INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

BIOTECNOLOGA

ACADEMIA DE CIENCIA Y TECNOLOGA FARMACUTICA

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

FARMACOLOGA

ELABORADO POR:
Mara Esther Bautista Ramrez
Yolanda Gmez y Gmez

NDICE GENERAL
PG
PRACTICA 1. POSOLOGA

PRCTICA 2. FARMACOCINTICA

PRCTICA 3. MANEJO DE ANIMALES

12

PRCTICA 4. MTODOS PARA MARCAR ANIMALES DE EXPERIMENTACIN

16

PRCTICA 5. VAS DE ADMINISTRACIN

18

PRCTICA 6. ANESTSICOS VOLTILES

21

PRCTICA 7. DOLOR Y ANALGESIA

24

PRCTICA 8. MODELO EXPERIMENTAL DE ACTIVIDAD CONVULSIVANTE

29

PRCTICA 9. SISTEMA NERVIOSO AUTNOMO

31

PRCTICA 10. DIURTICOS

34

PRACTICA 11. . EFECTO DE UN ANTICIDO EN EL ESTMAGO

36

PRCTICA 12. EFECTO PROTECTOR DE ANTIACIDOS EN LA RATA

39

REGLAMENTO INTERNO DE LABORATORIO DE FARMACOLOGIA

Organizacin
1- La entrada al laboratorio ser con diez minutos despus de la hora sealada para el horario
del grupo
2- El trabajo de laboratorio se iniciar con una explicacin, donde se discutir detalladamente
los fundamento de la prctica a desarrollar
3- Los equipo de trabajo debern hacer un vale al profesor o al responsable del laboratorio por
el material que se emplear en el desarrollo de la prctica, observando las condiciones en
que es entregado y anotando cualquier defecto. El vale ser entregado junto con una
identificacin del alumno que recibe el material. La cual ser devuelta cuando se regrese el
material al trmino de la prctica.
4- En caso de que algn material se rompa o se pierda, ser repuesto por la persona
responsable y tendr que entregar una credencial al responsable del laboratorio, la cual se
regresar en el momento del material repuesto.
5- Si no se conoce el manejo u operacin de algn equipo del laboratorio solicitar el apoyo a
los profesores o al tcnico docente.
6- El material utilizado ser entregado limpio y en buen estado, as como el lugar de trabajo
deber de quedar limpio antes de retirarse del laboratorio.
Medidas de seguridad
1- El uso de bata es obligatorio, si el alumno no cuenta con ella no se le permitir la entrada al
laboratorio
2- Queda estrictamente prohibido consumir cualquier tipo de alimento y bebida o fumar dentro
del laboratorio
3- Nunca succione las sustancias con la boca, utilice bulbos, perillas o propipetas
4- Nunca tome reactivos directamente de los frascos contenedores, para ello deber utilizar un
vaso de precipitado o un recipiente ms pequeo, vaciando la cantidad aproximada que va a
utilizar, etiquetndolo inmediatamente con el reactivo que contiene.
5- Las sustancias peligrosas como cidos o bases, se debern manejar con equipo de
seguridad como guantes, lentes de proteccin y se bebern trabajar en la campaa de
extraccin
6- Los disolventes se bebern trabajar alejados de mecheros o parrillas de calentamiento
7- En caso de derrame de alguna sustancia sobre la mesa de trabajo, piso o paredes, limpie
inmediatamente la zona
8- En caso de derrame de alguna sustancia sobre el la ropa elimine el exceso con una franela
o papel absorbente
9- En caso de derrame de alguna sustancia sobre la piel, elimine el exceso con una franela e
inmediatamente coloque la parte impregnada debajo del chorro del agua.

PRCTICA No. 1
POSOLOGA
I. TEMA
Posologa.
II. OBJETIVO GENERAL
Practicar los clculos matemticos para la correcta dosificacin de los frmacos mediante la
resolucin de problemas asignados por el profesor de laboratorio para la administracin racional de
stos.
III. INTRODUCCIN
La posologa constituye uno de los rasgos ms importantes de la farmacologa y gran proporcin de
fallas de la teraputica medicamentosa resulta o tanto de las eleccin errnea del frmaco, sino del
empleo incorrecto de ste, como por ejemplo la inadecuada dosificacin.
Dosis se define como la cantidad de frmaco que debe administrarse a un paciente por kilogramo de
peso para producir un efecto deseado. Por lo tanto los efectos farmacolgicos dependern de la
concentracin de frmaco en el organismo, debido a que la dosificacin mantiene una relacin
directa entre la cantidad de frmaco administrado y el peso corporal del paciente.
IV. METODOLOGA
MATERIAL, EQUIPOS Y REACTIVOS.

Hojas blancas, calculadora y lpiz.

Dos recetas mdicas.
Una monografa de un medicamento.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
La prctica se realizar de acuerdo con las siguientes actividades:
1. Resolucin de una serie de problemas:
a. El profesor asignar a cada uno de los equipos un problema para su resolucin en
clase.
b. Se revisarn y discutirn los clculos matemticos y se aclararn las dudas que surjan.
c. Los problemas restantes de la serie se dejarn para resolver como tarea y se
entregarn como parte del reporte.
2. Revisin y anlisis de propaganda mdica de acuerdo con los siguientes criterios.
a. Verificar si la dosis recomendada del producto est expresada correctamente.
b. Identificar y enlistar los trminos farmacolgicos de la propaganda.
c. Investigar el significado de los trminos farmacolgicos y elaborar un glosario.
3. Revisin y anlisis de una receta mdica.
3

a. En las recetas solicitadas previamente por el profesor, identificar los datos posolgicos
indicados por el mdico y analizados de acuerdo con la expresin de dosis y si sta fue
la adecuada.
b. Identificar y sealar las partes de la receta.
PROBLEMAS
1. Cuntos g de cloruro de sodio contienes las siguientes soluciones?
a) 5.0 %
b) 0.5 %
c) 0.05 %
d) 0.005 %
2. El hidrato de cloral viene en solucin de 15 ml que contiene 1 gramo de frmaco. A qu
porcentaje est la solucin?
3. El medicamento Gino-Daktarn contiene:
Nitrato de miconazol 100 mg
Excipiente c.b.p.
275 mg
A qu porcentaje se encuentra el principio activo?
4. En el comercio se encuentran ampolletas de clorhidrato de adrenalina cuya concentracin es de
1 mg por ml. Cul es el porcentaje de dicha solucin?
5. Cuntos mg de Sulfatiazol sdico requieres para preparar 50 ml de una solucin al 2%?
6. Requieres preparar un litro de hidrxido de sodio 0.1 N Cuntos gramos de hidrxido de sodio
necesitas para prepararla?
7. El difenoxilato es un frmaco antidiarreico. La dosis que se administra en nios es de 0.05
mg/Kg. el preparado vienen en una concentracin de 0.05%. Cuntos mililitros de ste se le
tienen que administrar a un nio que pesa 32.2 kg?
8. Para determinar una curva dosis respuesta a la adrenalina se requiere preparar las siguientes
soluciones: 300, 100, 30, 10, 3, 1, 0.3, 0.1, 0.03 y 0.01 g en 2 ml; si el medicamento tiene una
presentacin en solucin; la cual contiene 100 mg de clorhidrato de adrenalina en 100 ml.
Cules son los clculos para obtener dichas concentraciones de adrenalina?
9. Despus de una intervencin quirrgica se desea administrar el medicamento Penprocilina a
una rata. La dosis es de 0.1 ml del medicamento preparado y la formulacin es la siguiente:
Penicilina G sdica
Penicilina G procanica
gua inyectable

100 000 U.I

300 000 U.I
2 ml

a) Cuntos miligramos se le estn administrando de cada una de las penicilinas a la rata?

4

b) En qu porcentaje se encuentran los dos tipos de penicilina?

10. Se tiene un paciente con problemas de hipertensin y el mdico decide administrarle el
medicamento Aldomet, el cul tienen como frmaco la -metildopa (antihipertensivo). ste debe
ser administrado de la siguiente manera: 1. tableta diaria para una persona que pesa 67 Kg.
Qu dosis en mg/Kg de peso se est administrando en 48 horas, si la tableta contiene 250 mg
de -metildopa?
11. En el mercado existe un medicamento llamado Abbocito, el cual puede neutralizar el exceso de
acidez en el estomago. ste medicamento tienen la siguiente formulacin:
Citrato sdico
0.945 g
Bicarbonato sdico
1.264 g
cido tartrico
1.316 g
cido ctrico
1.073 g
a) Cuntos g hay de cada uno de estos ingredientes?
b) En qu porcentaje se encuentra cada uno de ellos?
12. Requieres preparar una solucin salina fisiolgica al 0.9 %
a) Cuntos mg requieres para preparar 1 litro de la solucin?
b) Cuntos g necesitas para preparar 100 ml?
13. Un paciente presenta insuficiencia renal crnica, para su control se le tiene que administrar
Furosemida (diurtico), cuya dosis es de 800 g /Kg de peso cada 8 horas:
a) Qu dosis se le tienen que administrar cada 12 horas a este paciente si pesa 60 Kg?
b) A cunto equivale en tabletas, si la presentacin del medicamento es la siguiente:
1 Tableta:
Furosemida
20 mg
Excipiente c.b.p.
150 mg
14. Para un experimento farmacolgico se requiere administrar a 5 ratas Sulfatiazol sdico por va
intraperitoneal. Para ello la dosis de este frmaco es de 0.2 g/Kg de peso. Si la solucin est al
2%. Cuntos mililitros se les debe de administrar a las ratas, si los pesos son de: 200, 250,
280, 300 y 310 gramos?
15. Calcula los miligramos de dextrosa necesarios para preparar:
a) 200 ml de una solucin acuosa de este azcar cuya concentracin sea de 0.3 mg/ml.
b) 100 ml de una solucin acuosa de este azcar al 10%.
16. Un frasco mpula contiene 0.1 g de un medicamento A disuelto en 10 ml de agua bidestilada.
a) Qu volumen de esta solucin es necesario administrar a un paciente de 15 Kg de
peso, para que ste reciba 30 mg del medicamento?
b) Cul es la dosis en g y mg que se le est administrando a este paciente, cuando se le
dan 30 mg de este medicamento?

17. Un paciente diabtico cuyo peso es de 65 Kg requiere la administracin diaria de insulina a dosis
de 0.25 U.I/Kg de peso (va subcutnea). Sabiendo que los frascos mpulas contienen 100 U.I
(24 U.I = 1 mg), calcula:
a) Las unidades de insulina que el paciente recibe diariamente.
b) Los miligramos de insulina que el paciente recibe por da.
c) El volumen de la solucin que el paciente recibe diariamente.
18. La carbamacepina, medicamento til en el tratamiento de epilepsia, debe administrarse a un
paciente de 50 Kg de peso. La dosis es de 20 mg/Kg y la presentacin farmacutica son tabletas
de 0.2 gramos; determina:
a) El nmero de tabletas que deben ser administradas diariamente.
b) Si el medicamento se administra dos veces al da. Cuntas tabletas hay que dar en
cada ocasin?
19. Un frasco mpula contiene una solucin formada por 0.5 g de un medicamento X y 0.5 ml de
disolvente. Qu volumen de esta solucin es necesario administrar a un paciente para que ste
reciba 100 mg del medicamento?
20. Un frasco mpula contiene 2 000 000 U.I de penicilina G sdica en 2 ml.
a) Cuntos ml de diluyente esterilizado se requieren para preparar una solucin de 250
000 U.I/ml?
b) Sabiendo que un paciente debe recibir 500 000 U.I cada 8 horas (I.M). Qu volumen
de la solucin anterior es necesario administrarle en un da?
21. Se dispone de una solucin de alcohol en agua al 80 %. Qu volumen de esta solucin se
necesita para preparar 1000 ml de solucin de alcohol al 25 %?
22. La dosis como hipntico del pentobarbital para las ratas es de 20 mg/Kg de peso. Se necesita
administrar esta dosis a 4 animales de los siguientes pesos: 250, 300, 132 y 200 g; sin embargo,
la presentacin es de 63 mg/ml. Qu dilucin haras para poder administrar la dosis adecuada
a cada una de las ratas en 0.5 ml?
23. El medicamento Tempra contiene en cada 100 ml
Paracetamol
10 g
Alcohol etlico
10 ml
Vehiculo c.b.p
100 ml
a) La presentacin es: frasco gotero con 20 ml de solucin, Qu cantidad de paracetamol
habr en sta?
b) Si la dosis para infantes es de 6 gotas por cada 5 Kg de peso, Qu cantidad de
paracetamol se le aplica a un nio de 10 Kg de peso en un da?
c) Si la dosis es cada 8 horas y se aplica durante 3 das, Qu cantidad total se le
administr en este tiempo?

24. A un infante se tres meses de edad le recetaron durante tres das Acetaminofn en solucin. La
dosis fue de 6 gotas cada 8 horas. Buscar la presentacin de ste frmaco y decir que cantidad
se le administr en mg al finalizar el tratamiento.
25. Se desea aplicar Diyodohidroxiquinolena a una paciente de 18 Kg de peso. Si la dosis
recomendada es de 35 mg/Kg de peso por da.
a) Indique cual es la dosis por da del frmaco requerida para la paciente.
b) Si la presentacin es de 210 mg/ 5ml, indique a qu concentracin viene dicho
medicamento en porcentaje
c) Diga cuntas tomas al da requiere la paciente para cubrir la dosis.
26. Se aplicar a un paciente de 12 Kg de peso 6 tomas de media cucharadita de jarabe de
Acetaminofn durante el da, que se presenta en una concentracin de 75 mg/5 ml; si una
cucharadita equivale a 5 ml de jarabe, indique:
a) Cuntos mg por toma se estn prescribiendo?
b) Qu dosis por toma por Kg de peso se le estn aplicando?
c) Cuntos mg por da se estn aplicando?
27. La presentacin farmacutica del pentobarbital sdico es de 603 g en 100 ml de vehculo; si
requieres preparar dos soluciones, una de 5 mg/ml y otra de 9 mg/ml.
a) Cuntos ml de esta solucin utilizaras para preparar 50 ml de cada una?
b) Si la solucin de 5 mg/ml se utiliza para administrar las siguientes dosis: 25, 33, 50, 66 y
80 mg/Kg de peso, qu volumen administraras a ratones de 30 g?
c) Si la solucin de 9 mg/ml se utiliza para administrar las siguientes dosis: 100, 125, 150,
175 y 200 mg/Kg de peso, qu volumen administrara a ratones de 30 g?
28. A un paciente con 20 Kg de peso se le aplic Cimetidina con fines preparatorios de la siguiente
manera: durante 2 das se le dio un primer tratamiento de 2 grageas de 200 mg cada una; un
segundo tratamiento de una gragea de 300 mg y un tercer tratamiento de 2 grageas de 200 mg
cada una. Indique:
a) Qu dosis por Kg se le aplic en el primer y tercer tratamiento?
b) Qu cantidad en gramos se le aplic al da?
c) Qu dosis por Kg se le aplic al da?
29. La dosis de Warfarina es de 0.21 mg/Kg por va oral. El Coumadn tiene la siguiente
presentacin: Tabletas con Warfarina sdica de 5 mg y vehculo c.b.p de 0.2 g., se requiere
administrar Warfarina a 3 animales de laboratorio con los siguientes pesos: 450, 25 y 50 g.
a) Indica la concentracin de Warfarina en porcentaje.
b) Indica la dosis para cada animal.
c) Qu dilucin haras para poder aplicar la dosis del medicamento?
30. El Patector NF es un anticonceptivo, cuya presentacin es la siguiente:
Acetofnido de dihidroxiprogesterona 75 mg
Enantato de estradiol
5 mg
Vehculo c.b.p
1 ml
Dosis: 1 inyeccin mensual para una mujer de peso aproximadamente de 60 Kg
7

a. Qu dosis deber administrarse a ratas que pesan: 280, 312.5, 276.9 y 300 g?
b. Qu dilucin haras para administrar a cada rata un volumen menor o igual a 0.4 ml?

PRCTICA No. 2
FARMACOCINTICA
I. TEMA:
Simulacin del modelo de un compartimento intravascular
II. OBJETIVO GENERAL
Simular in vitro el modelo de un compartimento despus de una administracin intravascular y
determinar los parmetros farmacocinticos ms importantes.
III. OBJETIVOS ESPECFICOS:
Determinar experimentalmente los parmetros farmacocinticos ms importantes como son la
concentracin plasmtica al tiempo cero (Cpo), el volumen de distribucin (Vd), el tiempo de vida media
(t ) , la constante de eliminacin (Ke), clearence (Cl) y rea bajo la curva (ABC), a partir de los datos
obtenidos.
IV. INTRODUCCIN
Para producir sus efectos caractersticos, un frmaco debe estar presente en concentraciones
apropiadas en sus sitios de accin. Si bien las concentraciones alcanzadas son, una funcin de la
cantidad del frmaco administrada, tambin dependen del grado y velocidad de su absorcin,
distribucin, fijacin o localizacin en tejidos, biotransformacin o excrecin (1).
Uno de los objetivos de la farmacocintica es describir en trminos simples el complejo fenmeno
involucrado en la disposicin del frmaco y la respuesta incluyendo la cintica de absorcin, distribucin
y eliminacin o bien la cintica de la respuesta farmacolgica, varios procesos fisicoqumicos,
bioqumicos y fisiolgicos involucrados en la disposicin de frmacos que se puede describir por
algunas relaciones matemticas. Una hiptesis fundamental de la farmacocintica es que existe una
relacin entre los efectos farmacolgicos de un medicamento y la concentracin medible del mismo.
En casi todos los casos la concentracin del medicamento en la circulacin general guardar
relacin con la concentracin que posee en sus sitos de accin. La farmacocintica tiene por objeto
esclarecer la relacin cuantitativa entre dosis y efecto, y el marco de referencia en que es posible
interpretar las cuantificaciones de las concentraciones de frmacos en los lquidos biolgicos.
Cuando la cintica de distribucin es rpida comparada con la cintica de eliminacin, el modelo de un
compartimiento es til, en este modelo el cuerpo es representado como un simple compartimiento de
volumen. Despus de la administracin intravenosa, no es visible una fase de distribucin. Sin embargo,
la rpida distribucin no implica una distribucin uniforme a todos los tejidos (2).
Los parmetros farmacocinticas ms importantes son la depuracin, volumen de distribucin, tiempo
de vida media y biodisponibilidad. La depuracin es matemticamente igual al producto de la constante
de eliminacin y el volumen de distribucin y es una medida de la habilidad del organismo de eliminar el
frmaco. El volumen de distribucin, mide el espacio disponible en el cuerpo para contener el frmaco
9

y resulta de una interaccin entre el frmaco, el tejido y las protenas plasmticas, a mayor unin el
volumen de distribucin ser mayor. El tiempo de vida media es el resultado del fenmeno de
distribucin y eliminacin y es el tiempo requerido para que la concentracin de frmaco en sangre
disminuya a la mitad. Biodisponibilidad, es referente a la fraccin del medicamento que se absorbe
como tal en la circulacin general. (1).
V. MATERIAL Y EQUIPO
Espectrofotmetro visible
Balanza Analtica
Bomba peristltica
Parrilla de agitacin
Barra magntica
Mangera de hule
Esptula
Matraz Kitazato de 4000 ml
Pipetas graduadas 1,5 y 10 ml
Vasos de precipitados 1000 ml
Matraces aforados de 100 ml
Reactivos:
Azul de metileno
METODOLOGA:
Montar el dispositivo que se muestra en la figura 1, aadir 2350 ml de agua destilada y 10 mg de azul de
metileno, el flujo de agua debe ser de 127ml/min. Tomar muestras a los siguientes tiempos
1,2,4,6,8,10,16,24,32,40,48 y 56 min.
Realizar una curva de calibracin con las siguientes concentraciones de azul de metileno 0.1, 0.5, 1.0,
2.0, 4.0, 6.0 y 8.0 g/ml determinando la absorbancia a 663 nm. Determinar la concentracin de las
muestras interpolando en la curva de calibracin.

VI. RESULTADOS:
Calcule la concentracin de azul de metileno de cada muestra interpolando en la curva estndar.
10

Elabore una grfica de tiempo t(min) contra el ln de la concentracin de azul de metileno con los datos
obtenidos.
Calcule la Cpo, Ke, t
frmulas:

, Vd, ABC y Clearence (Cl) con los datos obtenidos utilizando las siguientes

t1/2=0.693/Ke Cl=Vd(0.693)/ t1/2, Vd=D/Cpo, ABC= D/Vd.Ke donde:

t1/2 = Tiempo de vida media.
Cl = Clearence.
Vd= Volumen de distribucin.
D= Dosis.
Cpo = Concentracin plasmtica al tiempo cero.
Ke = Constante de eliminacin.
Tiempo (min)

Absorbancia (663 nm)

VII. DISCUSIN:
Elabore su discusin en base a los resultados obtenidos.
Haga un anlisis de cada uno de los parmetros obtenidos y explique el significado de ellos.
VIII. CUESTIONARIO:
1. Defina: tiempo de vida media, biodisponibilidad, clearence, volumen de distribucin.
2. Explique a que se refiere el modelo multicompartamental.
3. Cmo determinara los parmetros farmacocinticos in vivo. Explique ampliamente.
IX. BIBLIOGRAFA
1. Goodman G. A, Rall T.W., Nies A.S, Taylor P. Las bases farmacolgicas de la teraputica, 9.
Edicin, Interamericana pp 3-29,1996.
2. Levy R.H., Bauer L.A., Terapeutic drug monitoring, Raven press New York, 1986.
11

3. Rang H. P., Dale M. M., Farmacologa, 5a. Edicin, Editorial Elsevier, 99,114,115.
PRCTICA No. 3
MANEJO DE ANIMALES
I. TEMA
Manejo de Animales
II. OBJETIVO GENERAL
Ensear al alumno de un modo general algunas formas de marcar y manejar algunos animales de
laboratorio de uso mas frecuente.
III. INTRODUCCIN
La docencia, investigacin biolgica, biomdica y el desarrollo, produccin y control de
medicamentos, alimentos y otros insumos importantes para la salud requieren la utilizacin de
animales de laboratorio. El diseo de los experimentos que utilizan animales de laboratorio exige la
definicin detallada de las caractersticas genticas y ambientales ya que slo as se obtendrn
resultados reproducibles. Las acciones de los frmacos y su correcta evaluacin requiere de
animales de diferente especie por lo que es necesario el aprender su manejo para evitar lastimarlos
y que no sean un peligro cuando se trabaja con ellos. Adems es importante el marcarlos para poder
hacer su diferenciacin en cualquier momento, en especial cuando se hacen experimentos crnicos
en los que se prolonga su observacin por tiempo ms o menos largo. Las revistas cientficas
internacionales exigen que los investigadores firmen un documento donde se garantice que las
experiencias han sido efectuadas respetando las normas internacionales existentes, por ejemplo la
declaracin universal de los derechos de los animales(UNESCO,1996) y la gua para el cuidado y
uso de animales de laboratorio (NRC,1996): La firma de este documento significa aseverar que los
trabajos han sido previamente autorizados por comits de tica institucionales y que todo el personal
que interviene en el trabajo en relacin con los animales de laboratorio ha aprobado previamente un
curso de capacitacin en el tema.
Las responsabilidades del investigador para el cuidado de los animales incluyen:
El diseo y realizacin de los procedimientos con base en su relevancia para la salud
humana y animal, el avance del conocimiento y el bienestar de la sociedad.
El uso de las especies, calidad y nmero apropiados de animales.
El evitar o reducir al mnimo la incomodidad, estrs y dolor.
El uso apropiado de sedacin, analgesia y anestesia.
El establecimiento de metas y objetivos en el experimento.
Brindar un manejo apropiado a los animales, dirigido y realizado por personas calificadas.
La conduccin de experimentos en animales vivos slo por, o bajo la, estricta supervisin de
personas calificadas y con experiencia.

12

MANEJO
RANAS
La rana debe de tomarse con una franela hmeda para evitarle prdida de agua (respiracin
cutnea) y facilitar su manipulacin.
RATONES
Se toman del extremo de la cola con los dedos pulgar e ndice de la mano derecha. Con el pulgar y
el ndice de la mano izquierda se tomar un pliegue de la piel en la parte dorsal del cuello del ratn
en sentido longitudinal del mismo con lo que se le inmoviliza. As sujeto al animal se levantar de la
mesa girando al mismo tiempo la mano para poder usarla, (inyectar etc.) otro sitio de inyeccin
subcutnea es precisamente debajo de la piel del cuello se puede aprovechar el pliegue que se toma
entre pulgar e ndice y apoyando la mano con el animal ligeramente sobre la mesa. Los dedos
medio, anular y meique sirven para abrazar abdomen y tren posterior del animal. La mano derecha
queda libre para hacer la inyeccin clavando la aguja en la piel que queda sobre el pulgar e ndice y
en sentido ceflico caudal.
RATAS
Evtese el manejar a la rata con violencia, pues rpidamente aprende a defenderse y se torna difcil y
peligrosa se debe de tomar suavemente pero con seguridad con la mano derecha por el dorso y
colocarla en la mesa sin soltarla, o bien, por la cola, procurando que solamente las extremidades
anteriores se apoyen sobre la mesa. Con toda la mano izquierda sujete la piel del cuello en una
amplia zona, y mantenindola inmvil con la derecha se puede estirar la cola o las patas posteriores
(sin lastimarla) y se presenta otra persona, la que har la inyeccin o manipulacin necesaria.
Si va a inyectar en la cola se envuelve en una franela que inmovilizar al animal y lo deja en
posibilidad de poder inyectar.
CONEJO
No se debe tomar por las orejas, sino por la piel del cuello con la mano izquierda; la mano derecha le
servir para sujetar las extremidades posteriores (restirando sin lastimar) e inmovilizar al animal para
poderlo trabajar. Cuando se tiene la caja adecuadamente para la manipulacin del conejo basta con
acomodar al animal en el cepo de la misma. Esta caja permite el uso de las orejas para hacer
inyecciones en la vena. Puede colocrsele entre los dientes una pieza de madera con una
horadacin bocado; sujetndolo del hocico se introducir la sonda por la horadacin del bocado
(conviene humedecer la punta de las onda con glicerina o vaselina lquida si no interfiere con los
resultados que esperen, si no, simplemente con agua)
Si no se tiene caja se puede fijar el animal en la siguiente forma:
Se colocar el animal sobre la mesa con su tren posterior frente al operador y la cabeza hacia
delante. Se le pondr la mano la mano derecha sobre el dorso suavemente, la mano izquierda se
introducir por el lado izquierdo al animal debajo del trax deslizndola hasta sujetar los miembros
anteriores con los dedos medio, anular y meique, el pulgar e ndice permitirn sujetarse el maxilar
inferior. El conejo puede dar patadas por lo que la derecha servir para sujetarle los miembros
posteriores. En esta posicin otro operador podr sujetar el bocado entre el hocico del animal e
introducir la sonda.
13

Si se requiere inyeccin intraperitoneal el, operador que lo tiene sujeto podr colocarse el animal
libre el abdomen estirndolo un poco exponiendo la porcin ventral del animal para que pueda ser
inyectado por otro miembro del equipo de trabajo.
GATO
El gato se puede inmovilizar tomndole un amplio pliegue de la piel del cuello con toda la mano
izquierda en la mano derecha se sujetarn las patas posteriores restirando al animal se le colocar
sobre el abdomen, del operador (bien restirado se impiden los zarpazos y el pliegue de la piel del
cuello puede manejarse para inmovilizar la cabeza).
As puede hacerse inyeccin intraperitoneal (con las precauciones debidas) por otro operador. Si se
necesita pasar sonda gstrica se le colocar un bocado y sujetndole el hocico firmemente se
introducir la sonda como se ha indicado antes.
Siempre que se dirija una sonda al estmago deber tenerse en cuenta que la sonda efectivamente
sea introducida al esfago no a la traquea Cuando est en la traquea se percibe ruido de aire o
se ve como se expulsa si se coloca en la superficie del agua, o bien, como mueve una mechita de
algodn sostenida con una pinza frente a la boca de la sonda.
PERRO
Debe manejarse con bozal, si no lo tiene con una cuerda fuerte se hace un lazo con dos extremos
los suficientemente largos. Dependiendo de la agresividad del animal se tomarn las precauciones
necesarias para sostenerlo entre las piernas, la cabeza del perro hacia delante del operador.
El lazo que estar listo se le colocar en el hocico con las puntas hacia abajo y rpidamente se
jalarn cada una con una mano haciendo que el animal baje la cabeza y la pegue a su pecho, los
extremos del lazo se cruzaran primero sobre el cuello y despus por debajo del mismo para
finalmente anudarlos sobre el dorso del cuello del animal.
IV. METODOLOGA
MATERIAL BIOLGICO, EQUIPO Y REACTIVOS

Ratas (6 por equipo)

1 Trapo limpio o franela
Guantes de ltex

V. CUESTIONARIO
1. Por qu es importante saber manejar los animales de laboratorio?
2. Cules son los cuidados ambientales a considerar en animales de experimentacin?
3. Cmo se define un animal no tradicional de experimentacin (ANTE)?
4. Investigue como se debe realizar la disposicin final de los animales de experimentacin?
VI. BIBLIOGRAFA
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/grupo/rbioterio.PDF

14

Leader, R. W., and D. Stark. 1987. The importance of animals in biomedical research. Perspect. Biol.
Med. 30(4):470-485
NRC (National Research Council). In press. Occupational Health and Safety in the Care and Use of
Research Animals. A report of the Institute of Laboratory Animal Resources Committee on
Occupational Safety and Health in Research Animal Facilities. Washington, D.C.: National Academy
Press.

15

PRCTICA No. 4
MTODOS PARA MARCAR ANIMALES DE EXPERIMENTACIN
I. TEMA
Mtodos para marcar animales de experimentacin.
II. OBJETIVO
Identificar y aplicar los distintos mtodos de marcado de animales, para su correcta y completa
identificacin.
III. INTRODUCCIN
El marcar a los animales facilita su identificacin y distribucin para los diferentes ensayos en el
laboratorio.
RANAS
A las ranas se les coloca un cintillo de tela adhesiva en una de sus extremidades en tal forma que se
pueda anotar el peso corporal o el nmero que le corresponde para su identificacin posterior.
RATONES
Para experimentos agudos se utiliza el mtodo de manchado en el cual se le aplica un colorante por
medio de un hisopo en las diferentes regiones haciendo todas las combinaciones posibles. Por
ejemplo: CA cabeza; CO cola; MI pata delantera izquierda; PD pata trasera derecha. As quedara
CACO con manchas en la cabeza y en la cola.
Para experimentos subagudos crnicos se emplea el mismo procedimiento que se usa en las ratas
de perforaciones en las orejas.
RATAS
Se utiliza una pinza sacabocado y se hacen perforaciones de tal forma que en la oreja izquierda del
animal queden las unidades y en la derecha las decenas como lo indica el esquema.
Con esta forma sencilla se eliminan los nmeros ocho y nueve tanto igual sucede con el ochenta y el
noventa.
AVES
Se les coloca anillos metlicos en las patas que tienen grabado un nmero o con anillos plsticos de
colores diferentes.
CONEJOS Y CUYOS
Cuando todo un grupo de animales son de color, tamao y caractersticas semejantes se les colocan
grapas en las orejas que los identifican.

16

IV. METODOLOGIA
Utilizar diferentes marcajes utilizando colorantes y marcadores, diseando un cdigo de marcado.
V. CUESTIONARIO
1. Qu es un mtodo temporal de marcado?
2. Qu es un mtodo permanente de marcado?
3. Investigue cdigos de marcado de animales
VI. BIBLIOGRAFA
Guidelines for the use of animals in school science behavior projects, American Psychologist, Volume
36, Issue 6, June 1981, Page 686.
Ethical regulation and animal science: why animal behaviour is not so special, Animal Behaviour,
Volume 74, Issue 1, July 2007, Pages 15-22.

17

PRCTICA No. 5
VAS DE ADMINISTRACIN
I. TEMA
Vas de administracin.
II. OBJETIVO
Identificar y aplicar las distintas vas de administracin de frmacos en animales de laboratorio.
III. INTRODUCCIN
La administracin de un medicamento obliga a tener en cuenta los factores que modifican su
actividad, dichos factores pueden ser: su dosificacin, la frecuencia de administracin, la distribucin
del frmaco en el organismo, sus antagonismos tanto qumicos como farmacolgico, su efecto de
potenciacin, su tolerancia especfica, la edad del individuo y la va de administracin. Este ltimo
factor es quiz el ms importante de todos, ya que sino se elige una va de administracin correcta,
la actividad del frmaco puede atenderse o a veces nulificarse, en algunas ocasiones puede producir
efectos exagerados que resulten lesivos.
Las vas de administracin de frmacos son las rutas de entrada del medicamento al organismo, la
cual influye en la latencia, intensidad y duracin del efecto, por esta razn es de suma importancia
conocer sus ventajas y desventajas adems de cual de las vas de administracin de frmacos se
utiliza
en
una
situacin
particular.
Las diferentes vas de administracin de los frmacos dependen de su composicin qumica y en
algunas ocasiones de objetivo teraputico que se persigue, estas se pueden clasificar en:
Enterales y parenterales
VIAS DE ADMINISTRACIN
Va de
Patrn de absorcin
administracin
Intravenosa
Evita la absorcin,
efectos
inmediatos
potenciales, adecuada
para
administrar
grandes volmenes.
Subcutnea
Inmediata o sostenida.

Intramuscular

Oral

Utilidad especial

til en urgencias,
permite ajustar la
dosis,
til
para
administrar molculas
de alto peso molecular.
til para suspensiones
poco solubles y para
infiltrar implantes de
liberacin lenta.
Inmediata, en solucin Adecuada
para
lenta y sostenida con volmenes moderados.
preparados
de
depsito.
Variable, depende de Ms
cmoda
y
muchos factores.
econmica, por lo
general ms segura.

18

Limitaciones y
precauciones
Aumenta el riesgo de
efectos adversos, las
soluciones se deben
inyectar lentamente.
No es adecuada para
volmenes
grandes,
posible dolor o necrosis
cuando son irritantes.
Prohibida
durante el
tratamiento
con
anticoagulantes.
Es
importante
el
seguimiento del paciente,
biodisponibilidad variable.

IV. METODOLOGA
MATERIAL BIOLGICO, EQUIPO Y REACTIVOS
Ratas y ratones
Cnula intragstrica
Una jeringa de 5 ml
Una jeringa de 1 ml
Jeringas de insulina
Una aguja hipodrmica del N. 20
Una aguja hipodrmica de N. 27
Tijeras rectas
Vaso de precipitados de 600 ml largo
DESARROLLO EXPERIMENTAL
Administracin por va oral (p.o.)
Inmovilizar al animal (rata, ratn) en forma correcta con una mano y con la
otra mano introducir la cnula en la trompa en forma lenta y suave a lo largo
de la rama mandibular derecha, aqu el animal comienza a tragar y la cnula
se inserta dentro del esfago.
Va subcutnea (s.c.)
Realizar la administracin en sitios donde abunde tejido conectivo, ya
sea en el dorso o en los flancos del animal.
Se inserta la aguja en la piel paralela a la columna vertebral con un
ngulo de 30 a 45, en caso de utilizar ratn, no administrar un
volumen mayor de 2 ml.

Va intraperitoneal (i.p)
Sujetar al animal con una mano y con la otra mano inmovilizar la
pata izquierda, inclinar el animal con la cabeza hacia abajo para
producir un desplazamiento de las vsceras con el fin de no
lesionarlas.
Insertar la aguja en la piel en el cuadrante izquierdo inferior del
abdomen e introducir en la cavidad peritoneal, levantando la
aguja en contra de la pared abdominal para evitar la puncin en
el interior del intestino.
19

Va intramuscular (i.m.)
Inyectar al animal en la regin antero-lateral del muslo, el ngulo
de inyeccin con respecto a la piel debe ser de 90. No realizar
esta va de administracin en el ratn debido a que la masa
muscular es menor y se puede provocar un dao en las
estructuras vitales del tejido.

Va intravenosa (i.v.)
Inmovilizar al animal con ayuda de una franela. Aplicar calor o etanol en la cola del roedor
para dilatar las venas, stas se observaran cuando la cola es levantada y girada
lentamente en cualquier direccin, posteriormente introducir la aguja en un ngulo no
mayor de 45.

V. CUESTINARIO
1. Cul es la va ms comn para administrar medicamentos? Por qu?
2. Menciona tres vas de administracin de aplicacin parenteral
3. Cmo afecta el efecto del primer paso la biodisponibilidad de un frmaco?
4. Menciona en que va de administracin se evita el proceso de absorcin del frmaco.
Por qu?
VI. BIBLIOGRAFIA:
1. Goodman G. A, Rall T.W., Nies A.S, Taylor P. Las bases farmacolgicas de la teraputica, 11.
Edicin, Interamericana pp 3-29,2006.
2. Quezada A. Introduccin al manejo de animales de laboratorio: roedores y pequeas
especies. Mrida: Universidad Autnoma de Yucatn; 1997.

20

PRCTICA No. 5

PRCTICA No. 6
ANESTSICOS VOLTILES
I. TEMA
Anestsicos voltiles.
II. OBJETIVO:
Anestesiar y observar los efectos de los anestsicos inhalables.
III. INTRODUCCIN:
Los anestsicos son frmacos depresores del sistema nervioso central (S.N.C.). Los anestsicos
producen la prdida reversible de la conciencia que permite llevar a cabo operaciones quirrgicas.
La mayora de ellos son gases o lquidos voltiles administrados por inhalacin.
Un anestsico general de inhalacin se caracteriza por:
1) Induccin y recuperacin rpidas y agradables.
2) Cambios rpidos en la profundidad de la anestesia.
3) Relajacin adecuada del msculo estriado.
4) Margen amplio de seguridad.
5) Ausencia de efectos txicos.
Los anestsicos de inhalacin que se utilizan ampliamente son xido nitroso, halotano, enflurano,
isoflurano, sevoflurano y desflurano.
En 1920 Guedel describi las etapas de la anestesia general y dividi a la tercera, la anestesia
quirrgica, en cuatro planos:
I.
Etapa de analgesia
II.
Etapa de delirio
III.
Etapa de anestesia quirrgica
IV.
Etapa de depresin bulbar
En la actualidad solo se emplea con frecuencia el trmino etapa dos que significa un estado de
delirio en el paciente anestesiado de manera parcial.
Algunos criterios que se pueden valorar para anestesia general son, si el paciente parpadea cuando
se le tocan las pestaas, si esta deglutiendo, si su respiracin es irregular en cuanto a frecuencia y
profundidad, la prdida del reflejo palpebral y el desarrollo de la respiracin rtmica indican el inicio
de la anestesia quirrgica.
Mecanismos de Accin
La mayor parte de las teoras de la accin anestsica se basan en las caractersticas fisicoqumicas
de los frmacos anestsicos. La explicacin ms lgica consiste en que el efecto de los anestsicos
depende fundamentalmente de potenciar la descarga de neurotransmisores a nivel de las sinapsis
inhibidoras e inhibir las sinapsis excitadoras. Es evidente que varios anestsicos deprimen
preferentemente el sistema reticular activador ascendente, como resultado hay un descanso en la
actividad elctrica de la corteza que puede ser registrada en el electroencefalograma (EEG).
21

PRCTICA No. 5

Ferguson estableci que la misma presin parcial en el cerebro con diferentes anestsicos produce
el mismo grado de depresin, cuando la administracin es continua y prolongada a un nivel seguro
de anestesia y las presiones parciales del anestsico en los alveolos y en los tejidos se encuentran
en equilibrio, la actividad termodinmica en el sitio de administracin es proporcional a la que se
encuentra en el tejido nervioso.
La actividad termodinmica esta dada por la frmula:
P

m RT ln
Ps

Donde:
m
=
Actividad
termodinmica
R = Constante de los gases

T = Temperatura absoluta
P = Presin parcial del anestsico en alvolos
Ps = Presin de vapor saturado del anestsico puro
Los anestsicos generales voltiles actan sobre las estructuras nerviosas en un orden determinado.
1. Corteza cerebral.
2. Centros subcorticales.
3. Fibras sensitivas de la mdula espinal.
4. Centros bulbares.
IV. METODOLOGA
MATERIAL BIOLGICO, EQUIPO Y REACTIVOS.

Ratas (1 por equipo)

Frascos de vidrio de 3 L
Papel filtro
Pinzas de diseccin
Aguja hipodrmica del # 20
Cronmetro
Guantes de latex
Jeringas de 5 ml

DESARROLLO EXPERIMENTAL
1. ETER
a) Pesar una rata y colocarla en el frasco, cerrarlo sin poner el tapn de hule. Observar al
animal, sus movimientos, sus reflejos y frecuencia respiratoria,
b) Por el orificio, vaciar 1.5 ml de ter sobre un papel filtro previamente colgado a la tapa del
frasco, colocar el tapn de hule.
c) Observar los reflejos del animal como en el inciso a) hasta que el animal quede inmvil,
CUIDADO! No sobre pasar la exposicin al ter. Anotar: tiempos, frecuencias.
22

PRCTICA No. 5

d) Sacar al animal del frasco y observar sus reflejos, apretando una parta con unas pinzas,
midiendo el tiempo de recuperacin.
2. CLOROFORMO
a) Con otro animal repetir el proceso anterior poniendo 0.75 ml de cloroformo, midiendo la
misma secuencia que con el ter.
V. RESULTADOS
Realizar las siguientes observaciones y anotar.
1. Movimientos del animal.
2. Reflejos.
3. Frecuencia respiratoria.
VI. CUESTIONARIO
1. Mencione las diferencias entre anestesia general y local.
2. Investigue la teora de la liposolubilidad para explicar el mecanismo de accin de los anestsicos
generales.
3. De ejemplos de anestsicos generales y locales.
VII. BIBLIOGRAFA
Kalant, H. Roschlau W.H. (1998) Principios de farmacologa. Editorial Oxford.278-316.

23

PRCTICA No. 8

PRCTICA No. 7
DOLOR Y ANALGESIA
I. TEMA
Dolor y analgesia
II. OBJETIVO GENERAL
Que el alumno comprenda la importancia del sistema somatosensorial, as como su participacin en
el control del dolor a travs de estrategias farmacolgicas.
III. OBJETIVO ESPECFICO
Analizar el mecanismo de accin de un analgsico.
IV. INTRODUCCIN
Existen dos tipos de sensibilidad: sensibilidad especial, que procede de los rganos de los sentidos,
e incluye las sensibilidades auditiva, visual, gustativa y olfativa; y sensibilidad general. El sistema
somatosensorial procesa informacin acerca del tacto, posicin, temperatura y dolor. Se denomina
nocicepcin al fenmeno de deteccin, transduccin y transmisin de un estmulo nocivo. Los
receptores involucrados en la transduccin de estas sensaciones son los mecanoreceptores y
nocireceptores. Estos ltimos reaccionan a los estmulos nocivos capaces de causar dao tisular.
Hay dos tipos principales de nocireceptores:
a) Trmicos o mecnicos. Los cuales son inervados por fibras nerviosas eferentes mielinizadas
finas tipo A y responden a estmulos mecnicos como pinchazos dolorosos con objetos
agudos.
b) Polimodales. Estn inervados por fibras C no mielinizadas y reaccionan a estmulos
mecnicos o qumicos y al calor muy intenso.
Analgesia.- (Patologa) Falta o supresin de toda sensacin dolorosa, sin prdida de los restantes
modos de sensibilidad.
Los analgsicos pueden ser clasificados, por su sitio de accin en tres tipos:
1. Accin central (opioides y no opioides).
2. Accin perifrica (no opioides).
3. Accin local (anestsicos locales).
Por definicin, todos los analgsicos proveen alivio del dolor con efectividad variable. Sin embargo
cuando se elige un agente farmacolgico es importante considerar la condicin del paciente y el tipo
de dolor que experimenta. Por lo tanto los efectos agudos se deben medir durante la fase de
titulacin analgsica y durante la fase de mantenimiento se enfatiza sobre el perfil de seguridad y
eficacia a largo plazo.
24

PRCTICA No. 8

V. METODOLOGA
MATERIAL, EQUIPOS Y REACTIVOS

Ratones albinos, machos de 20 g de peso (todos las disponibles en el grupo). Es importante

que no hayan ingerido comida por lo menos 3 h antes de la realizacin de la prctica.
Ratas de 250 a 350 g de peso (todas las disponibles en el grupo).
1 cnula intragstrica para rata.
Mortero en caso de que la forma farmacutica sea tableta o cpsula
Pinzas para ropa
Cronmetro
Marcador indeleble
Guantes
Vaso de precipitado de 50 ml
Analgsicos (tramadol, indometacina)
Agua destilada

DESARROLLO EXPERIMENTAL
EXPERIMENTO 1: MODELO MECNICO DE DOLOR
1. A un control de ratones se le administra s.s 0.9%.
2. A los ratones tratados se les administra:
3. Por va oral 0.5 ml/20 g por va oral los medicamentos a probar de acuerdo a las siguientes
dosis:
Amidopirina 160 mg/Kg
Acido acetilsaliclico. 850 mg/Kg
Diclofenaco...50 mg/Kg
4. 30 minutos despus se coloca la pinza al ratn y se observa que no busque ms quitarse la
pinza, comparado con los testigos que giran para tratar de quitrsela.
EXPERIMENTO 2: MODELO TRMICO DE DOLOR
1. Graduar una placa a 58oC, con la ayuda de un vaso de precipitados con agua y un
termmetro (fig. 1).
2. Ensayar la reactividad del ratn al colocarlo sobre la placa caliente colocando un vaso de
precipitados grande para evitar que se escape (fig2).
3. Marcar y pesar los animales y administrar de acuerdo a lo mencionado anteriormente.
4. Despus de 30 min de la administracin colocarlo sobre la placa caliente y observar.
(Despus de administrado el frmaco si no responde a los 9 seg retirar de la placa caliente.
Repetir cada 30 min durante 2 horas y llenar la sig. Tabla:
Analgsico
30 min
60 min
90 min
120 min

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PRCTICA No. 8

EXPERIMENTO 3: Modelo con formalina

a) Test de dolor (nocicepcin)
1. Dividir a los animales (ratas) en 2 grupos con 3 integrantes cada uno.
2. Aclimatar los animales en cajas abiertas de plexigls durante 30 minutos antes de realizar la
prueba (figura 1).
3. Despus del periodo de aclimatacin realizar en el animal una inyeccin subcutnea, en la
superficie dorsal de la pata trasera derecha de 50 l de formalina (figura 2).
4. Posteriormente, se procede a contabilizar la incidencia de sacudidas espontneas de la pata
donde se aplic la inyeccin, el conteo se realiza durante 1 minuto cada 5 minutos durante
60 minutos. Colocar un espejo en ngulo de 45 detrs de la cmara de observacin para
tener una completa visin del movimiento de la pata.
a) Test de analgesia (antinocicepcin)
1. Administrar 30 mg/kg p.o. de indometacina en la rata e inmediatamente despus introducir al
animal en las cajas de plexigls para su aclimatacin.
2. 1 hora despus de la anterior administracin, realizar la inyeccin intraplantar de 50 l
formalina.
3. Contabilizar la incidencia de sacudidas espontneas de la pata donde se aplic la inyeccin,
el conteo se realiza durante 1 minuto cada 5 minutos durante 60 minutos.
4. Realizar una grfica donde se compare el nmero de sacudidas de pata vs. tiempo (grfica
1). Determinar el rea bajo la curva (AUC, por sus siglas en ingls) de la grfica y calcular el
porcentaje de antinocicepcin del frmaco utilizado, de acuerdo con la siguiente frmula:

Grfica 1: Cuantificacin de la nocicepcin producida por la inyeccin intraplantar de 50 l de

formalina.

26

PRCTICA No. 8

Figura 1: Aclimatacin de las ratas en cmaras

de plexigas.

Figura 2: Administracin intraplantar en la rata.

VI. RESULTADOS
Experimento 1: Se determina el porcentaje de los animales que para una dosis determinada son
indiferentes a la presin
Experimento 2: analizar la tabla correspondiente
Investigar y describir el mecanismo de accin de (los) analgsico (s) empleado (s)

Investigar la clasificacin de los analgsicos y realizar una tabla descriptiva sobre las
caractersticas de cada clasificacin incluyendo 5 ejemplos de frmacos.

Realice el anlisis de resultados y sus respectivas conclusiones.

Fig. 1

fig.2

VII. CUESTIONARIO
1. Mencione los diferentes grupos de frmacos analgsicos y d algunos ejemplos.
2. Investigue el mecanismo de accin de los analgsicos antinflamatorios no estereoideos
3. Describa el mtodo de Eddy y Leimbach (plancha caliente) para evaluar la actividad
analgsica
4. Qu otros mtodos existen para evaluar la actividad analgsica, descrbalos?
5. Defina que es el periodo de latencia de un Anestsico Local.
6. Investigue a que se refiere el trmino umbral del dolor.
7. Explique las dos fases de dolor que se producen en el modelo con formalina. Qu
mediadores intervienen?
8. En qu fase acta la indometacina? Fundamente su respuesta.
27

PRCTICA No. 8

VIII. BIBLIOGRAFA
Barranco Ruiz F., Principios de Urgencias, Emergencias y Cuidados Crticos, 3 Edicion, Espaa,
1986.
Benson J., Thurmon J., Tranquilli W., Fundamentos de Anestesia y Analgesia en Pequeos
Animales, Ed. Masson, 1999.
De Paz-Campos, M.A., Chvez-Pia, A.E., Ortiz, M.I., Castaneda-Hernndez, G. (2012). Evidence
for the Participation of ATP-sensitive Potassium Channels in the antinociceptive effect of Curcumin.
Korean J Pain, 25, 221-227.

28

PRCTICA No. 8

PRCTICA No. 8
MODELO EXPERIMENTAL DE ACTIVIDAD CONVULSIVANTE
I. TEMA
II. OBJETIVO GENERAL
Estudiar el modelo convulsivante producido por pilocarpina.
III. OBJETIVOS ESPECFICOS

Evaluar la capacidad anticonvulsivante del fenobarbital sdico.

IV.INTRODUCCIN
La epilepsia es una de las enfermedades neurolgicas ms frecuentes, y adems conlleva una tasa
de consecuencias negativas muy importante, tanto para el paciente como para los familiares. Su
manifestacin clnica principal es la aparicin de crisis epilpticas recurrentes, que en el 70-80% de
los casos se controlan con la medicacin 1.
El uso de modelos animales para el estudio de la epilepsia, empleando ratas en desarrollo, permite
al investigador entender los mecanismos que generan las crisis epilpticas, los que las detienen, los
procesos de epileptognesis, as como la identificacin de posibles terapias farmacolgicas. Algunos
de los modelos experimentales de epilepsia en rata que actualmente son utilizados son los
siguientes:
Agente proepilptico

Agente causante
Pilocarpina

Qumico
cido kanico
Glutamato monosdico
Kindling elctrico
Fsico

Electrochoques
Hipertermia

Gentico

Tipo de actividad epilptica

generada
Crisis
parciales
complejas
secundariamente
generalizadas,
status epilepticus.
Crisis
parciales
complejas
secundariamente
generalizadas,
status epilepticus.
Crisis tnico-clnicas generalizadas.
Crisis
parciales
complejas
secundariamente generalizadas.
Crisis mioclnicasCrisis
tnicoclnicas.
Crisis
parciales
complejas
secundariamente generalizadas.

Ratas genticamente
propensas a crisis de ausencia
GAERS (GeneticAbsence
Crisis de ausencia.
Epilepsy Rat from Strasbourg).
Ratas Genticamente

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Tipo de protocolo
Agudo, crnico
Agudo, crnico
Agudo, crnico
Crnico
Agudo
Agudo, crnico
Descargas
electrogrficas tipo
espiga onda
espontneas
Sonido

PRCTICA No. 8
Propensas a la Epilepsia
GEPR (GeneticallyEpilepsyProne Rats).

Crisis convulsivas primaria

o
secundariamente
generalizadas.
(clnicas/tnico-clnicas).

V. METODOLOGA
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Ratas Wistar de 220 a 250 g de peso.

Solucin salina (s.s. 0.9%).
Fenobarbital sdico.
Clorhidrato de pilocarpina.
3 Vasos de precipitados de 10 ml

DESARROLLO EXPERIMENTAL
Modelo convulsivante con clorhidrato de pilocarpina
1. Se utilizarn ratas Wistar de 220 a 250 g de peso.
2. Dividir los animales en tres grupos; grupo 1: control, grupo 2: grupo de dao, grupo 3: grupo
con tratamiento.
3. Administrar 10 mg/kg i.p de fenobarbital sdico al grupo 3. Treinta minutos ms tarde
administrar al grupo 1, solucin salina 0.9% i.p., a los grupos 2 y 3 administrar 100 mg/kg i.p.
de clorhidrato de pilocarpina.
VI. RESULTADOS
Observar la presencia y frecuencia de crisis parciales en los animales a los cuales se les administra
pilocarpina y en los animales tratados con el anticonvulsivante.
VII. CUESTIONARIO
1.
2.
3.
4.
5.

Mencione y describa otros modelos experimentales de epilepsia.

Cul es el modelo experimental ms usado y porque?
Cul es el mecanismo de accin de la pilocarpina?
Describa a detalle el efecto antiepilptico del fenobarbital sdico.
Mencione otros frmaco antiepilpticos que podran ser utilizados en el modelo estudiado.

VIII. BIBLIOGRAFA
Hauser WA, Annengers JF, Rocca WA. Descriptive epidemiology of epilepsy: contributions of
population-based studies from Rochester, Minnesota. Mayo Clinic Proceedings, 1996;7:576-86.

30

PRCTICA No. 8

SISTEMA NERVIOSO AUTNOMO

I. TEMA
Efecto de los frmacos simptico y parasimpaticomimticos sobre la fisiologa del ojo.
II. OBJETIVO GENERAL
Que el alumno identifique las principales acciones del sistema nervioso autnomo sobre la funcin
ocular.
III. OBJETIVO ESPECFICO
Que el alumno experimente las diversas acciones de los frmacos, agonistas o antagonistas de la
adrenalina y de la acetilcolina sobre las principales funciones del ojo.
IV. INTRODUCCIN
El sistema nervioso autnomo se divide a su vez en el sistema nervioso simptico y parasimptico,
el primero se caracteriza por que sus fibras posganglionares son largas y secretan noradrenalina
(NA), mientras que en el segundo las fibras posganglionares son cortas y, al igual que las
preganglionares en los dos sistemas, secretan acetilcolina (ACh), por lo que los ganglios estn
localizados en las cercana de los rganos inervados. La musculatura intrnseca del ojo, es decir, el
iris y el msculo ciliar, est controlada por el sistema nervioso autnomo y este rgano constituye un
lugar muy conveniente para estudiar las acciones de dicho sistema y su modificacin por accin de
las drogas.
Las fibras simpticas posganglionares adrenrgicas se originan en el ganglio cervical superior y
alcanzan el ojo por los nervios ciliares largos, mientras que las fibras parasimpticas colinrgicas
nacen en el ganglio ciliar y llegan al ojo por los nervios ciliares cortos.
El sistema simptico inerva el msculo radial y adems las fibras musculares lisas situadas en los
prpados (msculo orbital). Su estimulacin es va los receptores adrenrgicos por la NA y provocan
la dilatacin de la pupila (midriasis) y mayor amplitud de la hendidura palpebral, la parlisis del
simptico provoca la constriccin pupilar (miosis) y la cada del prpado superior (ptosis) y
disminucin de la hendidura palpebral.
El sistema parasimptico inerva el msculo circular o esfnter de la pupila y el msculo ciliar. En este
sentido hay que sealar que el normalmente, el cristalino se encuentra aplanado por la tensin
ejercida por las fibras zonales (ligamentos radiales), cuando se contrae el msculo ciliar se relaja
dicha tensin, de manera que el cristalino, por su elasticidad natural, se hace ms biconvexo, dando
lugar a la acomodacin para la visin cercana. La estimulacin del parasimptico, por la accin
muscarnica de la ACh, provoca miosis y acomodacin para la visin cercana, mientras que la
parlisis produce midriasis y prdida de la acomodacin (ciclopejia).
NOTA: Es importante que al llegar el alumno al laboratorio haya investigado la fisiologa del ojo y
tenga claro cada una de las partes anatmicas mencionadas arriba.

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PRCTICA No. 8

V. METODOLOGIA
MATERIAL Y REACTIVOS

Ratas hembras albinas de la misma edad y de un peso aproximado a los 200 g.

Acetil--metilcolina
Regla transparente
1 texto para leer
Cinta mtrica
Hoja de datos
Cronmetro
Diferentes frmacos en presentacin de soluciones oftlmicas para identificacin, al menos 5.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
PARTE I
Para la realizacin de esta prctica se requiere de voluntarios sanos, que no padezcan en el
momento de hacer la prctica de alguna infeccin ocular o alergia. De preferencia se requiere a
un voluntario por equipo.
A cada uno de los voluntarios se le van a aplicar de 3 a 5 gotas de la solucin oftlmica
problema y se hecha a andar el cronmetro y observar constantemente su ojo para determinar el
tiempo en el que comienzan a aparecer signos relacionados con la aplicacin de la droga. Es
necesario que el voluntario tambin reporte cualquier sntoma que presente.

Despus de que aparece el efecto hay que hacer mediciones cada 10 minutos durante 1 hora.
Los parmetros a determinar en cada voluntario son: dimetro de la pupilar (DP) y distancia
menor a la que puede leer con claridad un texto (DVC= distancia de la visin cercana), adems
de anotar si hay irritacin o por el contrario desaparecen los signos de esta o bien si hay
cambios en la posicin del prpado superior.

PARTE II

La acetil -metilcolina es inyectada por va intraperitoneal a cada animal a la vspera del

experimento con el fin de verificar la respuesta lagrimal de los animales seleccionados. Al da
siguiente, se renueva la prueba inyectando al tiempo 0 en las mismas condiciones el
parasimpaticoltico a estudiar (la Atropina sirve de referencia).
Las inyecciones de acetil--metilcolina son renovadas a los 3, 15, 45 y 75 minutos, a partir del
tiempo 0.
Despus de cada inyeccin de la sustancia colinrgica, se busca poner en evidencia la
lagrimacin. Si el fenmeno no aparece al trmino de 3 minutos, el aparecimiento despus es
considerado como improbable y la proteccin es total.

VI. RESULTADOS
32

PRCTICA No. 8

Llenar la siguiente tabla con la informacin obtenida de los voluntarios.

0 min
10 min
20 min
30 min
tiempo
DVC DP
DVC DP DVC DP DVC
Droga DP
(mm) (cm) (mm) (cm) (mm) (cm) (mm) (cm)
1
2
3
4
5
6

40 min
60 min
DP
DVC DP
DVC
(mm) (cm) (mm) (cm)

Observaciones:
Frmaco:
1:_______________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
2:_______________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
3:_______________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
4:_______________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
5:_______________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
6:_______________________________________________________________________________
________________________________________________________________________________
De acuerdo a los efectos de cada una de las drogas sobre los voluntarios los alumnos identificarn
la droga que se coloc en el ojo de cada uno de sus compaeros.
VII. CUESTIONARIO
1. Mencione las funciones del sistema nervioso autnomo.
2. Describa las principales acciones que tiene el sistema nervioso autnomo sobre el ojo.
3. Describa qu es miosis y que es midriasis.
4. Mencione que es la acetilcolina, que efectos tiene en el ojo y mencione algunos agonistas y
antagonistas de la misma.
VIII. BIBLIOGRAFA
1. Goodman y Gilman. Las bases farmacolgicas de la teraputica. Editado por Hardman y
Limbird, 11. edicin. Mc Graw Hill.2006.
2. Manuel Litter .Farmacologa experimental y clnica. Sptima edicin o ms reciente. Editorial El
Ateneo.

33

PRCTICA No. 8

PRCTICA No. 10
DIURTICOS
I. TEMA
Diurticos
II. OBJETIVO GENERAL
Determinar la accin de los diurticos sobre la excrecin renal, a partir de los cambios en el
volumen y la composicin urinaria posterior al uso de diurticos.
Analizar las principales alteraciones hidroelectrolticas y cido-base posteriores al uso de
diurticos.
III. OBJETIVOS ESPECFICOS
Administrar Furosemida y acetazolamida y determinar los efectos en la excrecin de orina en la rata.
Determinar como cambia la composicin de la orina cuando se administra un diurtico determinando
volumen, pH y cloruros.
IV. INTRODUCCIN
Los diurticos son frmacos que aumentan la tasa de flujo urinario, incrementando la tasa de
excrecin del Na+ (natriursis) y de un anin acompaante, por lo general Cl -. En el organismo el
NaCl es el principal determinante del volumen de lquido extracelular y casi todas las aplicaciones
clnicas de los diurticos se dirigen a reducir dicho volumen al disminuir el contenido corporal total de
NaCl. Un desequilibrio sostenido entre la ingestin del sodio en la dieta y la prdida del sodio es
incompatible con la vida. Un balance positivo sostenido del sodio dara como resultado la sobrecarga
de volumen con edema pulmonar y uno negativo sostenido originara disminucin del volumen y
colapso cardiovascular.
Sin embargo, existen una serie de mecanismos que mantienen el equilibrio hdrico como son: la
activacin del sistema nervioso simptico y el eje renina-angiotesina-aldosterona, decremento de la
presin arterial, incremento de la expresin de transportadores epiteliales renales y alteraciones de
las hormonas natriurticas como el pptido natriurtico auricular.
Los diurticos se pueden clasificar de acuerdo a su mecanismo de accin en:
a) Inhibidores de la anhidrasa carbnica (acetazolamida)
b) Diurticos osmticos (urea)
c) inhibidores del simporte de Na+-K+-2Cl- (Furosemida)
d) Inhibidores del simporte Na+Cl- (clorotiazida)
e) Inhibidores de los canales de Na+ (amilorida)
f) Antagonistas de los receptores de mineralocorticoides (espironolactona)

34

PRCTICA No. 8

La furosemida es un inhibidor del simporte en la rama ascendente gruesa del asa de Henle que es
sumamente eficiente por lo que se denomina diurticos de lmite alto. La eficacia se debe a una
combinacin de factores.
1) bajo situaciones normales, alrededor del 25% de la carga de solutos filtrada se reabsorbe
en la rama ascendente gruesa.
2) Los segmentos de neurona posteriores a esta ltima rama no poseen la capacidad de
resorcin para rescatar el flujo de lquidos rechazado que sale de dicha rama.
V. METODOLOGA
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS
9. Ratas (3 por equipo)
10. 1 Jaula metablica
11. Matraz aforado de 10 ml
12. Matraz aforado de 50 ml
13. Pipetas de 1, 5 y 10 ml
14. Jeringas de insulina
15. Papel pH
16. Furosemida
17. Nitrato de plata
DESARROLLO EXPERIMENTAL
a.
b.
c.
d.
e.
f.

Armar la jaula metablica como se indica en el instructivo

Pesar y marcar una rata
Preparar una solucin de furosemida que contenga una concentracin de 1 mg/ml
Administrar 0.1, 0.2 y 0.3 ml de la solucin de furosemida a cada rata por va intraperitoneal.
Medir el volumen de orina eliminado, tomando muestras a las 1, 2, 3, 4 hrs. despus de
haber administrado la solucin y determinar pH y cloruros aadiendo una gota de una
solucin de nitrato de plata 0.01 N, a cada muestra de orina.
Indicar el resultado marcando con + cuando la prueba sea positiva.

VI. RESULTADOS
Reportar los resultados de todo el grupo reportando todas las dosis administradas y realizar sus
conclusiones de acuerdo a los datos obtenidos.
VII. CUESTIONARIO
1.
2.
3.
4.
5.

D la definicin de diurtico.
Mencione la clasificacin de los diurticos segn su mecanismo de accin.
Explique por qu determinamos cloruros en las muestras de orina.
Tuvo efecto el diurtico utilizado? Explique su respuesta.
Qu sugerencias tiene para mejorar la prctica?

VIII. BIBLIOGRAFA
1. Goodman and Gilman. Las Bases farmacolgicas de la Teraputica. 11 Edicin. 2006.
35

PRCTICA No. 8

2. M. Al-Obaid et. al Anal. Profiles Drug Subs. 18, 153 193. 1989.
3. Flores Jess Farmacologa Humana Ed. Manual Moderno 8 Edicin 2004.

36

PRCTICA No. 11
EFECTO DE UN ANTICIDO EN EL ESTOMAGO
I. TEMA
II. OBJETIVO GENERAL
Determinar la capacidad neutralizante in vitro de diferentes anticidos comerciales.
III. OBJETIVOS ESPECFICOS
Explicar como acta un anticido para neutralizar el cido producido por el estmago.
Determinar a partir de las grficas obtenidas el tiempo necesario y los mililitros en que los
anticidos alcanzan el pH teraputico (pH 3.5).
IV. INTRODUCCIN
Las lceras ppticas se originan en un desequilibrio de los mecanismos de secrecin de cido, los
llamados factores agresivos (secrecin de cido gstrico, pepsina, infeccin de Helicobacter pylori) y
los factores protectores de la mucosa (secrecin de bicarbonato, secrecin de moco, produccin de
postaglandinas) y su tratamiento racional tienen la finalidad de restaurar este equilibrio. Los
frmacos que reducen la secrecin de cido gstrico son los antagonistas de los receptores H 2 de la
histamina y los inhibidores de la bomba H +K+ATPasa de la clula parietal, tambin son tiles los
citoprotectores como el sucralfato, bismuto coloidal y el agonista de las prostaglandinas el
misoprostol y los anticidos.
Los anticidos constituyen un grupo de medicamentos utilizados para neutralizar el jugo gstrico
(cido clorhdrico) secretado por las clulas de la pared gstrica.
Desde el punto de vista cuantitativo todos los anticidos son similares en trminos de su capacidad
para neutralizar el cido, que se define como la cantidad de HCl 1.0 N (expresada en
miliequivalentes) que puede hacerse llegar a un pH de 3.5 en 15 minutos.
El proceso de neutralizacin entre el anticido y el jugo gstrico (HCl) es el siguiente:
HCl (cido del estmago) + Anticido (base dbil)

H 2O + CO2 + Sales

Segn su poder neutralizante se pueden clasificar en dos grupos:

A) Los anticidos fuertes
Dentro de este grupo se encuentran el bicarbonato de sodio, el xido de magnesio y el carbonato
de calcio.
B) Los anticidos dbiles
37

Dentro de este grupo se encuentran diversas preparaciones que contienen aluminio como gel
(hidrxido de aluminio).
V. METODOLOGA
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Potencimetro
Electrodo de pH
Vaso de precipitados de 250 ml
Agitador de vidrio
Barra magntica
Bureta
Soporte universal
Parrilla de agitacin
Solucin Buffer pH 7.0
Solucin Buffer pH 4.0
Solucin de cido clorhdrico (HCl) 0.1 M
2 anticidos de marcas comerciales diferentes.

DESARROLLO EXPERIMENTAL
1. Montar el dispositivo como se muestra en la figura 1

Soporte universal

Electrodo de pH

HCl 0.1 M
Agitador magntico
Agitador

Figura 1.
2. Aadir 100 ml de solucin de HCl 0.1 M.
3. Adicionar gota a gota con una bureta el anticido a probar y determinar el pH cada minuto
durante 30 minutos.
38

4. Elabore una grfica de tiempo contra pH y otra de volumen de anticido (ml) contra pH
5. Registre los mililitros necesarios para llegar a un pH de 3.5.
VI. RESULTADOS
Determine cual de los anticidos probados tienen mayor capacidad neutralizante, realizando una
tabla comparativa con todos los anticidos probados y realice sus conclusiones.
Anticido

Componentes de la
formulacin

ml necesarios para llegar

a un pH de 3.5

VII. CUESTIONARIO
A. Definir que es un anticido.
B. Investigar cmo se produce el cido clorhdrico en el estmago
C. Investigue los grupos de frmacos que inhiben la produccin de cido clorhdrico e indique
su mecanismo de accin.
D. La eficacia de un anticido depende de la naturaleza del principio activo, de su cantidad o
de ambos?
E. De acuerdo a sus resultados, Cul de los anticidos es ms eficaz para controlar la
acidez?
VIII. BIBLIOGRAFA
1. Goodman and Gilman. Las Bases Farmacolgicas de la Teraputica. 11 Edicin. 2006.
(http://rapidshare.com/files/71989949/goodman_gilman_s_the_pharmacological_basis_o
f_therapeutics_-_11th_ed_2006.rar).
2. Avendao C. Introduccin a la Qumica Farmacutica. 2a. Ed. Editorial McGraw- HillInteramericana. Madrid, ESPAA. 2001.

39

PRCTICA No. 12
EFECTO PROTECTOR DE ANTIACIDOS EN LA RATA
I. TEMA
Actividad ulcerognica en la rata
II. OBJETIVO GENERAL
Estudiar el modelo ulcerognico con etanol absoluto en la rata.
III. OBJETIVOS ESPECFICOS

Evaluar la capacidad gastroprotectora de carbenoxolona en el modelo ulcerognico con

etanol absoluto.

IV.INTRODUCCIN
Actualmente, las afecciones gstricas producidas por diversos factores tales como: el estrs, dieta,
tabaco, alcohol y ciertos medicamentos constituyen un importante problema de salud pbica debido
a su alta incidencia y morbilidad. Se estima que aproximadamente el 20% de los individuos pueden
sufrir ulceraciones ppticas durante su vida, siendo sta una de las patologas ms importantes del
aparato digestivo y que constituye un problema mdico-social de transcendencia econmica a
escala mundial2.
En los ltimos aos, las investigaciones en modelos experimentales como: ligadura de ploro, dao
gstrico inducido con indometacina, ulceraciones con etanol, por mencionar algunas, han permitido
esclarecer muchas de las incgnitas que existen alrededor de las afecciones gstricas en pacientes.
El modelo de ulceracin gstrica inducida con etanol produce cambios histopatolgicos en la
mucosa del estmago del ratn y rata, produciendo lesiones hemorrgicas erosivas y agudas,
edema y necrosis1,3. Estos modelos tambin han permitido evaluar la actividad gastroprotectora de
algunas plantas utilizadas en la medicina tradicional, as como, algunos frmacos existentes en el
mercado con otros usos teraputicos.
V. METODOLOGA
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Ratas de 220 a 250 g de peso.

Cnula intragstrica
Solucin salina (s.s 0.9%).
Etanol absoluto
40

Carbenoxolona
Regla transparente

DESARROLLO EXPERIMENTAL
Modelo de dao gstrico con etanol absoluto
1. Se utilizarn ratas Wistar de 220 a 250 g de peso.
2. Dividir los animales en dos grupos; grupo 1: control y grupo 2: grupo de dao gstrico.
3. Dejar las ratas en ayuno de 18 a 20 horas antes de realizar el experimento, administrar slo
agua.
4. Se induce el dao gstrico de acuerdo al modelo descrito por Robert (1979). Las ratas son
administradas con 1 ml de etanol absoluto por va intragstrica utilizando una cnula
adecuada, el grupo control recibe s.s 0.9 % p.o.
5. Dos horas despus de la anterior administracin, sacrificar las ratas con sobredosis de ter
etlico.
6. Se remueve el estmago y se abre a lo largo de la curvatura mayor. Medir el rea de lesin
(mm2) de cada estmago con una regla y determinar el promedio de dao gstrico de cada
grupo tratado (Chvez Pia et al 2010).
Modelo de gastroproteccin con carbenoxolona.
1.
2.
3.
4.
5.

Administrar 30 mg/kg p.o de carbenoxolona a cada rata del grupo de gastroproteccin.

30 minutos ms tarde, inducir el dao gstrico con etanol absoluto.
Sacrificar las ratas 2 horas despus de inducir el dao gstrico.
Remover el estmago y abrir por la curvatura mayor.
Medir el rea de lesin gstrica.

VI. RESULTADOS
1. Graficar el rea de lesin vs. el grupo tratado y determinar el % de gastroproteccin (% GP)
de los grupos tratados de acuerdo a la siguiente formula % GP= (IUC-IUT) x 100/IUC, donde
IUC es el ndice de ulcera del grupo control y IUT es el ndice de ulcera de los animales
tratados. (Navarrete et al., 2005).
2. Analice y discuta sus resultados.
VII. CUESTIONARIO
1.- Explique en qu consiste el modelo de dao gstrico inducido por etanol.
2.- Mencione a detalle cual es el mecanismo gastroprotector de carbenoxolona.
3. Investigue que plantas de la medicina tradicional han comprobado tener un efecto gastroprotector
en el modelo de dao gstrico inducido con etanol.
4. Investigue otros modelos de dao gstrico y explique en qu consisten.

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VIII. BIBLIOGRAFA
1. Al-Shabanah, O.A., Raza, M., Al-Harbi, M.M., Al-Bekairi, A.M., 2000. Effect of ninhydrin on
the biochemical and histopathological changes induced by ethanol in gastric mucosa of rats.
Life Sci. 67, 559566.
2. Bucciarelli, A. y Skliar, M.I., Medicinal plants from argentina with gastroprotective activity. Ars
Pharm 2007; 48 (4): 361-369.
3. Gazzieri, D., Trevisani, M., Springer, J., Harrison, S., Cottrell, G.S., Andre, E., Nicoletti, P.,
Massi, D., et al., 2007. Substance P released by TRPV-1 expressing neurons produces
reactive oxygen species that mediate ethanol-induced gastric injury. Free Radic. Biol. Med.
43, 581589.

42

43