Los espectrofotmetros actuales permiten medir y registrar la absorbancia
de un gran nmero de longitudes de onda proporcionando mayor informacin de la muestra, resultando en infinitas soluciones para la solucin del sistema (Alciaturi et al, 2003). La espectrofotometra UV-visible es una tcnica analtica que permite determinar la concentracin de un compuesto en solucin. Se basa en que las molculas absorben las radiaciones electromagnticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentracin. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotmetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solucin y medir la cantidad de luz absorbida por la misma. 1.1- Absorbancia La absorbancia (A) es un concepto ms relacionado con la muestra puesto que nos indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io. Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del 100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces A vale log 1 = 0. La cantidad de luz absorbida depender de la distancia que atraviesa la luz a travs de la solucin del cromforo y de la concentracin de ste. La ley de Beer dice: La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a la concentracin y a la longitud del paso de la luz. La aplicacin prctica de la ley de Beer es, que conociendo la absorbancia de una sustancia podremos averiguar su concentracin, esto puede ser llevado a cabo de dos maneras: Por comparacin de con una solucin conocida o a travs de una curva de calibracin. 1.2Ley de Lambert-Beer Esta ley expresa la relacin entre absorbancia de luz monocromtica (de longitud de onda fija) y concentracin de un cromforo en solucin: A = log I/Io = cl La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a su concentracin a mayor nmero de molculas mayor interaccin de la luz con ellas-; tambin depende de la distancia que recorre la luz por la solucin a igual concentracin, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra ms molculas se encontrar-; y por ltimo, depende de , una constante de proporcionalidad -denominada coeficiente de extincin- que es especfica de cada cromforo. Como A es adimensional, las dimensiones de dependen de las de c y l. La segunda magnitud (l) se expresa siempre en cm mientras que la primera (c) se hace, siempre que sea posible, en M, con lo que las dimensiones de resultan ser M1cm-1. Este coeficiente as expresado, en trminos de unidades de
concentracin molar (o un submltiplo apropiado), se denomina
coeficiente de extincin molar (M). Cuando, por desconocerse el peso molecular del soluto, la concentracin de la disolucin se expresa en otras unidades distintas de M, por ejemplo gL-1, las dimensiones de resultan ser distintas, por ejemplo g-1Lcm-1, y al coeficiente as expresado se denomina coeficiente de extincin especfico (s). La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c altos, vara con la concentracin, debido a fenmenos de dispersin de la luz, agregacin de molculas, cambios del medio, etc. BIBLIOGRAFIA: Alciaturi C., Escobar M., De la Cruz C., Rincn C. (2003), Partial least squares (PLS) regression and its application to coal analysis, Revista Tcnica de la Facultad de Ingeniera Universidad del Zulia. 26 (3):197-204