CAPTULO 6

LAS ENZIMAS
6.1 INTRODUCCIN
Dentro de las protenas que han alcanzado un mayor desarrollo y especializacin
en cuanto a su funcin se encuentran las enzimas. Las enzimas son
biomolculas proteicas altamente especializadas como catalizadores con lo cual
participan de manera destacada en todos los procesos metablicos que tienen
lugar en los organismo vivos, son, por tanto, biocatalizadores. El trmino enzima
viene de "En - zima" es decir, en la levadura, pues fue primeramente en las
levaduras que fermentaban los azcares para producir el alcohol donde se
estudiaron estas sustancias. Producto de ello se conocan antiguamente como
fermentos.
La mayor parte de las sustancias orgnicas existentes en los animales y
vegetales son estables a temperaturas ordinarias y si se alteran algo, lo hacen
lentamente; pero esas mismas sustancias se transforman rpidamente al
ponerse en contacto con las enzimas, descomponindose gradualmente en otras
ms sencillas y, por ltimo, en anhdrido carbnico y agua por oxidacin, o sirven,
por el contrario como sillares constitutivos por la integracin de molculas de
mayor peso y complejidad.
La catlisis es la aceleracin de un proceso qumico que transcurre lentamente
en las condiciones normales. Quiere esto decir que las enzimas; como
catalizadores que son, catalizan reacciones posibles, las cuales transcurren aun
en ausencia de ellas, pero muy lentamente. Esto es muy importante y no debe
perderse de vista, pues nos explica que las reacciones que ocurren en el
organismo viviente son reacciones lgicas que siguen y cumplen todas las leyes
qumicas.
La actividad cataltica en la enzima recae en la parte proteica. En su constitucin
qumica algunas enzimas requieren de metales (zinc, cobre, molibdeno,
magnesio, etc.) para realizar su accin. A veces algunas enzimas presentan
grupos prostticos (no proteico) tales como hemoporfirinas u otros compuestos
y muy frecuentemente requieren de coenzimas como elementos funcionales
encargados de actuar como donadores o aceptadores de tomos o grupos de
tomos. Las coenzimas son compuestos formados en el metabolismo
principalmente a partir de vitaminas. La separacin entre vitamina y coenzima a
veces es muy difcil de determinar. La vitamina es un factor nutricional, mientras
que la coenzima es un factor metablico formado a partir, generalmente, de una
vitamina.
La unin entre la apoenzima y la coenzima puede ser muy variada, desde una
unin muy estrecha, hasta una separacin total. La parte proteica es la
responsable de la actividad enzimatica que se pierde al ser destruida ya sea por
calentamiento o por desnaturalizacin. La coenzima muchas veces constituye la
parte funcional. Tambin existen enzimas que no poseen coenzimas.
La constitucin qumica de la apoenzima es similar a la ya sealada para las
protenas poseyendo todas las propiedades inherentes a las mismas, tambin
con su estructura primaria, secundaria y terciaria.

La sustancia que se transforma se llama de manera general sustrato de la

correspondiente enzima. En la molcula del sustrato se presentan
modificaciones en las afinidades entre determinados tomos, de tal modo que
puede tener lugar una reaccin qumica.
Segn la actividad cataltica de la enzima que entra en combinacin con el
sustrato puede originarse reacciones muy distintas con un mismo sustrato. Un
ejemplo de esto ltimo es el siguiente; si un alfa aminocido reacciona con el alfa
aminocido oxidasa, se origina el correspondiente alfa cetocido, por el
contrario, si reacciona con una descarboxilasa, entonces se separa el grupo
carboxlico originndose una amina con un tomo de carbono menos.
En los ltimos aos se ha logrado la obtencin al estado puro de diversas
enzimas. Un primer ejemplo de una enzima pura cristalizada fue la ureasa, luego
sigui la obtencin de diversas enzimas digestivas y, finalmente, toda una serie
de enzimas que participan en procesos oxidativos o en distintas reacciones.
Todas estas sustancias revelaban en su anlisis qumico que se trataban de
protenas.
La parte proteica de la enzima recibe el nombre de apoenzima y el grupo
prosttico coenzima, formando el conjunto a la coenzima propiamente dicha,
tambin llamada holoenzima.
En las protenas de carcter enzimatico se presenta siempre en su estructura
terciaria determinadas zonas o regiones encargadas de "reconocer" y unirse con
el sustrato, que recibe el nombre de centro activo. El centro activo se caracteriza
por poseer en su conformacin tridimensional determinados radicales que se
complementan con el sustrato. Adems del carcter hidrofbico o no de
determinada zona es determinante en su unin con el sustrato. En la figura 6.1
se representa esquemticamente la unin de la lisina de un resto polipeptdico
con la tripsina; enzima de carcter proteoltico capaz de hidrolizar el enlace
peptdico.

La accin de las enzimas puede ser estrictamente especfica para un sustrato de

constitucin establecida. Ejemplo de una enzima con especificidad absoluta la
tenemos en la arginasa, que solo ataca a la arginina; la ureasa solo reacciona
con la urea; sus efectos son nulos con los derivados de sta. Se da el caso de
enzimas que se muestran activas con algunos esteroismeros, pero no ante
otros.
Numerosas enzimas estn capacitadas para actuar sobre sustratos de anloga
constitucin, por ello se les atribuye especificidad de grupo.
La especificidad de las acciones
fundamentalmente por la estructura.

enzimticas

est

condicionada

Generalmente tambin las enzimas presentan especificidad ptica, por lo cual

slo actan frente a un ismero ptico, as, la maltasa cataliza la hidrlisis de las
uniones alfa, pero no la beta; igualmente, la mayora acta sobre los aminocidos
de la serie L.
Recientemente se ha comprobado la existencia de enzimas, sobretodo en
sistemas multienzimticos, que adems de poseer el centro activo que fija el
sustrato, poseen otro sitio, llamado sitio alostrico. A estas enzimas se les llama
enzimas alostricas. El trmino alostrico significa "otro espacio". Estas enzimas
son capaces de fijar determinados productos, llamados " modulador alostrico",
por el sitio alostrico lo que a su vez modificara la estructura del centro activo
hacindolo ms adecuado, o, en otro caso, inadecuado para su unin con el
sustrato normal. El sitio alostrico es, en general, tan especfico para la unin
con el modulador como el centro activo para el sustrato. El carcter estimulador
o por el contrario inhibidor del modulador actuara en gran medida en la
regulacin de la actividad de la enzima.
La unin de la enzima (E) con el sustrato (S) para formar el complejo enzima sustrato se verifica por un mecanismo de "encaje inducido" dado por la
complementacin existente entre el centro activo y el sustrato. En esto
intervienen radicales de los aminocidos, a veces muy distantes en su estructura
primaria, pero cercanos a la estructura terciaria de la enzima. Los radicales de la
histidina, el cido glutmico, la cisteina, la serina y otros ms son muy
importantes en esta accin. Entre estos radicales y el sustrato se presentan
interacciones fsico -qumicas que determinan la formacin del complejo enzima
- sustrato y que posibilitan la reaccin enzimtica. La estructura del centro activo
no es rgida, sino que puede sufrir determinados desplazamientos que permiten
la unin ms estrecha entre el sustrato y la enzima.
6.2

MECANISMO DE LA ACCIN ENZIMTICA

El carcter excepcional de las enzimas como catalizador est dado

principalmente por la especificidad de unin al sustrato, combinado con la
disposicin ptima de los grupos catalticos. Es decir el centro activo posee
grupos catalticos y grupos fijadores del sustrato que permiten que la reaccin
se incremente considerablemente. Un catalizador acta disminuyendo la energa
libre de activacin mediante una va que estabiliza el estado de transicin.
Una reaccin catalizada por un catalizador no enzimatico es una reaccin
intermolecular, mientras la reaccin enzimtica es intramolecular.

Esto se debe a que entre enzima (E) y sustrato (S) se establece una relacin
muy estrecha formando un complejo llamado Enzima-Sustrato (E - S)
posibilitando la formacin de un compuesto de transicin (CT) activado que
permite la reaccin y la transformacin del sustrato en producto (P). Los estados
de este proceso seran:

Trataremos a continuacin de explicar como las enzimas son capaces de actuar

sobre un sustrato produciendo determinada reaccin, tan eficazmente, que
superan en mucho al mejor catalizador producido por el hombre. Adems, todo
esto lo hacen en soluciones diluidas, a pH biolgicos y a temperatura moderada
que son las condiciones prevalecientes a nivel celular.
El primer aspecto a considerar es que las enzimas, al igual que todos los
catalizadores, catalizan reacciones posibles desde el punto de vista energtico.
Quiere esto decir que las enzimas catalizan reacciones que pueden ocurrir en
ausencia de ellas.
Una reaccin qumica, donde el sustrato (S) se transforma en un producto (P)
tiene lugar porque cierta cantidad de molculas del sustrato poseen la suficiente
energa como para pasar a un estado de transicin donde es muy probable que
se produzca una reaccin, con modificaciones en determinados enlaces, que
conduzcan a la formacin de otro compuesto, en este caso llamado producto (P).
La energa necesaria para que un sustrato alcance su estado de transicin y que
le permita reaccionar posteriormente es llamada energa de activacin (Ea)
En condiciones no enzimticas, para que se produzca la reaccin debe
suministrarse esta energa por factores presentes en el medio, bien por
colisiones en otras molculas o por medio de la energa calrica o cintica de
otros productos; la energa de activacin debe ser, en estos casos, la suficiente
para producir el cambio que permita la reaccin. En condiciones enzimticas,
debido a la afinidad estructural entre sustrato y enzima se produce la unin entre
ellos, de manera que disminuye considerablemente la cantidad de energa de
activacin necesaria para ello; en esto consiste el mecanismo de accin de las
enzimas.
En el siguiente esquema (figura 6.2) se presenta, en condiciones no enzimticas,
un sustrato que posee cierta energa (a), el cual libera su energa y pasa a un
estado inferior (b). A su vez, se presenta, en condiciones enzimticas, un
sustrato con cierta cantidad de energa (A), que tambin libera su energa
pasando a un estado inferior (B).
En condiciones enzimticas la cantidad de energa de activacin es menor que
en condiciones no enzimticas.
El por qu se produce la disminucin de la energa de activacin en condiciones
enzimticas, se explica por la unin estrecha que existe entre enzima y sustrato,
lo que permite modificar determinados enlaces con el mnimo de energa.
En ausencia de las enzimas, muchas reacciones qumicas son extremadamente
lentas, lo que no sera perceptible.

Ntese que la energa gastada para subir, es liberada en su cada; esto ilustra el
concepto de que los cambios qumicos globales en una reaccin son
independientes del camino de la reaccin.
Varios son los factores que parecen contribuir al incremento de la velocidad de
las reacciones catalizadas por enzimas. En primer lugar la enzima puede fijar el
sustrato de forma que el enlace susceptible de modificaciones se halle muy cerca
del grupo cataltico del centro activo de tal manera que el estado de transicin
sea ms factible. En segundo lugar algunas enzimas se pueden combinar con el
sustrato formando un intermediario covalente inestable. Otras enzimas pueden
proporcionar grupos funcionales aceptadores o donadores de protones
efectuando una catlisis cido - bsica y otros, por ltimo, pueden producir una
modificacin en determinados enlaces del sustrato que permitan una reaccin
ms fcil.
6.3

FACTORES QUE ACTUAN SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA.

Tres son los factores principales que pueden actuar sobre la actividad enzimtica
de modo sustancial; la concentracin de los elementos reaccionantes, el pH y la
temperatura.
6.3.1. Concentracin
Al explicar el mecanismo de la accin enzimtica qued establecido que la
enzima se une al sustrato como paso imprescindible para que ocurra la reaccin.
En toda reaccin enzimtica debemos suponer la presencia de los siguientes
estados: enzima, sustrato, complejo enzima - sustrato; complejo enzima -

compuesto de transicin, (E - CT) complejo enzima - producto y finalmente la

enzima ms el producto.
Como es lgico, en esta ecuacin los efectos de la concentracin de los distintos
miembros afectan la velocidad de la misma. Experimentalmente se ha podido
demostrar que lo que determina la velocidad de la reaccin es la disociacin del
complejo E - S en enzima y producto. Tambin se deduce que si partimos de una
cantidad constante de enzimas y vamos aumentando la concentracin del
sustrato, la enzima ir formando el complejo E - S hasta su saturacin y la
velocidad de la reaccin ir tambin aumentado, hasta el momento que se hace
mxima.
La velocidad de reaccin se mide por la presencia de los productos. Partiendo
de una concentracin de sustrato conocida y aumentando progresivamente su
concentracin, la velocidad de la reaccin se mostrar de la siguiente manera:
Primero se incrementar rpidamente, despus algo ms lento hasta alcanzar la
velocidad mxima y finalmente, si continuamos aumentando la concentracin, la
velocidad de la reaccin no se modifica.
Estos efectos han sido explicados por Michaelis y Menten al sealar la funcin
del complejo E - S dentro de la reaccin y su dependencia del grado de afinidad
enzima - sustrato pues hay enzimas de gran afinidad por su sustrato y otras de
poca.
El grado de afinidad por supuesto, condicionar la existencia del complejo E - S
y la velocidad de la reaccin.
Sobre la base de estos criterios, Michaelis estableci una constante, conocida
como constante de Michaelis (Km) que es igual a la concentracin del sustrato
con la cual alcanza la velocidad semimxima de la reaccin. Sus dimensiones
son en mol/I.
Una Km alta quiere decir que la enzima no tiene una alta afinidad por el sustrato,
mientras que una Km baja, significa gran afinidad entre enzima y sustrato. En la
figura 6.3 se relacionan estos conceptos.
Lgicamente, en todos estos casos la concentracin de la enzima permanece
constante, pues de variar sta, tambin se modifica la velocidad de la reaccin.
Al respecto hay que sealar que las enzimas realizan su accin a
concentraciones extremadamente pequeas, as, por ejemplo, una molcula de
catalasa puede descomponer aproximadamente 100 mil molculas de H O por
segundo. Se comprende tambin que el incremento de la concentracin de la
enzima aumenta la velocidad de la reaccin hasta lograr un mximo.
Por ltimo, queremos sealar que al aumentar la concentracin de los productos
de la reaccin, disminuye la velocidad de dicha reaccin.
2

Esto es muy importante, pues como todas las reacciones enzimticas estn en
cadena generalmente, donde el producto de una reaccin es el sustrato del
siguiente, la concentracin de los diferentes productos acta regulando el
proceso en su conjunto.

6.3.2. pH
La reaccin del medio es de gran importancia en toda enzima. La enzima slo
es activa en una zona determinada del pH, que vara desde 1.5 para la pepsina
hasta 8.5 - 10 para la tripsina y la fosfatasa alcalina de los mamferos.
Con esta y algunas otras excepciones, el pH ptimo de la mayora est
comprendido entre 5 y 7. La dependencia entre la eficacia enzimtica y el pH
tiene su explicacin en su naturaleza proteica.
Cuando la enzima se va alejando de su pH ptimo ya sea hacia la zona cida o
bsica, comienza a disminuir su actividad hasta que finalmente se inactiva. Esto
se explica por el hecho de su carcter proteico y la influencia del pH sobre la
estructura del centro activo de la enzima. Igualmente el pH puede influir sobre la
estructura inica del sustrato.
6.3.3. Temperatura
La velocidad de casi todas las reacciones qumicas, catalticas o no, aumenta
con la temperatura. Las reacciones catalizadas por enzimas obedecen tambin
a esta ley cintica general, pero con alguna salvedad. La elevacin de la
temperatura estimula la accin enzimtica hasta cierto grado (temperatura
ptima), cercana al de los animales de sangre caliente, pasado el cual se debilita
y hasta es destruida, dado el carcter termolbil de la enzima.
Esta inactivacin de la enzima est ligada a su naturaleza proteica y a su estado
coloidal (desnaturalizacin y en cierto caso coagulacin). En la figura 6,4 se
puede observar esta dependencia.

Como se seala en la curva, para los animales homeotrmicos, la temperatura

ptima es de 37 a 40 C. Cuando sigue incrementndose la temperatura,
comienza el proceso de desnaturalizacin, con perdida de las estructuras
secundaria y terciaria y, paralelamente, la prdida de la actividad.
6.4. MODIFICACIONES DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
Adems de los factores principales antes sealados hay un gran nmero de
elementos que pueden afectar la actividad enzimtica; as, la actividad cataltica
puede ser modificada por pequeas molculas, que pueden actuar negativa o
positivamente en la actividad enzimatica; entre los principales tenemos los
siguientes:
6.4.1

Activadores metlicos

La mayora de los iones metlicos actan como activadores de la actividad

enzimtica; estos incluyen los micro elementos y algunos macro elementos. As,
el Cu, Fe, Mg, Ca, Zn, Mo, K, Na y otros, realizan esta funcin. En la actividad
enzimtica, la funcin de los minerales se explica por varios mecanismos: unos
participan directamente en la catlisis experimentando un cambio de valencia en
el proceso de oxidacin reduccin; otros se combinan con el sustrato, con lo cual
forman un complejo metal - sustrato que es el verdadero sustrato para la enzima;
por ejemplo, el Mg y el ATP, donde Mg - ATP es en verdad el sustrato para la
transfosforilasa. Tambin puede unirse a la enzima, formando un complejo metal
- enzima que puede ser de la forma activa o a la inversa.
As mismo, los metales pueden variar las constantes de equilibrio de las
reacciones enzimticas, desplazndolas hacia un lado o hacia el otro, o cambiar
la forma de la parte proteica de la enzima al unirse con un punto alejado de los
centros activos, pero que al modificar la estructura terciaria, cambiara la accin
de la misma.
6.4.2

Inhibidores competitivos

La inhibicin competitiva clsica se produce por analoga del sustrato normal de

la enzima, por lo que sucede la unin del inhibidor con la enzima, formando un
complejo inhibidor - enzima; esta reaccin es irreversible y el factor
concentracin es muy importante para producir la inhibicin total o no de la
reaccin. Uno de los casos ms conocidos es la inhibicin de la
deshidrogenacin del cido succnico por la succnico - deshidrogenasa, por
medio del cido malnico:

Los inhibidores competitivos presentan un gran uso en la prctica mdica, por

cuanto bloquean la accin enzimtica en microorganismos, ya sean bacterias o
parsitos, provocan el no desarrollo y reproduccin de los mismos. En la prctica,
son potentes quimioterpicos.
La inhibicin del cido (P) aminobenzoico (PABA) por las sulfonamidas, es
ampliamente conocido. Las bacterias requieren PABA para formar cido flico,
vitamina del complejo B; la sustitucin por las sulfamidas es fatal para ellas (ver
figura 6.5).

6.4.3.

Inhibidores no competitivos

La inhibicin no competitiva se produce por productos que no presentan analoga

estructural con el sustrato normal de la enzima. La inhibicin no competitiva
puede ser reversible e irreversible.
La inhibicin no competitiva reversible se presenta cuando un producto inhibidor
se une con la enzima libre o con el complejo enzima-sustrato interfiriendo la
accin de ambos.

El tipo ms comn es de los agentes que puede combinarse reversiblemente con

algn grupo funcional de la enzima, que aunque no est en el centro activo es
fundamental para mantener la estructura terciaria de la enzima.
Se destaca dentro de esto la inhibicin de los grupos -SH de algunas enzimas
por metales pesados como el Hg y el Ag. A veces, como es el caso del EDTA
(tetra-acetato de etilendiamina), el agente se une a iones metlicos como el
Hg, Ag y el Mg y Ca que son imprescindibles para la actividad de la enzima.
La inhibicin no competitiva irreversible se produce cuando los agentes
inhibidores modifican covalentemente los grupos activos de la enzima. Entre los
fundamentales se destaca el iodoacetato que es capaz de modificar los restos
de histidina en la molcula de la enzima.
Un agente de esta tipo muy importante es el caso de los rgano fosforados tales
como el fluorofosfato de diisopropilo que fosforilan los restos de serina de la
molcula de la enzima inhibiendo su actividad. Estos productos son llamados
venenos nerviosos y su accin se realiza sobre la acetil colinesterasa que acta
desdoblando la acetl colina. Muchos de estos productos se emplean como
insecticidas.
6.4.4. Modificadores Alostricos
Los modificadores alostricos son compuestos generalmente producidos por las
mismas clulas dentro de su metabolismo normal, que son capaces de unirse
por el sitio alostrico de las enzimas que poseen dichos sitios, lo cual conlleva la
modificacin consecuente del centro activo. Esta modificacin puede tener dos
consecuencias: puede hacerlo ms favorable en su unin con el sustrato normal
de la enzima o, por el contrario, la modificacin puede producir la imposibilidad
de la unin del sustrato con la enzima.
En el primer caso estamos en presencia de un activador alostrico y en el
segundo caso de un inhibidor alostrico, los modificadores alostricos presentan
una importancia de primer orden por cuanto pueden actuar como reguladores
normales del flujo de metabolitos en las reacciones en cadenas o en los ciclos
metablicos. En la figura 6.6 se muestra un esquema sobre una seccin de una
enzima donde puede verse el efecto de un inhibidor alostrico. Se observa el
centro activo de la enzima en este caso modificado de manera negativa.
La introduccin del modificador alostrico puede modificar el centro activo de
manera que sea ms favorable para la unin de este con un sustrato normal, de
forma que en este caso se favorecera la unin enzima-sustrato, realizando la
funcin de activador alostrico.
Existen, en el metabolismo, compuestos que pueden actuar sobre una enzima
como activador alostrico y sobre otra como inhibidor alostrico.
En la parte correspondiente al papel de las enzimas como reguladores del
metabolismo volveremos a tratar este aspecto.

6.4.5. Enzimas activadoras e inactivadoras.

Adems de los aspectos sealados existen algunas enzimas que presentan
formas activas e inactivas las que pueden nter convertirse unas en otras. Lo
curioso del caso es que esta nter conversin la realiza a su vez otra enzima.
Generalmente el mecanismo es por incorporacin o eliminacin del cido
fosfrico a restos de serina de la molcula de la enzima. En el metabolismo del
glucgeno tendremos oportunidad de profundizar ms en este proceso.
6.5. PAPEL DE LAS ENZIMAS EN LA REGULACIN DEL METABOLISMO
Para que la vida pueda seguir de una forma ordenada, el flujo de metabolitos por
las rutas de sntesis o de degradacin debe ser regulado dentro de las clulas y
perfectamente coordinados a corto y largo plazos. La regulacin se obtiene,
finalmente, despus de pasar por la regulacin gentica, por sntesis o no de las
protenas enzimticas y por el control de la velocidad de las reacciones. Ya vimos
que la velocidad de reaccin est relacionada con varios factores
(concentraciones, pH, temperatura, inhibidores, activadores etc.) y por la
velocidad de sntesis de las enzimas, que depende de los mecanismos de
represin o de induccin.
Dentro de todo esto, la regulacin alostrica presenta gran significacin; as, la
va metablica de una sustancia A puede pasar sucesivamente por B, C, D, E,
catalizada por varias enzimas, y el producto final F puede actuar inhibiendo
alostricamente la enzima que acta en el cambio de A en B, por lo que se regula
todo el proceso.
Estos mecanismos pueden estar sumamente ramificados y relacionados entre s
con varas vas metablicas establecindose un complejo mecanismo de
regulacin.
A manera de ejemplo, y como caso hipottico, mostramos en la figura 6.7 como
F puede a que vez activar la enzima de otra cadena de reacciones, al mismo
tiempo que inhibe la reaccin inicial.

La sntesis de las enzimas ocurre por mecanismos iguales a las sntesis de

protenas. Es dirigida por los cidos nucleicos, por medio de un complejo
mecanismo de regulacin, de forma que los cambios producidos en la estructura
del gen pueden provocar modificaciones en la estructura primaria de la enzima
e inclusive su ausencia.
Como resultado, a veces surge un defecto metablico transmisible, o
"enfermedades" moleculares que se manifiestan por la imposibilidad de
metabolizar un compuesto, con la correspondiente acumulacin o eliminacin
del agente normal. En el metabolismo podemos ver algunos de estos "errores"
metablicos.
6.6. CLASIFICACIN
Atendiendo al modo de accin, las enzimas se clasifican en seis grandes grupos,
cada uno con varios subgrupos y adems cada enzima es identificada por un
cdigo de cuatro dgitos. La clasificacin de las enzimas es la siguiente:
1.- Oxidorreductasas
1.1 Actan sobre grupos alcohol
1.2 Actan sobre grupos aldehidos o cetnicos
1.3 Actan sobre cadenas saturadas
1.4 Actan sobre grupos aminos
1.5 Actan sobre grupos iminos
1.6 Actan sobre el NADH o el NADPH (reducidos)
1.7 Actan sobre otros compuestos nitrogenados.
2.- Transferasas
2

2.1 Transfieren grupos de 1 carbn (transmetilasa y otras)

2.2 Transcetolasas y Transaldolasas
2.3 Transacetilasas
2.4 Transglucosidasas
2.5 Aciltransferasa
2.6 Aminotransferasas y otros grupos aminos
2.7 Fosfotransferasas
2.8 Sulfotransferasas.

3. Hidrolasas
3.1 Estearasas

3.2 Carbohidrasas
3.3 Hidrolizan grupos ter
3.4 Peptidasas
3.5 Desaminasas
3. 6 Actan sobre enlaces anhidro-cido
4.- Liasas
4.1Carbonocarbonoliasas
4.2
Carbono-oxgeno liasas
4.3 Carbono-nitrgeno liasas
4.4 Carbono-sulfuro liasas.
5. Isomerasas
5.1 Racemasas y epimerasas
5.2 Cis-trans isomerasas
5.3
oxidoreductasas

Intramolecular

5. 4 Intramolecular transferasas
6. Ligasas o sintetasas
6. 1 Forman enlaces carbono-oxgeno (C-O)
6.2 Forman enlaces carbono-sulfuro (C-S)
6.3 Forman enlaces carbono-nitrgeno (C-N)
6.4 Forman enlaces carbono- carbono (C-C).
Estudiaremos las ms importantes de cada grupo, al mismo tiempo que daremos
su clasificacin particular para que sirvan de gua para el estudio posterior de
ellas dentro del metabolismo.
6.6.1 Oxidorreductasas
Este grupo de enzimas, vitales para el funcionamiento celular, constituye uno de
los ms interesantes, a la vez complejo, del metabolismo
La energa que requieren los organismos superiores para el mantenimiento de
sus funciones vitales es obtenida de la oxidacin de los productos alimenticios.
El resultado qumico global de estos procesos de oxidacin es un continuo
consumo de oxgeno y la produccin de anhdrido carbnico y agua. Este
importante trabajo es realizado por una serie de enzimas, conocidas como
Oxidorreductasas, redoxasas o enzimas redox, o sea, enzimas que catalizan
reacciones de oxidacin-reduccin.
Recordemos que con el nombre general de oxidacin se indican determinadas
reacciones que transcurren con prdida de electrones. La prdida de electrones

puede suceder tambin por eliminacin de hidrgenos siendo por tanto, la

deshidrogenacin sinnimo de oxidacin. La oxidacin puede ocurrir tambin por
incorporacin de oxgeno. Los procesos inversos, o sea, prdida de oxgeno y
ganancia de electrones o hidrgeno reciben el nombre de reduccin. Siempre
que una sustancia se reduce otra se oxida. La sustancia que se oxida es el
agente reductor y la que se reduce el agente oxidante.
De especial inters resulta conocer tambin los potenciales de oxidacin
reduccin. Esta medida permite establecer una escala de actividad y conocer si
una sustancia puede ser oxidada por otro o reducida.
El potencial redox se establece a partir de la energa libre liberada en la reaccin.
En las reacciones de oxidacin reduccin el cambio de energa libre es
proporcional a la tendencia de las sustancias para donar o aceptar electrones.
As se establece una escala a partir del potencial redox del electrodo de
hidrgeno, que para un pH igual a cero es de 0.0 V y para un pH igual a siete de
0.42 V, que es el pH medio de los organismos superiores
Las enzimas pertenecientes al grupo de las Oxidorreductasas ms importantes
son.
1. Deshidrogenasas anaerobias con el NAD o NADP como coenzimas.
2.
Deshidrogenasas aerobias, flavoenzimas, flavoproteinas o flavin
dependientes, con el FMN o FAD como coenzimas.
3. Deshidrogenasas con coenzima
Q
4. Ferrosulfo
enzimas.
5. Hemoenzimas. Con el grupo hemo como grupo
prosttico que incluyen: citocromo,
catalasas y
peroxidasas
6. Metaloenzimas u oxidasas cpricas.
Pasemos a continuacin a estudiar este grupo de enzimas.
1. Deshidrogenasas anaerobias Enzimas que actan con el NAD o el NADP
como coenzimas.
Con el nombre de Deshidrogenasas anaerobias se designa un grupo de enzimas
de oxidacin reduccin que catalizan la eliminacin de tomos de hidrgeno de
los sustratos produciendo oxidacin por deshidrogenacin. Los hidrgenos son
recibidos por las coenzimas que actan como aceptores de los mismos.
Las coenzimas de estas enzimas son el NAD y el NADP, tambin conocidas
como DPN y TPN respectivamente. Son di nucletidos, uno de los cuales es el
cido adenlico y el otro es nucletido que contiene la amida del cido nicotnico
o nicotinamida como base (vitamina del complejo B). La funcin de las
coenzimas es fijar los electrones y los tomos de hidrogeno cedidos por el
sustrato y a su vez cederlos a otro aceptor en una etapa posterior. En este
sentido actan como aceptadores y transportadores de electrones, en cuya
funcin participa el ncleo piridnico de la nicotinamida.
Estudiaremos estas coenzimas primero, con algunos ejemplos donde ellas
actan.
NAD: Su nombre es nicotn adenn dinucletido, conocido antiguamente como
DPN (difosfato piridn nucletido).

Esta coenzima est formada por dos nucletidos, el cido adenlico y el

nucletido de la nicotinamida. Presenta una carga positiva. En la figura 6.8
aparece su estructura.

.
El NAD, o como veremos ms adelante el NADP, es el elemento encargado de
fijar los dos hidrgenos procedentes del sustrato, hecho que ocurre en varias
etapas segn veremos en la figura 6.9.
Mientras un tomo de hidrgeno (un electrn y un protn H) se fija a un carbono
del ncleo piridnico, el otro electrn neutraliza la carga positiva del nitrgeno y
el segundo protn queda en solucin.

A los efectos de hacer ms factible su escritura en lo adelante el NAD oxidado

se representar como NAD, sin la carga y el reducido (NADH + H+) como NADH
siempre que esto no afecte la explicacin del proceso.
NADP: Su nombre es nicotn adenn dinucletido fosfato o trifosfato piridn
nucletido. Presenta la misma estructura que el NAD con un fsforo ms.
Contiene una molcula ms de cido fosfrico que el NAD, la cual esta unida a
uno de los carbonos de la ribosa que corresponde al cido adenlico.
2

En los tejidos existen enzimas que catalizan la transformacin de una coenzima

en otra por eliminacin o fijacin del tercer cido fosfrico. Sus propiedades son
muy similares.

Existen unas 200 enzimas que dependen del NAD y del NADP para realizar su
accin. Se conocen con el nombre de Deshidrogenasas anaerobias ya que no
necesitan de la presencia del oxgeno para realizar su trabajo.
Estas deshidrogenasas actan sobre diferentes sustratos que poseen en su
estructura funciones alcoholes a los cuales deshidrogenan pasando estas a
aldehdo o cetona, segn se trate del carbono que posee el grupo alcohol. A
manera de ejemplo citaremos la lctico deshidrogenasa que produce la
deshidrogenacin del cido lctico segn la ecuacin:

En este tipo de reaccin se produce NADH (reducido) el cual aporta los

hidrgenos a la cadena respiratoria, inicindose de este modo el proceso de
oxidacin-reduccin a nivel celular (respiracin).
2

Para que la accin de las Deshidrogenasas contine, es necesario que las

coenzimas reducidas paseen nuevamente al estado oxidado.
Las coenzimas reducidas no se oxidan por el oxgeno molecular. Su oxidacin
se efecta por accin enzimtica y la naturaleza de las enzimas que participan
en ella, parece ser variable. Las ms conocidas son las enzimas del grupo de las
ferro sulfo enzimas que actan oxidando las coenzimas reducidas y reduciendo
el citocromo oxidado.
En ocasin de estudiar la cadena respiratoria trataremos el tema ms
profundamente.
Deshidrogenasas aerobias
Deshidrogenasas que actan con el FMN y el FAD como coenzimas. Estas
enzimas poseen siempre como un grupo prosttico un nucletido de la aloxazina
o flavina nucletido. El nucletido de la aloxazina y los compuestos relacionados
deben considerarse como derivados de la riboflavina o vitamina B . Tienen color
amarillo, por lo cual las enzimas se conocen tambin como enzimas amarillas.
En trminos generales, las flavoprotenas son enzimas que catalizan la
separacin de tomos de hidrogeno del sustrato, los que son fijados en la porcin
aloxazina del grupo prosttico.
2

A continuacin describimos las coenzimas:

FMN Flavian mononucletido: Es un mononucletido que resulta de la unin del
cido fosfrico con la riboflavina o vitamina B (Figura 6.10).
2

FAD: Flavn adenn dinucletido: Es un dinucletido formado por la unin de la

aloxazina o flavna con el cido adenlico, que es tambin un mononucletido.
Sus propiedades son semejantes a las del mononucletido, solo su color es ms
rojizo (Figura 6.11).

Casi todas las flavoprotenas contienen el dinucletido como grupo prosttico. El

grupo aloxazina de ambos nucletidos actan como aceptor de hidrgeno por
sus tomos de N no saturado, con lo cual se produce un desplazamiento en las
dobles ligaduras (Figura 6.12).

Las enzimas que contienen el FAD y al FMN como grupo prosttico, estos se
mantienen firmemente unidos actuando ms bien como grupo prosttico que
como coenzimas
Por otra parte los hidrgenos presentes en las coenzimas reducidas (FADH y
FMNH ) pueden pasar en unos casos a los citocromos y en otros a la coenzima
Q continuando de esta manera el proceso oxidorreduccin.
Las flavoprotenas parecen desempear una doble funcin en los procesos de
oxidacin-reduccin celular.
Algunas son intermediarias entre las deshidrogenasas que actan con el NAD y
el citocromo oxidado, se denominan citocromos reductasas: otras actan en
diversos sustratos que son productos del metabolismo, de importancia variable.
Estas ltimas inician, por tanto, la oxidacin de los metabolitos.
A manera de ejemplo una reaccin catalizada por una deshidrogenacin aerobia
con el FAD como coenzima.
2

Estas reacciones pueden estar sumamente relacionadas con otros compuestos

como es el caso de la coenzima Q. segn veremos al estudiar la cadena
respiratoria y la fosforilacin oxidativa.
3. Ferro-sulfo enzimas
Estas enzimas tambin llamadas protenas ferro-sulfuradas o enzimas
ferrosulfuradas son enzimas que contienen hierro y azufre en su estructura.
Fueron encontradas primeramente en bacterias y ms tarde en las mitocondrias
de clulas animales donde se seala su participacin en el transporte
electrnico. El hierro es su grupo funcional el cual oscila de Fe a Fe (ferroso a
frrico) y viceversa, siendo este por tanto su parte activa.
Es de destacar el carcter no hemnico de este hierro, al contrario de los
citocromos. Por ello estas enzimas se simbolizan como FeNH (hierro no
hemnico) o simplemente como Fe-S.
+2

+3

Todo hace suponer que presentan una accin destacada en la oxidacin del
NADH
4. Hemoenzimas
2

Son enzimas constituidas por una protena unida a uno o varios grupos hemo en
los cuales el hierro puede estar bi o trivalente, o variar entre estas valencias
durante la accin enzimtica. Entre ellas se encuentran los citocromos, las
catalasas y las peroxidasas.
Citocromos: Son enzimas mitocondriales que presentan constitucin de
cromoprtidos. Su identificacin y estudio se realizan por bandas tpicas de
absorcin en su estado reducido. En la cadena respiratoria, participan en el
transporte de electrones desde las flavoprotenas hasta las citocromo oxidasa.
El sistema de los citocromos de los animales superiores est formado por tres
componentes: citocromo oxidasa, citocromo B y citocromo C. Sealaremos
algunas caractersticas de ellos.
La Citocromo oxidasa es una de las enzimas ms importantes en los procesos
de oxidacin celular, pues es la nica que cataliza la oxidacin de los citocromos
por el oxgeno. Aunque existen otras posibilidades para la utilizacin del oxgeno
por los tejidos, el sistema que emplea la citocromo oxidasa y los citocromos es
de gran importancia. En la prctica es el responsable de la mayor parte de las
oxidaciones.
La citocromo oxidasa est, junto con el oxgeno, en uno de los extremos de la
cadena de estas oxidaciones, lo cual, en razn de ser la principal de todas, le da
importancia especial.
El nico sustrato que se conoce de la citocromo oxidasa es el citocromo C
catalizando su oxidacin por el oxgeno molecular. Es el nico mecanismo
biolgico conocido capaz de oxidar al citocromo C reducido.
La citocromo oxidasa es una protena con ferro porfirina como grupo prosttico.
Es inactiva por los cianuros y el xido de carbono. Algunos autores la consideran
igual al sistema formado por los llamados citocromo A y A3. Se encuentra
presente en todas las clulas animales y vegetales de organismos que necesitan
oxgeno para la vida normal.
Los citocromos, incluyendo a la citocromo oxidasa como uno de ellos, pueden
existir en dos estados de oxidacin. Al estado oxidado el tomo de hierro de la
porfirina es trivalente, mientras que es estado reducido es bivalente.
El citocromo B forma parte de un complejo enzimtico que determina la oxidacin
del cido succnico. Es oxidado con facilidad por el citocromo C y reducido
rpidamente por el sistema enzimtico que oxida al cido succnico.
El citocromo C es el ms estudiado de todos por la estabilidad que tiene y la
concentracin relativamente alta que se encuentra en los tejidos animales. Los
preparados considerados ms puros contienen 0,465% de hierro. Por
tratamientos con cidos se ha podido separar del citocromo C una porfirina que
result igual a la protoporfirina de la hemoglobina: por tanto, su grupo prosttico
es una hierro porfirina, la cual se encuentra unida a la parte proteica por medio
del aminocido cistena (figura 6.13).
En las oxidaciones celulares del sistema de los citocromos acta en cadena
(cadena respiratoria). La citocromo oxidasa (citocromo A + A ) cataliza la
oxidacin del citocromo C por el oxgeno del aire. A su vez, el citocromo C
oxidado, oxida por una parte al citocromo B que acta en el sistema oxidante del
3

cido succnico y por otra, a enzimas del tipo de las flavo protenas, que actan
en las oxidaciones celulares.

Como la oxidacin del citocromo C por la citocromo oxidasa es muy especfica,

cualquier inhibidor de estas enzimas, como son los cianuros y el xido de
carbono detiene la cadena de oxidacin. Si se considera que las oxidaciones por
medio de los citocromos representan una alta proporcin de las que ocurren en
un organismo superior, se explica la accin txica de esas sustancias, al impedir
la oxidacin de los mismos.
Catalasas: La catalasa es una enzima que tiene por sustrato el agua oxigenada,
a la cual descompone en agua y oxgeno. Se ha obtenido cristalizada del hgado
y de eritrocitos de diversas especies. Su masa molecular es de 230.000 y
contiene cuatro grupos hematina por molcula, con el hierro al estado trivalente.
Su mayor masa molecular y el estado de valencia la diferencia de la
hemoglobina. En los procesos de descomposicin del agua oxigenada acta un
solo grupo hematina que se une a aquella.
Peroxidasas: Son enzimas que tienen como sustrato el agua oxigenada, a la
cual descomponen en agua y oxgeno. Este ltimo, por medio de una reaccin
acoplada, acta sobre otro sustrato susceptible de oxidacin. Sern estudiadas
en la cadena respiratoria y el estrs oxidativo.
5. Metaloenzimas u oxidasas cpricas
Son enzimas formadas por protenas y un metal, el cobre, que puede
considerarse como su grupo prosttico. Por las reacciones que catalizan,
pertenecen al grupo de las oxidasas, enzimas que aceleran la oxidacin del

sustrato con oxgeno molecular. Se diferencias de las peroxidasas en que no se

requiere agua oxigenada para la oxidacin.
Como ejemplo citaremos: Tirosinasa o Polifenol oxidasa: Oxida los monofenoles
y quinonas. Tambin oxida el aminocido Tirosina, con lo cual produce,
finalmente, el pigmento llamado melanina. Acta sobre distintos sustratos.
Dioxifenilalanina oxidasa: Dopa oxidasa: Enzima presente en los menaloblastos
de la piel de los animales superiores - incluso en el hombre - que determina la
oxidacin por oxgeno del aire del aminocido L 3-4 dihidroxifenilalanina (DOPA).
Mediante una serie de reacciones este aminocido se transforma finalmente en
melanina. Algunos autores la consideran idntica a la tirosinasa.
Uricasa: Enzima que oxida directamente al cido rico. Como producto final se
obtiene la alantona.
6. Ubiquinonas o coenzima Q
Tambin conocida con el nombre de ubiquinona, es una coenzima trasportadora
de hidrgenos con estrecha relacin estructuras con la vitamina K. Posee al
anillo quinnico y una cadena lateral isoprenoide de longitud variable. Esta
cadena lateral determina su carcter liposoluble. La coenzima Q puede existir en
dos formas, una oxidada (sin hidrgeno) y otra reducida (con hidrgeno) (Figura
6.14).
Las ubiquinonas son, sin duda, componentes normales de la cadena respiratoria
de muchos organismos vivos, entre otros de los animales superiores. Algunos la
sitan entre las coenzimas flavnicas (FMN y FAD) y los citocromos.
Recientemente se ha sealado su posible ubicacin dentro de los citocromos
segn veremos en el aspecto correspondiente a la fosforilacin oxidativa.

6.6.2. Transferasas
Las Transferasas son un grupo amplio de enzimas del metabolismo intermediario
que tienen como caractersticas catalizar reacciones de transferencia entre dos
sustratos. Pueden transferir tomos, molculas o restos moleculares de un
sustrato que acta como donador del grupo en cuestin a otro que acta como
aceptor. Realizan un papel muy importante en el metabolismo y en particular en
ciertas reacciones de sntesis. Entre las principales transferasas se cuentan:
transaminasas,
transcetolasas,
transaldolasas,
transglucosidasas
y
transpeptidasas.

Estudiaremos las ms importantes de ellas y las dems sern analizadas en el

metabolismo.
Transaminasas
Tambin conocidas como aminotransferasas, catalizan la reaccin reversible en
la que el grupo alfa amino de un aminocido se transfiere al grupo ceto de un
cetocido, con lo que se forma su nuevo aminocido, segn vemos en la
siguiente reaccin:

La reaccin es francamente reversible. Las transaminasas conocidas todas

presentan el fosfato de piridoxal o vitamina B , como coenzima.
6

Las transaminasas ms conocidas son la alanina cetoglutrico transaminasa o

glutmico pirvico transaminasa (GPT) y la aspartato cetoglutrico transaminasa
o glutmico oxaloactico transaminasa (GOT), ambas de gran utilidad para el
diagnstico de lesiones del hgado, el corazn y los msculos.
Transfosforilasas
Estas enzimas desplazan restos fosfricos entre dos molculas. Generalmente
el fsforo es cedido por el ATP. Estos fermentos son conocidos como quinasas
o cinasas.

Un grupo especial de transfosforilasas est constituida por aquellas que

desplazan restos de fosfatos dentro de la misma molcula. Reciben el nombre
de mutasas.
Ejemplo:

Transmetilasas
Son tambin llamadas metil transferasas y catalizan la transferencia del grupo
metil. Generalmente la transferencia se hace a partir de la metionina que posee
grupos metilicos hbiles.
Estos grupos metlicos son necesarios en las rutas biosintticas de varias
sustancias entre otras en la fonacin de creatina, colina, fosfolpidos, etc., as
como para metilar los productos de excrecin.
Transacetilasas
Se conocen tambin como acetiltransferasas y las mismas catalizan la
transferencia del radical acetil. Su coenzima es la coenzima A.
Las transacetilasas ms importantes estn comprendidas dentro del complejo de
la pirvico deshidrogenasa (pirvico descarboxilasa) donde actan aceptando al
grupo acetl del cido lipoico el cual es recibido por la coenzima A. Esta enzima
recibe el nombre de lipoato-acetil transferasa y la reaccin en cuestin aparece
en la figura 6.15.
La coenzima A es una estructura algo compleja que est formada por la unin
del cido pantotnico (vitamina del complejo B), el cido adenlico y un resto de
cisteina (figura 6.16). El resto de cistena posee un grupo de azufre (SH) que
constituye la parte activa de la coenzima,
La coenzima A es adems un compuesto muy activo dentro del metabolismo
pues participa en la activacin de los cidos grasos junto y a las tiolasas dentro
de la beta oxidacin de los cidos grasos. Adems, en la descarboxilacin del
cido cetoglutrico en el ciclo de Krebs acta formando parte del succinl CoA.
Una reaccin muy importante relacionada con esta coenzima es ceder el grupo
acetl para formar la acetilcolina, transmisor sinptico del sistema nervioso.

6.6.3. Hidrolasas.
Las hidrolasas son enzimas que producen la hidrlisis de los sustratos. Es decir,
rompen determinados enlaces (C-0, C-N y P-0) susceptibles de ser hidrolizadas
por el agua.
Las hidrolasas se encuentran en el tubo digestivo donde participan
destacadamente en la hidrlisis de los compuestos ingeridos, previo a la
asimilacin. Tambin existen las hidrolasas en los lisosomas, partculas
subcelulares que actan en la digestin intracelular.
Entre las principales hidrolasas tenemos: las desaminasas que incluyen la
ureasa, arginasa, glutaminasa, asparaginasa. etc. Las protasas que incluyen
dos tipos: las proteinasas o endopeptidasas con la pepsina, tripsina y
quimotripsina y las peptidasas o exopeptidasas que incluyen las dipeptidas,
carboxipeptidas y aminopeptidasas Las estearasas con la lipasa, colinesterasa.
lecitinasa y fosfatasa. Las carbohidrasas que incluyen las glucosidasas como las
maltasas, sacarasas y lactasas y las poliasas que son amilasas, celulasas,
hialuronidasas, etc. Adems, pertenecen a las hidrolasas las nucleasas y las
ATP asas.
Dentro del metabolismo tendremos la oportunidad de estudiar la mayora de
estas enzimas.
6.6.4. Liasas:
Constituye un grupo heterogneo de enzimas que catalizan la remocin de
grupos de sustratos por mecanismos diferentes a la hidrlisis. Generalmente
actan rompiendo el enlace C - C o C - O. Este grupo incluye las descarboxilasas,
hidratasas, fosforilasas y aldolasas.
Las principales enzimas de este grupo sern estudiadas en el metabolismo.
Veamos el caso de las descarboxilasas como ejemplo de grupo.

Descarboxilasas
Son enzimas que catalizan la reaccin de descarboxilacin o remocin del grupo
carboxlico como CO . Presentan como coenzima un derivado de la vitamina B
o tiamina, conocido como pirofosfato de tiamina.
2

La descarboxilacin se puede presentar en el metabolismo de los animales

superiores en los cetocidos y en los aminocidos.
La descarboxilacin de los aminocidos ha sido muy estudiada en el caso de la
histidina ya que producto de la descarboxilacin de la misma se produce la
histamina (figura 6.17) que tiene un marcado efecto en la vasodilatacin capilar
y las reacciones alrgicas.

La descarboxilacin de los cetocidos presenta, a diferencia de la anterior, una

fase oxidativa que requiere de la presencia de las deshidrogenasas que trabajan
con el NAD. Esta descarboxilacin requiere de la presencia del cido lipoico y de
la B
A manera de resumen de este proceso presentamos el siguiente esquema como
ejemplo: Figura 6.18.
1.

Esta reaccin ser analizada en detalle en el capitulo correspondiente a las

vitaminas, en particular a la vitamina B
1

6.6.5. Isomerasas
Estas enzimas catalizan todas las reacciones de interconversin de ismeros
entre s, Incluyen las racemasas, epimerasas, cis-transisomerasas y las
cetoaldoisomerasas.
6.6.6. Ligasas o sintetasas.

Son enzimas que catalizan la unin de dos sustratos acoplados a la ruptura de

un enlace pirofosfato del ATP o de un compuesto semejante. Este grupo incluye:
aminocido RNA ligasa, carboxilasas (pirvico carboxilasa), glutamina sintetasa,
peptdico sintetasa, las polimerasas, etc.
En todos los casos hay consumo de energa ya que se trata de reacciones
endergnicas que estn acopladas al ATP como elemento portador de esta
energa Tambin sern estudiados en el metabolismo. A manera de ejemplo
veamos el caso de las carboxilasas, en particular la pirvico carboxilasa, que
cataliza la carboxilacin del pirvico. Estas enzimas requieren de la presencia de
la biotina, vitamina del complejo B, como coenzima. Figura 6. 19