TOXICOLOGA

IESCH
Universidad
Salazar

MANUAL DE PRCTICAS
TOXICOLOGA

LICENCIATURA EN:
TUXTLA GUTIRREZ, CHIAPAS
Agosto DEL 2014

QUMICO
FARMACUTICO
BILOGO

DOCENTE: Q.F.B. Gloria Zepeda Ramos

TOXICOLOGA

CONTENIDO

Misin y Visin Institucional.............................................3

Misin y Visin de la Carrera............................................4
Perfil del Egresado.............................................................5
Introduccin a la Toxicologa............................................6
Reglamento del Laboratorio..............................................7
Reglas de Seguridad........................................................11
Criterios de Calificacin..................................................15
Formato de Reporte de Prcticas...................................16
Prcticas de Laboratorio.................................................18

TOXICOLOGA

MISION Y VISION DEL IESCH

El Instituto de Estudios Superiores de Chiapas, tiene por Misin:

Formar al ser humano, fomentando el desarrollo de actitudes, valores, habilidades

y conocimientos en pertinencia y vinculados con el entorno econmico, social,
poltico y cultural que demanda nuestra regin y el pas

Y por Visin:

Ser una Institucin integrada a los sectores productivos y sociales que conjunten
actividades docentes y de investigacin con el servicio y mejora de nuestro estado
y pas, acorde al proceso de globalizacin actual, fomentando excelencia y calidad

TOXICOLOGA

MISION Y VISION DE LA LICENCIATURA

La licenciatura en Qumico Farmacutico Bilogo, tiene por Misin:

Formar profesionales en Qumico Farmacutico Bilogo con capacidad para la

produccin de bienes y servicios para la salud y para realizar actividades de
intervencin, investigacin y docencia que respondan a las necesidades
individuales y colectivas que demanda nuestra

regin y pas, con una visin

integral del ser humano y con alto sentido de responsabilidad y humanismo

Y por Visin:

Ser una licenciatura con alto nivel acadmico y amplio reconocimiento social,
lder en la formacin de profesionales qumico farmacutico bilogo; integrada a
los sectores productivos y sociales que vincule actividades de docencia,
investigacin y servicio, acorde al proceso de globalizacin actual, fomentando la
excelencia y la calidad en su quehacer diario

TOXICOLOGA

PERFIL DEL EGRESADO

El egresado de la carrera de qumica farmacutico biolgica deber poseer los

conocimientos habilidades y aptitudes para poder colaborar en el equipo de salud
realizando funciones especficas en la investigacin, desarrollo, preparacin y control de
frmacos y medicamentos, teniendo la responsabilidad social para fabricar y/o distribuir al
pblico los medicamentos y la informacin necesaria de los mismos. Desarrollar,
supervisar, Investigar y realizar los procedimientos y tcnicas analticas en el rea de la
salud colaborando en la resolucin de problemas de salud relacionados con la
prevencin, diagnstico y control de enfermedades de acuerdo con la normatividad del
pas y las recomendaciones

internacionales. Participar en el establecimiento de la

normatividad que rige las actividades del rea de Salud, colaborar en la verificacin,
peritaje y supervisin del cumplimiento de las normas. Adems de contar con los
conocimientos necesarios para incorporarse en estudios de postgrado, todo esto para
servir a la sociedad responsablemente contribuyendo as al desarrollo de su entorno
regional.

TOXICOLOGA

INTRODUCCIN AL LABORATORIO DE
TOXICOLOGA

La Toxicologa es el estudio de los productos txicos, toxinas y sus actividades, su forma,

estructura, cmo estn distribuidos en la naturaleza, sus relaciones con otros
compuestos, los efectos que ejercen sobre los humanos, y las alteraciones fsicas y
qumicas que provocan en su medio.
En este curso se estudiara principalmente la terminologa y los conceptos bsicos y
definitorios de la toxicologa, los principios generales de la respuesta sistemtica al efecto
de las sustancias txicas, mtodos de anlisis e identificacin de toxinas implicados en el
consumo de medicamentos, sustancias de abuso, alimentos y otras sustancias qumicas
de uso comn, as como poder discriminar sobre el beneficio/riesgo que pueden presentar
ciertas sustancias presentes en los antes mencionados.
Para cursar esta asignatura no tiene un requisito previo ya que es una materia optativa,
sin embargo el alumno deber tener conocimientos previos de Anatoma, Fisiologa y
Bioqumica para facilitar la comprensin de los principios y mecanismos de efectos txicos
sobre sistemas especficos.

TOXICOLOGA

REGLAMENTO DEL LABORATORIO

GENERALES:
El presente reglamento tiene como objetivo establecer las normas y conductas que
deben presentar catedrticos, alumnos y laboratoristas en el transcurso de las prcticas
de la materia de toxicologa, para establecer los parmetros de calificaciones asignadas a
los alumnos.

CAPITULO I
DEL LABORATORISTA
Artculo 1

El laboratorista permanecer en el laboratorio en el horario que le corresponde.

Tendr listo el material (cristalera, instrumental, reactivos y equipos) para las

prcticas dentro del laboratorio, de acuerdo a lo solicitado por el profesor, con tres
das de anticipacin por lo menos.

Entregar con debida cortesa, el material a los alumnos y a los profesores durante
el tiempo estipulado para cada sesin de laboratorio.

El material ser entregado durante los primeros 15 minutos.

Recibir y revisar que el material y el equipo estn en buen estado y en perfectas

condiciones de limpieza,

Auxiliar a los profesores en la preparacin de soluciones u otros reactivos que se

requieran para el desarrollo de la prctica.

Orientar a los estudiantes en el manejo y cuidado del equipo.

Tendr al da los inventarios fsicos, de cristalera, instrumental, reactivos y equipo

de laboratorio a su cargo y los entregar a fin de semestre a la Coordinacin de la
materia.
Mantendr el equipo en su sitio procurando su correcta utilizacin y bajo controles
de seguridad.

TOXICOLOGA

Ser el responsable absoluto de que el equipo de laboratorio este en perfecto

estado de uso (limpio, funcionando, etc.)

Controlar el regreso de material, equipo, etc., en el tiempo estipulado.

En casos estrictamente necesarios, se quedar unos minutos ms para facilitar la

prctica.

Al final del semestre le entregar a los alumnos un comprobante de No Adeudo

de material de Laboratorio.

Est prohibido comer, beber o fumar dentro del laboratorio.

CAPITULO II
DE LOS ALUMNOS
Artculo 2
El alumno deber llegar puntual a la hora correspondiente de la prctica. Se le
dar una tolerancia mxima de 10 minutos, transcurrido ese tiempo, no podr
ingresar al laboratorio.
Es indispensable el uso de la bata dentro del laboratorio, no se permite el uso de
filipina.
Est prohibido comer, beber o fumar dentro del laboratorio, cualquier incurrimiento
en lo antes mencionado anular el derecho a realizar la prctica.

Entrando al laboratorio, el alumno deber entregar los requisitos de la prctica a

realizar de lo contrario se anular dicha prctica.

Se deber entregar un Reporte de Prctica 8 das despus de haberla realizado.

El contenido del mismo ser indicado por el catedrtico.

El alumno deber cumplir con al menos el 80% de asistencias en el laboratorio

durante todo el ciclo escolar, para evitar la baja del curso prctico.

TOXICOLOGA

El Material biolgico necesario para la realizacin de las prcticas ser

proporcionado por los alumnos, el incumplimiento de esta disposicin anular el
derecho a realizar la prctica.

El alumno deber solicitar el material de laboratorio con un mximo de 3 das de

anticipacin, mediante un vale a los laboratorista, de lo contrario perder el
derecho de realizar la prctica.

Cualquier material que resulte daado durante la realizacin de la prctica deber

ser repuesto por el alumno a ms tardar en 8 das, de lo contrario perder el
derecho de realizar la siguiente prctica y su calificacin de ese mes ser
anulada.

La calificacin de laboratorio constituir el 20% de la calificacin global de la

materia.

El alumno presentar un examen terico de la prctica, durante el transcurso de

la realizacin de la misma.

La calificacin de cada prctica estar integrada por el reporte, la evaluacin

terica de la prctica y el desempeo durante la misma.

La calificacin mnima aprobatoria es de 6.0

Es requisito indispensable aprobar la teora para validar la calificacin del

Laboratorio.

Los alumnos que reprueben ms del 20% del total de las prcticas, se vern
obligados a presentar un Examen terico-prctico Final del Laboratorio, como
requisito indispensable para poder tomar en cuenta el porcentaje correspondiente
al Laboratorio para la calificacin final de la materia.

CAPITULO III
DE LOS PROFESORES
Artculo 3

El profesor deber llegar 10 minutos antes del inicio de la prctica para verificar
el orden y funcionamiento del material de laboratorio que se emplear en el
desarrollo de la misma.

TOXICOLOGA

La calificacin de laboratorio constituir el 20% de la calificacin global de la

materia.

El alumno presentar un examen terico de la prctica, durante el transcurso de

la realizacin de la misma.

La calificacin de cada prctica estar integrada por el reporte, la evaluacin

terica de la prctica y el desempeo durante la misma.

La calificacin mnima aprobatoria es de 6.0

Los alumnos que reprueben ms del 20% del total de las prcticas, se vern
obligados a presentar un Examen terico-prctico Final del Laboratorio, como
requisito indispensable para poder tomar en cuenta el porcentaje correspondiente
al Laboratorio para la calificacin final de la materia.

Est prohibido comer, beber o fumar dentro del laboratorio.

Las calificaciones mensuales debern entregarse al profesor titular a ms tardar

5 das antes de la aplicacin del examen mensual.

Se debern entregar al profesor 10 reactivos referentes a lo revisado durante el

mes para su inclusin en el examen mensual terico, a mas tardar 5 das antes de
la aplicacin de este,

Se deber proporcionar junto con las calificaciones, la relacin de alumnos que

adeudan material, as como las inasistencias para su contabilizacin.

10

TOXICOLOGA

MEDIDAS DE SEGURIDAD QUE DEBE TOMAR

DURANTE EL DESARROLLO DE LA PRCTICA
1. Leer antes su prctica. En ocasiones se le pedir traer materiales y si no los trae
no podr efectuar su prctica.
2. Traiga consigo siempre material de limpieza, como franela, detergente y jabn
neutro.
3. No coloque mochilas sobre su mesa de trabajo.
4. Tenga consigo siempre su manual de prcticas o diagrama de flujo de la misma.
5. Efectu solo lo que se le seala. Lo dems podra ocasionar riesgos.
6. Tome en cuenta las fuentes flamables: equipo elctrico, mecheros, tuberas de
gas, fuentes de calor, etc.
7. No utilice equipos de comunicacin mientras trabaja en el laboratorio.
8. No pruebe ni huela las sustancias qumicas a menos que se lo indique su profesor.
9. No se frote los ojos con las manos mientras se est trabajando, si necesita hacerlo
use un pauelo apropiado.
10. Antes de succionar pipetas, lvelas y squelas para no contaminar los reactivos.
11. Nunca mezcle sustancias qumicas a menos que el procedimiento se lo indique.
12. Si la meza de trabajo se ensucia, inmediatamente debe limpiarla con una toalla
hmeda para eliminar los residuos de los reactivos.
13. Deseche las sustancias segn las instrucciones de su profesor.
14. Cuando ponga a calentar tubos de ensayo, debe hacerlo inclinado este 45 C. en
direccin opuesta a sus compaeros y usted.
15. Use pinzas para manejar recipientes calientes.
16. No utilice la boca para pipetear sustancias qumicas, use una perilla.
17. En caso de quemaduras, avise al encargado de laboratorio o a su profesor.

11

TOXICOLOGA
18. Siempre deje limpia su mesa de trabajo y lave el material que utilizo con agua y
jabn, con un enjuague final con agua destilada.
19. Cuando utilice aparatos especiales, entrguelos limpios.
20. Entregue el material, reactivos y equipos.
21. Al concluir la practica qutese la bata y lvese las manos.

MANEJO DE EQUIPO Y CRISTALERIA.

a. Cercirese que la cristalera este limpia y sin dao al recibirla.
b. Si va a aplicar calor a la cristalera, revise que sea tipo Pyrex.
c. Si usted dao cristalera, debe inmediatamente informarlo al encargado de
laboratorio.
d. Toda la cristalera se lava con jabn y los tubos de ensayo se colocan en la gradilla
boca abajo.
e. No utilice termmetros como agitadores.
f.

Utilice esptulas limpias para recoger los reactivos slidos.

g. Limpie los goteros y las pipetas antes de usarlas para evitar contaminaciones.
h. Cuando tenga que utilizar equipos de los cuales desconozca su funcionamiento
pregunte al profesor.

MANEJO DE REACTIVOS.
i.

Antes de usar un reactivo qumico lea cuidadosamente la etiqueta, este le indica

nombre, formula, concentracin. Tome lo que necesita y cierre el recipiente.

ii.

No use ningn reactivo que no posea etiqueta.

iii.

Mantenga los reactivos en el lugar indicado por su profesor. Los cidos y base
fuertes mantngalos alejados de su mesa de trabajo.

iv.

Para medir volmenes de cidos y bases concentrados, use probetas o buretas.

Nunca pipetas.

v.

Al usar reactivos evite tocarse los ojos o la boca.

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TOXICOLOGA
vi.

Mucho de los solventes que se utilizan en laboratorio son flamables, entre ellos
estn el metanol, la acetona, el ter y el hexano. Por ello deben mantenerse lejos
de mecheros encendidos y deben de manejarse en campanas de extraccin de
vapores.

vii.

Los cidos y base fuertes deben de manejarse en campanas de extraccin de

vapores.

viii.

Al verter al drenaje cidos y bases fuertes deje correr mucha agua para diluirlos.

ix.

No vaci al drenaje material insoluble como grasas, ceras, vidrios, etc.

x.

Si se derramara cualquier reactivo sobre su piel u ojos, avise de inmediato a su

profesor.

xi.

No introduzca pipetas, goteros o cualquier otro objeto en los reactivos, salvo los
que este utilizando para evitar contaminacin.

xii.

No mezcle el contenido de varios tubos a menos que lo indique el procedimiento,

puede causar explosiones, calentamiento o vapores txicos.

xiii.

Vierta la solucin concentrada en la menos concentrada para evitar reacciones

violentas.

xiv.

Si se produjera derrame de sustancias voltiles, apague mecheros y equipo y

limpie el rea.

xv.

Lee las etiquetas de los reactivos para ver si es toxico, inflamable, irritante o
corrosivo.

Riesgo Biolgico

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TOXICOLOGA
PREPARACIN DEL REA DE TRABAJO:

La mesa de trabajo debe ser con cubierta de acero inoxidable, o cualquier material
plstico resistente al calor, humedad y corrosin, la cual debe mantenerse limpia y en
buen estado de conservacin. Contar con suficiente iluminacin, natural o artificial, sin
reflejos molestos sobre el analista. Sin objetos sobre de ella que vayan de ninguna
manera intervengan en el trabajo.
Distribuir los materiales dentro del rea de trabajo en tal forma que el movimiento del
material se realice de izquierda a derecha y siempre dentro del espacio suficiente para
realizar las maniobras con fluidez. Al concluir la ltima actividad en la mesa de trabajo,
proceder a su limpieza.
El analista estar provisto de bata manga larga, limpia y en buen estado. Bajo ninguna
circunstancia fumar, masticar o hablar en tanto se realiza el trabajo.

CRITERIOS DE CALIFICACIN
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TOXICOLOGA

A) DISCIPLINA:
1.- Se presenta puntual y correctamente vestido al laboratorio
2.- Utiliza el material requerido
3. Se comporta adecuadamente y con inters

B) DESARROLLO DE LA PRCTICA:
1.- Presenta su manual de prcticas
2.- Presenta el material qumico o biolgico que se le solicita para desarrollar la prctica
3.- Solicita material completo para realizar la prctica
4.- Define con claridad los trminos y conceptos relacionados a la prctica
5.- Conoce la finalidad de cada paso que se realiza en la prctica
6.- Sabe distinguir los diferentes reactivos y materiales utilizados
7.- Maneja con habilidad las tcnicas establecidas
8.- Observa los resultados que se obtienen y toma nota
9.- Entrega material limpio y completo al finalizar la prctica
10.- Reporta sus anotaciones individuales al catedrtico responsable de la prctica
11.- Reporte de prctica
EL REPORTE DE LABORATORIO DEBE CONTENER LOS SIGUIENTES PUNTOS:
15

TOXICOLOGA
1. TITULO DE LA PRACTICA
2. RESUMEN EJECUTIVO
3. PALABRAS CLAVE
4. INTRODUCCIN
5. OBJETIVO
6. MATERIALES Y METODOS
7. RESULTADOS
8. DISCUSION DE RESULTADOS
9. CONCLUSION
10. CUESTIONARIO
11. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
INSTRUCCIONES GENERALES PARA REALIZAR EL REPORTE DE PRCTICA.
1- Indicaciones para el reporte escrito:
Generales. Usar hojas blancas, tamao carta. Escribir con letra nmero
doce y margen izquierdo de 3 cm. Entregar las hojas grapadas, no clip, sin
carpeta. La entrega se realizar siete das despus de haberla concluido.

Portada. Deber realizarse en la primera hoja del reporte, el nombre del

instituto, de la licenciatura, nombre de la asignatura, el nmero de prctica y
nombre de la misma, nmero de equipo e integrantes, fecha, y de ah iniciar
el la misma con el resumen ejecutivo.

Resumen Ejecutivo. En forma concisa se informar sobre el objetivo de la

prctica, el equipo y las consideraciones principales del modelo, se
enfatizarn los resultados obtenidos, as como las limitaciones a su validez.

Palabras Clave.

Introduccin. Deber ser breve, no mayor de dos cuartillas y deber anotar

las citas bibliogrficas respectivas.

Objetivo(s).

Materiales y Mtodos. Describa de forma detallada la forma en que realiz

la prctica.

16

TOXICOLOGA

Resultados. Describa y analice sus resultados, aqu anote los cuadros que
realiz junto con su(s) compaero(s). Es conveniente anexar tablas, grficas,
dibujos, fotografas o esquemas de lo que observ durante la prctica. Si
existen dibujos, stos debern estar entintados y coloreados.

Discusin. Esta es la parte ms difcil de escribir, pero es la ms importante.

Aqu se deben sealar las diferencias y similitudes que hallaste con los datos
bibliogrficos y analizar el porqu de los resultados que obtuviste. Puedes
utilizar cuadros comparativos u otra herramienta que te sea til para
presentar la informacin.

Conclusiones. Redactar con relacin al o los objetivo(s) y a los resultados

obtenidos.

Cuestionario. Deber contestar las preguntas que se encuentran al final de

cada prctica, citar la bibliografa empleada.

Referencias Bibliogrficas. Debe citar SIEMPRE la fuente de donde obtuvo

la informacin, ya sea escrita o visual. Utilice revistas especializadas, libros y
pginas de Internet recomendadas por el docente.

Al final de la prctica debers anexar las hojas que se firman durante el

desarrollo de la prctica, para confirmar tu participacin.

Al finalizar cada prctica contenida en este manual debers anexar 2 hojas blancas
para que estas sean en las que realices tus anotaciones y las que entregues en el
reporte. Debers presentar el manual de prcticas engargolado en cada prctica de
laboratorio.

PRCTICAS DE LABORATORIO
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TOXICOLOGA

CONTENIDO
PRCTICA
NOMBRE
INVESTIGACIN EPIDEMIOLOGCA DE LAS
1
2
3
4

INTOXICACIONES EN MXICO Y EN EL
ESTADO DE CHIAPAS
CONSULTA DE INFORMACIN TOXICOLGICA
PRODUCTOS DOMESTICOS
POTENCIALMENTE TXICOS
EXTRACCION Y CUANTIFICACION DE
TOXICOS NO VOLATILES EN UNA MUESTRA
PROBLEMA CUANTIFICACIN DE UN TXICO
VOLTIL (CIANURO DE HIDRGENO) EN
GLUCSIDOS CIANOGNICOS.

EFECTO DEL pH EN LA LIBERACIN DE

METALES PESADOS POR
UTENSILIOS DE BARRO VIDRIADO

EFECTOS TXICOS DE LA ADMINISTRACIN

DE PLOMO EN RATAS

PGINA
19
23
26
30

36

38
42

PRACTICA NO. 1
18

TOXICOLOGA
INVESTIGACIN EPIDEMIOLOGCA DE LAS INTOXICACIONES EN
MXICO Y EN EL ESTADO DE CHIAPAS
OBJETIVO
1. El alumno realizar una investigacin documental para identificar cules son las
principales causas de intoxicacin en nuestro pas.
2. El alumno realizar una investigacin documental para identificar cules son las
principales causas de intoxicacin en el Estado de Chiapas.

INTRODUCCION
El alumno deber conocer las fuentes de informacin epidemiolgica de nuestro pas,
para identificar cules son las causas ms importantes de atencin en cuidados
toxicolgicos, por ejemplo en el ao 2000 se presentaron 1913 casos de intoxicacin por
plaguicidas, 30,673 casos de intoxicacin por veneno de escorpin.

MATERIAL

Internet

Revistas Toxicolgicas

Anuarios Estadsticos

EQUIPO

Computadora o Computadora Porttil

METODOLOGIA
1. Consultar las siguientes pginas de Internet:
http://www.ssa.gob.mx/
http://www.inegi.gob.mx/
http://www.cdc.gov/

19

TOXICOLOGA
2. Consulta otras pginas, revistas, anuarios estadsticos del Estado, entre otros y
completa lo que se te pude en cada caso.
3. Indica cules son las 10 causas principales de intoxicacin en nuestro pas.
Causa

Nmero de Casos

Fuente

Ao

4. Indica cules son las 10 causas principales de intoxicacin en el Estado.

Causa

Nmero de Casos

Fuente

Ao

5. Indica cules son las 10 causas principales de intoxicacin en otros pases y compara.
Causas

Nmero de

Pas

Fuente

Ao

Casos

20

TOXICOLOGA

6. Indica cules son las 10 causas principales de intoxicacin en otros estados y compara.
Causas

Nmero de

Pas

Fuente

Ao

Casos

7. Analiza la informacin y discute los resultados obtenidos.

CUESTIONARIO
1.- Qu es Incidencia?
2.- Define Epidemiologa.
3.- Qu es Prevalencia?
4.- Define Toxicologa.
21

TOXICOLOGA
5.- Define Intoxicacin y Toxina.
6.- Define Intoxicacin Aguda y Crnica.
7.- Define Toxicidad y Riesgo.

PRACTICA NO. 2
CONSULTA DE INFORMACIN TOXICOLGICA
OBJETIVO
1. El alumno investigara cuales son los centros de consulta sobre intoxicaciones en
nuestro pas.
2. El alumno realizara una investigacin de consulta a alguno de estos centros, nacionales
o extranjeros.

22

TOXICOLOGA
INTRODUCCION
El alumno deber conocer si existen en nuestro pas centros de consulta para el caso de
intoxicaciones, cual es la facilidad para los mismos, es necesario conocer si en otros
pases existen estos centros, la factibilidad para consultarles, considerando que el perfil
del Farmacutico considera que este conocer y asesorara en los hospitales, es
indispensable que elabore un directorio de los centros de informacin sobre
intoxicaciones.
MATERIAL

Internet

http://www.ssa.gob.mx/

http://www.cdc.gov/

Otras Pginas

Directorio de los Servicios de Salud

EQUIPO

Computadora o Computadora Porttil

METODOLOGIA
1. Consulta pginas de internet y completa lo que se te pide en cada caso.
2. Indica cules son los principales centros de informacin sobre intoxicaciones de
nuestro pas.
Nombre del

Responsabl

Centro

Direccin

Telfono, Fax y

Horario de

Correo Electrnico

Consulta

23

TOXICOLOGA
3. Incida cules son los principales centros de informacin sobre intoxicaciones de
nuestro estado.
Nombre del

Responsabl

Centro

Direccin

Telfono, Fax y

Horario de

Correo Electrnico

Consulta

4.- Indica cules son los principales centros de informacin sobre intoxicaciones en otros
pases.
Nombre del

Responsabl

Centro

Direccin

Telfono, Fax y

Horario de

Correo Electrnico

Consulta

5. De las 10 causas ms frecuentes de intoxicacin en el estado realiza dos consultas

documentadas en un centro de informacin toxicolgica (Anexa copia de las mismas o
correo electrnico).
6. Analiza la informacin y discute los resultados obtenidos.

CUESTIONARIO
1.- Qu es un xenobitico?
2.- Qu es una reaccin alrgica?
3. Qu es una reaccin de Idiosincrasia?
4.- Defina tolerancia.
5.- Defina sensibilizacin.

24

TOXICOLOGA

PRACTICA NO. 3
PRODUCTOS DOMESTICOS POTENCIALMENTE TXICOS
OBJETIVO
1. El alumno investigara que productos se encuentran en su domicilio y resultan
potencialmente txicos.
2. El alumno realizara una investigacin sobre la composicin de los productos de su
domicilio y las precauciones que deber de tener con los mismos.

INTRODUCCION

25

TOXICOLOGA
En el hogar tenemos un buen nmero de productos que nos resultan familiares y
olvidamos o no reconocemos su toxicidad, por ejemplo los insecticidas, limpiadores,
pegamentos, suavizantes, blanqueadores, etc. La mayor frecuencia de intoxicaciones
accidentales en nios se debe a los productos del hogar.

MATERIAL

Productos de su domicilio

METODOLOGIA
1. Identifique algunas clases de sustancias txicas potenciales y completas lo que se te
pide:
Venenos

Ejemplo

Componentes

Sustancia

Precauciones

Txica
De Insectos
De Vegetales
De Animales
De Bacterias

Medicamentos

Ejemplo

Componentes

Sustancia

Precauciones

Txica

Productos

Ejemplo

Componentes

Industriales
Solventes
Polvos
Corrosivos

Plaguicidas

Sustancia

Precauciones

Txica

Ejemplo

Componentes

Sustancia

Precauciones

Txica
26

TOXICOLOGA
Insecticidas
Rodenticidas
Fungicidas
Acaricidas

Agentes

Ejemplo

Componentes

Aditivos
Tabaco
Alcohol
Estimulantes
Narcticos
Estupefaciente

Sustancia

Precauciones

Txica

s
Alucingenos
Hipnticos

Aditivos de

Ejemplo

Componentes

Alimentos y

Sustancia

Precauciones

Txica

Bebidas

Cosmticos

Ejemplo

Componentes

Sustancia

Precauciones

Txica

Productos
Caseros
Limpiadores
Destapacaos
Amoniaco
Quitamanchas
Desodorantes
Pegamentos
Blanqueadores

Ejemplo

Componentes

Sustancia

Precauciones

Txica

27

TOXICOLOGA
Refrescadores
de Aire

2. Realizar un listado de los 10 productos de mayor potencial txico en tu hogar.

3. Investiga las medidas que debern seguirse para un caso de intoxicacin de los
productos antes listados.
Producto

Medidas

Antdoto

CUESTIONARIO
1.- Qu es un veneno?
2.- Cules son las medidas teraputicas ms importantes para cualquier paciente
envenenado?
3.- Cules son las medidas teraputicas ms importantes para cualquier paciente
intoxicado?
4.- Cul es la causa y manejo del choque anafilctico?

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TOXICOLOGA

PRACTICA NO. 4
EXTRACCIN Y CUANTIFICACIN DE TXICOS NO VOLTILES
EN UNA MUESTRA PROBLEMA
OBJETIVO
Que el alumno emplee mtodos de extraccin cida y bsica para obtener eficientemente
txicos no voltiles de naturaleza cida y bsica en una muestra problema y explique qu
mtodo de extraccin es el ms eficiente.
INTRODUCCION
Establecer las condiciones ms adecuadas para realizar una extraccin del 90% de los
txicos no voltiles cidos y bsicos (cido acetilsaliclico y cafena) presentes en una
muestra problema. La muestra deber trabajarla en medio cido y medio bsico.
METODOLOGIA
El profesor proporcionar 30 mL de muestra, la cual deber dividirse en dos porciones
(cada una de 15 mL) para realizar la extraccin en medio cido y en medio bsico. La
cuantificacin de cido acetilsaliclico y cafena se determinar siguiendo los apndices
correspondientes.
A) PROCESO DE EXTRACCION EN MEDIO ACIDO PARA TOXICOS NO
VOLATILES:
1. Agregar a la muestra biolgica cido tartrico hasta un pH= 2 y agitar.

29

TOXICOLOGA
2. La solucin cida se extrae con 2 porciones de 15 mL de ter, separando las fases
etreas y reunindolas en un matraz.
3. La fase acuosa remanente se guarda, etiquetndola como fraccin A (sustancias
bsicas).
4. La fase etrea se extrae con dos porciones de agua destilada (10 mL) y se renen las
fases acuosas con la fraccin A.
5. Tratamiento de la fase etrea: sta fase se trata con 5 mL de una solucin saturada de
bicarbonato de sodio, se separan las fases. En la fase acuosa se concentran los cidos
fuertes (fraccin B). Tratar esta fraccin como se indica en el apndice I.
6. A la fase etrea se le aaden 5 mL de NaOH 0.15 N, mediante este proceso se extraen
los cidos dbiles en la fase acuosa, etiquetarla como fraccin C y trabajarla como se
indica en el apndice I.
7. Tratamiento de la fraccin A. Las fases acuosas reunidas en el inciso 4 se alcalinizan
hasta pH = 10 con NaOH 2.5 N.
8. Extraer con dos porciones de CHCl3 (10 mL) y separar las fases.
9. Concentrar la fase orgnica hasta sequedad (en rotaevaporador), etiquetar como
fraccin D (sustancias bsicas) y tratarlo como se indica en el apndice II.
B). PROCESO DE EXTRACCION EN MEDIO BASICO PARA TOXICOS NO
VOLATILES:
1. La muestra se ajusta a pH = 10 con NaOH 2.5 N.
2. Realizar la extraccin con dos porciones de CHCl3 (15 mL), separando las fases.
3. La fase orgnica se concentra hasta sequedad y el residuo se etiqueta como fraccin
E (sustancias bsicas) y se trata como se indica en el apndice II.
4. La fase acuosa se etiqueta como fraccin F (sustancias cidas) y se trata segn el
apndice I.
MATERIAL

Gradilla 1

Piseta con agua destilada. 1

Tubos de ensayo 4

Matraz de bola de 50 mL 2

Matraz aforado de 10 mL 2

30

TOXICOLOGA

Pipeta Pasteur 2

Matraz aforado de 25 mL 2

Probeta de 25 mL 1

Embudo de separacin 250 mL 2

Esptula cromo/nquel 1

Matraz Erlenmeyer 250 mL 1

Pipeta graduada 10 mL 2

Matraz Erlenmeyer 50 mL 2

Pipeta graduada de 5 mL 2

Gogles 1

Pipeta graduada de 1 mL 1

Anillo metlico 2

Para curva patrn

Gradilla 1

Vaso de precipitados 100 mL 1

Matraz volumtrico de 10 mL 5

Pipeta graduada de 1 mL 1

Matraz volumtrico de 25 mL 5

Pipeta graduada de 10 mL 1

Tubos de ensayo 10

EQUIPO

Espectrofotmetro

Rotaevaporador

Lmpara de luz ultravioleta

Potencimetro

Balanza analtica

REACTIVOS

cido tartrico
31

TOXICOLOGA

ter etlico

Hidrxido de sodio

Cloroformo

Nitrato frrico

Salicilato de sodio

cido clorhdrico

Cloruro mercrico

Bicarbonato de sodio

APNDICE I
a) Tratamiento de la muestra:
Tome 1 mL de la muestra (fraccin B, C y F) y adicione 5 mL del reactivo para desarrollar
color (apndice III), agite, espere 2 min. y determine la absorbancia a 540 nm. Si la lectura
de absorbancia no cumple con la ley de Lambert y Beer, realice las diluciones necesarias,
repita el procedimiento y vuelva a realizar la lectura. Calcule la concentracin de AAS
presente en su muestra, interpolando la lectura de absorbancia en la curva patrn.
b) Curva patrn del cido acetil saliclico:
1) Preparar una solucin patrn de salicilato de sodio (1000 g/mL): Pesar 25 mg de
salicilato de sodio y disolverlo en 10 mL de agua destilada y llevar hasta 25 mL con agua
destilada (preparar 25 mL por curva patrn).
2) A partir de la solucin patrn de salicilato de sodio (1000 g/mL), preparar la curva
patrn como se describe a continuacin (realizar dos curvas patrn por grupo).
Alcuota de la

Aforo con

Concentracin

solucin patrn

Agua destilada

(g/mL)

(mL)
0.5
1
3
5
7

10
10
10
10
10

50
100
300
500
700

En un tubo de ensaye colocar 1 mL de las soluciones recin preparadas y adicionar 5 mL

del reactivo para desarrollar color (apndice III), agitar la muestra en un vrtex durante 1
32

TOXICOLOGA
min. esperar 2 min. y determinar la absorbancia a una longitud de onda de 540 nm,
ajustando a cero con un blanco (1 mL de agua y 5 mL del reactivo para desarrollar color).
APNDICE II
Cuantificacin de cafena:
a). Tratamiento de la muestra
1. Disolver por separado los residuos D y E en 5 mL de NaOH 0.1 N, pasarlo a un matraz
volumtrico de 25 mL y aforar con NaOH 0.1 N.
2. Determinar la absorbancia de la solucin a 275 nm utilizando NaOH 0.1 N como blanco.
Si la lectura de absorbancia obtenida no cumple con la ley de Lambert y Beer, realice las
diluciones necesarias con NaOH 0.1N.
3. Calcular la concentracin de cafena presente en su muestra, interpolando la lectura de
absorbancia en la curva patrn.
b) Curva patrn
1. Solucin patrn de cafena (100 g/mL)
Disolver 10 mg de cafena anhidra en 10 mL de NaOH 0.1 N y afore con la misma
solucin a 100 mL.
2. A partir de la solucin patrn de cafena (100 g/mL) preparar la curva patrn como se
describe a continuacin. Por grupo realizar dos curvas patrn.
Alcuota de la

Aforo con

Concentracin

solucin patrn

NaOH 0.1 N

(g/mL)

(mL)
1
2
3
4
5
3. Determinar la absorbancia de la curva

25
4
25
8
25
12
25
16
25
20
patrn a una longitud de 275 nm, ajustando a

cero con un blanco (NaOH 0.1 N).

APNDICE III
Reactivo para desarrollar color:
Pesar 4 g de cloruro mercrico y disolverlo en 12 mL de HCl 1N, adicionar 4 g de nitrato
frrico, agitar hasta disolver y diluir con agua destilada a 100 mL.
Solucin de hidrxido de sodio 2.5 N
33

TOXICOLOGA
Disolver 10 g de NaOH en 25 mL de agua destilada y aforar a 100 mL.
Solucin de hidrxido de sodio 0.1 N
Disolver 0.4 g de NaOH en 25 mL de agua destilada y aforar a 100 mL.
Solucin de cido clorhdrico 1 M
Colocar 83 mL de HCl concentrado en un matraz aforado y adicionar agua destilada hasta
1 L.
CUESTIONARIO
1. Con la experiencia que adquiri al realizar los procesos de extraccin qu sustancias
cidas o bsicas recomendara para ajustar el pH antes de efectuar la primera extraccin
en muestras biolgicas? Justifique su respuesta.
2. Esquematice los procesos de separacin empleados tanto en medio cido como en
medio bsico y especifique que especies qumicas se encuentran en cada uno de las
fases.
3. Al realizar las diferentes extracciones con el disolvente orgnico indique en cada
proceso dnde permanece la fase orgnica y la fase acuosa. Por qu?
4. En la extraccin cida por qu se pueden juntar las fracciones acuosas en la fraccin
A?
5. Por qu se determina la cafena y cido acetil saliclico a diferentes longitudes de
onda? Justifique su respuesta.
6. Una vez desarrollado el guin qu puntos del proceso de extraccin cree usted que
son crticos para la extraccin de su txico no voltil?
7. Qu propiedades fisicoqumicas podrn mejorar el rendimiento de la extraccin de un
xenobitico?
8. Presente los datos de absorbancia contra concentracin de las curvas patrn de AAS y
cafena con sus respectivas grficas y los datos de regresin lineal correspondientes.
Interpole los datos de absorbancia de sus muestras tanto en la extraccin cida como en
la bsica.
9. Es necesario considerar las diluciones realizadas durante el proceso de extraccin
para calcular la concentracin inicial de los xenobiticos en su muestra? Justifique su
respuesta.
10. Indique el procedimiento para los clculos de la concentracin de AAS y cafena en su
muestra.

34

TOXICOLOGA

PRACTICA NO. 5
CUANTIFICACIN DE UN TXICO VOLTIL (CIANURO DE HIDRGENO)
EN GLUCSIDOS CIANOGNICOS.

ASIGNATURA: Toxicologa (8o semestre, carrera Q.F.B.)

OBJETIVO ACADMICO: Que el alumno determine la cantidad de cianuro de
hidrgeno liberado a partir de glucsidos cianognicos presentes en muestras
de plantas y semillas que forman parte de la dieta de humanos y animales, y
relacione la concentracin con su potencial toxicolgico.
PROBLEMA: Que el alumno cuantifique la concentracin de cianuro de
hidrgeno presente en una serie de 3 muestras de semillas o plantas. Una de
estas ser proporcionada por el profesor y se deber reportar al menos el 80%
de la concentracin real. Al final de la prctica el alumno indicar cual semilla
podra presentar mayor riesgo de toxicidad para el humano, en base a la
cantidad de HCN que estara presente en el consumo de 50 g de muestra.
INTRODUCCIN:
Existe en la naturaleza una amplia gama de vegetales, alrededor de
1000 especies, que contienen glucsidos cianognicos. Algunos de stos estn
constituidos por alfa-hidroxinitrilos (aglucn), unidos a travs de un enlace beta
a un carbohidrato, que puede ser un monosacrido o un disacrido.
Al hidrolizar estos compuestos, se obtiene, entre otros productos, cido
cianhdrico. Dicho proceso requiere de la presencia de la enzima -glucosidasa,
que rompe el enlace glucosdico, y de la enzima hidroxinitriliasa, que libera el
cido cianhdrico. Estas enzimas se encuentran presentes en la misma planta y
actan sobre los glucsidos, cuando la planta sufre ruptura del tejido debido a
daos mecnicos( 2,3 ).

35

TOXICOLOGA
La importancia de estos compuestos desde el punto de vista toxicolgico
radica en que se encuentran presentes a diferentes concentraciones, en
vegetales que forman parte de la dieta de humanos y animales.
Los estudios realizados en algunos alimentos, han permitido detectar
glucsidos cianognicos tales como: faseoliona, amigdalina, durrina y
linamarina entre otros( 2 ). Entre dichos alimentos se encuentran leguminosas
(varios tipos de frijol incluyendo el colorin); tubrculos como la casava;
cereales como el sorgo; y semillas de algunas frutas como limn, lima,
manzana, pera, cereza, durazno, albericoque y ciruela( 1, 4, 5 ).

FUNDAMENTO:
El mtodo en el presente guin aprovecha la reaccin, sensible y
especfica de Guignard, la cual es ampliamente utilizada en pruebas
cualitativas para la deteccin de HCN como de glucsidos cianognicos; sin
embargo, con el uso de una curva estndar de cianuro alcalino, se podr
realizar dicha prueba en forma cuantitativa, expresndose en base al cido
OH
O2

OH
NNO2NH

OH

+ 2HCN+
1/2 O2
CN
NO2
Acido

NO2
Isopurpurina pcrico

cianhdrico liberado( 4, 6, 7 ).

MATERIAL
Tubos de ensaye( 20*150) con tapn de hule.

CANTIDAD.
10

Cajas petri

Papel filtro cualitativo( filtracin rpida )

2 x10 cm.

Tijeras, pinzas de diseccin y regla o escuadra graduada 1 juego (Traer por

persona)
Matraz erlenmeyer de 250ml. con tapn de hule.

10

36

TOXICOLOGA
Mortero con pistilo
Navaja

1
1 (Traer por persona)

Pipeta de 1ml. graduada.

Probeta de 50ml.

Matraces volumtricos de 10 ml
6 Embudo de cola corta.
5
Vaso de precipitado de 100ml.
Tubo de ensaye( 13*150 mm )
Celdas de 1 cm de dimetro
Guantes de hule
Hielo

3
2
2
1 par (Traer por persona)
Traer por equipo

MATERIAL DE ESTUDIO
Traer por persona aproximadamente 1g de muestras de plantas o semillas de:
durazno, manzana roja, ciruela pasa, sorgo, bamb, colorn, lima,
almendra de capuln, germen de soya.
REACTIVOS
Acido clorhdrico concentrado.
Acido pcrico.
Carbonato de sodio.
Cloroformo.
Cianuro de potasio
PRECAUCIN: ALTAMENTE TXICO, PREPARAR Y MANEJAR CON GUANTES
( SOLUCIN ESTNDAR II).
SEGURIDAD: A pesar de que la concentracin utilizada de KCN en este guin
es de aproximadamente 0.24 mg/mL y esta concentracin est por debajo de
la DL50 en ratones, no deber descuidar las medidas de seguridad para su
trabajo.
MANEJO DE RESIDUOS: Los residuos de las soluciones que contienen KCN
no debern ser tiradas al drenaje directamente, recolectarlas en frascos
y etiquetarlas.

37

TOXICOLOGA
Tratamiento de residuos de soluciones que contienen KCN: colocarlas en hielo y
adicionar lentamente una solucin de hipoclorito de sodio, se dejan reposar por
24 horas y posteriormente podrn ser desechadas por la tarja con abundante
agua.

EQUIPO
Espectrofotmetro
Balanza analtica
Estufa

PROCEDIMIENTO:
El alumno trabajar 3 muestras problema de plantas o semillas segn la lista
mencionada. Una de las cuales ser proporcionada por el profesor.

A) PREPARACIN DE LA TIRA REACTIVA

Cortar papel filtro en tiras exactamente de 2x10 cm (preparar 1 tira por
muestra), se sumergen en el reactivo de Guignard, dejndose escurrir.
Introducirlas en una estufa que se encuentre estable a una temperatura entre
50-55oC, donde se dejan por aproximadamente 10 min (las tiras reactivas
preparadas deben quedar ligeramente humedecidas al ser utilizadas en el
procedimiento).

B) PREPARACIN DE LAS MUESTRAS DE SEMILLAS O PLANTAS.

Pesar 1 g de muestra de y colocarla por separado en el mortero, y con la
ayuda de las pinzas de diseccin y navaja cortarlas y macerarlas lo ms
rpido posible.
A cada una de las muestras se le realizar el siguiente procedimiento:
Colocar la muestra fragmentada en un matraz erlenmeyer de 250 mL, medir 25
mL de agua destilada con pipeta volumtrica y agregarlos al matraz. A
continuacin aadir 2 gotas de cloroformo y 1 mL de HCl 0.5 N. Colocar con
cuidado la tira de papel reactivo humedecida como se ilustra en la figura (1).
PRECAUCIN: No mojar la tira reactiva con los reactivos anteriores y tapar
inmediatamente cada uno de los matraces erlenmeyer con su tapn despus
de concluir este procedimiento.
Colocar el matraz Erlenmeyer en la estufa a 40oC por espacio de 1 h,
agitando suavemente a intervalos de 15 min, teniendo precaucin de que el

38

TOXICOLOGA
contenido del matraz no tenga contacto con la tira reactiva de papel filtro,
meter simultneamente a la estufa los matraces con las diferentes
concentraciones de la curva estndar de HCN. (El gas de HCN liberado
reacciona con el reactivo de Guignard de la tira reactiva, formando un complejo
NO TXICO).

TAPON DEHULE

PAPEL FILTRO
TIRA REACTIVA
)

MUESTRA

FIGURA 1. Preparacin de la muestra en el matraz y colocacin de la tira

reactiva.
C) PREPARACIN DE LA CURVA ESTNDAR
La curva estndar de HCN se prepara colocando en matraces volumtricos de
25 mL los volmenes de la solucin patrn indicados en la siguiente tabla y
llevando a volumen con agua destilada:
CURVA ESTNDAR DE HCN.
Alcuota de la
Concentracin
solucin patrn (mL)
(g/mL)
0.0
Blanco
0.1
0.4
0.2
0.8
39

TOXICOLOGA
0.3
0.4
0.5

1.2
1.6
2

Tratamiento de la curva estndar:

1)

Una vez preparadas las soluciones de la curva patrn, pasarlas

inmediatamente a matraces erlenmeyer de 250 ml, debidamente etiquetados.
2)
Colocar la tira reactiva en el matraz como se indica en la figura 1 y
agregar a cada matraz 1 ml de la solucin de HCl 0.5 N y dos gotas de
cloroformo.
PRECAUCIN: No mojar la tira reactiva con los reactivos anteriores y tapar
inmediatamente cada uno de los matraces erlenmeyer con su tapn despus
de concluir este procedimiento. 3)Incubar por una hora con agitacin cada 15
minutos.

D) TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS PROBLEMA, CURVA ESTNDAR Y BLANCO.

Una vez transcurrido el tiempo de incubacin, los matraces se sacan de
la estufa y se dejan enfriar. Se observan las tiras reactivas de las muestras
problema y aquellas que no muestren ni siquiera una leve coloracin caf-rojiza
se considerarn como prueba negativa; en tanto que aquellas que s lo
presenten son positivas y se introducen en un tubo de ensaye al cual se le
adiciona 20 ml de agua destilada, se tapa y se agita vigorosamente con el fin
de extraer el pigmento colorido; se procede a filtrar (con papel Whatman No.
40) para eliminar residuos de la tira de papel. Se determina la absorbancia de
las muestras y de la curva patrn en el espectrofotmetro a 520nm, utilizando
como blanco el primer punto de la curva.
NOTAS:
a) Las soluciones II, III y agua destilada deben de estar en bao de hielo
antes de usarse.
b) No olvidar poner 2 gotas de cloroformo a los matraces de la curva patrn.
c) Antes de meter a la estufa los matraces de la curva patrn, colocar las tiras
reactivas a cada uno de ellos (como se indica en la figura 1).
PREPARACIN DE SOLUCIONES:
Reactivo de Guignard: Se disuelve en agua destilada 2.5 g de cido pcrico y
a continuacin 12.5 g de carbonato de sodio, llevndose a un volumen de 500
ml con agua destilada. MANEJAR CON CUIDADO EL CIDO PCRICO, YA QUE
ESTAS SUSTANCIA ES CANCERGENA Y SE ABSORBE FCILMENTE POR PIEL.
40

TOXICOLOGA
Solucin patrn de cianuro de potasio: se pesa exactamente 12.05 mg de
KCN y se lleva a 50 ml de agua destilada. MANEJAR CON CUIDADO Y CON
GUANTES LA SOLUCIN
DE CIANURO ALCALINO YA QUE ES ALTAMENTE TXICO
COLOCAR LA SOLUCIN EN BAO DE HIELO DESPUS DE PREPARARLA.
cido clorhdrico 0.5 N.
COLOCAR LA SOLUCIN EN BAO DE HIELO DESPUS DE PREPARARLA.

CUESTIONARIO:
1.-Qu importancia tiene durante la prctica que la trituracin de la muestra
se realice rpidamente?
2.-Por qu la tira reactiva de papel no debe tocar la solucin y por qu se da
una reaccin positiva sin que la tira reactiva est en contacto con la muestra?
3.-Por qu considera necesario colocar la solucin patrn de cianuro de
potasio y el HCl 0.5N en bao de hielo?
4.-Por qu es necesario agregar cloroformo en el paso B) a sus muestras y en
el paso D) a su curva estndar?
5.- Por qu es necesario calentar la muestra?
6.-Cmo podra eliminar la presencia de glucsidos cianognicos de una
planta comestible?
7.- Grafque los valores de absorbancia vs concentracin obtenidos e interpole
las absorbancias de las muestras.
8.- Reportar los resultados obtenidos en mg/50g de muestra, tomando en
cuenta que la solucin patrn es equivalente a 100 g HCN/ml y llenar la
siguiente tabla:.

Muestra de
semilla

Concentracin
de HCN
(g/mL)

mg HCN/50 g
de muestra

Riesgo de
Toxicidad
(marque con
cruces)

41

TOXICOLOGA
9.- Con base a los resultados obtenidos cul muestra considera que
representa un mayor riesgo potencial en su consumo?
10.- Proponga un mtodo para extraer txicos voltiles a partir de una
muestra.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. Linder, E.; Toxicologa de los alimentos; Acribia, pg. 15-19, Zaragoza ( 1978 ).
2. Conn, E.E.; Cyanogenic glucosides. In: Toxicants ocurring naturally in foods;
National Academy of Sciences; 2th Edition, pp. 290-308, Washington, D.C.
( 1973 ).
3. Montgomery, R.D.; Cyanogens: AToxic constituyent of plant food stuffs; Liener,
I.E; Academic Press, pp. 143-160, N.Y.( 1980 ).
4. Conn, E.E.; Cyanogenic glucosides; Agr. Food Chem. 17, 519-526 (1969).

5. Eyjolfsson, R.; Recent Advances in chemistry of cyanogenic glucosides; Fortsch.

Chem. Orgn. Naurist. 28, 74-108 (1970).
6. Fabre, R. Y Truhaht, R.; Tratado de toxicologa; Paraninfo, S.A., Vol. I, pg. 311332, Madrid (1976).
7. Lucas, B. and Sotelo, A.; A simplified test for the quantitation of cianogenic
glucosides in wild and cultivated seeds; Nutr. Rep. Int. 29 ( 3 ), 711719( 1984 ).

EFECTO DEL pH EN LA LIBERACIN DE METALES PESADOS POR

UTENSILIOS DE BARRO VIDRIADO
OBJETIVOS.
42

TOXICOLOGA
* Determinar cualitativamente la presencia de plomo en recipientes de cermica a
diferentes
valores de pH.
* Discutir los efectos toxicolgicos que presenta el plomo sobre los organismos vivos.
MATERIALES.
Vasija de cermica
3 Mechero
1Rejilla de asbestos
1 Gradilla
1
Tubos de ensayo 13x100 10 Bao Mara 1
Termmetro 1 Pipetas de 1 ml 3
Anillo metlico 1 Pinza para tubos 1
Papel pH 3 Probeta de 100 ml 1
REACTIVOS.
Agua destilada cido Clorhdrico conc.
Hidrxido de sodio 1 N Acido Ntrico
Yoduro de Potasio
PROCEDIMIENTO.
1.- El alumno debe traer tres vasijas de barro vidriadas, iguales y nuevas.
2.- Marcar las vasijas como A, B y C.
3.- Colocar agua destilada en la vasija A. Colocar agua destilada y ajustar a pH < 2 con HCl
conc., en la vasija B. Colocar agua destilada en la vasija C y ajustar a pH > 10. Medir el pH
de
cada vasija.
4.- Calentar las vasijas a ebullicin y dejarlas hervir 30 minutos. En caso de que el
contenido de agua disminuya considerablemente puede agregar mayor cantidad de la
misma.
5.- Enfriar la solucin y medir el pH.
6.- Colocar por separado 0.5 ml de solucin de cada vasija en tubos de ensayos ms tres
gotas de HNO3 concentrado.l
8.- Agregar a cada tubo, 1 ml de la solucin de yoduro de potasio (16.5 g de yodurode
potasio aforados a 100 ml; esta solucin es sensible a la luz), procurando que la solucin
caiga directamente en el contenido del tubo. No agite y observe.
9.- Un precipitado amarillo indica la presencia de plomo en la solucin original
10.- Emplee un blanco de agua destilada y proceda de la misma forma como se indica en el
paso 5 al paso 8.
11.- Para el reporte elabore una tabla que relacione el valor de pH en los pasos 3 y 5 con la
presencia del plomo.
21

CUESTIONARIO.
1.-Cules son los minerales que pueden ser fuentes de contaminacin de plomo?
2.- Mencione 5 alimentos cuyo pH sea cido y 5 cuyo pH sea alcalino.
3.- Construya una tabla donde se indiquen otras fuentes de exposicin al plomo y la
cantidad
estimada que estas fuentes contienen del metal.
4.- Cmo influye la edad del individuo en la absorcin gastrointestinal del plomo?
43

TOXICOLOGA
5.- Cules son los tejidos principales de distribucin y depsito del plomo en el
organismo?
6.- Qu efectos ocurren en los eritrocitos cuando la concentracin de plomo rebasa el valor
de
80g/dl y que es lo que provoca esta manifestacin?
7.- Diga el nombre de los dos sistemas enzimticos que intervienen en la sntesis del grupo
Hem y que se ven afectados en una intoxicacin por Pb.
8.- Proponga a travs de un esquema la influencia del plomo en la biosntesis del grupo
Hem.
9.- Cmo se manifiesta principalmente la intoxicacin por plomo en el sistema nervioso
central?
10.- Cules son los sntomas principales de intoxicacin por plomo en el tracto
gastrointestinal?
11.- Cmo influye la edad y el sexo en los niveles de plomo en sangre en los seres
humanos?
12.- Qu efectos producen la anemia que se manifiesta por la intoxicacin por plomo?
13.- Esquematice los valores de plomo en sangre debajo de los cuales no hay manifestacin
clnica de intoxicacin.
14.- Cul es la t1/2 del plomo en sangre y huesos? Y qu papel juegan los eritrocitos en la
relacin de concentracin plasma/orina en la eliminacin del mismo?
15.- Cmo se manifiesta una intoxicacin crnica (30-50 g/dl) por plomo en los nios?
16.- Qu papel juega la sal Na2CaEDTA, en dosis de 40 mg/Kg en el diagnstico por
intoxicacin por plomo?
17.- Qu medidas teraputicas se toman en una intoxicacin por plomo y que
concentracin
plasmtica del mismo debe de estar presente para que se aplique a los nios?
18.- Cmo va a influir la intoxicacin por Pben los valores de HbL y Hbt. ?

PRACTICA NO. 6
EFECTOS TXICOS DE LA ADMINISTRACIN DE PLOMO EN
RATAS
OBJETIVO
Que el alumno visualice las alteraciones morfolgicas del hgado, bazo y clulas
sanguneas y relacione la variacin cuantitativa en el valor de hematocrito, hemoglobina
libre y total al administrar dosis diferentes de plomo.
INTRODUCCION

44

TOXICOLOGA
Indique que solucin causa mayor efecto txico al observar macroscpicamente los
cambios morfolgicos del hgado, bazo y microscpicamente clulas sanguneas, y
cuantifique el valor de hematocrito, hemoglobina libre y hemoglobina total.
METODOLOGIA
El trabajo experimental se desarrollar por equipo en cuatro sesiones de laboratorio.
SESION I (PRIMERA SEMANA)
1) Traer 4 jeringas de 1 ml por equipo.
2) Pesar los animales, anestesiarlos con ter etlico y marcarlos de acuerdo al sistema de
marcaje. (El profesor indicar que numeracin se asignar a cada equipo y el sistema de
marcaje)

OREJA DERECHA (UNIDADES)

OREJA IZQUIERDA (DECENAS)

3) El profesor dar cuatro soluciones etiquetadas como sol. A, B, C, y D (SSI) a cada

equipo.
Cada una de las soluciones ser administrada por va intraperitonial en un volumen de 0.5
mL/rata con peso de 250 280gr.
MATERIAL

Balanza para animales (una por equipo)

Caja de contencin ( una por equipo)

Perforador ( uno por grupo)

Algodn

Cuatro jeringas para insulina (traer por equipo)

Cubre boca (traer por equipo)

45

TOXICOLOGA

Guantes de hule (traer por equipo)

MATERIAL BIOLGICO

4 ratas del mismo sexo (por cada equipo)

REACTIVOS

Acetato de plomo

ter etlico

Solucin salina isotnica

Etanol

SESION II y III (SEGUNDA Y TERCER SEMANA)

1) Pesar a los animales nuevamente
2) Realizar una segunda administracin de las soluciones A, B, C, y SSI a la rata
correspondiente.
MATERIAL

Caja de contencin (una por equipo)

Algodn

Cuatro jeringas para insulina (traer por equipo)

Cubre boca (traer por equipo)

Balanza para animales

REACTIVOS

Acetato de Plomo

Solucin salina isotnica

SESION IV (CUARTA SEMANA)

MATERIAL POR EQUIPO:

1 navaja para bistur

1 boquilla para pipeta shalii (traer una por equipo)

4 pipeta shalii 1 gradilla

46

TOXICOLOGA

1 cubrebocas (traer uno por persona)

1 par de guantes (traer uno por equipo)

1 tijeras de diseccin

6 gogles

4 jeringas de 3 5 ml (por equipo)

1 pinzas de diseccin

8 tubos capilares

20 tubos de ensayo 13X100

1 caja de contencin

1 Tabla de diseccin

16 portaobjetos

2 pipetas graduadas de 10 ml

2 pipetas volumtricas de 5 ml

5 tubos de ensaye de 16x150

1 vaso de precipitados de 250 ml

2 vasos de precipitado de 100 ml

1 pipeta graduada de 1 ml

2 celdas de vidrio (por grupo)

4 cajas de Petri Algodn

REACTIVOS

Nuevo azul de metileno

Solucin de Drabkin

Solucin de heparina

Colorante de Wright

Estndar de cianometa hemoglobina

ter dietlico

Solucin salina isotnica.

Etanol

Bencidina al 1%

47

TOXICOLOGA

Agua oxigenada al 1%

MATERIAL BIOLGICO

4 ratas del mismo sexo (por cada equipo)

EQUIPO

Microcentrfuga

Espectrofotmetro

Microscopio de inmersin

Centrfuga

PROCEDIMIENTO
1) Preparar 4 jeringas con 0.1 ml de solucin de heparina o EDTA y 4 tubos de ensaye
con 0.3 mL del mismo anticoagulante e identificarlos de acuerdo al No. de rata
correspondiente.
2) Realizar puncin cardiaca a cada una de las ratas, previamente anestesiada con ter
dietlico, para la obtencin de la muestra sangunea.
3) Una vez obtenida la muestra (aproximadamente un volumen de 5 ml de sangre),
colocarla en el tubo correspondiente, TENER CUIDADO DE NO HEMOLIZAR LA
SANGRE RETIRANDO LA AGUJA DE LA JERINGA.
4) Sacrificar a la rata por desnucamiento, hacer una incisin en la parte media del
abdomen observar la cavidad abdominal, colocar el hgado y el bazo en una cajas de petri
con 0.5ml de solucin salina para evitar la deshidratacin.
Tratamiento de la muestra biolgica:
5) Homogeneizar la sangre. Llenar 2 capilares (Apndice I) por rata y centrifugar en la
microcentrfuga a 11000 rpm por 5 minutos. Calcular el hematocrito (Hto).
6) Preparar un frotis con tincin de Wright. Utilizar agua de la llave en vez de sol.
amortiguadora. Observar en el microscopio, identificar y anotar las alteraciones
morfolgicas de los eritrocitos encontrados en las tinciones. Hacer un mnimo de 2
tinciones con la sangre de cada animal.
7) En un tubo de 13 X 100 mm colocar una gota de sangre y adicionar una gota de nuevo
azul de metileno, mezclar suavemente, dejar reposar 5 minutos, hacer un frotis y observar
al microscopio los reticulocitos, su morfologa y cantidad.

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TOXICOLOGA
8) A la muestra de sangre restante, cuantificar la Hemoglobina total (Hb) por la tcnica de
hemoglowiener (Apndice I) y Hemoglobina libre por el mtodo de la bencidina (Apndice
I).
CUESTIONARIO
1.- Construir una tabla con la siguiente informacin:
POR CADA EQUIPO
No.

Hb

Hb-L

Hematcrit

Rata/Soluci

Total

(mg/L

o%

(g/dL

rganos
Hgad Baz
o

Frotis
Wrigh Nuevo
t

Azul de
Metilen

Efect
o
Txic
o

o
A
B
C
D (SSI)
2.- Segn las dosis administradas cules fueron las diferencias en las alteraciones
morfolgicas en hgado y bazo? cules en las clulas sanguneas con respecto al control
(rata D)?
3.- Qu relacin observ entre las alteraciones morfolgicas de las clulas sanguneas y
los valores de hematocrito para cada una de las soluciones?
4.- Qu solucin provoc la aparicin de un mayor nmero de reticulocitos en el frotis y
cmo se relaciona con los valores de hemoglobina libre y hemoglobina total?
5.- Qu solucin provoc el mayor dao en la morfologa de los eritrocitos y cmo se
relaciona con los valores de hematocrito y el nmero de reticulocitos?
6.- Cmo afect la dosis de la solucin A, B y C al valor de hemoglobina libre y
hemoglobina total con respecto al control?
7.- De qu manera se correlacionan los valores de hemoglobina total y hemoglobina libre
con el hematocrito en cada una de las ratas con respecto al control?
8.- Con base en los resultados descritos en la tabla, explique qu solucin provoc
mayor efecto txico?
9.- De los resultados obtenidos experimentalmente qu factores podran influir para que
stos no se correlacionen al 100 %?
10.- Con la experiencia que adquiri en el desarrollo de este protocolo describa cmo
podra obtener resultados ms confiables?
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