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BIORREACTORES

I.

II.

OBJETIVOS
Conocer las partes de un biorreactor , su utilidad y la clasificacin de
este.
FUNDAMENTO TEORICO
II.1.
Definicin
Es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente
activo. En algunos casos, un biorreactor es un recipiente en el que se
lleva a cabo un proceso qumico que involucra organismos o sustancias
bioqumicamente activas derivadas de dichos organismos, se lleva a cabo
una reaccin catalizada por enzimas o clulas, libres o inmovilizadas.
Este proceso puede ser aerbico o anaerbico. Estos biorreactores son
comnmente cilndricos, variando en tamao desde algunos mililitros
hasta metros cbicos y son usualmente fabricados en acero inoxidable.
El biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales propias
(PH, temperatura, concentracin de oxgeno) al organismo o sustancia
qumica que se cultiva. En funcin de los flujos de entrada y salida, la
operacin de un biorreactor puede ser de tres puntos distintos:
Lote (batch).
Lote alimentado (fed batch).
Continuo o quimiostato.
II.2.

CLASIFICACIN:
II.2.A. DE ACUERDO A SUS FASES:
Homogneos.
Heterogneos.
II.2.B. DE ACUERDO AL METABOLISMO (CLASIFICACIN
BIOLGICA).
Los sistemas biolgicos deben interaccionar con el ambiente
externo para poder crecer y desarrollarse, es por eso que los
biorreactores se clasifican biolgicamente de acuerdo al
metabolismo procesal del sistema: Anaerbico, Facultativo,
Aerbico.
Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones estn
basados

en

el

metabolismo

celular

del

cultivo.

El

metabolismo

define

los

parmetros

caractersticas

operativas biolgicas de diseo y de operacin del


biorreactor. Estas caractersticas son las que intervienen en la
parte biolgica del sistema y tienen que ver con el
crecimiento, productividad y rendimiento del cultivo; por lo
que , definen la clasificacin biolgica . procesal del sistema
de cultivo.
II.2.C. DE ACUERDO A SU PROCESO DE OPERACIN:
Continuos.
Semicontinuo.
Discontinuos.
Esta es una clasificacin operativa y se aplica a cualquier
reactor, sea qumico o biolgico (biorreactor). En los
reactores biolgicos el modo de operacin define el sistema
de cultivo que es el mismo y delimita la clasificacin procesal
productiva

del bioproceso (cultivo). Al operar un

biorreactor en una determinada categora (discontinuo,


semicontinuo,

continuo),

automticamente

queda

determinado el modo de cultivo del sistema y se definen los


parmetros y las caractersticas operativas y de diseo que
intervienen en el proceso productivo del sistema.
II.2.D. DE ACUERDO A LA MEZCLA:

II.3.

Biorreactor discontinuo de mezcla completa.


Biorreactor continuo de mezcla completa.
Biorreactor continuo de flujo de pistn.
Biorreactor reactores de lecho fluidizado.

ELECCIN DEL TIPO DE REACTOR:


Control de PH y temperatura.
Exigencias de suministro o eliminacin de reactores gaseosos.
Presencia de partculas slidas deseadas o indeseadas en la
alimentacin.
Estabilidad qumica y/o biolgica de sustratos y productos.
Sustitucin del catalizador.
Inhibicin por sustratos y/o productos.

Escala de operacin.
Destinos del producto.

II.4.

DISEO DE BIORREACTORES

Es una tarea de ingeniera bastante compleja, los organismos o clulas


son capaces de realizar su funcin deseada con gran eficiencia bajo
condiciones ptimas. Las condiciones ambientales de un biorreactor tales
como flujo de gases (por ejemplo; oxgeno, nitrgeno, dixido de
carbono, etc.), temperatura, PH, oxgeno disuelto y velocidad de
agitacin o circulacin, deben ser cuidadosamente monitoreadas y
controladas.
La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan
recipientes,

sensores,

controladores

un

sistema

de

control

interconectados para su funcionamiento en el sistema biorreaccin.


La misma propagacin celular puede afectar la esterilidad y eficiencia del
biorreactor, especialmente en los intercambiadores de calor. Para evitar
esto, el biorreactor debe ser fcilmente limpiable y con acabados lo ms
sanitario posible (de ah sus formas redondeadas).
Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el bioproceso a
temperatura constante. La fermentacin biolgica es una fuente
importante de calor, por lo que en la mayor parte de los casos, los
biorreactores requieren de agua de enfriamiento. Pueden ser refrigerados
con una chaqueta externa o, para recipientes sumamente grandes, con
serpentines internos.
En un proceso aerobio, la transferencia ptima de oxgeno es tal vez la
tarea ms difcil de lograr. El oxgeno se disuelve poco en agua (y an
menos en caldos fermentados) y es relativamente escaso en el aire (20,8
%). La transferencia de oxgeno usualmente se facilita por la agitacin
que se requiere tambin para mezclar los nutrientes y mantener la
fermentacin homognea. Sin embargo, existen lmites para la velocidad
de agitacin, debidos tanto al alto consumo de energa ( que es
proporcional al cubo de la velocidad del motor) como al dao
ocasionado a los organismos debido a un esfuerzo de corte excesivo.

Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros


organismos simples que pueden resistir la fuerza de agitacin. Tambin
son fciles de mantener ya que requieren solo soluciones simples de
nutrientes y pueden crecer a grandes velocidades.
En los biorreactores utilizados para crecer clulas o tejidos, el diseo es
significativamente distinto al de los biorreactores industriales. Muchas
clulas y tejidos, especialmente de mamfero, requieren una superficie u
otro soporte estructural para poder crecer y los ambientes agitados son
comnmente dainos para estos tipos de clulas y tejidos. Los
organismos superiores tambin requieren medios de cultivo ms
complejos.

PRINCIPIOS EN EL DISEO DE BIORREACTORES

A. BIORREACTOR DISCONTINUO DE MEZCLA COMPLETA.


Variacin de forma contina.
Constante a travs del reactor.
Empleo de enzimas solubles.
Volumen pequeo de produccin.
DESVENTAJAS:
Cambios en las condiciones de operacin.
Grado de mezcla en reactores a gran escala.

B. BIORREACTOR CONTINUO DE MEZCLA COMPLETA.


Composicin uniforme.
Verstiles y baratos.
Facilidad de control de PH, temperatura, etc.
DESVENTAJAS:
Gastos energticos elevados.

C. BIORREACTOR DE FLUJO EN PISTN.


Invariable a lo largo del tiempo.
Vara a travs del reactor.
Clulas o enzimas libres (inoculacin).
Clulas o enzimas inmovilizados.
VENTAJAS:

Ms eficaces que los de mezcla completa.


Simples y fciles de manejar y automatizar.

D.

BIORREACTOR DE LECHO FLUIDIZADO


Fluidizacin: winkler (1921).
De lecho fluido o turbulento.
Biocatalizador o en suspensin.
Flujo de sustrato.
VENTAJAS:
Buen control de PH, T, gas, etc.
Gran rea de interaccin.
Facilidad de hacer trabajo en continuo.
DESVENTAJAS:
Tcnica de trabajo cara.
El diseo en bioingeniera no es solo la aplicacin de conceptos
bsicos y tericos que conlleven a lograr un prototipo; para la
realizacin integra de un modelo, otra gran parte, trata de la
adaptacin creativa y de la utilizacin del ingenio propio para lograr
el objetivo de conjuntar el ambiente biolgico de un cultivo vivo con
el ambiente artificial de un dispositivo controlado; este es el resultado
denominado biorreactor o reactor biolgico. Un biorreactor es por
tanto un dispositivo biotecnolgico que debe proveer internamente un
ambiente controlado que garantice y maximice la produccin y el
crecimiento de un cultivo vivo; esa es la parte biolgica.
Externamente el biorreactor es la frontera que protege ese cultivo del
ambiente externo: contaminado y no controlado. El biorreactor debe
por tanto suministrar los controles necesarios para que la operacin o
proceso (bioproceso) se lleve a cabo con economa, alto rendimiento
(productividad) y en el menor tiempo posible; esa es la parte
tecnolgica.

El biorreactor es un sistema totalmente cerrado para la recepcin y


tratamiento de las aguas residuales, residuos agrcolas y de cualquier otro
tipo de residuos orgnicos biodegradables, donde son convertidos en
abono biolgico formulado, libre de todo patgeno, y genera un gas,
llamado biogs, el cual se purifica hasta llevarlo a metano puro en la

mayor proporcin posible para ser utilizado en cualquier sistema de


combustin, motores o cualquier otro tipo de equipo que opere con gas
natural, incluyendo los vehculos particulares convertidos a gas natural
pues tiene un alto porcentaje de metano de no menos del 91% y su
composicin, poder calorfico, etc. Es casi idntico a la del gas natural,
debido a que se purifica hasta su punto ptimo.

II.5.

CULTIVOS Y FERMENTACIONES

Lo primero que hay que entender en el diseo de reactores biolgicos es que


contrario a los qumicos, su cintica no est determinada exclusivamente por
la velocidad de reaccin y las variables que la determinan. Aunque se puede
describir de manera similar a la qumica, la cintica biolgica tambin
depende de caractersticas intrnsecas del organismo o cultivo tales como
crecimiento y tasa de divisin celular, as como del tipo de operacin que se
lleve a cabo. Por eso, lo primero que se define en el diseo de un biorreactor
es el propsito de utilizacin; es decir, qu tipo de cultivo se va utilizar, el
modo de operar y/o el proceso de cultivo.
El biorreactor sistema de cultivo debe cumplir con los siguientes
objetivos:
a. Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen
de cultivo.
b. Mantener constante y homognea la temperatura.

c. Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.


d. Prevenir la sedimentacin y la floculacin.
e. Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el
f.
g.
h.
i.
j.

cultivo.
Mantener el cultivo puro.
Mantener un ambiente asptico.
Maximizar el rendimiento y la produccin.
Minimizar el gasto y los costos de produccin.
Reducir al mximo el tiempo.

Una fermentacin es un proceso biolgico o bioproceso que consiste en la


descomposicin de la materia orgnica por microorganismos fermentadores
(bacterias y hongos).
Un cultivo tambin es un bioproceso; pero generalmente se asocia a organismos
o microorganismos superiores (en orden jerrquico) a las bacterias; los cultivos
son casi todos del reino Eucariota.
II.6.

BIORREACTORES Y TIPOS DE CULTIVO

Los sistemas biolgicos que determinan el metabolismos celular de cultivo y el


modo procesal biolgico del sistema son:
A. CLULAS Y MICROORGANISMOS ANAERBICOS
Bacterias en su gran mayora, son microorganismos de metabolismos
degradativo (catablico); generalmente unicelulares, estos microorganismos
son autnomos y nutricionalmente independientes ( auttrofos); sus clulas
(cuerpos) no respiran (no utilizan la gluclisis para la respiracin celular), en
cambio, utilizan vas alternas, donde una molcula orgnica, producida
durante el proceso metablico (catabolismos), es utilizada como aceptor de
electrones, en un proceso bioqumico como respiracin oxidativa; esta
molcula es reducida a producto orgnico en un proceso comnmente
denominado fermentacin.
B. CLULAS Y MICROORGANISMOS FACULTATIVOS.
Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes:
aerbico y anaerbico; microorganismos de metabolismos mixto por lo que,
pueden tanto degradar (catabolismo) como construir (anabolismos) materia
orgnica, a partir de diferentes sustratos (materia prima), tanto orgnicos
como inorgnicos. Pese a su versatilidad, sus mayores representantes son

microorganismos que presentan relaciones parsitas o simbiontes tales como;


hongos y levaduras, por lo que son muy extensos.
C. CLULAS Y MICROORGANISMOS AERBICOS.
Pertenecen en su mayora al reino Eucariota (pero tambin hay procariotas)
son microorganismos y clulas que respiran (utilizan la gluclisis como
forma de respiracin celular); por lo que su metabolismo es constructivo
(anablico) y deben obtener sus nutrientes de diferentes fuentes. Sus
principales grupos estn representados por: bacterias y microorganismos
aerbicos, plantas y animales; cuyas clulas se pueden cultivar en
suspensiones celulares o bien, en diferentes arreglos artificiales o
modificadas.

II.7.

TIPOS DE CULTIVO QUE SE PUEDEN REALIZAR:

a) CULTIVOS MICROBIANOS ANAERBICOS FERMENTADOR


BACTERIAL (CO2)
Los microorganismos de metabolismos anaerbico son los ms simples
de todos, tan solo necesitan de un medio de cultivo adecuado, agitacin
vigorosa y cierta cantidad de CO2 disuelto para crecer y multiplicarse.
b) CULTIVOS MICROBIANOS FACULTATIVOS FERMENTADOR
BACTERIAL.
Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxgeno en
bajas concentraciones y adems de un sustrato adecuado, slo requieren
agitacin moderada y un medio de cultivo para crecer y desarrollarse.
c) CULTIVOS MICROBIANOS AERBICOS FERMENTADOR
BACTERIAL (O2).
Los microorganismos aerbicos necesariamente requieren la presencia de
oxgeno disuelto (OD) para sobrevivir; adems, agitacin moderada y un
medio de cultivo rico en nutrientes para poder crecer y desarrollarse.
d) CULTIVOS CELULARES AERBICOS Y FACULTATIVOS
FERMENTADOR MICTICO (CO2).

Los cultivos celulares se diferencian de los bacteriales (microbios) en


que

o son microorganismos procariotas, son eucariotas. Son

microorganismos aerbicos o facultativos pertenecientes al reino fungi


(hongos y levaduras), generalmente llamados micticos, requieren de la
presencia de CO2 disuelto en el medio como sustrato limitante de la
velocidad de reaccin y generan estructuras reproductivas muy
particulares.
e) CULTIVOS CELULARES AERBICOS ESTRICTOS
FERMENTADOR CON AIREACIN (O2).
El cultivo de microorganismos celulares (no bacteriales) aerbicos
estrictos requieren la presencia de oxgeno disuelto en el medio de
cultivo para el metabolismo celular; as como una adecuada agitacin.
f) CLULAS VEGETALES EN SUSPENSIN BIORREACTOR DE
ELEVAMIENTO POR AIRE (O2) EN RGIMEN TURBULENTO (Re
3000).
Las clulas vegetales pueden ser cultivadas en suspensiones celulares:
pequeos agregados celulares que se suspenden en el medio de cultivo
mediante agitacin. Dado que las clulas vegetales, el diseo del
biorreactor debe incorporar una lnea de aireacin (aire) para suministrar
oxgeno disuelto (OD) al medio de cultivo. El diseo debe contar con
agitacin vigorosa, pues los agregados celulares vegetales tienden a
agruparse (clusters) y de alcanzar gran tamao y peso, precipitaran. Por
eso, la operacin de este tipo de biorreactores debe ser en rgimen
turbulento (Re 3000). Los biorreactores para clulas vegetales en
suspensin generalmente son diseados con un mecanismo de
levantamiento por aire que combina una agitacin vigorosa (turbulenta)
con una adecuada aireacin (oxgeno disuelto) del medio de cultivo.
g) PROTOPLASTOS VEGETALES BIORREACTOR DE
LEVATAMIENTO POR AIRE (O2) EN RGIMEN LAMINAR (Re
2300).
Los protoplastos son clulas vegetales desprovistas de su pared celular,
esto se logra utilizando enzimas proteolticas (proteasas y lipasas) que
degradan la pared celular. Actualmente, el cultivo de protoplastos no es

muy comn, pero de realizarse, requiere de una cama de aire (burbujas


muy finas) que opere en rgimen laminar (Re 2300), para evitar que
los esfuerzos cortantes (esquileo) e hidrodinmicos (agitacin) generados
en el medio de cultivo daen (lisis celular) las clulas en suspensin.
Tambin es indispensable que el medio de cultivo contenga las proteasas
y lipasas necesarias para evitar la regeneracin de la pared celular.
h) CLULAS ANIMALES BIORREACTOR DE LECHO
FLUIDIZADO (O2)
Los cultivos de las clulas animales requieren de proximidad mutua y de
un soporte slido (anclaje) para interactuar (comunicacin clula
clula) y poder metabolizar (producir); esto por cuanto, las clulas
animales, por lo general, no son independientes y deben estar unidas a un
sistema (por ejemplo heptico) para funcionar adecuadamente. Par
suministrar esa proximidad y el soporte necesario, los diseos de
biorreactores para clulas animales deben aumentar la densidad celular
(concentrar) de las clulas en cultivo. Una forma de hacerlo es incorporar
un lecho fluidizado formado por cantidad de microesferas acarreadoras
hechas de material cermico poros inerte que, por su tamao
(micromtrico) forman una interfase con el medio de cultivo (fluido) que
permite la transferencia de masa (nutrientes y OD), energa (calor) y
momentun (agitacin) entre el medio de cultivo y las clulas en cultivo;
lo que es llamado lecho fluidizado. Los cultivos celulares animales, por
la delicada naturaleza de las membranas plasmticas requieren adems de
oxgeno disuelto (OD) en el medio de cultivo y de un rgimen de
agitacin laminar (Re 2300).
i) CLULAS INMOBILIZADAS BIORREACTOR DE FIBRA HUECA
(O2)
La inmovilizacin celular es otra forma de lograr proximidad celular y
aumentar la densidad celular y la concentracin de metabolitos dentro de
las clulas. La inmovilizacin es un mtodo mucho ms eficiente y logra
rendimientos muy superiores a los del lecho fluidizado. Pero, los
fenmenos de transferencia (masa, momentun y energa) se ven muy
limitados por la inmovilidad. Esto es especialmente crtico en cultivos

de clulas de mamfero por cuanto la clula no recibe la nutricin


adecuada.
Los reactores de fibra hueca son los dispositivos ms utilizados para
inmovilizar y concentrar cultivos celulares animales. Su diseo consiste
en una batera de fibras huecas y porosas en su interior, colocadas en
paralelo. Las clulas se concentran y aumenta la densidad celular, en los
intersticios de las fibras huecas. El medio de cultivo fluye en
contrasentido desde el exterior del reactor o a travs de una carcasa como
si fuera un intercambiador de calor de doble tubo. Para solventar el
problema de la escasa transferencia de masa (nutrientes y OD) dentro de
la fibra hueca, un diseo novedoso es el tambor rotativo en el cual, el
tambor externo rota sobre la batera de fibras huecas, generando una
circulacin constante de masa y de momentun, aumentando las tazas de
transferencia.
j) CLULAS EMPAQUETADAS BIORREACTOR DE LECHO
EMPACADO (O2)
El empaquetamiento celular es una forma menos drstica de
inmovilizacin; pues sta es parcial. Tambin tiene el objetivo de
aumentar la concentracin y la densidad celular; pero al no estar
enclaustradas las clulas, la transferencia de masa es mayor, aunque
siempre limitada. Un lecho empacado es una matriz de soporte slido que
retiene las clulas, bien por geometra (dentro de los intersticios o
espacios huecos de la matriz), bien por afinidad (paso o adherencia
selectiva). Un biorreactor con este propsito debe contener un lecho de
soporte slido, sumergido en el medio de cultivo. La oxigenacin
generalmente se realiza en el exterior del lecho, a travs del medio de
cultivo.
k) CULTIVOS ENZIMTICOS REACTORES DE LECHO
CATALTICO.
Los cultivos enzimticos se comportan en algunos aspectos como
cultivos celulares y en otros como reactivos qumicos. Debido a que un
sustrato enzimtico es un cataltico de una reaccin biolgica, la cintica
de estos reactores puede simularse como la qumica, pero sin olvidar que

el compuesto es biolgico. Los sustratos enzimticos deben estar


anclados a un lecho semislido o a un semifluido (segn sea el caso)
dependiendo de la naturaleza enzimtica del sustrato; que por la
naturaleza de la enzimas se conocen como lechos catalticos. Muchas
veces el medio de cultivo, adems de la enzima, requiere, para un
sustrato determinado, su respectivo precursor metablico llamado
cofactor, ms algn componente especial que agilice el proceso
metablico.
II.8.

MODO DE OPERACIN Y SISTEMAS DE CULTIVO.

El modo de operacin de un sistema de cultivo, es sinnimo del modo de


operar del biorreactor o fermentador. ste no solo influye en el diseo
propio del reactor, tambin, en el modelo cintico de crecimiento del cultivo
y en el proceso de produccin. Existen tres modos de cultivo aunados a tres
modos bsicos de operacin:

II.8.A. DISCONTINUO (batch).


Por lotes o tandas, sin alimentacin (F); se coloca dentro del
biorreactor la carga total de cada proceso (tanda o lote) de cultivo o
fermentacin y se deja que se lleve a cabo el proceso productivo o la
fermentacin por el tiempo que sea necesario; el cual se denomina
tiempo de retencin.
Las clulas se cultivan en biorreactor con una concentracin inicial,
sin que esta sea alterada por nutrientes adicionales o el lavado, por lo
que el volumen permanece constante y slo las condiciones
ambientales del medio (PH, temperatura, velocidad de agitacin) son
controladas por el operador. Es proceso finaliza cuando todo el
sustrato es consumido por la biomasa.
II.8.B. SEMICONTINUO (Fed batch).
Por lotes alimentados, con alimentacin de entrada (F1); se alimenta
una lnea de entrada o alimentacin (F1) para que el sistema de
cultivo tenga un producto (biomasa) con mximo crecimiento
(exponencial) y aumente la productividad. Los nutrientes son

alimentados al biorreactor de forma semicontinua o continua,


mientras que no hay efluente en el sistema. La adicin intermitente
del sustrato mejora la productividad de la fermentacin manteniendo
baja la concentracin del sustrato. Este proceso est restringido por la
capacidad volumtrica del reactor.
II.8.C. CONTINUO.
Por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada F1 con nutrientes
de manera continua y se drena una salida F2 o lavado; de manera
que los flujos o caudales de ambas lneas sean iguales y la
produccin sea continua.

II.9.

III.

Partes de un Biorreactor

CONCLUSIONES
Se logr conocer que es un biorreactor y para qu son utilizados, as
mismo reconocer sus partes y los diferentes tipos.
El biorreactor es usado casi universalmente en la industria de la
fermentacin; una de las razones es su facilidad de control. Sin
embargo presenta algunas desventajas.

IV.

BIBLIOGRAFIA
Pginas Web
http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/2748/Capitulo2.pdf

https://sites.google.com/site/bioingenieriauv15/unidad-2biorreactores-y-su-aplicacion
http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/1608/Capitulo2.pdf
http://www.redalyc.org/pdf/620/62060105.pdf