RESUMEN DE HISTOLOGIA

1.-APELLIDOS Y NOMBRES: Figueroa Quispe, Kleidy Annais

a. CODIGO: 013200723-B
b. CAPITULO Y TEMA DE HISTOLOGIA: Anexos Digestivos
2.-TITULO:
Thymosin 4 and 10 Levels in Pre-Term Newborn Oral Cavity and Foetal
Salivary Glands Evidence a Switch of Secretion during Foetal Development.
3.-AUTORES ORIGINALES:
Sonia Nemolato, Irene Messana,Tiziana Cabras, Barbara Manconi, Rosanna
Inzitar ,Chiara Fanali,Giovanni Vento,Chiara Tirone,Romagnoli, Alessandro,
Daniela, Eliana Di Felice,Gavino Faa, and Massimo Castagnola.
4.-FECHA DE PUBLICACIN:
Abril 1, 2009
5.- REFERENCIA DE BSQUEDA REVISTA PUBLICADA:
PubMed - NCBI
6.-TITULO TRADUCIDO:
Niveles de Timosina 4 y 10 de cavidad oral y glndulas salivales fetales en
recin nacidos prematuros. Pruebas de secrecin durante el desarrollo fetal.
7.-PALABRAS CLAVE:
Timosina b4 y b10.
Anlisis HPLC-MS de saliva fetal.
8.-OBJETIVO DE LA INVESTIGACIN:
El objetivo del estudio es la deteccin inmunohistoqumica de T 4 y T 10
este enfoque permitir obtener informacin sobre la evolucin de T 4 y
T 10 produccin y secrecin durante el crecimiento fetal; obtener los
niveles de concentracin T 4 y T 10 observadas en funcin de la PMA;
encontrar las fuentes responsables de
concentracin de timosinas
observadas en la cavidad oral de los recin nacidos prematuros y poner en
manifiesto la variabilidad inter-individual.
9.-MATERIAL MTODOS:
Reactivos: Productos qumicos y reactivos comunes de grado
analtico, Normas de timosina 4 y timosina 10.
Aparato: El aparato de HPLC-ESI-IT-MS, Divisor de Detector de red de
diodos PDA. Espectrmetro de masas LCQ Deca XP Plus equipado con
un ion electrospray (ESI) fuente, Columna cromatografca Vydac C8
con 5 m de dimetro de partcula.
Los sujetos inscritos: Doce recin nacidos ingresados en UCIN,4 nios
nacidos despus de embarazos admitidos en el Policlnico "A y
adultos.

MTODOS:
Recogida y tratamiento de la muestra:
Toma de muestras de saliva de prematuros y recin nacidos a
trmino mediante aspirador plstico; durante estancia hospitalaria y
espordica despus de este perodo.
Mezcla inmediata con un volumen igual de 0,2% 2,2,2 cido
trifluoroactico (v / v) en bao de hielo.
Centrifugacin de solucin cida a 9.000 g durante tres minutos
Anlisis de solucin acida inmediata por HPLC-ESI-MS (100 l,
correspondiente a 50 l de toda la saliva) o almacenarse a -80 C
hasta el anlisis.
Anlisis RP-HPLC-ESI-MS:
Uso de soluciones para separacin cromatografa.
Gradiente aplicado lineal de 0 a 55% en 40 min, a velocidad de flujo
de 0,30 mL /min.
Divisor T se dirigi a una velocidad de flujo de aproximadamente 0,20
ml / min hacia el detector de red de diodos y 0,10 mL / min hacia la
fuente ESI.
La deteccin de -timosinas en toda la saliva y la determinacin de su
concentracin:
Deconvolucin de los espectros de masas ESI promediado.
Valores de masa experimental se compararon con los valores medios
tericos disponibles en la base de datos Swiss-Prot.
Identificacin de timosina 4 y timosina 10 basada en la
coincidencia de tiempos de elucin, ESI-MS espectros y ESI-MS / MS
espectros con los estndares de pptidos.
Determinacin de concentracin de -timosinas considerando el rea
del pico de corriente de iones extrados (XIC),
Anlisis inmunohistoqumicos:
Uso como grupo control de tejido circundante de especmenes
quirrgicos de la glndula partida peritumoral de 5 pacientes adultos
sometidos a ciruga para la reseccin de adenoma pleomrfico.
Muestras de tejido fijados con formalina, embebidos en parafina y se
procesadas de forma rutinaria.
Secciones 5 de espesor Deparaffinized se inmunotien con
anticuerpo dirigido contra T 4 (conejo) a una dilucin de 1:500.
Uso de secciones de ganglios linfticos reactivos ricos en macrfagos
(controles positivos) y linfocitos (controles negativos.

10.-RESULTADOS:
Determinacin de las concentraciones
diferentes muestras analizadas

de

-timosina

en

El estudio de T 4 y T 10 concentraciones en la saliva durante el

desarrollo de los recin nacidos humanos pone de manifiesto una
variabilidad inter-individual marcada y una tendencia general
dependiente de la edad, que muestra disminucin de la
concentracin de timosinas como una funcin de PMA.
En relacin de concentracin, puede estar asociado hasta ahora a la
presencia de T 4 sulfxido espordicamente detectado en toda la
saliva de algunos recin nacidos prematuros (27 de los 78
mediciones).

Histologa e inmunohistoqumica:
La inmunorreactividad para T 4 se detect en todos los casos
probados en este estudio, tanto en mayores y menores glndulas
salivales obtenidos a partir de los fetos, los recin nacidos y pacientes
adultos. Hemos observado marcadas diferencias entre individuos
tanto
en
el
grado
de
reactividad
y
en
el
patrn
inmunohistoqumico. Por otra parte, se observ una variabilidad
notable en la expresin y en la localizacin del pptido entre las
diferentes glndulas salivales ensayadas, incluso en el mismo
sujeto. En cuanto a las observaciones morfolgicas, la estructura de
la glndula salival antes del nacimiento mostr diferentes grados de
inmadurez, tpicos de la diferenciacin de las estructuras tubulares
hacia clulas acinares y ductales.
11.-CONCLUSIONES:
La presencia de altas cantidades de timosinas 4 y 10 en la cavidad oral de
los bebs prematuros con un mximo probable de expresin alrededor de
140-150 das, a partir de al menos de unos 85 das (12 semanas) de GA
present un papel para los pptidos en el desarrollo de la cavidad oral y sus
anexos. Hasta ahora las glndulas salivales se crean rganos de lento
desarrollo, alcanzando una maduracin secretora completa despus del
nacimiento. Sorprendentemente, nuestros resultados sugieren que las
glndulas salivales no poseen la capacidad secretora especfica an durante
las etapas de maduracin prenatales. De hecho, al menos desde 85 das (12
semanas) de GA que comienzan pptidos que segregan, como timosinas
4 y 10, que debe tener funciones especficas durante el desarrollo. La
variabilidad observada puede derivar en parte de la variabilidad inter e
intra-individual de la tasa de flujo salival.
Los principales resultados sugieren que el patrn de inmunoqumica de
T 4es dinmico y que cambia durante las diferentes etapas del desarrollo
prenatal y postnatal. En particular, un granulado T 4 patrn predomina en
las fases tempranas e intermedias de desarrollo fetal, sustituido

progresivamente por una tincin citoplasmtica difusa estructural como se

ve en los recin nacidos y adultos. Por otro lado, el patrn de timosina se
observ en la preparacin histoqumica refleja la diferenciacin glandular y
a saber, el inicio de la diferenciacin de clulas acinares. Este cambio se
refleja incluso en el desarrollo de uniones estrechas como se ha demostrado
por estudios inmunohistoqumicos de claudins.
12.-COMENTARIO DEL ALUMNO:
La investigacin sobre el estudio de los niveles de Timosina 4 y 10 juega
un papel fundamental como base de entendimiento sobre el sistema del
cito esqueleto celular y desarrollo fetal; as como cambios histoqumicos a
nivel del desarrollo humano al comparar muestras histolgicas fetales, de
recin nacidos y personas adultas. Los datos inmunohistoqumicos que
presenta el artculo de investigacin indican la expresin glandular de
T 4 en fetos a diferencia de lo observado en adultos poniendo en evidencia
los cambios a nivel de concentracin.
Aunque la va de secrecin no se entiende completamente, este estudio
permiti poner en relieve funciones extra-celulares para estos pptidos .Por
ejemplo T 4 modifica la tasa de unin y propagacin de las clulas
endoteliales en componentes de la matriz que inducen metaloproteinasas
de la matriz que va a estimular la migracin de clulas endoteliales de la
vena umbilical humana, tambin est implicado en la reparacin de crnea
daada e induce el crecimiento del cabello mediante la activacin de las
clulas madre del folculo piloso , y podra estar involucrado en el desarrollo
y reparacin del corazn y los daos cerebrales .
Debido a que no hubo disponibilidad real de anticuerpos especficos
dirigidos contra T 10 en la investigacin; ello no permiti comparar la
expresin de este pptido con respecto a la de T 4. Sin embargo, el cambio
de concentracin en relacin de pptidos constantes observada en el
presente estudio nos sugiere que las cantidades absolutas de timosina
desempean funciones relevantes durante el desarrollo fetal.