Ao 2006

PROBLEMAS III
SISTEMAS DE CULTIVO I- Cultivos Batch
(parte 1y 2)
1) Se realiza un cultivo batch de Pseudomona sp. y se observan los siguientes
resultados experimentales en funcin del tiempo:
Tiemp
Biomasa
o
(g/L)
(h)
0
0.1
1
0.13
2
0.18
3
0.24
4
0.32
5
0.43
6
0.58
7
0.78
8
1.04
9
1.4

Sustrato
(g/L)
40
39.9
39.8
39.7
39.5
39.3
39
38.5
38
37.2

Tiempo Biomasa Sustrat

(h)
(g/L)
o (g/L)
10
11
12
13
14
15
16
17
18

1.87
2.5
3.35
4.49
6
8
10.7
14.1
17.9

36.2
34.8
32.9
30.5
27.2
22.8
17.1
9.6
1.1

a) Calcule la velocidad especifica de crecimiento ( max).

b) Calcule el rendimiento global (Yx/s).
c) Si durante el cultivo se determina una produccin global de 606 milimoles por litro
de CO2, verifique si en estas condiciones de crecimiento el microorganismo genera
algn producto.
Rtas.: max=0.29 h-1; Yx/s= 0.46 g/g; No se forma producto.
2) En un experimento de laboratorio se inocularon diferentes medios de cultivo con
una suspensin de una bacteria aerobia facultativa (E. coli). El medio sinttico
empleado en todos los casos contiene la misma concentracin de sales y fuente
nitrogenada. Las diferencias existentes entre los mismos se observan en la siguiente
tabla:
Medio de
cultivo

S0

A
B
C
D
E

5
10
20
10
10

pH
Volumen (ml) de medio
(constante) de cultivo en frascos de
1l.
7,0
100
7,0
100
7,0
100
3,0
100
7,0
300

Los resultados obtenidos se indican en el siguiente grfico:

Log X

Tiempo

Indique a qu tratamientos de la tabla le corresponde cada una de las curvas

obtenidas. Justifique sus respuestas.
3) Se crece un microorganismo en tanque agitado de 2 litros de volumen til a una
temperatura de 28 C. A las 10 horas de cultivo se agota la fuente de C y Energa.
Cul deber ser la concentracin inicial de sustrato limitante?
Datos:
tlag= 0 horas
Yx/s=0.47 g sust/g biom
max=0.23 h-1
Xo=0.2g/L
Rtas: Xf= 2 g/L; Sr= 3.8 g/L
4) Cultivando un microorganismo aerobio estricto en batch se obtuvo la siguiente
tabla de valores para las horas iniciales del proceso:
Tiempo
(h)
1
2
3
4
5

X
(g/l)
0.257
0.392
0.424
0.544
0.698

Se emple un medio de cultivo sinttico con la fuente de C como sustrato limitante a

una concentracin inicial de 14.8 g/L. Se inocul el reactor a razn del 10 % del
volumen con un cultivo cuya biomasa final haba sido 2.3 g/L
Calcular:
max y tg
a)
Hubo fase lag ? Si la hubo, cul fue su duracin?
b)
Si el rendimiento celular fue de 0.45 g biomasa / g sustrato, cul fue la
c)
concentracin celular mxima alcanzada y en qu momento se obtuvo?
Rta: max=0.25 h-1; tg = 2.77 h; to=0.55 ; , Xf=6.9; tnec=14.15 h.

5) Una bacteria se cultiva en batch en un medio conteniendo glicerol y NH 3. El

rendimiento celular es 0.50 g biomasa / g glicerol y el max = 0.32 h-1.
a) Calcule la concentracin mxima de biomasa y el tiempo de cultivo en que se
alcanza dicha biomasa.
b) Cul es en ese instante la demanda de O2 del cultivo?
Datos:
So = 8 g/L
Yx/o = 0.89 g biomasa / g O2
t lag = 1.5 horas
Xo = 0.3 g/L
Rta: Xf=4.3 g/L,
t=9.8h,
rO2= 1.55 gO2/L.h
6) Se desea cultivar un microorganismo aerbico estricto en erlenmeyers agitados,
utilizando un medio de cultivo a base de suero de leche cuya concentracin de
lactosa es de 4% (P/V). El KLa de los erlenmeyers es de 100 h-1. Experiencias en
tanques agitados mecnicamente dieron los siguientes resultados:
t (h)
0
2
4
6
8
10
12
14

x (g/l)
1,0
1,1
1,4
2,8
5,6
11,2
19,1
19,1

lactosa (g/l)
40,0
40,0
39,2
36,0
29,7
17,3
0,1
0,0

El consumo total de O2 fue de 20 g/l. El Cc para este microorganismo es de 1 mg/l

y en las condiciones de cultivo C* = 7,5 mg O2/l.
Qu dilucin habr que efectuar al medio original para realizar el cultivo en
erlenmeyer comenzando el cultivo con una biomasa inicial de 0,5 g/l?
7) Un biorreactor de laboratorio que contiene un medio sinttico con glucosa como
sustrato limitante, fue sembrado con un microorganismo aerbico estricto de
composicin estndar. Desde el inicio del cultivo el crecimiento del microorganismo
estuvo limitado por O2.
Teniendo en cuenta que el Kla del biorreactor vara segn la expresin:
log Kla = -3,4 + 2,1 log rpm (este equipo puede regular la velocidad de
agitacin entre 0 y 1000 rpm), se pudo establecer que el K La utilizado fue de 247 h-1.
Si se pudo medir un desprendimiento de calor equivalente a 1495,8 cal/g de
fuente de carbono y energa:
a) Cul fue la concentracin de glucosa utilizada en la formulacin del medio de
cultivo, si sta se agot a las 15 h de proceso?
b) Entre qu valores vari si la biomasa final fue de 35 g/l?

c) Suponiendo que el mayor valor de calculado coincidiera con m , qu Kla tendra

que haberse usado para lograr que todo el cultivo transcurriera en fase exponencial,
si lo ideal para este microorganismo es que el O 2 disuelto no baje del 10 % del de
saturacin C* = 7,5 mg O2/l?
d) De querer realizar el cultivo sin limitacin de O 2, se podra utilizar el equipo
descripto? Justifique su respuesta.
8) Una levadura aerbica estricta se utilizar para estimar el K la de un reactor tipo
tanque agitado. La estrategia del clculo es promover un crecimiento limitado en O 2
de manera que la velocidad de crecimiento est determinada por la velocidad de
suministro de O2 en el tanque. Plantee una ecuacin de balance en fase gaseosa a
rx = cte. para el cultivo limitado en O 2 que permita calcular el Kla. Considere
mantenimiento despreciable.
Aplique la ecuacin a un proceso donde se hace crecer exponencialmente una
levadura con m = 0,45 h-1 hasta alcanzar una concentracin de biomasa de 5,03 g/l
a partir de la cual el cultivo se vuelve limitado en 0 2. Cul es el Kla del reactor?
Fuente de Carbono: Sacarosa
Biomasa estndar (x = 4,2), yx/s = 0,43
C* = 0,25 mmol O2/l