Staphilococcus:
epidermidis.
aureus.

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Streptococcus.
Propionibacterium acnes.
Haemophillus sp.
Neisserias sp.
o FLORA DE LA BOCA
Streptococcus del grupo viridans:
mitis.
mutans (relacionados con las caries).
sanguis.
Otros.
Otros Streptococcus no viridans.
Bacteroides.
Fusobacterium.
Actinomyces.
Trichomonas tenax.
Cndida.
o FLORA FARINGEA
Streptococcus:
grupo viridans
S. pyogenes (Beta Hemoltico del grupo A)
S. pneumoniae (neumococo)
Staphylococcus:
epidermidis.
aureus.
Especies de Neisseria.
A veces: Neisseria meningitidis.
Haemophilus influenzae.
o FLORA DEL PULMN
Pneumocystis carinii (en muchas personas, segn algunos expertos)
o FLORA DE LA URETRA ANTERIOR
Staphylococcus epidermidis.
Estreptococos, sobre todo alfa hemoliticos.
Enterococcus feacalis.
o FLORA DEL ESTOMAGO
Lactobacilos.
Streptococcus (Estreptococos) acidotolerantes.

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o FLORA DEL INTESTINO DELGADO

Lactobacilos.
Estreptococos.
Enterobacterias.
Especies de bacteroides.
Candida.
o FLORA DEL INTESTINO GRUESO (COLON)
Especies de bacteroides.
Especies de fusobacterium.
Enterococo feacalis.
Enterobacterias.
Escherichia coli.
Especies de Klebsiella.
Salmonellas.
Pseudomonas.
Eubacterias.
Bifidobacterias.
Lactobacillus.
Especies de Clostridium.
Staphilococcus aureus
Estreptococos.
Candida.

Qu son los medios de enriquecimiento?

o Son medios de cultivos que contiene los nutrientes necesarios para apoyar el
crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, entre ellos algunos
de los ms exigentes. Se utilizan comnmente para la cosecha de diferentes
tipos de microbios que estn presentes en la muestra.
o Algunos ejemplos de medios de cultivo de enriquecimiento son:
Agar sangre es un medio enriquecido en el que los suplementos de la
sangre les proporciona todos los nutrientes bsicos.
Agar CLED
Agar McConkey
Agar chocolate
Agar Sabouraud
Caldo Selenito

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Investigue sobre las buenas prcticas en un laboratorio de microbiologa.

Es un conjunto de reglas, de procedimientos operacionales y prcticas
establecidas y promulgadas por determinados organismos como la (Organization
for Economic Cooperation and Development (OCDE), o la Food and Drug
Administration (FDA), etc.), que se consideran de obligado cumplimiento para
asegurar la calidad e integridad de los datos producidos en determinados tipos
de investigaciones o estudios".
Esto surge debido a que a Fines de los aos 1969 y 1975 las agencias
reguladoras se enfrentaron con grandes discrepancias en los datos dirigidos a
ellas, obtenidos en distintos laboratorios.
Haba caso de laboratorios que no operaban con protocolos y la informacin slo
estaba en forma oral, en general los informes eran incompletos y no contaban
con documentos de procedimientos estandarizados.
Era necesario realizar un mejor trabajo, tanto en el manejo y desarrollo de
estudio de informes como en reportes de los laboratorios.
Las BPL abarcan todos los eslabones de un estudio o investigacin, y para ello
se precisa que previamente se haya establecido un "Plan de Garanta de la
Calidad". Para verificar que el Plan se cumple a lo largo de todo el estudio, se
precisa de "un sistema planificado de actividades", cuyo diseo o finalidad es
asegurar que el Plan de Garanta se cumple.

Se incluyen las dos definiciones ms usuales de BPL:

OCDE: "Las BPL es todo lo relacionado con el proceso de organizacin y las
condiciones tcnicas bajo las cuales los estudios de laboratorio se han
planificado, realizado, controlado, registrado e informado".
AOAC: "Las BPL son un conjunto de reglas, procedimientos operativos y
prcticos establecidas por una determinada organizacin para asegurar la
calidad y la rectitud de los resultados generados por un laboratorio".

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Fecha: 08/02/16

Las normas BPL constituyen, en esencia, una filosofa de trabajo, son un

sistema de organizacin de todo lo que de alguna forma interviene en la
realizacin de un estudio o procedimiento encaminado a la investigacin de
todo producto qumico o biolgico que pueda tener impacto sobre la especie
humana. Las normas inciden en cmo debe trabajar a lo largo de todo el
estudio, desde su diseo hasta el archivo.

Principales principios que abarcan las BPL. Basado en las descripciones de

Goldman son:
1. Facilidades Adecuadas. Desde el punto de vista del trabajo, para que
ste pueda ser realizado por los trabajadores en forma segura y
apropiada. Se debe contar con suficientes salas, para que el personal
trabaje sin limitaciones de espacio. El propsito y el tipo de producto a
analizar deben ser considerados en el diseo de un laboratorio.
2. Personal Cualificado. Es importante contar con personal cualificado.
Esto es una decisin de manejo basada en trabajo de calidad.
3. Equipamientos Mantenidos y Calibrados. Emplear equipos
mantenidos y calibrados de manera apropiada. Adems disponer de los
registros de los mantenimientos.
4. Procedimientos Estndares de Operacin (SOPs). Procedimientos
operacionales estndares escritos. Ellos aseguran que cada uno
obedezca al nico procedimiento al mismo tiempo, porque no es lo mismo
dar las indicaciones en forma oral, o decir que se sigan las indicaciones
que aparecen en alguna literatura, donde muchas veces la traduccin no
es la ms adecuada, que si est establecidas por escrito.

Investigue sobre los microorganismos utilizados en la prctica.

Staphylococcus:
Son clulas esfricas Gram + dispuestas en racimos irregulares.

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Fecha: 08/02/16

Los estafilococos son organismos inmviles que no forman esporas. Sus

dimetros varan entre 0.7 y 1.2 micras. Los cocos de las capas
patgenas tienden a ser menores que las cepas no patgenas.
Los estafilococos (staphylococcus en ingls o su abreviacin staph), es un
tipo de bacteria que vive en muchas superficies de la piel sin ocasionar
ningn dao, especialmente alrededor de la nariz, la boca, los genitales y
el ano. Pero cuando la piel es punzada o en el caso de una herida, las
bacterias estafilococos pueden entrar en la herida y causar una infeccin.
Al igual que con otros cocos, se ha comprobado que los estafilococos
producen infecciones en muchos tejidos, rganos y tractos del cuerpo.
Las enfermedades que pueden desarrollar el gnero estafilococo por la
produccin de toxinas, son: Entero toxinas - diarreas, vmito y nuseas
Dao en la piel - separando el estrato granuloso del crneo, dando el
signo de piel escaldada.

7. Bibliografa:
http://tecnias-asepticas.blogspot.com/2009/11/definicion.html

DIEGO ARREDONDO GALLEGUILLOS

http://repositorio.uchile.cl/tesis/uchile/2006/arredondo_d/sources/arredond
o_d.pdf
Ryan Mac, Traducido por Maria Eugenia Gonzalez
http://www.ehowenespanol.com/tecnicas-incubacion-crecimientobacteriano-hechos_136856/
http://www.losmicrobios.com.ar/microbios/?page_id=1236
MIMS PLAYFAIR ROITT WAKELING WILLIAMS MOSBY / DOYMA
LIBROS PRIMERA EDICIN EN ESPAOL DE LA PRIMERA EDICIN EN
INGLES. COPYRIGHT (c) 1995.
THOMAS D. BROCK BIOLOGIA DE LOS MICROORGANISMOS LA
FLORA NORMAL DE LOS ANIMALES. CAPITULO 12
http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/docume
n/uni_02/44/GLP.htm
GOLDMAN D.S., Good Laboratory Practices: An Agrochemical Perspective,
Garner, W. Y. (Ed) at the 194th Meeting of the American Chemical Society,
New Orleans, Louisiana, Chemical Aspects of Compliance with Good
Laboratory Practices, EPA Perspective on Generic Good Laboratory
Practice, pp. l3~23.