Objetivo 1:

Que el estudiante utilice la cromatografa en columna como un mtodo de

purificacin.
Objetivo 2:
Que el estudiante aprenda el mtodo de cromatografa en capa fina como apoyo
para observar el avance de una reaccin entre otros mtodos.
Introduccin:
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin basado en la diferencia de
distribucin de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una
mvil y otra estacionaria. Las molculas de soluto de la mezcla son retenidas por
la fase estacionaria y arrastradas por la fase mvil, de manera que si los
componentes de la mezcla presentan diferentes afinidades por alguna de las
fases, sus velocidades medias de avance a lo largo del sistema sern diferentes.
La afinidad viene determinada por fuerzas de tipo Van der Waals, puentes de
hidrgeno o transferencia de carga. Los componentes que sean fuertemente
retenidos por la fase estacionaria se movern ms lentamente a lo largo de dicha
fase que aquellos que se unen dbilmente. Como consecuencia de esta diferencia
de movilidad los componentes de la mezcla se separan en bandas discretas, que
pueden analizarse cualitativa o cuantitativamente mediante el uso de los
detectores adecuados.
La cromatografa es una tcnica extremadamente verstil, que permite tanto la
separacin de mezclas como la purificacin de productos, la determinacin del
grado de pureza de un compuesto, el seguimiento de reacciones o la deteccin y
caracterizacin de compuestos. Su principal ventaja frente a otros mtodos de
separacin y purificacin consiste en que sta tcnica puede aplicarse a
cantidades muy pequeas de producto (del orden del g). Las tcnicas
cromatogrficas se pueden clasificar atendiendo a varios criterios: naturaleza de
las fases (slido, lquido, gas), relacin de polaridad de las fases (fase normal,
fase inversa), mecanismo de separacin (adsorcin, exclusin, intercambio inico,
reparto, afinidad), disposicin de las fases (en columna, en plano) y forma de
desarrollo del proceso (frontal, de desplazamiento, de elucin).

Reactivos:
Slice
Algodn
Hexano
Acetona
1 Cromatofolio
Material:
1 Columna cromatografca de 1cm de dimetro
18 Matraces Erlenmeyer 50 mL
1 Matraz Erlenmeyer 250 mL
2 Pipetas Pasteur
1 Vaso de Precipitados
1 Embudo de talle corto
1 Vidrio de reloj
Lmpara UV
Procedimiento:
1.Se cortaron pedazos de placa de aproximadamente 5 X 3 y se le dibujaron 3
puntos en la parte de abajo ( cm antes de llegar al final de la placa) y se le
pone en el punto de en medio la mezcla de los componentes a usar, en el
de los lados se le pone; de un lado uno de los componentes de la sustancia
y del otro lado el otro.

2.Se preparan distintas mezclas de disolventes hexano- acetato de etilo (en

proporciones 70:30, 80:20 y 95:5) y se ve en que sistema de disolventes la
separacin es la mejor. Con la ayuda de una lmpara UV se ve cmo es
que trabajan los diferentes eluyentes.

3.Ya que tenemos el sistema elegido; en una columna cromatografica, se va a

poner algodn en el fondo, despus de eso se le agrega la slice con
hexano para formar una papilla, en seguida de esto se le coloco la mezcla a
separar y por ltimo la cantidad suficiente de el eluyente elegido, en este
caso la relacin 95:5.

4.Se separan en los matraces necesarios y se calcula que cada uno tenga
aproximadamente 10 mL.

5.Despus de esto se observa cmo es que se separ la mezcla y cules son

los que nos sirven en cuanto a la sustancia A.

6.Esto se ve mediante la placa de nuevo, se corta la cantidad necesaria y se

coloca en un vaso de precipitados con el eluyente elegido, despus con la
lmpara UV se ve en que matraces an tenemos mezcla y en cuales
rescatamos la sustancia A.

Existe una relacin entre la intensidad y tamao de las manchas con la

concentracin de la sustancia aplicada en cada caso? Mientras ms
concentrada sea la solucin mayor ser la intensidad de la mancha y ms grande
ser esta.
Existen compuestos que no obedezcan a esta relacin? Si
Por ejemplo cul? El Acetato de etilo, por lo cual se us una mayor
proporcin de benceno, por lo tanto en las tres placas que utilizamos en cada
una de ella se dio un desplazamiento distinto; y se observ que haba una mayor
separacin cuando se usaba la mezcla del disolvente en proporcin 95:5.
Cul fue la sustancia ms polar y cual la menos polar?
La sustancia ms polar fue la sustancia A y la menos polar fue la sustancia B

Es preferible utilizar un eluyente( fase mvil de un solo disolvente o solo un

sistema eluyente de dos disolventes? Se necesita de un sistema eluyente de
dos disolventes
Por qu? Por qu con los dos disolventes actuando con la mezcla de las
sustancias se puede llevar a cabo una separacin efectiva a causa de su
polaridad.

Conclusin
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin basado en la diferencia de
distribucin de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una
mvil y otra estacionaria.
Se observ como las molculas de soluto de la mezcla son retenidas por la fase
estacionaria y arrastradas por la fase mvil, de manera que los componentes de la
mezcla presentaron diferentes afinidades y su velocidad de avance a lo largo del
sistema fue diferente. Es ms polar el acetato de etilo, por lo tanto entre ms polar
sea el eluyente, arrastra ms las muestras y entre ms hexano haya hay ms
separacin. Debido a estos utilizamos la mezcla 95:5.
La cromatografa es una tcnica extremadamente verstil, que permite tanto la
separacin de mezclas como la purificacin de productos, la determinacin del
grado de pureza de un compuesto, el seguimiento de reacciones o la deteccin y
caracterizacin de compuestos. Su principal ventaja frente a otros mtodos de
separacin y purificacin consiste en que sta tcnica puede aplicarse a
cantidades muy pequeas de producto (del orden del g).

Referencias:
http://html.rincondelvago.com/cromatografia-en-columna-y-de-capa-fina.html
http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractica9.pdf