1

Explicar como se lleva a cabo la sntesis de la

molcula de ARN, a partir de la informacin
contenida en el ADN (transcripcin) tanto en
procariotes como en eucariotes

Biosntesis del ARN: ARN-polimerasa,

ARN-dirigida tanto en eucariotas como en
procariotas

Inhibidores de la sntesis de ARN. Modo de

accin.

1.

2.

GEN

Recordando conceptos

Tipos de ARN
ARNhn o Heterogneo Nuclear
ARNm o Mensajero
ARNt o de Transferencia
ARNr o Ribosomal

3.

Celular Procariotas
4. Clulas Eucariotas

Cmo puede el
ADN estando dentro
del ncleo, dirigir la
sntesis de protenas
fuera del mismo?

DOGMA CENTRAL DE LA GENTICA MOLECULAR

Basado: Biologa M.-Jos Luque

NCLEO

ADN

MITOCONDRIA
ADN

Protenas de
membrana y de
secrecin

Transcripcin

(un cromosoma)

Transcripcin
3 Pre-ARNs

Pre-ARNs (transcritos primarios)

Maduracin
postranscripcional

(transcritos primarios)

Maduracin
postranscripcional

Protenas
nucleares

3 7 ARN
maduros

ARNs maduros

ARNr-mt ARNt-mt ARNm-mt

Protenas
de otros
orgnulos

ARNr ARNt ARNm

Protenas
citoslicas

Traduccin

Polipptidos

Maduracin
postranscripcional

Protenas

Protenas de
mitocondriales

Traduccin
13 protenas

Proceso encargado en la Sntesis de ARN

basado en informacin contenida en el ADN.

Secuencia molde:
Informacin gentica contenida en la
regin codificante de un

DNA

Cadena de RNA con secuencia de

bases complementaria a la de las
cadenas del DNA
Principios de Bioqumica-Lehninger

-1

+1

+2

+3

+4

+5

3
Hebra No -Molde

Codificante

Hebra Molde

No
Codificante

3
P

OH

ARN
Polimerasa

OH

P
P
Basado: Biologa M.-Jos Luque

Hebra No -Molde

ADN
Hebra Molde

ARN con sentido

+
Direccin de la sntesis de ARN: 5- 3

Principios de Bioqumica-Lehninger

 Requiere una estructura desenrollada

(fibras de 10)
INTERFASE (Mayor accesabilidad)

Carcter asimtrico: No se
produce de forma simultnea en
las dos hebras
Cada RNA se transcribe a
partir de una sola hebra de DNA
La transcripcin es independiente
para cada gen

Orientacin de la secuencia: 5 - 3

Carcter asimtrico
La informacin para la sntesis de los distintos ARNs de la clula est
repartida entre ambas hebras del ADN.

* Genes solapantes: comparten una misma regin de ADN,

codificados en hebras distintas o la misma hebra.
Biologa M.-Jos Luque

DIRIGIDA POR ADN

n ATP + nGTP + nCTP + nUTP

ADN molde

ARN + (n + n + n + n) PPi

G= -9 KJ/mol ( - 2,6 kcal/mol)

El mRNA resultante de la
transcripcin ya es funcional

Es necesaria la maduracin
postranscripcional

Asociacin espacial y temporal entre

transcripcin y traduccin

Separacin espacial y temporal entre

transcripcin y traduccin

Menor complejidad

Regulacin ms compleja de la
expresin gnica

Protena
naciente
RNA transcrito - mRNA

Biologa M.-Jos Luque

Solo se transcribe 35 % del

genoma

Una sola ARN polimerasa

Tres ARN polimerasas diferentes:

ARNpol: sintetiza ARNr,

ARNm y ARNt mitocondriales
o cloroplsticos.

ARNpol-I (Nucleolo): sintetiza

pre-ARN grande
(28 S, 18 S y 5,8 S)
ARNpol-II (Nucleoplasma):
sintetiza ARNhn (ARNm)
ARNpol-III (Nucleoplasma):
sintetiza pre-ARNt y pre-ARNr
pequeo (5 S)

Secuencia de ADN a ser

transcrita (Hebra molde)

Regin
promotora

Promotor
Terminador
Unidad de
Transcripcin
gen a transcribir

Regin de
terminacin

Doble hebra de
ADN

Procariotas

Opern

Biologa M.-Jos Luque

Se pueden diferenciar tres etapas:

Iniciacin
Elongacin
Terminacin
Biologa M.-Jos Luque

Regin promotora

Separacin de las hebras de DNA en

un pequeo tramo cercano a la
secuencia promotora

Reconocimiento
ARNpol

Factores de Transcripcin

Burbuja de
Transcripcin
Inicio de la sntesis
Unin de Factores de Transcripcin (FT)
a las regiones promotoras del DNA e
incorporacin de la RNApol

Complejo de
Iniciacin

ARN
naciente

Procariotas: Un mismo promotor inicia la

cotranscripcin de varios genes.

PPi
ATP, GTP, CTP, UTP

Eucariotas: cada promotor solo

transcribe un gen.
Basado: Biologa M.-Jos Luque

Estos Promotores presentan secuencias consenso:

Procariota:

Eucariota:

(5) TATAAT (3)

(5) TTGACA (3)

(5) TATA (3)

Varias
Secuencias
reguladoras

Requieren de la ARN
polimerasa completa y
factores de transcripcin
Formacin de Complejos:
Complejo Cerrado:
ARNpol + Promotor + ADN intacto
Complejo Abierto:
ARNpol + Promotor + ADN
desenrollado

Sujeta a regulacin

Burbuja de transcripcin

Hebra no
templante

ARN
Polimerasa

Rebobinando

Cadena
molde
Sitio Activo

Direccin de la transcripcin

Principios de Bioqumica-Lehninger

Dos ribonucletidos forman el enlace fosfodister

inicial apareados con
+1 y +2 de la hebra molde de DNA
pppN
pppA
+
Ribonuclesidonucletido (ATP)
trifosfato (NTP)
acta como cebador,
nucletido de la
Se aparea con T en +1
posicin +2 de la
de la hebra molde del
hebra molde
DNA
+1 +2

Extremo 5 del RNA

naciente

pppApN
+
RNA de dos
nucletidos
con tri-p en su
extremo 5, unido
a la hebra molde

PPi
2Pi

+10

DNA

RNA
La reaccin se repite sobre el
extremo 3 del dinucletido hasta
unir unas 10 bases

La RNApol se libera del promotor y de los

FT y comienza a desplazarse por la hebra
molde en sentido 3 - 5
Basado: Biologa M.-Jos Luque

PROCARIOTAS (E.Coli)
Regin
Promotora
Elemento UP

Principios de Bioqumica-Lehninger

Se extiende desde
-70 a +30
Secuencia
Consenso

Liberacin del promotor

PROCARIOTAS:
Disociacin de la subunidad de la holoenzima RNApol
RNA polimerasa
completa
(holoenzima)
de E. coli

DNA
Iniciacin
Elongacin

ncleo de la
RNA polimerasa
(enzima mnima)

Subunidad o de la RNA polimerasa

(36.5 kDa) ensambla la enzima mnima- unin a

reguladores
(151 kDa) polimerasa (sitio cataltico)
(155 kDa) se une al ADN molde
(11 kDa)
(70 kDa) reconoce promotor- inicia la sntesis

Basado: Biologa M.-Jos Luque

EUCARIOTAS:
Fosforilacin del dominio carboxilo-terminal

(CTD) de la ARNpol-II por el TFIIH

Protenas de
Transcripcin (Iniciacin)

Funciones

TBP

Protena de unin a TATA

TFIIB

Se une a su vez a TBP y al ADN

TFIIA

Estabiliza el complejo TFIIB-TBP

TFIIF

Dirigir a la Pol II hacia sus promotores, y reducir la unin

de la polimerasa a sitios no especficos.

TFIIE

Recluta TFIIH.
Completa el Complejo Cerrado

TFIIH

Posee actividad ADN helicasa (desenrolla el ADN)

Fosforila los dominios CTD
Principios de Bioqumica-Lehninger

Principios de Bioqumica-Lehninger

 La burbuja de transcripcin
se desplaza por el DNA y la
RNApol continua alargando
la cadena de RNA

Rebobinado
(Re-enrollamiento)

Avance de la burbuja

3
3

Complejo de
Elongacin
- ADN abierto
- ARNpol
- ARN naciente

5
5

ARN
creciendo

Desenrollamiento
PPi

Fosforilacin del
dominio CTD de la
ARNpol-II

ATP, GTP, CTP, UTP

La tensin es liberada por

las topoisomerasas
3

La polimerasa alarga el RNA

aadiendo nucletidos al
extremo 3 del RNA naciente

5
PPi
ATP, GTP, CTP, UTP
Basado: Biologa M.-Jos Luque

Por delante de la polimerasa se separan las hebras de DNA

(avance de la burbuja).

La polimerasa
alarga el RNA
aadiendo
nucletidos al
extremo 3 del
RNA naciente

Avance de la burbuja

3
3
5

3
5
PPi
ATP, GTP, CTP, UTP

Por detrs de la polimerasa, la cadena de RNA nuevo se va separando de la

hebra molde de DNA y sale de la burbuja.
Las dos hebras de DNA se aparean de nuevo y se produce el re-enrollamiento
Basado: Biologa M.-Jos Luque

Protenas de
Transcripcin
(Elongacin)
PTEFb
SII
FIIF
SIII(elonguina)
ELL

Basado: Biologa M.-Jos Luque

Funciones

Evitan la terminacin prematura

de la elongacin
Aumentan la velocidad de la
elongacin al suprimir las pausas
transitorias

Al alcanzar la secuencia de terminacin, la RNApol interrumpe la sntesis de

RNA y se separa del DNA
Regin de
terminacin
3
5
PPi
ATP, GTP, CTP, UTP

ARN polimerasa

ARN terminado
(transcrito primario)

P
Basado: Biologa M.-Jos Luque

PROCARIOTAS (E.Coli)
Independiente de
(rho)

Presencia en el RNA de
un punto de terminacin
(secuencia palindrmica),
que permite la formacin
de una estructura en
horquilla.

Serie muy conservada

de residuos de A en la
hebra molde que se
transcriben a residuos de
U.
Basado: Biologa M.-Jos Luque

PROCARIOTAS (E.Coli)
Posee actividad DNA/RNADependiente de
helicasa y ATPasa dependiente
(rho)
de RNA
Presencia en el RNA de otra secuencia especifica.
Situada en el RNA formado y fuera de la burbuja, interacciona con una
protena llamada .
Una vez unida empieza a desplazarse sobre el RNA en sentido 3 hasta
alcanzar el complejo de elongacin, en este contacto provoca la
desnaturalizacin liberando el RNA e interrumpiendo la transcripcin.
ARNpol
5

proteina p

ARNpol

ADN
ARN
terminado

protena p
(hexmero)
ATP

ADP-P

ARN
ADN
Basado: Biologa M.-Jos Luque

EUCARIOTAS
Consecuencia de la combinacin de dos factores:
Detencin o Pausa de la ARNpol
Desestabilizacin del hbrido ARN-ADN

Terminacin en
ARNpol-I
Una protena pausa o
protena terminadora se
une a secuencias especficas
del DNA y detiene el avance
de la RNApol

Una vez detenida la pol, la

presencia de una regin rica
en T en la hebra no molde
facilita la separacin del
RNAr

No hay regin palindrmica

RNApol-1

(pausa)
5

Protena
terminadora:
Reblp en levadura,
TTF-1 en ratn, similar en humanos

Basado: Biologa M.-Jos Luque

EUCARIOTAS
Terminacin en
ARNpol-II
En mltiples sitios dentro de una amplia regin de terminacin la
RNApol se detiene, lo que puede deberse a secuencias especificas en el
DNA o a protenas de pausa que se unen al DNA
Una protena similar a , se une al RNAhn induciendo su separacin

RNApol-II
5

protena
similar a p

Posible protena
terminadora
(no identificada)
Basado: Biologa M.-Jos Luque

EUCARIOTAS
Terminacin en
ARNpol-III
La RNApol se detiene en secuencias especificas del DNA
Una vez detenida la presencia de una regin rica en T en la hebra no
molde facilita la separacin del ARNt
RNApol-III
5

5
Basado: Biologa M.-Jos Luque

Requiere la presencia del factor de transcripcin mtTFA

3 regiones promotoras (bucle D)

promotor secundario de
la hebra pesada

Promotor principal de la
hebra pesada

Dos para la hebra

pesada (H1 y H2)

o bien
ADN
(H+L)

Completado el
transcrito L
corto

ADN mitocondrial

Completado
el transcrito
L2 Largo

+
Transcrito L

ADN
(H+L)

+
Transcrito L

transcripcin
de la hebra
pesada
Para simplificar, se consigue la separacin de las hebras de ADN en la burbuja de
transcripcin y se representa la cadena de ARN junto a la de ADN aunque ya no
estn apareadas

H
(hebra pesada)
H
(hebra ligera)

transcripcin
de la hebra
ligera

Uno para la ligera

(L)

promotor de la
hebra ligera

Promotor de la
hebra ligera

ADN
(H-L)

transcrito H
en elongacin

Completado el
transcrito H

+
Transcrito II

La mitocondria sintetiza una mayor cantidad

de RNAs ribosmicos

Basado: Biologa M.-Jos Luque

Actinomicina D

Daunomicina y derivados

Deforma el ADN,
impide la formacin de
complejos abiertos y la
interaccin de todas las
ARNpol

Usado en
Quimioterapia,
actan sobre
clulas en
crecimiento rpido

Antibiticos
de Tipo II
Acridina y derivados

Efecto similar a
Antinomicina D

Inhibidores indirectos
Se unen al DNA
impidiendo la unin o el
avance de la polimerasa

Bromuro de etidio
Colorante txico de ADN
usado en laboratorio.
Acta como intercalante
doxorrubicina o adriamicina

acridina

Basado: Biologa M.-Jos Luque

Antibiticos de Tipo III

Inhibidores indirectos
Impiden la accin de la DNA girasa procaritica
Cumermicina
Novobiocina
cumermicina A1

Acido nalidxico
novobiocina

cido nalidixico

Basado: Biologa M.-Jos Luque

REPLICACIN

TRANSCRIPCIN

Se copia el cromosoma entero

Es mas selectiva (codifica un gen

especfico)

Necesita un ARN cebador

No es autoiniciadora

No requiere cebador.
Es autoiniciadora

Utiliza dNTPs

Utiliza NTPs

Las dos hebras actan como

molde simultneamente

Las dos hebras pueden actuar

como molde del RNA, pero no
simultneamente

Los apareamientos entre las

bases son definitivos

Los apareamientos son

temporales