Instituto Politcnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa

Laboratorio de Mtodos analticos e instrumentales

PRCTICA No. 7

IDENTIFICACIN Y CUANTIFICACIN DE COMPUESTOS DE INTERS

FARMACUTICO POR ESPECTROFOTOMETRA ULTRAVIOLETA-VISIBLE

Integrantes:

Bazaldua Monroy Vernica

Mndez Snchez Blanca Esthela
Silva Ramrez Ricardo
Santiago Quintana Jos Martn
Villegas Esquivel JharettMariam

Profesores:
Raquel Nava

Grupo: 4FM1

Equipo 1

1. OBJETIVOS
1.1 Identificar compuestos orgnicos por medio de la espectroscopia UV-VIS
1.2 Determinar la concentracin de sustanciasorganicas en muestras problema,
por medio de una cuerva de calibracin, aplicando la ley de Beer-Bouger
2. INTRODUCCIN
La cafena es un alcaloide del grupo de las xantinas, slido cristalino, blanco
y de sabor amargo, que acta como una droga psicoactiva,
levemente disociativa y estimulante por su accin antagonista no selectiva
de los receptores de adenosina. La cafena se encuentra en muchas
especies de plantas, donde acta como pesticida natural. Segn ciertos
estudios, los altos niveles de cafena presentes
en
plantas jvenes que an estn
desarrollando follaje pero carecen de
proteccin mecnica logran paralizar y matar
ciertos insectos que se alimentan de la planta.
Se han encontrado tambin altos niveles de
cafena en los suelos alrededor de los
vstagos en los granos de caf germinados.
Las fuentes de cafena ms comnmente usadas son el caf, el t y en
menor medida el cacao. Otras fuentes de cafena usadas con menor
frecuencia incluyen las plantas de yerba mate y guaran, las cuales a veces
son utilizadas en la preparacin de infusiones y bebidas energticas.
Ley de Beer
La Ley de Beer afirma que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo
depende de la concentracin en la solucin. Esta ley nos dice que, si
hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz
que saldra del otro lado sera mayor que si repitiramos esto en el
segundo, ya que en este ltimo las ondas electromagnticas chocan contra
un mayor nmero de tomos o/y molculas y son absorbidos por estos.

Ley de Lambert
La Ley de Lambert dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto
depende de la distancia recorrida por la luz. Esta ley nos dice que, si
hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz
que saldra del otro lado seria mayor que si repitiramos esto en el
segundo, ya que en este ltimo las ondas electromagnticas chocan contra
un mayor nmero detomos o/y molculas y son absorbidos por estos, tal
como se explic en la ley de Beer.

Ley de Beer-Lambert
Una expresin para la ecuacin de Beer-Lambert es la siguiente:

Donde:
es el rango de luz captado por el tubo de fotocolorimetra,
es el rango de luz que sale del tubo de fotocolorimetra y que va a
llegar a la celda fotoelctrica donde es captada y medida
es la capacidad de captacin del haz del campo electromagntico,
es la longitud del tubo de fotocolorimetra, en cm.
es la concentracin de la muestra ya ubicada en el tubo de
fotocolorimetra.

Referencias:
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/caffeine.htmlhttp://www.scielo.b
r/pdf/rba/v62n3/es_v62n3a11.pdf

3. DIAGRAMA DE BLOQUES
3.1 Preparacin de curva tipo de cafena

Preprarar
estandares de 5,10,
15, 20 ppm a partir
de solucion de 100
ppm

Preparar un blanco
de reactivo de
etanol 10%

Ajustr absorbancia
con el blanco

Leer la Abs de cada

solucin de
concentracin
conocida

Obtener grfica de
A=f( ) y
determinar max

Obtener el espectro
estandar de 200
ppm en intervalo de
200-300 nm

3.2 Preparacin de muestra problema de tableta de Cafiaspirina

Pesar la pastilla y
molerla en el mortero
y pesar 500 mg

Disolver en EtOH 10%

en 10 mL y realizar
una dilucin de 1:10

Tomar 1 mL de la
solucin anterior y
llevarla a una
dilucin 1:10

Si es necesario hacer
una nueva dilucin

Medir absorbancia
cuidando que est
dentro del rango

3.3 Preparacin de muestra de caf

Pesar 1 gr de caf
y solubilizarlo en
20 ml de solucin
EtOH 10%

Calentar a
ebullicin, enfriar y
filtrarcon papel filtro

El filtrado se
colocar en un
matrz volumtrico
10 ml y aforar

Hacer tantas
diluciones como
sena necesarias

Hacer una dilucin

de 1:10

4. RESULTADOS
Tabla 1. Resultados obtenidos de absorbancia
Solucin
1
2
3
4
5

Absorbancia
0.209
0.25
0.469
0.475
0.709
0.716
0.931
0.933
1.142
1.159

Concentracin (ppm)
5
5
10
10
15
15
20
20
25
25
0.266
0.014
0.81

Caf soluble
T negro
Cafiaspirina

Tabla 2. Absorbancias promedio

Solucin

ppm

1
2
3
4
5

5
10
15
20
25

A
promedio
0.2295
0.472
0.7125
1.0365
1.1505

Tabla 3. Barrido de longitud de onda de la cafena

Longitud de onda
230
233
236
239
242
245
248
251
254
257
260
263
266
269
272
275
278
281
284
287
290
293
296
299

Absorbancia
0.192
0.169
0.127
0.104
0.108
0.149
0.210
0.325
0.465
0.639
0.748
0.891
1.025
1.106
1.129
1.083
0.971
0.810
0.614
0.411
0.232
0.110
0.047
0.016

5. ANLISIS DE RESULTADOS
5.1 Obtener grfica de Absorbancia contra longitud de onda
1.2

Absorbancia

0.8

0.6

0.4

0.2

0
230

240

250

260

270

280

290

300

max

Grafica 1. Barrido de longitud de onda de la cafena

Se observa que la longitud de onda mxima est en el punto de 272nm

1.4
1.2

Absorbancia

1
0.8
0.6
y = 0.0481x - 0.0018
R = 0.9855

0.4
0.2
0
0

10

15

20

25

30

ppm

Grafica 2. Curva tipo de cafena

Al graficar los puntos obtenidos experimentalmente y al realizar la regresin

lineal se obtuvo la ecuacin y = 0.0481x 0.0018 con un coeficiente de
correlacin de 0.9855. La presente ecuacin nos permiti calcular la
concentracin en ppm de las muestras problema que a continuacin se
presentan.
Caf soluble
Peso: 250mg
Absorbancia registrada: 0.266
Caf total (frasco): 48g
Concentracin de cafena:
De la ecuacin y = 0.0481x 0.0018 despejamos X (la concentracin)

Te negro

Peso: 0.2503g
Absorbancia registrada: 0.014
Peso del sobre: 0.4454g
Peso del total del sobre: 2.3441g
Peso total del t.1.8987g

Concentracin de cafena:
De la ecuacin y = 0.0481x 0.0018 X (la concentracin)

Cafiaspirina
Peso: 0.125g
Absorbancia registrada: 0.810
Tableta completa: 0.6589g
Concentracin de cafena:
De la ecuacin y = 0.0481x 0.0018 X (la concentracin)

% Error
%E=

Investigar que es el coeficiente de extincin de la ecuacin de LambertBeer y de que depende.

Lambert y Beer demostraron que la absorbancia (A), tambin llamada densidad
ptica (D.O.) de una sustancia es directamente proporcional a la concentracin
(c) de la sustancia absorbente, la longitud del paso de luz (l) (espesor de la
solucin) y una constante denominada coeficiente de extincin o coeficiente de
absorcin (a), que es caracterstico para cada sustancia a una longitud de onda
(l) determinada.
A = al c
Las unidades del coeficiente de extincin dependen de las unidades de
concentracin y de longitud del paso de luz. Generalmente la unidad de

longitud es el centmetro y la longitud del paso de luz es 1,0 cm. Si las

unidades de concentracin son moles L-1 o milimoles L-1, se hace referencia al
coeficiente de extincin molar (o milimolar, respectivamente
Si la concentracin est expresada en g/100 mL (% peso / volumen) se obtiene
el coeficiente de extincin especfico (E1%).
A = l c
+ Ao
El coeficiente de extincin se determina realizando una serie de diluciones de
la sustancia de interes. Luego se mide la absorbancia de cada muestra de
dilucin a un largo de onda determinado. Los valores de absorbancia son
graficados en funcin de la concentracin. El resultado debe ser una linea
recta.
La pendiente de la linea (y/x) es el coeficiente de extincin (K). Si las
unidades de concentracin son en moles, entonces la constante es llamada
coeficiente de extincin molar y se mide en unidades de M/ cm.
Representa a cada longitud de onda la capacidad que tiene una sustancia de
absorber la radiacin electromagntica.
Tambin se puede calcular mediante la frmula y debe de arrojar un resultado
aproximado al obtenido de la pendiente de la regresin lineal.

Donde:
b = longitud de la trayectoria que atraviesa la luz por la muestra (1cm)
C = concentracin
A = absorbancia
E=coeficiente de extensin molar (pendiente)

Tabla 4 Absorbancias de cafena

Solucin
No.

Concentracin
de cafena,
mol/L

Absorbancia
max=272nm

0.0002575

0.2295

0.000515

0.472

0.0007724

0.7125

0.0010299

1.0365

0.0012874

1.1505

Grafica 3 Curva tipo

1.4
1.2

Absorbancia

1
0.8
y = 934.64x - 0.0017
R = 0.9855

0.6
0.4
0.2
0
0

0.0002

0.0004

0.0006

0.0008

0.001

0.0012

0.0014

Concentracin de cafena, mol/L

Por lo tanto

Calculo de la concentracin de la muestra problema a partir del coeficiente de

extincin molar.

Caf soluble
Absorbancia: 0.266
Longitud de trayectoria: 1cm

T negro
Absorbancia: 0.014
Longitud de trayectoria: 1cm

Cafiaspirina
Absorbancia: 0.810
Longitud de trayectoria: 1cm

7. APLICACIONES FARMACUTICAS
La cafena es una xantina de origen natural, presente en el caf, utilizada como
estimulante del sistema nervioso central o como estimulante respiratorio.
Tambin se utiliza como diurtico suave. Otros derivados xantnicos incluyen la
teofilina, que se utiliza como broncodilatadora y la teobromina, compuesto que
se encuentran en el cacao y el chocolate. La cafena se encuentra en muchas
bebidas y refrescos. A menudo la cafena se combina con analgsicos o
derivados del alcaloide ergotamina para el tratamiento de la migraa y otros
tipos de cefalea.
La cafena tambin se comercializa en productos utilizados para tratar el mareo
u obesidad. Clnicamente se utiliza tanto por va oral como parenteral como
estimulante respiratorio en neonatos con apnea de prematuridad. La cafena
reduce la frecuencia de los episodios apneicos entre un 30-50% en las 24
horas siguientes a su administracin. La cafena se prefiere a la teofilina en los
neonatos debido a la facilidad de una administracin una vez al da y la de una
ventana teraputica bastante amplia. En algunos pases tambin se prescribe
por va parenteral para el tratamiento de la apnea de los prematuros.
Scanlon JEM, Chin KC, Morgan MEI, et al. Caffeine or theophylline for neonatal
apnea Arch Dis Child 1992; 67:425-8.

8. CONCLUSIONES
Las absorbancias obtenidas con el espectrofotmetro son mayores a las
obtenidas con el clculo del coeficiente de extincin molar por lo tanto el uso de
soluciones debe estar dentro del rango de concentraciones requeridas para la
experimentacin, en este caso de 5 a 25 ppm.
El porcentaje de error obtenido en la prueba con la cafiaspirina se debe a que
los componentes de la tableta se van perdiendo conforme esta se tritura y se

diluye por lo que el valor obtenido tuvo que ser 50 por lo que indica la caja del
frmaco.

9. BIBLIOGRAFA
-Chang, R. (2008). Fisicoqumica (3 ed.). E. U. A.: McGraw-Hill, pp. 768
-Chang, R. (2010). Qumica (10 ed.). E. U. A.: McGraw-Hill
-Day, R. y Underwood, A. (1989). Qumica analtica cuantitativa (5 ed.).
Mxico, D.F.: Prentice-Hall Hispanoamericana. pp. 251-265
-Skoog, D., West, D., Holler, F. y Crouch, S. (2001). Qumica analtica (7 ed.).
Mxico, D. F.: McGraw-Hill. pp. 363-374
-http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/espectrofoto.htm
-http://www.espectrometria.com/espectrometra_ultravioleta-visible