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I
1.0
II
1.0
Nmero de tubo
III
IV
1.0
1.0
V
1.0
VI
1.0
2.4
2.4
2.4
2.4
2.4
I
6.5
II
6.5
Nmero de tubo
III
IV
6.5
6.5
V
6.5
VI
6.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
4. Preincubar por 2 minutos a 25C, luego agregar a cada uno de los tubos la
enzima tratada en el paso 1.
5. Dejar en incubacin durante 2 minutos s a 25C y determinar la actividad
enzimtica cualitativamente de la siguiente manera.
- Presencia de actividad enzimatica = formacin de gas
- Ausencia de actividad enzimatica = ausencia de gas
VI. RESULTADOS
MANZANA
N de Tubo
I
II
III
IV
V
VI
N de Tubo
I
II
III
IV
V
VI
VII.
Diagrama de bloques
Pelar el tomate y la manzana; luego
desechar la cscara.
VIII. DISCUSION
Las enzimas son protenas que catalizan reacciones qumicas en los seres vivos.
La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos, su
funcin es descomponer el perxido de hidrgeno (H2O2) en agua y oxigeno.
La influencia del pH en la velocidad de las reacciones enzimticas indica que los
enzimas presentan un pH ptimo de actividad. El pH puede afectar de varias
maneras:
Por lo tanto es muy importante elegir un buffer adecuado para las pruebas que se
desarrollen y as evitar cambios de pH ya que la mayora de enzimas son
sensibles a los cambios de pH y esto podra provocar la desnaturalizacin de la
protena en si.
Por otro lado, la temperatura influye tambin en la actividad cataltica, ya que al
ser protenas a cierta temperatura se empiezan a desnaturalizar. Por ejemplo a
temperaturas altas el aumento de velocidad de la reaccin es contrarrestada por
la prdida de actividad cataltica y la actividad enzimtica decrece rpidamente
hasta anularse.
Es por eso que es recomendable utilizar en los experimentos vegetales
previamente congelados, para as evitar complicaciones al reconocer las
enzimas.
IX. CONCLUSIONES
Anotas las conclusiones de la prctica de acuerdo a los objetivos propuestos.
1. Logramos obtener un extracto crudo de la enzima catalasa, con la ayuda del
buffer fosfato (pH 6,5). Ya que la ruptura de clulas en un buffer adecuado libera
las enzimas al medio.
2. Comprobamos el efecto del pH en la actividad enzimatica. Las enzimas poseen un
PH caracterstico donde su actividad es mxima, por encima o debajo de ese PH
la actividad disminuye. Las catalasas dan como resultado oxgeno.
X. CUESTIONARIO
1. QU ES UN EXTRACTO CRUDO?
Es el extracto de algn compuesto biolgico, en el cual no se altera su composicin
qumica.
Generalmente para el aislamiento de protenas el primer paso es la obtencin del
extracto crudo, ya sea procedente de la ruptura total de un tejido, de un solo tipo de
clulas o de algn orgnulo subcelular previamente aislado.