UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIHUAHUA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE MICOLOGA MDICA

REPORTE DE LABORATORIO
PRCTICA NO.2
HONGOS DEL MEDIO AMBIENTALES MEDIANTE TECNICA
DE PRECIPITACION
TITULAR: M.E. ISKRA REYES HERNNDEZ
EQUIPO # 1
INTEGRANTES:
VANESA MUOZ HUERTA 282280
CARLOS CHAIREZ PEREA
Grupo: 8c
A 02 de marzo del 2014 Chihuahua, Chih

Resumen
En la presente practica se aislaron hongos y levaduras ambientales por medio de la
tcnica de precipitacin para lo cual se expuso una caja Petri con agar papa dextrosa al

medio ambiente por 20 minutos . la toma de muestra se realizo en la recepcin del

edificio de laboratorios de la Facultad de Ciencias Quimicas de la UACH. Posteriormente
se procedio a serrar y cellas la caja con papel parafilm para incubarla a 30c por 7 dias.
Transcurrido el tiempo de incubacin se evaluo la presencia u ausencia de colonias
levadriformes y filamentosas que de estar precentes se evaluaron macroscpicamente y
microsopicamente. La preparacin de la muestra a observarse al microscopio se realizo
por medio de la tcnica de la cinta scotch y la tcnica de aguja de diceccion , ambas en
caso de tratarse de una colonia filamentosa . mientras que las colonias levaduriformes
se prepararon con una tincin de Gram. los resultados obtenidos fueron la presencia de
dos colonias una con aspecto filamentoso y otra con aspecto levaduriforme .en lo que
respecta a la colonia filamemntosa se corroboro que efectivamente se trataba de un
hongo puesto que al microscopio se observaron las estructuras representativas de estas
(hifas) las cuales se describen ampliamente en los resultados. Mientras que la colonia de
aspecto levaduriforme denotaron estar formadas por bacterias cuya forma fueron bacilos
en cadena Gram positivos.
OBJETIVO

Aislar y evaluar macroscpicamente y microscpicamente mohos y levaduras

presentes en el ambiente.
Familiarizarse con la tcnica de precipitacin para la toma de muestra as como
con la utilizacin de agares como medios de cultivo.

INTRODUCCION
Los hongos son organismos cosmopolitas que pueden desarrollarse en los sustratos
ms variados, en todos los climas de la tierra e incluso en condiciones extremas. Su
mbito es tan amplio, que sus esporas incluso sobrepasan la atmsfera (Aira et
al., 2003). El desarrollo fngico est supeditado a ciertas condiciones ambientales tales
como

la

humedad

relativa,

temperatura,

precipitacin,

inversiones

trmicas,

contaminacin, disponibilidad de sustrato y actividades humanas, las que influyen de

manera determinante en la proliferacin y propagacin de las partculas fngicas hacia
los espacios interiores (Guerrero et al., 2003). Los hongos se propaga y reproducen por
esporas, las cuales sobreviven en condiciones ambientales que no favorecen el
crecimiento normal de hongo, permaneciendo dormantes hasta que las condiciones
ambientales se tornen favorables.Las esporas fngicas son componentes normales de
ambientes externos y pueden ser la fuente contaminante de los ambientes internos y
muchos de estos pueden servir como sitios de amplificacin para el crecimiento de los
2

hongos (Bueno et al., 2003). La mayora de los hongos presentes en los ambientes
internos son saprofticos, porque ellos obtienen lo que necesitan para su metabolismo de
materiales muertos, materia orgnica o sustratos como madera, papel, pintura, suelo,
polvo, piel y alimentos. Al aire libre pueden encontrarse en reas o lugares hmedos
sombreados donde hay descomposicin de hojas o de otro tipo de vegetacin. En los
interiores pueden encontrarse en lugares donde los niveles de humedad son altos como
los stanos o las duchas.
La inhalacin sistmica de esporas y fragmentos de micelio de hongos puede inducir
una afeccin alrgica respiratoria, tanto en las vas areas superiores como en las
inferiores. Los componentes alergnicos de hongos contienen molculas, como
glucoprotenas, protenas y polisacridos, que pueden desencadenar reacciones de
hipersensibilidad tipo I (Ruiz et al., 2006).
Los tipos ms comunes de mohos ambientales son Cladosporium sp, Penicillium sp,
Aspergillus sp, Mucor sp y Aternaria sp. (Guerrero et al., 2003)
MATERIALES Y METODOS
Material

Aguja de diseccin

Asa micolgica

Cinta adhesiva transparente

Porta objetos

Cubre objetos

Tijeras

Mechero Bunsen

Equipo

Microscopio ptico de campo claro

Incubadora a 30C

Reactivos
Azul de algodn de lactofenol
Medios de cultivo:
3

Agar papa dextrosa

Metodologa
Dia 1
Inoculacin en medio de cultivo por tcnica de precipitacin
1. Elegir un punto determinado del ambiente de estudio.
2. Destapar la caja Petri exponiendo el medio de cultivo al aire. El tiempo de
exposicin puede ser de 20 a 30 minutos. Transcurrido el tiempo tapar la placa y
rotular.
3. Sellar con papel parafilm la caja Petri e incubar a 30C de 5 a 7 das.
Da 2
Anlisis macroscpico
1. Buscar colonias filamentosas y levaduriformes
2. Definir las caractersticas macroscpicas de las colonias presentes en el agar,
describiendo su forma, color, consistencia, textura y de ser posible el aspecto.
Anotar sus observaciones
Anlisis microscpico
Realizar las siguientes tcnicas de preparacin de muestra para las colonias
filamentosas mediante las condiciones aspticas adecuadas encendiendo los mecheros
y manteniendo un permetro de esterilizacin adecuado.
A) Tcnica con aguja de diseccin
1. Colocar una gota de azul de algodn de lactofenol en un portaobjetos
2. Tomar muestra de la colonia del hongo con la aguja de diseccin previamente
Esterilizada ( el asa colocndola a la flama hasta el rojo vivo)
3. Colocar la muestra en el portaobjeto con la gota de azul de algodn de lactofenol.
4. Colocar un cubre objeto evitando la formacin de burbujas.
5. Observar al microscopio a 40X
6. Realizar las anotaciones pertinentes.
B) Tcnica de cinta scotch
1. Cortar un trozo de cinta adhesiva y pegar una esquina en el Asa micolgica
previamente Esterilizada ( el asa colocndola a la flama hasta el rojo vivo)
4

2. Poner en contacto la cara adhesiva de la cinta con la parte de la muestra donde

se encuentran los hongos.
3. Poner una gota de azul de algodn de lactofenol en el portaobjetos.
4. Colocar la cinta adhesiva sobre la gota de azul de lactofenol.
5. Colocar un cubre objeto evitando la formacin de burbujas.
6. Observar al microscopio a 40x
7. Realizar las anotaciones pertinentes.
Realizar las siguientes tcnicas de preparacin de muestras para las colonias
levaduriformes mediante las condiciones aspticas adecuadas.
a) Elaboracin de frotis
1. Marcar las reas de frotis con un sharpie en la parte posterior del portaobjeto
2. Coloca una gota de solucin salina en el portaobjetos
3. Tomar una porcin de la colonia levaduriforme con un asa estril. Mezcla con la
solucin salina.
4. Permitir que los frotis se sequen al aire.
5. Pasa sobre la flama del mechero de dos a tres veces.
6.
b)Tincin de gram
1.
2.
3.
4.
5.

Cubre el frotis con cristal violeta por 30 segundos

Enjuaga el cristal violeta con agua, permitiendo que esta corra a travs del frotis.
Cubre el frotis con yodo lugol por 1 minuto. Enjuaga el frotis con agua.
Decolora con alcohol acetona por 10 segundos. Enjuaga con agua.
Cubre el frotis con safranina por 30 segundos. Enjuaga el frotis con agua y seca

suavemente.
6. Observa en el microscopio en el objetivo de 40x y despus de 100 x (agregar el
aceite de inmersin antes de pasar al objetivo de 100x).
7. Anotar observaciones.

RESULTADOS
Durante la prctica se logr el aislamiento de dos tipos de microorganismos
diferentes en el agar papa dextrosa ,los cuales se hicieron notar mediante la
formacin de colonias distintas cuyas caractersticas se describen en la tabla 1 y 2
para el caso de la colonia 1 y para la colonia dos en la tabla 3 y 4 .

Colonia No.1

MORFOLOGA MACROSCPICA (Descripcin escrita e imagen)

Colonia

IMAGEN

Forma

Circular

Tamao

1cm

Color de la colonia
Difusin de pigmento

Amarilla a blanca (del

centro hacia afuera )
Negativo

Superficie

Plana

Textura

Vellosa

Aspecto

No aplica

MORFOLOGA MICROSCPICA
Colonia
Tabicado
Micelio

Ramificado
Hialino
Clamidoconidias y raquetas
Conidios

Estructuras de
reproduccin

Lagrima
Hialinos
Microaleurioconidios
Solitarios

 Colonia No.2
MORFOLOGA MACROSCPICA
Colonia
Forma

Irregular

Tamao

5 mm

Color de la colonia

Blanca

Difusin de pigmento

Negativo

Superficie

Convexa

Textura

Cremosa

Aspecto

No aplica

IMAGEN

MORFOLOGA MICROSCPICA
Colonia
Micelio

Ausente
Ausente

Levadura
Bacterias

Bacilos Gram positivos

Discusin
En la presente practica se corroboro que tal como lo menciona la literatura los hongos
son organismos cosmopolitas los cual quiere decir que los podemos encontrar
prcticamente en cualquier lugar y que estos se pueden propagar de un medio externo a
uno interno por medio de esporas por lo cual los podemos encontrar distribuidos de una
forma increble en el medio ambiente de modo que aunque no los veamos estos se
encuentran precentes en sus formas de resistencia esperando las condiciones
adecuadas para crecer .De este modo que se puede definir a las esposras como
estructuras de resistencia que permiten al hongo sobrevivir y propagarse de un lugar a
otro . Por otro lado se puede anexar que las condiciones de temperatura de 22c y una
humedad de 87% son favorables para que coexistan los hongos ambientales puesto que
estas fueron las condiciones de temperatura y humedad a las que se encontraba el
estado de chichuahua chuhauahua el dia de la toma de muestra que dio como resultado
la presencia de un hongo, estos datos se tomaron de la pagina denominada el tiempo
en chihuahua mexico. Por otro lado se puede establecer que los hongos que
predominaron son aquellos cuyas caractersticas son la presencia de hifas septadas ,
hialinas con modalidades de clamidioconidias y cullas conidiaas tenan la forma de
microaleurioconidias tal como lo revelo la observacin al microscopio con un objetivo de
40 x .sin embargo tenemos que los hongos no son el nico tipo de microorganismos que
podemos encontrar inmersos en el medio ambiente , en este caso el microorganimo que
acompaaba a nuestro hongo fue una bacteria gram positiva, de esto es importante
destacar que nuestro agar no era un medio selectivo de modo que no contaba con
antibiticos que nos permitieran inhibir el crecimiento de este tipo de microorganismos
.en lo que respecta a las tcnicas utilizadas para la preparacin de las muestras a
observar en el microscopio se puede decir que se mejoraron ya que la aparicin de
burbujas en nuestras muestras fueron escasas lo que habla de un buen manejo de la
tcnica.

Conclusin

Bibliografa
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