TECNICAS PARA LA

VALORACION DE
HEMOSTASIA
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Reynosa Tamulipas
Karla Paola Hernndez Salvador
5B Laboratorio Clinico CBTis 7 Jose Maria Morelos y Pavon
Realiza Anlisis Hematolgicos de Serie Blanca y Hemostasia.

INDICE
INTRODUCCION.3
TIEMPO DE SANGRADO..4
TIEMPO DE COAGULACION....5
TIEMPO DE PROTROMBINA..7
TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA10
TIEMPO DE TROMBINA.12
RETRACCION DEL COAGULO..14
DETERMINACION DE FIBRINOGENO.15
FUENTES BIBLIOGRAFICAS..17

INTRODUCCION
La hemostasia es un conjunto de procesos naturales por los
cuales detienen el proceso de hemorragia en una cortada por
ms mnima que sea, es la capacidad que tiene un organismo
de hacer que la sangre en estado lquido permanezca en
los vasos sanguneos. La hemostasia permite que la sangre
circule libremente por los vasos y cuando una de estas
estructuras se ve daada, permite la formacin
de cogulos para detener la hemorragia, posteriormente
reparar el dao y finalmente disolver el cogulo. En
condiciones normales, los vasos sanos estn recubiertos
internamente por una capa de clulas endoteliales, que
forman el endotelio.
Cuando la hemostasia no sucede de buena forma, puede ser
por diferentes complicaciones o fallas en ellas, como el bajo
porcentaje de plaquetas o incluso por factores de la
coagulacin que en algunos de los casos pueden ser graves,
para que pueda a ver algn tratamiento es importante la
realizacin de pruebas de laboratorio.
Algunas de ellas podran ser el tiempo de sangrado que mide
el tiempo por el cual el proceso de hemostasia tarda en
realiza. Tambin el tiempo de coagulacin lo que mide el
tiempo que tarda en coagularse la sangre.
Estas pruebas se realizan cuando se sospechan algn
problema en los tiempos de los factores de la coagulacin.
A continuacin se presentan algunas pruebas que se realizan
de rutina en el laboratorio clnico.

TIEMPO DE SANGRADO
Introduccin:
Cuando existe una lesin vascular, por reflejo nervioso y espasmo muscular del vaso,
sobreviene una contraccin del mismo, fenmeno que dura segundos y tiene como
finalidad lograr la estasis de la circulacin y favorece la formacin del tapn
plaquetario.
En lesiones de capilares, esta vasoconstriccin, refleja es suficiente para permitir la
adhesin plaquetario y la detencin de la hemorragia.
El tapn hemosttico plaquetario primario es una masa de plaquetas que se acumulan
en el punto lesionado de la pared vascular, como resultado de su adherencia, al
colgeno del tejido subendotelial que ha quedado expuesto (adhesin) y luego entre s
(cohesin y agregacin). Los tapones primarios son inestables y fcilmente eliminados.
Un tiempo de sangrado normal indica una retraccin normal de los capilares y la
existencia de un nmero suficiente de plaquetas, con actividad normal.
Fundamento:
Al realizar una puncin de tamao y profundidad estandarizados, la accin conjunta de
los vasos y plaquetas detendr el sangrado en un corto tiempo, el cual es medido y
comparado con el normal.
Material y equipo:
Lancetas estriles
Torundas de algodn con alcohol (70%)
Papel filtro
Un Cronometro
Metodologa:
Mtodo de Duke:
1. selecciona uno de los lbulos de la oreja del paciente (que est libre de lesiones),
dar un masaje suave (esto favorece a la circulacin) hasta que la zona este tibia.
2. limpiar el lbulo de la oreja con una torunda de algodn con alcohol dejar secar la
regin limpiada.
3. se hace una puncin con la lanceta en el sitio elegido, al mismo tiempo echar a
andar el cronometro. La puncin debe hacerse en un solo movimiento, y sin hacer
movimientos laterales para no rasgar la piel.
4. sin tocar la piel ni comprimir se seca la vota de sangre que salga por el sitio de la
puncin con papel filtro cada 15 segundos.

5. cuando el papel filtro ya no absorba sangre parar el cronometro.

6. anotar el tiempo.

TIEMPO DE COAGULACION
Introduccin:
A la transformacin de fibringeno en fibrina se le llama coagulacin, por que se pasa
de un estado lquido (fibringeno) a solido (fibrina).esta transformacin ocurre en 3
fases, en la primera se desarrolla actividad de tromboplastina por acciones de factores
de coagulacin en la sangre y por adicin de jugos y plasma tisulares. Los sistemas
sanguneos (intrnsecos) y tisulares (extrnsecos) son los responsables del desarrollo de
la actividad de tromboplastina, ambos funcionan en defensa fisiolgica de la
hemostasia.
El sistema intrnseco. Se denomina as porque es iniciada a travs de estimulacin de
factores aislados que se encuentran en el propio plasma y cuyas reacciones culminan
con la generacin de fibrina. Comienza con activacin del factor XII que puede ser
iniciado por mltiples actividades como colgeno, fosfolpidos, liposacaridos, etc. El
factor XII tiene capacidad de activar otras molculas del factor VII y de precalicreina;
con esto la reaccin se hace expansiva. En presencia del calcio se activa el factor XI,
con lo que continua el proceso. El factor XI activado en presencia de calcio, acta sobre
el factor IX activndolo, y junto con el factor 3 plaquetario, calcio y el factor VIII se
forma el complejo activador del factor X.
El sistema extrnseco: se inicia como respuesta a estimulacin extrnseca a la sangre,
como la tromboplastina tisular.
Cuando la sangre entra en contacto con la tromboplastina tisular, el factor VII forma un
complejo enzimtico con los fosfolpidos tisulares. Mediante iones calcio y adquiere
actividad enzimtica capaz de activar el factor X.
La segunda fase de coagulacin es la conversin de protrombina en trombina. Se inicia
con el factor X activado por cualquiera de los sistemas intrnseco y extrnseco, y con el
factor V, factor 3 plaquetario y calcio integra otro complejo que tiene accin sobre la
trombina, por lo que acta sobre ella convirtindola en trombina
La tercera fase de la coagulacin sangunea es la conversin del fibringeno en fibrina
por accin de la trombina.

Fundamento:
El tiempo necesario para que la primera sangre se coagule en tubo de crista es la
medida de la actividad total des sistema intrnseco de la coagulacin. La inspeccin
peridica del coagulo permite la valoracin de las propiedades fsicas del coagulo
(tamao, aspecto y fuerza mecnica).

Material y aparatos:

Capilares sin heparina (orilla azul)

Lancetas estriles
Jeringa de plstico de 5 mililitros
Cronometro
3 tubos de ensayo
Torundas con alcohol (70%)
Sangre obtenida con jeringa.
Sangre obtenida por puncin capilar.

Metodologa:
Mtodo de Lee-White:
1. Colocar 3 tubos de 13 x100 mm en el bao mara a 37c.
2. Obtener 5 mililitros de sangre venosa por una puncin limpia y extrada con una
jeringa de plstico. Con el mximo cuidado de evitar que la sangre se espume
3. Colocar 1ml de sangre en cada tubo numerado del 1 al 3.
4. Poner en marcha el cronometro cuando la sangre entra en el tubo numero 1.
5. Cada 30 segundos se inclinan suavemente los tubos hasta que se vea un coagulo en
uno de ellos; se para el cronometro en ese momento y se calcula el tiempo.
Mtodo capilar:
1. Limpiar la zona de puncin con una torunda con alcohol (de preferencia el pulpejo
del dedo anular).
2. Dejar que el alcohol seque.
3. Puncionar hasta la profundidad de 3 mm. Con una lanceta estril. Poner en marcha
el cronometro.
4. Se desecha la primera gota de sangre, a continuacin se llena el capilar sin heparina
hasta las dos terceras partes.
5. A partir del tercer minuto de la puncin, se invierte el capilar constantemente hasta
observar que no haya desplazamiento de la sangre. Si es necesario, se rompe el capilar
para observar el tiempo en que se forman los hilos de fibrina o en su efecto, tratar que
una gota de la punta caiga sobre un papel, para poder observar si se observa un hilo
entre el capilar y el papel.
6. Si ya no hay desplazamiento o se observan los primeros hilos de fibrina, es el
momento en que se detiene el cronometro.

Comentarios:
El tiempo de coagulacin sangunea es una prueba muy poco sensible y nunca se debe
utilizar como prueba selectiva. Se usa a menudo para guiar a la teraputica heparinica,
pero los resultados obtenidos son a menudo inseguros, por esto son preferibles
pruebas como el tiempo de tromboplastina parcial activa.
Valores de referencia:
Mtodo de Lee-White oscila 4 a 8 minutos.
Mtodo capilar de 3 a 5 minutos.

TIEMPO DE PROTOMBINA /(TP)

7

INTRODUCCION
La prueba del tiempo de protrombina (TP) mide el tiempo que tarda en formarse un
cogulo en una muestra de sangre. Un cogulo es una masa espesa de sangre que
produce el organismo para sellar escapes de sangre a travs de heridas, cortes o roces
a fin de evitar el sangrado excesivo.
La capacidad de coagulacin de la sangre requiere de la participacin de las plaquetas
(tambin denominadas "trombocitos") y de unas protenas denominadas "factores de
coagulacin". Las plaquetas son clulas de forma ovalada que se fabrican en la mdula
sea. La mayora de los factores de coagulacin se fabrican en el hgado.
Cuando se rompe un vaso sanguneo, las plaquetas son las primeras en llegar al rea
de la lesin para sellar el escape de sangre y detener o reducir temporalmente el
sangrado. Pero, para que el cogulo se vuelva resistente, duro y estable, tambin
debern intervenir los factores de coagulacin.
Los factores de coagulacin del organismo humano se enumeran utilizando la
numeracin romana (desde el factor I hasta el factor XII). Estos factores actan
conjuntamente en una secuencia especializada, casi como si se trataran de las piezas
de un rompecabezas. Cuando se coloca la ltima pieza en su sitio, se forma el cogulo,
pero si falta una pieza o si existe una pieza defectuosa, el cogulo no se podr formar.
La prueba del TP se utiliza para evaluar la actividad de cinco factores de coagulacin
diferentes (I, II, V, VII y X). El tiempo de coagulacin se alarga cuando alguno de estos
factores no se detecta, se detecta pero en una cantidad insuficiente o es defectuoso.
Cuando el proceso de coagulacin de la sangre tarda un tiempo anormalmente largo,
esto puede ser un indicador de:

una deficiencia de base hereditaria en los factores de coagulacin (lo que ocurre
en trastornos hemorrgicos como la hemofilia y la enfermedad de von Willebrand)

una enfermedad heptica (puesto que la mayora de los factores de coagulacin

se fabrican en el hgado)

una deficiencia en vitamina K (debido a que la vitamina K es un componente

esencial de varios factores de coagulacin)

tratamiento con warfarina, un medicamento anticoagulante

determinadas afecciones mdicas donde el organismo utiliza o destruye

factores de coagulacin demasiado deprisa

Es posible que los mdicos soliciten una prueba del TP como parte de la
evaluacin de un trastorno hemorrgico. Entre los sntomas de los trastornos
hemorrgicos, se incluyen los siguientes: formacin de moretones con gran
facilidad, hemorragias nasales difciles de detener, sangrado excesivo tras
someterse a un procedimiento dental, encas que sangran con facilidad,
hemorragias excesivas durante el perodo menstrual, presencia de sangre en la
orina o inflamacin y/o dolor en las articulaciones.

Incluso en ausencia de sntomas, los mdicos suelen utilizar esta prueba para
asegurarse de que la capacidad de coagulacin de la sangre es normal antes de
que un paciente se someta a una operacin.

Esta prueba tambin se puede solicitar para controlar la capacidad de

coagulacin sangunea de pacientes que padecen enfermedades hepticas o
que tienen deficiencias en vitamina K.

La prueba del TP tambin es til para supervisar los efectos del tratamiento con
un medicamento anticoagulante llamado "warfarina". Los anticoagulantes se
suelen recetar para prevenir la formacin de cogulos en pacientes que han
sufrido infartos de miocardio (ataques de corazn) o accidentes cerebrovasculares o a quienes les han implantado vlvulas cardiacas artificiales. Puesto
que la dosificacin es un aspecto fundamental (se debe administrar una
cantidad suficiente de medicamento para evitar que se formen cogulos
peligrosos, pero no tanta como para que provoque sangrados excesivos), se
requiere de una atenta supervisin.

En muchos casos, la prueba del TP se realiza junto con la del tiempo de

tromboplastina parcial (TTP), para que los mdicos puedan tener una visin
global y completa del funcionamiento de los factores de coagulacin.

OBJEPTIVO
Es un examen que mide el tiempo de coagulacin extrnseco del plasma, los factores V,
VII , X, II (protrombina) y I (fibringeno).
El tiempo de protrombina se prueba para evaluar trastornos de la coagulacin
sangunea, usualmente sangrado. Es un examen de tamizaje amplio para muchos tipos
de trastornos del sangrado.
MATERIAL, REACTIVOS Y APARATOS
Tubos de ensayo
Bao mara
Pipeta, pipetas automticas.
Solucin de cloruro clcico 0,025 mol/l sino trae calcio la tromboplastina.
Plasma pobre en plaquetas.
Suspensin de tromboplastina hstica de cerebro de conejo normal.
Para verificar la calidad y sensibilidad del preparado comercial se compara con el
patrn de referencia internacional respecto del patrn que se consideran de valor 1
0.
Tcnica:
1.
En dos tubos de hemlisis se introducen 0,2 ml de solucin de
tromboplastina
previamente incubando en un bao mara de 10 a 15 minutos a 37 .
2.
A cada uno aadir 0,1 ml de plasma en plaquetas problema y testigo, al mismo
tiempo que se dispara el cronmetro.
3.
Anotar el tiempo en segundos que tardo en aparecer el cogulo.
Clculos:
Si la tromboplastina es adecuada el valor correspondiente al plasma testigo est
entre 12 14 segn
El tiempo de QUICK del paciente puede expresarse:
En segundos

En tanto por ciento (%) con respecto al testigo normal

Puede expresarse en proporcin, dividiendo el tiempo del plasma problema por el
tiempo del testigo o control, esto se denomina Ratio o Razn.
IRN ( Razn Normalizada Internacional ). Es muy utilizada ya que puede ser comparada
entre los laboratorios:
INR = (Ratio)ISI
Valor normal de INR 0,9 1.15
Valores normales:
El rango normal es de 11 a 13,5 segundos (el concepto de "normal" vara segn el
laboratorio).
Para una persona con terapia anticoagulante completa, el TP debe ser de 2 a 3 veces el
valor de "control" del laboratorio.
Observaciones:
La coagulacin resulta de una secuencia (cascada) de reacciones que involucran los
factores de coagulacin, por ejemplo el factor I y el factor II. Algunos de estos factores
tienen otros nombres como, por ejemplo, Factor I (fibringeno), Factor II (protrombina)
y Factor XII (factor Hageman).
Estas protenas se producen en el hgado y se segregan en la sangre y algunos de
estos factores (es decir, II, VII, IX y X) requieren vitamina K para su sntesis. La
sustancia qumica cumadina (warfarina) es un medicamento anticoagulante usado
regularmente que acta inhibiendo la enzima que requiere vitamina K en el hgado, la
cual impide la formacin de algunos de los factores coagulantes, inhibiendo de esta
manera la coagulacin.
La secuencia de coagulacin se inicia cuando los factores de coagulacin entran en
contacto con el tejido daado y cada reaccin del factor de coagulacin activa la
prxima reaccin. El producto final de la cascada es el cogulo de fibrina (cogulo de
sangre).
El factor X se puede activar por medio de dos secuencias separadas de reacciones
qumicas. A los factores involucrados en las dos secuencias se les llama el sistema
intrnseco y extrnseco. El primero involucra la activacin de los factores de Hageman
por medio del tejido que normalmente no se encuentra en contacto con la sangre,
seguido por el funcionamiento secuencial de los factores XI, IX y X, en presencia del
VIII.
El segundo simplemente involucra la activacin del factor VII por tromboplastina
(tambin llamado factor tisular), que es una protena liberada de las membranas de los
tejidos daados.
El TP se utiliza para evaluar la suficiencia del sistema extrnseco y la ruta frecuente en
la coagulacin; adems, mide la capacidad de coagulacin de los factores I
(fibringeno), II (protrombina), V, VII y X. Igualmente, cuando cualquiera de estos
factores est presente en cantidades deficientes, el TP se prolonga.

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11

TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA/

(TPT)
Introduccin
Siempre que se rompe un vaso sanguneo, los tejidos lesionados que lo rodean,
o los bordes desgarrados del propio vaso, liberan un material lipoproteico
denominado tromboplastina. Este, a su vez, reacciona con los iones de calcio y
con varios factores proteicos del plasma sanguneo, para producir activadores
de protrombina.
La activacin de la actividad trombo plasmtico se realiza por va intrnseca y
extrnseca , esta actividad se presenta por el factor IX activado, junto con el
factor 3 plaquetario, calcio y el factor VIII resultado de la va intrnseca; y con el
VII activado, fosfolpidos tisulares, calcio resultado se la va extrnseca.
El tiempo de tromboplastina parcial activada (T.T.P.A.)
Constituye una medida del sistema intrnseco, depende de la totalidad de
factores, excepto calcio, plaquetas y factores VII y XII.
Fundamento
Al plasma anticuagulado se le induce la coagulacin reponiendo el calcio que
fue inactivado con el anticoagulante y agregando una tromboplastina parcial y
un activador de contacto para iniciar la va intrnseca. El anticoagulante
remueve el calcio de la sangre y la centrifugacin, las plaquetas. Los
fosfolpidos reemplazan a las plaquetas.
Material y aparatos
Equipo para puncin venosa
Tubos de ensayo fr 12x75mm
Pipetas serolgicas 1 ml
Gradilla
Pipeta Pasteur con bulbo
Algodn con alcohol al 70%
Tuvo con citrato al vacio
Bao Mara a 37C
Centrifuga
Tromboplastina parcial liquido activada
Cloruro de calcio 0.02m
Sangre venoso obtenida con citrato
Metodologa
1. Todas las muestras de deben realizar siempre por duplicado
2. Antes de transcurridos 30 minutos , de la extraccin de la muestra ,
centrifugar la sangre a 750rpm, durante 5 minutos.
3. Separar el plasma y conservarlo en refrigeracin hasta su proceso.
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4. En tubos de ensayo, incubar a 37C el cloruro de calcio 0.02M y la

tromboplastina, durante 3 minutos, por lo menos. Calcular la cantidad
necesaria para las pruebas que se van a realizar
5. Colocar un tubo de ensayo 0.1ml de la tromboplastina parcial previamente
incubada y dejar incubar exactamente 2 minutos
6. Agregar 0.1ml de la tromboplastina parcial previamente incubada y dejar
incubar exactamente 2 minutos.
7. Transcurrido ese tiempo, agregar 0.1ml del cloruro de calcio 0,02M echando
a andar el cronometro y el cuagulometro.
8. Al iniciarse el coagulo, el cronometro de detendr. Anotar el tiempo, en
segundos, en que esto ocurri.
Comentarios:
el T.T.P.A. nos mide factores involucrando en las vas intrnsecas y comn. Por
ello, es muy utilizado en el monitoreo de terapia con heparina y como mtodo
para buscar deficiencia de los factores que intervienen en dichas vas.
Es importante establecer sus propios valores de referencia en cada laboratorio,
de acuerdo con el reactivo y el equipo utilizado.
Valores de referencia
Son variables para cada laboratorio y para cada reactivo generalmente cifra
alrededor de:
T.T.P.A 25 a 40 segundos

13

TIEMPO DE TROMBINA
Introduccin:
La trombina se parece a su precursora, la protrombina, aunque su peso molecular sea
inferior. Es la enzima activa que transforma el fibringeno en fibrina y n se encuentra
en la sangre perifrica. Es una sustancia muy potente, capaz de transformar en fibrina
cantidades de fibringeno equivalentes a muchos cientos de veces su propio peso, la
unidad de trombina es la cantidad que coagula 1 ml, de solucin estndar de
fibringeno en 15 segundos de 38c, durante la trasformacin del fibringeno en
fibrina, gran parte de la trombina desaparece. La accin de la trombina sobre el
fibringeno parece consistir en la separacin de un pptido, deja libre una glicina
terminal. Puesto que la trombina es una sustancia potentsima, es evidente que el
organismo debe poseer sistemas iguales potentes para inactivar o imitar su actividad.
Fundamento:
La trombina es una enzima que tiene una accin altamente especfica sobre el
fibringeno, transformndolo en fibrina, aun sin la presencia de calcio. La velocidad de
coagulacin con trombina es conocida como tiempo de trombina y es inversamente
proporcional a la cantidad y funcionalidad del fibringeno y directamente proporcional
a la accin de inhibidores de la trombina, como la heparina.
Material y aparatos:
Tubos de ensayo 10 x 75 mm
Pipetas de 1.0 ml
Pipeta Pasteur
Equipo para puncin venosa
Tubos al vaco con citrato
Gradilla
Cronometro
Bao mara a 37 C
Centrifuga
Trombina humana a 4U/ml
Sangre Venosa obtenida con citrato de sodio.

Metodologa:
1. Todas las muestras se deben realizar siempre por duplicado.
2. Antes de transcurridos 30 minutos de la extraccin, centrifugar la sangre a 750 rpm,
durante 5 minutos.
3. Separar el plasma y conservarlo en refrigeracin hasta su proceso.
4. Incubar durante 2 minutos, a 37 C, la solucin de trombina necesaria para las
pruebas que se van a realizar.
5. En un tubo de ensayo incubar a 37 C 0.1 ml. Del plasma problema, durante 2
minutos.
6. Agregar 0.1 de la solucin de trombina de 4 U/ml y echar a andar simultneamente
el cronometro.
7. Al iniciarse el coagulo, el cronometro se detendr anotar el tiempo, en segundos en

14

que esto ocurri.

8. El tubo se deja en reposo y al cabo de 1 minuto se observa la integridad del coagulo.

Comentarios:
El T.T. es un buen mtodo para poder investigar trastornos cualitativos y cuantitativos
del fibringeno, o la presencia de inhibidores de la conversin fibringeno-fibrina, como
la heparina.
En caso de no disponer de trombina de 4U/ml, se puede utilizar una concentracin de
5000U/ml, y hacer disolucin necesaria con solucin salina isotnica para obtener una
concentracin final de 5U/ml.

Valores de referencia:
Es variable para cada laboratorio, de acuerdo con el reactivo, el equipo utilizado y la
concentracin de la trombina, por lo que es necesario establecer los valores de
referencia en lada laboratorio.
Generalmente, se estandariza la concentracin de trombina y se obtienen en plasmas
normales los siguientes valores:
Tiempo de trombina: 10 a 15 segundos
Cualquier diferencia de lo por lo menos 5 segundos respecto al testigo normal, se
considera significativa.

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RETRACCION DEL COAGULO

Introduccin:
El tapn hemostasico de plaquetas que se forma como resultado de la hemostasia
primaria, crece hasta que consigue cerrar la abertura en el vaso. Durante este tiempo,
las plaquetas del tapn metabolizan glucosa y producen atp de late energa este inicia
la contraccin de una protena de las plaquetas parecida a la actinomiosina llamada
trombostenina que es la causante de la retraccin del coagulo. Esta retraccin ocurre
una vez estabilizado el coagulo, por contraccin de las protenas fibrilares del
citoesqueleto plaquetario, de las glicoprotenas receptoras de membrana de la propia
fibrina, el coagulo que se retrae queda firmemente adherido a la pared vascular.
Al contraerse el coagulo los hilos de fibrina se contraen gradualmente y expulsan el
plasma del coagulo, aunque se retienen eritrocitos, plaquetas y otros elementos
slidos. El plasma expulsado del coagulo tiene poco o nada de fibringeno porque se
ha convertido en fibrina y se llama suero. Para que ocurra retraccin mxima del
coagulo, la sangre debe poseer nmero adecuado de plaquetas.
Fundamento:
Al coagularse en forma espontnea la sangre, se forma una masa solida con todos los
componentes sanguneos. Con el tiempo, la accin de las plaquetas sobre la red de
fibrina retrae el coagulo reduciendo su masa.
Material y aparatos:
Tubos de centrifuga de 10 ml graduados.
Tapn de hule para los tubos con alambre de cobre de un mm de grosor con el
extremo distal enroscado unas 10 vueltas.
Jeringa de 10 ml con aguja del #22 desechable.
Torundas de alcohol al 70%.
Bao mara.
Sangre venosa obtenida con citrato de sodio.
Metodologa:
1. En el tubo de centrifuga graduado, colocar 5 ml de sangre venosa recientemente
extrada.
2. Tapar con el tubo de hule el tubo introduciendo el alambre de cobre hasta el fondo
del tubo .
3. Incubarlo en bao mara a 37C, durante una hora.
4. Transcurriendo ese tiempo, sacar cuidadosamente el alambre con el coagulo
adherido, permitiendo que el plasma escurra dentro del tubo durante unos 2 minutos.
5. Leer el volumen que queda en el tubo y anotarlo como porcentaje con relacin del
volumen total de sangre inicial. Utilizando una regla de tres, de la siguiente manera:
Volumen inicial
5 ml ________ 100%
Volumen liquido
Exudado ________ X

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Comentarios:
Es una prueba gruesa para medir la capacidad de las plaquetas para retraer el coagulo,
aunque tambin es influida por el fibringeno y por el hematocrito.
Valores de referencia:
Con este mtodo la retraccin del coagulo tiene como valores de referencia de 40 a
65%.

DETERMINACION DEL
FIBRINOGENO
INTRODUCCION:
El fibringeno plasmtico puede ser cuantificado mediante diferentes mtodos. Sin
embargo, actualmente se suelen utilizar aquellos que exploran sus capacidades
funcionales o antignicas.
La determinacin cronomtrica de fibringeno, segn el mtodo de von Clauss, se basa
en la medicin del tiempo que tarda un exceso de trombina en degradar a fibrina el
fibringeno presente en un PPP diluido y en formar el cogulo.
El tiempo que tarda en originarse el cogulo de fibrina depende, exclusivamente, de la
cantidad inicial de fibringeno y es inversamente proporcional a la concentracin de
ste en el plasma estudiado (fibrinogenemia).
En estas condiciones, el logaritmo del tiempo de coagulacin est en relacin lineal con
el logaritmo de la fibrinogenemia.

FUNDAMENTO:

Segn el mtodo de von Clauss ,se basa en en medir el tiempo que tarda un exceso de
trombina en degradar a fibrina el fibringeno presente en un PPP diluido y en formar el
coagulo.
El tiempo que tarda en formarse el cogulo de fibrina depende, de la cantidad inicial de
fibringeno y es inversamente proporcional a la concentracin de est en el plasma
estudiado (fibrinogenemia ).

MATERIAL:

Una gradilla.

6 tubos de ensayo de plstico.

Una pre pipeta de seguridad.

Una pipeta graduada de vidrio de 1 ml , de 5 ml y de 2ml.

Una pipeta automtica de 100ul y de 200ml.

Puntas de pipeta (amarillas).

Un rotulador.

6 cubetas de coagulmetro.

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Un coagulmetro.

6 trocitos de acero para depositar en las cubetas.

Un bolgrafo.

Una hoja de papel de tipo logartmico.

Bata, guantes, papel de filtro.

REACTIVOS:
Un kit de fibringeno:
- R 1: es trombina bovina.
- R 2 : es tampn imidazol
-R 3 :solucin caoln.
-Control normal coagulation.
Plasma pobre en plaquetas (PPP).

TECNICA
1.

En una cubeta se prepara 50 l de muestra y 450 l del tampn de imidazol (R 2)

2.

Despus, del paso 1, preparamos 200 l de la dilucin y 20 l de R 3.

3.

Atemperar a 37 C unos 5 minutos.

4.

Se pone la varilla de acero.

5.

Una vez atemperado, se coloca en la celda medidora del coagulmetro.

6.

Se realiza con el programa "PT" porque el fibringeno no est calibrado.

7.

Aadimos 100 l de R1 y se pulsa ok.

8.

Hacer la curva con los datos de la tabla.

9.

Interpolar los resultados del coagulmetro a la curva.

COMENTARIO
Si el resultado final determinado en la muestra es menor que 7 segundos, la
fibrinogenemia es muy alta, por lo que se ha de repetir la determinacin, pero
partiendo de una dilucin de 1/20 (100l de muestra + 1.900l de tampn veronal), y
el resultado nuevo se debe dividir entre 2.
Para establecer la fibrinogenemia de la muestra se ha de trazar, previamente, en papel
bi-logartmico, una curva de referencia o de calibracin. Para ello, se anotan en el eje
de ordenadas (la y) los valores en segundos del tiempo en el que coagulan cada una de
las diluciones del plasma calibrador, y en el eje de abscisas (el horizontal) las
concentraciones de fibringeno que corresponden a cada una de ellas.
Posteriormente, se sealan en la grfica los puntos y se traza la lnea, en la cual
interpolamos la lectura que nos ha dado el coagulmetro.
La fibrinogenemia normal oscila entre los 150 y los 450 mg/dl.

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La formacin de fibringeno y, por tanto su concentracin plasmtica, puede estar

disminuida por trastornos congnitos o adquiridos.
La fibrinogenemia asciende, de una forma inespecfica, en multitud de procesos
inflamatorios, debido a que es un rectante de fase aguda.
La lectura de nuestro resultado ha sido 16,8, que interpolado a la curva, nos da una
actividad del 80% ms o menos.
Para hacer la curva hemos cogido los siguientes datos:
concentracin de 79,74 --- 47 segundos
concentracin de 239 ------ 16 segundos
concentracin de 478 ------- 11
Las otras concentraciones no las he podido coger para realizar la grafica ya que sali
un resultado mucho mayor que la ultima concentracin

BIBLIOGRAFIA
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