Fundamentos laboratoriais

Fundamentos laboratoriais prof Liane Sales Silva
Noes de Biossegurana laboratorial

1. Conceito de biossegurana
A biossegurana um conjunto de medidas necessrias para a manipulao adequada de agentes biolgicos,
qumicos, genticos, fsicos (elementos radioativos, eletricidade, equipamentos quentes ou de presso, instrumentos
de corte ou pontiagudos, vidrarias) dentre outros, para prevenir a ocorrncia de acidentes e conseqentemente reduzir
os riscos inerentes s atividades desenvolvidas, bem como proteger a comunidade e o ambiente e os experimentos.
2. Equipamentos de proteo individual
So quaisquer meios ou dispositivos destinados a ser utilizados por uma pessoa contra possveis riscos
ameaadores da sua sade ou segurana durante o exerccio de uma determinada atividade.
2.1 Tipos de EPIs utilizados no laboratrio clnico
Luvas: As luvas protegem de sujidade grosseira. Elas devem ser usadas em procedimentos que envolvam sangue,
fluidos corporais, secrees, excrees (exceto suor), membranas mucosas, pele no ntegra e durante a manipulao
de artigos contaminados. As luvas devem ser trocadas aps contato com material biolgico, entre as tarefas e
procedimentos num mesmo paciente, pois podem conter uma alta concentrao de microrganismos. Remova as luvas
logo aps us-las, antes de tocar em artigos e superfcies sem material biolgico e antes de atender outro paciente,
evitando a disperso de microrganismos ou material biolgico aderido nas luvas. Lave as mos imediatamente aps a
retirada das luvas para evitar a transferncia de microrganismos a outros pacientes e materiais, pois h repasse de
germes para as mos mesmo com o uso de luvas.
Luvas de procedimento: so de ltex, no estreis, protegem o manipulador
Luvas domsticas: so de borracha e indicadas para limpeza de materiais e de ambiente
Luvas estreis: so utilizadas para procedimentos invasivos e asspticos (evitar a contaminao por microrganismos),
protegem o operador e o paciente.
Mscaras: servem para proteger a mucosa do nariz e da boca contra respingos gerada por espirro, fala ou tosse de
pacientes ou durante a realizao de procedimentos laboratoriais. So de uso nico, devem ser trocadas quando
midas ou submetidas a respingos visveis.
culos: protegem a mucosa dos olhos contra respingos, aerossis e da irritao provocada por substancias volteis
(lcool, acetona, reagentes). So reutilizveis, feito de material plstico
Gorro: utilizado para proteger as amostras de contaminao, para no cair fios de cabelo na amostra, para impedir a
impregnao de algum odor nos cabelos. Tambm so teis durante a realizao de procedimentos nos quais so
produzidos aerossis, projeo de partculas e proteo dos pacientes durante procedimentos cirrgicos. So
descartveis.
Protetor facial: utilizado no lugar dos culos e da mscara, protege toda a face. utilzado em procedimentos onde
h a produo de muitos aerossis e de partculas solidas, de fascas, etc.
Avental ou jaleco: O avental (limpo, no estril) serve para proteger a pele e prevenir sujidade na roupa durante
procedimentos que tenham probabilidade de gerar respingos ou contato de sangue, fluidos corporais, secrees ou
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excrees. O avental ser selecionado de acordo com a atividade e quantidade de fluido encontrado (plstico ou
tecido). O avental de plstico est indicado para lavagem de materiais em reas de expurgo. O avental sujo ser
removido aps o descarte das luvas e as mos devem ser lavadas para evitar a transferncia de microrganismos para
outros pacientes ou ambiente.
Calados: fechados e impermeveis, para impedir a penetrao de sujidade ou de amostras derramadas no cho,
vidros quebrados, etc.
3. Equipamentos de proteo coletiva

So utilizados na proteo coletiva de trabalhadores expostos ao risco
3.1 Tipos de EPCs
Dispositivos de pipetagem Nunca usar a boca para pipetar, porque alm do risco de aspirao, torna mais fcil a
inalao de aerossis. Utilizar um dos vrios tipos de bulbos, pra ou pipetadores.
Extintores de incndios: equipamento que combate o fogo colocado no corredor do laboratrio.
Lava olhos: tem o objetivo de livrar os olhos de contaminantes
Chuveiro de segurana: so aqueles especificamente projetados para fornecer um fluxo de gua abundante e de
baixa presso, suficiente para remover do corpo humano qualquer tipo de contaminante ou calor, sem causar
agravamento de possveis leses.
Sada de emergncia: facilitar o acesso para fora do laboratrio no caso de incndios ou acidente com gazes
explosivos ou txicos.
Capelas biolgicas: Equipamento imprescindvel onde se manuseia produtos qumicos ou particulados, amostras
biolgicas que podem apresentar microorganismos infectantes. As capelas ajudam a proteger o operador, a amostra e
o meio ambiente, pois possuem filtros que purificam o ar que lanado para o interior ou para fora do laboratrio.
Descartes para materiais perfurocortantes: devem ter paredes firmes e rgidas, geralmente so feitos de papelo,
com revestimento interno que no permita vazamento ou perfuraes. Aps o uso, so recolhidos e devem ser
incinerados para destruir os matriais contaminantes.
4. Cuidados com materiais perfuro-cortantes:
Os matrias perfurocortantes so seringas, agulhas, escalpes, ampolas, vidros de um modo em geral ou,
qualquer material pontiagudo ou que contenham fios de corte capazes de causar perfuraes ou cortes.
Recomendaes especificas devem ser seguidas durante a realizao de procedimentos que envolvam a
manipulao de material perfurocortante.
a) Mxima ateno durante a realizao dos procedimentos;
b) Jamais utilizar os dedos como anteparo durante a realizao de procedimentos que envolvam materiais
perfurocortantes;
c) As agulhas no devem ser reencapadas, entortadas, quebradas ou retiradas da seringa com as mos;
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d) No utilizar agulhas para fixar papis;

e) Todo material perfuro-cortante (agulhas, seringas, scalp, laminas de bisturi, vidrarias, entre outros), mesmo que
esterilizados, devem ser desprezados em recipientes resistentes perfurao e com tampa;
f) Os recipientes especficos para descarte de materiais no devem ser preenchidos acima do limite de 2/3 de sua
capacidade total e devem ser colocados sempre prximos do local onde realizado o procedimento.
Figura 1 chuveiro de segurana e lava-olhos
As Boas Prticas de Laboratrio exigem que se respeitem as seguintes diretrizes bsicas ao utilizar os laboratrios da
rea da Sade:
1. Utilizar proteo apropriada para os olhos quando necessrio.

2. Usar outros equipamentos de proteo conforme for necessrio.
3. No usar cabelo solto, quando for longo.
4. Jamais pipetar com a boca solventes ou reagentes volteis, txicos ou que apresentem qualquer risco para a
segurana. Usar sempre um pipetador.
5. Evitar a exposio a gases, vapores e aerossis. Utilizar sempre uma capela ou fluxo para manusear estes
materiais.
6. Lavar as mos ao final dos procedimentos de laboratrio e remover todo o equipamento de proteo incluindo
luvas e aventais.
7. Nunca consumir alimentos e bebidas no laboratrio. A separao de alimentos e bebidas dos locais contendo
materiais txicos, de risco ou potencialmente contaminados pode minimizar os riscos de ingesto acidental
desses materiais. Consumir alimentos e bebidas apenas nas reas designadas para esta finalidade.
8. No guardar alimentos e utenslios utilizados para a alimentao nos laboratrios onde se manuseiam
materiais txicos e perigosos.
9. No utilizar os fornos de micro-ondas ou as estufas dos laboratrios para aquecer alimentos.
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10. A colocao ou retirada de lentes de contato, a aplicao de cosmticos ou escovar os dentes no laboratrio
pode transferir material de risco para os olhos ou boca. Estes procedimentos devem ser realizados fora do
laboratrio com as mos limpas.
11. Aventais e luvas utilizados no laboratrio que possam estar contaminados com materiais txicos ou
patognicos no devem ser utilizados nas reas de caf, salas de aula ou salas de reunies.
12. Antes de sair do laboratrio, lavar sempre as mos para minimizar os riscos de contaminaes pessoais e em
outras reas.
13. No laboratrio sempre devem existir locais para a lavagem das mos com sabonete ou detergente apropriado
e toalhas de papel descartveis.
14.Limpeza da Bancada de Trabalho
a) Deve ser feita com lcool a 70% no incio e no trmino das atividades ou
sempre que houver necessidade;
b) Quando houver derramamento de material biolgico, limpar imediatamente
com soluo de hipoclorito a 2% em preparao diria.
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Procedimentos para controle de microorganismos no laboratrio

Conceitos
Limpeza: Consiste na remoo da sujidade da superfcie de artigos e equipamentos, atravs da ao mecnica
utilizando gua e detergente, com posterior enxge e secagem. A grande carga microbiana est concentrada na
matria orgnica, que conseqentemente, ser removida de uma superfcie durante a remoo da sujidade. A limpeza
deve ser sempre realizada como primeira etapa de desinfeco ou esterilizao, pois vai garantir a qualidade destes
processos. O material orgnico aderido abriga os micrbios. Ao realizarmos a limpeza de artigos estamos expostos
fluidos contaminados e produtos qumicos, sendo imprescindvel a utilizao de equipamentos de proteo como
culos, mscara cirrgica, avental plstico, braadeiras plsticas e luvas de borracha.
Produtos utilizados para limpeza
Detergente liquido e neutro
Modo de uso em superfcies: aplicar puro em um pano mido ou escova, ou diludo em gua (soluo detergente).
Aplicar pano umedecido em gua para o enxge.
Desinfeco: o processo de destruio de microrganismos como bactrias na forma vegetativa (no esporulada),
fungos, vrus e protozorios. Este processo no destri esporos bacterianos.
Produtos utilizados:
Cloro e compostos clorados: o composto clorado de uso mais comum o hipoclorito de sdio.
Por ser voltil, sua troca indicada a cada 24 horas. A concentrao recomendada de 1% em dez minutos de contato
ou 0,5% com trinta minutos de contato para desinfeco de nvel mdio.
Modo de uso: a soluo deve ser solicitada na concentrao indicada. Se for usado alvejante comercial, considerar a
concentrao de 2% e preparar a soluo com uma parte de alvejante e igual parte de gua para obter 1% ou uma
parte de alvejante para trs de gua obtendo 0,5%.
lcool 70%: fechar o frasco imediatamente aps o uso para evitar a volatizao.
Modo de uso:
Em imerso: colocar em recipiente plstico com tampa. Por ser voltil, sua troca indicada a cada 24 horas. Seu
tempo de contato mnimo de 10 minutos. Deixar escorrer e secar espontaneamente dispensa o enxge. Indicado
para artigos metlicos como pinas, estantes de laminas, tesouras e materiais de odontologia. No indicado para
materiais de borracha, ltex, silicone e acrlico pela sua possibilidade de ressecar e opacificar estes materiais.
Em superfcies: aplic-lo diretamente com compressas, friccionando at sua evaporao repetindo por mais duas
vezes. A superfcie deve estar limpa e seca, pois inativado na presena de matria orgnica. Indicado para
equipamentos como refletores de luz, mesas ginecolgicas, mobilirio de atendimento direto ao paciente.
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Esterilizao por processos fsicos
A esterilizao por processos fsicos pode ser atravs de calor mido, calor seco ou radiao. A esterilizao por
radiao tem sido utilizada em nvel industrial, para artigos mdicos-hospitalares. Ela permite uma esterilizao a baixa
temperatura, mas um mtodo de alto custo. Para materiais que resistam a altas temperaturas a esterilizao por calor
o mtodo de escolha, pois no forma produtos txicos, seguro e de baixo custo.
Esterilizao por Calor mido: o equipamento utilizado autoclave. o mtodo de 1 escolha tratando-se de
esterilizao por calor. Esta preferncia se justifica por preservar a estrutura dos instrumentos metlicos e de corte, por
permitir a esterilizao de tecidos, vidros e lquidos, desde que observados diferentes tempos de exposio e
invlucros. O mecanismo de ao biocida feito pela transferncia do calor latente do vapor para os artigos, e este
calor age coagulando protenas celulares e inativando os microrganismos. Os artigos termossensveis no devem
sofrer autoclavagem, pois a temperatura mnima do processo de 121 C, bem como os leos que no permitem a
penetrao do vapor.
Etapas para processamento:
Invlucros: aps limpeza, secagem e separao, os artigos devero ser acondicionados para serem submetidos ao
ciclo de esterilizao. Os instrumentos articulados, tipo tesoura, porta-agulha, devem ser embalados abertos no interior
do pacote. Como invlucros para este processo, existem: papel grau cirrgico, filme plstico de polipropileno, algodo
cru duplo com 56 fios, papel crepado, caixas metlicas forradas internamente com campos simples e com orifcios para
permitir a entrada do vapor.
Os invlucros devero ser identificados quanto ao contedo, e todos devero ter escrito a data de validade da
esterilizao. Todas as embalagens devero portar um pedao de fita de indicao qumica externa para diferenciar e
certificar que os pacotes passaram pelo processo.
Os invlucros de papel crepado, papel kraft ou tecido devero obedecer a um mtodo de dobradura para possibilitar
abertura assptica do pacote.
Colocao da carga na autoclave: os artigos embalados em papel, dos diferentes tipos, e artigos embalados em
tecido no podem ter contato entre si, pois retm umidade. Se tiverem de ser colocados na mesma carga, devem ser
colocados em prateleiras diferentes da autoclave. Quanto a posio na prateleira, os invlucros devem ficar dispostos
no sentido vertical, e nunca camada sobre camada na mesma prateleira, para permitir a exausto do ar e a circulao
do vapor no interior de cada pacote. As cargas de tecidos (gazes e campos) devem ser processados em cargas
diferentes dos metais, caso contrrio os txteis devem ficar na prateleira superior para facilitar a penetrao do calor.
Os pacotes no podem encostar nas paredes internas da cmara, assim como a carga no pode ultrapassar 70% da
capacidade interna. A fita indicadora qumica de processo dever ser colocada em todos os pacotes ou caixas em local
visvel, em pequenos pedaos
Estocagem e validade do material esterilizado: para papel Kraft a durabilidade do processo de 7 dias de estocagem.
Esterilizao por Calor Seco: o equipamento utilizado o Forno de Pasteur, usualmente conhecido como estufa. A
esterilizao gerada atravs do aquecimento e irradiao do calor, que menos penetrante e uniforme que o calor
mido. Desta forma requer um tempo de exposio mais prolongado e maiores temperaturas, sendo inadequado para
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tecidos, plsticos, borrachas e papel. Este processo mais indicado para vidros, metais, ps (talco), ceras e lquidos
no aquosos ( vaselina, parafina e bases de pomadas).
Etapas para processamento
Invlucros: aps limpeza, secagem e separao, os artigos devero ser acondicionados para serem submetidos ao
ciclo de esterilizao. Os instrumentos articulados, tipo tesoura, porta-agulha, devem ser acondicionados abertos no
interior da caixa metlica. Como invlucros para este processo, existem: caixas metlicas, vidros temperados (tubo de
ensaio, placas de Petri) e lminas de papel alumnio. Utilizando-se caixas metlicas, estas devem ser fechadas com
tampa. Os artigos contidos no interior das caixas devem ter um limite de volume que proporcione a circulao do calor.
Preferentemente as caixas devem conter kits de instrumentos a serem usados integralmente em cada procedimento.
Se utilizadas caixas maiores, contendo grande volume de artigos, recomenda-se envolver cada instrumento ou kits em
papel alumnio para reduzir a possibilidade de contaminao na retirada dos instrumentos. Neste momento deve-se ter
o cuidado de evitar o rompimento do papel alumnio. Os ps e lquidos devem ser colocados em vidros fechados com
alumnio. Todos os invlucros devero conter um pedao de fita indicadora qumica do processo de esterilizao, bem
como a indicao de validade e o nome do kit ou instrumento.
Colocao da carga na estufa: os principais pontos a observar so a no sobrecarga de materiais, deixando espao
suficiente entre eles para haver uma adequada circulao de calor. No permitido o empilhamento de caixas em cada
prateleira da estufa.
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Controle de qualidade no laboratrio clnico

O resultado de um exame laboratorial confivel e de qualidade depende do preparo do paciente, da colheita do material
e do manuseio e armazenamento da amostra colhida.
O controle de qualidade o conjunto de atividades planejadas e sistemticas do laboratrio para garantir que os seus
servios atendam ao requisito de qualidade.
A garantia de qualidade engloba os processos pr-analticos, analticos e ps-analticos. Portanto, o seu objetivo
assegurar resultados laboratoriais corretos que satisfaam as necessidades do cliente ou paciente.
Para se obter a qualidade nos exames realizados, preciso que se faa uma padronizao dos processos envolvidos
desde a solicitao mdica dos exames at a liberao do laudo.
Portanto, a padronizao em laboratrio clinico tem a finalidade de prevenir, detectar, identificar e corrigir erros ou
variaes que possam ocorrer em todas as fases da realizao dos testes.
Padronizao dos processos pr-analticos:

Os fatores pr-analticos so difceis de monitorar e controlar porque grande parte deles pode ocorrer fora do
laboratrio.
1. Identificao: muito importante que o paciente, a solicitao de exames e as amostra sejam
devidamente identificadas: nome do paciente,data e hora da coleta,tipo de material (soro, plasma,
sangue total, urina, fezes, secreo vaginal, escarro, etc.
2.
Preparao do paciente: todos os profissionais do laboratrio devem saber da importncia da correta

preparao do paciente e saber como ela pode afetar os resultados. Na preparao dos pacientes
para a realizao do exame deve-se observar alguns fatores como: necessidade de jejum, estado
nutricional, uso de lcool; estresse, fumo, exerccios fsicos, postura (sentado, deitado, em p).
3. Coleta da amostra: na coleta da amostra importante que os profissionais tenham conhecimentos

necessrios dos erros e variaes que podem ocorrer antes, durante e aps a obteno da mesma.
Variaes devido obteno, preparao e armazenamento da amostra: identificao incorreta do
paciente, troca do material, contaminao da amostra, erro por hemlise, estase prolongada, homogeneizao,
centrifugao, conservao inadequada, erro no emprego de anticoagulantes, etc.
Erros potenciais na etapa pr-analtica
Erros na solicitao dos exames: escrita ilegvel, interpretao errada do exame, erro na identificao do
paciente, falta de orientao por parte do mdico ou do laboratrio para determinados exames
Erros na coleta da amostra:
Identificao errada do paciente, troca das amostras
Paciente no preparado corretamente: falta de jejum, horrio da coleta incorreto, tempo de coleta de
amostra de urina incorreto
Uso de anticoagulante errado
Volume da amostra inadequado para o exame
Hemlise e lipemia intensas
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Estase prolongada
Transporte e armazenamento da amostra incorreto
Contaminao de tubos, frascos e tampas.
Padronizao dos processos analticos

As diversas variveis analticas na realizao de um exame laboratorial devem ser muito bem controladas para
assegurar que os resultados sejam precisos e exatos.
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Confiabilidade :preciso, exatido , sensibilidade, especificidade, linearidade

Praticidade: volume e tipo de amostra, durao do ensaio, necessidade de equipamentos, segurana pessoal
Outras variveis: qualidade da gua, limpeza de vidrarias
Calibrao dos dispositivos de medio e ensaio: pipetas e vidrarias, equipamentos
Erros potenciais na etapa analtica
Troca de amostras
Erros de pipetagem; pipetas no aferidas, molhadas, volume incorreto
Vidraria e recipientes mal lavados
Presena de interferncias das amostras: medicamentos, lipemia, hemlise, ictercia
Temperatura ambiente e da reao no adequadas
Erros nos clculos das diluies, nas unidades, na concentrao
Padronizao na etapa ps-analtica

Os processos ps-analticos consistem nas etapas executadas aps a realizao do exame.
Incluem:
Clculo dos resultados

Analise de consistncia dos resultados
Liberao dos laudos
Armazenamento de material ou amostra do paciente
Transmisso e arquivamento dos resultados
Consultoria tcnica
A direo do laboratrio responsvel por assegurar que os laudos sejam entregues ao usurio adequado
Os laudos devem ser legveis e sem rasuras de transcrio
Os dados dos laudos so confidenciais, devendo-se respeitar a privacidade do paciente e manter sigilo sobre os
resultados
Os resultados devem ser liberados em prazos especificados e expressos preferencialmente nas unidade do sistema
internacional de medidas (mg/ l; g/l; mg/cm ; etc.).
No laboratrio devem permanecer copias ou arquivos de laudos para posterior recuperao.
Contedo de um laudo
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1- Do laboratrio clinico: nome, endereo completo, nmero do registro no conselho profissional, responsvel
tcnico com seu registro no conselho profissional.
2- Do paciente: nome, nmero de registro do laboratrio
3- Do medico solicitante: nome, numero do registro do conselho profissional
4- Do material ou amostra do paciente: tipo, data, hora da coleta ou do recebimento, quando aplicvel
5- Do resultado do exame: nome do analito, resultado, unidade, nome do mtodo, intervalos de referencia, data
da liberao
6- Do responsvel tcnico: nome, nmero do registro profissional, assinatura
Erros potenciais na etapa ps-analtica
Identificao errada do paciente

Transcrio de dados incorreta
Resultado ilegvel
Unidades erradas
No identificao de substancias interferentes
Erros na interpretao dos resultados
Acondicionamento para transporte de amostras

1 - Para transporte de curta distncia
Para transporte rpido, de curta distncia, os tubos com amostras (geralmente sangue total, soro ou plasma) podem vir
em estantes e transportados em caixas trmicas.
2. Para transporte de longa distncia
Quando as amostras de sangue total, soro, plasma e outras similares so procedentes de locais mais distantes,
sugere-se o seguinte procedimento:
a) Colocar o(s) tubos(s) com as amostra(s), devidamente identificada(s) e etiquetado(s), em um saco plstico e fechar;
b) Colocar o saco com os tubos em p, protegido com papel, dentro de uma garrafa plstica cortada (pode ser de
lcool, gua sanitria, refrigerante, etc);
c) Colocar uma fita adesiva por cima para fixar o saco com tubos na embalagem plstica;
d) Colocar dentro de uma caixa trmica;
e) Colocar o gelo reciclvel dentro da caixa;
f) Colocar papel amassado por cima, de maneira que as amostras e o gelo no se batam;
g) Colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco plstico;
h) Vedar bem o saco e fixa-lo na parte interna da tampa da caixa trmica;
i) Fechar e vedar bem a caixa;
j) Identificar com destinatrio, remetente;
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k) Enviar ao laboratrio.
Gelo: o gelo deve ser preferencialmente reciclvel, para no haver risco de perda da amostra.
Caixa Trmica: a caixa para transporte de amostra que deve ser de polietileno ou similares (tipo geladeira
porttil). Deve ser lavvel, resistir a desinfeco e portar a identificao de Infectante ou Risco Biolgico,
juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que deve ser avisada em caso de acidente com a(s)
amostra(s).
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Coleta de amostras biolgicas
As amostras utilizadas para anlises laboratoriais so:
Sangue
Urina
Fezes
Lquor
Esperma
Secreo vaginal
Liquido sinovial
Saliva
Escarro
Lavado broncoalveolar
Coleta de fezes EPF (Exame parasitolgico de fezes)
Finalidade: O exame de rotina de fezes compreende as anlises macroscpicas, microscpicas e bioqumicas

para a deteco precoce de sangramento gastrintestinal, distrbios hepticos e dos ductos biliares e
sndromes de m absoro.
Pesquisa de helmintos e protozorios nas fezes.
Preparo do paciente:
Evacuar em recipiente limpo e seco e transferir uma poro das fezes recm emitidas para o frasco coletor,
tendo o cuidado para no ultrapassar a metade do frasco.
No utilizar laxantes ou supositrio.
Material: Fezes em frasco coletor de polipropileno com tampa de rosca de aproximadamente 80 ml.
Interferentes: Contaminao com urina.
Observaes: o paciente para evitar misturar fezes com urina ou contamin-las com gua usada para limpar
banheiros, que podem conter desinfetantes qumicos.
Armazenamento:
Conservar refrigerada
- No congelar
- Material dever ser colhido mesmo apresentando-se diarrico, muco, pus ou sangue.
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Coleta de urina
de fcil obteno
Deve ser colhida em recipiente descartvel limpo, seco e, no caso das uroculturas, tambm deve ser estril.
O recipiente deve ser devidamente etiquetado com o nome do paciente, data e hora da coleta alm da
identificao comum utilizada para os demais exames. importante lembrar que amostras no etiquetadas
colocadas sobre suas respectivas requisies podem ser movidas facilmente e trocadas.
A amostra deve ser entregue imediatamente ao laboratrio e analisada dentro de 1 hora. Caso isso no seja
possvel a amostra deve ser mantida refrigerada para prevenir a decomposio da urina e a proliferao
bacteriana na amostra
A amostra no deve ser congelada, pois o congelamento destri os elementos figurados e ocorre turvao ao
descongelar.
Orientaes especficas de coleta - Amostra de urina de jato mdio

Sempre que possvel, as amostras de urina devem ser colhidas pela manh.
a) Como orientar pacientes do sexo feminino:
A paciente deve lavar bem as mos com gua e sabo neutro e sec-las com toalha de papel limpa e
descartvel.
Deve despir-se em sala adequada, afastar os lbios vaginais e lavar bem a vulva e os lbios
vaginais, usando chumaos de algodo e gazes estreis em gua morna com sabo, esfregando de frente para
trs. Deve enxaguar bem com gua morna e secar com gazes esterilizadas. Durante todo este processo a
paciente deve manter os lbios vaginais separados, e no tocar a rea limpa com os dedos. Urinar, desprezando
a primeira parte do jato urinrio. Colher cerca de 30ml (aproximadamente a metade do frasco) de urina em um
recipiente estril, fechando assim que a urina for colhida. Em seguida a amostra colhida, contida no recipiente
fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel para ser encaminhada ao laboratrio.
b) Como orientar pacientes do sexo masculino:
O paciente deve lavar bem as mos. Afastar o prepcio e desprezar no vaso uma pequena
quantidade de
urina. Sempre segurando para trs o prepcio colher cerca de 30ml de urina no frasco estril. Em seguida, a
amostra colhida, contida no recipiente fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel para ser encaminhado ao
laboratrio.
TIPOS DE AMOSTRAS:
PRIMEIRA AMOSTRA DA MANH (JATO MDIO): a amostra ideal para o exame de rotina Urina tipo I.
Tambm essencial para evitar o resultado falso negativos nos testes de gravidez. A primeira amostra da
manh uma amostra concentrada, o que garante a deteco de substncias que podem no estar presentes
nas amostras aleatrias mais diludas. Deve-se instruir o usurio para colher a amostra logo que se levantar e
entreg-la ao laboratrio o mais rpido possvel.
AMOSTRA ALEATRIA: Esse tipo de coleta til nos exames de triagem, para detectar anormalidades bem
evidentes. Contudo tambm pode produzir resultados errados, devido ingesto de alimentos ou atividade
fsica realizada pouco antes da coleta da amostra.
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AMOSTRA COLHIDA 2 HORAS APS A REFEIO: Orienta-se o paciente para urinar pouco antes de se
alimentar e colher a urina 2 horas depois de comer. Este tipo de coleta utilizado para controlar a terapia com
insulina.
AMOSTRA DE 24 HORAS OU COM TEMPO MARCADO: Quando necessrio medir a quantidade exata de
determinada substncia qumica na urina e quando esta quantidade varia segundo as atividades do dia, como
exerccios, refeies e metabolismo orgnico, necessrio a coleta de 24 horas. Para conseguir uma amostra
precisamente cronometrada, necessrio iniciar o perodo de coleta com a bexiga vazia e termin-la tambm
com a bexiga vazia. Estas orientaes aplicam-se para qualquer coleia com tempo determinado.
EXEMPLO DE COLETA DE AMOSTRA DE 24 HORAS:
1 dia -7 da manh: o paciente urina e descarta a amostra. O paciente colhe toda a urina nas prximas 24
horas.
2 dia 7 da manh: o paciente urina e junta esta urina com aquela previamente colhida e envia ao laboratrio
todo o volume coletado.
Coleta peditrica / urina com saco coletor
Realizar assepsia da regio genital. Retirar o papel que recobre a parte adesiva e fixar o orifcio do saco
coletor na regio genital em torno da uretra. Aguardar que a criana urine. Se a criana no urinar em um
perodo de 30 minutos, repetir a higiene e trocar o saco coletor a cada 30 minutos. Assim que a criana urinar,
retirar o saco coletor e fech-lo, colando as bordas do orifcio. Verificar se est vedado.
Enviar imediatamente ao laboratrio sob refrigerao.
Colocar a identificao do usurio no saco coletor.
Coleta de lquor
Lquor normalmente colhido por puno suboccipital ou lombar entre a terceira, quarta ou quinta vrtebra.
Embora no se trate de um procedimento complicado, requer certas precaues, que compreendem a medida
da presso intracraniana e o emprego de tcnicas cuidadosas para evitar a infeco ou leso no tecido neural.
As amostras devem ser colhidas em TRS tubos estreis, marcados 1,2,3 na ordem em que so obtidos. O tubo 1
(UM) usado para as anlises bioqumicas e sorolgicas: o tubo 2 usado para a microbiologia: o tubo 3 usado para
a contagem celular, por apresentar menor probabilidade de conter clulas introduzidas acidentalmente pelo
procedimento de puno espinhal
As amostras destinadas a testes bioqumicos, sorolgicos e de hematologia so refrigeradas e as de

microbiologia so mantidos temperatura ambiente.
A coleta do liquor s poder ser feita por um mdico
Secrees Genitais
Coleta da secreo uretral masculina para exame a fresco
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Solicitar ao paciente para retrair o prepcio;

Limpar a secreo emergente com gaze estril;
Certificar-se de que a uretra esteja reta;
Introduzir o swab cerca de 2 centmetros no canal uretral;
Gire o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para absorver a secreo;
Retirar o swab, introduzir em um tubo com 1,0 ml de salina estril e encaminhar para
O laboratrio imediatamente.
Coleta de secreo vaginal para exame a fresco
Introduzir o espculo;
Coletar a amostra do saco vaginal com auxlio de um swab;
Retirar o swab e introduzir em tubo de ensaio contendo 1,0 ml de salina estril, previamente identificado;
Encaminhar ao laboratrio imediatamente.
Coleta de esperma
MATERIAL: Esperma.
EXAMES: Espermograma, Cultura de esperma, Bacterioscopia
FORMA DE COLETA:
Fazer abstinncia sexual de no mnimo 3 dias e no mximo 5 dias, para posterior coleta de esperma.
A coleta dever ser realizada pela manh (entre 7:00 e 8:30 hs), de segunda a sexta-feira, de preferncia no
laboratrio. Se no for possvel, seguir rigorosamente o tempo de envio ao laboratrio. Lavar o pnis com gua
e sabonete. Deve-se urinar previamente e depois coletar por masturbao, todo o volume de esperma de uma
ejaculao, diretamente no frasco fornecido pelo laboratrio. No coletar o esperma em preservativo, pois o
ltex interfere com a viabilidade dos espermatozides.
Anotar o horrio da coleta e enviar o esperma ao laboratrio no mximo 30 minutos aps a coleta. O material
deve ser protegido contra extremos de temperatura (menos de 20 C e mais de 40 C) durante o transporte at
o laboratrio. Comunicar ao laboratrio se fez vasectomia e a quanto tempo.
A realizao do espermograma tem como aplicaes, principalmente, a avaliao das glndulas seminais, da
fertilidade e monitoramento ps-vasectomia. Alm de esclarecer infeces neste local.
Antes da coleta, realizar higiene das mos e pnis;
A amostra deve ser coletada por masturbao em frascos limpo, de vidro ou plstico, de boca larga, fornecido,
pelo laboratrio;
No utilizar mtodos alternativos para obteno do smen (em caso de coleta em casa) como, por exemplo,
relao sexual interrompida (interrompe a relao quando vai ejacular e colhe o material);
Evitar perda do material durante a coleta. Fechar imediatamente o frasco aps a coleta, para evitar
alcalinizao;
Recomendar ao paciente a no utilizao de preservativos de ltex durante a coleta;
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indispensvel informar o horrio da coleta;
O jejum no obrigatrio, exceto quando solicitado a dosagem de frutose, pois nveis elevados de glicose
podem interferir na dosagem.
Coleta de escarro
Colher, de preferncia, a primeira amostra da manh;
Orientar o paciente para enxaguar previamente vrias vezes a boca com gua para remover a flora bacteriana
superficial dessa regio e colher a amostra obtida aps tosse profunda, diretamente em um frasco de boca
larga;
Explicar ao paciente a diferena de uma amostra obtida aps tosse profunda e saliva, para se obter um
material de melhor qualidade;
Paciente incapaz de expectorar colher escarro induzido aps nebulizao com soluo fisiolgica estril de 3
a 10%.
Figura 2 pote para coleta de escarro
Coleta de sangue digital para exame gota espessa - Malria
a) Coletar sempre uma lmina com duas gotas espessas e uma lmina com esfregao;
b) No utilizar sangue com anticoagulante para preparao da lmina.
c) Aps secagem das lminas, transportar em caixas ou frascos , com paredes rgidas e com ranhuras prprias para
fixao das lminas.
d) A solicitao do exame deve acompanhar os frascos de transporte.
Tcnica de Coleta e Preparao da Gota Espessa
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a) Trabalhar sobre superfcie plana horizontal.

b) Preencher completamente os dados do paciente.
c) Usar duas lminas, colocar uma lmina sobre a superfcie plana ou sobre o padro, sendo o manuseio pelas
extremidades sem tocar as superfcies. De preferncia, a lmina deve estar com etiqueta auto-adesiva para o registro
da identificao ou usar lmina com extremidade esmerilhada.
d) Limpar vigorosamente a pele do local de puno (parte lateral do segundo ou terceiro dedo esquerdo, lbulo da
orelha ou em lactentes o dedo grande do p ou o calcanhar) com gaze ou algodo embebido em lcool e enxugar com
gaze ou algodo.
e) Retirar o estilete do envoltrio estril, segurando-o com a mo direita. Mantendo firmemente o dedo a ser
puncionado entre o polegar e o indicador da mo esquerda, puncionar o local de maneira firme e leve.
f) Remover a primeira gota de sangue com gaze ou algodo seco.
g) Comprimir o dedo suavemente (como uma ordenha) para obter outra gota de sangue esfrica sobre a pele seca.
No tocar o ponto de sada do sangue.
h) Segurando a lmina firmemente pelas bordas numa das extremidades contra o indicador (que est comprimindo o
dedo do paciente) baixa-se lentamente a lmina at tocar o alto da gota de sangue (sem entrar em contato com a
i) Colocar a lmina com a face para cima na superfcie de trabalho. Com o canto e os primeiros 5mm da borda longa da
segunda lmina, espalhar o sangue formando um retngulo de tamanho e espessura adequados. Tomar outra amostra,
colocar ao lado da primeira e espalhar da mesma maneira. As gotas espessas devem ser localizadas na parte central
da lmina.
j) Em lugar da segunda gota espessa pode-se colocar uma gota de sangue e fazer um esfregao (distendido ou
extenso).
k) Limpar o local puncionado com gaze ou algodo secos, se necessrio pressionar.
l) Secar abanando com um pedao de carto, ar morno, caixa com lmpada, estufa, ou sobre o prprio quebra-luz com
suporte para secagem de lminas recm-colhidas ou coradas.
m) No recomendvel o registro do nmero da lmina na prpria amostra de sangue.
n) A melhor preparao para o diagnstico de malria obtida com amostra de sangue colhida diretamente por puno
digital ou venosa sem anticoagulante. O sangue com anticoagulante fixa menos na lmina de vidro, podendo ocorrer o
desprendimento do sangue no ato da colorao pelo
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Coleta de sangue
Coleta de sangue venoso
Coleta de sangue Venoso
o sangue que circula da periferia para o centro do sistema circulatrio, que o corao. conseguido pela puno
venosa que fornece quantidade aprecivel de sangue usado nos exames hematolgicos e bioqumicos.
Locais de puno: fossa cbita (dobra do cotovelo), dorso da mo e dorso do p.
Figura 1: Veias da fossa cbital indicadas para venopuno
Procedimento:
- Preparar a seringa, agulha, algodo e o tubo apropriado.
- Colocar o brao do paciente no suporte
- Garrotear o brao quatro dedos acima da fossa antecubital
- Sentir com as digitais a veia do paciente
- Introduzir a agulha com o bisel voltado pra baixo
- Retirar a quantidade de sangue desejado
- Desgarrotear o brao e retirar a agulha
- Pressionado o algodo para o estancamento do sangue
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- Importante no deixar o paciente dobrar o brao.

- Retirar a seringa e colocar o sangue no tubo de maneira que escorra pelas paredes do tubo, para evitar a hemlise.
- Homogeneizar
Coleta de sangue capilar
conseguido pela puno no calcanhar em crianas, na margem livre do lbulo da orelha e na face palmar do dedo da
mo.
Procedimento:
- Fazer assepsia do local com lcool;
- Esperar secar e introduzir no local da puno uma lanceta (descartvel e estril);
- Permitir o escoamento livre do sangue e no espremer para que no haja diluio do sangue com a linfa
(liquido tissular) e sempre desprezar a primeira gota, pois contendo liquido tissular e material exgeno;
- Realizar a coleta com tubo capilar com ou sem anticoagulante apenas tocando na gota de sangue;
- Pressionar o local da puno com um pedao de algodo embebido com lcool at cessar o sangramento.
Coleta de sangue vcuo

O sistema de coleta a vcuo consiste de uma agulha, um adaptador tubo-agulha e o tubo de coleta.
Os tubos de coleta com vcuo so produzidos para determinados volumes de sangue, que determinado pelo
tamanho do tubo e seu vcuo. Tubos com vrias capacidades esto disponveis desde 2 mL at acima de 20 mL.
Muitos tubos de coleta com vcuo contm aditivos ou anticoagulantes utilizados para coletar amostras para
diferentes anlises. A cor da tampa do tubo de coleta codificada para definir se existe algum aditivo ou anticoagulante
ou no. As cores usadas em geral so:
- Tampa vermelha: Sem anticoagulantes utilizado na coleta de sangue para a obteno de soro para bioqumica e
sorologia.
- Lavanda: Adicionado de anticoagulante EDTA sdico ou potssio. Obtm-se sangue total para a hematologia.
- Azul: Adicionado de anticoagulante citrato de sdio para obteno de plasma para provas de coagulao
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- Verde: Adicionado de heparina para a obteno de plasma para testes bioqumicos.

- Cinza: Adicionado fluoreto de potssio (inibe a gliclise) para a obteno de plasma para a determinao da glicose.
Procedimento:
- Preparar a o suporte para tubos a vcuo com o tubo apropriado.
- Fazer a assepsia unidirecionalmente do local desejado utilizado um algodo emedecido com lcool 70%.
- Colocar o garrote com fora moderada a uma distncia de mais ou menos 4 dedos da fossa antecubital.
- Introduzir a agulha na veia desejada utilizando o suporte de tubo a vcuo
- Introduzir o tubo a vcuo, quando atingir a quantidade desejada, retirar o tubo a vcuo do suporte, soltar o garrote
assim que o sangue comear a entrar no tubo a vcuo do suporte.
- Quando atingir a quantidade desejada, retirar o tubo a vcuo do suporte, e em seguida retirar a agulha e colocar um
algodo seco no local puncionado, pressionando levemente e evitando dobrar o brao.
- Tampar a agulha retirando-a do suporte e descart-la.
Tubos de Coleta e Anticoagulantes

ANTICOAGULANTES - So substncias que evitam a coagulao do sangue.
Os tubos esto disponveis em uma variedade de tipos e tamanhos. Os tubos podem ser estreis ou no. As tampas
coloridas demonstram claramente qual o anticoagulante contido no tubo, ou se no h anticoagulante.
Cor da Tampa
Anticoagulante
Exemplos de Uso
Vermelha
Nenhum
Exames que requerem soro. Ex: (bioqumica e sorologia.
Lils
EDTA
hematologia e Tipagem sanguinea.
Azul Claro
Citrato de Sdio
Exames de coagulao (TAP, TTPa, Fibrinognio)
Cinza
Fluoreto de Sdio
Glicose (impede a gliclise)
Verde
Heparina
Alguns exames especiais.
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ANTICOAGULANTES
Como j foi citado antes, os anticoagulantes so substncias usadas para prevenir a coagulao e retardar a
deteriorao do sangue. A escolha do anticoagulante e da sua quantidade importante. Escolhido impropriamente
interfere com as investigaes bioqumicas como o EDTA potssico na dosagem do potssio e o oxalato de amnio na
dosagem da uria. O excesso de anticoagulante lquido dilui o sangue interferindo nas determinaes quantitativas.
Alguns anticoagulantes se prestam melhor hematologia pelas suas propriedades conservadoras da morfologia celular
e dos componentes do plasma, especialmente os fatores da coagulao.
O EDTA apresenta propriedade conservadora das clulas sanguineas. Impede a aglutinao das plaquetas no
sangue. No deve ser usado para o tempo de protrombina e testes de funo plaquetria. O EDTA impede a
coagulao ao formar quelatos com o clcio.
A Heparina inibe a formao de trombina, impedindo a converso de fibrinognio em fibrina. No altera a
morfologia e o tamanho celular.
O citrato de sdio utilizado como anticoagulante nas transfuses de sangue e no estudo da coagulao
quando em soluo aquosa a 3,8% ( Atividade de protrombina, PTT e fibrinognio).
Para as transfuses sanguneas o citrato combinado com outras substncias formando o ACDF (cido ctrico,
citrato de sdio, dextrose e fosfato monossdico)
Confeco do esfregao sanguneo

A confeco de um bom esfregao sangneo indispensvel a obteno de corretos resultados e pode ser feita com
sangue com anticoagulante ou sem anticoagulante. Considera-se como esfregao erradamente confeccionado os
curtos demais, os finos demais, os com parte de gota sangunea deixada na cabea sem estirar, os com paradas e
recomeo e aqueles que no deixam margem lateral. As lminas para o esfregao devem estar perfeitamente limpas,
sem gordura e polidas.
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Tcnica de Preparao de Esfregao (Distendido)

a) Trabalhar sobre superfcie plana e horizontal.
b) Colocar uma pequena gota de sangue na parte central da lmina de vidro a 1,5 cm da extremidade fosca ou da
etiqueta.
c) Colocar a Lmina com a face para cima sobre a superfcie plana.
d) Com a borda estreita da lmina em contato com a gota de sangue, formando um ngulo de 50, espalhar o sangue
com um movimento rpido, para formar uma camada delgada de sangue sem atingir a extremidade da lmina.
e) Deixar secar na mesma posio horizontal.
f) Usar etiqueta adesiva para identificao.
g) O sangue pode ser espalhado tambm da seguinte maneira: Retirar com a extremidade da prpria lmina
espalhadora a gota de sangue. Colocar a extremidade que contm o sangue em contato com a parte central da
lmina em posio horizontal e antes que o sangue, por capilaridade, atinja as bordas laterais da lmina espalhadora
formando um ngulo de 50, faz-se o deslocamento rpido para formar a camada fina de sangue sem atingir a
extremidade da lmina.
Figura 3 Esfregao de sangue distendido
Figura 4 frasco para transporte de amostras
22

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