SISTEMA DIEGO

1. RESUMEN
El sistema diego es un sistema sanguneo irregular que forma parte de los 600
grupos sanguneos identificados por la International Society of Blood Transfusin
(ISBT), su descubrimiento fue de un recin nacido de origen latino que falleci por
una enfermedad hemoltica de etiologa desconocida, y que posteriormente se
identific como un sistema sanguneo nuevo que se encuentra ntimamente
relacionado con reacciones transfusionales inmediatas y con enfermedad hemoltica
del recin nacido. Actualmente se conocen 22 antgenos dentro de este sistema
sanguneo de los cuales los antgenos Di a y Di b son considerados inmunogenicos.
Del mismo modo la distribucin geogrfica del sistema Diego, especficamente del
antgeno Dia, es mayormente en la asitica mongoloide y en las poblaciones tnicas
de Amrica Latina.
En el campo de la medicina transfusional, es importante el estudio y la
determinacin de los grupos sanguneo Diego en los donadores y en los pacientes
que se someten a transfusiones o trasplantes. En el mbito antropolgico es
considerado como marcador de identidad poblacional o gentica.
El antgeno Dia del sistema Diego, se encuentra en muy pocos individuos por lo
que

se

considera

un

marcador

poblacional

peligroso

en

trminos

transfusionales. Se compone de 21 factores sanguneos o antgenos llevado la

Banda 3 glicoprotena, tambin conocido como anin intercambiador 1 (AE1).
Los antgenos se heredan a travs de varios alelos del gen SLC4A1 (Familia
portador soluto 4), ubicado en cromosomas humanos 17. La glicoprotena AE1 se
expresa slo en glbulos rojos y, en forma abreviada, en algunas clulas. El
Diegoa antgeno es bastante comn en Pueblos indgenas de las Amricas (en Norte
y Sudamrica) y Asiticos orientales, pero muy raros o ausentes en otras
poblaciones ms, apoyando la teora de que los dos grupos comparten ancestros en
el rin comunes.

2
0

El sistema de Diego es nombrado despus de un par de tipos, Diego a (Dia) y

Diegob (Dib), que se diferencian por uno aminocido en la glicoprotena AE1,
correspondiente a una diferencia en la nucletido secuencia del gen SLC4A1. Di b es
omnipresente en todas las poblaciones que han sido testadas para l, mientras que
Di o comna se ha encontrado solamente en los pueblos indgenas de las Amricas
(en Norte y Sudamrica) y los asiticos orientales y en personas con algunos
antepasados de esos grupos. Gente heterocigoto para los dos alelos producen
ambos antgenos.
Ningn individuo ha sido probado que no produce uno, o ambos, de los dos
antgenos.[1] Anti-Dia (el anticuerpo a Dia) puede causar severas enfermedad
hemoltica

del

recin

nacido

severo

reaccin

la

transfusin. Anti-

Dib generalmente provoca reacciones ms leves.

2. INTRODUCCION
El antgeno o factor Diego dentro de la clasificacin de los grupos sanguneos
ocupa el dcimo lugar de descubrimiento entre los antgenos eritrocitarios, a partir
de este hallazgo realizado por Layrisse, Arends y Domnguez en 1953 tomo
importancia la identificacin de este antgeno realizndose varios estudios
principalmente en grupos indgenas de poblacin venezolana y caribea
encontrndose una frecuencia del 35.54 %, esto puso alerta a los pases
latinoamericanos de la existencia de un nuevo antgeno eritrocitario capaz de
provocar la produccin de anticuerpos que ocasionan una enfermedad hemoltica
del recin nacido.
Estudios posteriores demostraron que el antgeno Diego Di a a pesar de presentar
una baja incidencia en la poblacin caucsica puede producir aloinmunizacion y
desarrollo de anticuerpos anti - Di a que ocasionan reacciones hemolticas
postransfucionales.
Una de las caractersticas particulares de este anticuerpo es que puede estar
presente como una respuesta inmune o de forma natural y ocasionar una reaccin
hemoltica inmediata. Un caso reportado en la literatura relacionada con reaccin
postransfucional ocasionada por este anticuerpo fue el trasplante de hgado entre
2
0

un donante Dia positivo y un receptor con aloanticuerpos anti - Di a que ocasiono una
reaccin hemoltica por trasplante, otros de los problemas enfrentados en este caso
clnico fue obtener sangre libre del antgeno Di a, por ser un antgeno frecuente en la
poblacin.
Es importante enfatizar que los anticuerpos anti- Di a generalmente son de tipo IgG1
que atraviesa fcilmente la placenta constituyendo un riesgo durante el embrazo
para el desarrollo de enfermedad hemoltica del recin nacido
El sistema Diego consiste en 22 antgenos: dos pares de antgenos antitticos
Dia y Dib, Wra y Wrb, ms 18 antgenos de baja frecuencia.
Dia es un marcador antropolgico muy til debido a su polimorfismo en muchas
poblaciones mongoloides, pero virtualmente ausente en otros grupos tnicos. El
antgeno Dia

representa la sustitucin del aminocido leucina en la posicin

854, en vez de prolina (antgeno Dib) en la misma posicin, sobre la banda 3.

El antgeno de baja frecuencia Wra y el de alta frecuencia Wrb representan
sustitucin de lisina en posicin 658 y cido glutmico en posicin 658
respectivamente sobre la banda 3. Individuos carentes de glicoforina son Wr (a
b) y adicionalmente para que se exprese el antgeno Wrb se requieren que
estn presentes la glicoforina A y la banda 3.
Los otros antgenos Diego de baja frecuencia estn asociados a sustitucin
simple de aminocidos en la banda 3. Hasta el momento no se ha reportado en
individuos sanos el fenotipo Diego null lo cual indica la importancia funcional de
la banda 3.Actualmente hay nuevas herramientas de la biologa molecular que
se estn aplicando al estudio de ste interesante sistema.

3. HISTORIA.
En junio de 1953, muestras de una madre y su beb Rh positivo, grupo
2
0

compatible, sufriendo enfermedad hemoltica del recin nacido enfermedad

fueron enviadas desde Caracas, Venezuela a Raritan (Estado Unidos) y
llegaron en excelentes condiciones. Segn reportaron el curso de la
enfermedad fue tpico, la ictericia apareci despus de 12 horas y l bebe muri
al tercer da con sntomas sugestivos de kernicterus.Los hemates del beb
eran Coombs directo positivo, y el estudio del suero de la madre contra un panel
de clulas selectas, fue negativo, no demostrando.
anticuerpos eritrocitarios. En ese estudio no se incluy hemates del esposo. El
suero del beb y eluato preparado a partir de sus hemates tambin fueron
negativos en el estudio de anticuerpos. En ausencia de incompatibilidad ABO,
se sospech de un anticuerpo dirigido contra un antgeno de baja frecuencia.
Este fue confirmado un mes despus cuando la sangre del padre y la
madre fueron estudiadas simultneamente en Raritan. Se encontr que el
suero de la madre reaccionaba fuertemente con los hemates del esposo,
sin embargo fue negativo con 200 muestras de hemates O positivo.
Posteriormente se prob contra 800 muestras de hemates y los resultados
tambin fueron negativos al estudio de anticuerpos. Con ocasin de una visita a
Nueva York el 26 de Octubre de 1953, el padre del beb acord con el Dr.
Philips Levine, que el nombre del nuevo "factor sanguneo sea: Diego (Di a). El
correspondiente anticuerpo fue llamado anti-Di a.No se realizaron otras pruebas
debido a las dificultades de enviar muestras de miembros de extenso rbol
genealgico. Cuando la madre nuevamente estuvo embazada en 1955, el
Dr. Layrisse fue consultado en Caracas y fue posible realizar pruebas
adicionales. La historia obsttrica de la madre, nunca transfundida, es la
siguiente:

1949, beb mujer normal nacida a trmino.

1950, aborto involuntario a los tres meses
1951, beb varn normal nacido a

trmino, desarroll anemia

lentamente, no haba ictericia y la recuperacin fue espontnea. La historia

no dio ningn indicio que la isoinmunizacin

con

enfermedad

hemoltica posterior fuera la causa de la anemia.

1953, beb varn nacido a trmino (propsito), que al nacer pareca
clnica y hematolgicamente normal. No

se

ictericia, se hizo evidente despus de

2
0

determin
12

bilirrubina.

horas, se

La

increment

severamente y el beb falleci al tercer da. La prueba de Coombs

directo fue positivo.

1955, beb varn normal nacido a trmino,

no

present ictericia o

anemia, el Coombs directo fue negativo y los hemates

no

reaccionaron con el anti-Di a (muestra estudiada por el Dr. Layrisse).

El

suero

materno

solo

reaccion

fase antiglobulina con un

en

ttulo de 512 dils, con los hemates del esposo y de la misma manera con los
Hemates

de

otros

miembros

de

la

familia portadores del antgeno

Dia+.
Para descartar la posibilidad de ser un antgeno de baja frecuencia conocido,
los hemates del esposo se enfrentaron a antisueros conteniendo anticuerpos
especficos dirigidos contra antgenos de baja frecuencia (todos tuvieron reaccin
negativa). El suero de la madre se prob contra hemates conservados en
congelacin, que

contenan

antgenos

raros

carecan

de antgenos de

alta frecuencia. Los resultados fueron negativos. Estos resultados indicaran

que el antgeno Diego representara un nuevo antgeno sanguneo.
Miembros de la familia Diego se estudiaron para rastrear la transmisin
gentica y se observ que el antgeno Diego estaba en presente en 10 de 33
miembros de 4 generaciones. Este se deriv del lado materno en la generacin
I y II. (Fig. 1, rbol genealgico), el padre del beb fallecido (hijo 3) fue Dia+ y
ala madre Dia-, los dos primeros hijos son Dia+ y el ltimo Di (3,4).

2
0

Se estudiaron 1000 individuos de grupo O, 200 en 1953 y 800 en 1955, y

todos fueron negativos al

antgeno Dia (caucasoides y una pequea parte

negroides). El suero usado tena 64 dils de anti-Dia. Layrisse y col. observaron

que las caractersticas fsicas de algunos miembros de la familia indicaban
una
mezcla con indios nativos, por lo que deciden estudiar su distribucin en
otras poblaciones. Aparentemente el antgeno Diego puede ser de origen
mongoloide tal como sospecha.
En 1955, Levine identific un segundo ejemplo de anti-Dia, en una enfermedad
hemoltica, en una familia caucasoides
y proceda de Polonia,

(Buffalo, NY). El esposo era Dia+

(origen mongoloide). Los hemates del beb

fueron recubiertos y el suero materno fue negativo

con

un

panel

de

sangre
seleccionada. El anticuerpo reaccion con los hemates del esposo. El
anticuerpo reacciono con hemates conocidos Dia+. Los hallazgos indican que un
antgeno considerado de baja incidencia en una poblacin puede ser de alta
frecuencia en otra poblacin.

4. SISTEMA DIEGO COMO MARCADOR ANTROPOLGICO

El descubrimiento clnico del sistema Diego abri otra puerta hacia el
estudio antropolgico del mismo ya que los antgenos de este sistema
sanguneo son caractersticos y frequents en poblaciones especficas, es as
que el antgeno Dia por ejemplo, es frecuente en la poblacin mongoloide
propia del sudeste asitico, y su prevalencia en la poblacin americana se la
explica por los factores migracionales de dicha poblacin a travs del estrecho
de Bering.
De la misma manera este antgeno es poco frecuente en la poblacin europea
2
0

en la cual el antgeno predominante es el Dib, mientras que en la poblacin de

raza negra y caucsica la presencia de antgenos del sistema Diego es casi
nula. Es evidente que ha existido un marcado mestizaje en todas las
poblaciones a nivel mundial, al ser este sistema especfico de ciertas
poblaciones se ha podido determinar factores migratorios principalmente hacia
el continente americano donde el porcentaje de prevalencia de los antgenos de
este sistema es del 12% a nivel de la poblacin india Mxico-americana.
Adems el descubrimiento de este sistema por primera vez en Caracas,
ciudad de Sud Amrica, permiti que se determine la incidencia de este
sistema en Venezuela, presentando una frecuencia del 29%. Otros pases de
Sudamrica han sido objeto antropolgico de estudio determinndose as la
presencia de este sistema sanguneo en poblaciones indgenas de Per, Chile
y Argentina as lo menciona Trujillo en su compendio publicado en 2012.

5. BASES ESTRUCTURALES
Los antgenos del sistema Diego son de tipo eritroide, se encuentran
localizados en la banda 3 del eritrocito que es tambin conocida como CD 233
o AE1 (anin transporter 1), esta es una protena transmembrana que se
encuentra multiplicada hasta por un milln de unidades a lo largo de la
membrana del eritrocito por lo que comprende aproximadamente el 25 % del
balance proteico de las clulas rojas. Estructuralmente la banda 3 contiene
911 aminocidos distribuidos en tres dominios, un dominio N-terminal, un
dominio transmembranal de carcter hidrofbico y un dominio C-terminal de
origen citoplasmtico, cada uno de ellos constituido por 403, 479 y 29
aminocidos respectivamente. Se conoce que sobre esta banda del eritrocito
se encuentran los antgenos del sistema Diego, principalmente los antgenos
NFLD, ELO, Fra, Rba, WARR, Vga, Wda, Wdb, BOW/NFLD, Wu, Jna,/KREP,
Bpa, Swa/SW1, Hga/Moa, Wra/Wrb, Dia/Dib, DISK. La importancia clnica de la
estructura de la banda 3 y su correlacin con los antgenos del sistema Diego
se basan en que dicha banda del eritrocito se encuentra en varios procesos
fisiolgicos encontrndose relacionada directamente con la funcin renal,
2
0

debido a que la porcin citoplasmtica de la misma regula la expresin del

dixido de carbono mediante el intercambio de cloro y bicarbonato, adems
esta

protena

transmembranal es la responsable de los procesos de

senescencia y destruccin de las clulas rojas y del mismo modo est

involucrada en las vas glicolticas del metabolismo del eritrocito y procesos
hemocrmicos, por ello es que una alteracin de dicha banda resulta en la
aparicin de varios fenotipos antignicos que conllevan a estados patolgicos,
(Tabla 1).

6. BASES GENTICAS DEL SISTEMA DIEGO

La gentica de los antgenos del sistema Diego est ligada al gen SLC4A1
(Solute Carrier Family 4, Anion Exchanger Member 1) el mismo que a su
vez est implicado en la expresin de la banda 3 del eritrocito as lo determin
Spring y sus colaboradores en el

ao

de

1992

cuando,

mediante

electroforesis, se encontr que en los eritrocitos Dia positivos exista la

variante Memphis II en la banda 3, aunque nunca se determin que todos los
hemates con la banda 3 variante Memphis fuesen Dia positivos.
A partir de este descubrimiento se asocia la expresin del sistema Diego al
cromosoma 17, especficamente en el locus q12-q21, esto mediante la
secuenciacin y la clonacin del gen SLC4A1.(Figura N2). Al aplicar esta
metodologa se dieron a conocer tambin las bases moleculares del gen, se
sabe que est constituido por 19 intrones y 20 exones de los cuales 5 son los
involucrados en la codificacin de variantes fenotpicas de los antgenos del
sistema Diego.

Figura N2. Cromosoma 1 SLC4A1 gene7

2
0

Autor: Genetics home reference, 2015 Fuente: National Library of Medicine

Localizacin del gen SLC4A1 en el cromosoma 17: posicin 21.31

El estudio molecular del gen codificante de la banda 3 se logr determinar la

mutacin causante de la expresin de los antgenos del sistema Diego, es as
que para el antgeno Dia positivo la causa es una mutacin simultnea que
se basa en la sustitucin de nucletidos de citosina por timina en la posicin
2561, que desencadena la expresin de leucina por prolina, mientras que en
los individuos Dib positivos, no hay cambio en la citosina de posicin 2561 lo
que determina que el aminocido 854 siga siendo prolina (Figura N3).
Figura N3. Polimorfismo de la expresin del antgeno Di

Autor: Costa Nues, 2004

Fuente: Estudio del polimorfismo del Sistema Diego

2
0

Grfico muestra el polimorfismo entre el Dia y Dib en la banda 3: 854 leucina

causante de la expresin del antgeno Dia y prolina del Dib. Fuente: (Costa
Nunes da Cunha Cozac, 2004).

Los antgenos del par Wr (a+, b+) deben su expresin a una mutacin en la
cuarta porcin proteica correspondiente a los aminocidos extracelulares,
siendo as que la expresin de los antgenos Wra y Wrb est condicionada
al cambio del aminocido de posicin 658 siendo este lisina por el cido
glutmico. En cuanto a la variante Memphis la sustitucin es de una adenina por
una base guandica en la posicin 166 del exn 4, lo que desencadena en la
codificacin de cido glutmico en lugar de lisina en la posicin 56 del dominio
N-terminal, porcin citoplasmtica.
Figura N4. Polimorfismo de la expresin del antgeno Wr

Autor: Costa Nues, 2004

Fuente: Estudio del polimorfismo del Sistema Diego

Grfico muestra el polimorfismo entre el Wra y Wrb en la banda 3: 658 lisina

causante de la expresin del antgeno Wra y cido glutmico del Wrb
Existe una amplia expresin de los alelos codificantes de los antgenos del
sistema Diego, de tal manera que la frecuencia del gen es del 40% en la
poblacin indgena de

Sur Amrica. El gen tambin presenta amplias

frecuencias en Centro Amrica mientras que en la poblacin indgena de

Amrica del Norte son pocos los casos registrados, en el este de Asia la
2
0

frecuencia es del 1 al 5 % mientras que en Korea y en el Tibet la poblacin en la

que se expresa el gen vara entre el 7 y el 8 %. Por otro lado la expresin del
alelo Dib positivo es frecuente en todas las poblaciones..

7. ANTGENOS DEL SISTEMA DIEGO

El sistema sanguneo Diego cuenta con 22 antgenos eritrocitarios de los
cuales el fenotipo Dib y el Wrb son considerados de alta frecuencia mientras que
el los antgenos Dia y el Wra son considerados de frecuencia baja, de la
misma manera se determina que

aquellos antgenos con caracterstica

inmungena son los antgenos Dia y Dib ya que son principales involucrados
en enfermedad hemoltica del recin nacido y en reacciones transfusionales
tardas, aunque se ha evidenciado pacientes sanos con un fenotipo Dib dbil.
Se sabe que estos antgenos ya se encuentran desarrollados al momento de
nacer.
En el ao 2004 la Sociedad internacional de Transfusin Sangunea determin y
clasific 17 de los antgenos del sistema Diego hasta entonces conocidos, y a
partir de entonces se han descubierto nuevas variantes antignicas en los que
se incluyen el antgeno Fra, SW1, Swa2, DISK y el Di (a-b-) o fenotipo nulo,
completando los actuales 22 antgenos del sistema Diego (Tabla 1). El fenotipo
nulo no se haba encontrado en personas sanas debido a que se trataba de
una

variante

altamente

inmungenicos

que

desencadenaba

reacciones

consecuentemente fatales.
La denominacin del antgeno Diego null o Diego nulo se debe al reporte de un
caso en el que se evidenci la completa ausencia de la banda 3 en los
eritrocitos del paciente por lo que se considera un antgeno Diego (a-b-). As
mismo se han evidenciado antgenos del sistema Diego en la banda 3 de
glbulos rojos anormales implicados en procesos de adhesin principalmente
por contagio de malaria.
Finalmente en un ensayo basado en electroquimiomicroscopa, en el que se us
una IgG marcada con ferritina, se logr determinar la porcin de antgenos
2
0

sobre un eritrocito Dib positivo, en el que el resultado fue 15400 unidades del
antgeno por clula roja, (Masouredis, Sudora, Mahan, & Victoria, 1980) estudio
con el

que se determina la

importancia del conocimiento del potencial

imungeno de los antgenos pertenecientes a este sistema sanguneo irregular.

(Figura N5).

Tabla 1: Antgenos del Sistema Diego.

b

DI*02 codifica Di , Wr , DISK

Fenotipo ISBT

Nombre

Cambio

del alelo
DI:1,-2 o Di (a+b-)

Exn

de

Cambio
del

nucleti
2561
CT

19

aminoci
Pro
854 leu

DI*01 o Di

DI:-1,2 o Di (a-b+)

DI*02 o Di

2561 C

19

Pro 854

DI:3,4 o Wr
(a+b)
a
DI:5 o Wd

DI*02.03

1972 G>A

16

Glu 658 Lys

DI*02.05

1669 G>A

14

Val 557 Met

DI:6 o Rb

DI*02.06

1643 C>T

14

Pro 548 Leu

DI:7 o WARR+

DI*02.07

1654 C>T

14

Thr 552 Ile

DI:8 o ELO+

DI*02.08

1294 C>T

12

Arg 432 Trp

DI:9,22 o Wu+,

DI*02.09

1694 G>C

14

Gly 565 Ala

DI*02.10

1707 C>A

14

Asn 569 Lys

DI*02.11

1967 G>A

16

Arg 656 His

DI*02.12

1966 G>T

16

Arg 656 Cys

DI*02.13

1663 T>C

14

Tyr 555 His

DI*02.14.01

1937 G>A

16

Arg 646 Gln

DISK
DI:10 o Bp

DI:11 o Mo
DI:12 o Hg
DI:13 o Vg

DI:14 o Sw

2
0

DI:14 o Sw

DI*02.14.02

1936 C>T

16

Arg 646 Trp

DI:15 o BOW+

DI*02.15

1681 C>T

14

Pro 561 Ser

DI:16 o NFLD+

DI*02.16

1287 A>T;

12;

Glu 429 Asp

1681 G>G

14

Pro 561 Ala

DI:17 o Jn

DI*02.17

1696 C>T

14

Pro 566 Ser

DI:18 o KREP+

DI*02.18

1696 C>G

14

Pro 566 Ala

DI*02.19

1653 C>G

14

Lys 551 Asn

DI*02.20

1438 G>A

13

Glu 480 Lys

DI*02.21

1936 C>T

16

Arg 646 Trp

13

Val 488 Met

DI:19 o Tr

DI:20 o Fr

DI:21 o SW1+

Fenotipo Nulo
Di (ab)

DI*02N.01

1462 G>A

Autor: Storry, 2014

Fuente: Sociedad Internacional de Transfusin
Sangunea, 2014
Figura N5.Distribucin de los antgenos del sistema Diego en Banda 3

Autor: Costa Nues, 2004

Fuente: Estudio del polimorfismo del Sistema Diego
Grfico muestra los mltiples antgenos del sistema Diego en la banda 3
.

2
0

8. ANTICUERPOS ANTI-DIEGO
Fue en el ao de 1967 cuando se detect por primera vez un anticuerpo antiDib, esto ocurri en un paciente de origen latino con un amplio registro de
transfusiones sanguneas, sin embargo los reportes de casos en los que se
especifica la presencia de anti-Dib son escasos, apenas se describen 15
casos a nivel internacional. Se han reportado varios casos de presencia de
otros anticuerpos de mayor frecuencia entre ellos el anti-Dia, casos en los que
se han visto involucradas principalmente mujeres embarazadas por lo que se
determina que la va perinatal es la principal forma de sensibilizacin para el
desarrollo de trastornos hemolticos . Por otro lado los anticuerpos anti Wra y
anti-Wrb fueron descubiertos en 1953 y en 1971 respectivamente, siendo
estos hallados en pacientes politransfundidos con presencia de enfermedad
hemoltica

leve.

Los

anticuerpos

inmunoglobulinas del tipo IgG

anti-Diego

son

principalmente

aunque tambin se han reportado casos de

anticuerpos del tipo IgM, siendo estos de baja frecuencia.

Dentro de los

anticuerpos del tipo IgG estn el anti-Dia y anti Dib que son los causantes de
reacciones hemolticas transfusionales y neonatales, dichos trastornos pueden
ser leves o evolucionar hasta volverse trastornos severos. Del mismo modo los
anti-Wra y anti-Wrb as como el anti-ELO se los ha clasificado como anticuerpos
con importancia clnica mientras que el resto de antgenos anti-Diego no
presentan valor clnico significativo.
La importancia clnica que presentan los anticuerpos anti-Dia y anti-Dib ha hecho
que sean el foco de varios estudios mediante los cuales se ha demostrado
que estas inmunoglobulinas fijan fuertemente el complemento produciendo un
alto factor de adherencia, favoreciendo la fagocitosis con los eritrocitos Dia y
Dib positivos respectivamente.
El escrutinio de los anticuerpos anti-Diego se los realiza mediante la tcnica de
antiglobulina

indirecta,

Coombs

indirecto,

sin

embargo

el

potencial

inmungeno de los del tipo anti-Dia y anti-Dib hacen que estos aglutinen
2
0

directamente con eritrocitos positivos para su respectivo antgeno.

La importancia clnica y transfusional de este sistema ha hecho que sea de vital
importancia la incorporacin de los antgenos del sistema Diego en paneles
celulares para el escrutinio de anticuerpos anti-Diego. Actualmente en Japn se
ha desarrollado un antisuero monoclonal anti-Dia cuyas clona HMR15 aglutina
directamente con eritrocitos positivos hacia su antgeno Dia, mientras que la
clona HMR22 aglutina con clulas positivas para su respectivo antgeno
mediante la tcnica de antiglobulina humana directa.
La aplicacin de paneles celulares Diego positivo como la utilizacin de un
antisuero para la determinacin directa de antgenos Diego en eritrocitos es un
importante paso el para

obtener un diagnstico preventivo en mujeres

embarazadas y en pacientes transfundidos de manera oportuna, haciendo de

las tcnicas in vitro los procedimientos de diagnstico de primera mano.

2
0

9. CLNICA DEL SISTEMA DIEGO

Se sabe que los antgenos del sistema Diego son altamente inmungenos, es
as que al

entrar en contacto con el sistema inmune inducen a la

sensibilizacin y produccin de anticuerpos frente a dichos antgenos, a partir

de

esto

se

desarrollan

dos

trastornos

hematolgicos

relevantes,

las

reacciones transfusionales y la EHRN, ambas causadas por el contacto

transfusional con antgenos del sistema diego, principalmente el Dia, y por la
consecuente sensibilizacin inmunolgica del paciente transfundido como de la
aloinmunizacin materno fetal.En ambos casos la respuesta inmune puede ser
leve o derivar a moderada, inclusive inducir una respuesta inmunolgica tan
severa que conlleve a la muerte del individuo.
9.1.

REACCIONES

TRANSFUSIONALES

ASOCIADAS

LA

INMUNIZACIN POR ANTGENOS DEL SISTEMA DIEGO

Las reacciones transfusionales son trastornos de hipersensibilidad de tipo 2 en
los que se produce una respuesta inmunolgica exacerbada debido al contacto
del paciente transfundido con molculas antignicas sobre la superficie de la
membrana de los eritrocitos contenidos en el CGR, este tipo de reacciones
transfusionales son exclusivamente de carcter inmune y sus manifestaciones
caractersticas

son

la

presencia

de

fiebre

urticaria,

relacionadas

directamente a la hemlisis eritrocitaria, y en casos severos se puede llegar

a un choque anafilctico. .
Las reacciones transfusionales asociadas a antgenos del sistema Diego
pueden ser inmediatas o tardas, es decir que dependen del tiempo en que se
presentan las manifestaciones clnicas, siendo inmediatas cuando estas
aparecen dentro de las primeras 24 horas de la administracin del paquete
globular o tardas cuando la reaccin se produce posterior a las 24 horas de
la transfusin. Es as que en 2012 en Korea se reporta un caso de reaccin
transfusional inmediata tras la administracin de una unidad de CGR como
procedimiento compensatorio tras un proceso quirrgico a un paciente de 75
aos de edad de sexo femenino, cuyo previo resultado a la identificacin de
anticuerpos irregulares fue negativo, la reaccin desencaden hemoglobinuria
3
0

moderada una hora despus de finalizada la transfusin, sin que la paciente

presente otras manifestaciones clnicas relevantes. En un nuevo estudio se
determina que la paciente es entonces positiva para anticuerpos anti-Dia y se
presume que su sensibilizacin ocurri dos semanas antes de episodio
hemoltico debido una transfusin previa de dos unidades de CGR realizada
posterior a otra ciruga ajena al caso mencionado.

9.2. ENFERMEDAD HEMOLTICA DEL RECIN NACIDO ASOCIADA AL

SISTEMA DIEGO

La Enfermedad Hemoltica del Recin Nacido es un trastorno inmunohematolgico causada por la incompatibilidad existente entre los anticuerpos
maternos y las clulas rojas fenotpicamente diferentes del recin nacido ,
provocando una hiperbilirrubinemia debido a la liberacin de la hemoglobina
causada por la destruccin de los eritrocitos fetales, es comn que este
trastorno se deba a la incompatibilidad por el sistema ABO y Rh, sin embargo
existen grupos sanguneos entre ellos el sistema Diego cuyos anticuerpos
especficos maternos predisponen al desarrollo de la enfermedad.
Existen varios reportes de casos de EHRN causados por anticuerpos
pertenecientes al sistema Diego, es as que el punto de partida para la
investigacin de dicho sistema es el fallecimiento de un recin nacido de
races latinas que desarrolla hiperbilirrubinemia durante tres das hasta su
fallecimiento, posteriormente se determina que se trat de una

reaccin

hemoltica materno fetal por anticuerpos anti-Dia. A partir de este caso existen
varios casos en los que se determinan anticuerpos del sistema Diego como lo
causantes de la hemlisis neonatal, es as que en 2007 se presenta un nuevo
caso de anemia hemoltica causado por anti-Dia, en dicho reporte presentado
por Sun Min Lee se detalla la presencia de hiperbilirrubinemia en un infante
nacido a trmino, por lo que es ingresado al tercer da de nacido a tratamiento
con fototerapia y exanginotransfusin debido a la severidad de la reaccin
hemoltica, si bien las pruebas de rutina realizadas a la madre para la
determinacin de anticuerpos irregulares fueron

negativas, se evidenci

mediante pruebas in vitro la incompatibilidad del suero materno con las clulas
3
0

de neonato, las mismas que dieron positivas tanto para la presencia de

antgeno Diego Dia como para la prueba de Coombs directo, se encontr
tambin que la madre estaba sensibilizada mediante la prueba de su suero con
clulas panel que incluan al antgeno Dia. Se han evidenciado varias casos de
enfermedad hemoltica del recin nacido como de reacciones transfusionales
en las que se ha involucrado al sistema Diego, por lo que se resalta la
importancia de incluir a este sistema en el protocolo de rutina para la
determinacin de sistemas sanguneos irregulares.

9.3.

MTODO DE DETECCIN DE ANTGENOS Y ALOANTICUERPOS DEL

SISTEMA DIEGO

Actualmente existen varios mtodos para la determinacin de antgenos y

anticuerpo de sistemas sanguneos irregulares, entre ellos los pertenecientes al
sistema Diego. La gran mayora se basan en la reaccin de aglutinacin con
especificidad entre antgeno y anticuerpos siendo uno de ellos parte de un kit
de diagnstico comercial y otro contenido en la muestra del paciente, de tal
manera que si se busca la presencia de un anticuerpo irregular son las clulas
positivas, en este caso clulas Dia, las que corresponden al kit comercial de
diagnstico y viceversa.
9.4. AGLUTINACIN EN TUBO, REACCIN ANTGENO-ANTICUERPO IN
VITRO

La aglutinacin en tubo o mtodo in vitro se basa en la reaccin de clulas

comerciales con suero del donante en un tubo de ensayo, el mismo que se
incuba a 37 C para su lectura mediante reaccin de Coombs indirecto. Si
existiese reaccin antgeno anticuerpo se espera que los anticuerpos anti-IgG
presentes en el reactivo de Coombs formen un complejo llamado aglutinado
el mismo que se ve como un botn compacto de clulas en el fondo del
tubo.La presencia del aglutinado indica que en la muestra existe el anticuerpo
irregular, para las clulas comerciales Dia positivas el anticuerpo encontrado
3
0

ser el anti-Dia. Para la determinacin in vitro de antgenos irregulares es

necesario realizar una suspensin de clulas del donante y probarlas con los
anticuerpos monoclonales comerciales especficos, y a partir

de entonces

continuar con el protocolo establecido segn la Asociacin Americana de

Banco de Sangre.
9.5. MICROAGLUTINACIN O TCNICA EN GEL
La tcnica de aglutinacin en gel es una tcnica basada en la formacin del
aglutinado por una reaccin antgeno-anticuerpo, el mismo que de existir, se
mantiene retenido en la superficie de un microposillo contenido en el casette
de diagnstico, cuando no existe aglutinacin es indicativo de que no se ha
realizado

la

reaccin

antgeno-anticuerpo

por

lo

que

despus

de

la

centrifugacin del casette la suspensin de clulas migra a travs del gel

completamente hacia el fondo, resultado que se debe interpretar como negativo.
Para la determinacin de anticuerpos irregulares, incluidos el anti-Dia, la
columna de gel debe tener una suspensin de baja fuerza inica conocida como
LISS conjugada con la AHG propia del reactivo de Coombs. La cantidad de la
suspensin celular que migra por la columna determina la fuerza de la reaccin
antgeno- anticuerpo por los que se han establecidos patrones de lectura
los mismos que se determinan por cruces desde positivo fuerte hasta
negativo o indeterminado por presencia de poblacin celular mixta.
Figura N6. Patrones de lectura para la tcnica de aglutinacin en gel

3
0

Autor: Golffed, Jorge, 2014

Fuente: Microtcnica de Aglutinacin en Gel
Patrones de lectura para la tcnica de aglutinacin en gel.

9.6. DETECCIN DE ANTGENOS DEL SISTEMA DIEGO POR

MTODOS DE BIOLOGA MOLECULAR.
Los moleculares mtodos de deteccin de antgenos irregulares se basan en la
aplicacin de la PCR o Reaccin en Cadena de la Polimerasa utilizando
secuenciadores de iniciacin especficos. En el caso especfico para la
determinacin de antgenos del sistema Diego se utilizan secuenciadores de
iniciacin especficos para el cromosoma 17 en el que se encuentra el gen
SLC4A1, el mismo que codifica la expresin de los antgenos eritrocitarios del
sistema Diego. En un estudio realizado en Mxico se logr amplificar las
secuencias codificantes para el antgeno Dia y para el antgeno Dib, utilizando
como referencia marcadores de peso molecular obtenidos de pacientes control
positivos para los antgenos Dia y Dib. El resultado fue de 139 y 129 pares de
bases respectivamente para cada antgeno.
Los mtodos moleculares abren la puerta hacia un nuevo y ms especfico
diagnstico

de

los

antgenos

involucrados

transfusionales sin embargo dejan

BIBLIOGRAFIA

11.

GLOSARIO

trastornos

hemolticos

de ser reproducibles por el tiempo,

equipamiento y costo de dichos procedimientos.

10.

en

3
0

1. Antgeno: Cualquier sustancia, molcula o microorganismo que al

ingresar el cuerpo, provoque la respuesta del organismo a la produccin de
anticuerpos. (Collin, 2014)
2. Anticuerpo: Sustancia o molcula producida por el cuerpo en respuesta a
la exposicin de una sustancia extraa con caractersticas especficas y
antagnicas al mismo. (Collin, 2014)
3. Inmunizacin: Exposicin de un antgeno con la capacidad de iniciar la
respuesta de produccin de su anticuerpo especfico, sea por la inyeccin
del antgeno o por la exposicin involuntaria del cuerpo ante el mismo.
(Collin, 2014)
4. Aloinmunizacin: Produccin de anticuerpos de un individuo con
especificidad a clulas o tejidos de otro, ambos de la misma especie,
usualmente madre a hijo en el embarazo. (Federal, 2010)
5. Hemlisis: Destruccin y fragmentacin de los glbulos rojos con
liberacin de hemoglobina. (Dorland, 2011)
6. Aglutinacin: Fenmeno basado en la unin del antgeno varios de sus
respectivos anticuerpos para formar una partcula mayor llamada aglutinado.
(Martin, 2010)
7. Inmunoglobulinas: Molculas derivadas de las protenas plasmticas que
cumplen funciones inmunitarias al actuar como anticuerpos. (Dorland, 2011)
8. Inmungeno: Trmino general para toda sustancia que desencadene una
reaccin de inmunidad (Dorland, 2011)
9. Fenotipo: Caractersticas expresadas en un individuo por la accin
gentica sean o no estas de carcter hereditario. (Collin, 2014)
10. Ictericia: Coloracin atpica amarillenta en la piel, secreciones y mucosas
como consecuencia de la acumulacin de pigmentos biliares. (Collin, 2014)
11. Test de Coombs o Antiglobulina Humana Indirecta: Reaccin que
permite determinar

la presencia de anticuerpos anti-glbulos rojos

provenientes de la madre en las clulas rojas del hijo mediante metidos

de aglutinacin. (Baptista, Hernandez, Galindo, Santamara, & Rosenfeld,
2009)

3
0

12. Poblacin Mongoloide: Poblacin originaria asitica con marcadas

caractersticas mongolas, piel amarilla, cara redonda, ojos pequeos y
rasgados, generalmente de estatura corta. (Trujillo, 2012)
13. Poblacin Caucsica: Grupos humanos de piel blanca, cabello claro o
variable generalmente biraciales originarios de las montaas del Cucaso.
(Junqueira P. , 2002)
14. Bilirrubina: Compuesto pigmentado amarillo producto del metabolismo de
la hemoglobina liberada en la destruccin de los eritrocitos en las clulas del
retculo endotelial. Usualmente es el compuesto causante de la ictericia
cuando est presente en mucosas y tejidos. (Dorland, 2011)
15. Homeostasis:

Estado

de

equilibrio

orgnico

sistmico

de

las

condiciones fisiolgicas del cuerpo con su medio externo. (Martin, 2010)

16. Aminocido: Unidad estructural de las protenas, es una biomolcula que
contiene un grupo amino NH2 y un grupo carboxlico cido COOH.
(Dorland, 2011)
17. Senescencia: Variaciones fsicas

y fisiolgicas

ligadas

al

tiempo.

Sinnimo de envejecimiento. (Dorland, 2011)

18. Exn: Fragmento de la cadena de ADN capaz de convertirse en ARN para
la codificacin de aminocidos y posterior sntesis de protenas. (NHGRI,
2014)
19. Intrn: Fragmento de AND de un mismo gen que se encuentra separado
de los exones por los que no codifican aminocidos. (NHGRI, 2014)
20. Gen: Unidad funcional de ADN que forma parte del genoma humano.
Contiene toda la informacin gentica necesaria para la expresin de los
factores hereditarios. (NHGRI, 2014)
21. Alelo: Corresponde a las dos unidades de un mismo gen. En los humanos
un gen est compuesto por dos alelos heredados uno del padre y otro de la
madre. (NHGRI, 2014)
22. Antisuero: Suero de un individuo que ha sido expuesto a un antgeno y
haya producido inmunoglobulinas especificas a dicho antgeno. (Collin,
31

2014)
23. Monoclonal: Referente a anticuerpos producidos por una sola clona de
linfocitos B y que reconocen especficamente a un eptope de su respectivo
antgeno. (Ruiz, Moreno, Lpez, & Vega, 2007).

32

24.
25.

26.

34