PATGENOS PERIODONTALES

Desde el siglo pasado se han acumulado una cantidad de reportes sobre la

etiologa microbiana de la periodontitis, pero pocas bacterias, han sido hasta
ahora denominadas patgenos periodontales, los cuales, estn relacionados con
la iniciacin y progresin de la enfermedad. Mucha de la informacin obtenida
acerca de la microbiota de la periodontitis ha emergido de estudios realizados en
EEUU y Europa 1,2,3.
Algunos autores definen a la periodontitis como un proceso infeccioso
relacionado con la acumulacin de placa subgingival y clculo dental, siendo los
microorganismos anaerobios los principalmente involucrados. Si la placa formada
sobre la superficie del diente no es removida, las bacterias all presentes se
acumulan e inician una reaccin inflamatoria en la enca; el establecimiento de
un proceso infeccioso provoca la disminucin de la tensin de oxgeno molecular
y en consecuencia del potencial redox, con lo cual se favorece la supervivencia y
crecimiento de la flora bacteriana anaerbica, prevaleciendo sta sobre la flora
aerbica y anaerobia facultativa 6,7,8,9,10.

Las bacterias anaerobias son microorganismos que no pueden vivir en presencia

de oxgeno, ya que resulta txico para ellas. Poseen un alto poder de sntesis, de
tal forma que su desarrollo en medios sintticos depende del aporte de diversos
factores de crecimiento, especialmente vitaminas. Suelen estar dotadas por
diversas enzimas que le permiten actuar sobre diferentes productos orgnicos.
Cierto nmero de bacterias anaerobias son patgenas para el hombre, en
algunos casos originan procesos eminentemente txicos, mientras que en otros
la accin patgena est ligada a su morfoestructura y enzimas, a reacciones
inmunolgicas, o a mecanismos que van a perturbar los mecanismos de defensa
del hospedador.
Atendiendo a su morfologa, las bacterias anaerobias de inters clnico
odontolgico se clasifican en dos grandes grupos: Esporulados, constituidos por
bacilos Gram positivos, generalmente mviles. Dentro de este grupo se
encuentran
los
clostridios
periodontopatgenos,
que
forman
parte,
excepcionalmente de la microbiota de la cavidad bucal y se han relacionado con
la agresividad de periodontitis en individuos inmunodeprimidos (Tabla 1). Otro
grupo de anaerobios son los No Esporulados, que engloban cocos y bacilos, tanto
Gram positivos como Gram negativos, y espiroquetas9 (Tabla 2). Estos
microorganismos actan generalmente como oportunista, tanto a nivel de su
hbitat (mucosas, cavidades) como en tejidos y rganos distantes; es as como la
mayora de las infecciones por este grupo de bacterias anaerobias no
esporuladas, son de origen endgeno.
Cada da existe un mayor inters por este grupo de bacterias asociadas a la
enfermedad periodontal. El desarrollo de las tcnicas microbiolgicas durante los
ltimos 20 aos ha permitido aclarar considerablemente la etiologa de la
periodontitis, y se han establecido grupos de microorganismos especficos
presentes en dicha enfermedad. La microbiota periodontal es una comunidad de
microorganismos, principalmente anaerobios, muchos de los cuales an son
difciles de aislar en el laboratorio10,11,12.

A pesar de las dificultades para aclarar los aspectos microbiolgicos de la

periodontitis, hoy en da se conoce un grupo limitado de bacterias anaerobias
asociadas a la periodontitis, denominadas patgenos periodontales, (Tabla 2), y
en la actualidad se estudian las propiedades de dichos microorganismos que les
permiten actuar como patgenos en el tejido periodontal.
Tabla 1
Especies de Clostridium asociados a la periodontitis

C.
C.
C.
C.
C.
C.

malenominatum
ramosum
sporogenes
hastiforme
histolyticum
subterminale

Fuente: Liebana, U. (1995).

De acuerdo a esta revisin bibliogrfica, en la Tabla 2 se recopilan las principales

bacterias que se hallan ampliamente y moderadamente asociadas a la
periodontitis.
Tabla 2
Especies bacterianas asociadas a la periodontitis

Ampliamente asociadas

Moderadamente
asociadas

Actinobacillus
actinomycemcomitans

Fusobacterium nucleatum

Porphyromonas gingivalis

Prevotella nigrescens

Prevotella intermedia

Streptococcus intermedius

Bacteroides forsythus

Peptostreptococcus micros

Treponema denticola

Eikenella corrodens

Campylobacter rectus

Eubacterium sp

Capnocytophaga sp.
Fuente: Nakagawa & col. (1990); Kamma & col. (1995); Slotwinska, S. (2000)
Durante aos se ha estudiado la flora bacteriana predominante en la
periodontitis1,2. Como agentes etiolgicos relacionados con esta enfermedad, se
le ha dedicado particular atencin a Actinobacillus actinomycetemcomitans,

Fusobacterium nucleatum y a especies de Bacterias Anaerobias Gram Negativas

Pigmentadas (BAGNP)10,11,12,13.
Investigaciones realizadas reportan que la etiologa de la periodontitis est
asociada a la presencia de especies de Bacterias Anaerobias Gram Negativas
(BAGN). Muchos autores coinciden que entre los periodontopatgenos ms
comunes
se
encuentran
Porphyromonas
gingivalis,
Prevotella
intermedia,Bacteroides forsythus F. nucleatum, A. actinomycemcomitans y
especies de Capnocytophaga10,11,12,14,15.
A. actinomycemcomitans, se ha relacionado principalmente con la Periodontitis
Juvenil, el cual se ha encontrado colonizando la mucosa bucal, paladar, lengua,
as como en placa supra y subgingival de individuos, tanto sanos como enfermos
periodontalmente2,16.
P. gingivalis y P. intermedia son las especies ms virulentas dentro del grupo de
Bacterias Gram Negativas Pigmentadas (BGNP) y las ms comnmente asociadas
con la Periodontitis del Adulto (Figura 1); estas especies habitan en el surco
gingival y en la bolsa periodontal de la cavidad bucal12.13,16.

Figura 1. Coloracin de Gram.

Bacilos Gram Negativos.

Asimismo, P. gingivalis y P. intermedia han sido aisladas en jvenes con

Periodontitis Prepuberal junto conFusobacterium sp., A. actinomycemcomitans y
Eikenella corrodens , igualmente en individuos con Periodontitis Postjuvenil y
Periodontitis de Progresin Rpida, asociadas a Treponema denticola14,15,16.

Basndose en esta revisin, resulta obvio que la microbiota periodontal es una

comunidad compleja de microorganismos. P. gingivalis y P. intermedia,
actualmente se incluyen en el grupo de patgenos periodontales ms
importantes, conjuntamente con A. actinomycetemcomitans, B. forsythus
yCapnocytophaga sp., los cuales son aislados en muchos laboratorios con fines
de investigacin y manejo de la periodontitis. Muchas investigaciones aun se
encaminan a describir los factores de virulencia de varios patgenos
periodontales, lo que permitir comprender aun ms la patognesis de la
periodontitis.

2.2. PORPHYROMONA GINGIVALIS

(Jannet, Vijaya, & John, 2000) (Ramos Perfecto Donald, 2O11) Varias bacterias
tienen una gran particularidad por colonizar y prosperar a nivel subgingival
estando mucho ms vinculadas con enfermedades periodontales, la P. gingivalis
es un bacilo Gram negativo anaerobio estricto sobresaliente en la periodontitis
crnica, al igual que el Agregatibacter actinomicetencomitans que est presente
en esta patologa, los diversos factores de virulencia de la Porphyromonas
Gingivalis la hacen sumamente agresiva, ya que utiliza las condiciones del
husped para inducir mayor dao y en el surco gingival halla los requisitos
ptimos para su desarrollo provocando una devastacin lenta y persistente de los
tejidos periodontales.
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) (Jannet, Vijaya, & John, 2000) La P. gingivalis
incluso suele exhibirse mucho ms patgeno siendo un agente de riesgo para
infecciones pulmonares, parto pre termino y bajo peso al nacer, y acrecienta el
riesgo de infarto al miocardio cuando existe su presencia en placas
arterioesclerticas.
(Libana Urea, 2002) El gnero Porphyromonas engloba bacterias asacarolticas,
nos referimos a que no metabolizan los carbohidratos ni por la ruta de EmbdemMeyerhof-Parnas (gluclisis) ni por la va de las pentosas fosfato; esto ltimo se
debe a que no poseen las enzimas glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y gluconato6-fosfato deshidrogenasa. Se vale de compuestos nitrogenados para obtener
energa, no progresan en presencia de bilis al 20% y son susceptibles a
concentraciones superiores a 2 g/ml de vancomicina.
(Libana Urea, 2002) Las especies del gnero de inters en patologa humana
son: P. asaccharolytica la misma que est vinculada con patologa extraoral, ya
que pertenece a la microbiota normal del colon y la vagina, P. gingivalis, P.
endodontalis y P. catoniae, que se desarrollan en su hbitat natural que es la
cavidad oral y excepcionalmente producen procesos patolgicos fuera de ella.
(Ronimus & Morgan, 2003) La va de Embdem-Meyerhof-Parnas (gluclisis)
anteriormente nombrada es la secuencia metablica en la que se oxida la
glucosa, cuando no existe la presencia de oxgeno esta es la nica va que
produce ATP en los animales, se trata de nueve reacciones enzimticas mediante
las que se obtienen dos molculas de piruvato y dos equivalentes reducidos de
NADH, los que al incorporarse en la cadena respiratoria crean cuatro molculas
de adenosn trifosfato (ATP).
2.2.1. TAXONOMIA
(De Palm, Khalaf, & Bengtsson, 2013) (Ramos Perfecto Donald, 2O11) El empleo
de nuevos mtodos de clasificacin basndose en biologa molecular como ADNADN hibridacin y otras, apoy al gnero bacteroides que en primeras instancias
se lo clasifico como un grupo de bacterias heterogneas, anaerobios obligados
Gram negativas no esporuladas y de forma bacilar, del cual la bacteria en estudio
pudo ser definida en un grupo homogneo de especies a partir de los
bacteroides, nombrados ahora Porphyromonas, que en un comienzo eran tres
especies P. gingivalis, P. asaccharolyticus, P. endodontales, siendo particularidad
de estas l no ser fermentadores, tener como sustrato el nitrgeno y emplear a la
tripticasa y a la peptona para obtener energa.

(Negroni, 2009) Actualmente a la Porphyromonas gingivalis se la define como un

cocobacilo Gram-negativo, no mvil, anaerobio estricto, asacaroltico,
concerniente al filo Bacteroidetes.
2.2.2. MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) Se lo observa como capsulado no esporulado sin
flagelos y abundantes fimbrias, a nivel de la membrana externa de la pared
celular expone endotoxinas, en su superficie presenta una diversa cantidad de
enzimas que benefician a la virulencia y posee la habilidad de elaborar enzimas
que degradan las protenas, se la considera un potencial comensal en la cavidad
oral y mide de 1 a 3,5 um de largo por 0,5 a 0,8 um de ancho.

(Macn Cabrera, 2015) La tonalidad marrn oscuro o negro de las colonias se

debe a la facultad que posee para almacenar hierro, acumulndolo
superficialmente para metabolizar en situaciones deficitarias, de ah que se las
conoce como bacterias pigmentadas de negro, las colonias no son fluorescentes
bajo la luz ultravioleta.
2.2.3. FACTORES DE VIRULENCIA
(Diaz Zuiga J, 2012) Lo que determina a un microorganismo como virulento es la
cualidad de producir metabolitos txicos, enzimas, toxinas, al igual que la
produccin de componentes de la superficie o pared celular que le posibilitan
eludir las barreras protectoras e invadir y sobrevivir en los tejidos y clulas del
anfitrin. As podemos precisar a la virulencia como la capacidad de un
microorganismo de interferir con los procesos metablicos y fisiolgicos del
hospedador lo que conlleva a la instauracin de una enfermedad.
(Garcia Reyna Roberto, 2015) La P. gingivalis es una bacteria asacarolitica
anaerobia que fabrica una amplio abanico de factores de virulencia entre los que
tenemos: cisten proteasas, lipopolisacridos, cpsulas y fimbrias, estas ltimas
codifican el gen fimA. Todos esos factores estn encaminados a la adquisicin de
hierro y pptidos de crecimiento como fuente de energa a partir de la hemina
(hierroprotoporfirina IX), la cual la obtiene de la hemoglobina, haptoglobina,
mioglobina, metahemoglobina, oxihemoglobina, lactoperoxidasa albmina,
catalasa, y citocromo c, de los glbulos rojos por medio de su reclutamiento en el
lugar de la invasin.
Podemos listar los factores de virulencia de esta bacteria periodontopatgena.
2.2.3.1. CAPSULA
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) El rol preponderante que juega en la evasin del
sistema inmunolgico, le otorgan una vital importancia a esta estructura, lo hace
eludiendo la fagocitosis, opsonizacin y accionar del complemento, est
compuesta por polisacridos, siendo un gen codificante de epimerasa epsC
esencial para su sntesis, existiendo 6 serotipos capsulares de k1 a k6.
2.2.3.2. MEMBRANA EXTERNA

(Macn Cabrera, 2015) Posee un papel indispensable al favorecer a la adhesin y

congregacin bacteriana, colonizacin de clulas epiteliales y fibroblastos,
formacin y mantenimiento de la biopelicula subgingival.

2.2.3.3. FIMBRIAS
(Libana Urea, 2002) Estas actan como adhesinas, fomentan los fenmenos de
congregacin y adhesin a superficies epiteliales y dentales con la mediacin de
la saliva, al igual que las protenas de la membrana externa. Poseen la capacidad
de sumarse a distintas molculas, clulas y sustratos, como epitelial,
fibronectina, fibringeno, lactoferrina, al mismo tiempo expone cualidades
quimiotacticas y de induccin de citoquinas, se presentan en forma pertrica de
0,3 a 3,0 um de largo y 5 nm de ancho, compuestos por monmeros de
fimbrilina, codificadas por el gen fimA.
2.2.3.4. PROTEASAS
(Libana Urea, 2002) Gracias a ellas se obtiene la capacidad de penetracin,
multiplicacin y diseminacin que la bacteria posee, ya que consigue nutrientes a
partir de los tejidos del anfitrin, induciendo significativos daos tisulares. La
Porphyromonas gingivalis genera una vasta serie de enzimas proteolticas; varias
de las cuales se asocian a la membrana externa y otras se liberan al exterior o
son transportadas a distancia por las vesculas superficiales.
(Macn Cabrera, 2015) Est implicada en la destruccin del periodonto, tejido
conectivo del diente y reabsorcin sea, presentan accin hemoltica que es la
desintegracin de hemates para obtener hierro, dentro de sus propiedades
tenemos:
Elevacin de la permeabilidad vascular del surco gingival, inflamacin y mayor
nmero de nutrientes para las bacterias debido a la destruccin de protenas
reguladoras, destruccin de inmunoglobulinas igAI, igAII e igG
Perciben hierro de molculas que engloben transferrina, lactoferrina o
hemoglobina
Activacin de metaloproteasas en la matriz de clulas epiteliales que rodea al
diente resultando en la destruccin tisular
(Del Ro Martinez, 2006) Se consideran a las colagenasas y a las aminopeptidasas
como decisivas en la patognesis de las bacterias, adems existen otras
proteinasas especficas como arginina y lisina proteinasa que son proteinasas
cistenas y han recibido un nombre en comn gingipains y son un potente
normalizador de la permeabilidad vascular, siendo capaces de inducir la
permeabilidad vascular en el plasma humano y unirse directamente a
bradiquininas. La Arg-gingipain es capaz de inactivar especies oxigeno reactivas
(bactericidas naturales) producidas por PMNN el cual es un primordial mecanismo
de defensa del hospedador.
2.2.3.5. PROTEASAS CASEINOLITICAS

(Macn Cabrera, 2015) Inhiben la actividad bacteriana de PMNN pero el principal

papel de estas es degradar colgeno tipo I y IV, igG humana, fibronectina y
complemento C3, C4, C5 y C5a.
2.2.3.6. METABOLITOS TXICOS TISULARES
(Libana Urea, 2002) La particularidad principal de estas es aumentar la
permeabilidad de la mucosa oral, son cidos grasos de cadena corta, compuestos
azufrados voltiles, amonaco e indol. Tambin posee molculas antibacterianas,
varios de los metabolitos mencionados desempean un rol competitivo con
diferentes bacterias; a ellos hay que sumar la elaboracin de bacteriocinas por
parte de determinadas cepas de P. gingivalis. Todas estas molculas estn
implicadas en las vastas interrelaciones que las bacterias instauran en la cavidad
oral.
2.2.4. FISIOPATOLOGIA
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) Se presenta a travs de la saliva por contagio o
transmisin por individuos infectados, es considerado un colonizador secundario,
comensal del surco gingival, su capacidad de adherirse principalmente por sus
fimbrias pertricas tipo Ib, II as como por sus vesculas de membrana,
hemaglutininas, capsula, le proporcionan la facultad de dar el primer paso en la
colonizacin del surco, poder adaptarse e invadir las clulas epiteliales en un
lapso aproximado de 20 minutos, logrando replicarse dentro de ellas y
diseminarse a las clulas de alrededor, esta peculiaridad de invadir la clula le da
la capacidad de evadir las defensas del anfitrin.
(Jannet, Vijaya, & John, 2000) La P. gingivalis posee la capacidad de degradar
diversas protenas, componentes del surco gingival, ligamento periodontal y
hueso alveolar, adems de alterar la respuesta propia y especfica del
hospedador. A todo esto se suma un factor husped, que ante la presencia de
esta bacteria, activa una inmensidad de respuestas que pueden exacerbar el
proceso inflamatorio presente en el surco, aumentando el proceso de destruccin
del periodonto.
2.2.5. NUTRICION
(Del Ro Martinez, 2006) El ecosistema subgingival suministra un entorno propicio
para esta especie ya que invariablemente coloniza en sitios donde la tensin de
oxigeno es nfima, pero en la cual hay sustratos abundantes en nitrgeno, en
estos sitios el potencial redox es bajo y ms bajo aun en bolsas periodontales que
posee nutrientes endgenos ricos en pptidos y aminocidos.
(Grenier, 2014) La P. gingivalis necesita de un requerimiento imprescindible de
hierro para crecer sin embargo cuando existe una deficiencia del mismo en el
sistema de poros de la bacteria (sideporo, los cuales quelan hemina) utiliza
hemina (hierro protoporfirina IX), los niveles de hemina son cambiantes en boca y
el sangramiento, como resultado de la inflamacin gingival, elevara su
conglomeracin subgingival, de modo que este puede ser un factor que
predispone a la acumulacin de la bacteria. Esta hemina que se almacena en la
membrana extracelular acta como basurero de oxigeno fomentando a
conservar un microambiente anaerobio.

(Diaz Zuiga J, 2012) Su notoriedad como colonizador se debe a su capacidad de

adhesin a los diferentes tipos de clulas de los tejidos de la cavidad oral, con
otras bacterias, con la matriz extracelular y con componentes salivales. Esta
capacidad de adhesin es proporcionada por las fimbrias, componente que
adems ha sido asociado a su potencial patognico; de hecho, la mayora de
pacientes con inflamacin de los tejidos de soporte dentarios (periodontitis)
presentan el genotipo fimA II seguido en frecuencia por el genotipo fimA IV,
mientras que el genotipo fimA tipo I, III y V se detectan mayoritariamente en los
adultos sanos con presencia de P. gingivalis.
2.2.5 Plantas Medicinales
2.2.5.1 Principio activo de las plantas Medicinales Thompson119 refiere que el
valor medicinal de las plantas curativas, se debe a la presencia de una sustancia
qumica principio activo que produce un efecto fisiolgico. Mucho de los
principios activos son sumamente complejos, desconocindose an su naturaleza
qumica; otros han sido purificados, sintetizados o imitados. Por lo general
pertenecen a una de estas categoras: aceites esenciales, alcaloides, glcidos,
taninos, sapogeninas, fenoles, quinonas, terpenos, carotenoides, cumarinas,
flavonoides, resinas
2.2.5.2 Generalidades del aceite esencial
Definicin
Los aceites esenciales son mezclas de sustancias voltiles con propiedades
aromticas, extrados de plantas, en su mayora por destilacin; son
generalmente lquidos y rara vez slidos.120,121,122 Son el producto final del
metabolismo secundario de muchas clulas vegetales, por lo que no se
reintegran al metabolismo celular.
Augusto124 define a los aceites esenciales como aquellas sustancias
caracterizadas por su volatilidad, formadas por agrupaciones de un gran nmero
de compuestos qumicos aromticos. Existen en las diferentes partes de las
plantas, siendo estas sustancias no miscibles en agua.
Morales125 reporta que la mayora de las esencias estn constituidas por un
compuesto predominante; pero que no siempre las caractersticas de olor y sabor
estn dadas por el compuesto principal. Otros componentes en menor tasa son
importantes y en algunos casos la calidad comercial de ciertas esencias depende
de dichos constituyentes.
Composicin
Se considera que los aceites esenciales son qumicamente una mezcla compleja
y muy variables de hidrocarburos alicclicos, denominados terpenos y sus
derivados oxigenados llamados alcanfores.126 La composicin de los aceites
esenciales es diversa. Estn principalmente constituidos por hidrocarburos de
formula C10 H16. En la actualidad se refieren a un gran
nmero de
hidrocarburos que aparecen en la naturaleza con formula (C5H8), sus derivados y
compuestos aromticos.120,121,122
Los terpenos por su composicin, pueden derivar de la condensacin de dos
molculas de Isopreno C5H8. En los mismos aceites esenciales, y en otros
productos naturales, aparecen compuestos derivados, anlogamente, del

Isopreno, de modo que la calificacin de terpeno se extiende a todos aquellos,

dividindolos
en
hemiterpenos
C5H8, terpenos
propiamente
dichos,
sesquiterpenos C15H24, diterpenos C20H32 y politerpenos (C5H8)n, siendo n un
nmero elevado.121,122
Los productos derivados de los terpenos que tienen oxigeno reciben el nombre de
alcanfores, como ejemplo: en los hidrocarburos terpnicos figuran los limonenos,
el mirceno, el pineno. Entre los alcoholes terpnicos ms importantes, el geraniol
(de las esencias de las rosas), citronelo, etc.121,122
Propiedades Fsicas127
Lquidos a temperatura ambiente (a diferencia de los aceites fijos).
Muy raramente son coloreados.
En general, su densidad es inferior a la del agua.
Poseen un ndice de refraccin elevado.
Desvan la luz polarizada.
Son liposolubles y solubles en los disolventes orgnicos habituales.
Arrastrables en vapor de agua (muy poco solubles en ella).
Punto de ebullicin es superior a los 100C.
Composicin Qumica
Estn constituidos por muchas clases de compuestos qumicos, algunos por un
solo componente en un alto porcentaje y otros por mezclas complejas de
compuestos cclicos aromticos, acclicos, heterocclicos y derivados oxigenados.
Los constituyentes principales de los aceites esenciales son: 128
Hidrocarburos: Mirceno, cinemo, pineno, canfeno, felandreno, bineno, limoneno,
cariofileno, geranioleno, santaleno
Alcoholes: Isoamlico, geraniol, linalol, citronelol, nerodinol, farsenol, terpinol,
mentol, borneol, benclico, fenil-etlico
Fenoles: Timol, carbacrol, eugenol, vainillina
Aldehidos: Citral, citronelal, anisaldehido, benzaldehido, cinamadehido
Cetonas: Alcanfor, carvona, mentona, piperitona, acetato fenona
Eteres: Anetol, metil chavicol, eucaliptol, ascarodol
Esteres: Salicilato de amilo, benzoato de metilo, acetato de terpinilo, acetato de
geranilo
Localizacin de los aceites esenciales en las plantas
especies de plantas producen aceites esenciales.

Segn Miller129 2000

Las especies que proporcionan mayor cantidad de aceites esenciales pertenecen

a las Familias Labiadas, Umbelferas, Compuestas, Mirtceas, Laureceas,
Rutceas y Pinceas. Los aceites esenciales se hallan en regiones circunscritas a

la planta; son segregadas por estructuras especializadas como los pelos

glandulares, cavidades esquizgenas, etc.
Funcin de los aceites esenciales en la planta Meyer130 informa que no se
conoce exactamente la importancia bioqumica que desempean los aceites
esenciales en las plantas.
Probablemente deben considerarse como productos accesorios del metabolismo,
es probable que tengan un papel ecolgico. Sin embargo; otros estudios han
demostrado que los aceites esenciales regulan la transpiracin, especialmente al
alterar o modificar la actividad calorfica y la presin osmtica, manifiesta que los
aceites esenciales son secreciones patolgicas como la resina, el blsamo, etc.,
sirviendo a la planta como sustancias protectoras contra las enfermedades de los
rganos daados. 131
Influencia de los factores externos en la produccin de aceites esenciales
Diversos investigaciones estudiaron el tipo de influencia de los factores externos
y su relacin con los aceites esenciales, concluyendo que la luz, el suelo, el clima,
la velocidad del viento, etc. determinan su produccin. 119, 132,133
Actividad antimicrobiana de los aceites esenciales
Los aceites esenciales, compuestos extrados de varios tipos de plantas y usados
para preservar alimentos y bebidas, tienen un efecto inhibitorio sobre el
desarrollo de microorganismos. En su estudio Walton y col. demostr que el
extracto destilado del ajo tiene efectos bactericidas y bacteriostticos.127 Se
conoce de la actividad antimicrobiana de varias especies vegetales en forma de
extractos o hierbas aromticas en los alimentos, inhiben la formacin vegetativa
de esporas, detienen el crecimiento de alimentos patgenos y levaduras. 127
Mecanismo de accin del aceite esencial sobre los microorganismos
Este mecanismo de accin hacia los microorganismos es complejo y an no ha
sido del todo entendido y explicado. El modo de accin de los aceites esenciales
tambin depender del tipo de microorganismos y esta principalmente
relacionado con la estructura de la pared celular y la membrana externa de los
mismos.12 Kakrani y col. Establecieron, in vitro, la actividad antimicrobiana,
antiparasitaria y antimictica de los aceites esenciales de Aglia odoratissima. Las
investigaciones plantean que los aceites esenciales interferiran la fase del
metabolismo intermedio de los microorganismos inactivando enzimas de
reaccin.134
Extraccin del aceite esencial
Para obtener la fraccin cromtica del material vegetal, a lo largo de los aos, se
usaron diferentes procesos. Motle135 en su estudio consideraba los siguientes
mtodos:
a) Extraccin por expresin
b) Extraccin por solucin
- Con grasas slidas y fras
- Con grasas lquidas y calientes

- Con solventes voltiles

c) Extraccin por destilacin
- Extraccin por destilacin con agua caliente
- Extraccin por arrastre de vapor
Extraccin por destilacin por arrastre de vapor
Esta tcnica resulta una de las ms simples y econmicas para obtener el aceite
esencial de este tipo de planta y en general para cualquier otro. Las ventajas de
este mtodo son su simplicidad, bajo costo y el hecho de poder maniobrar
grandes volmenes de materia prima.
Este mtodo se fundamenta en que los aceites esenciales son arrastrados por la
corriente de vapor de agua que se genera en la fuente de vapor, luego esta
mezcla (vapor de agua y aceite) es condensada mediante su paso por un
refrigerante de vidrio, para luego separar el aceite del agua por simple diferencia
de densidades. La destilacin es una operacin farmacutica que tiene por
finalidad separar los principios voltiles (contenidos en una mezcla compleja) de
los que no lo son. El equipo de destilacin est compuesto por un sistema de
destilacin de doble baln, en el cual solo uno de los balones que contiene agua,
es sometido al calor directo; mientras que el segundo baln que contiene la
planta licuada recibe los vapores de agua, para luego liberar el vapor mixto
(agua-aceite esencial) hacia el condensador.
El mtodo involucra los siguientes pasos: 136
a. Seleccin de las hojas, talluelos y flores en buen estado.
b. Las hojas se pesan y lican, para lo cual se utiliza una pequea cantidad de
agua destilada, este luego se deposita en el segundo baln de destilacin.
c. Se activ el sistema al someter a calor directo (mechero de bunsen) el baln
de agua destilada.
d. El destilado se recibi en un depsito estril y cerrado, aqu se observa un
estado difsico entre agua y aceite esencial, debido a la diferencia de
densidades. Esto permiti separar el aceite esencial mediante el uso de pipeta
Pasteur a viales estriles.
e. Los aceites esenciales obtenidos luego son esterilizados por filtracin con
membrana de Millipore de 0.22 u; almacenado a temperatura ambiente y en
oscuridad hasta su utilizacin.
2.2.6 Minthostachys Mollis
2.2.6.1 Descripcin general
Se denomina en la lengua Quechua mua, y en la Aymara tiene 2 nombres:
Coa y Huaycha. Debido a sus caractersticas semejantes al pleo y organo,
los espaoles la denominaban poleo silvestre. Otros nombres vulgares con los
que se le conoce a esta planta son: "Mua negra", "Polco silvestre", "coz", "muamua", "arash mua", "kon" "Orcco-mua".137,138

La mua, es un recurso natural que tiene un plano altitudinal de crecimiento

entre los 2500 3500 m.s.n.m.139 Habita entre los diferentes pisos ecolgicos de
nuestra serrana, comportndose como tal; existe en gran abundancia. As como
es una planta hemicriptfila que durante la poca ms fra del invierno y seco
desaparecen sus rganos areos para brotar nuevamente con las primeras lluvias
de la primavera.140 Alcanza una altura de 0.80 a 1.50 m., desarrollndose en
forma difusa y muy ramificada, crece en lugares cercanos a acequias,
manantiales sin tener grandes requerimientos de agua.125 Se desarrolla en
suelos arenosos, ricos en materia orgnica, bien drenados, con buena retencin
de humedad, con un pH entre 5-8 y un clima con elevada luminosidad, florece en
poca de lluvia, se multiplica por semilla y por codo. 125
2.2.6.2 Clasificacin sistemtica
Reino

: Vegetal

Sub reino

: Embryophyta

Divisin

: Magnoliophyta

Clase

: Magnoliopsida

Sub clase
Orden

: Methachlamydeae
: Tubiflorae

Familia
Gnero
Especie

: Lamiaceae (Labiatae)
: Minthostachys
: M. mollis (Spach) Griseb

Nombre vulgar : Mua

Frmula floral

: K(5) C(2-3) A(2-2) G(2)

2.2.6.3 Caractersticas Botnicas

Es una planta arbustiva, leosa, frondosa en la parte superior, de aspecto general
glauco, erecta y pubescente, su tallo es ramificado desde la base. La hoja es el
elemento vegetativo simple ligeramente aserrado, carece de estpulas,
cortamente pedunculares de filotaxia opuesta. Su peciolo mide entre 4 y 6 mm.
de largo, pubescente acanalada en la parte superior y convexo en la parte
inferior, es aqu donde se deposita la mayor cantidad de aceite, que al estrujarlos
dejan sentir su aroma caracterstico. Las flores son hermafroditas.
El limbo es aovadote 1.7 a 2.5 cm. En su mayor ancho, y de 2 a 4 cm. de largo;
su base es atenuada de bordes aservados, pice agudo de nerviacin
penninervia. El limbo es pubescente tanto en el haz como en el envez, debido a
lo cual la hoja presenta una coloracin verde plida; sus nervaduras secundarias
son muy desarrolladas y ligeramente reticuladas. El cliz soldado con 13
venaciones terminado en 5 lbulos dentados casi iguales entre si con pelos
cerelosos en la base, la corola raramente es de 6mm. De largo, dividida en 2
labios: 2 lbulos o labio superior y 3 lbulos o labio inferior. Los pelos de las
partes areas, o sea de las hojas y tallos, parece que forman una especie de
manto protector contra los cambios bruscos de temperatura y al mismo tiempo
son los lugares en donde se deposita el aceite esencial, de aqu que al estrujarlos

dejen sentir su aroma o el sabor picante que da una impresin de fro que es
caracterstico. Las flores son pequeas, reunidas en verticilos falsos, situados en
la parte superior de las ramas con pednculos cortos, 2 en cada axila.
2.2.6.4 Tipos de mua
Se indica un total de 12 especies, cuya distribucin abarca desde Argentina hasta
Venezuela; 139 y en el Per encontraron 6 especies distribuidas desde el norte
(Cajamarca) hasta el sur (Cuzco), con una mayor distribucin en la regin central,
cuyas especies son: 139,141
M. glabrescens
M. salicifolia
M. cetosa
M. spicata
M. tomentosa
M. mollis (HKB) griseb

2.2.6.5 Caractersticas fsico-qumicas del aceite esencial de M. mollis (HKB)

griseb mua 124,125
- Aspecto

: Lquida, clara, transparente

- Color

: Incoloro

- Olor

: Caracterstico en menta

- Sabor

: Picante

- Densidad relativa : 0.92

- Indice de refraccin : 1.4699
- Solubilidad en alcohol al 70% : 5
- Indice de mentona : 33.88%
- Indice de menta : 22%
- Indice de acidez : 1.683
- Indice de esteres : 5.819
- Rotacin especfica :-2 45
- Indice de ter : 16.80 %
- Contenido de mentol total : 4.042 %
- Solubilidad en etanol : 95 %
2.2.6.6 Composicin Qumica
Con respecto a la composicin qumica del aceite esencial de M. mollis (mua)
existen pocos trabajos de investigacin por lo que se tiene poca informacin; el

aceite esencial de M. mollis (mua), al igual que otros aceites esenciales,

presenta una estructura aldehdica, cetnica, alcohlica (mentol y mentona),
steres, teres y terpenos en mayor porcentaje.
Gibaja142 realiz la desterpenacin del aceite esencial de M. mollis (mua)
determinando el 10.20% para la parte desterpenada (compuestos oxigenados) y
89.80 % para la fraccin terpnica. Chica12 determin la presencia de carvacril
acetato, carvacrol, pulegona y mentona.
2.2.6.7 Molculas presentes en Minthostachys mollis
Pulegona
Uno de los componentes ms importantes de muchos aceites Minthostachys,
pero es mejor conocido por pulegium poleo (Mentha). Es altamente txico en
grandes cantidades, daa el hgado y puede provocar el aborto. Su toxicidad
probablemente explica algunos de los efectos del aceite de Minthostachys contra
las plagas y parsitos. La sustancia tambin se usa en perfumera y saborizantes.
Mentona
Otro componente muy importante, junto con Pulegona a menudo representan
ms del 75% de la composicin del aceite entero. El ms conocido de la menta
(Mentha x piperita). Tiene un aroma muy agradable sabor a menta y se usa en
perfumera, pero tambin tiene propiedades digestivas.
Carvacrol
Se han encontrado para ser componentes dominantes en una menor proporcin
de los estudios de los aceites de Minthostachys molis. Carvacrol tambin se
encuentra en varias hierbas conocidos como el organo (Origanum vulgare), la
ajedrea de verano (Satureja hortensis) o tomillo (Thymus serpyllum), y es sobre
todo un valor para sazonar.
Carvona
Como su nombre lo sugiere, esta sustancia es conocida como un producto de
semillas de alcaravea (Carum carvi), un Apiaceae. Tiene propiedades digestivas y
se utiliza para dar sabor.
Mentol
Por lo general, mucho menos importante en Minthostachys mollis, pero a veces
se encuentra como componente menor de la mezcla de aceite. Se est enfriando
y adormece el dolor, y se utiliza contra throatsore.
Linalol
Empleado como condimento y como insecticida, linalol es ms conocido de
cilantro (Coriandrum sativum) de la familia Apiaceae. A menudo es uno de los
componentes menores del aceite de Minthostachys mollis.
Timol
Como su nombre lo sugiere, esta sustancia es bien conocida de los aceites de
distintas especies de tomillo. Acta como antisptico y contra el dolor de

garganta y tos. A veces se encuentra como un componente menor en el aceite de

Minthostachys mollis.
2.2.6.8 Composicin nutritiva de Minthostachys mollis (mua)
parte comestible
Componentes mayores:
Agua 16 ug. %
Protenas 3.20 ug. %
Grasas 2.80 ug. %
Carbohidratos 66.30 ug. %
Fibras 9.40 ug. %
Cenizas 11.70 ug. %
Minerales:
Calcio 2.24 ug. %
Fsforo 269 ug. %
Hierro 22.40 ug. %
Vitaminas
Retinol 306 ug. %
Tiamina 0.35 ug. %
Riboflavina 1.81 ug. %
Niacina 6.85 ug. %
Ac. Ascrbico 21.10 ug. %
Otros componentes
Acidos dbiles 2.54 ug. %
Esteres 14.02 ug. %
Taninos Positivo
Resinas Positivo
Fenoles Positivo
Alcoholes Positivo
Aldehidos Positivo
Cetonas Positivo
Carbonilo 22.06 ug. %
Mentol 40.42 ug. %
2.2.6.9. Propiedades y usos

En 100 gr. De

La mua es reconocida tradicionalmente por sus propiedades digestivas contra

clicos,
flatulencia
(carminativo),
vmitos,
diarreas;
antitusgenas,
antiasmtico,6,138 expectorante,4 antiespasmdicas, antisptica, analgsico,
antiinflamatorio, febrfugas, en tratamiento de tumores y mezclndola con chilca
se empleaba en fracturas.13 Es excelente contra la halitosis143 y para combatir
jaquecas y soroche. Adems es utilizada como condimento para preparar platos
tpicos.6
En el campo agrcola se emplea para la preservacin de algunos productos como
la papa, del ataque de insectos.137,138,143 A manera de fumigante orgnico
vegetal contra el gorgojo de los andes y Norimoschema y como antimoho.4
En el campo pecuario es utilizado para controlar los ectoparsitos y
endoparsitos de los animales domsticos, adems para curar sarna en equinos y
camlidos.6 En otras zonas de Latinoamrica, principalmente en Argentina, se le
emplea para aromatizar y fabricar licores y bebidas.7
2.2.7 Pruebas de Susceptibilidad Microbiana
La actividad antimicrobiana se mide in vitro para determinar principalmente la
potencia de un agente antibacteriano en solucin, su concentracin en los
lquidos del cuerpo o en los tejidos y la susceptibilidad de un microorganismo
dado a concentraciones conocidas del medicamento. Los mtodos ms utilizados
son:
2.2.7.1 Mtodo de Dilucin
Se incorporan cantidades graduadas de las sustancias antimicrobianas en medios
bacteriolgicos lquidos o slidos; los medios se inoculan despus con las
bacterias de prueba y se incuban. El punto final se toma como la cantidad de
sustancia antibacteriana requerida para inhibir el crecimiento o para matar las
bacterias de prueba.144,145
Las pruebas de sensibilidad por dilucin en agar consumen tiempo y su uso est
limitado a circunstancias especiales. Sin embargo, el advenimiento de series
preparadas de dilucin de caldos para muchos frmacos distintos en placas con
microdilucin ha aumentado y simplificado de manera considerable al mtodo. La
ventaja de las pruebas con microdilucin es que permite informar un resultado
cuantitativo que indica la cantidad de un frmaco dado necesaria para inhibir (o
matar) a los microorganismos sujetos a la prueba. 144,145
2.2.7.2 Mtodo de Difusin
Este mtodo, que sufri diferentes modificaciones hasta que fue estandarizado
por Kirby-Bauer en los Estados Unidos en 1966, representa la prueba de
susceptibilidad ms ampliamente utilizada en bacteriologa clnica porque
permite obtener resultados bastante exactos mediante un mtodo cuantitativo,
semicuantitativo o cualitativo, este ltimo es el ms utilizado.
El Comit de Expertos de la OMS (NCCLS en su documento M7-T) public las
Normas para efectuar algunas modificaciones al descrito por Bauer, de manera
que los resultados sean comparables en todas partes del mundo. Estas normas
tienen en cuenta: 144,145

Condiciones de la cepa:
Debe aislarse del material de estudio.
Debe obtenerse en forma de cultivo puro.
Debe ser agente etiolgico del proceso infeccioso.
Se podrn utilizas cepas de referencia cuando existan dudas del material que
se usa.
Cualidades del disco de papel:
Debe tener un tamao de 5 a 7 mm. y un espesor de 0.02 mm.
Deben cargarse con una concentracin de antimicrobiano selectivo de manera
que se obtenga una zona de inhibicin no mayor de 40 mm.
La cantidad de antimicrobiano selectivo que contiene cada disco debe ser justa
porque una sobrecarga falseara los resultados.
Deben mantenerse almacenados a temperaturas de 4C o segn las
instrucciones del fabricante, para que no haya deterioro en la potencia de la
droga.
Tienen que estar en un ambiente con sustancias desecadoras para evitar los
vapores de condensacin al almacenarlos en el refrigerador.
Indicaciones para la preparacin de las placas:
El medio deber distribuirse uniformemente en la caja.
La altura del medio debe ser de 4mm para que se pueda estandarizar la
difusin de la droga porque si se disminuyera el espesor de la capa de agar se
obtendra halos inhibicin ms amplios.
Este mtodo requiere experiencia de laboratorio y conocimiento de bacteriologa
porque de lo contrario se pueden cometer errores que repercutirn clnicamente.
A continuacin se detalla los pasos a seguir para realizar esta prueba: 144,145
Se realiza la siembra de la placa con el agar selectivo para el microorganismo
especfico, esta siembra puede ser por diseminacin en la superficie, por
inundacin o por agotamiento por estras.
Se deja secar entre 3 y 5 minutos.
Con una pinza estril de puntas finas se colocan sobre la superficie del agar
sembrado discos individuales o en estrella; estos llevan impresa la abreviatura
del antimicrobiano selectivo en el cual se encuentran embebidos y la serie a la
cual pertenecen.
Con respecto a los discos se debe tener en cuenta que para asegurar el
contacto adecuado y por lo tanto una difusin uniforme se los debe presionar
suavemente. Para permitir la lectura de los resultados se los debe colocar con la
inscripcin hacia el medio de cultivo. Para impedir la superposicin de los halos
de inhibicin deben estar a una distancia no menor de 15 mm entre s y a 1.5 cm.
del borde de la placa.

 Se deja la placa no menos de media hora a temperatura ambiente para que el

disco absorba agua del medio de cultivo y as permita la difusin radial del
antimicrobiano selectivo, lo que produce un gradiente de concentracin, es decir
que cuanto ms nos alejamos del disco menor ser la concentracin del
antimicrobiano. Esta predifusin es necesaria para reducir una posible causa de
error.
Luego se incuba de acuerdo a las caractersticas de cada microorganismo. Una
vez transcurrido el tiempo indicado se procede a la medicin e interpretacin de
la zona circunda el disco, llamada halo de inhibicin. Este informa si el
microorganismo es sensible, resistente o intermedio. La falta de desarrollo
alrededor del disco indica que la bacteria es sensible al antimicrobiano
selectivo, lo que significa que despus de tratar al paciente infectado por el
microorganismo con las dosis habituales de dicho antimicrobiano se observar
una respuesta favorable al tratamiento. El crecimiento del microorganismo
alrededor del disco indica una cepa resistente, es decir, una con la cual no se
obtendr ninguna respuesta teraputica. Existe un tercer tipo de cepa, la cepa
intermedia, que es la que exige la administracin de dosis de antimicrobianos
superiores a las habituales para obtener una respuesta teraputica favorable.
Como el tamao de cada halo de inhibicin depende de la sensibilidad de la cepa
al antimicrobiano, de la velocidad de crecimiento del microorganismo, de la
cantidad (carga) de antimicrobiano selectivo presente en el disco y de la
capacidad para difundir en el medio, etc., un halo ms grande no siempre indica
mayor actividad antimicrobiana.
2.2.8 Evaluacin de la Susceptibilidad Microbiana
Muchos microorganismos han desarrollado diferentes grados de resistencia a los
quimioterpicos, lo que en algunos casos, con el paso del tiempo causan efectos
colaterales; lo que no sucede con el uso de los principios activos de una
planta.120 Duraffourd ha trabajado mucho en fitoterapia clnica, aplicando
tratamientos en base de principios activos comparndolos con la actividad de
antibiticos, segn lo que reporto el uso de principios activos en humanos no
reportaron efectos secundarios.
Para demostrar la susceptibilidad que tienen los microorganismos a diversos
aceites esenciales Duraffourd y col. realizaron estudios estadsticos determinando
tablas de actividad antimicrobiana basado en porcentajes.120
Estos consideran la actividad de los aceites esenciales en funcin al dimetro del
halo de inhibicin de crecimiento bacteriano (HICB):

Nula (-), para un dimetro inferior a 8 mm.

Sensibilidad lmite (sensible = +) para un dimetro comprendido entre 8 a
14mm
Medio (muy sensible =++) para un dimetro entre 14 y 20mm
Finalmente para un dimetro superior a 20 mm el microorganismo es
sumamente sensible (+++)

2.3 Definicin de trminos

Aceite esencial: Los aceites esenciales son mezclas de varias sustancias
qumicas biosintetizadas provenientes de las plantas, que dan ciertas
caractersticas a flores, rboles, semillas y a ciertos extractos de origen animal.
Qumicamente estn formados por monoterpenos y algunos sesquiterpenos, y
compuestos aromticos.
Cepa bacteriana: Todos los organismos descendientes de un cultivo puro, por
tanto, con fenotipo y genotipo definidos.
Efectividad antibacteriana: Cualidad de un frmaco o agente qumico
determinado consistente en eliminar o inhibir el crecimiento de las bacterias
patgenas que se desarrollan en un medio dado, al actuar sobre ellas indirecta
(obstaculizando el desarrollo bacteriano) o directamente (ocasionando la muerte
de la clula bacteriana).
Principio Activo: Sustancia qumica responsable de la actividad farmacolgica y
del uso teraputico de una droga.