UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)

Facultad de Farmacia y Bioqumica
Escuela Acadmico Profesional de Farmacia y
Bioqumica

Bromatologa

Cuestionario Cuantificacin de
vitaminas liposolubles y vitaminas
hidrosolubles

Profesora:
Mg. QF Carmen R. Arana Avila
ALUMNO:
Carlos Hernn Carhuaz Vsquez

Lima Per
2016

Cuestionario
1. Dibujo estructural del HPLC
Principalmente, pueden utilizarse dos modos de cromatografa (fase normal y fase
reversa) para la cuantificacin de la vitamina A. El Cuadro 2 muestra dos
procedimientos de trabajo a partir de las mltiples posibilidades que existen para
lograr buenas separaciones.
Los
estndares
y
soluciones
estndares
deberan
controlarse
espectromtricamente en cuanto a la pureza y la concentracin corregida debera
utilizarse para el clculo.
En algunos de los sistemas cromatogrficos, se logra una separacin entre el
retinol "slo trans" y el 13-cis retinol. En estos casos, los resultados deberan
informarse como equivalentes de retinol "slo trans" lo cual es la suma del retinol
"slo-trans" y el 13-cis retinol despus de corregir considerando la menor
biopotencia (75% del retinol "slo-trans"). Es importante indicar claramente las
unidades utilizadas para informar los resultados.

2. Diferentes mtodos para determinar una vitamina hidrosoluble y para

cuantificar una vitamina liposoluble.

Tcnica

Cromatografa de papel

Principio

El analito asciende por un papel absorbente que acta como

soporte o fase estacionaria de una fase mvil que sube por
capilaridad.
Cromatografa de capa Fina

Tcnica
Principio

Un slido acta como fase estacionaria, se extiende en una

capa delgada sobre una placa de soporte.

Tcnica

Cromatografa de gases

Principio

La muestra se volatiliza y la elucin se produce por el flujo de

una fase mvil de gas inerte que transporta el analito a travs
de la fase estacionaria.
Mtodos colorimtricos

Tcnica
Principio

Incorporacin de un indicador en la matriz que reacciona con el

analito.

Tcnica

Espectrometra de fluorescencia

Principio

Utiliza una lmpara para la excitacin de la fluorescencia y una

serie de tubos fotomultiplicadores que sirven como detectores.

Tcnica

HPLC

Principio

La sustancia pasa a travs de una columna con una fase

estacionaria y por el bombeo de un lquido a alta presin.

3. Datos de sierra exportadora respecto a los productos que tienen

vitaminas en macro.

4. Adems del HPLC que otros mtodos existen para cuantificar las
vitaminas liposolubles o vitaminas hidrosolubles.
Valoracin
redox
radioinmunoensayo,
fluoromtricos.

con
yoduro
para
cuantificar vitamina
C,
mtodos colormetricos, espectrofotomtricos y

Evaporacin y dilucin
Se agregan aproximadamente 2-5mg de BHT al extracto antes de la
evaporacin utilizando un evaporador rotatorio bajo un vaco parcial y a
una temperatura que no exceda 50C Deben tomarse medidas para
remover restos de agua tales como secar con sulfato de sodio, o
destilacin azeotrpica con etanol o tolueno o el uso de papel filtro para
separacin de fases.
El residuo es redisuelto utilizando de preferencia la fase mvil u otro
solvente compatible con HPLC de tal modo de obtener una concentracin
apropiada para la inyeccin dentro de la columna de HPLC. Esta la
solucin final de la muestra.
Saponificacin y extraccin
La mayora de los procedimientos de anlisis estn utilizando una etapa de
saponificacin antes de la extraccin con un solvente orgnico adecuado.
Una comparacin de los mtodos basada en los datos obtenidos en un
estudio colaborativo revela que las condiciones para la saponificacin
pueden variar dentro de ciertos lmites sin afectar los resultados. En
generalmente 2-10 g de la muestra se saponifican preferentemente bajo
nitrgeno utilizando una mezcla de hidrxido de potasio acuoso, etanol o
metanol, agua y con la adicin de un antioxidante como cido ascrbico,
pirogalol o BHT. Los antioxidantes deberan ser agregados a la muestra
antes de la adicin de la solucin de hidrxido de potasio.
El tiempo normal de saponificacin es entre 15-45 minutos con
temperaturas que fluctan de 80 a 100C (reflujo).
La vitamina A es extrada de la solucin de saponificacin por medio de un
solvente adecuado por ejemplo: ter dietlico, tertbutil metil ter, n-hexano 3
a 4 veces, con volmenes que fluctan de 50-150 ml. Los extractos
combinados son lavados a pH neutro con agua (2-4 veces, 50-150 m1).
Variacin Analtica
La variacin analtica que existe en estos procedimientos depende
basicamente de la cantidad de vitamina presente y de lo complejo de la
matrz, de modo tal que en el caso de alimentos terminados, el porcentaje
de variacin es mucho mayor que cuando se trata de una premezcla
vitamnica. Esta variacin se afecta por el procedimiento de de purificacin
y limpieza de extractos que se hayan utilizado. Como referencia, se
especifican en la Tabla 27.2. las variaciones esperadas para el ensayo de
vitamina D3 en el procedimiento oficial de los laboratorios Roche (Manz
and Phillipp).

Referencias bibliogrficas
1.

Mtodos colormetricos, espectrofotomtricos y fluoromtricos. Disponible en:

http://repositorio.uis.edu.co/jspui/bitstream/123456789/331/2/128410.pdf
2. Tablas y calculadoras. Disponible en : http://www.dietas.net/tablas-ycalculadoras/tabla-de-composicion-nutricional-de-losalimentos/cereales/granos-y-harinas/harina-de-maiz.html
3. Problemas en la cuantificacion de vitaminas liposolubles en premezclas y
alimentos
terminados.
Disponible
en:
http://www.fao.org/docrep/field/003/ab482s/ab482s28.htm
4. Schneider, D. 1988c. Determination of vitamin K3 in feedstuffs and vitamin
premixes using HPLC. Estimation of vitamins and carotenoids in premixes and
feeds. Animal Nutrition Products. Development and Application BASF.