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ROEDORES
MATERIALES Y METODOS
Procedimientos experimentales. Se estudiaron cuatro especies diferentes de
roedores: A / J ratones (n 5 11; 20,5 a 24,7 g), ratas Sprague-Dawley (n 5 8; 260 a
290 g), conejillos de indias Dunkin-Hartley (n 5 5; 360- 410 g), y conejos blancos
de Nueva Zelanda (n 5 6; 2,6 a 3,0 kg). Los ratones y las ratas fueron sedados con
un bolo intraperitoneal de xilazina (7 y 14 mg / kg, respectivamente). Todos los
animales fueron anestesiados [pentobarbital sdico en ratones (50 mg / kg
ip), ratas (35 mg / kg ip), y conejillos de indias (65 mg / kg ip); tiopental sdico en
conejos (35 mg / kg iv)] y traqueostomizada. A excepcin de los conejos, que
haba su trquea canulados con un tubo de plstico rgido y que fueron ventilados
con una versin comercial del SAV (flexiVent, SCIREQ, la Ciencia Equipo
Respiratorio, Montreal, Quebec), todos los dems animales tenan un cmodo
ajuste cnula traqueal de metal conectado a un prototipo SAV (34). Ratones, ratas,
cobayas y conejos fueron ventilados mecnicamente con la inspiracin sinusoidal
y espiracin pasiva con volmenes corrientes de 6, 8, 9 y 7 ml / kg de respiracin y
las frecuencias de 150, 90, 70 y 60 respiraciones / min, respectivamente. La
presin positiva al final de la espiracin (PEEP) se fij en 3 hPa mediante la
conexin de la lnea de espiracin del ventilador a una trampa de agua. Los
ratones y los conejos se paralizaron con bromuro de pancuronio (0,8 mg / kg ip y
0,1 mg / kg iv, respectivamente). Las ratas y cobayos fueron paralizadas con
cloruro de succinilcolina (20 y 13 mg / kg ip, respectivamente). Cada 3 min, los
animales fueron ventilados contra uno de los cinco diferentes niveles de PEEP (07 hPa) elegido al azar. Tres maniobras totales de capacidad pulmonar se
realizaron mediante el cierre de la lnea de espiracin hasta una presin de
apertura de la va area (Pao) de 30-35 se obtuvo hPa. Esperamos 15 ciclos de
respiracin, los animales se les permiti a expirar pasivamente al volumen de
relajacin segn se determina por PEEP (establecido mediante la conexin de la
lnea de espiracin del ventilador a una trampa de agua), y un 18-s de pequea
amplitud, de banda ancha perturbacin volumen se aplic a la apertura de las vas
respiratorias. La forma de onda de perturbacin volumen contena 12
componentes sinusoidales discretas que tienen frecuencias mutuamente primos
0,25 a 9,125 Hz, y su amplitud pico a pico correspondi a 35% del volumen
corriente del animal. Las amplitudes individuales en el flujo tenan la misma
potencia en cada frecuencia. Las fases de las sinusoides se ajustaron para reducir
al mnimo la amplitud pico a pico de la seal de volumen. Las frecuencias fueron
elegidos para ser mutuamente primordial para evitar la distorsin armnica en la
seal de presin de la va area (Paw) (6). Adems, se seleccion esta gama de
frecuencias, ya que es adecuado para la particin de resistiva newtoniano y las
propiedades viscoelsticas del tejido respiratorias. Una vez que se han tomado
medidas en todos los cinco diferentes niveles de PEEP, se repiti el
procedimiento.
El SAV es un ventilador controlado por ordenador en el que un motor lineal
acciona un pistn en un cilindro de dimetro conocido (34). Los clculos de Zrs se
Para facilitar las comparaciones entre especies, que normaliz los parmetros R, I,
GTI, y HTI multiplicndolos por BW para obtener, respectivamente, NR, NI, NGti, y
NHTI.
Se calcul la coherencia entre Pcyl y Vcyl en cada una de las frecuencias
utilizadas en la seal de perturbacin volumen y ajustar el modelo a Zrs a slo
aquellas frecuencias para las que la coherencia era .0.9. Sobre esta base, se
descart 0,15, 1,25, y 1,25% de los datos Zrs en ratones, ratas y conejos,
respectivamente. Tambin se calcul la desviacin estndar de los residuales
entre los datos y el ajuste del modelo y descartamos aquellas frecuencias para las
que las partes real y / o imaginarias de Zrs eran ms de dos desviaciones
estndar de distancia de la forma. Todos juntos, 1,97, 3,39, 0,41, y 2,78% de los
datos obtenidos Zrs en ratones, ratas, cobayas y conejos, respectivamente, no
fueron utilizados en el modelo apropiado.
ANOVA se utiliz para buscar diferencias significativas en los parmetros del
modelo empotrados, debido a los efectos de las especies, la PEEP, su interaccin,
y de un animal en particular en una especie. Se encontr que la forma en que los
valores de los parmetros del modelo dependan de PEEP vari significativamente
entre las especies; Por lo tanto, se utiliz un modelo lineal para investigar los
efectos de la PEEP en cada especie. Tambin estudiamos las diferencias en los
valores de los parmetros entre las especies para cada PEEP. Cuando sea
apropiado, se realizaron diferencias significativa mltiples comparaciones por
pares de Tukey. Se consider estadsticamente significativo cuando P, 0,05.
RESULTADOS
Las figuras 1 y 2 muestran, respectivamente, NRRS y RXR como funcin de la
frecuencia para cada una de las especies estudiadas en cinco diferentes niveles
de PEEP. En cada caso, NRR disminuyeron montonamente, mientras que RXR
aumenta montonamente con la frecuencia. La frecuencia de resonancia no se
logr en cualquiera de los animales por 9.125 Hz, como NXrs siempre fue negativo
hasta esta frecuencia. La figura 1 tambin muestra que los ratones tenan valores
NRR inferiores a frecuencias ms altas que hizo ratas, cobayas, o conejos. A la
frecuencia ms baja de 0,25 Hz y al 0-hPa PEEP, ratones y conejos tenan
mayores NRR que hizo ratas y conejillos de indias. Por encima de 6 Hz, NRRS
disminuyeron sistemticamente con el aumento de la PEEP. La Figura 2 muestra
que los ratones y conejos tenan NXrs inferiores a 0,25 Hz, en ausencia de PEEP,
que hizo ratas y conejillos de indias. La Figura 3 muestra la dependencia de PEEP
de los parmetros del modelo Zrs en las cuatro especies estudiadas. NR tendi a
disminuir con PEEP en todas las especies y era muy similar en ratas y conejillos
de indias, ms bajos en los ratones y mayor en los conejos. NI era muy pequea
en magnitud y por lo general negativo. Por otra parte, cuando estaba excluido de
la ecuacin. 1 y el modelo fue revisado totalmente a los datos Zrs, no hubo
esencialmente ningn cambio en los valores de los parmetros restantes.
Nosotros, por lo tanto, consideramos la influencia de NI para ser insignificante
sobre el rango de frecuencias estudiado. Los ratones y las ratas tuvieron valores
ms altos de NGti en ausencia de PEEP que cuando se aplic PEEP. NGti no
mostr ninguna dependencia de la PEEP en conejos y en cobayos NGti tendi a
aumentar a niveles ms altos de PEEP. Las diferencias en NGti entre las especies
fueron menores y se produjeron en una PEEP de 0 hPa entre los ratones y las
ratas y al tos ms de 2 y 7 hPa entre las ratas y conejos. En todas las especies,
NHTI tendi a disminuir con el aumento de PEEP hasta 5 hPa cuando no haba un
punto de inflexin, excepto en ratones. En tos ms bajos, ratones y conejos
presentaron mayores valores de NHTI que hizo ratas y conejillos de indias. La una
y h fueron independientes de PEEP en ratones, pero mostraron una tendencia a
disminuir y aumentar, respectivamente, con PEEP en ratas y conejos. En cobayas,
la nica diferencia observada fue entre los niveles de PEEP de 0 y 2 hPa. Excepto
cuando no se aplic PEEP, los ratones mostraron valores de y h que fueron
significativamente diferentes de los de otras especies. Se analiz el conjunto de
repeticin de las mediciones que se realizan en cada animal para establecer la
reproducibilidad de los resultados en el tiempo. Se compararon las primera y
segunda mediciones de R, GTI, Hti, , y h en cada uno de los cinco niveles
diferentes de PEEP. El anlisis de la prueba t pareada no mostr diferencias
significativas en casi todos los parmetros. No se han encontrado excepciones
para Gti en cobayas en una PEEP de 7 hPa, para Hti en cobayas ms de 5 y 7
hPa, para Hti en conejos en una PEEP de 0 hPa, y por y h en ratones en una
PEEP de 2 hPa. Sin embargo, las diferencias relativas fueron siempre, del 9,1%
para Hti y h, 3,1% para Gti, y 1% para .
DISCUSIN
El presente estudio fue motivado por la amplia utilizacin de los roedores en la
investigacin del desarrollo y los procesos relacionados con las enfermedades del
sistema respiratorio pulmonar. Aunque las especies que utilizamos han sido
estudiadas en el pasado (3, 4, 10, 14, 16, 17, 19, 21, 25-30, 32, 35-37, 39), muy
poco se ha informado acerca de las Zrs de los ratones, sin duda, en parte debido a
las dificultades tcnicas asociadas con la fabricacin de las mediciones
necesarias. Adems, la mayora de los estudios comparativos sobre la mecnica
respiratoria de mamferos se han realizado durante la respiracin espontnea de
las mareas, que permite a los animales para elegir (y varan) sus volmenes
corrientes, frecuencias de respiracin, y la capacidad residual funcional. Adems,
los datos comparativos existentes presentadas proceden de diferentes fuentes en
la literatura; Por lo tanto, los mtodos utilizados para evaluar la mecnica no
siempre fueron los mismos en las diferentes especies. Teniendo en cuenta la
presente necesidad de realizar mediciones precisas de Zrs en pequeos roedores
y el hecho de que Zrs depende marcadamente de la frecuencia y el volumen
pulmonar (. Figs 1 y 2), existe una clara necesidad de mediciones comparativas de
Zrs en varias especies de roedores ms de una amplia gama de frecuencias y en
diferentes niveles de PEEP. Este fue el objetivo de nuestro estudio. Zrs por s
mismo puede proporcionar informacin til sobre el estado del sistema
respiratorio, pero la utilizacin de modelos adecuados puede facilitar
enormemente su interpretacin. El modelo que utilizamos consiste en un proyecto
de I y que conduce a un compartimento tisular-fase constante caracterizado por el
parmetro Gti disipativo y el parmetro elstica Hti. Se ha demostrado
anteriormente que este modelo proporciona ajustes extremadamente precisos
para Zrs normales en el rango de frecuencias que hemos estudiado (12, 15, 17,
22, 31), a pesar de tener slo cuatro parmetros independientes. Al igual que en
estudios previos de nuestro laboratorio en ratas (17), encontramos que para hacer
una contribucin insignificante a la impedancia de entrada por encima del rango de
frecuencias examinadas en el presente estudio. Estudios previos de nuestro
laboratorio en perros (2) y ratas (17) tambin han demostrado que R contiene
contribuciones tanto de los tejidos de la pared del pecho y las vas respiratorias
pulmonares, respectivamente, en diversos grados, dependiendo de la especie. Gti
y Hti caracterizar las propiedades viscoelsticas de los tejidos respiratorios. Para
comparar Zrs, R, I, GTI, y Hti entre las especies, que les multiplica por BW. Como
Sin embargo, la idea de que los ordenamientos de rango son de hecho el mismo
proviene de una opinin comparativa de la mecnica respiratoria por Leith (21),
que mostr que Raw est relacionada con BW en un amplio rango de especies de
diversas especies como el producto del nmero de los alvolos por pulmn y el
volumen alveolar medio. Entonces Asumimos a la elasticidad a ser inversamente
proporcional al volumen de pulmn y elasticidad pulmonar calculado normalizado
a BW respecto a la de la del ratn (Fig. 5). Aunque los elastances pulmonares
normalizados disminuyeron con el tamao para la mayora de las especies, los
conejos y ratones tenan distensibilidad pulmonar muy similares debido a los
inusualmente pequeos alvolos en el conejo (24). Se compararon estos valores
con las estimaciones de NHTI para el pulmn en ratones, ratas y conejos por el
supuesto de que el pulmn represent el 65% del sistema respiratorio NHTI en el
ratn, 55% en la rata, y 80% en el conejo (16, 17, 30, 32). La Figura 5 muestra que
nuestras estimaciones de NHTI pulmonares normalizados concuerdan bien con los
valores de la literatura derivados de elasticidad pulmonar. Por lo tanto, parece
probable que los ratones y los conejos tienen relativamente mayor NHTI
comparacin con las ratas y conejillos de indias, debido a los volmenes totales de
espacio de aire proporcionalmente ms pequeas. Encontramos Gti a variar con
BW a la fuente de 21,02, que es muy similar a la relacin se han encontrado Hti
(Fig. 4). Esto significa que Gti y Hti deben tener una relacin constante; por lo
tanto, h debe ser independiente del tamao del animal. Aunque h era
esencialmente constante en ratones en el rango de PEEP estudiados, ratas,
cobayas, conejos y mostraron valores de h que variaban con PEEP (Fig. 3). Hirai
et al. (17) informaron de una variacin modesta en h con el volumen pulmonar
para el sistema respiratorio en ratas que era debido a que solo una ligera variacin
en h para el pulmn, pero una marcada variacin en h para la pared del pecho.
Pulmn h Tambin se ha demostrado no ser afectado por la presin transpulmonar
entre 3 y 11 hPa en ratones (28) y entre 2 y 4,6 hPa en conejos (35), mientras que
hiperinflada pulmones de cobayas ventilados con un volumen normal de la marea
haban reducido h (19 ). Esto sugiere que la dependencia PEEP observado del
sistema respiratorio h que encontramos se debi a la pared torcica. Por ltimo,
debemos tener en cuenta algunas posibles deficiencias de nuestro estudio. Al
hacer una comparacin entre las especies, es importante para mantener las
condiciones y los protocolos experimentales como similares como sea posible
para los diferentes animales. Es imposible hacer esto perfectamente, sobre todo
cuando se examinan los animales de distintos tamaos.
En nuestro estudio, por ejemplo, tuvimos que ventilar los diferentes roedores con
volmenes corrientes y frecuencias existentes en sus respectivos patrones de
respiracin. Sin embargo, las medidas reales de la mecnica respiratoria se
hicieron utilizando la misma forma de onda de perturbacin en el volumen de cada
animal, a escala de la amplitud de acuerdo a los volmenes corrientes los distintos
animales. De esta manera, esperbamos para evitar los efectos de confusin de la
frecuencia, amplitud, y PEEP que se sabe que afectan el comportamiento
mecnico del sistema respiratorio en un grado significativo (1, 12-17, 30-32, 35).
Otra posible fuente de variabilidad en las mediciones fue el hecho de que no
usamos la misma anestesia y agentes paralizantes en todas las especies. Nuestra
experiencia es que las especies diferentes se tratan mejor con diferentes drogas,
especialmente en trminos del agente paralizante utilizado (parlisis completa es
esencial para la determinacin precisa de la impedancia respiratoria). Esto plantea
la cuestin de si nuestros resultados podran haber sido afectados por estas
diferencias en el tratamiento de drogas. No podemos saber con seguridad. Sin
embargo, se sospecha que los efectos eran insignificantes porque los resultados
que obtuvimos en las diferentes especies a escala general con el tamao del
animal, con esas salidas de ser interpretable en trminos de la de informes
anteriores diferencias en el tamao de las vas respiratorias relativa entre los
animales grandes y pequeos. En resumen, hemos realizado un estudio
comparativo de Zrs en ratones, ratas, cobayas, conejos y utilizando un SAV
controlado por ordenador. Interpretamos Zrs en trminos de un modelo de tejido
de fase constante en serie con un R e I. Se documentaron las dependencias de
PEEP de propiedades de las vas respiratorias y del tejido en estos animales e
interpretamos nuestras observaciones en trminos de diversos fenmenos
fisiolgicos, como el reclutamiento y el espacio areo interdependencia la manera
de aire del parnquima Tambin demostramos que R es proporcionalmente mayor
en los animales ms grandes, probablemente debido al aumento relativamente
pequeo en el calibre de la va area a medida que aumenta de tamao. Tambin
hemos argumentado que un volumen total de espacio de aire relativamente
pequeo podra explicar los valores ms altos de Hti que encontramos en ratones
y conejos. Por consiguiente, concluimos que un estudio detallado, comparativo de
la mecnica del sistema respiratorio muestra evidencia de algunas diferencias
estructurales entre los pulmones de varias especies, aunque, en general, los
roedores que estudiamos tenan la mecnica respiratoria que ajustan en funcin
de BW de una manera similar a la reportada en otras especies (21). Esto sugiere
que los pulmones de los roedores que estudiamos difieren de los de las especies
ms grandes esencialmente slo en trminos de escala, que apoya su validez
como modelos de propsito general del pulmn humano.