Distribucion y ubicuidad de los miroorganismos

Nicols Pedraza, Beatrz Lpez, kevin sanjuanelo.

Universidad del Atlantico
Programa de farmacia
Fecha de entrega: 2 de marzo de 2016

Resumen
En la experiencia se demostr la ubicuidad de los microorganismos empleando
diferentes ambientes naturales en los cuales estos podan crecer y reproducirse,
utilizando una caja petri con agar nutritivo, el cual sirvi de medio, luego se
depositaron los miroorganismos en la caja, sellando y cultivndolos por 48 horas,
dentro de este tiempo se observaron la aparicin de las primeras colonias, as
como la cantidad, el color, y el tamao que estas posean, con esto se comprob
que estos pueden existir en cualquier medio biolgico, y no solo exitisino tambin
reproducirse y crear grandes colonias, en este caso bacterianas.
Introduccin
A pesar de que el aire no posee una
microbiota autctona, puede ser un
medio de dispersin de muchos
microorganismos
como
esporas
bacterias virus y hongos generados
en
medios
distintos.
Estos
microorganismos han desarrollado
muchas estrategias adaptativas que
les permiten propagarse a todos los
ambientes posibles. Estas estrategias
de propagacin y sus mtodos de
reproduccin eficientes son su
principal va de supervivencia. [1]
Debido a la facilidad de propagacin,
a la alta tasa reproductiva y la
capacidad infecciosa de muchos de
estos microorganismos, son los
responsables de epidemias De
acuerdo a la forma de propagacin
los microorganismos pueden entrar
por el aparato respiratorio, por la
boca, a travs de la piel,
conjuntiva(ocular, genital) ya sea en

forma directa o llevados por un vector

como un mosquito. [2]
Por esta razn podemos decir que los
microorganismos son ubicuos, ya que
se encuentran en todos los hbitats
[3]
. En esta prctica se intentar
demostrar la facilidad del contagio de
bacterias en el trabajo de laboratorio.
Adems se comprobar la ubicuidad
mencionada de los microorganismos
ambientales, discutir el significado de
la presencia de microorganismos en
determinados ambientes.
Objetivo general
Demostrar que los
microorganismos se
encuentran en diversos
ambientes.
Objetivos especficos
Conocer las tcnicas utilizadas
en microbiologa para
determinar la existencia de
microorganismos en un
ambiente determinado.

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piel, dedo y mucosa. Este informe fue

diseado refirindose a una sola de
esas muestras (mucosa).

Distinguir las diferentes formas

de crecimientos de estos
microorganismos en diferentes
medios de cultivos
establecidos en el laboratorio.

Resultados
La muestra fue observada durante el
perodo de incubacin, se tomaron
evidencias fotogrficas:

Materiales

Agar nutritivo
Cajas de Petri estriles
Escobilln de algodn estril
Incubadora
Asa metlica

Metodologa
Se tom un escobilln estril y se
insert en la boca frotando sobre la
mucosa de la misma, tomando una
caja de Petri que contena agar
nutritivo.
El
escobilln
ya
contaminado
se
frot
muy
suavemente en forma de zigzag
sobre el agar. La caja de Petri fue
tapada y sellada con cinta de papel
para evitar que otros organismos
interfirieran en el medio, luego fue
rotulada con el nombre del medio del
que se tom (boca), la fecha, el grupo
correspondiente. Luego de invetir la
caja, sta se llev a porcceso de
incubacin durante un perodo de 24
a 48 horas.

Imagen 1. Colonias formadas a las 28

horas de incubacin.
A partir de las observaciones se pudo
tomar los siguientes datos
Nmero de colonias: 24 (contando
an las mas pequeas a y apenas
visibles).
Color: blanco hueso.
Forma: circulares.
Tamao: aun pequeas con respecto
al tiempo de incubacin.

Dentro del perdo establecido la caja

fue revisada para observar los
avances y tomar datos.
Cabe resaltar que en el laboratorio
fueron tomadas varias muestras de
diferentes ambientes; aire, moneda,

La cavidad oral contiene una

microbiota caracterstica debido a los
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diferentes factores fisicoqumicos

como pH, humedad y temperaturas,
as como factores de adhesin,
agregacin y nutricionales, lo que
favorece a la localizacin de estos
organismos
en
esta
zona,
convirtindola en el area ideal de
muchas
bacterias
para
su
supervivencia y el medio necesario
para que estas realicen sus procesos
metablicos.

nmero de microorganismos.
Ej. Caldo nutritivo.
Slidos:
Se pueden preparar a partir de
medios lquidos a los cuales se
les
aaden
agentes
solidificantes
como
agar,
gelatina o slica gel. Se utilizan
con
frecuencia
en
el
aislamiento y mantenimiento
de los microorganismos en el
laboratorio. Ej. Agar nutritivo

Conclusiones
A partir de los resultados obtenidos
por todos los grupos de laboratorio,
fue posible comprobar la existencia
de los microorganismos en diversos
ambientes, superficies corporales,
lquidos y en el aire y concluir que
estos seres se encuentran en casi
todas las superficies y ambientes
conocidos. Aparte de la capacidad de
estos organismos de adaptarse a un
nuevo medio y tomar de l los
nutrientes y metabolitos para su
reproduccin.
Estos resultados nos invitan a
reflexionar acerca de los cuidados
que se deben tener al tratar con estos
microorganismos.

Segn la naturaleza
constituyentes

de

sus

Medios naturales o complejos:

Estn
constituidos
por
sustancias
complejas
de
origen animal o vegetal y
usualmente se complementan
con el aadido de minerales y
otras sustancias. No se
conocen
todos
los
componentes del medio de
cultivo, ni las cantidades
exactas
en
que
estn
presentes. Ej. Extracto de
carne, extracto de levaduras.
Medios
sintticos
o
qumicamente definidos
Se preparan a partir de
ingredientes
qumicamente
puros y por lo tanto se puede
conocer
exactamente
su
composicin
cuali
y
cuantitativa. Por su costo slo
se emplean en procedimientos
especiales.

Preguntas
1. Tipos de medios de cultivo
Segn su estado fsico
Lquidos
Usualmente se denominan
caldos ya que contienen los
nutrientes disueltos en agua.
Permiten
obtener
suspensiones con un elevado

Segn sus propsitos de uso

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Medios de enriquecimiento:
Cualquier cultivo en medio
lquido que resulte en un
incremento en el nmero de un
tipo dado de microorganismo
en relacin con el nmero de
otros tipos de microorganismos
que puedan estar en el
inculo. Este medio puede
contener
sustancias
que
favorezcan el crecimiento del
microorganismo
que
nos
interesa o que inhiban el
crecimiento de los otros tipos
de microorganismos presentes
Ej. Caldo tetrationato

A veces se combinan en un
mismo
medio
las
caractersticas de ser selectivo
y diferencial. Ej.: el agar Mac
Conkey, inhiben el crecimiento
de las bacterias gram +.
2. Preparacion y esterilizacin
de medios de cultivo
En la actualidad, la mayora de los
medios de cultivo se encuentran
comercializados; normalmente bajo la
forma de liofilizados a los que es
preciso rehidratar. En estos casos la
preparacin del medio de cultivo se
reduce sencillamente a pesar la
cantidad deseada del mismo y
disolverla
en
agua
destilada
siguiendo las instrucciones del
fabricante.
Las
sustancias
termolbiles, se esterilizan por
filtracin y se aaden al resto de los
componentes despus de que estos
hayan sido previamente esterilizados
en el autoclave y enfriados a
temperatura ambiente a 40-50C si
se trata de medios con agar.

Medios selectivos:
Son
iguales a
los de
enriquecimiento, se diferencian
por ser medios slidos y estn
diseados para el aislamiento
de
microorganismos
especficos.
Ej. Agar desoxicolato citrato
Medios diferenciales:
No
contienen
sustancias
inhibidoras, es decir, permiten
el
crecimiento
los
microorganismos,
pero
si
contienen
indicadores
de
productos derivados de la
actividad metablica de los
microorganismos
sobre
algunos de los componentes
del medio. Se utilizan para la
identificacin
de
los
microorganismos. Ej.: Agar
base rojo fenol

Antes de su esterilizacin los medios

lquidos se reparten en los recipientes
adecuados (tubos, matraces, etc.). Si
es un medio slido y se ha de
distribuir en tubos en matraces ser
necesario fundir el agar en bao
Maria u horno microondas, una vez
fundido
y
homogenizado,
se
distribuye en caliente a los tubos
matraces (no en placas Petri) se tapa
y se esteriliza en el autoclave.

Medios selectivos diferenciales:

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Una vez finalizada la esterilizacin los

medios se dejaran enfriar a
temperatura ambiente y en el caso de
medios slidos contenidos en tubos
debern, en su caso, inclinarse para
que al solidificarse adopten la forma
de agar inclinado pico de
flauta(slant) si tal es su finalidad.
Las placas de Petri se preparan
vertiendo el medio fundido y estril
dentro de ellas y en un ambiente
asptico
(por ejemplo
en
la
proximidad de la llama de un
mechero Bunsen) es conveniente
homogenizar el medio en el
transcurso de la operacin para evitar
que el agar sedimente en el fondo del
recipiente y no se distribuya por igual
en todas las placas. Tambin es
posible conservar el medio destinado
a preparar placas Petri solidificado y
estril en tubos que se fundirn al
bao Maria en el momento de la
preparacin de las mismas.

desnaturalizacin de protenas,
fusin y desorganizacin de las
membranas
y/o
procesos
oxidantes irreversibles en los
microorganismos.
Estos
efectos
se
deben
principalmente a dos razones:
- El agua es una especie qumica
muy reactiva y muchas estructuras
biolgicas son producidas por
reacciones que eliminan agua.
- El vapor de agua posee un
coeficiente de transferencia de
calor mucho ms elevado que el
aire.
Calor Seco: El calor seco
produce desecacin de la
clula, es esto txicos por
niveles elevados de electrolitos,
fusin de membranas. Estos
efectos se deben a la
transferencia de calor desde los
materiales
a
los
microorganismos que estn en
contacto con stos. La accin
destructiva del calor sobre
protenas y lpidos requiere
mayor temperatura cuando el
material est seco o la actividad
de agua del medio es baja.

Los caldos y medios slidos pueden

conservarse, una vez esterilizados, a
temperatura ambiente pero para
reducir su deshidratacin y el
consiguiente
cambio
en
las
concentraciones de sus componentes
es preferible conservarlos a 4C.
3. Mtodos de esterilizacin.
Mtodos Fsicos

Radiaciones.

Calor Hmedo: su eficacia

depende de dos factores: el
tiempo de exposicin y la
temperatura. Todos

a). Radiaciones ionizantes:

Producen iones y radicales
libres que alteran las bases de
los
cidos
nucleicos,
estructuras proteicas y lipdicas,
y componentes esenciales para
la
viabilidad
de
los

los
microorganismos
son
susceptibles, en distinto grado, a la
accin del calor. El calor provoca
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microorganismos, dando lugar

a
mutaciones
en
los
microorganismos
que
los
incapacitan
metablicamente
para producir una enzima
esencial y sobreviniendo la
muerte
bacteriana.
Las
radiaciones
tienen
gran
penetrabilidad y se las utiliza
para
esterilizar
materiales
termolbiles (termosensibles).

Filtracin: Se usan membranas

filtrantes con poros de un
tamao
determinado.
El
tamao del poro depender del
uso al que se va a someter la
muestra. Los filtros que se
utilizan pueden no retener
virus o micoplasmas, estos
ltimos estn en el lmite de
separacin segn el dimetro
de poro que se utilice.

b) Rayos Gamma: basado en

los conocimientos sobre la
energa atmica. Este tipo de
esterilizacin se aplica a
productos
o
materiales
termolbiles
y
de
gran
importancia en el campo
industrial. Puede esterilizar
antibiticos,
vacunas,
alimentos, etc.

Sedimentacin: Es un mtodo
por
el
cual
los
microorganismos
son
eliminados
de
depsitos
hdricos. Se fundamenta e el
hecho de que la densidad de
muchas bacterias es algo
mayor
de
1.0;
en
consecuencia, se depositan en
el fondo del recipiente que las
contiene quedando el lquido
sobrenadamente no estril del
todo, pero su poblacin
microbiana
disminuye
notablemente. En el laboratorio
la sedimentacin se acelera
por centrifugacin. Es utilizado
este mtodo para identificar
microorganismos en muestras
de agua potable y otras
sustancias.

c). Rayos X: requieren mucha

energa, son pocos operativos
para su empleo masivo, su uso
es muy costoso, por lo tanto
son muy poco usados con fines
de esterilizacin
d). Rayos Ultravioletas: Afectan
a las molculas de DNA de los
microorganismos.
El
ADN
absorbe una longitud de onda
de 2600 y libera energa
ocasionado
rearreglo
de
enlaces
qumicos
son
escasamente penetrantes y se
utilizan para superficies, y la
esterilizacin en quirfanos.

Mtodos Qumicos
Provocan la perdida de viabilidad de
los microorganismos.
Oxido de etileno: Es un agente
alquilante que se une a
compuestos con hidrgenos
lbiles como los que tienen

Mtodos Mecnicos
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grupos
carboxilos,
amino,
sulfhidrilos, hidroxilos, etc.

en el fondo de una caja

envueltas en gasa o algodn,
que despus pueden ser
expuesta al calor para una
rpida esterilizacin (accin
del gas formaldehdo).

Es utilizado en la esterilizacin
gaseosa, generalmente en la
industria
farmacutica.
Destruye
todos
los
microorganismos incluso virus;
es un agente microbiano de
amplio espectro, destruye la
bacteria en estado vegetativo,
incluyendo al bacilo de la
tuberculosis, las esporas y los
virus. Sirve para esterilizar
material termosensibles como
el descartable (goma, plstico,
papel,
etc.),
equipos
electrnicos,
bombas
cardiorrespiratorias, metal, etc.
Es muy peligroso por ser
altamente
inflamable
y
explosivo,
y
adems
cancergeno.

Esterilizacin por gas-plasma

de Perxido de Hidrgeno: Es
proceso de esterilizacin a
baja temperatura la cual
consta en la transmisin de
perxido de hidrgeno en fase
plasma (estado entre lquido y
gas), que ejerce la accin
biocida.
Bibliografia
[1] M. C. DE LA ROSA, M. A. MOSSO
y C. ULLN, 2002,
El aire: hbitat y medio detransmisin de
microorganismos,
Departamento de Microbiologa II.
Facultad deFarmacia. UCM.

Otros:
Aldehdos:
Son
agentes
alquilantes que actan sobre
las protenas, provocando una
modificacin irreversible en
enzimas e inhiben la actividad
enzimtica. Estos compuestos
destruyen las esporas.

[2] FARANATI A., 2004, Gineconet,

S.A., disponible en:
http://www.gineconet.com/nuevositio/
noticias/expand2.asp?id=18
[3] ARANGO M. C., 2008, UDEA,
Generalidades de la microbiologa,
disponible en:
ingenieria.udea.edu.co/grupos/microb
iol/General_micro2_doc.doc

Glutaraldehdo: Consiste en
preparar una solucin alcalina
al 2% y sumergir el material a
esterilizar de 20 a 30 minutos,
y luego un enjuague de 10
minutos. Este mtodo tiene la
ventaja de ser rpido y ser el
nico esterilizante efectivo fro.

Formaldehdo: Se utilizan las

pastillas de paraformaldehido,
las cuales pueden disponerse
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