CLASIFICIACIN DE LAS BACTERIAS EN BASE A LA TINCIN DE GRAM Y

SU IMPORTANCIA CLNICA
Agosto 2007
La microbiologa es la base para determinar la etiologa de las enfermedades
infecciosas. El uso de diferentes tcnicas de deteccin o identificacin de
microorganismos se encamina a lograr un diagnstico definitivo (etiolgico) de la
enfermedad que presenta el paciente. Por ejemplo, un paciente con fiebre, cefalea
y rigidez de nuca presenta un cuadro clnico de meningitis. El diagnstico clnico de
la enfermedad de este paciente ser Meningitis. El anlisis de lquido
cefalorraqudeo, si mostrara presencia de 2000 leucocitos con predominio (90%) de
polimorfonucleares nos aclarara el diagnstico como una Meningitis purulenta o
bacteriana. Solamente hasta que contamos con los resultados de la tincin de
Gram (cocos Gram positivos) y cultivo (aislamiento de Streptococcus pneumoniae)
podemos determinar un diagnstico definitivo: Meningitis bacteriana por
Streptococcus penumoniae. En esta presentacin se revisar, la clasificacin de
las bacterias en base a la tincin de Gram y su importancia clnica.
TINCIN DE GRAM
La tincin de Gram es de las tcnicas mas utilizadas en Microbiologa. Se resume
a continuacin la tcnica para efectuarla:
1) Prepara frotis y fijar con calor.
2) Cubrir con cristal violeta.
3) Lavar con agua.
4) Cubrir con lugol durante 1 minuto.
5) Lavar con agua.
6) Decolorar utilizando combinacin de acetona-alcohol.
7) Lavar con agua.
8) Cubrir durante 10-30 segundos con safranina.
9) Lavar con agua y dejar secar.
La coloracin morada indica la presencia de organismos Gram positivos, mientras
que la coloracin roja indica organismos Gram negativos).
CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS EN BASE A SU MORFOLOGA Y
TINCIN DE GRAM
Para fines prcticos las bacterias se pueden clasificar de acuerdo a su morfologa
(cocos, bacilos), la forma en que se agrupas (cocos en cadenas: estreptococos;
cocos en racimos: estafilococos) y la coloracin que adquieren con la tincin de
Gram (Gram positivas y Gram negativas). La identificacin preliminar del agente
etiolgico de una infeccin se basa en 1) los resultados de la tincin de Gram
efectuada directamente en la muestra enviada al laboratorio y 2) los resultados de
la tincin de Gram en las bacterias aisladas en cultivo. La identificacin definitiva
del organismo se confirma de acuerdo con otras caractersticas, tales como el
medio de cultivo en que crecieron las bacterias, las condiciones de incubacin
(cultivo aerobio o anaerobio), y los resultados de diversas pruebas bioqumicas o
moleculares.

PRINCIPALES AGENTES BACTERIANOS Y SUS CARACTERSTICAS EN

TINCIN DE GRAM, DE ACUERDO AL SITIO DE INFECCIN
INFECCIONES RESPIRATORIAS
Faringitis
Agente principal: Streptococcus pyogenes
Mtodo de diagnstico: Cultivo de exudado farngeo
Caractersticas en la tincin de Gram: Estreptococos Gram- positivos.
Otitis Media y Sinusitis Aguda
Agentes principals: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella
catarralis
Mtodos de diagnstico (para casos de difcil manejo con sospecha de organismo
resistente): cultivo de lquido obtenido mediante timpanocentesis o aspiracin de
senos paranasales (tincin de Gram, cultivo y antibiograma).
Caractersticas en la tincin de Gram:
Streptococcus pneumoniae, diplococos (estreptococos) Gram positivos.
Haemophilus influenzae, coco-bacilos Gram negativos.
Moraxella catarralis cocos Gram negativos.
Epiglotitis
Agente principal: Haemophilus influenzae tipo b.
Mtodo de diagnstico: Cultivo bacteriano de hisopado directo de epiglotis
(mediante visualizacin directa al momento de intubacin endotraqueal del
paciente).
Caractersticas en la tincin de Gram: coco-bacilos Gram negativos.
Neumonia
Agente principal: vara de acuerdo a la edad, presentacin clnica (aguda, crnica),
estado inmune del paciente, poca del ao. (Mltiples agentes, adems de las
bacterias pueden producirla como virus, Micoplasmas, Chlamydias, etc.).
Principales bacterias: Neumococo, Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae,
algunos bacilos Gram negativos (Klebsiella pneumoniae).
Mtodo de diagnstico: Tincin de Gram y cultivo de expectoracin (en adultos)
Cultivo de derrame pleural.
Cultivo de secreciones obtenidas durante broncoscopia.
Caractersticas en la tincin de Gram:
Streptococcus pneumoniae, diplococos (estreptococos) Gram positivos.
Haemophilus influenzae, coco-bacilos Gram negativos.
Staphylococcus aureus, cocos Gram positivos (se observan en racimos).
Klebsiella pneumoniae, bacilos Gram negativos.
INFECCIONES GASTROINTESTINALES
Agentes bacterianos: Escherichia coli (enterotoxignica, enteroadherente,
enterohemorrgica, enteroinvasiva), Shigella, Salmonella, Campylobacter, Yersinia.
Mltiples otros agentes (por ejemplo agentes virales como rotavirus, virus Norwalk,
adenovirus o agentes parasitarios, Giardia lamblia, Entamoeba histolytica) pueden
causar infecciones intestinales.
Mtodos de diagnstico: citologa de moco fecal, coprocultivo.
La citologa de moco fecal no se hace con la intencin de observar a las bacterias
(sino la presencia de leucocitos). Para lograr el aislamiento de las diversas
bacterias de inters se requiere de medios de cultivo selectivos.

Las caractersticas de las bacterias participantes en infecciones intestinales cuando

se observan con la tincin de Gram son la de bacilos Gram negativos.
INFECCIONES DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL
Meningitis aguda bacteriana (considerar la posibilidad de meningitis o encefalitis
viral como diagnstico diferencial).
Principales agentes bacterianos: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae tipo b, Neisseria meningitidis, Listeria monocitogenes.
Mtodos de diagnstico (meningitis bacteriana): Tincin de Gram y cultivo de
lquido cefalorraqudeo. Mtodos diagnsticos complementarios en meningitis
bacteriana: Deteccin de bacterias mediante co-aglutinacin en lquido
cefalorraqudeo.
Caractersticas en la tincin de Gram:
Streptococcus pneumoniae, diplococos (estreptococos) Gram positivos.
Haemophilus influenzae, tipo B; coco-bacilos Gram negativos.
Neisseria meningitidis, cocos Gram negativos.
Listeria monocitogenes, bacilos Gram-positivos.
INFECCIONES DE PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
Principales agentes: Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus.
Mtodo de diagnstico: Tincin de Gram y cultivo de secreciones o aspirados.
Caractersticas en la tincin de Gram:
Staphylococcus aureus, cocos Gram positivos (se observan en racimos).
Streptococcus pyogenes Estreptococos Gram- positivos.
INFECCIONES URINARIAS
Principal agente: Escherichia coli, otros bacilos Gram negativos.
Mtodo de diagnstico: Urocultivo.
Caractersticas en la tincin de Gram: Bacilos Gram negativos.
INFECCIN DE HUESOS Y ARTICULACIONES
Osteomielitis.
Principal agente: Staphylococcus aureus, cocos Gram positivos.
Otros organismos incluyen a bacilos Gram negativos.
Artritis sptica.
Principal agente: Staphylococcus aureus, cocos Gram positivos.
Neisseria gonorrhoeae, cocos Gram negativos.
Otros agentes: estreptococos, bacilos Gram negativos.
Es importante hacer notar que no todos los agentes infecciosos que deben de
considerarse para cada tipo de infeccin se han mencionado, como tampoco todos
los mtodos diagnsticos especficos disponibles.
Bibliografa
1. Principios del diagnstico microbiolgico en medicina. En: Brooks GF, Batel
JS, Morse SA, editores. Microbiologia mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg
17. edicin. El Manual Moderno, Mxico, DF, 2002.