Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
DISOLUCION DE MUESTRAS
La mayora de los mtodos separativos y determinativos utilizados en el anlisis qumico, se llevan a cabo
en solucin, por lo que las sustancias slidas se deben disolver convenientemente para poner en solucin
los elementos de inters. Esta solucin por lo general es acuosa, sobre todo si se trata de materiales
inorgnicos. Por otra parte, el hecho de conocer la solubilidad de una muestra, parcial o total, es un dato
importante para dilucidar la naturaleza del material. La manera de poner un material en solucin depende
fundamentalmente de la naturaleza de la muestra y las caractersticas del componente a determinar.
Puede ocurrir que se desee determinar el contenido de Na en una muestra heterognea donde este
elemento est contenido solamente en una sal como el NaCl. Entonces, nos debe preocupar nicamente
la puesta en solucin del NaCl y en dicha solucin hacer la determinacin correspondiente. Las sustancias
empleadas habitualmente como disolventes incluyen: agua, cidos concentrados y diluidos, mezclas de
cidos (agua regia) y sustancias slidas (fundentes). Algunos autores denominan DISOLUCION de una
muestra, al proceso que utiliza un solvente lquido (generalmente acuoso) a temperaturas inferiores a los
100 C, para poner en solucin los elementos deseados.
El trmino disgregacin se utiliza para expresar una accin ms enrgica, tanto en relacin a la
temperatura y presin, como a la caracterstica de la sustancia empleada en tal caso. Habitualmente se
emplean en este procedimiento cidos fuertes concentrados, solos y en mezclas, a temperaturas por
encima de los 120 C, mientras que, en el caso de los slidos fundidos, las temperaturas pueden
sobrepasar los 1000C. Con ambas sustancias, las cantidades del reactivo empleadas son muy altas. En
este trmino se incluye tambin el tratamiento de la muestra con sustancias gaseosas, tal es el caso del
uso de Cl2. Tambin corresponde mencionar aqu el uso de sistemas cerrados bajo presin (bombas Parr)
donde se utilizan cidos como disgregantes a temperaturas moderadas y elevadas presiones
(aproximadamente entre 70 y100 atm y hasta 300 atm).
DISOLUCION
Un orden creciente de severidad de una tcnica de disolucin sera: agua, agua caliente, cidos diluidos,
cidos concentrados y agua regia. Cada sustancia empleada como disolvente se la debe utilizar primero
en fro y despus en caliente, y para cuando se trata de cidos, primero diluido y posteriormente
concentrado. Si se desea comprobar que se ha disuelto parte del material, se evaporan unas gotas de la
solucin obtenida. Si aparece algn depsito quiere decir entonces que efectivamente parte del material se
disolvi. Cuando la solucin se ha hecho con cidos concentrados, es necesario eliminar el exceso de
cido por cuanto puede ser perjudicial en el procedimiento posterior.
Procedimiento:
Una vez pesada la muestra se la coloca en un vaso de precipitado, el que debe cubrirse con un vidrio reloj
con el lado convexo hacia abajo. El solvente se agrega con mucho cuidado, utilizando para ello una varilla
de vidrio apoyada contra la pared del vaso a efectos de evitar salpicaduras.

Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
Ensayos de solubilidad:
1. Agua.
Al tratar de disolver una sustancia en agua y posteriormente calentar, adems de observar la
disolucin en s, se debe verificar el desprendimiento de gases tales como: O 2, H2S, HCl, HBr, HI,
H3N; puede haber, adems, un cambio de pH y formacin de un compuesto insoluble.
2. HCl.
Algunas sales (y compuestos naturales) desprenden gases cuando son tratados con HCl. Dichas
sales provienen de cidos dbiles, como es el caso del CaCO 3. Los voltiles producidos en estos
casos son CO2, H2S. El reconocimiento de carbonatos en muestras naturales se hace
habitualmente por reaccin con HCl, para observar el desprendimiento de CO 2. La disolucin con
HCl puede producir tambin compuestos insolubles: cloruros de Ag +, Pb2+, Hg2 2+. En general, el
HCl es un buen disolvente de los xidos.
3. HNO3.
El cido ntrico, adems de disolvente es un agente oxidante muy utilizado y en especial cuando
la muestra contiene materia orgnica. El HNO 3 es un buen disolvente de los metales por cuanto
se combina la accin oxidante y la de cido propiamente dicho.
Cu + 2 HNO3 + 2 H+ Cu2+ + 2 NO2 + 2 H2O
4. HCl - HNO3. (3 volmenes de HCl 12 M + 1 volumen de HNO3 15 M).
Esta mezcla conocida con el nombre de agua regia, es un importante disolvente de sulfuros
metlicos, Au y Pt. Es una combinacin de poder oxidante y complejante, al que se suma el de
cido propiamente dicho. En algunos casos se puede reemplazar la accin oxidante del HNO 3
por KClO3
DISGREGACION DE RESIDUOS INSOLUBLES EN ACIDOS
En algunos casos puede quedar un residuo insoluble despus de tratar una muestra con agua o
cido. En tal caso debe procederse a una disgregacin, lo que permitir una posterior disolucin
en agua o cidos. Hay sustancias a las que inicialmente deben disgregarse en forma enrgica
por cuanto el agua o los cidos no tienen efectos sobre ellas. Se incluyen aqu muchas muestras
de origen natural (xidos de Al, Fe, Cr, etc. y silicatos en general). La disgregacin es un
procedimiento por medio del cual, una muestra o residuo insoluble se pone en contacto con otras
sustancias slidas, por lo general mezclas salinas, o con cidos fuertes o sus mezclas en
condiciones muy enrgicas. En general, los disgregantes son sustancias muy reactivas a lo que
se le agrega la accin de la temperatura y en algunos casos de la presin. En las disgregaciones
que utilizan sustancias slidas como fundentes, la efectividad de la operacin se debe a las

Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
elevadas temperaturas de la misma, como tambin a la alta concentracin de reactivo. Los
fundentes alcalinos (Na2CO3, NaOH, Na2O2), se emplean para disgregar sustancias de naturaleza
cida (ej. silicatos). Los fundentes de naturaleza cida (KHSO 4) con sustancias alcalinas (Fe 2O3).
Para las sustancias anfteras, se emplean fundentes cidos y bsicos. Los fundentes oxidantes
(Na2O2) se emplean frente a sustancias oxidables (FeO).
PRINCIPALES AGENTES DISGREGANTES
1. DISGREGACIN ALCALINA

I Alcalina simple:
Disgregante: Na2CO3 o Na2CO3 - K2CO3 (1:1): Las sustancias que se disgregan en este
caso son: sulfatos alcalinos trreos (SrSO 4 - BaSO4), silicatos y SiO2, entre otros. Si se
emplea Na2CO3, la temperatura de fusin debe sobrepasar los 850 C (punto de fusin
del carbonato). En cambio, cuando se usa la mezcla Na 2CO3 - K2CO3, la temperatura de
fusin es 750 C, pues forman un eutctico con ese punto de fusin.
Disgregante: KOH NaOH: Estos hidrxidos pueden emplearse como slidos o
soluciones concentradas. Las sustancias que se disgregan son: halogenuros de Ag,
cianuros, silicatos minerales que no se pueden atacar con mezclas de cidos.

II Alcalino-oxidante:
Disgregante: Na2CO3 + KNO3 (5:2); Na2CO3 + Na2O2 (1:1) Con estas sustancias se
disgregan: sulfuros y arsenosulfuros, sales de Cr anhidras o calcinadas

2. DISGREGACION ACIDA

cidos concentrados:
Se emplean en este caso, H 2SO4, HClO4, HCl, HF, solos o mezclados con otros cidos.
Las sustancias que se pueden disgregar incluyen: mezclas inorgnicas y orgnicas,
fosfatos naturales, carbono, fsforo, fluoruros y fluorosilicatos. El H 2SO4 concentrado y
en caliente, solo o mezclado con otros cidos (HNO 3) se utiliza en la disgregacin de
sistemas con materia inorgnica y orgnica, como los materiales biolgicos, para la
determinacin de iones metlicos. El ataque se hace en matraces tipo Kjeldahl,
calentando directamente a la llama. Este procedimiento es el que se conoce
habitualmente como mineralizacin, y es utilizado siempre que hay materia orgnica en
cantidades importantes en la muestra. El HClO 4 tambin se usa en casos similares solo
que al contacto con la materia orgnica puede producir explosiones debido a la liberacin
violenta de gases, particularmente CO2. Por tal razn es comn usar inicialmente HNO 3

Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
o H2SO4, y una vez eliminado el reductor (materia orgnica), proseguir el ataque con
HClO4.
MATERIALES EMPLEADOS.
Cuando se realizan disgregaciones utilizando cidos concentrados en caliente, los
elementos apropiados son:
Vidrio: si entre los cidos no se encuentra el HF (recordar que este cido ataca el
vidrio). La temperatura con este material no debe superar los 500 C (vidrio prex).
Tefln: Utilizado en sistema abierto (vaso) o cerrado (tipo bomba Parr). Este material es
muy importante cuando la disgregacin con cidos emplea HF, ya que, a diferencia del
vidrio, no es atacado. La temperatura mxima a que se puede usar el tefln es de 250
C, por encima de la cual el material se descompone. Las bombas tipo Parr, son vasos
de tefln con tapa hermtica, conjunto al que se le coloca una cubierta de acero
inoxidable que posee un cierre a rosca. Las disgregaciones se realizan en medio cido
con HF y se utiliza fundamentalmente cuando se desea disolver silicatos. Admite
temperaturas de 120C, aunque hay algunas ms robustas que toleran hasta 250 C. No
se deben incluir entre los cidos aquellos que reaccionen con el tefln, cual es el caso
del HClO4.
Platino: Se puede utilizar con cualquier mezcla cida excepto el agua regia que lo ataca.
Entre los crisoles empleados para las fusiones encontramos: porcelana y cuarzo:
Disgregaciones con fundentes alcalinos, sean estos oxidantes, reductores o sulfurantes.
Las disgregaciones cidas con KHSO 4 o con cidos concentrados incluyendo el uso de
HF, se llevan a cabo tambin en crisoles o cpsulas de Pt. Por su importancia en el
anlisis y elevado precio, los crisoles de Pt deben utilizarse con el debido cuidado
DIGESTION DE MUESTRAS BIOLOGICAS
La cantidad de minerales en los alimentos se determinan mediante procedimientos
analticos sobre las cenizas de las muestras incineradas. El proceso de incineracin
destruye los compuestos orgnicos y libera los minerales existentes. Estos mtodos no
incluyen el contenido de nitrgeno de las protenas, ni otros elementos que se convierten
en gases cuando se incineran los alimentos. Los elementos vestigio que se consideran
clnicamente relevantes en materiales biolgicos pueden clasificarse en tres grandes
grupos:

Elementos vestigio esenciales: Ca, Cr, Cu, F, Fe, I, Mn, Mo, Se, Si, Sn, V y Zn.
Elementos vestigio no-esenciales usados teraputicamente: Al, Au, B, Bi, Co, Ge, Li y Pt.
Elementos vestigio txicos y no-esenciales: Ag, As, Ba, Be, Cd, Hg, Ni, Pb, Sb, Te y Tl.

Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
En el caso particular del cuerpo humano, los elementos que juegan un rol metablico
tambin pueden dividirse en varios grupos:

Elementos presentes en grandes concentraciones: Na, K, Ca ,Mg.

Elementos presentes en el nivel de ppm o ms bajos, que actan como carriers de
enzimas: Zn, Cu, Ni, Mn, Se, entre otros.
Elementos presentes en concentraciones variables y que se comportan como
contaminantes: Pb, Cd y Hg.
Elementos introducidos como parte de un tratamiento.

Los elementos en sistemas biolgicos estn presentes en forma ligada a un compuesto orgnico, el que
est en exceso en forma apreciable. La eliminacin de materia orgnica y mineralizacin de estos
elementos no solo es deseable, sino que forma parte de una etapa crucial que precede a las de
separacin y medida analtica. Los constituyentes orgnicos por lo general interfieren tanto en la
separacin como en la medida. Los elementos vestigio son eluidos desde la matriz orgnica hacia una
solucin acuosa o son separados por volatilizacin de la materia orgnica. Esta ltima etapa, usualmente
denominada calcinacin (ashing) comprende la eliminacin de la materia orgnica por conversin a una
forma gaseosa. El residuo inorgnico contiene los elementos de inters. Los mtodos ms importantes
para transformar muestras biolgicas como tejidos y fluidos adaptables a los sistemas de nebulizacin y
por ende apropiadas para tcnicas instrumentales como espectrometras atmicas, se basan
especialmente en la destruccin de la materia orgnica la que puede ser mediante procedimientos por va
seca o hmeda. En cualquier caso, el mtodo empleado debe hacerlo evitando todo tipo de
contaminacin, reteniendo los analitos en el residuo inorgnico y extrayendo los componentes orgnicos
de la muestra.
PROCEDIMIENTOS POR VIA SECA
Este procedimiento se lleva a cabo segn dos procedimientos:

Elevadas temperaturas: Se realiza en un horno mufla y en varias etapas. La primera consiste en

un secado a temperaturas que oscilan entre 105 y 150 C, luego una precalcinacin entre 200 y
400 C para finalmente proceder al calcinado principal entre 450 y 550 C. Si no se desean
determinar elementos voltiles, el calcinado principal se puede realizar a temperaturas prximas a
los 800 C. Se debe poner especial cuidado en no elevar la temperatura en demasa puesto que
se pueden formar compuestos refractarios difciles de disolver posteriormente por los mtodos
tradicionales. Las cenizas resultantes se pueden disolver en cidos o mezclas de ellos. Se
emplean habitualmente HCl, HNO3 y H2SO4. Cuando la muestra tiene cantidades importantes de
fosfatos y uratos, es recomendable el empleo final de agua regia como disolvente. La principal
ventaja de este mtodo es su simplicidad y las desventajas estn relacionadas con las prdidas
por volatilizacin, largos tiempos de calcinacin y contaminacin causada por las impurezas
introducidas por el aire y el container empleado para la calcinacin como es el caso del vidriado
con xido de Ti y Zn en los crisoles de porcelana.

Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
Bajas temperaturas: Las temperaturas empleadas son de 100 a 200 C y se calcinan entre 1 y 5 g
de muestra en una atmsfera de oxgeno generada por un campo magntico de alta frecuencia.
Es til para aquellos casos en que se desea evitar prdidas de elementos voltiles como Pb y Cd.

PROCEDIMIENTOS POR VIA HUMEDA

Estos procedimientos incluyen la descomposicin de muestras empleando cidos oxidantes, solos o en
mezclas, en sistemas abiertos a presin atmosfrica o en sistemas cerrados bajo presin. Esto ltimo se
hace con el fin de emplear temperaturas mayores que aquellas correspondientes al punto de ebullicin de
los reactivos y originar presiones elevadas que aceleran el proceso. Se suelen emplear, adems, agentes
oxidantes auxiliares, tal es el caso del perxido de hidrgeno, los que destruyen la materia orgnica
transformado la muestra en un residuo compuesto por sales que son fcilmente solubles en cidos
diluidos.

Sistemas Abiertos: En estos sistemas se emplean los vasos comunes tipo erlenmeyer y Kjeldahl,
con o sin condensadores de reflujo. Cuando la muestra posea elementos voltiles a determinar, es
conveniente el empleo de frascos cuello largo a fin de evitar prdidas. El H 2O2 es un reactivo de
fuerte poder oxidante que se lo emplea comnmente en combinacin con el H 2SO4.
Sistemas cerrados: Los cidos utilizados se pueden calentar a temperaturas mayores
incrementando con ello el poder oxidante. Sin embargo, es limitado por la cantidad de muestra
que puede utilizarse, puesto que hay una liberacin importante de gases con un incremento de la
presin. La cantidad de muestra que se emplea habitualmente es 500 mg. En algunos casos se
puede hacer una pre-digestin en la misma bomba con lo que se produce la destruccin de gran
parte del material orgnico. Esto permite a su vez incrementar la cantidad de muestra. Un aspecto
importante de la digestin en sistemas cerrados es que se pueden determinar aquellos elementos
voltiles, los que bajo otras circunstancias pueden perderse. Esto se aplica en especial a
elementos formadores de hidruros como As, Sb, Se y Te.

PROCEDIMIENTO
Un procedimiento por va hmeda adecuado para descomposicin de muestras biolgicas consiste en la
colocacin de la muestra en un tubo de digestin (42 mm de dimetro y 300 mm de alto) o en un matraz
tipo Kjeldahl y agregar 50 mL de cido ntrico concentrado. Se coloca un tubo refrigerante de aire y se
calienta a 60 C durante 12 horas. Se eleva luego la temperatura hasta 120 C durante una hora y
finalmente a 140C pero sin el refrigerante para evaporar hasta unos 10 mL aproximadamente. Se deja
enfriar y se agrega con mucho cuidado cido perclrico calentando posteriormente hasta 220 C durante
media hora y con el refrigerante colocado. Finalmente se retira el refrigerante y se evapora hasta unos 2
ml aproximadamente. El residuo final se lleva a volumen con agua destilada. El tiempo total empleado en
esta digestin lleva 18 horas.
El periodo de digestin y el aumento progresivo del poder oxidante, combinando cidos y temperaturas,
evita la formacin de compuestos voltiles (especialmente de As, Se y Sb) al mismo tiempo nos da las
condiciones enrgicas para romper los rganos compuestos ms resistentes. El nico elemento que se
pierde con este mtodo de digestin es el Hg.

Monografia: Tratamiento y disolucin de muestras.

Febrero 23 de 2016
Maicoll Arturo Vanegas Lpez (mavanegasl@unal.edu.co)
Mara Paula Bastidas Jaramillo (mpbastidas@unal.edu.co)
DIGESTIN POR MICROONDAS
En el espectro electromagntico la radiacin comprendida entre 300 y 300.000 MHz corresponde a la
energa de microondas. De estas frecuencias la ms empleada para microondas cientfico e industrial es
2450 MHz.
La importancia de esta tcnica es que se logran temperaturas y presiones elevadas en periodos de tiempo
muy cortos. Se conocen dos tipos de equipos: industriales y domsticos. Los primeros pueden ser
totalmente automticos, mientras que en los segundos no por lo que se transforman en equipos de mucho
cuidado por los accidentes. Los reactores empleados se construyen de materiales transparentes a las
microondas como PTFE, policarbonato y polietileno.
Las ventajas de sta tcnica pueden resumirse as:
1. Es muy eficiente.
2. Es muy escasa la prdida de voltiles.
3. Se reducen considerablemente los tiempos.
4. Permite la automatizacin.
Dentro de las desventajas podemos citar:
1. Requiere equipo especial (incluidos los reactores).
2. Es un sistema riesgoso.
3. Se procesan pocas muestras.
4. Se requiere personal experimentado.
Un procedimiento tpico para disgregacin de muestras orgnicas con microondas es: 0,250 g de muestra
ms 1 mL de H2O2 y 3 mL de HNO3 concentrado se deja en reposo por 3 horas. Se expone a las
microondas a mitad de su potencia por unos pocos minutos (2 a 5 minutos). Se destapa el reactor para
liberar presin (por seguridad) y se procede a entregar ms energa por microondas en periodos de 2
minutos hasta disolucin total.