1.- Qu es un sistema libre de clulas?

Es una fraccin subcelular aislada por ultra centrifugacin u otro medio con el
uso de tcnicas para la separacin de la pared celular.
El sistema libre de clulas fue utilizado por Arthur Kornberg en un extracto de
E. coli, en el que las bacterias se rompieron y las centrifugo despus para
separar la pared celular.
Como conclusin Arthur Kornberg logr sintetizar el ADN a travs de un
sistema libre de clulas.
3.- bajo cuales supuestos se inicio la investigacin?
La investigacin se inicio bajo dos evidencias, la primera surgi de cmo la
propia clula poda sintetizar los nucletidos a partir de la glucosa, amoniaco,
anhdrido carbnico y aminocidos. Y el segundo conocimiento proceda de los
estudios previos que dice que las molculas mas simple resultan de dos
nucletidos y que se formaban a partir de unidades 5nucleotidicos, logrando
as que la unin enzimtica tuviera lugar.
4.- Cul es la Ventaja de marcar radiactivamente los nucletidos?
A travs de este mtodo se puede llegar a detectar la incorporacin del acido
nucleico para la sntesis del ADN, con las esperanzas de que estas molculas
sintetizadas conteniendo un nucletido marcado pudiera sobrevivir estando
entremezclados en los cidos nucleicos. Detectndose as la sntesis de pocas
molculas atrapadas en el conjunto.
5.- Cules son los componentes que deben estar presentes para la sntesis
artificial del ADN?
Junto con el ADN polimerasa, debe de estar presente el ADN preformado y los
cuatros desoxinucleotidos constituyentes del ADN (Adenina, Guanina, timina
y citosina).
La composicin del ADN sinttico est determinada exclusivamente por la
composicin del ADN.
6.- Cul observacin accidental les permiti comprobar la exactitud de la ADN
polimerasa cuando aparea pares de bases?
Cuando Severo Ochoa y Marianne Grunberg-Manago investigaban el aspecto
del metabolismo enegertico, tuvieron la inesperada observacin de que uno de
los reactivos , adenosin difosfato (ADP), haba sido polimerizado por los
extractos celulares para dar asi una cadena de adenilatos parecida a la del
ARN

7.- Resume el experimento del vecino ms cercano

El anlisis del vecino ms cercano, fue ideado en 1959 por John Josse A, Dabe
Kaiser y Yo (no se si es Arthur Kornberg o es otro). El experimento del vecino
ms cercano tiene la finalidad de determinar la frecuencia relativa con que dos
nucletidos resultan unidos lateralmente en una molcula de ADN sinttico.
Existe un total de 16 combinaciones posibles y de ellas cuatro secuencias
posibles de vecinos ms prximos de A, T, G y C. Este anlisis se utilizo para
determinar la frecuencia de estas secuencias dinucleotidicas en una cadena
sinttica de ADN. El procedimiento consisti en utilizar primero, durante la
sntesis, un trifosfato marcado con un tomo de fosforo radiactivo, tratando
despus el ADN sintetizado con una enzima especifica que rompa el ADN,
dejando as el tomo de fosforo radiactivo unido a su vecino ms inmediato.
La exactitud del anlisis de la frecuencia de vecinos ms cercanos o prximos
no puede ser superior al 98%.
8.- Cmo se comprob finalmente que el ADN sinttico era funcional?

9.- Cul es la importancia de este trabajo?

Es importante reconocer que la sntesis total de un ADN vital infectivo por la
ADN polimerasa, a travs de los cuatro desoxinuclesidos trifosfatos son
capaces de demostrar la capacidad de estas enzimas para copiar un
cromosoma pequeo sin ningn error. Uno de los acontecimientos que puede
lograr hacer el ADN polimerasa es comprender exactamente como se realiza
sin error la replicacin del ADN. Sin este acontecimiento acerca de la estructura
de la enzima y de cmo es que funcionan en condiciones definidas en los tubos
de ensayo, esta comprensin de su conducta intracelular seria incompleta. El
conocimiento sobre la estructura y sntesis del ADN da esperanzas sobre el
bienestar de la humanidad, ya que la ingeniera gentica y la responsabilidad
colectiva consisten en dar grandes oportunidades para mejorar la calidad de la
vida humana.
Uno de los virus que puede lograr modificar su ADN es el polioma, este induce
una variedad de tumores malignos en diversas especies de roedores
(constituido por un ADN circular doble). Es importante ya que es fcil de
sintetizar el ADN del virus, y si se llegara a conocer esta sntesis, seria muy
importante ya que lograra determinar donde se radica su capacidad de causar
tumores y controlara su potencial productor de tumores.