Ingeniera gentica

La ingeniera gentica, tambin llamada biogentica es la tecnologa del control y transferencia

de ADN de un organismo a otro, lo que posibilita la creacin de nuevas especies, la correccin de
defectos genticos y la fabricacin de numerosos compuestos.

Aparicin de la gentica
En 1953 se descubri el fenmeno llamado de restriccin: ciertos fagos (virus bacteriano) que parasitan
a E. coli podan desarrollarse en ciertas cepas de esta bacteria, pero no podan hacerlo en otras (se dice
que estn "restringidos" en determinadas cepas).
A finales de los 60, Werner Arber, en Basilea, descubre las enzimas de restriccin responsables de ese
fenmeno: la cepa de bacteria restrictiva produce unas endonucleasas que escinden el ADN del fago
crecido en otra cepa diferente.
Esas primeras enzimas de restriccin eran inespecficas en cuanto al sitio del ADN donde cortaban, pero
en 1970 Hamilton O. Smith, en Baltimore, descubre un nuevo tipo de enzima de restriccin totalmente
especfica: capaz de reconocer una determinada secuencia de ADN, de unos pocos pares de bases, y de
cortar en ambas cadenas en lugares concretos.
En 1972, Mertz y Davis aadieron a una mezcla de ADN de diferentes orgenes una enzima ADN-ligasa,
procurando que se reparasen los enlaces fosfodister. Y esto les hizo darse cuenta de que podan
constituir la base para la produccin de molculas recombinantes in vitro, con material gentico de
diferentes especies.
Pero este ADN recombinante, generado en el tubo de ensayo, es inerte, no es ms que una
macromolcula hbrida que por s sola no hace nada. Si queremos que el ADN recombinante haga algo,
hay que introducirlo en clulas vivas que sean capaces de expresar su informacin gentica.
Esto nos lleva ya a la idea de lo que es la Ingeniera Gentica: la formacin in vitro de nuevas
combinaciones de material gentico, por medio de la insercin de un ADN de inters en un vehculo
gentico (vector), de modo que tras su introduccin en un organismo hospedero el ADN hbrido
(recombinante) se pueda multiplicar, propagar, y eventualmente expresarse.

Gentica en seres vivos

Ingeniera gentica en bacterias
Son los seres vivos ms utilizados en Ingeniera Gentica. La ms utilizada es la Escherichia coli. Se usa
prcticamente en todos los procesos de I.G.

Ingeniera gentica en levaduras y hongos

Son junto con las bacterias los sistemas ms utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el primer
sistema eucariota secuenciado completamente. Otra levadura importante es P. pastoris, utilizada para

conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo continuo. En el campo de los hongos
destaca por su labor mdica el Penicillium.
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Gentica en animales

La manipulacin gentica de los animales persigue mltiples objetivos: aumentar el rendimiento del
ganado, producir animales con enfermedades humanas para la investigacin, elaborar frmacos, etc.
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Gentica en plantas

Actualmente se han desarrollado plantas transgnicas de ms de cuarenta especies. Mediante ingeniera

gentica se han conseguido plantas resistentes a enfermedades producidas por virus, bacterias o
insectos. Estas plantas son capaces de producir antibiticos, toxinas y otras sustancias que atacan a los
microorganismos.

Ingeniera gentica en humanos

Terapia somtica celular. Uno o ms tejidos son sometidos a la adicin de uno o ms genes teraputicos,
mediante tratamiento directo o previa extirpacin del tejido. Esta tcnica se ha utilizado para el
tratamiento de cnceres o enfermedades sanguneas, hepticas o pulmonares.

Ingeniera gentica
1. Introduccin
Todo organismo, an el ms simple, contiene una enorme cantidad de informacin. Esta informacin se
encuentra almacenada en una macromolcula que se halla en todas las clulas: el ADN. Este ADN est
dividido en gran cantidad de sub-unidades (la cantidad vara de acuerdo con la especie) llamadas genes.
Cada gen contiene la informacin necesaria para que la clula sintetice una protena. As, el genoma (y
por consecuencia el proteoma), va a ser la responsable de las caractersticas del individuo. Los genes
controlan todos los aspectos de la vida de cada organismo, incluyendometabolismo,
forma, desarrollo y reproduccin. Por ejemplo, la sntesis una protena X har que en el individuo se
manifieste el rasgo "pelo oscuro", mientras que la protena Y determinar el rasgo "pelo claro".
Vemos entonces que la carga gentica de un determinado organismo no puede ser idntica a la de otro,
aunque se trate de la misma especie. Sin embargo, debe ser en rasgos generales similar para que la
reproduccin se pueda concretar. Y es que una de las propiedades ms importantes del ADN, y gracias a
la cual fue posible la evolucin, es la de dividirse y fusionarse con el ADN de otro individuo de la misma
especie para lograr descendencia diversificada.
Otra particularidad de esta molcula es su universalidad. No importa cun diferente sean dos especies:
el ADN que contengan ser de la mismanaturaleza: cido nucleico. Siguiendo este razonamiento, y
teniendo en cuenta el concepto de gen, surgen algunas incgnitas: Son compatibles las cargas
genticas de especies distintas? Puede el gen de una especie funcionar y manifestarse en otra
completamente distinta? Se puede aislar y manipular el ADN?
La respuesta a todas estas preguntas se resume en dos palabras: Ingeniera Gentica.

2. Definicin de Ingeniera Gentica

La Ingeniera Gentica (en adelante IG) es una rama de la gentica que se concentra en el estudio del
ADN, pero con el fin su manipulacin. En otras palabras, es la manipulacin gentica de organismos con
un propsito predeterminado.
En este punto se profundizar el conocimiento sobre los mtodos de manipulacin gnica. El fin con el
cual se realizan dichas manipulaciones se tratar ms adelante, cuando se analicen los alcances de
esta ciencia.
Enzimas de restriccin.
Como ya se dijo, la IG consiste la manipulacin del ADN. En este proceso son muy importantes las
llamadas enzimas de restriccin, producidas por varias bacterias. Estas enzimas tienen la capacidad de
reconocer una secuencia determinada de nucletidos y extraerla del resto de la cadena. Esta secuencia,
que se denomina Restriction Fragment Lenght Polymophism o RLPM, puede volver a colocarse con la
ayuda de otra clase de enzimas, las ligasas. Anlogamente, la enzima de restriccin se convierte en una

"tijera de ADN", y la ligasa en el "pegamento". Por lo tanto, es posible quitar un gen de la cadena
principal y en su lugar colocar otro.
Vectores.
En el proceso de manipulacin tambin son importantes los vectores: partes de ADN que se pueden
autorreplicar con independencia del ADN de la clula husped donde crecen. Estos vectores permiten
obtener mltiples copias de un trozo especfico de ADN, lo que proporciona una gran cantidad de
material fiable con el que trabajar. El proceso de transformacin de una porcin de ADN en un vector se
denomina clonacin. Pero el concepto de clonacin que "circula" y est en boca de todos es ms amplio:
se trata de "fabricar", por medios naturales o artificiales, individuos genticamente idnticos.
ADN polimerasa.
Otro mtodo para la produccin de rplicas de ADN descubierto recientemente es el de la utilizacin de
la enzima polimerasa. ste mtodo, que consiste en una verdadera reaccin en cadena, es ms rpido,
fcil de realizar y econmico que la tcnica de vectores.

3. Terapia Gnica.
La terapia gnica consiste en la aportacin de un gen funcionante a las clulas que carecen de
esta funcin, con el fin de corregir una alteracin gentica o enfermedad adquirida. La terapia gnica se
divide en dos categoras.
I.

Alteracin de clulas germinales (espermatozoides u vulos), lo que origina

un cambio permanente de todo el organismo y generaciones posteriores. Esta terapia no se utiliza
en seres humanos por cuestiones ticas.

II.

Terapia somtica celular. Uno o ms tejidos son sometidos a la adicin de uno o ms genes
teraputicos, mediante tratamiento directo o previa extirpacin del tejido. Esta tcnica se ha
utilizado para el tratamiento de cnceres o enfermedades sanguneas, hepticas o pulmonares.

4. Aplicaciones
La Ingeniera gentica tiene numerosas aplicaciones en campos muy diversos, que van desde
la medicina hasta la industria. Sin embargo, es posible hacer una clasificacin bastante simple bajo la
cual se contemplan todos los usos existentes de estas tcnicas de manipulacin gentica: aquellos que
comprenden la terapia gnica, y aquellos que se encuentran bajo el ala de la biotecnologa.

5. Usos de la terapia gnica.

"En marzo de 1989, los investigadores norteamericanos Steve Rosenber y Michael Blease, del Instituto
Nacional del Cncer, y French Anderson, del Instituto Nacional del Corazn, Pulmn y Sangre,
anunciaron su intencin de llevar a cabo un intercambio de genes entre seres humanos, concretamente
en enfermos terminales de cncer.
Los genes trasplantados no haban sido diseados para tratar a los pacientes, sino para que actuaran
como marcadores de las clulas que les fueron inyectados, unos linfocitos asesinos llamados
infiltradores de tumores, encargados de aniquilar las clulas cancergenas.
Las vctimas de cncer murieron, pero la transferencia haba sido un xito "
Este fue uno de los primeros intentos de utilizar las tcnicas de IG con fines teraputicos.

Hoy el desafo de los cientficos es, mediante el conocimiento del Genoma Humano, localizar "genes
defectuosos", informacin gentica que provoque enfermedades, y cambiarlos por otros sin tales
defectos.
La ventaja quiz ms importante de este mtodo es que se podran identificar en
una persona enfermedades potenciales que an no se hayan manifestado, para o bien reemplazar el gen
defectuoso, o iniciar un tratamiento preventivo para atenuar los efectos de la enfermedad. Por ejemplo,
se le podra descubrir a una persona totalmente sana un gen que lo pondra en un riesgo de disfunciones
cardacas severas. Si a esa persona se le iniciara un tratamiento preventivo, habra posibilidades de que
la enfermedad no llegue nunca.
A travs de una tcnica de sondas genticas, se puede rastrear la cadena de ADN en busca de genes
defectuosos, responsables de enfermedades genticas graves.
Si bien la informacin del Genoma Humano fue recientemente descubierta, ya se han localizado los
"locus" de varias enfermedades de origen gentico. He aqu algunas de ellas:
Hemofilia Alcoholismo Corea de Huntigton Anemia Falciforme Fibrosis qustica Hipotiroidismo
Congnito Retraso Mental Miopata de Duchenne Manacodepresin Esquizofrenia Sndrome
de Lesch Nyhan Deficencia de ADA Hidrocefalia Microcefalia Labio Leporino Ano Imperfecto o
Imperforacin Espina Bfida.
Pero los alcances de la terapia gnica no slo se limitan a enfermedades genticas, sino tambin a
algunas de origen externo al organismo: virales, bacterianas, protozoicas, etc. En febrero de este ao,
por ejemplo, se anunci que un grupo de cientficos estadounidenses emple tcnicas de terapia gnica
contra el virus del SIDA. Sintetizaron un gen capaz de detener la multiplicacin del virus responsable de
la inmunodeficiencia, y lo insertaron en clulas humanas infectadas. El resultado fue exitoso: el virus
detuvo su propagacin e incluso aument la longevidad de ciertas clulas de defensa, las CD4.
Otra tcnica peculiar inventada recientemente es la del xenotransplante. Consiste en inocular genes
humanos en cerdos para que crezcan con sus rganos compatibles con los humanos, a fin de utilizarlos
para transplantes.
Esto nos demuestra que la Ingeniera Gentica aplicada a la medicina podra significar el futuro
reemplazo de las tcnicas teraputicas actuales por otras ms sofisticadas y con mejores resultados. Sin
embargo, la complejidad de estos mtodos hace que sea todava inalcanzable, tanto por causas
cientficas como econmicas.

6. Biotecnologa.
Pero el conocimiento de los genes no slo se limita a la Medicina. La posibilidad de
obtener plantas y animales trangnicos con fines comerciales es demasiado tentadora como para no
intentarlo.
Las biotecnologas consisten en la utilizacin de bacterias, levaduras y clulas animales en cultivo para
la fabricacin de sustancias especficas. Permiten, gracias a la aplicacin integrada de los conocimientos
y tcnicas de la bioqumica, la microbiologa y la ingeniera qumica aprovechar en el plano tecnolgico
las propiedades de los microorganismos y los cultivos celulares. Permiten producir a partir
de recursos renovables y disponibles en abundancia gran nmero de sustancias y compuestos.
Aplicadas a escala industrial, las tales biotecnologas constituyen la bioindustria, la cual comprende las
actividades de la industria qumica: sntesis de sustancias romticas saborizantes, materias
plsticas, productos para la industria textil; en el campo energtico la produccin de etanol, metanol,

biogas e hisrgeno; en la biomineralurgia la extraccin de minerales. Adems, en algunas actividades

cumplen una funcin motriz esencial: la industria alimentaria (produccin masiva de levaduras, algas y
bacterias con miras al suministro de protenas, aminocidos, vitaminas y enzimas); produccin agrcola
(donacin y seleccin de variedades a partir de cultivos de clulas y tejidos, especies vegetales y
animales trangnicas, produccin de bioinsecticidas); industria farmacutica (vacunas, sntesis
de hormonas, interferones y antibiticos); proteccin del medio ambiente (tratamiento de aguas servidas,
transformacin de deshechos domsticos, degradacin de residuos peligrosos y fabricacin de
compuestos biodegradables).
Los procesos biotecnolgicos ms recientes se basan en las tcnicas de recombinacin gentica
descritas anteriormente.
A continuacin se detallan las aplicaciones ms comunes.

7. Industria Farmacutica.
Obtencin de protenas de mamferos.
Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de coagulacin, etc. tienen
un inters mdico y comercial muy grande. Antes, la obtencin de estas protenas se realizaba mediante
su extraccin directa a partir de tejidos o fluidos corporales.
En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas protenas
humanas en microorganismos adecuados para su fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la
produccin de insulina que se obtiene a partir de la levadura Sacharomces cerevisae, en la cual se clona
el gen de la insulina humana.
Obtencin de vacunas recombinantes.
El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos inactivos, puede
comportar un riesgo potencial.
Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por IG. Como la mayora de los
factores antignicos son protenas lo que se hace es clonar el gen de la protena correspondiente.

8. Agricultura.
Mediante la ingeniera gentica han podido modificarse las caractersticas de gran cantidad de plantas
para hacerlas ms tiles al hombre, son las llamadas plantas transgnicas. Las primeras plantas
obtenidas mediante estas tcnicas fueron un tipo de tomates, en los que sus frutos tardan en madurar
algunas semanas despus de haber sido cosechados.
Recordando que la clula vegetal posee una rgida pared celular, lo primero que hay que hacer es
obtener protoplastos.
Vamos a ver las tcnicas de modificacin gentica en cultivos celulares. Estas clulas pueden someterse
a tratamientos que modifiquen su patrimoniogentico. Las tcnicas se clasifican en directas e indirectas.
Entre las tcnicas indirectas cabe destacar la transformacin de clulas mediada por Agrobacterium
tumefaciens.
Esta bacteria puede considerarse como el primer ingeniero gentico, por su particular mecanismo
de accin: es capaz de modificar genticamente la planta hospedadora, de forma que permite su
reproduccin. Esta bacteria es una autntica provocadora de un cncer en la planta en la que se
hospeda.

Las tcnicas directas comprenden la electroporacin, microinyeccin, liposomas y otros mtodos

qumicos.
Entre los principales caracteres que se han transferido a vegetales o se han ensayado en su
transfeccin, merecen destacarse:
Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas.
Ya se dispone de semillas de algodn, que son insensibles a herbicidas. Para la resistencia a los
insectos se utilizan cepas de Bacillus thuringiensis que producen una toxina (toxina - Bt) daina para las
larvas de muchos insectos, de modo que no pueden desarrollarse sobre las plantas transgnicas con
este gen. Respecto a los virus se ha demostrado que las plantas transgnicas con el gen de la protena
de la cpsida de un virus, son resistentes a la invasin de dicho virus.
Incremento del rendimiento fotosinttico.
Para ello se transfieren los genes de la ruta fotosinttica de plantas C4 que es ms eficiente.
Mejora en la calidad de los productos agrcolas.
Tal es el caso de la colza y la soja transgnicas que producen aceites modificados, que no contienen los
caracteres indeseables de las plantas comunes.
Sntesis de productos de inters comercial.
Existen ya plantas transgnicas que producen anticuerpos animales, interfern, e incluso elementos de
un polister destinado a la fabricacin deplsticos biodegradables
Asimilacin de nitrgeno atmosfrico.
Aunque no hay resultados, se ensaya la transfeccin del gen nif responsable de la nitrogenasa, existente
en microorganismos fijadores de nitrgeno, y que permitira a las plantas que hospedasen dicho gen,
crecer sin necesidad de nitratos o abonos nitrogenados, aumentando la sntesis de protenas de modo
espectacular.