Uso del Microscopio y Organizacin

Celular

Objetivos

1. Reconocer las partes mecnicas y pticas que componen un microscopio ptico.

2. Aprender los cuidados que se deben tener en el uso del microscopio.
3. Realizar montajes de preparacin hmeda y teida
4. Describir y comparar las clulas animales y vegetales.
5. Identificar la estructura de los organelos celulares y correlacionar con su funcin.

Introduccin

El da Mircoles 10 Febrero mis compaeros y yo realizamos la prctica de laboratorio #3

llamada Uso del Microscopio y Organizacin Celular. El ser humano posee el sentido
de la vista desarrollado. Sin embargo, no se pueden ver a simple vista cosas que midan
menos de una dcima de milmetro. Y muchos de los avances en qumica, biologa y
medicina no se hubieran logrado; si antes no se hubiera inventado el microscopio.
Es por esto, que el ptico holands Zacharas Janssen (1590-1600) invent el primer
microscopio, con una especie de tubo con lentes en sus extremos, de 8 cm de largo
soportado por tres delfines de bronce; se obtenan imgenes borrosas a causa de la mala
calidad de los lentes. Estos primeros microscopios aumentaban la imagen 200 veces. Este
invento se fue perfeccionando al pasar de los aos y con los aportes de los diferentes
investigadores como lo fueron el italiano Marcello Malpighi y Antonie van Leeuwenhoek;
pero en el Siglo XX llego el gran cambio con el microscopio electrnico que sustituyo la
luz por electrones, y las lentes por campos magnticos.
Respecto de los tipos conocidos de microscopios podemos mencionar los siguientes: ptico
(es el ms sencillo y est formado por dos lentes, l es utilizado por principiantes y con un
aceptable poder de resolucin), electrnico (de barrido especfico para observar las
superficies de las muestras a partir de un delgado haz electrnico y de transmisin, ilumina
la muestra con un haz de electrones y aumenta la imagen con lentes magnticas), digital
(utiliza conexin USB y produce imgenes hacia el monitor de la PC) y cuntico (es parte
del instrumental llamado manoscopio dado que con ellos es posible ver elementos medidos
en nanmetros y an menores, tambin llamado microscopio de barrido efecto tnel.
En la cual debamos observar, mediante un microscopio todas las fuentes que nos
proporcionaron posteriormente a eso tenamos que saber cmo utilizar adecuada y
cuidadosamente el uso del microscopio por medio de una introduccin dada por nuestra
Dra. Celia que imparte la clase de Procesos Biolgicos I. De ah pudimos realizar las
diferencias entre las clulas Eucariotas y Procariotas mediante la observacin directa de
diferentes tipos celulares. Despus de tomar nota podemos decir que nuestro laboratorio fue
terminado con xito.

Marco Terico

Con frecuencia la Ciencia y la Tcnica van de la mano, casi todos los avances cientficos
han sido el resultado de nuevos avances tcnicos, esto es particularmente ilustrativo en lo
referente al uso del microscopio. Al descubrimiento de la clula se lleg gracias a una serie
de descubrimientos cientficos que estuvieron ligados a la mejora de la calidad de los
microscopios. Uno de los pioneros en la construccin de estos aparatos fue Antn Van
Leeuwenhoek.

Cmo es un microscopio?
El microscopio es un aparato que aumenta la imagen de los objetos y nos permite observar
aquello que, en un principio, es invisible para el ojo humano. Fue utilizado por primera vez,
como tal, por el holands Antn van Leeuwenhoek el ao 1675. Tiene dos partes: una
ptica, para observar, y otra mecnica, que sostiene a la primera.

La parte ptica consta de:

Ocular, lente situada cerca del ojo del observador.
Objetivo, lente situada cerca del objeto que se quiere observar.
Diafragma, dispositivo para graduar la entrada de luz.
Condensador, dispositivo para concentrar la luz sobre el objeto.
Foco de luz o espejo, para iluminar el objeto.

La parte mecnica del microscopio consta de:

Columna, parte que sostiene el tubo ptico.
Tubo ptico, donde se encuentra ubicado el ocular.
Revlver, parte mvil que sostiene los objetivos.
Platina, que soporta el porta objetos.
Pi, sostiene todo el microscopio.
Tornillo macro-mtrico, que permite desplazamientos rpidos de las lentes.
Tornillo micromtrico, que permite desplazamientos suaves de las lentes.

Cmo se utiliza el microscopio?

El objeto que queremos observar se coloca en un vidrio transparente que llamamos
portaobjetos, y lo cubrimos con otro vidrio ms fino que llamamos cubre objetos. Una vez
conocido el funcionamiento de les partes del microscopio debes saber que el aumento que
nos ofrece un microscopio se obtiene con la combinacin del objetivo y del ocular. Por
ejemplo, si tenemos un ocular de 15x i un objetivo de 40, el aumento obtenido es de:
40 x 15 = 600 aumentos.
El enfoque del objeto se realiza con el tornillo macro mtrico, y despus se afina con el
tornillo micromtrico, hasta conseguir una visin perfecta. Una vez enfocado el objeto, se
pasa al objetivo inmediatamente superior, hasta obtener el aumento deseado. Cada vez que
cambies de objetivo cuida de no tocar la preparacin, el vidrio se puede romper. La
luminosidad para observar la muestra la puedes regular moviendo el diafragma hasta
conseguir la ms adecuada para cada caso. Como unidad de medida, en microscopia se
utiliza la micra (). Su equivalencia es:
1 = 1/1000 mm ; por tanto, 1 mm = 1000
Cmo se prepara una observacin microscpica?
Para observar perfectamente un objeto es necesario someterla a un proceso de preparacin
que destaque aquellas partes que nos interesen. Tambin, que conserve la muestra para
observaciones posteriores. Dos fases de este proceso son: la fijacin y la tincin.
Con la fijacin se consigue que la muestra que queremos observar no se mueva. Se suele
utilizar diferentes lquidos: alcohol etlico 70%, cido actico...; tambin se utilizan altas
temperaturas que ayudan a deshidratar la muestra. El objeto, una vez fijado, debe lavarse en
un medio apropiado como alcohol o agua.
La tincin: consiste en colorar la muestra que queremos observar para, as, destacar
aquellas partes que nos interesen observar. La gama de colorantes es muy variada, y cada
uno resalta una parte diferente del objeto. Los colorantes siguientes suelen utilizarse para
resaltar las partes de la clula:
- La estructura celular: azul de metileno, orcena actica.
- El citoplasma celular: eosina, fucsina cida, verde luz.
- El ncleo celular: fucsina bsica, verde metilo.

Organizacin Celular

Existen dos modelos de organizacin celular segn la complejidad de su estructura interna:

1. Clulas procariotas
2. Clulas eucariotas.
La diferencia fundamental entre ambas es la disposicin del ADN en su interior. En las
clulas procariotas el ADN se encuentra libre en el citoplasma (en una regin con lmites
poco definidos llamada nucleoide), en las clulas eucariotas se halla protegido en el
interior del ncleo, orgnulo limitado por la envoltura nuclear. Adems, los nicos
orgnulos presentes en todas las clulas procariotas son los ribosomas. Las clulas
eucariotas, por el contrario, poseen numerosos orgnulos celulares.
Las bacterias, organismos unicelulares, son los nicos seres formados por clulas
procariotas. Todos los dems seres vivos (algas, protozoos, hongos, plantas y animales)
estn constituidos por clulas eucariotas.

Materiales

1. Gabacha para laboratorio y Guantes Ltex.

2. Microscopio elctrico, lminas porta y cubreobjetos.

3. Goteros e hisopos estriles.

4. Solucin salina y fisiolgica

5. Agua estancada

6. Frotis de sangre y de bacteria

7. Aceite de inmersin, Papel lente, Papel toalla, Bistur y cajas de Petri

8. Pipeta pasteur, Colorante azul de metileno y lugol

9. Cebolla, papa y tomate.

Precauciones
1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con la mano izquierda
la base.
2. El cordn se deber enrollar sobre si mismo , no alrededor del cuerpo del microscopio.
3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin.
4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la observacin de todas
las muestras que se indiquen en la prctica, mientras no se observe, se disminuir la
intensidad luminosa.
5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier movimiento brusco.
6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas.
7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el objeto de menor
aumento.
8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los dedos.
9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina.
10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao suave o con un
papel higinico.
11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con cubreobjetos.

Procedimiento
1.

En la siguiente representacin grfica de un microscopio, reconozca y ubique cada

una de las siguientes partes:
Tubo, oculares, brazo y pie
Objetivos 4x,10x.40x y 100x
Tornillo macro mtricos y micromtrico
Tornillo carro mvil y tornillo condensador

2. Realice un montaje de Cloroplastos (tomate maduro) que se encuentra en su mesa

de trabajo de la siguiente manera:
Realice un pequeo corte de la pulpa de tomate. Colquelo en el portaobjeto y
resgurdelo con un cubreobjetos
Observe la preparacin a mediano (10x) y alto poder (40)

Identifique las estructuras que

presenta (como pared celular,
citoplasma y cromoplatos)

3. Realice un montaje hmedo de Hisopado bucal, de la siguiente manera:

Utilizando un hisopo de madera tome una pequea muestra raspado su
mejilla por dentro de la boca (mucosa oral)

Coloque una gota de agua destilada en el portaobjetos

que contiene la muestra.
Agregue azul de metileno, cubra la preparacin con
un cubre objetos. Deje r4eposar por 3 minutos.
Baje la intensidad de la luz, y observe a 10x y 40x

4. Realice un montaje de epidermis de cebolla, de la siguiente manera:

realice dos cortes delgados de la epidermis de la cebolla.
Coloque cada uno en el portaobjetos (cada uno por separado)
Agregue a uno una gota de azul de metileno y al otro una gota de lugol

Coloque sobre ellos un cubre

objetos y observe sl microscopio
iniciando por el objetivo de
menor aumento.

5. Realice el mismo procedimiento anterior, uno de los materiales biolgicos

solicitados (papa)

6. Observe con el objetivo de inmersin los extendidos que se le proporcionaran,

anote sus observaciones en los espacios mostrados a continuacin:

Frotis de Sangre

7.

Bacterias

Realice un montaje de
estancada

siguiente manera:
Coloque una gota
Coloque sobre ellos
iniciando por el

agua
de la

pequea de la muestra en un portaobjetos

un cubre objetos y observe al microscopio
objetivo de menor aumento.

Observaciones y
Resultados

1. Pudimos entender que todos los seres vivos estn formados por clulas y productos
celulares.
2. Las funciones de un ser vivo son el resultado de las clulas que lo componen
3. El Cromoplasto del Tomate maduro pudimos observar que tena un color rojizo.
4. En el Hisopado Bucal pudimos observar muy pocas bacterias e igual tono rojizo.
5. En el Azul de Metileno observamos qje tuvo un color Amarillento con Anaranjado.
6. La muestra de Lugol fue un tono Amarillento.
7. El raspado de Papa obtuvo colores Anaranjados en el granulo de almidn.
8. En la muestra de Agua Estancada no observamos ningn microorganismo.
9. En la muestra de Bacterias fue positiva la presencia de Bacterias con un tono
Morado.

Recomendaciones
1.-Quitar la funda protectora del microscopio.
2.-Enchufar/encender el microscopio.

3.-Colocar en primera instancia el objetivo de menor aumento para lograr un enfoque

correcto. Este paso en muy importante y se debe realizar siempre, ya que permitir la
observacin de una panormica del preparado y la ubicacin de reas de inters para su
anlisis posterior.
4.-Subir el condensador utilizando el tornillo correspondiente.
5.-Colocar el preparado sobre la platina, con el cubre-objetos hacia arriba y
Sujetndola con las pinzas/guas.
6.-Enfoque el preparado mirando a travs del ocular y lentamente mueva el
Tornillo macro mtrico.
7.-Recorra todo el preparado y haga sus observaciones. Elija el sitio donde debe
Seguir observando a mayor aumento.
8.-Cambie al objetivo de mediano aumento (40 X) y para lograr el enfoque siga moviendo
lentamente el tornillo macro mtrico. Al cambiar de objetivo, la imagen debe estar
ligeramente enfocada gracias a que la mayora de microscopios son para focales, es decir,
una vez logrado el primer enfoque, al pasar al objetivo de aumento inmediato superior la
imagen queda en un foco aproximado y solo se debe realizar un ajuste.
9.-Realice la observacin y haga sus anotaciones. Determine cul es la estructura que va a
observar a mayor aumento y colquela en el centro del campo.
10.-Cambie al objetivo de mayor aumento. Si realiz el enfoque de manera correcta con el
objetivo anterior, al colocar el objetivo de mayor aumento la imagen solo se debe enfocar
girando nica y lentamente el tornillo MICROMTRICO. NUNCA se debe utilizar el
tornillo macro mtrico con los objetivos de mayor aumento, pues al estar ste muy cerca del
preparado, se corre el riesgo de partirlo.

Conclusiones

Aprendimos el uso y manejo del microscopio de la forma ms adecuada, y

comprendimos lo esencial que es este para la Biologa.

Gracias al microscopio la microbiologa pudo salir a relucir y por ende la ciencia ha

podido surgir.

Comprendimos las diferencias entre la clula animal y vegetal. La clula animal es

redonda mientras q la vegetal es como una cadena de celdas. Haciendo nfasis en
los tipos de clulas estudiadas.

La parte ms importante del microscopio es el objetivo porque de este depende la

resolucin de la imagen.

Los tipos de clulas identificadas fueron clulas eucariotas.

Se debe aprovechar al mximo sus funciones ya que, este objeto de estudio nos
permite obtener diferentes aumentos de las muestras que se quieren analizar.

Bibliografa

Libro bioquimca de Harper

www.areaciencias.com/ El_Microscopio.htm
www.olympuslatinoamerica.com/.../ola_aboutolympus_microscopes_esp...