Estructura de Macromolculas. Dr. O. Lpez Mayorga, Departamento de Qumica Fisica. UGR.

8. Procesamiento de las seales en RMN.

8.1 Generalidades.
Podemos considerar el experimento de RMN como la sucesin de las tres etapas
siguientes:
I.Adquisicin de la FID.
-

Seleccin del tipo de experimento.

Edicin de parmetros de adquisicin.
Ejecucin del programa de pulsos.
Almacenamiento de parmetros y datos en memoria masiva (disco).

II. Procesamiento de los datos.

Lectura de datos y parmetros de adquisicin (abrir o importar) de los archivos

del experimento.

Manipulacin de datos en el dominio del tiempo (antes de aplicar la TF)

- Llenado de ceros.
- Apodizacin.

Transformacin de Fourier de la FID (dominio del tiempo) para obtener el

espectro(dominio de la frecuencia).
- Correccin de fase del espectro.
- Correccin de linea base.
- Calibracin del desplazamiento qumico con la referencia usada.

III. Anlisis del espectro.

Integracin.
Peak picking.
Asignacin de seales.
Medidas de las constantes de acoplamiento.
Medidas de distancias NOE.
Etc.

En esta sesin abordamos la etapa II, revisando previamente los fundamentos de

estas operaciones y llevaremos a la prctica estos procesos con un ejemplo sencillo. Para ello
utilizaremos el programa MestReC y una FID en formato Nuts.

8- 1

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8.2. Digitalizacin de la FID.

Un dispositivo conocido como conversor analgico digital, CAD, se usa para
convertir la seal de resonancia magntica nuclear de voltaje a nmeros binarios que se
almacenan en la memoria de un computador. El CAD muestrea la seal a intervalos
regulares de forma que la FID se obtiene como un conjunto de puntos de datos.
Una primera y fundamental caractersticas de un CAD es la resolucin o nmero
bits que ste usa . El nmero de puntos que representan a la seal mxima que admite el
conversor se obtiene por la expresin 2N, donde N es el nmero de bits del conversor; as un
conversor analgico digital de 3 bits solo distinguira 8 niveles. Cuanto ms elevado es el
nmero de bits de un conversor tanto mejor estar descrita de la seal.
La principal consecuencia de usar una resolucin del CAD pobre es la aparicin de
las llamadas bandas laterales en los picos los espectros, fluctuaciones de la seal en la base
del pico. En general estas bandas laterales no son un problema importante pues en muchas
ocasiones son del mismo orden de magnitud que el ruido; no obstante si el espectro contiene
algn pico muy intenso sus bandas laterales pueden enmascarar picos dbiles prximos.
Aumentando la resolucin del CAD se reducir las bandas laterales como se muestra la
figura 8.1

Figura 8.1 (a)Espectro obtenido a partir de una FID digitalizada con un CAD de 6 bits (64
niveles). (b) El mismo espectro obtenido a partir de una FID digitalizada con un CAD de 8
bits (256 niveles)
Otra caracterstica fundamental del conversor analgico digital es la velocidad de
muestreo. El CDA muestrea la seal analgica (funcin continua del tiempo) a intervalos
regulares y el tiempo que separa a dos puntos consecutivos es conocido como perodo de
muestreo. Si el perodo de muestreo es demasiado grande (frecuencia de muestreo pequea)
la seal estar pobremente representada en el dominio del tiempo por el conjunto de puntos
digitalizados; se perder la evolucin temporal de la seal entre dos puntos consecutivos y la
reconstruccin de la seal a partir de los datos digitalizados, consecuentemente, presentar
una clara distorsin armnica. Mientras que cuanto ms pequeo sea el perodo de muestreo
tanto ms fielmente estar representada la seal en el dominio del tiempo; esto se ilustra en
la figura 8,2.

8- 2

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Figura 8.2 (a) Digitalizacin de una FID a una velocidad de muestreo adecuada o periodo
de muestreo suficientemente pequeo. (b) Digitalizacin de una FID a una velocidad de
muestreo demasiado pequea o periodo de muestreo demasiado grande.
Un periodo de muestreo demasiado grande (baja frecuencia de muestreo), adems de
la prdida de componentes armnicos de la seal, trae como consecuencia otro fenmeno en
el dominio de las frecuencias conocidos por el nombre de Aliasing o plegamiento
espectral, fenmeno no tan sencillo de entender pero de vital importancia en el anlisis de
las seales discretas muestreadas.
El punto de partida para entender la naturaleza de este fenmeno es el Teorema de
muestreo de Shannon (Matemtico americano, 1916), tambin conocido como el Criterio
de Nyquist, una regla general para digitalizar seales peridicas en el tiempo. Podemos
enunciar este teorema de la siguiente forma: Para una seal limitada a una anchura
espectral 2B, siendo B la mxima frecuencia de dicha seal, se necesitan al menos 2B
muestras.s-1 (muestrear a una frecuencia fs=2B) para reproducir la seal peridica sin
distorsin.
Otra forma de enunciar este teorema es:
Si T representa el periodo de muestreo la mxima frecuencia que podemos digitalizar
sin perdida de informacin (distorsin) ser:

1
2B

1
2T

(59)

Este periodo de muestreo en el argot de RMN se conoce como dwell time.

Otro aspecto importante para entender los fenmenos de aliasing y folding de la
seales muestreadas, es la peculiaridad de la transformacin de Fourier de las seales
discretas o muestradas. En el dominio del tiempo, digitalizar una seal continua equivale a
multiplicar la propia seal por un tren de funciones de Dirac unidad (pulso de anchura
infinitesimal y rea unidad) separados por el tiempo de muestreo, T. Pero multiplicar en el
dominio del tiempo equivales a convolucionar en el dominio de la frecuencia; luego el
espectro de frecuencias de la seal muestreada ser el resultado de convolucionar el espectro
de la seal continua con la tranformada de Fourier del tren de funciones de Dirac, que es otro
tren de pulsos de frecuencia f = 1/T, figura 8.3. As resulta que el espectro de cualquier seal
muestreada contiene mltiples replicas del espectro continuo. El periodo de estos espectros
replicados en el dominio de la frecuencia es la frecuencia de muestreo, fS.

8- 3

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f(t)

F()

b
TF
t

-B

fS = 2B

fS = 2B

TF
t

T = 1/fS

f(n)

Fn()

TF
t

-B

f
H()

Recuperacin de la seal

f(t)

F()
-B

TF
t

-B

Figura 8.3. Transformada de Fourier (b) de una seal continua en el dominio del tiempo (a)
y de una seal muestreada (e) justo a la frecuencia de Nyquist. La seal muestreada es el
resultado de multiplicar la seal continua por el tren de funciones de Dirac con la
frecuencia fS (c). El espectro (f) de la seal muestreada es el resultado de la operacin de
convolucin entre el espectro de la seal continua (b) y la transformadade Fourier del tren
de pulsosos(d). La recuperacin de la seal continua (a) a partir del espectro de los datos
muestreados (f) mediante una operacin de filtrado pasa baja con un frecuencia de corte
B.

8- 4

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La recuperacin de la seal continua a partir del espectro de los datos muestreados

implica, aislar el espectro central de las replicas, es decir, eliminar todas las frecuencias
fuera del intervalo B+B. Esto se consigue mediante un filtrado pasa baja. La operacin
de filtrado consiste en multiplicar en el dominio de la frecuencias el espectro por la funcin
de transferencia del filtro pasa baja. En la figura 8.3 (g) se muestra la funcin de
transferencia de un filtro ideal de frecuencia de corte B; esta funcin de transferencia es
H() = 1 para frecuencias en el intervalo B+B, y H() = 0 fuera de ese intervalo.
Si no realizamos la operacin de filtrado se producir el efectos de Aliasing. Este
fenmeno consiste en la aparicin de componentes de frecuencias fuera de la anchura
espectral B+B como falsas componentes de baja o altas frecuencias dentro de dicho
intervalo. Estas falsas componentes no pueden distinguirse de los componentes vlidos. En
el dominio de las frecuencias este fenmeno produce un aparente plegamiento del
espectro, es decir, altas/bajas frecuencias se pliegan a bajas/altas frecuencias. Cuando se
muestrea una seal a una frecuencia fS muestras.s-1 no podemos distinguir entre una seal
sinusoidal muestreada de frecuencia f0 y una seal sinusoidal de f0+kfS, siendo k cualquier
entero positivo o negativo.
El fenmeno de la aliasing y/o plegamiento del espectro puede observarse
fcilmente en la figura 8.4. La seal muestreada de una funcin senoidal de 7 kHz, a una
frecuencia de muestreo fS = 6 kHz, se muestra en la figura 8.4-a, como una secuencia de
puntos separados por 1/(6000) s. En la figura 8.4-b se muestra la ambigedad entre la onda a
7 kHz y a 1 kHz (k = -1). Otro ejemplo se ilustra en la figura 8.4-c, donde una onda de 4kHz
se ha muestreado a 6 kHz (k = -1). En la figura 8.4-d se muestra estas ambigedades en el
dominio espectral.
El problema ms evidente surge si muestreamos a una frecuencia menor que la que
establece el criterio de Nyquist, porque en dicho caso el solapamiento de las rplicas
espectrales hace imposible evitar la aliasing filtrando a la frecuencia de corte B; es decir,
la recuperacin de la seal continua sin distorsin sea prcticamente irrealizable, figura 8.5C. Muestrear a una frecuencia ligeramente mayor que la frecuencia de muestreo es
aconsejable porque introduce un margen de seguridad para aplicar un filtrado real de la
banda espectral central (en un filtro real la funcin de transferencia no es un escaln
perpendicular), figura 8.5-A. Decimos ligeramente porque muestrear a frecuencias
elevadas conlleva la generacin de juegos de datos de un tamao tal que en el caso de la
RMN multidimensional se convierte en un problema importante.

8- 5

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(a)

(b)

(c)

Banda espectral
de inters

(d)

Figura 8.4. Ambigedad en la frecuencia de seales muestreadas. (a) Seal muestreada de

una funcin senoidal de 7 kHz, a una frecuencia de muestreo fS = 6 kHz. (b) Funciones
senoidales de 1 y 7 kHz que pueden representar los puntos muestreados anteriores. (c) Otro
ejemplo de ambigedad de funciones senoidales de 4 y -2 kHz muestreadas a 6 kHz. (d)
Esquema de plegamiento en el dominio espectral.

8- 6

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fS > 2B

Fn()

-B

fS = 2B
Fn()

-B

fS < 2B
Fn()

-B

Figura 8-5. A, espectro de una seal muestreada con una frecuencia ligeramente mayor que
el ancho de banda; las replicas del espectro de la seal continua estan separadas por un
intervalo fS B . B, espectro de una seal muestreada con una frecuencia fS = 2B. C,
espectro de una seal muestreada con una frecuencia menor que 2B; las replicas se solapan
no pudindose evitar el fenmeno de la aliasing.

8- 7

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8.3 Mejora de la sensibilidad.

Podramos definir la sensibilidad de una medida, ntimamente relacionada con la
sensibilidad del instrumento utilizado, como la mnima cantidad de seal que podemos
distinguir del ruido. Aumentar la sensibilidad de un instrumento no implica necesariamente
mejorar la calidad de las medidas que hagamos con l, porque aunque aumentemos la
amplitud de la seal, normalmente tambin aumentamos el ruido. Por esta razn, para
especificar la calidad de la medida se suele utilizar la relacin seal/ruido (S/N o S/R). La
determinacin del valor de esta relacin depende de las caractersticas de la seal. Cuando
sta consiste en un pico, por ejemplo una banda de absorcin, la seal se calcula del valor
mximo y el ruido puede estimarse de la desviacin estndar de la lnea base. Si la seal es
constante en el tiempo, esta se evala a travs de la media aritmtica y el ruido de la
desviacin estndar. Es evidente que cuanto mayor es el valor de la relacin S/R tanto
mayor es la calidad de la medida; de hecho cuando la relacin S/R es menor de 3 ya no se
puede distinguir visualmente la seal, figura 8.6.
Relacin S/N = 25

Relacin S/N = 4

Intensidad de la seal

100

100

50

0
0

200

400

600

800

1000

200

400

600

800

1000

800

1000

Frecuencia

Relacin S/N = 10

Relacin S/N = 100

Intensidad de la seal

100

50

50

0
0

200

400

600

800

1000

200

400

600

Frecuencia

Frecuencia

Figura 8.6. Espectro formado por cuatro picos lorentzianos con relaciones S/N 4, 10, 25 y
100 respectivamente. En todos los casos se ha utilizado la amplitud del pico mayor como
valor para S y la amplitud del ruido se ha calculado mediante la desviacin estndar de la
lnea base (seal para frecuencias mayores de 800 s-1).

Cuando registramos la FID inevitablemente registramos tambin ruido. Parte de este

ruido provienen de los amplificadores y otros dispositivos electrnicos del espectrmetro,
pero la contribucin principal proviene del ruido trmico en la bobina de deteccin. Dado
que la RMN es una tcnica intrnsecamente pobre en sensibilidad, es necesario detenernos en
conocer los mtodos de mejora de sensibilidad.

8- 8

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Existen diferentes mtodos para mejorar sensiblemente la relacin S/N, hasta el

punto de hacer factible y fiables medidas que sin esta mejora tendran muy baja exactitud y
precisin. Estos mtodos caen en una de las dos posibles categoras:
Dispositivos electrnicos: Filtros analgicos y digitales, moduladores,
amplificadores diferenciales, amplificadores de corte, amplificadores de cierre,
etc. (para una breve explicacin de estos dispositivos y sus fundamentos
recomiendo el capitulo 4, Seales y Ruido, del texto Anlisis Instrumental,
Douglas A. Skoog y JamesJ. Leary. Ed. McGraw-Hill).
Procesamiento en tiempo diferido:
- Promedio de un conjunto de medidas repetidas y acumuladas.
- Filtrado digital en el dominio del tiempo o de la frecuencia.
- Filtrado de los datos de un intervalo pequeo (ventana) que recorre el
intervalo total de datos.
- Clculo de la funcin de autocorrelacin.
Aqu solo revisaremos los dos primeros mtodos de procesamiento en tiempo
diferido de promedio de un conjunto y filtrado digital, por ser los mas utilizados en
espectroscopia, especialmente en RMN.
Promedio de un conjunto
En este mtodo se repite la medida un nmero determinado de veces y los datos se
suman punto a punto en un vector o matriz, proceso al que se suele llamar coadicin.
Finalmente los datos se promedian dividiendo el valor acumulado para cada punto
por el nmero de coadiciones realizadas.
La efectividad de este mtodo radica en el siguiente hecho: la seal debe permanecer
coherente en cada medida acumulada de forma que, tras n coadiciones, la seal acumulada
valdr nS; sin embargo y debido a su naturaleza aleatoria el ruido acumulado valdr n N .
La consecuencia inmediata es que la relacin seal/ruido aumenta en n :
S
nS
S

n
N
N
nN

(60)

La figura 8.7 muestra la mejora introducida en la relacin S/N de un espectro para

diferentes nmeros de coadiciones. Este mtodo exige muestrear de forma sincronizada
todos los barridos para tener los puntos digitalizados en los mismos valores de frecuencia.

8- 9

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S/N original: 14

Intensidad de la seal

A
100

50

0
0

200

400

600

800

1000

Frecuencia
n de coadiciones: 10, S/N original: 14, S/N promedio del conjunto: 39

Intensidad de la seal

B
100

50

0
0

200

400

600

800

1000

Frecuencia
n de coadiciones: 20, S/N original: 14, S/N promedio del conjunto: 48

Intensidad de la seal

100

50

0
0

200

400

600

800

1000

Frecuencia
n de coadiciones: 50, S/N original: 14, S/N promedio del conjunto: 73

Intensidad de la seal

100

50

0
0

200

400

600

800

1000

Frecuencia

Figura 8.7. A, Espectro obtenido en una sola medida con una relacin S/N = 14. B, C y D:
Espectros obtenidos con 10, 20 y 50 coadiciones (color negro) y los valores de relacin S/N
del promedio 39, 48 y 73, respectivamente. Con objeto de facilitar la comparacin en B, C y
D se incluye el espectro A.
8-10

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Filtrado digital.
Si observamos la FID del ejemplo de la figura 8.8 constatamos que la informacin
est en la regin inicial de la variable tiempo, por debajo de 100 s, mientras que el resto de
los datos no contienen informacin y solo aportan ruido, degradando la relacin S/R.
El filtrado digital puede realizarse en el dominio de la frecuencia eliminando picos
de frecuencia que correspondan al ruido y volviendo al dominio del tiempo por la
transformada inversa de Fourier. En RMN la operacin de filtrado usualmente se realiza en
el dominio del tiempo multiplicando la FID por una funcin filtro o de peso que reduce a
cero los datos que solo aportan ruido. En la figura 8.8. se muestra un ejemplo donde se
utiliza una funcin exponencial decreciente como funcin de peso; el resultado de la
multiplicacin se somete a la transformacin de Fourier para obtener el espectro que
presenta una mejor relacin S/N, 31 frente a 11 en nuestro ejemplo.
La combinacin de ambos mtodos produce los mejores resultados y es la estrategia
de procesamiento de datos usual en tcnicas experimentales tales como RMN. La figura 8.9
representa este uso combinado de los dos mtodos, donde podemos observar que, tras la
coadicin de 30 espectros y el filtrado digital posterior con una funcin gaussiana, se
consigue una excelente relacin seal ruido S/N = 143.
La operacin de filtrado digital hace que el decaimiento o atenuacin de la induccin
sea mas acentuado; esto trae como consecuencia un efecto de ensanchamiento de los picos
del espectro en detrimento de la resolucin y de la amplitud de las seales, de forma que un
filtrado digital no adecuado puede llevar a un empeoramiento de la relacin S/R. Se puede
demostrar que la mejor relacin S/R se obtiene aplicando una funcin de filtrado cuyo efecto
de ensanchamiento iguale al la anchura inicial del espectro original. Esta funcin recibe el
nombre de filtro igualado ( mached filter).

8-11

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Filtracin en el dominio del

tiempo Multiplicacin de
la seal por la funcin filtro
(una funcin de atenuacin
exponencial, en este caso)

Transformada rpida de Fourier

FFT

Seal original y seal filtrada

Intensidad de la seal

100

50

0
0

200

400

600

800

1000

Frecuencia

Seal original
Seal filtrada

Figura 8.8. Filtrado digital en el dominio del tiempo y transformacin de Fourier

para obtener el espectro. En el espectro final se ha superpuesto el espectro que se obtendra
sin la operacin de filtradp digital. La relacin S/N del espectro original es 11 y del
espectro filtrado 31.

8-12

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Seal promedio del conjunto, 30 coadiciones

Intensidad de la seal

100

Acumulacin de espectros
en el dominio de la frecuencia, 30 coadiciones en este
caso.
Relacin S/R = 57

50

200

400

600

800

1000

Frecuencia

iFFT

Transformada rpida de Fourier inversa

Transformada de Fourier del espectro y funcin de filtro.

Intensidad

Filtracin en el dominio del

tiempo Multiplicacin de
la seal por la funcin filtro
(una funcin gaussiana, en
este caso)

100

200

300

400

500

Tiempo

TF de la Seal
Funcin de filtro Gaussiana

FFT

Transformada rpida de Fourier

Seal promedio del conjunto y seal promedio filtrada

Intensidad de la seal

100

50

Relacin S/R = 143

0

200

400

600

800

1000

Frecuencia

Seal promedio del conjunto

Seal filtrada

Figura 8.9. Transformacin de Fourier del promedio de un conjunto de espectros,

filtrado digital en el dominio del tiempo y transformacin inversa para reconstruir el
espectro. La relacin S/N de cada uno de los 30 espectros originales es 11; para el espectro
promedio de un conjunto de 30 coadiciones la relacin S/N es 57 y del espectro filtrado con
una funcin gausiana es 143.

8-13

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8.4 Mejora de la resolucin.

Entendemos por resolucin la capacidad de obtener las bandas espectroscpicas
separadas de forma que toda caracterstica estructural que determine la posicin amplitud y
multiplicidad de los picos del espectro no quede enmascarada u oculta por el solapamiento
parcial o total de estos picos.
La resolucin y la forma de las lneas espectrales estn estrechamente relacionadas.
De acuerdo con la ecuacin fundamental Eb Ea h la lnea espectral
correspondiente a la transicin entre dos estados a y b, de energa perfectamente definida,
debera ser una lnea de anchura infinitesimal localizada en el espectro en la frecuencia
propia de la transicin.
Intensidad

Eb
h

Ea

Frecuencia

Figura 8.10. Lnea espectral terica correspondiente a una transicin entre dos
niveles de energa completamente determinados.
Sin embargo, dependiendo de la naturaleza del efecto que produce el
ensanchamiento, las lneas espectrales presentan las formas caractersticas de las funciones
lorentziana y gaussiana, figura 8.12.
Los fenmenos que dan lugar al ensanchamiento de las lneas son: a)
Ensanchamiento natural, b) Ensanchamiento por colisin atmica o molecular,
c) Ensanchamiento por emisin estimulada y d) Ensanchamiento por efecto Doppler. De
todos estas causas de ensanchamiento aqu solo nos vamos a referir al ensachamiento
natural.
El ensanchamiento natural, en ausencia de perturbaciones externas, es debido al
tiempo de vida del estado excitado y puede entenderse considerando el principio de
incertidumbre de Heisenberg:

E t

h
2

El estado excitado de un tomo tendr un tiempo de vida intrnseco asociado al

decaimiento radiativo dado por:

dNj

dt

Nj i j Aij

donde Aij son los coeficientes de Einstein de emisin espontnea para todas las transiciones
radiativas desde el nivel j. Integrando ala ecuacin anterior tendremos:

Nj (t ) Nj (o)e

( t

i j A ji )

8-14

Nj (o)e

( t / j )

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donde

j es el tiempo de vida de cada proceso radiativo:

j

i j

A ji

As la anchura natural de un nivel de energa, es decir la incertidumbre en el valor de energa

que le corresponde, es:

E j
y puesto que E h :

h
2 j

hi j A ji
2

i j A ji

donde es la anchura de la lnea en unidades de frecuencia de una transicin entre un

estado excitado y el estado fundamental, el cual se considera virtualmente con un tiempo de
vida infinito, y como consecuencia sin incertidumbre en su energa.
Intensidad

Eb

E
h

Ea

Frecuencia

Figura 8.11.- Lnea espectral lorentziana correspondiente a una transicin entre el

estado fundamental (determinado) y un estado excitado con una incertidumbre en el nivel de
energa E.
La forma de la lnea de una transicin con solo ensanchamiento natural es una
Lorentziana, figura 8.12.
La consecuencia inmediata del ensanchamiento de la lnea espectral es el problema
de la resolucin que se ilustra en la figura 8.13.

8-15

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Figura 8.12 Funciones Lorentziana

y Gaussiana que sirven para
representar las lneas espectrales.
A w2
Lorentziana: Lx
4( x x0 ) 2 w 2
Gausiana:
(61)
2
( x x0 )

G x A exp
2
2w

Posicin del mximo, x0 = 50

Amplitud, A = 100
Anchura del pico a la mitad de la
altura: Lorentziana w = 10
Gausiana 2 2 ln(2) .w

110
100
90
80
70
L
x

60

G
x

50
40
30
20
10
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

150

150

140
130

Y1
x

130

120

120

110

110

100

Y1
x

90

Y2
x

80

Y
x

60

70

100
90

Y2
x

80

Y
x

60

70

50

50

40

40

30

30

20

20

10
0

140

10
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

10

20

30

40

x
140

130

Y1
x

90
70
50

60

70

80

90

100

100
90

Y2
x

80

Y
x

60

70

40

50

30

40

20

30

10
0

100

110

100

60

90

120

110

Y
x

80

130

120

Y2
x

70

150

140

80

60

150

Y1
x

50

20
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

10
0

10

20

30

40

50
x

Figura 8.13. Cuatro situaciones de diferente resolucin de dos lneas espectrales

representadas por funciones lorentzianas de anchura a la mitad de altura 10 u.a. A:no
resueltas; B: y C: parcialmente resueltas; D: resueltas.

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La resolucin aumenta con la intensidad de campo magntico del espectrmetro,

razn por la que para el estudio de biopolmeros, macromolculas cuyos espectros contienen
una elevada densidad de picos, se utilizan espectrmetros con imanes capaces de generar
intensidades de campo magntico como mnimo de 12 T. Hoy da es frecuente el uso de
espectrmetros de 17.7 T (750 MHz para el 1H) en trabajos relacionados con protenas.
Para un espectrmetro dado la resolucin puede mejorarse en la etapa de
procesamiento de datos usando funciones de peso diseadas para estrechar las lneas
espectrales. Este es el caso opuesto al uso de las funciones peso para mejorar la relacin S/R
porque se suaviza la atenuacin de la FID para conseguir el estrechamiento de los picos. La
idea bsica es simple, se trata de multiplicar la FID por una funcin peso que aumente con el
tiempo en un cierto intervalo y termine decayendo para no amplificar el ruido de la cola de
la FID.
El proceso est representado en la figura 8.14. En (a) y (b) se representan la FID
original y el espectro correspondiente. Multiplicando la FID por una funcin peso
exponencial w(t ) exp( t ), 0 , se obtiene la FID y el espectro correspondiente, (d) y
(e), donde se puede observar el estrechamiento del pico pero un evidente empeoramiento de
la relacin S/R.

Figura 8.14. Esquema representando el uso de funciones peso para mejorar la resolucin
del espectro, (ver texto).

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En la parte inferior de la figura 8.14 se muestra el efecto de introducir como funcin de

atenuacin, para evitar la amplificacin del ruido, una funcin temporal de Gauss o
Guassiana, que en su forma mas simple es: W (t ) exp( t 2 ) , siendo el parmetro que
fija la velocidad de atenuacin. Es decir, se multiplica la FID original por la funcin
exponencial creciente (f) y por la Gaussiana (g) para obtener la FID con decaimiento
atenuado (h) cuyo espectro (i) presenta un pico claramente mas estrecho (mejor resolucin)
sin un empeoramiento grande de la relacin S/R. La grafica (j) representa el producto de las
dos funciones de peso. Los parmetros y tienen que seleccionarse cuidadosamente para
obtener un resultado optimo.
El proceso de aplicacin de las funciones de peso para mejorar sensibilidad y
resolucin se conoce con el nombre general de Apodizacin.
Hay otras funciones de peso que se usan para mejorar sensibilidad y resolucin.
Quiz la ms popular es la llamada campana seno o su cuadrado campana seno al cuadrado:
t

W (t ) sen
t

adq

W (t ) sen 2
t

adq

(62)

donde tadq es el tiempo de adquisicin y esta funcin de peso se ajusta con la fase como se
muestra en la figura 8.15.

Figura 8.15. Arriba, funcin de peso campana seno para diferentes valores de la fase .
Abajo, funcin de peso campana seno al cuadrado para los mismos valores de la fase.

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8.5 Llenado de ceros.

Esta es una operacin que no produce ningn efecto sobre la posicin de los picos,
sus intensidades o sobre la anchura de las bandas espectrales, es decir sobre la resolucin
real, pero aumenta la resolucin digital (Hz/punto) de forma que se definen mejor los picos
La operacin del llenado con ceros consiste en aadir un nmero de puntos, potencia de 2, a
continuacin del ltimo punto de la FID. La transformada de Fourier preserva en nmero de
puntos, como consecuencia la ventana de frecuencia, despus de un llenado de ceros, se
reparte entre un nmero mayor de puntos de forma que se mejora la resolucin digital, en
trminos de Hz/punto. Esta operacin y su efecto sobre el espectro se ilustra en la figura 8.16
en dos sucesivas operaciones de llenado de ceros.

Figura 8.16. Efecto del llenado de ceros sobre la definicin de los picos del espectro. (a)
FID original y el pico correspondiente pobremente definido. (b) FID suplementada con un
nmero de ceros que duplica el nmero total de puntos y el pico espectral correspondiente
aun con pobre definicin. (c) FID suplementada con un nmero de ceros que cuadruplica el
nmero inicial de puntos y el pico espectral bien definido.
No se trata de una simple operacin esttica, as por ejemplo, puede mejorar la
exactitud con que se miden constantes de acoplamiento. Como se ilustra en la figura 8.17,
para el caso de un doblete con un desdoblamiento de 8 Hz, a una baja resolucin de 3.0
Hz/punto se describe con solo 3 puntos y por consiguiente la medida del desdoblamiento
podra ser inexacta, en contraste con el mismo doblete obtenido despus de un llenado de
ceros tal que cambia la resolucin digital a 0.3 Hz/punto y define mucho mejor los picos y
permite una medida de la constante de acoplamiento mas exacta.

Baja Resolucin Digital

Alta Resolucin Digital

Figura 8.17 Efecto de la resolucin digital sobre la definicin de un doblete con un

desdoblamiento de 8 Hz.

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8.6 Truncacin

En RMN monodimensional convencional es casi siempre posible registrar la FID

hasta su decaimiento al nivel del ruido. No obstante, este no es el caso en los experimentos
de RMN multidimensional donde por razones de cantidad de datos que se genera es preciso
en muchas ocasiones registrar parcialmente la FID, es decir truncar la cola de la FID. El
efecto que se obtiene al aplicar la transformacin de Fourier a una FID truncada es la
aparicin de oscilaciones de la seal en la base de los picos; cuanto mayor sea la truncacin
tanto mas amplias sern las oscilaciones, como se muestra en la figura 8.18.

Figura 8.18. Artefactos (sinc wiggles)en los picos espectrales debido a la truncacin de
la FID. En la izquierda la FID prcticamente alcanza el cero no apreciandose artefactos de
truncacin. En el centro con una truncacin moderada los artefactos son muy pequeos
pero perceptibles. Y en la derecha con una truncacin fuerte los artefactos son ya
importantes.
El problema principal que puede derivarse de la truncacin es el enmascaramiento de
seales dbiles prximas a un pico intenso.
En el caso que no sea aconsejable aumentar el tiempo de adquisicin, la solucin es
la apodizacin para forzar la terminacin de la FID lo ms cerca posible del nivel de ruido,
teniendo en cuenta el cosro en resolucin debido al ensanchamiento que produciremos en los
picos.

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8.7. Correccin de la fase.

Ya hemos estudiado en el apartado 4 el probema de la fase y es evidente que, por

razones instrumentales, no sea posible predecir sobre que direccin aparecer la seal; es
decir, en cualquier situacin prctica tendremos una desplazamiento de fase desconocido. La
consecuencia inmediata es que la parte real del espectro, que es la que normalmente se
muestra, no tiene la forma de Lorentziana en modo absorcin en detrimento de la resolucin.
Cualquier espectro real es una mezcla de los modos de absorcin y dispersin, y la
proporcin de cada modo vara con el desplazamiento, normalmente de forma lineal.
En tendemos por correccin de fase la operacin necesaria para conseguir que la
parte real del espectro aparezca en modo de absorcin pura y la parte imaginaria en modo de
dispersin. La operacin puede hacerse en el dominio del tiempo o en el dominio de la
frecuencia, siendo lo ms frecuente hacerlo en ste ltimo y de forma interactiva entre el
usuario y el computador.
Un poco de matemticas de las ondas nos har entender fcilmente la operacin:
As una onda de frecuencia angular y fase puede estar representada por:
A t = Ao cos( t + ) = Ao cos(2t + )

pero tambin por:

A t = [ A0 ei( t

+ )

]R

donde el subndice R indica la parte real. Estas dos ecuaciones son equivalentes porque:
i
e cos + i sen

cos i sen

i( t + )

= cos( t + ) + i sen( t + )

Si dos ondas difieren slo en fase:

i [ t + 1 ]
A1 t = A0 e
i [ t + 2 ]
A2 t = A0 e

donde

= 2 - 1 .

A2 (t) =

A1 (t) e

Recordad que e(a+b) = ea .eb

( icorr )

Luego basta multiplicar por e

la FID para cambiar la fase. De la misma forma en el
dominio de la frecuencia la operacin de correccin de la fase consiste en la operacin:

e ( i corr ) S ( )

(63)

Donde S() representa al espectro.

Esta correccin que se aplica a todo el espectro y es independiente de la frecuencia se
conoce como correccin de fase de orden cero; es decir afecta por igual a todos los picos
del espectro, independientemente de su desplazamiento qumico.

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Si la fase depende del desplazamiento qumico con una correccin de orden cero solo
podramos ajustar la fase de un determinado pico, quedando los dems desajustados.
Afortunadamente, en la mayora de los casos la dependencia del desfase con la frecuencia o
desplazamiento qumico es una funcin lineal, corr ( ) b m , lo que nos permite
realizar una correccin de fase de primer orden. Se escoge un pico intenso como pivote
(normalmente en un extremo del espectro), es decir un pico al que se le adjudica el valor de
= 0 para la correccin lineal y se corrige su fase ajustando el parmetro b (ordenada en el
origen); se escoge ahora un segundo pico (en el otro extremo del espectro) y se corrige su
fase ajustando la pendiente m de la funcin lineal, Con los dos parmetros b y m as
ajustados se corrigen las fases de todos los picos, figura 8.19.

Hipottico espectro

Correccin lineal

Correccin de fase
de orden cero
-135

Pico pivote
Correccin de fase
de primer orden

Por ultimo, otras operaciones tales como correccin de linea base, integracin, peak
picking, calibracin del desplazamiento qumico, etc., se vern en la prctica.

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