El Dao UV, Reparacin por Escisin de Nucletidos, y Foto

Reactivacin
Como se mencion anteriormente, una razn importante al dao del ADN
(DDR) es provocada por la exposicin a la luz UV. De las tres categoras de la
radiacin UV solar, slo el UV-A y UV-B son capaces de penetrar la atmsfera
terrestre. Por lo tanto, estos dos tipos de radiacin UV son los de mayor
preocupacin para los seres humanos, sobre todo con el continuo agotamiento
de la capa de ozono hace que los niveles ms altos de esta radiacin lleguen a
la superficie del planeta.
La radiacin UV provoca dos tipos de lesiones del ADN: dmeros de ciclobutano
pirimidina (CPDs, figura 1) y 6-4 fotoproductos (6-4 PPs, Figura 2). Ambas
lesiones distorsionan la estructura del ADN, la introduccin de curvas o
torceduras y de este modo impide la transcripcin y replicacin. Zonas
relativamente flexibles de la doble hlice de ADN son ms susceptibles a los
daos. De hecho, un "punto caliente" de los daos inducidos por UV se
encuentra dentro de un oncogn mutado, el gen p53.
CPDs y 6-4 PPs se reparan a travs de un proceso conocido como la reparacin
por escisin de nucletidos (NER). En eucariotas, este complejo proceso se
basa en los productos de aproximadamente 30 genes. Los defectos en algunos
de estos genes han sido demostrados que causan la enfermedad humana XP,
as como otras condiciones que comparten un riesgo de cncer de piel que se
eleva ms de mil veces que lo normal. Ms especficamente, NER eucariota se
lleva a cabo por al menos 18 complejos de protenas a travs de cuatro pasos
discretos (Figura 3): deteccin de dao; la escisin de la seccin de ADN que
incluye y rodea el error; relleno de la brecha resultante por la ADN polimerasa;
y el sellado de la brecha entre el nuevo ADN sintetizado y el ADN ms viejo
(Figura 4). En las bacterias (que son procariotas), sin embargo, el proceso de
NER se completa con slo tres protenas, denominadas UvrA, UvrB, y UvrC.
Las bacterias y otros organismos tambin poseen otro mecanismo para reparar
el dao UV llamada foto reactivacin. Este mtodo se refiere a menudo como
"reparacin por luz", porque es dependiente de la presencia de la energa de la
luz. (En comparacin, la mayora de NER y otros mecanismos de reparacin se
refieren con frecuencia como "reparacin a oscuras", ya que no requieren luz
como fuente de energa) Durante la foto reactivacin, una enzima llamada
fotoliasa une lesiones del dimero pirimidina; adems, una segunda molcula
conocida como cromforo convierte la energa luminosa en energa qumica
necesaria para revertir directamente el rea afectada de ADN a su forma sin
daos. Las fotoliasa se encuentran en numerosos organismos, incluyendo
hongos, plantas, invertebrados como moscas de la fruta, y vertebrados,
incluyendo ranas. Ellos no parecen existir en seres humanos, sin embargo.
(Sinha y Hader, 2002).

Figura 2: La radiacin UV puede distorsionar el ADN, lo que impide la

transcripcin y replicacin.
Una regin de ADN se muestra antes (A) y despus (B) su estructura est
distorsionada por la radiacin UV. La distorsin en el panel B se debe a una
curva convexa, o torcedura, en una de las cadenas (C).

Figura 3: El mecanismo de reparacin de nucletidos escisin en

eucariotas.
Cuando el dao provoca una distorsin en la estructura del ADN (1), un
complejo enzimtico (ovalado de color prpura) reconoce la distorsin (2). Las
dos hebras de ADN estn separadas, y las protenas de una sola hebra de
unin (esferas de color naranja) estabilizan las hebras individuales (3). Una
enzima (estructura globular color azul claro) se adhiere al filamento

distorsionado en ambos lados de los daos (4). La parte daada se retira (5), y
el hueco se rellena con la ADN polimerasa (estructura azul en forma de
manopla) y sellada por la ADN ligasa (estructura naranja en forma de guante)
(6).

Figura 4: Representacin esquemtica de la ruta de reparacin por

escisin de nucletidos.
Otros Mecanismos de Reparacin del ADN
NER y foto reactivacin no son los nicos mtodos de reparacin del ADN. Por
ejemplo, la reparacin por escisin de la base (BER) es el mecanismo
predominante que maneja el dao espontaneo en el ADN causado por los
radicales libres y otras especies reactivas generadas por el metabolismo. Las
bases pueden volverse oxidadas, alquiladas, o hidrolizadas a travs de
interacciones con estos agentes. Por ejemplo, los grupos qumicos metilo (CH3)
se aaden con frecuencia a la guanina para formar 7-metilguanina;
alternativamente, los grupos de purina pueden perderse. Todos estos cambios
dan lugar a bases anormales que deben ser removidas y reemplazadas. Por lo
tanto, las enzimas conocidas como ADN glucosilasas separan las bases
daadas literalmente cortndolos de la hebra de ADN a travs del clivaje de los
enlaces covalentes entre las bases y la estructura de azcar-fosfato. El espacio
resultante se llena entonces por una reparacin especializada de la polimerasa
y sellado por ligasa. Muchas de estas enzimas se encuentran en las clulas, y
cada una es especfica para ciertos tipos de alteraciones de base.
Sin embargo, otra forma de dao en el ADN se da cuando el doble filamento se
rompe, que son causadas por la radiacin ionizante, incluyendo rayos gamma y
rayos-X. Estos cortes son altamente perjudiciales. Adems de interferir con la
transcripcin o la replicacin, pueden conducir a reordenamientos
cromosmicos, en el que las piezas de un cromosoma a se conectan a otro
cromosoma. Los genes son interrumpidos en este proceso, lo que lleva a
protenas hbridas o activacin inapropiada de genes. Un nmero de cnceres
estn asociados con tales reordenamientos. Roturas de la doble cadena se

reparan a travs de uno de estos dos mecanismos: recombinacin no

homloga (NHEJ) o la reparacin por recombinacin homloga (HRR). En NHEJ,
una enzima llamada ADN ligasa IV utiliza piezas que sobresalen de ADN
adyacentes a la ruptura para unir y rellenar los extremos. Errores adicionales
pueden ser introducidos durante este proceso, que es el caso si una clula no
ha replicado completamente su ADN en preparacin para la divisin. En
contraste, durante HRR, el propio cromosoma homlogo se utiliza como una
plantilla para su reparacin.
Las mutaciones en el ADN de un organismo son parte de la vida. Nuestro
cdigo gentico est expuesto a una variedad de lesiones que amenazan su
integridad. Sin embargo, un riguroso sistema de controles y compensaciones
est en su lugar a travs de la maquinaria de reparacin del ADN. Los errores
que se deslizan a travs de las grietas a veces pueden estar asociados con la
enfermedad, pero tambin son una fuente de variacin que acta sobre los
procesos a largo plazo, tales como la evolucin y la seleccin natural.