UNIVERSIDADE REGIONAL INTEGRADA DO ALTO URUGUAI E DAS

MISSES CAMPUS DE ERECHIM

Macromorfologia das colnias de fungos

Aula prtica de Microbiologia

Alunas: Estela Carla Tyburski e Tatiane Bertella

Professora: Neiva Aparecida Grazziotin
Curso: Farmcia
Departamento: Cincias da Sade

Erechim, agosto de 2013.

Introduo
Em nossas aulas prticas, foram utilizadas placas de Petri esterilizadas
para a preparao de meios de cultura, que so matrias com nutrientes
preparadas no laboratrio para crescimento de microrganismos. Para esse
crescimento, h vrios tipos de meios de cultura, um deles o gar que possui
propriedades muito importantes para a microbiologia. O sabouraud gar
normalmente usado em placas de Petri ou tubos de ensaio que so colocados
em uma posio inclinada, e dependendo do procedimento utilizado so
deixadas para obter microrganismos para anlise.
Tambm utilizamos a autoclave, que um mtodo usado para a esterilizao
de diversos objetos, sejam eles slidos ou lquidos, indo desde meios de
cultura at vestimentas e instrumentos. Portanto,
a esterilizao com o autoclave mais eficaz quando os
organismos so contatados diretamente com o vapor ou esto
contidos num pequeno volume de soluo aquosa (constituda
primariamente por gua). Sob essas condies, o vapor a uma
presso

em

torno

de

15

psi(121C)

matar

todos

os

organismos(com exceo dos prons) e seus endosporos com

cerca de 15 min(TORTORA,2012,p.188).

Os meios de cultura preparado por ns, era especial para fungos, que
so microrganismos eucariticos quimiorganotrficos. Reproduzem se,
naturalmente, por meio de esporos, com poucas excees. Alm disso, a
maioria das partes de um fungo potencialmente capaz de crescimento; um
minsculo fragmento suficiente para originar um novo indivduo. Os fungos
no tm clorofila, so filamentosos em geral e comumente ramificados. Os
filamentos apresentam paredes celulares constitudas por quitina ou celulose,
ou ambas. So encontrados em todo lugar, principalmente no ar. Os fungos so
classificados em diversos grupos. O fungo filamentoso, por exemplo, tem no
seu corpo vrios filamentos longos de clulas conectadas, chamadas hifas, que
podem crescer at imensas propores, com paredes cruzadas denominadas
septos, que dividem as hifas em distintas unidades unicelulares, crescem por
alongamento das extremidades. Cada parte da hifa capaz de crescer, ate
mesmo se o fragmento quebrar, ele se alonga formando uma nova hifa. Os
esporos so formados por hifas areas, so partes dos fungos por onde
possvel determinar o tipo especifico de um fungo. Quando um fungo
filamentoso forma um esporo, o mesmo se separa da clula parental e
germina, originando um novo fungo filamentoso. Eles podem ser assexuais, no
qual germinam e se tornam organismos geneticamente idnticos ao parental e
sexuado aonde ocorre fuso de ncleos de duas linhagens opostas de
cruzamento de uma mesma espcie de fungo. Os fungos filamentosos,

patognicos ou contaminantes ambientais, potencialmente oportunistas,

formam um grupo muito extenso, a sua identificao tem como fundamento, a
observao da morfologia da colnia e aspectos microscpicos. A anlise da
colnia visa observar: cor, textura, superfcie, pigmento difusvel no meio de
cultura, entre outros, e pode ser feita nos tubos de ensaio contendo a cultura
primria do fungo. Porm, o mais adequado a anlise a partir de uma cultura
feita no ponto central de uma camada de gar distribudo em placa de Petri. A
velocidade decrescimento nos fungos, pode ser rpida (menor 7 dias),
intermediria (8 a 14 dias) ou lenta (maior 15 dias) fundamental para
identificao presuntiva do fungo.

Objetivos
Aprender o preparo de um meio de cultura e observar a macromorfologia
de fungos analisando, as prprias lminas, tendo como material de observao
os fungos que encontramos em lugares especficos determinados por cada
aluno.
Materiais e mtodos
Pra todo esse procedimento foram utilizados os seguintes materiais:

Placas de petri

Papel pardo

Autoclave

Bquer

gar sabouraud

Microondas

Basto de vidro

Lamparina

Lamina

Lamnula

Papel filtro

Ala

Microscpio

Procedimento
Primeiramente, preparamos o meio de cultura em que cada grupo utilizou um
diferente ,escolhido pelos mesmos. O nosso grupo optou por preparar o meio
de cultura gar sabouraud, que foi acrescentada 488ml de gua destilada,
aquecido at sua total diluio e depois autoclavada. Posteriormente,
preparamos as placas de Petri para serem esterilizadas, enrolando-as em
papel pardo, para ficarem na estufa de esterilizao. Sete dias aps feito isso,
colocamos o meio de cultura autoclavado em uma microndas para fazer ele
retornar ao estado lquido depositando-o, em seguida, em placas de Petri,
sendo que cada aluno definiu uma para si e colocando-a em algum lugar para
atrair os fungos do ar. Logo aps feito isto, deixamos as placas de Petri
armazenadas em um local, para que, se houver colnias de fungos, elas se
desenvolvam. Cinco dias se passaram, e ns retiramos as placas de Petri do
local de armazenamento para observar o crescimento de suas colnias.
Selecionamos uma colnia de cada placa para analisarmos, fazendo um
esfregao da mesma. Para isso, depositamos duas gotas de lactofenol azul
algodo em lminas, ascendemos uma lamparina para esterilizar o local,
esterilizando tambm uma ala empregada para retirar parte de uma colnia a
fim de sua verificao. Retirada parte do centro da colnia, pusemo-la encima
da lmina que tinha lactofenol azul algodo, e cobrimo-la com uma lamnula,
para a identificao de qual fungo se tratava, averiguando em um microscpio
ptico.

Resultados e discusses:
Depois de ter ficado armazenadas por 7 dias, constatamos a formao de 19
colnias em ambas as placas, algumas mais desenvolvidas que outras. Para
melhor estudo, escolhemos duas colnias, uma de cada placa, analisando seus
aspectos macromorfolgicos. Observamos que elas tinham aspecto aveludado,
com pigmento reverso de colorao amarelo. Por essas caractersticas,
supomos que esses fungos eram do tipo filamentosos e pluricelulares. Para a
confirmao, utilizamos as lminas feitas com parte do centro das colnias
escolhidas, e visualizamos no microscpio ptico nos aumentos de 100X e
400X.

Imagens fotografadas das lminas obtidas no final de todo o procedimento.

Depois da observao, conclumos que se tratavam realmente de fungos
filamentosos, sendo que seu talo(corpo) consiste em filamentos longos de
clulas conectadas, denominadas hifas, que podem crescer at chegar a
imensas propores. Quando as hifas se acumulam, passam a ser vistas a
olho nu e chamadas de miclio, conhecido popularmente como bolor.
Fazendo comparao com outros fungos encontrados na literatura, mais
precisamente no artigo Fungos no ar, na cidade de Porto Alegre, Rio Grande
do Sul, Brasil, onde tratava-se do fungo anemfilos encontrado na cidade de
Porto Alegre, sendo possvel a identificao de seu gnero no ar da referida
cidade que atravs de seus esporos, foram localizados com maior frequncia
os gneros Cladosporium, Penicillium e Aspergillus. Tambm, conseguiram
identifica em qual poca do ano havia maior e menor incidncia de seus
esporos, consistindo no vero a maior incidncia e no outono a menor.
Porm, em nossos testes no obtivemos o mesmo sucesso, pois como no
havia esporos e nem outro fator determinante, no foi possvel identificar seu
gnero.

Concluses:
Conclumos, com isso, a importncia da preparao de meios de cultura para o
crescimento e identificao de microrganismos, j que eles so de suma
importncia para nossa vida, em especial os fungos, analisados nesse
relatrio, que quando suas hifas se juntam formando bolores, so utilizados
para fabricar o antibitico penicilina, molho de soja, queijos Roqueford e
Camembert, tendo tambm outras utilidades. Sua anlise tambm muito
importante para que possamos combater seus malefcios, entre alguns esto,
deteriorao de matrias txtis e madeiras, e doenas como p-de-atleta.
Referncias:
TORTORA, Gerard J. Microbiologia. 10. ed. Porto Alegre:
Artemed,2012.

<http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_7_2004.ht
>
<http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_pos2003/const_microorg/
fungos.htm>
< http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003646652002000500007&lang=pt>
PELEZAR, Michel J. Jr, CHAN, E.C.S, KRIEG, Noel R.. Microbiologia:
conceitos e aplicaes. 2ed. So Paulo: Makron books,1996.