REPROGRAMACIN DE GENES MEDIANTE LA TCNICA CRISPR/CAS9

EN CIGOTOS TRIPRONUCLEARES HUMANOS

Autores:
Roxana Montilla, Leomarys Bolvar y Liliam Daz
Asesora: Eva Cabrera
RESUMEN

Descriptores:

INTRODUCCIN
Hoy en da es fcil mirar al mundo y pensar que estamos viviendo tiempos
diferentes, donde muchas cosas han cambiado en el cual los avances tecnolgicos han
marcado la historia de gran manera. En la dcada de 1970 se abrieron nuevas
perspectivas en el campo de las biotecnologas gracias al perfeccionamiento de
nuevas tcnicas que permiten llegar directamente al material que est en el origen de
todas las caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este conjunto de
tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de ingeniera
gentica. Su objetivo es la manipulacin in vitro del ADN, la introduccin de este
ADN as modificado en clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del
material hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias,
por ejemplo, la fraccin de ADN humano que regula la sntesis de insulina, puede
introducirse en bacterias de manera que pasa a formar parte de su genoma y lograr as
que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar insulina. De esta manera la
biotecnologa permite modificar de forma selectiva la actividad de los organismos
vivos, buscando una utilidad prctica en diversos sectores, en la medicina, la
agricultura, la alimentacin, la energa, el medio ambiente y la produccin industrial
(Duque, 2010).
Dentro de los avances biotecnolgicos, la comunidad cientfica ha estado
investigando en los ltimos tiempos en torno a tcnicas que permitan manipular el
genoma de los seres vivos con la intencin de lograr el tratamiento de las
enfermedades humanas, basado en la transferencia de material gentico a las clulas
de un individuo. Habitualmente la finalidad de esta transferencia de material gentico
o terapia gnica es restablecer una funcin celular que estaba ausente o defectuosa,
introducir una nueva funcin o bien interferir con una funcin existente.

As, las distintas estrategias de la terapia gnica se basan en la combinacin de tres

elementos clave, el material gentico a transferir, el mtodo de transferencia y el
tipo celular que incorporar dicho material gentico. Inicialmente la atencin se
centr en el tratamiento de las enfermedades hereditarias monognicas, pero
posteriormente la mayor parte de los ensayos clnicos (ms de cuatrocientos) han
abordado el tratamiento del cncer. En China se ha aprobado un producto gentico
para su comercializacin: un adenovirus que transfiere la versin correcta del gen
supresor de tumores p53. Y a finales de los 90, un grupo de nios con
inmunodeficiencia combinada severa fue exitosamente tratado mediante la
transferencia ex vivo a clulas de su mdula sea de la versin correcta del gen
alterado, aunque algunos de estos nios han desarrollado ms adelante sndromes
linfoproliferativos por la activacin de un oncogn en las clulas corregidas. La
terapia gnica humana es factible y puede ser til, pero las herramientas necesitan ser
perfeccionadas para que pueda llegar a formar parte del arsenal teraputico habitual
(Ruiz y Sangro, 2005).
La terapia gnica de mayor desarrollo hasta el momento, ha sido la dirigida a
clulas somticas, no germinales, lo que asegura que la transferencia slo afecte al
individuo en tratamiento y no a su descendencia (Ruiz y Sangro, 2005). Sin embargo,
a pesar de las implicaciones ticas, se ha querido modificar el material gentico en
embriones humanos con la intencin de corregir condiciones genticas existentes en
el embrin y no tratables por otros mtodos. Los primeros estudios fueron realizados
en animales, por ejemplo: La oveja Dolly (Wilmut y
primer mamfero clonado a

partir

de

una clula adulta;

primera oveja clnica y transgnica a la vez

Campbell, 1997) fue el

la oveja

Polly es

la

(Wilmut,1997), le fue insertado

un gen humano que codifica protenas humanas que actan como factores de
coagulacin. , monos transgnicos, se realiz para demostrar que CRISPR puede
crear primates viables se modific tres genes en los monos: uno que regula el
metabolismo, otro que regula el desarrollo de las clulas inmunes y un tercero que
regula las clulas madres (Young S. 2014), la rana translucidas, entre otros. Luego de

mltiples experimentos fue en la universidad de Sun Yat-sen, en China, donde

lograron modificar por primera vez embriones humanos, con el objetivo de cambiar el
gen responsable de la B-talasemia, la cual es un trastorno sanguneo que se transmite
de padres a hijos (hereditario) de manera que el cuerpo produce una forma anormal
de hemoglobina, la protena en los glbulos rojos que transporta el oxgeno (Liang et
al, 2015). Este trastorno ocasiona la destruccin de grandes cantidades de los
glbulos rojos, lo cual lleva a que se presente anemia.
El estudio de Liang et al (2015) tuvo como propsito evaluar la capacidad del
sistema de edicin del genoma CRISPR/ Cas9 responsable de la -talasemia, en embriones
humanos no viables descartados por las clnicas de fertilizacin.

El estudio del gen

responsable de esta enfermedad fue posible gracias al sistema de edicin del

CRISPR-Cas9, la investigacin fue liderada por Junjiu Huang. Dicho sistema
introduce una rotura en la doble cadena de ADN donde se pretende corregir el error
gentico, este punto de rotura es reparado por la maquina celular utilizando como
gua un ADN suministrado junto con otros componentes del sistema de edicin del
genoma (Liang et al, 2015).
A pesar de que esto contribuye a una posible solucin de la enfermedad, an
sigue siendo

un tema que ha suscitado numerosas controversias por parte de

diferentes organismos nacionales e internacionales, adems de tener una gran difusin

pblica, los experimentos realizados han generado controversias ticas, religiosas y
polticas, ya que desde el punto de vista biolgico la vida comienza a partir de la
fecundacin o sea desde el momento de la unin entre los dos gametos (vulo y
espermatozoide).
Al respecto, la Declaracin Universal sobre el Genoma y Derechos Humanos,
en su artculo 4a seala que una investigacin, un tratamiento o un diagnstico en
relacin con el genoma de un individuo, slo podr efectuarse previa evaluacin
rigurosa de los riesgos y las ventajas que entraa y de conformidad con cualquier otra
exigencia de la legislacin nacional (Unesco, 1997) y el
Seguridad (2008), refiere

Cdigo de Biotica y

que la vida y su preservacin es un derecho que la

humanidad ha tenido que reconocer, no slo en su concepcin filosfica y normativa

sino como fuente de creatividad. La intencin de las normativas no es imponer
sanciones, ms bien buscan crear en cada individuo conciencia y valores
humansticos para regir las acciones y decisiones que se tomen en los procesos de
investigaciones que afectan a cualquier forma de vida, desde bacterias hasta los seres
humanos. La consideracin de que el embrin no solo es una masa celular, sino que
ya comienza a ser un individuo en proceso de formacin, considerado un ser humano,
por la humanidad e incluso por la misma ciencia (Lozada, 2010) determina que las
acciones que lo involucren tome en cuenta este enfoque.
Sin embargo, existen posturas religiosas, que se oponen a la manipulacin
gentica en embriones humanos, ya que apoya el proceso natural de concepcin que
se ha venido manejando desde que el hombre ha existido en el planeta tierra, de lo
contrario cambiara la naturaleza de la vida (El Vaticano, 2006).
Por otra parte, en algunos pases a nivel mundial ha causado polmica, ya que
cada da se hace ms factible la posibilidad de clonar a un ser humano. Por esta
razn, los organismos cientficos y ticos de los diferentes pases comenzaron a
legislar contra la manipulacin gentica en el hombre con fines reproductivos, siendo
este el caso de 13 pases de la comunidad Econmica Europea y de Estados Unidos,
que han legislado sobre ello (Urbano, 2006). Pues con esta afirmacin, seala el
impacto y los posibles riesgos y peligros que puede traer como consecuencia el uso
de la manipulacin gentica en seres humanos, y que posiblemente se pueda hablar de
cmo se excede la aplicabilidad de la biotecnologa actual.
Tomando en consideracin los aspectos planteados, se plantean las siguientes
interrogantes: Qu tcnicas se utilizan y qu limitaciones y prospectivas se derivan
de dichas tcnicas? Para qu modificar geneticamentegenticamente embriones
humanos embriones modificados genticamente? Cules son las consecuencias en el
plano social? Es tico el uso de embriones humanos? Qu riesgos y beneficios se
puede obtener?
Por otra parte, el propsito de esta investigacin es analizar las diferentes
tcnicas asociadas a la modificacin de embriones humanos, evaluar cules son sus

posibles consecuencias e implicaciones ticas y disear una estrategia didctica que

les permita a los jvenes conocer estas tcnicas, los diferentes avances tecnolgicos y
cmo estos son aplicados en los seres humanos.

MTODO
La investigacin que se reporta es una investigacin documental, ya que se refiere
al estudio de problemas con el propsito de ampliar y profundizar el conocimiento
(UPEL, 2012), en concreto de las tcnicas, conceptos genticos relacionados e
implicaciones bioticas del sistema de edicin del genoma CRISPR/ Cas9
responsable de la -talasemia, en embriones humanos no viables descartados de
tcnicas de fertilizacin. Se bas en la revisin, anlisis y sntesis de trabajos previos,
informacin y datos divulgados por medios impresos, audiovisuales o electrnicos.
La originabilidad del estudio se refleja en el enfoque, criterios, conceptualizaciones,
reflexiones, conclusiones, recomendaciones, propuestas didcticas y, en general, en el
pensamiento de los autores (UPEL, 2012).
La tcnica usada en la investigacin fue el anlisis de contenido cualitativo que
busca temas, describe sus particularidades, establece las categoras de anlisis y las
interpreta. El procedimiento seguido para la ejecucin de la investigacin se resume
en los siguientes pasos (UPEL, 2012):
A Preparacin del material: los diferentes documentos se clasificaron segn los
criterios de anlisis o en funcin de su significacin, fueron seleccionados
aquellos que tuvieran relacin con terapia gnica, tcnicas de edicin del
genoma, regulacin gentica y consideraciones bioticas de la manipulacin de
embriones humanos. El criterio de seleccin fue su relevancia, pertinencia y
actualidad de la informacin.

B Lectura o anlisis previo: es una lectura que se realiza para cubrir tres objetivos:
Familiarizarse con los contenidos y obtener una visin global de los temas
tratados. Avanzar en la formulacin de hiptesis. Identificar los indicadores en
los que se apoyar la interpretacin.
C Seleccin de las unidades de anlisis en funcin de los objetivos de
investigacin.
D Categorizacin: esta fase es quiz la parte esencial del anlisis, ya que las
categoras se utilizaron para darle estructura al informe de los resultados. Las
categoras son la esencia, ya que agrupan en epgrafes genricos y reorganizan
todos los contenidos aparecidos en los documentos analizados (Bez y Prez ,
2009).
Para la recopilacin del material se utilizaron los instrumentos de recoleccin
de la informacin siguientes: cuadros de resumen, mapas y redes conceptuales, mapas
mentales la ficha bibliogrfica (de libros, folletos, publicaciones peridicas,
documentos de archivos, etc.) y resmenes escritos. Para la organizacin del material
se realiz el estudio,o y ordenacin y el vaciado de las fichas de trabajo, y la
redaccin de un informe en relacin con los objetivos de la investigacin (Gallardo,
2007).

RESULTADOS Y DISCUSIN
Dada la naturaleza de la investigacin realizada, de tipo documental, en los
resultados se presentan los contenidos que fueron sintetizados a partir del anlisis de
la literatura revisada. A continuacin se muestra un resumen de los principales
aspectos que fueron seleccionados, organizados de acuerdo a la estructura que se
consider relevante.
Poner aqu antecedentesSntesis de investigaciones con tcnicas asociadas
que sirvieron como antecedentes
Los trabajos que han hecho posible esta investigacin, estn relacionados con la
temtica, para as ampliar y profundizar los conocimientos referentes al tema de

estudio. A travs de las tareas experimentales realizadas por distintos cientficos,

entre ellos: Liang, P y otros. 2015; Menchaca, A. 2013; Young S. 2014; Badajoz V.
2007 y Gabardi M. 2010; se ha podido evidenciar que todos tienen en comn la
aplicacin de la biotecnologa y sus ciencias auxiliares (ingeniera gentica y terapia
gnica) en organismos vivos; sobre todo para tratar de resolver problemas que se
presentan genticamente en los individuos o para generar cualquier otro beneficio.
stos se basaron en la aplicabilidad de las tecnologas en embriones de animales y de
seres humanos, ms sin embargo no todos con las mismas tcnicas ni con los mismos
objetivos. Es as como este tema, trae consigo mucha polmica a nivel social, tico y
religioso; para ello el trabajo de Gabardi, M (2010), hizo referencia al paradigma
legal con respecto a los anlisis de las situaciones que se vienen presentando a travs
de la manipulacin gentica en los seres humanos concebidos extra corpreamente
(Tabla 1).

Tabla 1
Sntesis de investigaciones con tcnicas asociadas que sirvieron como antecedentes
Autor

Liang, P y
otros. (2015).

Menchaca, A
(2013).

Young S.
(2014).

Objetivos
Evaluar la
capacidad del
sistema de edicin
del genoma
CRISPR/ Cas9
responsable de la
-talasemia, en
embriones
humanos.

Generar
conocimiento,
cientfico y
colaborar en la
cura de algunas
enfermedades
humanas para que
las futuras
generaciones
puedan vivir mejor.

Demostrar que
CRISPR puede
crear primates
viables en los que
se han modificado
genes concretos.

Encuadre
terico
Sistema CRISPR/
cas9, cigoto
triponuclear,
mosaico, talasemia, globina, edicin de
gen, terapia gnica,
PCR y cigoto
poliesprmicos.

Muestra
biolgica

Metodologa

Principales hallazgos

Aportes significativos

86 Embriones
Humanos
(Cigotos
triponucleares)

Fueron seleccionados los Ovocitos

fertilizados anormales con tres
proncleos. Posteriormente se analiz
con la tecnologa CRISPR / Cas9.
Lograron la incorporacin del gen
seleccionado a solo 28 embriones
humanos.

CRISPR / Cas9 podra escindir

eficazmente en la -globina.
Se obtuvo un 25 % de embriones
editados, una tasa muy alta de
mutaciones y embriones mosaico

CRISPR/Cas9 ha sido utilizado para

modificar genes en sistemas de animales
incluyendo cigotos y las clulas humanas,
tienen una gran promesa para la
investigacin bsica y las aplicaciones
clnicas. Si la tcnica se perfecciona podra
ser una forma de curar la B-talasemia en
embriones antes de su implantacin.

Produjeron embriones de oveja

mediante la fertilizacin in vitro, luego
se les inyect el gen de inters en este
el responsable de la produccin de una
protena, y fueron colocados por
endoscopa en el tero de ovejas
receptoras, Cinco meses de gestacin
permitieron el nacimiento de nueve
corderos

En este experimento se comprob

que un gen aislado puede ser
incorporado al genoma de un
embrin de oveja que al ser adulta
producir la misma sustancia en
la leche. Luego la leche ser
purificada para realizar frmacos.

Este proyecto abre un camino de

posibilidades para la biomedicina y la cura
de enfermedades, en la bsqueda de que
las futuras generaciones puedan vivir
mejor

Inyectaron ARN en embriones de una

nica clula de macaco para guiar el
proceso de edicin del genoma. El
equipo modific tres genes en los
monos: uno que regula el
metabolismo, otro que regula el
desarrollo de las clulas inmunes y un
tercero que regula CRISPR

Descubrieron que las herramientas

para edicin del genoma produjeron
mltiples cambios en los genes
modificados en los diferentes
estados del desarrollo embrionario.

Haban creado monos transgnicos, como

un Macaco Rhesus que produce la versin
del gen causante de la enfermedad de
Huntington.

Embriones
ovinos.

Cordero,
biomedicina,
fosforescente,
tecnologa
gentica, protena,
fertilizacin in
vitro, embriones,
gen, endoscopia y
tero

Macacos
Chinos,
(Primates)

Badajoz V.
(2007).

Gabardi M.
(2010)

Analizar los
parmetros
embrionarios para
conocer si las
variables que
definen la calidad
embrionaria se
vean modificadas
por la edad de la
mujer o la calidad
del semen

Determinar la
respuesta
normativa que, a
nuestro criterio,
debera darse a la
actual
problemtica de la
cro conservacin
de embriones
humanos; teniendo
en cuenta las
diferentes posturas
planteadas en torno
a la naturaleza
jurdica de los
embriones.

Dicha
Se utiliz la Tcnicas FIV
investigacin convencional e ICSI. (micro-inyeccin
fue realizada
citoplasmtica)
sobre el
Se compar la calidad embrionaria en
historial de 612
los das uno, dos y tres tras la
pacientes
fecundacin
para ver la influencia en
Ingeniera del
humanos,
el desarrollo embrionario de los
ADN, peces cebras
analizando 663
factores clave. Los resultados se
y avatar.
ciclos.
clasificaron por cuatro intervalos de
clasificando la
edad de la mujer y por tres tipos de
calidad seminal
calidad seminal del varn, as como
en tres tipos
por tipos de esterilidad
para tratar de
descubrir su
influencia en
los resultados
Factor etario,
factor masculino,
folculos
ovocitarios,
ovocitos, microinyeccin
citoplasmtica, y
ciclos FIV

Embriones
humanos, que
se
encuentraban
en estado
congelamiento.

Anlisis profundo desde el momento

en que se inicia la vida humana segn
el ordenamiento jurdico, para
demostrar que el embrin concebido
extra corpreamente, no solo tiene
vida humana sino que tambin es un
ser humano, a pesar de posturas que
definen lo contrario.

Se concluy que la calidad

embrionaria no envejece y que no
afecta la fertilidad asistida.

Se encuentran la mejor pauta hormonal

para inducir la ovulacin; la recuperacin
de un mayor nmero de Ovocitos.

Trabajar en un proyecto legislativo

que adopte posturas claras en torno a
evitar que las generaciones futuras y
la sociedad del maana, resulte
afectada de quienes deciden
someterse a una tcnica de
reproduccin asistida

Delimitar el amparo jurdico que debieran

tener los embriones supernumerarios;
como as tambin reflexionar respecto de
las posturas que han surgido en torno a las
soluciones prcticas pero no legales.

Derechos
humanos,
manipulacin
gentica, amparo
jurdico; ovocito
pronucleado,
plasmacin de un
individuo humano,
tcnicas de
fecundacin
artificial,
congelamiento de
embriones,
fecundacin in
Vitro y
biotecnologas

Desarrollo histrico de las tcnicas que originan organismos genticamente

modificados

El estudio de la gentica ha tenido grandes avances a lo largo del tiempo,

comenzando primeramente por los trabajos de Gregor Mendel y unos de los grandes
progresos, el descubrimiento de la estructura del ADN (cido desoxirribonucleico),;
este ltimo fue el punto de partida para dar inicio a la biotecnologa, una ciencia que
permite modificar de forma selectiva la actividad y la informacin gentica de los
organismos vivos, buscando una utilidad prctica en diversos sectores, en la
medicina, la agricultura, la alimentacin, la energa, entre otros, el medio ambiente y
la produccin industrial (Duque, 2010),

y sus diferentes ramas como la ingeniera

gentica; considerada la a. Se entiende como la tecnologa del control y transferencia

de ADN de un organismo a otro, lo que permite la creacin de nuevas especies, la
correccin de defectos genticos y la fabricacin de numerosos compuestos para
mltiples finalidades (Fernndez, M. 1993). Estas tcnicas en sus inicios, no se
enfocaban en realizar la insercin de genes con seres humanos, sino que para ello
utilizaban otros materiales biolgicos ( como: bacterias, plantas y otros animales). No
es sino en la actualidad hasta
estos ltimos tiempos queque se ha aplicado a travs de sistemas especializados en
embriones humanos. A continuacin se mostrar una lnea de tiempo, donde se
marcarn los avanzas desde las primeras modificaciones genticas hasta la actualidad.

Fig. 1 Lnea de tiempo. Desarrollo histrico de las tcnicas que originan organismos genticamente
modificadoad.

1980
2015

1985

1988

1996

2013
BACTERIA
DE TIPO
PSEUDOMONAS

Degrada cuatro
de los mayores
componentes
del petrleo

Fig. 1 Lnea del tiempo de modificaciones genticas

CULTIVO DE
TEJIDOS DE
MAZ
Se insert uno o
varios genes con
caractersticas de
inters, mediante
el uso de
tecnologa de
genes o de ADN
recombinante

2014
MONOS
EMBRION
PRIMEROS
EL RATN DETRANSGNICOS
OVEJA
DOLLY
ES
CORDEROS
HARVARD Inyectaron
Resultado de
unaen
ARN
HUMANO
MODIFICADOS
Microinyeccin
trasferencia
nuclear
clulas
de
S
Tcnica
GENTICAME
en los proncleos
desde
unacon
clula
embriones
el
empleada
NTE
de los embriones
donante
adulta
a un
sistema
CRISPR.
con el
Produjeron
vulo
no fecundado
Modificaron
tresde y
sistema
sinembriones
ncleo,
que
genes
El
que
regula
CRISPR/9
oveja
mediante
despus
fue ella
el metabolismo,
fertilizacin
in
implantado
una
que
regula
ela les
vitro,
se
hembra
portadora.
desarrollo
las de
inyect de
el gen
clulas
inmunes
y el
inters
y fueron
que regula
las por
colocados
clulas
madres.en el
endoscopa
tero receptor

Fig. 1 Lnea de tiempo. Desarrollo histrico de las tcnicas que originan organismos
genticamente modificados

Bases tericas Terapia Gnica: Tcnicas utilizadas

.

As, en ese proceso evolutivo de las modificaciones genticas,Gracias a los diversos

aportes realizados por los distintos grupos de investigacin, se han logrado perfeccionar los

cientficos lograron incluir tcnicas especficas para manipular el genoma humano, y

restablecer una funcin celular que estaba defectuosa y corregir las diferentes
enfermedades de origen gentico, entre ellas:
La terapia gnica considera; una tcnica que consiste en la insercin de genes en
clulas eucariotas, lo que permite corregir la carencia de un gen de forma
permanente y sin efectos secundarios (Gonzales, 2006).

Existen dos pasos para

llevar a cabo dicho procedimiento:

a) La transferencia de genes a las clulas diana: Etapa conocida como
transduccin (infeccin por transformacin), puede realizarse fuera del
organismo (ex vivo) o por administracin directa (in vivo). Existe una
variedad de barreras (espacios intravasculares e intracelulares) que pueden
impedir una adecuada transduccin, as que para proteger a los genes se usan
vectores. Los vectores son virales (retrovirus y los adenovirus) ya que son los
ms indicados para que se lleve a cabo el proceso; en este caso se eliminan las
porciones del genoma viral y se sustituyen por genes que se desean introducir
en la clula diana. A pesar de la modificacin gentica en los retrovirus, sta
genera una mayor probabilidad de inyectar patgenos a nivel celular, es as
como en la actualidad han venido trabajando con vectores adenovirales, cuya
patogenicidad es baja (no son oncognicos en humanos). Generalmente se
realiza abriendo poros transitorios en la membrana plasmtica de la clula
mediante electroporacin (tcnica que crea agujeros utilizando golpes
elctricos) para permitir el paso del material gentico, (Gonzales, 2006); (ver
Fig.2), sin embargo existen otras tcnicas que permiten hacer posible la
terapia gnica, como:

Transfeccin por liposomas: Mezcla de lpidos catinicos con el material

gentico, que se fucionanfusionan con la membrana celular y depositarn la
informacin en el interior celular (Enrique y Villaseca 1998).

Fig. 2 Mapa mental. Terapia gnica

Fig. 2 Mapa mental. Terapia gnica y sus procedimientos

Biobalstica: El ADN es introducido en las clulas por medio de partculas

microscpicas aceleradas a velocidades supersnicas, que atraviesan la pared y la

membrana celular.
Microinyeccin: tcnica que se realiza mediante una aguja muy fina que inserta
el ADN forneo directamente en el ncleo de la clula que se va a transformar

(Bedoya, 2014).
Electroporacin: Tcnica que crea agujeros momentneos en la membrana
celular utilizando golpes elctricos; esto permite que el ADN entre a la clula

(Bedoya, 2014).
PCR: Es una reaccin enzimtica in vitro que amplifica millones de veces una
secuencia especfica de ADN, a travs de ello resulta fcil identificar con una alta
probabilidad virus o bacterias causante de una enfermedad, identificar personas
(cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN (Tecnologa en salud,

2013).
Vectores virales: Son vehculos de cidos nucleicos. Estn compuestos por ADN
o un ARN rodeado por una cpside proteica y, en algunos casos, una envuelta
lipoproteica. Para poder utilizar un virus como vector, se insertar el cido nucleico
teraputico en el genoma viral, y se debe conseguir al mismo tiempo que el virus
no se replique y por tanto no sea patognico. Por esto, los virus utilizados en
terapia gnica se denominan virus recombinantes y defectivos (carecen de
alguna funcin necesaria para su propio ciclo replicativo) (Universidad de
Navarra, 2012). (Ver Fig.3)
b) Expresividad: Nos ms que el mecanismo mediante el cual la informacin
contenida en el ADN es procesada y llega al producto final que es la protena.
Se expresa en dos etapas: transcripcin (el ADN dirige la sntesis de ARN) y
la traduccin (los ribonucletidos en el ARNm gua la secuencia de
aminocidos). (Gonzales, 2006).

Fig.3. 3 Mapa conceptualEsquema. Tcnicas variadas en terapia gnica.a

Microinyeccin: tcnica que se realiza mediante una aguja muy fina que inserta el ADN forneo

directamente en el ncleo de la clula que se va a trnasformartransformar (Bedoya 2014).)

Electroporacin: Tcnica que crea agujeros momentneos en la membrana celular utilizando golpes

elctricos; esto permite que el ADN entre a la clula (Bedoya 2014).

PCR: Es una reaccin enzimtica in vitro que amplifica millones de veces una secuencia especfica de ADN,
a travs de ello resulta fcil identificar con una alta probabilidad virus o bacterias causante de una
enfermedad, identificar personas (cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN (Tecnologa

en salud, 2013).
Vectores virales: Son vehculos de cidos nucleicos. Estn compuestos por ADN o un ARN rodeado por una
cpside proteica y, en algunos casos, una envuelta lipoproteica. Para poder utilizar un virus como vector, se
insertar el cido nucleico teraputico en el genoma viral, y se debe conseguir al mismo tiempo que el virus no
se replique y por tanto no sea patognico. Por esto, los virus utilizados en terapia gnica se denominan
virus recombinantes y defectivos (carecen de alguna funcin necesaria para su propio ciclo replicativo)

c)

(Universidad de Navarra, 2012).

Expresividad: Nos ms que el mecanismo mediante el cual la informacin contenida en el ADN es

procesada y llega al producto final que es la protena. Se expresa en dos etapas: transcripcin (el
ADN dirige la sntesis de ARN) y la traduccin (los ribonucletidos en el ARNm gua la secuencia
de aminocidos) (Gonzales, 2006 )

An con el mapa mental, la

red y el flujograma esta
informacin permanece o no?

Fig. 2 Mapa mental. Terapia

Fig. 2 Mapa mental. Terapia gnica y sus procedimientos

Fig. 2 Mapa mental. Terapia gnica

Fig. 3 Mapa conceptual. Tcnicas variadas en terapia gnica

Por otra parte existen, tcnicas que han marcado la revolucin cientfica y
que permite que el sistema de edicin de genes sea ms preciso, la tcnica
CRISPR/CAS9, es una de ellas, un proceso cuyo origen es en bacterias, ya
que a nivel molecular lo que ocurre cuando el material gentico de un virus
entra dentro de ella, es que el virus toma el control de la maquinaria celular
y para ello empieza a interaccionar con diversos componentes celulares. Pero
puede darse el caso que interaccione con un complejo formado por una
protena Cas unida al ARN producido a partir de las secuencias CRISPR. Si
ocurre esto, resulta que el material gentico viral es inactivado y
posteriormente degradado. Las protenas Cas hacen otra cosa adems de
destruir el material gentico del virus, son capaces de tomar una pequea
parte del ADN viral, modificarlo e integrarlo dentro del conjunto de
secuencias CRISPR. De esa forma, si esa bacteria o su descendencia se
encuentran con ese mismo virus, ahora inactivar de forma mucho ms
eficiente al material genticoEl sistema CRISPR/Cas puede ser utilizado para
introducir cualquier tipo de ADN en el ADN de cualquier tipo de ser vivo,
sean estos bacterias, setas, plantas, insectos, peces, ratones, monos e incluso
seres humanos. Es decir, el sistema CRISPR/cas va camino de convertirse en
una herramienta que va a permitir hacer terapia gnica con gran precisin y
as tratar enfermedades (Nature s.f).

Tcnica CRISPR-Cas 9

DEFINIR QUE ES EDICION DE GENES

Por otra parte existen,Existen tcnicas que han marcado la revolucin

cientfica y que permiten que el sistema de edicin de genes ; stos son mtodos
que permiten editar el genoma de forma precisa, (Moira y otros, 2011); sea ms
preciso, la tcnica CRISPR/CAS9, es una de ellas, un proceso cuyo origen es en
bacterias, ya que a nivel molecular lo que ocurre cuando el material gentico de
un virus entra dentro de ella, es que el virus toma el control de la maquinaria

celular y para ello empieza a interaccionar con diversos componentes celulares.

Pero puede darse el caso que interaccione con un complejo formado por una
protena Cas unida al ARN producido a partir de las secuencias CRISPR. Si
ocurre esto, resulta que el material gentico viral es inactivado y posteriormente
degradado. Las protenas Cas hacen otra cosa adems de destruir el material
gentico del virus, son capaces de tomar una pequea parte del ADN viral,
modificarlo e integrarlo dentro del conjunto de secuencias CRISPR. De esa
forma, si esa bacteria o su descendencia se encuentran con ese mismo virus, ahora
inactivar de forma mucho ms eficiente al material gentico viral (Ver Fig.4)..

El sistema CRISPR/Cas puede ser utilizado para introducir cualquier tipo de

ADN en el ADN de cualquier tipo de ser vivo, sean estosestos bacterias, setas,
plantas, insectos, peces, ratones, monos e incluso seres humanos. Es decir, el
sistema CRISPR/cas va camino de convertirse en una herramienta que va a
permitir hacer terapia gnica con gran precisin y as tratar enfermedades (Nature
s.f).

Fig. 4 Flujograma. Tcnica CRISPR/Cas9

-talasemia: Una enfermedad con origen gentico

Los conocimientos adquiridos en la tcnica anterior, fueron aplicados por

primera vez en embriones humanos en 2015 segn Liang, P y otros. Donde se
busc modificar los genes estropeados que provocan la -talasemia; una
enfermedad hereditaria de origen mediterrneo, que se produce por una mutacin
en la cadena de la globina cuando hay un defecto en un gen que ayuda a controlar
la produccin de la protena Beta, causando una disfuncin de la sangre y una
formacin anormal de hemoglobina, lo que genera la destruccin de grandes
cantidades de glbulos rojos, generando anemia, que puede resultar letal y mortal
(Manascero 2003).

Aspectos genticos

Los defectos genticos subyacentes consisten en anomalas totales o parciales

de los genes de las cadenas beta de la globina, protena que forma parte de la
hemoglobina y cuya misin fundamental es transportar al grupo hemo, que aporta
el oxgeno a la sangre. Se heredan como rasgos genticos autosmicos recesivos.
El gen de la beta globina (HBB) se encuentra en el cromosoma 11 (Kuwayama,
2013). (Ver Fig.5

Fig.5 Mapa conceptual. Talasemia

Desarrollo embrionario humano: Tcnica CRISPR/Cas 9

El embrin es la etapa inicial del ser humano, se inicia desde el momento de la

fecundacin y termina con el nacimiento del nio. La fecundacin es la fusin
mutua de las clulas reproductoras masculinas y femeninas. El vulo fecundado,
durante su avance por la tuba uterina hacia el tero, se divide en las clulas hijas,
las blastmeros. A esta divisin se le llama segmentacin, formando as la
Mrula. Las clulas se van dividiendo por mitosis, al hacerle un corte transversal
de la mrula se observa la blstula, denominada Celoblstula; luego tiene lugar la
Gastrulacin, formacin de las hojas embrionarias con la ulterior formacin
rudimentaria de diferentes rganos. Al mismo tiempo se desarrollan las
denominadas partes extraembrionarias. La gastrulacin consiste en que el ncleo
embrionario se divide en dos lminas; el ectodermo, hoja embrionaria externa (da
origen a la piel, uas y pelos), y el endodermo, hoja embrionaria interna (da
origen al tubo digestivo desde el ano hasta la boca). De la hoja embrionaria
interna se origina, el mesodermo, hoja embrionaria media (da origen a todos los
tejidos y rganos internos), (Tatarinov 1974). Posteriormente se da la
organognesis, que es la formacin de los esbozos organognos y diferenciacin
de los mismos. (Vase Fig.6)

Con el actual cambio en materia cientfica y tecnolgica, las posibilidades de

modificacin de embriones humanos son grandes; por medio de la tcnica
CRISPR/Cas9, que confiere herramientas para modificar al hombre en las
estructuras ms mnimas que lo conforman, los
posibilidad de la modificacin gentica.

genes, alcanzando la

Fig. 5. Esquema. Desarrollo embrionario en Humanos

Fig. 6. Esquema. Desarrollo embrionario en Humanos

Fig. 5. Esquema. De

Fig. 4 Red Conceptual

Implicaciones Bioticas de la Apartado de Biotica

MModificacin de Embriones Humanos y la Biotica

La existencia de la especie humana no solo no est garantizada, sino que tambin se

encuentra seriamente amenazada. Esta amenaza se ha hecho particularmente grave en
nuestros tiemposla actualidad, debido a las alteraciones de los equilibrios biolgicos, as
como tambin a la creciente contaminacin de los ecosistemas, producto de la
manipulacin muchas veces irresponsable insensata de la naturaleza por parte del
hombre. Tambin se ha cuestionado la forma como algunos sectores de la investigacin
han propuesto la manipulacin del genoma de los seres vivos.

Con el desarrollo de la

ciencia han aparecido todas las tcnicas de ingeniera gentica que se conocen, muchas
de las razonescuales han sido tambinpropuestas por la necesidad de conseguir la curar
a las enfermedades genticas humanas. Al empezar a actuar sobre el hombre, sus genes
y su descendencia es cuando surgen las dudas ticas sobre estas tcnicas, generando
controversia dentro de la sociedad en cuanto a lo biotico, ya que la existencia de dos
visiones distintas pueden dar origen a discusiones sobre los lmites de la manipulacin
gentica. Actualmente esto se encuentra a cargo de los poderes manipuladores que le
han generado los procesos tecnolgicos, especialmente en las biotecnologas.

Es por ello que se hace necesario la propuesta de de una nueva materia de

estudio, con la finalidad de la investigacin de una sabidura, es decir, de unun

conocimiento que nos haga capacespermita de realizar juicios adecuados en relacin con lo
que podra constituir un progreso fsico, cultural o filosfico para una supervivencia
humana valiosa. Este conocimiento lo aporta la biotica. En este sentido, Potter (1971)
propuso el trmino biotica justificando que La humanidad necesita urgentemente de una
nueva sabidura que le proporcione el conocimiento de cmo usar el conocimiento para la
supervivencia del hombre y la mejora de la calidad de vida. Esta nueva ciencia, construida
sobre la propia Biologa e incluyendo adems, la mayora de los elementos esenciales de las
ciencias sociales y humansticas, incluyendo la Filosofa, propone resaltar, el conocimiento
biolgico: bios y los valores humanos: ethos (Lacadena, 2001). As,

El nacimiento de la biotica hay que reconocrselo a dos cientficos de

origen holands, el onclogo Van Ranselaer Potter y el fisilogo de Embriologa Humana

Andrs Hellegers (1925-1979), ambos catedrticos universitarios e investigadores. Potter
posee el mrito de haber forjado el trmino biotica y de haber elaborado los principios
esenciales de la nueva rama del saber. Por otra parte Hellergers, fue quien introdujo el
trmino de biotica y con l un campo de investigacin de inters comn en el mundo
acadmico de las Ciencias Biomdicas, en el gobierno y en los medios de comunicacin.

Lla biotica enlaza el conocimiento biolgico con el conocimiento de los

sistemas de valores humanos. Ya quefacilita el gnero humano necesita una sabidura como
gua para la accin, un saber cmo utilizar el conocimiento para el bien y el futuro de la
condicin humana, es por ello que la biotica tienen como principio fundamental promover
la calidad de vida.

Agregar dos prrafos para hablar de dudas que se presentan al manipular el

genoma

Para considerar si un procedimiento de Terapia Gentica es tico, hay que

determinar el tipo de estrategia que se utilizara (ex vivo in vivo) para introducir un gen en
una clula hospedadora y conocer el papel que va a desempear el gen introducido en la
clula, muchas veces el objetivo de la terapia es que el gen introducido en la clula se
transcriba y con su producto se obtenga una protena teraputica, en otros casos slo es
necesario que se realice la trascripcin, y se forme mRNA, ya que el efecto se consigue con
el producto de la transcripcin. En este tipo de terapia se utiliza el gen y su producto de
transcripcin como agente curativo, y no el producto proteico del gen. Slo si los datos
preliminares indican que la estrategia empleada es correcta, se puede pasar a examinar los
condicionamientos ticos.

La terapia gnica ha presentado problemas de carcter cientfico y tico, esto

como resultado de que existen dos tipos de intervencin. La primera de tipo somtico y la
segunda de tipo fetal y germinal, esto debido al tipo de clulas sobre las que se realiza la
terapia. Ya que hay terapias que se realizan sobre unas clulas que pertenecen a un tejido
adulto llamada somtica, y otras se realizan sobre las clulas embrionarias llamada
germinal. La terapia germinal tiene como objetivo, eliminar por completo las enfermedades

que son producidas por defectos en algn gen mediante la sustitucin del gen daado en el
individuo y tambin en su descendencia. Por otra parte los genes introducidos en el
embrin pasaran a todas las clulas del individuo, incluyendo las germinales, por lo tanto
su descendencia seria afectada por la terapia, y como resultado tendramos la cura de la
enfermedad. Siendo ste es un ideal teraputico y tico. (Vergel 2010.)

Con el desarrollo de la ciencia han aparecido todas las tcnicas de

ingeniera gentica que se conocen, muchas de las razones han sido tambin por la
necesidad de conseguir la curar a las enfermedades genticas humanas. Al empezar a actuar
sobre el hombre, sus genes y su descendencia es cuando surgen las dudas ticas sobre estas
tcnicas, generando controversia dentro de la sociedad en cuanto a lo biotico, ya que la
existencia de dos visiones distintas pueden dar origen a discusiones sobre los lmites de la
manipulacin gentica.

A Continuacin se presentara un cuadro comparativo que resume de los diferentes

argumentos a favor y en contra de la modificacin de embriones humanos:

Argumentos a favor y en contra de la modificacin de embriones humanos

A Favor

En Contra

Un
investigador
del "Esto (el estudio) enfatiza la necesidad de una prohibicin global
funcionamiento de los genes
inmediata a la creacin de bebs genticamente modificados", opina David
en la Universidad Sun YatKing, director de la organizacin britnica Human Genetics Alert.
Otros dicen que ese trabajo cruza una lnea tica: Edward Lanphier, uno
sen en Guangzhou, trat de
de los cientficos que sealaba advertencias en la revista Nature, en
disuadir esos problemas
marzo pasado, debido a que los cambios genticos a los embriones,
ticos mediante el uso de
conocidos como la modificacin de la lnea germinal, son heredables y
embriones no viables, es
podran tener un efecto impredecible en las generaciones futuras.
decir que no pueden dar
tenemos que hacer una pausa en esta investigacin y asegurarnos de
lugar a un nacimiento
tener una discusin amplia sobre en qu direccin vamos aqu".
vivo. Sin embargo, sostiene
Lanphier es presidente de Sangamo Biosciences en California, que aplica
que los embriones permiten
tcnicas de edicin de genes en clulas humanas adultas.
un modelo ms significativo,
Jennifer Doudna, cientfica de la Universidad de California en Berkeley,
y uno ms cerca de un
Estados Unidos, que desarroll la tcnica CRISPR: "El propio estudio
embrin humano normal a
subraya que la tcnica no est lista para ser aplicada de forma clnica en
la de un modelo animal.
Los defensores de la terapia
las clulas germinales humanas".

Los premios Nobel David Baltimore y Paul Berg comparten esta

gnica insisten en que
postura, tal como lo explican en el artculo titulado "Pulsemos 'pausa'
liberara a la humanidad de
antes de alterar la humanidad", publicado en el diario The Wall Street
enfermedades hereditarias.
Journal. Ambos advierten que los cambios introducidos en las clulas
De esa opinin es el
germinales se transmitiran a las generaciones siguientes y las
acadmico Julian Savulescu,
consecuencias hoy son imprevisibles.
el editor jefe del Journal of

"Creo que este es el primer informe de CRISPR / Cas9 aplicado a

Medical Ethics.
embriones humanos antes de la implantacin y, como tal, el estudio es
El
profesor
de
la
pionero, pero tambin es una historia con moraleja", dice George Daley,
Universidad de Oxford, en
un bilogo de clulas madre en la Escuela de Medicina de Harvard, en
Reino Unido, opina que
Boston. "Este estudio debe ser una severa advertencia a cualquier
crear los llamados bebs de
mdico que piensa que la tecnologa est lista para ser probada para
diseo debera considerarse
erradicar genes de enfermedades".
"una obligacin moral", ya
El cdigo de Biotica y Bioseguridad en su Captulo 1 contemplan lo
que al crecer se convertiran
siguiente: 1.1 Toda investigacin con humanos debe contemplar los
en "nios mejores". As lo
aspectos bioticos que sean pertinentes en cada caso; stos abarcan los
defendi en un artculo
elementos filosficos que sustentan los principios establecidos en este
publicado
en
versin
Cdigo junto a los elementos prcticos derivados de los mismos. 1.2
britnica
de
la
La persona sujeto de estudio tiene derecho al respeto de su integridad,
revista Reader's Digest.
por lo tanto, deben adoptarse las precauciones necesarias para
resguardar su intimidad y reducir al mnimo las consecuencias adversas
de la investigacin que puedan afectarlo en cualquiera de sus
dimensiones: biolgica, psicolgica, cultural, social y espiritual.
Unesco, La Declaracin Universal de los Derechos Humanos y del
Genoma Humano (1997) en su C. Investigaciones sobre el genoma
humano, Artculo 10. Seala, Ninguna investigacin relativa al genoma
humano ni ninguna de sus aplicaciones, en particular en las esferas de la
biologa, la gentica y la medicina, podr prevalecer sobre el respeto de
los derechos humanos, de las libertades fundamentales y de la dignidad

humana de los individuos o, si procede, de grupos de individuos.

El debate en torno a la edicin de embriones humanos sin duda continuar por

algn tiempo, sin embargo CRISPR/ Cas9 es conocido por su facilidad de uso por lo cual
muchos temen que ms cientficos ahora comenzarn a trabajar para mejorar el experimento
de Huang.

Podemos notar que hay ms argumentos en contra de la modificacin de

embriones en humanos, por el simple hecho de que consideran que se est tratando con un
ser vivo que merece respeto y derecho a vivir, ya que esta tcnica an no se ha
perfeccionado.

Primeros embriones humanos modificados genticamente

Investigadores de la Universidad Sun Yat-sen, evaluaron la capacidad del sistema

de edicin del genoma CRISPR-CAS9 para modificar el gen responsable de la -talasemia,

en embriones humanos no viables; es decir, ovocitos fecundados por dos espermatozoides.
El sistema CRISPR fue diseado para introducir una rotura en la doble cadena de ADN,
donde se pretende corregir el error gentico. Posteriormente, dicho punto de rotura es
reparado por la maquinaria celular utilizando como gua un ADN suministrado junto con
otros componentes del sistema de edicin del genoma.

Los investigadores inyectaron en 86 embriones de una nica clula, la

informacin necesaria para producir los componentes del sistema CRISPR (en este caso,
aquellos necesarios para modificar de forma especfica el gen que codifica para la globina). Esperaron 48 horas hasta que el sistema CRISPR actuara y los embriones se
desarrollaran hasta el estado de ocho clulas, momento en el que fueron analizados para ver
si haba tenido lugar la edicin del ADN. Los resultados obtenidos revelaron una tasa
extremadamente baja de xito. En lugar de utilizar la secuencia de ADN introducida con el
sistema CRISPR para actuar de gua o molde en la reparacin del ADN del embrin, en la
mayor parte de los casos la rotura del ADN era reparada utilizando otros mecanismos y en
los pocos casos en los que la edicin se llev de forma correcta, los embriones de ocho
clulas analizados eran mosaico (organismo en el que la composicin gentica no es la
misma en todas sus clulas), lo que impidi predecir la forma en la que se hubieran

comportado durante el desarrollo. Adems, el equipo detect que se haba producido un

nmero considerable de mutaciones localizadas fuera de la regin a modificar (Gentica
Mdica, 2015). (Vase Fig.7)

Fig.7 Esquema. Primeros embriones humanos modificados genticamente

SNTESIS DE INVESTIGACIONES CON TCNICAS ASOCIADAS QUE SIRVIERON

COMO ANTECEDENTES

Los trabajos que han hecho posible esta investigacin documental, estn relacionados
con la temtica, para as ampliar y profundizar los conocimientos. A continuacin se
presentarn una tabla de antecedentes, donde se explican los procesos de investigacin
realizado por diferentes cientficos.

A travs de estos trabajos experimentales realizados por distintos cientficos, entre ellos:
Liang, P y otros. 2015; Menchaca, A. 2013; Young S. 2014; Badajoz V. 2007 y Gabardi
M. 2010; se ha podido evidenciar que todos tienen en comn la aplicacin de la
biotecnologa y sus ciencias auxiliares (ingeniera gentica y terapia gnica) en
organismos vivos; sobre todo para tratar de resolver problemas que se presentan
genticamente en muchos individuos. stos se basaron en la aplicabilidad de las
tecnologas solo a embriones de animales y de seres humanos, ms sin embargo no
todos con las mismas tcnicas ni con los mismos objetivos. Es as como este tema, trae
consigo mucha polmica a nivel social, tico y religioso; para ello el trabajo de Gabardi,
M (2010), hizo referencia al paradigma legal con respecto a los anlisis de las
situaciones que se vienen presentando a travs de la manipulacin gentica en los seres
humanos concebidos extra corpreamente.

Tabla 1
Sntesis de investigaciones con tcnicas asociadas que sirvieron como antecedentes

Los trabajos que han

hecho posible esta investigacin documental, estn relacionados con la temtica, para as ampliar y

profundizar los conocimientos.

A continuacin se presentarn el cuadroXuna tabla de antecedentes, donde se explican los

procesos de investigacin
realizado por diferentes cientficos.
Tabla 1

Discusin: A travs de estos trabajos experimentales realizados por distintos

cientficos, entre ellos: Liang, P y otros. 2015; Menchaca, A. 2013; Young S.
2014; Badajoz V. 2007 y Gabardi M. 2010; se ha podido evidenciar que todos
tienen en comn la aplicacin de la biotecnologa y sus ciencias auxiliares
(ingeniera gentica y terapia gnica) en organismos vivos; sobre todo para tratar
de resolver problemas que se presentan genticamente en muchos individuos.
stos se basaron en la aplicabilidad de las tecnologas solo a embriones de
animales y de seres humanos, ms sin embargo no todos con las mismas tcnicas
ni con los mismos objetivos. Es as como este tema, trae consigo mucha polmica
a nivel social, tico y religioso; para ello el trabajo de Gabardi, M (2010), hizo
referencia al paradigma legal con respecto a los anlisis de las situaciones que se
vienen presentando a travs de la manipulacin gentica en los seres humanos
concebidos extra corp

A continuacin se presenta una red conceptual que corresponde a un organizador

grfico; sta permite relacionar todos los conceptos que hasta ahora se han abordado a
lo largo del artculo (Vase Fig.8).

Fig.8 Red conceptual. Relacin de los conceptos bsicos

Fig.5 Esquema. Primeros embriones humanos modificados genticamente

Propuesta Didctica

A continuacin Sse presentar una propuesta didctica donde se realizarn

proponen actividades que permitaen el desarrollo de contenidos disciplinarios
relacionados con la terapia gnica, sus tcnicas y en particular el uso de la tcnica
Crispr-Cas9 para tratar embriones afectados de B-Talasemia.

El inters espor el docente, interesado en

innovar el aprendizaje de los

estudiantesen el enfoque didctico que permita a los docentes que la utilicen y con el
objetivo de favorecer la comprensin de los contenidos relacionados con el tema
investigado. Se parte de la idea sus conocimientos. Donde que el alumno estudiante ser
el sujeto activo de desu aprendizaje y el profesor recrear el conocimiento en un
proceso educativo basado en la interaccin didctica. En la propuesta el proceso de
enseanza- aprendizaje, se realizar bajo el enfoque de aprendizaje basado en
proyectos. Se distribuirn diferentes estrategias a lo largo de cinco (5) semanas para que
as los sujetos de aprendizaje puedan entender a travs de diferentes actividades el
mundo de las modificaciones embrionarias en seres humanos.

ELABORACIN DE UN PROPUESTA DIDCTICA BAJO EL ENFOQUE DE

APRENDIZAJE BASADO EN PROYECTOS

Por: Liliam Daz, Leomarys Bolvar, Roxana Montilla

Ttulo: Descubriendo el mundo de la modificacin embrionaria en seres

humanos

Justificacin:

Actualmente la tecnologa ha progresado con grandes avances, y con ello la

medicina tambin se ha modernizado experimentando tcnicas que permiten la

manipulacin de los seres humanos en la etapa embrionaria; esto con la finalidad de
brindarles a los seres humanos unala posibilidad de curar diferentes enfermedades, que por
medio de frmacos no pueden ser curadas, siendo esto posible a travs de la terapia gnica,
una tcnica de la ingeniera gentica. Es fundamental que las sociedades tengan un
conocimiento cientfico bsico, en donde los docentes sean mediadores para implementar
estrategias que permitan que los estudiantes logren alcanzar construir los conocimientos y
que a su vez se alcance un aprendizaje significativo para dicho tema, ya que quizs para el
futuro ste podra ser una tcnica muy comn en la humanidad y por ello la relevancia en
obtener una nocin sobre las tcnicas utilizadas para modificar embriones humanos. Por
otra parte, es necesario generar discusiones donde se argumente en forma responsable y
sustentada, las distintas implicaciones de tipo legal y tico que surgen alrededor de tcnicas
relacionadas con la manipulacin de los genomas de los seres vivos y en particular de la
especie humana.

Metodologa:
a) Nivel educativo al que va dirigida la propuesta:

De 4to 9no ay 5to ao de Educacin Media General..

b) Competencias a desarrollar.

Interioriza los conceptos vistos en clase.Comprende los conceptos bsicos

relacionados con la terapia gnica.
Interpreta las tcnicas relacionadas con la terapia gnica.
Opina en forma sustentada en relacin con las implicaciones bioticas relacionadas
con la terapia gnica.
Respeta las ideas de sus compaeros.
Comparte sus ideas y opiniones en forma argumentada y respetuosa..
Realiza de manera responsable y comprometidaSe esfuerza en la elaboracin de las
actividades que se realizan a lo largo del proyecto.

Contenidos

1. Definir cromosoma, gen, embrin, biotecnologa, ingeniera gentica, terapia

gnica, tcnicas de terapia gnica y modificacin embrionaria.

2.
3.
4.
5.

El estudiante debe identificar una cadena de ADN

Proceso embrionario en el ser humano.

Conocer Interpretar la tcnica CRISPR-Cas9

Las refutaciones de la modificacin de embriones humanos segn la Biotica.

Objetivo General:

Promover a travs de estrategias didcticas un conocimiento cientfico en los

estudiantes que les permita entender las tcnicas utilizadas para modificar embriones
humanos.

Objetivos Especficos:

* Analizar y discutirInterpretar los conceptos bsicos de la modificacin

embrionaria.

* Realizar una red conceptual para profundizar el conocimiento de los conceptos

bsicos.

* Conocer y aAnalizar por medio de un video la terapia gnica y celular, y la

tcnica CRISPR-Cas9.

*Responder un cuestionario de la terapia gnica y celular

*Elaborar una mesa de trabajo de la tcnica CRISPR-CAS9.

* Desarrollar un peridico mural y lograr que los estudiantes internalicen los

conocimientos adquiridos.

* Transmitir la informacin a la comunidad estudiantil a travs de una jornada.

Actividades y Recursos:

Se describen las actividades que se plantean, las cuales estarn organizadas por
semanas, y das o clases de acuerdo a la naturaleza de las mismas y en funcin del lugar
donde se desarrollarn: aula de clase, laboratorio, jardn, saln de usos mltiples, otros.

DA 1

Red Conceptual

OBJETIVO: Analizar y discutir los conceptos

bsicos de la modificacin embrionaria.

ACTIVID
AD N.-1

Duraci
n:

Lugar:
Aula de
clase

ACTIVID
AD N.-2

Duraci
n:

Lugar:
Aula de
clase

DESCRIPCIN:
1. Se inicia la clase exponiendo el tema de
evaluacin Descubriendo el mundo de la
modificacin embrionaria del ser humano, el
docente formar equipos de 3 estudiantes y le
entregar una gua de conceptos, donde se
define ( cromosoma, gen, embrin, proceso
embrionario, biotecnologa, ingeniera
gentica, terapia gnica, tcnicas de terapia
gnica y modificacin embrionaria). Analizar
cada definicin, para luego discutirla en clases
con los dems estudiantes y el docente.

OBJETIVO:
Realizar una red conceptual para profundizar
el conocimiento de los conceptos bsicos.

DESCRIPCIN:
Posteriormente al discutir la gua, el docente
proceder a dar las instrucciones para la
elaboracin de una red conceptual como tarea
para relacionar y profundizar todos los
conceptos, y as tener un material de apoyo
para las siguientes evaluaciones referentes al
tema referentes al tema..

DA 2

Video Terapia Gentica y Celular

Min. 1:39 al 2:41

Aproximaciones a la terapia gnica,

Min. 1:00 al 1:31

terapia in-vivo y ex vivo. En esta imagen

Introduccin al Tema, en que
se presenta los aspectos claves de las
consiste la terapia gnica
aproximaciones.

Min. 13:25 al 18:29

que se implementoimplement esta
Desde
tcnica
en 1990 ha ayudado drsticamente

ala medicina y 25 aos despus existen

ms de 1500 protocolos para la
implementacin de la terapia gnica
Min.8:00 aal 13:02
El gen teraputico es dirigido
a la clula Diana. Para ello se
debe administrar por la va

Min. 3:04 al 3:30

Introduccin correcta del
gen de inters cuya
defuncin causa la

Min.3:50 al 3:30
A dems del gen, se debe elegir
las secuencias reguladoras de la
expresin, la secuencia se
denomina promotores.
Min.4:20 al 6:40
Los vectores son retro transcritos,
las clulas infectadas tambin
contendrn el gen teraputico
permitiendo as su expresin.

Fig. 6 Desarrollo del Video Terapia Gnica y Celular

Min. 01:00 a 3:15

Presentacin y explicacin de que es el
CRISPR/ CAS y como el virus inserta
el materia gentico en la bacteria.

Min. 03:17 a 4:21

Como la bacteria se defiende
del ataque de los virus.

Min. 04:23 a 5:17

La bacteria presenta el
CRISPR/CAS que tambin le va a
permitir neutralizar el virus
Min. 05:23 a 7:41
Cmo funciona el sistema
CRISPR/CAS

Min. 11:23 a 11:32

Referencias
Min. 09:59 a 11:19
El mecanismo CRISPR/CAS
ha sido puesto en prctica en
un experimento con ratones.

Min. 07:43 a 9:57

Cmo est formada la
protena CAS9 y como es su
accin sobre el ADN.

Fig.7 Desarrollo del video Didctico Ingeniera Gentica Sistema CRISPR /Cas.

Cronograma.

El cronograma es la principal herramienta de comunicacin que muestra

grficamente el progreso del proyecto. El cronograma planificado ordena en el tiempo las
actividades relevantes para el desarrollo de la intervencin didctica.

Cronograma global del Proyecto

ACTIVIDADES (Ejem)

TEMPORALIZACIN
SEMANA
2 3 4

1. Realizar una red conceptual para

profundizar el conocimiento de los
conceptos bsicos.
Diagnstico de la situacin
problemtica, diagnstico de recursos
disponibles Planificacin, organizacin
de equipos de trabajo, asignacin
responsabilidades. Recomendacin de
bibliografa y tcnicas de anlisis de la
informacin

2. Respondern una serie de preguntas

relacionadas con los procesos y
tcnicas que ocurre a lo largo del
video Terapia Gnica y Celular

3 Despus de haber tomado notas del

Video Tcnicas CRISPR/cas9 se le

aplicacin de juego didctico
relacionado con el tema.

5. Cierre del proyecto

Trabajo en equipos
Exposiciones orales
Presentacin de Maquetas

CONCLUSIN

4. Planificacin de la Jornada de
ciencias biolgicas. Descubriendo el
mundo de la modificacin embrionaria
en seres humano.
Asignacin de responsabilidades.
Equipos de trabajo

La presente investigacin en funcin a los objetivos propuestos permiti realizar la

pertinente revisin bibliogrfica y anlisis de todas Las Tcnicas implicadas en la
modificacin gentica en embriones humanos a travs de una exhaustiva recopilacin
documental, las cuales fueron posteriormente sintetizadas a travs de distintos
organizadores grficos, tales como; Lnea de tiempo para el desarrollo histrico de las
tcnicas que originaron organismos genticamente modificados, desde el primer
organismo (Bacteria) hasta el ms reciente (Humano); Mapa conceptual sobre las
variadas tcnicas en Terapia Gnica; Mapa Mental sobre la terapia gnica, Flujograma
donde explica puntualmente el proceso CRISPR/cas9, Esquema sobre el proceso

embrionario de los seres humanos, Red conceptual interrelacionando los conceptos

bsicos de la investigacin, Cuadro comparativo referente a la argumentacin a favor y
en contra segn la biotica y por ltimo, Matrices empricas y tericas donde se
organizaron los artculos que antecedieron la investigacin en cuestin acompaada de
un esquema explicando el proceso que estos realizaron el inters y el resultado
obtenido.

La previa investigacin de esta Tcnica Biotecnolgica, liderada por Junjiu

Huang permiti evaluar que las consecuencias de la misma son de baja tasa de xito, ello se
debe a que se produjo embriones mosaicos y mutaciones localizadas fuera de la regin a
modificar, posiblemente por tomar una parte especifica de ADN (exoma) para aplicar la
tcnica CRISPR/ cas9 o sencillamente dicha tcnica no es viable y eficaz sobre embriones
humanos.

En vista de lo anterior, la experimentacin de tal tcnica en humanos fue

rotundamente refutada aunque fueron realizadas en embriones no viables que iban a ser
descartados de la clnica de infertilizacin. Por tal motivo, el riesgo de expansin en
funcin a alguna mutacin o patologa en la especie humana era totalmente nula e
imposible, ya que para trabajar con tales muestras biolgicas el xito debe ser del 100%.

Por consiguiente, la mayor controversia fue expuesta desde el mbito de la

biotica; la cual es una ciencia que no separa los valores ticos de los hechos biolgicos,
siendo esta la premisa para opinar en contra de la tcnica usada, dado a que no debe usarse
en clulas germinales ya que puede ser heredable y por consiguiente, puede proporcionar
modificaciones irreversibles a la generacin futura. De tal manera, algunos investigadores
apoyan ya que estos opinan que puede erradicar enfermedades incurables actualmente.

Asimismo, se dise propuestas didcticas especficas; Gua de conceptos,

Red conceptual, Videos, Peridico mural y una Jornada donde los estudiantes podrn
exponer los conocimientos que obtuvieron del tema Descubriendo el mundo de la
modificacin embrionaria en seres humanos y simultneamente reconocern los avances y
utilidades cientfico-tecnolgicas de las herramientas Biotecnolgicas aplicadas en seres
vivos, especficamente en humanos, para un fin de salud como mecanismo ideal para la
prevencin y cura de enfermedades; as como tambin las distintas tcnicas que se pueden
utilizar para la modificacin gentica y, por ltimo, desarrollar un pensamiento crtico sobre

la evolucin cientfica e impactos positivos en los seres humanos, tomando en cuenta que
cumpla todas las implicaciones ticas que imparten la ciencia de la Biotica.

Evaluacin:

La evaluacin dentro de este enfoque debe tomar en cuenta no solo la evaluacin de los
estudiantes, sino la evaluacin del proyecto mismo, desde el diseo hasta la
implementacin, incluso el papel jugado por todos los participantes. Es decir, realizar
una evaluacin tanto de procesos (organizacin, coordinacin, avances parciales), como
de resultados (efectos positivos o aprendizajes alcanzados y dificultades, productos
concretos generados).
La evaluacin deber permitir conocer la repercusin que el proyecto tiene en los
participantes: alumnos, docentes, padres, miembros de la comunidad educativa.

Intrumento 1.
Valoracin global de la intervencin (agentes participantes)

OBJETIVOS Y CONTENIDOS

1.- Los objetivos del proyecto se han conseguido

2.- La planificacin de la intervencin se realiz de
forma conjunta
3.- El contenido de las actividades ha satisfecho las
situaciones problemtica inicial o fabricacin
(produccin) de los planificado
4.- El nivel de profundidad de los temas de las
actividades ha sido el adecuado
5.- La actividad y acompaamiento del docente ha
sido positiva
6.- La duracin del proyecto ha sido adecuada a los
objetivos y contenidos
METODOLOGIA
7.-La metodologa utilizada ha sido la adecuada a los
objetivos y contenidos del proyecto
8.-La metodologa ha permitido una participacin
activa en cada etapa
9.-Las prcticas, ejercicios prcticos, supuestos, han
sido tiles y suficientes para llegar al alcance de los
objetivos propuestos
10.-El ambiente de trabajo ha sido bueno
11.-El cronograma y su distribucin han sido
adecuados
RESULTADOS
12.- Estas satisfecho con los resultados obtenidos
producto de las actividades

VALOR
ACIN
S N
I
O

ASPECTOS

13.- La actividad final permiti comunicar y hacer

pblicos los resultados

REFERENCIA

Bez J. y Prez de T. (2009) Investigacin Cualitativa. [Libro en lnea]. Disponible:

https://books.google.co.ve/books?
id=XmvPJ9KtzsC&pg=PA289&dq=tecnica+de+investigacion+documental+analisis+de+contenidos&hl=es&sa
=X&ei=_yWLVbOBCYb_AHI742ICA&ved=0CEwQ6AEwCQ#v=onepage&q=tecnica%20de
%20investigacion%20documental%20analisis%20 de%20contenidos&f=false [Consulta: 2015, junio 24]

Bedoya (2014). Biotcnologa y tcnicas moleculares en plantas. [Documento en Lnea]. Disponibles:

roxanabiologa@hotmail.com

Bravo, S (1991). La Ciencia su Mtodo y su Historia. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Mxico.

Duque, J (2010). Biotecnologa. NETBIBLO, S-L. Espaa

Ferraro, R y Lerch, C (1997). Qu es qu en tecnologa? Granica S.A. Buenos Aires.

Fondo nacional de ciencia, tecnologa e innovacin (2008). Cdigo de Biotica y Seguridad. S.E. Caracas.

GENTAUR. TALEN-una forma rpida y fcil para la eliminacin de genes! [Pgina Web en lnea].
Disponible:
http://translate.google.co.ve/translate?hl=es
419&sl=it&u=http://gentauritaly.com/prodotti/talen-un-sistema-semplice-e-veloce-per-gene-knockout/&prev=search
[Consulta: 2015,
junio 05]

Gallardo H. (2007). Elementos de investigacin acadmica. [Libro en lnea]. Disponible:

https://books.google.co.ve/books?id=y9s80yY_oFEC&pg=PA171&dq=instrumentos+
de+investigacion+documental&hl=es&sa=X&ei=sDLVdOzKcT0AGbqoG4CQ&ved=0CDMQ6AEwBA#v=o
nepage&q=instrumentos%20de%20investigacion%20documental&f=false [Consulta: 2015, junio 24]

Gonzales
(2006).
Ensayos
mdicos
sobre
gentica
[Libro
en
lnea]
Disponible:
https://books.google.co.ve/books?id=5TsMx_fySYC&pg=PA240&dq=que+es+terapia+genica&hl=es419&sa=X&ei=lJSVYXaGYOOyASuoZ6oDw&ved=0CDYQ6AEwBQ#v=onepage&q=que%20es
%20terapia%20genica&f=false [Consulta: 2015, junio 30]

Kuwayama (2013). Centro de Medicina Embrionaria [Pgina Web en Lnea] Disponible:

http://www.pgdcem.com/terminologia/talasemias_alpha_beta_talasemia.html [Consulta 2015 Julio 06]

Liang, P y otros. (2015). Artculo de investigacin. [Documento en PDF]. Disponibles:

http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs13238-015-0153-5#page-1. [Consulta: 2015, Mayo 22]

Lozada, A. (2010). Biotica Hoy. [Pqina Web en Lnea] Disponible: http://www.bioeticahoy.com.es/

[Consulta 2015 Junio 06].]

Manascero (2003). Atlas de morfologa celular, alteraciones y enfermedades relacionadas. [Libro en Lnea].
Centro
Editorial
Javeriano.
Disponible:
https://books.google.co.ve/books?
id=apSP3g_oXNoC&pg=PA77&dq=Que+es+la+beta+talasemia&hl=es-

419&sa=X&ei=0hWUVaTUBI6TyATiiICwAg&ved=0CCMQ6AEwAQ#v=onepage&q=Que%20es%20la
%20beta%20talasemia&f=false [Consulta: 2015, Julio 1].

Medal M. (1965). Anemia de clulas falciformes. . [Pgina Web en

http://65.182.2.244/RHP/pdf/1965/pdf/Vol2-1-1965-3.pdf [Consulta: 2015, junio 05]

Moira, A y otros (2011). Edicin de genes: una nueva herramienta para la biologa molecular. [Pgina Web en
Lnea] Disponible: http://www.investigacionyciencia.es/revistas/investigacion-y-ciencia/numero/427/edicin-degenes-una-nueva-herramienta-para-la-biologa-molecular-8590 [Consulta 2015 Julio 06]

Mran A. (2015). Qu es la tecnologa CRISPR/cas9 y cmo nos cambiar la vida? [Pgina Web en
lnea]. Disponible: http://dciencia.es/que-es-la-tecnologia-crispr-cas9/ [Consulta: 2015, junio 05]

Reis A. y otros (2014) CRISPR / Cas9 y dirigida Genoma Edicin: Una nueva era en Biologa Molecular.
[Pgina
Web
en
lnea].
Disponible:
https://translate.googleusercontent.com/translate_c?
depth=1&hl=es&prev=search&rurl=translate.google.co.ve&sl=en&u=https://www.neb.com/tools-andresources/feature-articles/crispr-cas9-and-targeted-genome-editing-a-new-era-in-molecular
biology&usg=ALkJrhjL4PslGdRvYdfZ8ZvckpQIlmKkJA [Consulta: 2015, junio 05]

S/A. (2009). Genetic s Home Reference. Your Guide To Understanding Genetic Conditions. [Pgina Web
en
lnea].
Disponible:
http://translate.google.co.ve/translate?
hl=es419&sl=en&u=http://ghr.nlm.nih.gov/gene/HBB&prev=search [Consulta: 2015, junio 05]

S/A (2014).El exoma y su papel en el diagnstico de errores congnitos del metabolismo. [Pgina Web en
lnea]. Disponible: http://www.guiametabolica.org/noticia/exoma-su-papel-diagnostico-errores-congenitosmetabolismo [Consulta: 2015, junio 05]

S/A
(2011).Medicina
y
Farmacologia
[Pgina
Web
Disponible:http://medicinafarmacologia.blogspot.com/2011/03/hemocitoblastos.html
junio 05]

lnea].

Disponible:

en
lnea].
[Consulta: 2015,

Sommer S. (1998). Gentica, Clonacin y Biotica Cmo afecta la ciencia nuestras vidas? [Libro en
lnea].
Disponible:
https://books.google.co.ve/books?
id=eS7QQM2uRrMC&printsec=frontcover&dq=bioetica&hl=es419&sa=X&ei=z29zVa24N4XpsAXb7oPIAQ&ved=0CEAQ6AEwBw#v=onepage&q=bioetica&f=false
[Consulta: 2015, Jjunio 05]

Tecnologa en Salud (2013). Fundamentos de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) y de la PCR en

tiempo real. [Documento en PDF] Disponible: http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2013/ir132d.pdf
[Consulta 2015, Julio 05]

Trujillo.A
(2006).
El
Vaticano.
[PqinaPgina
Web
en
Lnea]
http://www.territoriodigital.com/nota.aspx?c=2188444897567484 [Consulta 2015 Junio 06].

Universidad Pedaggica Experimental Libertador (2012). Manual de Trabajos de Grado de

Especializacin y Maestra y tesis Doctorales. FEDUPEL. Caracas.

Urbano
J
(2006).
Saludisima.
[Pgina
Web
en
http://info.saludisima.com/manipulacion-genetica/ [Consulta 2015 Junio 06]

Universidad de Navarra (2012) [Pgina Web en Lnea]. Disponible: http://www.unav.es/ocw/genetica/tema12-31.html [Consulta 2015, Julio 05]

Valcrcel (2015). Nuevos avances contra la enfermedad de Huntington. [Pgina Web en lnea]. Disponible:
http://www.interempresas.net/Medico-hospitalario/Articulos/137429-Nuevos-avances-contra-laenfermedad-de-Huntington.html [Consulta: 2015, junio 05]

LACADENA, J.R. Gentica y Biotica, http://www.cnice.mecd.es/tematicas/genetica: Orgenes de

la Biotica: Van Rensselaer Potter, in memoriam (octubre, 2001), El Tratado Internacional sobre
Recursos Fitogenticos para la Alimentacin y la Agricultura (marzo, 2004)

Lnea]

Disponible:

Disponible:

POTTER, V.R. 1971. Bioethics: Bridge to the future. Prentice-Hall Inc, Englewood Cliffs, New Jersey,
XVII+205 pp.