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GUIA DE PRCTICAS
QUMICA ORGNICA II
Autores:
Mg. Q.F. Luis Miguel Flix Veliz
Dra. Juana Chvez Flores
Q.F. Daniel aez del Pino
Q.F. Maribel Veronica Rodriguez Vila
2016
F-CV3-3B-2
INTRODUCCIN
Bienvenidos. Esta asignatura se dedica al estudio de los compuestos denominados biopolmeros:
carbohidratos. proteinas, compuestos heterocclicos: nitrogenados, tiolados y en general de los
compuestos que posibilitan la vida como los esteroides, terpenos, bases nitrogenadas entre otros. La
enseanza de nuestra asignatura est dividida en clases prcticas de laboratorios y seminarios todo
esto con un enfoque a la vez sinttico y medio ambiental.
El objetivo principal es dar a conocer al alumno las bases tericas y prcticas de la Qumica Orgnica
II como herramienta fundamental de trabajo sobre la que se sustentan asignaturas de cursos
superiores
relacionados
con
la
Bioqumica,
la
Biologa
Molecular,
la
farmacognosia,
la
alumnos y estos
realizarn las actividades en el laboratorio con un calendario coordinado con el resto de prcticas.
Se estima que el alumno elabore el Informe Final de laboratorio en el que se incluye el anlisis de los
resultados obtenidos y conclusiones sobre el problema abordado.
LMFV.
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PRCTICA N 1
OBTENCIN Y RECRISTALIZACIN DE GLUCOSA APARTIR DE LA CHANCACA
1.1 Marco terico
El nombre carbohidrato o hidrato de carbono, deriva del hecho que el hidrgeno y el oxgeno
estn en la misma proporcin que en el agua (Hidrato); es decir, hay 2 hidrgenos por
cada oxgeno. El trmino carbohidratos, azcares, glcidos o hidratos de carbono se identifica y
designa un grupo de sustancias naturales que cumplen funciones vitales como componentes de
los organismos vivos.
Las sustancias qumicas puras se caracterizan por ciertas constantes fsicas (punto de fusin,
punto de ebullicin, densidad, rotacin ptica, ndice de refraccin) nos permite evaluar la
pureza. La recristalizacin es uno de los mejores mtodos fsicos para purificar compuestos
slidos a temperatura ambiente. Un compuesto slido puede recristalizarse a partir de su
solucin saturada y caliente, en un disolvente en el que a temperatura ambiente es poco
medianamente soluble. La tcnica se basa en el hecho de que el exceso de soluto forma ncleos
cristalinos que crecen al enfriarse la disolucin, dejando la mayor parte de sus impurezas en el
disolvente.
1.2 Competencias:
1. Realiza y explica las tcnicas de extraccin de carbohidratos a partir de un producto
natural
1.3 Materiales y reactivos:
Materiales:
1. Embudo de vidrio
2. Gradilla de metal
3. Pipeta serolgica 10mL
4. Mechero de bunsen
5. Bagueta
6. Esptula
7. Beacker 250mL
8. Beacker 1L
9. Balanza analtica
10. Trpode
11. Rejilla de asbesto
12. Pinza de madera
13. Estufa
14. Termmetro
15. Matraz de 250mL
Reactivos:
1. Etanol 96%
2. Etanol absoluto
3. Carbn activado
1.4 Procedimiento:
Si los cristales de partida presentan coloracin intensa debido a la presencia de impurezas, aadir
un poco de carbn activado para eliminarlas.
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5. Filtrar la solucin en caliente con un embudo cnico y filtro de pliegues para eliminar las
impurezas insolubles y el carbn activado
6. Desechando el residuo slido, compuesto por el carbn activado y las impurezas insolubles, que
aparece en el filtro de pliegues
7. A medida que la solucin se enfre se irn formando los correspondientes cristales del
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producto
8. Finalmente, y una vez que el filtrado se enfra completamente, dichos cristales se filtran por
succin; y se lavan con el disolvente usado en la recristalizacin en fro, usar un Bchner para
eliminar las trazas de disolvente, luego llevar el papel filtro a la estufa a 60 C por 5 minutos
observndose a la luz visible los cristales obtenidos de la recristalizacin de la glucosa a partir
de la chancaca
1.5 Resultados
Observar a la luz visible los cristales obtenidos de la recristalizacin de la glucosa a partir de
la chancaca
1.6 Cuestionario
1. Describir el fundamento de la recristalizacin
2. Cul es la funcin del carbn activado en la recristalizacin
3. Qu es un azcar invertido.
1.7 Fuentes de informacin
1. Cristalizacin:
http://viriquimica.blogspot.com/ - 62k
fecha de acceso 14/03/2008
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PRCTICA N 2
CARACTERIZACIN DE AZUCARES
2.1 Marco terico
La glucosa se usa mucho como alimento y como agente edulcorante, industrialmente se
fabrica en grandes cantidades por hidrlisis de almidn. La frmula estructural de la
sacarosa no tiene grupos hidroxilos glucsidos libres, ni contiene grupo aldehdico libre ni
potencial, ya que las dos unidades de monosacridos estn unidos por los hidroxilos
glucsidicos, ello trae como consecuencia que la sacarosa no presente mutarrotacin, no
sea reductora y no forme osazona.
2.2 Competencias:
1. Realiza las reacciones de caracterizacin de azucares
2. Explica y describe qumicamente las reacciones
2.3 Materiales y reactivos:
Materiales:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta serolgica 2mL y 5mL
4. Mechero de bunsen
5. Bagueta
6. Esptula
7. Beacker 250mL
8. Balanza analtica
9. Trpode
10. Rejilla de abesto
11. Pinza de madera
Reactivos:
1. Sol. de Fehling A
2. Sol. de Fehling B
3. Glucosa 1%
4. Sacarosa 1%
5. Lactosa 1%
6. Fructosa 1%
7. Manosa 1%
8. Xilosa 1%
9. Galactosa 1%
10. AgNO3 5%
11. NH4OH dil.
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12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
1.4 Procedimiento:
1. PARA LA GLUCOSA:
1.1 Reaccin de Moore: agregue en un tubo de ensayo 2 mL de solucin de glucosa
concentrada, adicinele 1 mL de hidrxido de sodio al 33% y por ltimo caliente
suavemente.
1.2 Reaccin de Trommer: agregue en un tubo de ensayo XX gotas de solucin de sulfato
de cobre al 10%, sobre sta aada gota a gota solucin de hidrxido de sodio, hasta que
se disuelva completamente el precipitado que se form al principio, luego adicione 1 mL
de solucin concentrada de glucosa y caliente suavemente por unos minutos observe el
color del precipitado.
1.5. Prueba de Tollens: Disponer de 3 tubos de ensayo, a cada uno aadirle 1 mL de reactivo
de Tollens recientemente preparado. Al tubo N 1 aadirle 1 mL de solucin de glucosa al
1%, al tubo N 2 aadirle 1 mL de solucin de sacarosa al 1%, al tubo N 3 aadirle 1 mL de
solucin de lactosa al 1%. Llevar los tubos de ensayo al Bao Mara por espacio de 5
minutos. Observe si hay formacin de espejo de plata.
1.6. Prueba de Benedict: Disponer de 3 tubos de ensayo, a cada uno aadirle 1 mL de reactivo
de Benedit recientemente preparado. Al tubo de ensayo No 1 aadirle 1 mL de solucin de
glucosa al 1%, al tubo de ensayo No 2 aadirle 1 mL de solucin de sacarosa al 1%, al tubo de
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2.
PARA LA SACAROSA:
PARA FRUCTOSA
3.1.Reaccin de Selivanoff: En un tubo de ensayo adicione 1 mL del reactivo de Selivanoff
y adicinele 1 mL de solucin concentrada de fructosa ms 1 mL de HCl
concentrado y proceda a calentar suavemente hasta que aparezca la coloracin
caracterstica.
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PRCTICA N3
IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS POR MTODOS CROMATOGRFICOS
3.1 Hidrlisis de carbohidratos
Los derivados de azucares en los cuales el hidrgeno de los grupos OH del carbn
hemiacetal o hemicetal es reemplazado por un radical orgnico (formando un acetal o cetal) son
denominados glicsidos; una molcula de agua es eliminada cuando esta reaccin se lleva a
cabo. Si el radical orgnico es derivado de otro monosacrido el producto formado es un
disacrido. Los polisacridos son polmeros de monosacridos unidos unos a otros por enlaces
glicosdicos. Los enlaces glicosdicos pueden ser hidrolizados por cidos relativamente fuertes o
por enzimas especficas. Los oligosacridos son azucares reductores si uno de sus grupos
carbonilos est libre (no forma parte del enlace glicosdico).
3.1.1 Cromatografa.
Cromatografa es el nombre dado a la tcnica utilizada para separar solutos en base a sus
distribuciones diferenciales entre dos fases, el sistema de solventes es la fase (fase mvil)
que se mueve sobre la otra fase (fase estacionaria). Los solutos se movern con la fase mvil a
una tasa que depender de sus distribuciones diferenciales entre las dos fases. Existen tres
tipos de cromatografa: particin, intercambio inico y adsorcin. La distancia que se
mueve e soluto en relacin a la distancia que se mueve el solvente sirve como un medio
conveniente para la identificacin de solutos. Esta tasa relativa de flujo es el valor de R f
para el compuesto bajo las condiciones especficas del experimento.
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7. Pro pipeta
8. Bagueta
9. Balanza analtica
10.
Cuba cromatografica pequea
11.
Asperjador con bombilla
Reactivos:
1. Acido Sulfrico al 5%
2. Carbonato de Calcio
3. Cromatofolio 20 x20 cm
4. Butanol
5. Acido actico
6. Piridina
7. Acetato de Etilo
8. Sacarosa Q.P
9. Almidn Q.P
10. Antrona
11. Lugol
12. Etanol
13. Revelador de difenilamina
14. Revelador acido 3.5-dinitrosalisilico
3.4 Procedimiento
3.4.1 Hidrlisis:
1.
1.
3.
4.
3.4.2 Cromatografia
1. Preparar los siguientes sistemas de solventes: n-butanol-agua-cido actico
(5:4:1)
2. Preparar las placas cromatogrficas utilizando como soporte silicagel G.
3. Sembrar las placas con patrn de glucosa versus los hidrolizados.
4. Desarrollar el cromatograma.
5. Revelar el cromatograma pulverizando con antrona (0,150g) en 20 mL del
sistema etanol - cido actico - cido sulfrico concentrado (3:1:1) y
calentando las placas de 5 a 7 minutos en la estufa a 110 C. Todos los
glcidos dan manchas de color verde de diferente tonalidad.
3.4.3 Otros reactivos de identificacin para cromatogrfia
A. DIFENILAMINA: Caracteriza a las aldohexosas y aldopentosas.
1. Pulverizar los cromatogramas con una solucin de 0,400 g. de difenilamina y 1g
de cido tricloroactico disueltos en n-butanol- metanol(1:1).
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PRCTICA N 4
DETERMINACIN DE LA GLUCOSA POR MTODOS ESPECTROSCPICO
4.1 Carbohidratos
Para la cuantificacin de carbohidratos se puede utilizar algunas reacciones de coloracin
como : o-toluidina, antrona y cido dinitro salicilico, ya que la absorbancia del compuesto
coloreado formado es directamente proporcional a la concentracin del carbohidrato.
Mtodo de la Antrona/sulfrico: La mayora de los carbohidratos dan la reaccin de la
antrona/cido sulfrico en alguna medida pero en las condiciones descriptas la reaccin es
razonablemente especfica para hexosas. Todos los polisacridos reaccionan en medio cido
fuerte dando un cromgeno (furfural y derivados) que condensan con n cromforo (reactivo)
para dar color. La contaminacin con celulosa o fibras debe ser rigurosamente evitada. La
variacin en el blanco puede ser muy molesta; es necesario recristalizar la antrona para
obtener blancos bajos y aceptables. Como en todas las reacciones de condensacin las
condiciones de calentamiento y enfriamiento deben estar muy bien estandarizadas y todos los
tubos de una serie deben tratarse simultneamente en las etapas de calentamiento y
enfriamiento.
4.2 Competencias
1. Conoce y explica el mtodo para la determinacin de glucosa mediante anlisis
espectroscopico UV/V
4.3 Material y reactivos
Materiales:
1. Beacker 250 mL y 1L
2. Mechero de bunsen
3. Trpode
4. Termmetro 250C
5. Rejilla de abesto
6. Bagueta
7. Esptula de metal
8. Pinza de madera
9. Tubos de ensayo
10. Gradilla
11. Probeta 250 mL
12. Goteros
13. Balanza analtica
14. Fiolas 100mL
15. Centrifuga
16. Pipeta 5mL y 10mL
17. Micropipeta
18. Equipo espectrofotmetro UV/V
Reactivos:
1. cido sulfrico Q.P
2. Tiourea
3. Antrona
4. Glucosa Q.P
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4.4 Procedimiento
Antrona tiourea: Solucin stock 66% V/V de H2SO4 disolver 10 g de tiourea y 0,5g de
antrona en un litro H2S04 calentando a 80 - 90C. Conservar el reactivo entre 0-4C,
glucosa estndar: rango 25 -200 g/mL. Hacer una curva de calibracin: Poner
0,2mL de la solucin problema ms 2mL del Reactivo de antrona agitar, poner en un
bao de agua a T ambiente y luego en un bao de agua a ebullicin por 15 minutos,
enfriar guardar en la oscuridad. Medir la absorbancia de 620 nm despus de 20 30
minutos.
4.5 Resultados
Determinar la concentracin de glucosa en la muestra problema
4.6 Cuestionario
1. Describa los mtodos que se utilizan para determinar la concentracin de azucares en
liquido biolgico.
2. Graficar los resultados obtenidos en la prctica de Determinacin de la glucosa por mtodos
espectroscpico
4.7 Fuentes de informacin
1. Determination of food carbohydrates / D.A.T. Southgate. - London:
Applied Science Publishers.1976
2. http:/www.scribd.com/Analisis-de-Macrocomponentes-en-alimentos
Fecha de acceso 15/06/09
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PRCTICA N 5
OBTENCIN DE ALCALOIDES A PARTIR DE PRODUCTOS NATURALES
5.1 Alcaloides
Las civilizaciones antiguas siempre emplearon extractos de races, cortezas, hojas, flores,
frutillas o semillas como frmacos. Este empleo de las plantas con propsitos medicinales no
estaba basado en la supersticin ni en el azar. Muchas plantas contienen compuestos que tienen
un profundo impacto fisiolgico con dosis muy pequeas. Los agentes activos en muchas de estas
sustancias vegetales han sido aislados y se han descubierto que son heterocclicos (anillo
bencnico, molcula de 6 tomos de carbono y con un enlace doble en tres de ellos; de
numerosas aplicaciones y abundante en la naturaleza entre los compuestos orgnicos, como
alcoholes, disolventes, aromatizantes y otros) de nitrgeno. Muchos de los compuestos de
nitrgeno vegetales contienen tomos de nitrgeno bsico y por lo tanto, pueden ser extrados
mediante disolucin cida de la planta en general. La produccin comercial de los alcaloides son
en gran mayora, extrados directamente de la planta. El proceso de extraccin comprende, en
principio, una maceracin en agua o alcohol y un proceso simple de filtrado, condensacin y
concentracin.
5.2 Competencia:
1. Conoce y explica los mtodos de extraccin de los alcaloides a partir de productos naturales
5.3 Materiales y reactivos
Materiales:
1. Beacker 250 mL
2. Mechero de bunsen
3. Trpode
4. Rejilla de abesto
5. Bagueta
6. Esptula de metal
7. Pinza de madera
8. Embudo
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9.
10.
11.
12.
Probeta 250 mL
Balanza analtica
Rotavapor
Estufa
Reactivos:
1. HCl Q.P
2. Cloroformo
3. Hexano
4. ter de petrleo
5. Hidrxido de sodio
6. Etanol 70%
7. Hidrxido de amonio
5.4 Procedimiento
Son diversos los mtodos empleados para obtener los alcaloides en forma pura de la planta que
los contiene, pues los compuestos poseen diferentes grados de solubilidad, pero en todos ellos se
aprovecha su carcter bsico, algunas tcnicas para extraerlos son:
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PRCTICA N 6
REACCIONES DE CARACTERIZACIN DE LOS ALCALOIDES
6.1 Alcaloides: Los alcaloides, son sustancias orgnicas nitrogenadas, de estructura compleja, cuya
molcula est constituida por grupos atmicos que contienen nitrgeno y forman anillos
cerrados. Los alcaloides tienen carcter bsico, o sea que se parecen a los lcalis, de donde
deriva su nombre.
Los alcaloides son de real importancia sntesis de frmacos que sern utilizados en medicina, con
fines de tratamiento de enfermedades, control de dolencias y mejoramiento de la salud del
hombre, sin los alcaloides hubiera sido imposible mantener a una persona dormida durante una
operacin, como tambin controlar problemas del sistema cardiovascular, nervioso, digestivo,
entre muchos otros. Muchas de estas drogas son muy peligrosas, podran provocar alteraciones en
el sistema nervioso central, alucinaciones, problemas graves en el sistema digestivo,
dependencia fsica y squica y en muchas ocasiones la muerte.
6.2 Competencia:
1. Realiza las reacciones de identificacin de alcaloides
2. Explica y describe qumicamente las reacciones
6.3 Materiales y reactivos
Materiales:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta serolgica 2mL, 5mL
4. Bagueta
5. Esptula
6. Trpode
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7. Rejilla de abesto
8. Pro pipeta
9. Beacker 250 mL
10.Mechero de bunsen
11.Goteros pasteur
12.Probeta 250mL
13.Embudo de vidrio
14.Matraz 250mL
15.Pinza de madera
16.Campana extractora
17.Balanza analtica
Reactivos:
1. HCl Q.P
2. Rvo. Draguendorff
3. Rvo. Mayer
4. Rvo. Popoff
5. Rvo. Bertrand
6. Rvo. Sonnenschein
7. Rvo. Bouchardt
6.4 Procedimiento:
A.- PREPARACIN DE LAS MUESTRAS PROBLEMAS
1. Recolectar y preparar muestras frescas
2. Desmenuzar finamente 10g de muestra fresca y colocar en un erlenmeyer. Aadir un volumen
suficiente de HCl 5% para que toda la muestra este en contacto con la solucin cida calentar
con agitacin al bao mara durante 5 minutos. Enfriar y filtrar.
3. A los extractos obtenidos en la prctica anterior hacerles las pruebas de caracterizacin.
B. RECONOCIMIENTO DE ALCALOIDES
1. Reaccin de Mayer
En un tubo de ensayo aadir 0,5mL de la sol. cida y agregar II gotas del Rvo. de Mayer. Si
se observa precipitado blanco amarillento la muestra contiene alcaloides.
2. Reaccin de Dragendorff
En un tubo de ensayo aadir 0,5mL de la sol. cida y agregar II gotas del Rvo. de
dragendorff. Si se observa precipitado anaranjado la muestra contiene alcaloides.
3. Reaccin de Bertrand
En un tubo de ensayo aadir 0,5 mL de la sol. cida y agregar II gotas del Rvo. de Bertrand.
Si se observa precipitado blanco la muestra contiene alcaloides.
4. Reaccin de Popoff
En un tubo de ensayo aadir 0,5 mL de la sol. cida y agregar II gotas del Rvo. de Popoff. Si
se observa precipitado amarillo la muestra contiene alcaloides.
5. Reaccin de Sonnenschein
En un tubo de ensayo aadir 0,5mL de la sol. cida y agregar II gotas del Rvo. de
Sonnenschein. Si se observa precipitado amarillo la muestra contiene alcaloides.
6. Reaccin de Bouchardt
En un tubo de ensayo aadir 0.5mL de la sol. cida y agregar II gotas del Rvo. de
Bouchardt. Si se observa precipitado pardo oscuro la muestra contiene alcaloides.
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6.5 Resultados
Se determin el anlisis cualitativo de los alcaloides en diferentes muestras problema
6.6 Cuestionario
1. Desarrollar otros mtodos para la identificacin de alcaloides
2. Indicar las aplicaciones farmacolgicas de los alcaloides
3- Realizar las interpretaciones qumicas de cada reaccin
6.7 Fuentes de informacin
1. Sanabra G. Antonio: Anlisis Fitoqumico Preliminar, Departamento de Farmacia,
Universidad Nacional, Bogot, 1983
2. Arango A. Gabriel, J. Quijano T. Jairo: Marcha Fitoqumica Semicuantitativa,Facultad de
Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Antioquia, Medelln.
3. Dominguez X.A., Mtodos de Investigacin Fitoqumica, Ed. Limusa, Mxico,1979.
4. http: www.scribd.com/introduccion-a-los-alcaloides
Fecha de acceso 15/06/09
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PRCTICA N 7
IDENTIFICACIN Y AISLAMIENTO DE ALCALOIDES POR MTODOS
CROMATOGRFICOS
7.1 Cromatografia: La cromatografa es un mtodo que permiten separar componentes
estrechamente relacionados en mezclas complejas.
La muestra se disuelve en una fase mvil y se hace pasar a travs de fase estacionaria inmiscible
la cual se mantiene fija en una columna o sobre una superficie slida.
7.2 Competencias:
1. Explica y conoce las tcnicas cromatogrficas para la identificacin de alcaloides
7.3 Materiales y reactivos
Materiales:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
Tubo de ensayo
Gradilla de metal
Esptula
Bagueta
Cuba cromatogrfica pequea
Asperjador con bombilla
Capilares
Pipeta serolgica 2mL, 5mL
Campana extractora
Propipeta
Goteros
Reactivos:
1. Cloroformo
2. Acetato de etilo
3. Revelador de dragendorff
4. Metanol
5. Etanol
6. Hexano
7. Acido actico glacial
8. Amoniaco
7.4 Procedimiento
1.
2.
3.
4.
5.
7.5 Resultados
Se observ por medio de mtodos cromatogrficos (cromatografa en capa fina) las
manchas caractersticas de los alcaloides al revelar con el revelador de dragendorff
7.6 Cuestionario
1.
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EXAMEN PARCIAL
PRCTICA N 8
DETERMINACIN DE LAS PROPIEDADES FSICAS Y QUMICAS DE LA ALBMINA
8.1 Aminocidos: En la estructura general de los aminocidos se observa que tienen en comn un
tomo de carbono central (alfa) al que estn unidos covalentemente un cido
carboxlico, un grupo amino y un tomo de hidrgeno. Adems de ello, al tomo de
carbono alfa se une una cadena lateral, designada R, que es diferente para cada uno de los
20 aminocidos comunes.
CH
COOH
NH3
Esctructura general de un aminocido
Las protenas son compuestos biolgicos conformados principalmente por la unin de alfa
aminocidos unidos unos a otros en forma lineal mediante enlaces peptdico.
La conformacin estructural de una protena que se da en forma natural (protena
nativa) es una caracterstica extremadamente importante de las protenas. A travs de
estudios con rayos X de ciertas protenas nativas y polipptidos sintticos, Pauling y
Corey propusieron que toda o ciertas partes de algunas protenas contenan aminocidos
dispuestos en forma helicoidal especficamente como una alfa hlice. En otras protenas, tales
como las del msculo o el pelo, se observan otras estructuras.
La desnaturalizacin de las protenas puede ser definido como algn cambio en la
estructura de la protena nativa que no produce la ruptura de los enlaces peptidicos.
Los agentes desnaturalizantes, tales como el calor, cidos, bases, agitacin, rayos X,
oxidacin o reduccin y urea, actan rompiendo los enlaces de hidrgeno, afectando los
puentes salinos, oxidando o reduciendo los enlaces disulfuro, etc. dando por resultado un
compuesto que posee una diferente conformacin as como diferentes propiedades que la
protena nativa. La solubilidad de las protenas depende no slo de la variedad de los grupos
individuales de los aminocidos y de la manera de plegarse la cadena peptdico sino tambin de
las propiedades del sistema solvente en el cual se encuentra la protena.
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F-CV3-3B-2
Determinacin de aminocidos
B. Determinacin de protenas:
Reaccin de Biuret:
En un tubo de ensayo aadir 1mL de solucin de albmina, adicionar 1 mL. de una
solucin de NaOH 10% y luego aadir 1 gota de sulfato de cobre 1%.
8.5 Resultados
Se determin el anlisis cualitativo de aminocidos de la albmina
8.6 Cuestionario
1. Realice las ecuaciones qumicas de cada una de las experiencias
2. Indique otras tcnicas por las cuales se pueda identificar aminocidos o protenas
8.7 Fuentes de informacin
1. Lock de Ugaz O. Investigacin Fitoqumica: Mtodos en el estudio de productos
Naturales
2. Dominnguez, X. A. Mtodos de Investigacin Fitoqumica. Editorial Limusa, Mxico D.F. 1973
3. Gibaja O. S. Gua para el anlisis de los compuestos del carbono Lima Per 1977
PRCTICA No 9
F-CV3-3B-2
PRCTICA No10
F-CV3-3B-2
10.5 Resultado
F-CV3-3B-2
Se observ por medio de mtodos cromatogrficos (cromatografa en capa fina) las manchas
caractersticas de los aminocidos al revelar con el revelador de ninhidrina
10.6 Cuestionario
1. Indique otros reactivos que nos permitan realizar la identificacin de aminocidos
por cromatografa en capa fina
2. Que precauciones debe tener en cuenta para la realizacin de la prctica
10.7 Fuentes de informacin
1. Lock de Ugaz O. Investigacin Fitoqumica: Mtodos en el estudio de productos
naturales
2. Dominnguez, X. A. Mtodos de Investigacin Fitoqumica. Editorial Limusa, Mxico
D.F. 1973
3. Gibaja O. S. Gua para el anlisis de los compuestos del carbono Lima Per 1977
PRCTICA No11
F-CV3-3B-2
F-CV3-3B-2
PRCTICA No12
PRUEBAS GENERALES PARA LACTONAS SESQUITERPNICAS Y LACTONAS
INSATURADAS
12.1 Las sesquiterpenlactonas son compuestos amargos, como todas las -lactonas son difciles
de saponificar; pero forman con facilidad los hidroxamatos frricos de color prpura, los
steres con la hidroxilamina dan cidos hidroxmicos. Los cidos hidroxmicos son cidos
dbiles y con ciertos metales polivalentes como el fierro, forman compuestos de
coordinacin coloreados.
La prueba de legal es caracterstica de las lactonas ,- no saturadas de 5 miembros. Las
lactonas , y , - no saturadas reducen el nitrato de plata amoniacal, las lactonas , no saturadas reducen el Tollens en ausencia de hidrxido de sodio, esta reaccin se
emplea para la diferenciacin de estas lactonas .
12.2 Competencias:
1. Realiza las reacciones de identificacin de lactonas
2. Explica y describe qumicamente las reacciones
12.3 Material y reactivo
Material:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta serolgica 2mL, 5mL
4. Bagueta
5. Esptula
6. Trpode
7. Rejilla de abesto
8. Propipeta
9. Beacker 250 mL
10.Mechero de bunsen
11.Goteros pasteur
12.Probeta 250mL
13.Embudo de vidrio
14.Matraz 250mL
15.Pinza de madera
16.Campana extractora
17.Balanza analtica
Reactivos:
1. Cloruro frrico 10%
2. HCl Q.P
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3. KOH 10%
4. Clorhidrato de hidroxilamina
5. cido pcrico
6. Etanol
7. Hidrxido de sodio
8. Nitrato de plata
9. Amoniaco
10. Nitroprusiato de sodio
11. Piridina
12. 3,5 dinitrobenzoico
12.4 Procedimiento:
A. Pruebas generales para lactonas sesquiterpnicas:
1. Ensayo con hidroxamato frrico: La muestra vegetal se disuelve en etanol, se aade
solucin de clorhidrato de hidroxilamina y KOH. La mezcla se calienta hasta que aparezca
una espuma de color rojizo. Se enfra y se acidula con HCl. Se aade cloruro frrico y se
forma una coloracin violeta.
2. Ensayo de Baljet: Las sesquiterpenlactonas producen coloraciones anaranjadas o rojo
oscuro cuando se tratan con dos soluciones que se mezclan en iguales volmenes antes de
usarse. Solucin A: 1g. De cido pcrico en 100mL de etanol; solucin B: 10g. De hidrxido
de sodio en 100mL de agua destilada.
3. Prueba de Tollens: Las lactonas , y , - insaturadas reducen el reactivo de Tollens
(AgNO3 /NaOH / Amoniaco) formando un espejo de plata.
B. Ensayo para lactonas insaturadas:
1. Ensayo de Legal: Las sesquiterpenlactonas con anillos lactona, , insaturados producen
coloracin rosa cuando se disuelven en piridina, se aade nitroprusiato de sodio y un lcali.
Aunque tambien las , - insaturadas dan coloracin si no se controla bien el pH, ya que
estos se isomerisan. Las metilencetonas tambin dan coloracin.
2. Ensayo de Kedde: A la muestra disuelta en alcohol se aade cido 3,5 dinitrobenzoico y
KOH, se producen coloraciones violetas o azules que desaparecen despus de una hora. La
prueba tambin la dan positiva los cardenlidos.
12.5 Resultados
Se determin el anlisis cualitativo del metabolito secundario lactonas en diferentes
muestras problemas
12.6 Cuestionario
1. Desarrollar otros mtodos para la identificacin de lactonas
2. Indicar las aplicaciones farmacolgicas de las lactonas sesquiterpnicas
3. Realizar las interpretaciones qumicas de cada reaccin
12.7 Fuente de informacin
1. Lock de Ugaz O. Investigacin Fitoqumica: Mtodos en el estudio de productos
naturales
2.Dominnguez, X. A. Mtodos de Investigacin Fitoqumica. Editorial Limusa, Mxico
F-CV3-3B-2
D.F. 1973
3. Gibaja O. S. Gua para el anlisis de los compuestos del carbono Lima Per
1977
PRCTICA N 13
IDENTIFICACIN DE LACTONAS POR MTODOS CROMATOGRAFICOS
13.1 Las lactonas sesquiterpnicas pueden separarse y analizarse bien sea por cromatografa en
columna o cromatografa en capa fina, utilizado silicagel y eluyentes como: CHCl 3:
MeOH(9:1), : CHCl3: MeOH(19:1), CHCl3: Et2O (4:1), CHCl3: Et2O (5:1), Bz: Me2CO (4:1), Bz:
EtOAc (5:5).
Como agentes reveladores para los anlisis por cromatografa en capa fina, pueden
utilizarse: cido sulfrico concentrado y calentamiento, vapores de yodo, luz
ultravioleta 254 nm o permanganato de potasio al 1%. Se han reportado un revelador para
lactonas sesquiterpnicas (p dimetilamino benzaldehido).
13.2 Competencias
- Explica y conoce las tcnicas cromatogrficas para la identificacin de lactonas
13.3 Material y equipos
Materiales:
1. Tubo de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Esptula
4. Bagueta
5. Cuba cromatogrfica pequea
6. Asperjador con bombilla
7. Capilares
8. Pipeta serolgica 2mL, 5mL
9. Campana extractora
10.Propipeta
Reactivos:
1. Cloroformo
2. ter de petrleo
3. Etanol
4.cido sulfrico Q.P
5. Vainillina sulfrica
6. Acetona
13.4 Procedimiento
1. Preparar las placas cromatogrficas
2. Prepara los sistemas de solventes: CHCl3/ter de petrleo/ EtOH (5:4:1); CHCl 3/Acetona
(90:10)
3. Preparar la solucin de lactonas a partir de los extractos de productos naturales
4. Desarrollar los cromatogramas, utilizando los sistemas de solventes.
5. Revelar el cromatograma con cido sulfrico concentrado vainillina sulfrica
13.5 Resultados
F-CV3-3B-2
PRCTICA N 14
SEMINARIO
F-CV3-3B-2
BIBLIOGRAFA
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Per, 1994
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3. M. Alemany L.. 5. Font 5.; PRACTICAS DE BIOQUIMICA, Editorial Alambra, 1982
4. T. A. Geissmnan. THE CHEMISTRY OF FLAVONOID COMPOUNDS, The Macmillan Compancv, 1962
5. Muoz Mena. QUMICA ORGANICA, Publicaciones Cultura SA., 1965
6. Xorge A. Dominguez, EXPERIMENTOS DE QUIMICA ORGANICA, Editorial Limnusa. 1963
7. R. Q. Brcwster. CURSO PRACTICO DE QUIMICA ORGANICA. Editorial Alhambra. 1979
8. CA. Rojahn. PRODUCTOS QUIMICOS Y FARMACEUTICOS, Editorial Atlante, 1946.
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