Citotoxicidad

Puntos a desarrollar en clase.

Killing.
Apoptosis.
Destruccin:
INTRACELULAR-----Citotoxicidad Celular
EXTRACELULAR----Fagocitosis
Leucocitos que reconocen y destruyen clulas
Mecanismo de defensa
Contra patgenos
Rechazo de trasplantes alognicos
Describir los mecanismos de citotoxicidad mediada por clulas, precisando
mediadores solubles, de membrana y celulares implicados. (Suele ser
pregunta de examen).

Las tres fases de la respuesta celular son: reconocimiento, activacin y fase

efectora.
En el sistema inmunitario la funcin de reconocimiento la poseen: los anticuerpos,
TCR (receptores de linfocito T), BCR (receptores de linfocito B), receptores tipo
Toll, etc.
La activacin puede ser tanto de diversos complejos como de clulas, por ejemplo:
la activacin de sistema de complemento, los macrfagos, los linfocitos T CD4 y
CD8, linfocitos B.
La fase efectora est dada por mecanismos mediados por molculas o clulas
como: anticuerpos (promueven opsonizacion, activacin del complemento,
neutralizacin y citotoxicidad mediada por anticuerpos).
Citotoxicidad: Se define como la cualidad que se tiene de ser toxico, es el dao
celular causado o provocado por la accin de anticuerpos especficos, sistema del
complemento o por clulas toxicas. Constituye una de las ms importantes
respuestas efectoras inmunitarias para la defensa contra los agentes infecciosos.
Ejemplo clnico: Una persona con hepatitis posee hepatocitos infectados con
virus, el sistema inmune se encargara de destruir a los hepatocitos infectados por
el virus de la hepatitis. Durante esta enfermedad los hepatocitos son destruidos no
tan solo por el virus que destruye las clulas (la accin del virus de destruir a los
hepatocitos se le llama efecto citopatico), sino que tambin son destruidos por el
sistema inmunitario con la finalidad de controlar la infeccin porque estas clulas

infectadas con el virus ya no son recuperables debido a que no hay manera de

sacar a el virus de la clula y destruirlo solamente a l. Hay maneras de detener o
ralentizar la maquinaria biosintetica de la clula infectada, por ejemplo con la
liberacin de citoquinas IFN-alfa e IFN-beta, tambin hay mecanismos internos de
la clula para frenar el metabolismo celular.
En ingles no se habla de citotoxicidad sino de Killing (matar), que es la actividad
de las clulas citotxicas. El organismo se encarga de realizar esta funcin
mediante la apoptosis (muerte celular programada) y en algunos casos se produce
la necrosis celular.
Cuando se produce apoptosis o necrosis es decir que la clula se destruye a si
misma hablamos de citotoxicidad celular pero cuando tenemos una clula que
fagocita a otra y la destruye dentro de si hablamos de fagocitosis.
Para que se produzca la citotoxicidad necesitamos de leucocitos que tengan la
capacidad de reconocer las clulas infectadas y que se encarguen de destruirlas,
esto ser un mecanismo de defensa para patgenos pero tambin puede causar
el rechazo a trasplantes porque son clulas extraas que estn ingresando al
organismo.
Clulas con capacidad citotxica.

Linfocitos TCD8 que cuando estn activados se denominan linfocitos T

citotxicos (CTL)
Linfocitos NK.
Linfocitos NKT.
Clulas mieloides.

Generalmente los que se encargan de esta funcin son los linfocitos TCD8 y los
Linfocitos NK.

Estas clulas antes de ejercer su actividad citotxica deben reconocer al antgeno

en la superficie de la clula infectada. Los linfocitos T citotxicos reconocen
pptidos que pueden ser de origen viral, los cuales se expresaran en la superficie
de la clula infectada como molculas del MHC de clase I que presentaran el
pptido viral a linfocito. Entonces los pptidos sern presentados por la clula
diana (infectada) mediante las molculas del MHC de clase I y esta clula ser
reconocida para luego ser destruida.
Hay clulas infectadas que pierden la capacidad de expresar las molculas de
MHC de clase I, por lo que los linfocitos T citotxicos no tendran la capacidad
para destruirlas, es este caso se encarga el linfocito NK ya que l es
extraordinariamente eficiente para detectar clulas sin MHC de clase I. De esta
manera el sistema inmunitario se complementa debido a que los linfocitos T
citotxicos no pueden reconocer clulas infectadas que no expresen MHC de
clase I el linfocito NK se encargara de reconocer a estas clulas.
Lo explicado anteriormente ocurre porque hay algunos virus como los
citomegalovirus, o los herpes virus que interfieren con diversos mecanismos de las
clulas que infectan y a su vez estas clulas pierden la capacidad de expresar
molculas del MHC de clase I. De manera anloga, algunos tumores generan
mutaciones en las clulas evitando la expresin de las molculas del MHC de
clase I. Por lo tanto estas clulas infectadas con estos virus o tumorales estarn a
salvo de los linfocitos T citotxicos, sin embargo los NK efectuaran la tarea de
eliminar estas clulas (los NK son clulas que participan activamente en la
eliminacin de tumores).

Citotoxicidad mediada por linfocito T citotxicos.

Los linfocitos T citotxicos son muy importantes en la inmunidad viral recordemos
que ellos al reconocer molculas del MHC de clase I reconocern generalmente
clulas infectadas con virus o con bacterias intracelulares. Luego de que los
linfocitos T CD8 reconocen a las clulas infectada procedern a inducir sobre esta
clula su actividad citotxica mediando as la apoptosis celular.

La citotoxicidad mediada por los linfocitos TCD8 induce la sinapsis

inmunolgica que es el contacto estrecho entre dos clulas que estn bajo los
efectos del sistema inmunitario que en este caso seria, el linfocito T CD8 y la
clula infectada o clula diana.
En el caso del linfocito T CD4 a la hora de reconocer los antgenos no hablamos
de clula diana si no de clula presentadora de antgeno y hablamos de un
proceso de activacin no de un proceso citotxico.
En el linfocito T citotxico la unin a la clula diana esta favorecida por molculas
de adhesin, no se necesitan molculas co-estimuladoras ya que las molculas de
adhesin estabilizan la unin entre estas dos clulas necesaria para que se d la
seal de destruccin celular.
Para la activacin de linfocitos T CD8 como factor fundamental la
participacin o expresin del linfocito Th1, que es una clula que ha
interactuado previamente con una clula presentadora de antgeno y es capaz de
producir IL-2 la cual es una citoquina estimulante para la activacin del linfocito T
CD8.
El linfocito T CD8 presenta un precursor que el linfocito CTL-P, el cual no
expresa receptor para la IL-2 al igual que no la produce, no se encuentra
proliferando y no tiene actividad citotxica. Cuando ocurre el reconocimiento

antignico mediante las molculas del MHC de clase I este linfocito CTL-P se
activa y empieza a expresar el receptor para IL-2 al igual que produce IL-2 pero en
pocas cantidades por lo que para promover la proliferacin de el mismo y su
actividad citotxica necesita mayor expresin de IL-2 la cual ser aportada por el
linfocito Th1.
En este caso hay que recalcar un hecho importante y es que el linfocito Th1 no
puede activar por si solo al linfocito T citotxico si no que se necesita que
previamente el linfocito CTL-P (precursor del linfocito T citotxico) haya reconocido
a su antgeno, para que luego el exprese los receptores de IL-2 necesarios para la
actividad co-estimuladora del linfocito Th1. Entonces cuando ocurre la interaccin
completa del linfocito TCD8 con la IL-2 es que se activan los mecanismos de
proliferacin y de actividad citotxica.

En la siguiente imagen podemos ver dos mecanismos de activacin de los

linfocitos T CD8, donde vemos en el primer caso una clula dendrtica infectada
por un virus expresando molculas del MHC clase I y del MHC de clase II que
seran pptidos del mismo virus procesados tanto el va citosolica como en la va
endocitica, de este modo esta clula dendrtica va poder interactuar con linfocitos
T CD4 y T CD8 siendo el linfocito T CD4 una clula ms fcil de activar la cual se
va diferenciar fenotpicamente en un linfocito Th1 que es una clula efectora capaz
de producir citoquinas como IL-2. Mientras que la clula T CD8 virgen necesita
para su activacin de un ambiente rico de IL-2 que se lo proporcionara el linfocito
Th1.

En el segundo caso vemos que hay ausencia del linfocito Th1, observaremos que
un linfocito CTL-P de memoria podr ser activado por una clula dendrtica que
manifieste grandes cantidades de molculas co-estimuladoras como B7 y CD28.
Este caso es una excepcin debido a que solo se da en linfocito CTL-P de
memoria, que se encuentren en sitios donde no haya proliferacin de linfocitos
Th1, porque los linfocitos CTL-P vrgenes no necesitan de molculas coestimuladoras para su activacin si no que necesitan de abundante IL-2, lo cual se
logra con la ayuda del linfocito Th1. Tambin cabe resaltar que los linfocitos CTL-P
de memoria pueden secretar suficiente cantidades de IL-2 para su correcta
activacin.

Entonces recordemos que primero se debe dar el reconocimiento a travs de una

seal especifica que es encontrarse con su antgeno y luego la seal coestimuladora que para linfocitos CTL-P de memoria es las molculas de B7 y
CD28 expresadas por la clula dendrtica y para los linfocitos CTL-P vrgenes son
las grandes cantidades de IL-2 en el sistema producidas por linfocitos Th1.
El linfocito T CD8 una vez que se ha activado se diferencia a ser una clula
citotxica, esta nueva clula ser una asesina en serie porque una vez que la
clula citotxica cumple su funcin efectora con una clula blanco puede seguir
cumpliendo esta funcin con las clulas infectadas por el mismo virus, hasta que

llega el momento en que culmina su funcin y ella tambin morir por apoptosis
celular.
Mecanismos generales de la citotoxicidad por linfocitos T CD8 citotxicos.

Interacciones directas entre la clula blanco y la clula citotxica.

Produccin de mediadores solubles que sirven de mensaje para que la
clula blanco produzca factores que induzcan su apoptosis celular como lo
son las citoquinas.
Presencia de grnulos que se encuentran en el linfocito T CD8 que sern
liberados para producir la apoptosis de la clula blanco.

Para que se den estos mecanismos tendremos una sealizacin directa mediada
por contacto directo entre la clula infectada y el linfocito T CD8 y una sealizacin
indirecta mediada por citoquinas.
Los grnulos poseen una serie de protenas las cuales se van a encargar de la
funcin citotxica del linfocito TCD8 por esto se les denomina protenas
citotxicas.
En la siguiente imagen podemos ver a un linfocito citotxico en accin. Primero
este linfocito se encuentra con su clula blanco en el tejido donde esta se
encuentre y la primera interaccin que se dar con la clula blanco es la
interaccin con las molculas de adhesin, despus de este acercamiento ocurre
el reconocimiento del antgeno. Al principio la interaccin con las molculas de
adhesin es una interaccin muy dbil que luego se establece y se hace ms
fuerte una vez que el linfocito ha reconocido a su antgeno. Posteriormente se
forma lo que se llama el conjugado en donde el linfocito T citotxico ya est unido
a la clula blanco, este linfocito pasa por un arreglo de su estructura en donde el
citoesqueleto se reorienta promoviendo as la liberacin de los grnulos a la clula
infectada.
Los linfocitos T CD8 poseen pocos grnulos comparados con los mastocitos o os
neutrfilos, debido a que estos linfocitos no necesitan altas cantidades de grnulos
porque ellos no provocaran la destruccin masiva de clulas en un determinado
momento, sino que irn unindose a cada clula infectada para eliminarla.
Una vez dada la unin y a reorientacin de citoesqueleto del linfocito T citotxico
ocurre la exocitosis de los grnulos, lo cual destruir por apoptosis a la clula
blanco. Posteriormente el linfocito T citotxico se unir a otra clula infectada con
el mismo virus y repetir el procedimiento hasta que culmine su funcin o su vida
media y el tambin muera por apoptosis celular.

Contenido de los grnulos citotxicos.

Las perforinas actan primero ya que ellas son las que abrirn los orificios en la
clula blanco para que las granzimas entren y provoquen apoptosis (las
granzimas solo pueden actuar dentro de la clula diana), y la granulisina acta de
manera similar a la granzima solo que ella provocara la despolarizacin de la
membrana mitocondrial de la clula blanco lo cual promover la liberacin del
citocromo C por parte de la clula blanco provocando as la apoptosis celular.

Entonces se produce la unin de las membrana de la clula banco y de la clula T

citotxica, luego ocurre la unin del granulo a la membrana plasmtica de la clula
T citotxica, posteriormente se produce la liberacin de los grnulos de perforina
que irn polimerizando la membrana de la clula blanco hasta formar los poros
que suelen ser muy abundantes.
Cuando ocurre la liberacin de los grnulos de perforina ellos se unen a los iones
de calcio de la clula banco lo que provocara que los poros se produzcan en la
clula banco y no en otro sitio u otra clula. Posteriormente una vez formados los
poros ocurre la liberacin de los grnulos de granzimas y granulisina.

La destruccion de la celula blanco puede darse por otros mecanismos apartes del
beso de la muerte por el linfocito T citotoxico, como mensajes o seales que
hacen se active el proceso de destruccion celular. Por ejemplo el linfocito T puede
expresar en su superficie diversos ligandos comos Fas ligando. Hay celulas que
pueden expresar el CD95 y al unirse a linfocitos T que tengan Fas ligando, la
union del CD95 y el Fas ligando provocara la activacion del proceso de
citotoxidad mediada por linfocitos T citotoxicos.

Tambien hay otros factores solubles que pueden provocar la apotosis celular
uniendose a sus receptores en la celua blanco, por ejemplo el TNF y las
linfotoxinas se unen a sus receptores y esto activara la apoptosis celular de la
celula infectada.
El Fas ligando de la celula T interactua con el CD95 de la celula banco una vez
que se da esta union se tiene una via final comun que es la via de las caspasas,
estas son enzimas que tienen un mecanismo de amplificacion en cascada, asi el
proceso de inducir la apoptosis celular sera bastante rapido debido a que la
amplificacion en cascada ocurre de manera muy rapida.
Los receptores de Fas o TNF, tienen una cola citoplasmatica que tienen la
capacidad de interactuar con otras proteinas solubles que se le unen en la medida
que el proceso avanza. Por lo tanto ocurre el cambio conformacional de los
receptores que provocara la union de las colas citoplasmaticas con moleculas
como FADD y TRADD que van a exhibir unos dominios conocidos como dominios
de muerte que son aquellos dominios caracteristicos para la activacion de las
caspasas que generaran una serie de cambios en el ADN de la celula infectada y
en las mitocondrias de la misma.
En el ADN hay fraccionamiento de las secciones de las cadenas del ADN que van
hacer empaquetadas en vesiculas, las mitocondrias u otras organelas seran
fraccionadas en su membrana.

Actividad citotoxica de las celulas NK.

La diferencia fundamental entre los linfocitos T citotoxicos y las celulas NK consiste
en el reconocimiento de las celulas infectadas. Las celulas NK poseen receptores
de patrones muy comunes en las celulas propias, ademas de estos receptores
poseen otros receptores que tiene la capacidad de reconocer moleculas del MHC
de clase I (en celulas que posean MHC de clase I no se producira efecto citotoxico
por parte de los NK). En ausencia de las moleculas del MHC de clase I en la celula
blanco los linfocitos NK recibiran la seal de activacion.
Primero se tiene un reconocimiento en donde la celula N podra activarse de
acuerdo a las seales que reciba. En el caso de que haya presencia de moleculas
del MHC de clase I daran una seal negativa a los linfocitos NK. Os receptores que
reconocer moleculas del MHC de clase I en celulas NK son receptores Kir los
cuales se les conoce como receptores de inhibicion de actividad citotoxica de
las celulas NK. Aparte del MHC de clase I hay multiples moleculas que tienen la
funcion de inhibir la funcion citotoxica de NK mediante otros rectores.
Fundamentalmente las celulas de MHC de clase I o de moleculas que causen
inhibicion de las celulas NK, provocaran la activacion de este linfocito.
La muerte celular o la apoptosis celular mediada por linfocitos T se da a traves de
mecanismo parecidos a los del linfocito T citotoxico, como la union del FasL con el
CD95. Lisis secreotora de granulos que son los mismos granulos del linfocito T
citotoxico (perforina, granulisina y granzima).
Al igual que hay moleculas que van a inhibir la activdad de los linfocitos N, hay otras
que van activar la actividad citotoxica de ellos.

Citotoxicidad mediada por anticuerpos.

Encontramos anticuerpos en la superficie de las celulas infectadas. Mediantes los
receptores Fc que los podemos encontrar en las celulas NK y otros leucocitos se
unen a las celulas recubiertas de anticuerpos, una vez que ocurre esta union del
receptor con la celula blanco se provocara la actividad citotoxica de la celula NK. El
receptor FcgammaRIIA es el receptor de la celula NK para anticuerpos, el cual
posee afinidad baja por IgG por lo que se unira las IgG encontradas en las
superficies celulares pero no a las IgG que circulan libre en el plasma, lo que quiere
decir que la IgG libre no activa a los linfocitos NK.

Cabe destacar que hay celulas como macrofagos o eosinofilos que expresan
receptores Fc pero estas celulas no actuaran de la misma manera que los linfocitos
NK, por ejemplo los macrofagos una vez reconocen una celula a traves de los
receptores Fc activaran su actividad fagocitica y no actividades citotoxicas.
En el proceso de inmunidad anti-viral en el organismo ocurren varios
procesos.
Tenemos el caso de una infeccion viral que dure 12 dias, una vez que empieza el
proceso de infeccion comienzan los signos de una respuesta del sistema
inmunitario como la liberacion de los IFN alfa y beta que son respuestas del sistema
que se mpizan a ver desde el momento que una celula vecina percibe que hay una
celula cercana infectada por un virus esta respuesta sera a nivel local. Despues
ocurre la migracion y activacion de las celulas NK y de manera mas tardia se
activan los linfocitos T citotoxicos, estas se activan de manera mas tardia porque
debemos recordar que para que se produzca su activacion el antigeno debe ser
procesado y luego presentado en forma de peptido al linfocito t CD8 por las
moleculas del MHC de clase I y tambien se necesita de la cooperacion de los
linfocitos T CD4 por la liberacion de IL-2.

Material realizado por:

Br. Ana Padilla
2015