Revista de Cincias

Farmacuticas
Bsica e Aplicada

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

ISSN 1808-4532

Journal of Basic and Applied Pharmaceutical Sciences

Emulses O/A contendo Cetoconazol 2,0%:

avaliao da estabilidade acelerada e estudos de
liberao in vitro
Mendona, C.C.1; Silva, I.C.L.1; Rodrigues, K.A.1; Campos, M.A.L.1; Medeiros, M.C.M.1; Casteli, V.C.1;
Ferrari, M.1, Musis, C.R.1; Machado, S.R.P1*
1

Laboratrio de Desenvolvimento e Avaliao de Formas Farmacuticas e Cosmticas,

Faculdade de Farmcia, Universidade de Cuiab, UNIC, Cuiab, MT, Brasil.
Recebido 16/09/2008 / Aceito 18/05/2009

RESUMO
Os objetivos do estudo foram desenvolver e avaliar a
estabilidade fsico-qumica de emulses O/A contendo
cetoconazol a 2,0% e determinar seu perfil de liberao
in vitro. As formulaes foram preparadas com bases
auto-emulsionveis com diferentes caractersticas
qumicas. A estabilidade do sistema foi avaliada
de acordo com o Guia para Realizao de Testes de
Estabilidade em Produtos Farmacuticos, utilizando
diferentes temperaturas (4C, 37C e 45C) por um
perodo de tempo de trs meses. Os parmetros
avaliados durante o ensaio foram: as caractersticas
organolpticas,o pH, o comportamento reolgico
e a concentrao do ativo. A emulso considerada
estvel foi submetida ao ensaio de liberao in vitro
utilizando clula de difuso de Franz. A quantificao
do cetoconazol na formulao e na soluo receptora
foi realizada por mtodo espectrofotomtrico no
ultravioleta a 244 nm. Dentre as formulaes testadas,
somente aquela preparada com lcool cetoestearlico
e estearato de polietilenoglicol (PEG20) manteve suas
caractersticas fsico-qumicas estveis durante o
teste. O estudo de liberao in vitro demonstrou que
o frmaco foi liberado do sistema gradualmente no
decorrer do tempo, apresentando uma cintica pseudo
zero ordem.
Palavras-chave: Cetoconazol. Estabilidade acelerada.
Emulso O/A. Liberao in vitro.
INTRODUO
As preparaes semi-slidas constituem uma
significativa proporo das formas farmacutica presentes
no mercado, pois servem como carreadores para frmacos
que so liberados topicamente atravs da pele. Devido

Autor correspondente: Silvia Regina Pengo Machado - Faculdade de

Farmcia - Universidade de Cuiab - Av. Beira Rio, 3100 - Jardim
Europa - CEP. 78015-480 - Cuiab - MT - Brasil - Telefone (65)33631044 - e-mail:silviapengo@yahoo.com.br

a seu comportamento reolgico perculiar, estas formas

podem aderir superfcie da pele por um perodo de tempo
suficientemente longo, propiciando um prolongamento da
liberao do frmaco no stio de aplicao. Alm disso,
so facilmente aplicveis e versteis, pois proporcionam a
liberao tpica de uma grande variedade de molculas de
frmacos (Gupta & Garg, 2002).
Entre estas formas farmacuticas, destacam-se
as emulses, que so uma mistura termodinamicamente
instvel de dois lquidos imiscveis, constitudos de uma
fase dispersa insolvel na fase dispersante e um terceiro
componente que o agente tensoativo, responsvel pela
unio destas duas fases (Ansel et al., 2000). As emulses so
muito utilizadas na rea farmacutica para os tratamentos
tpicos, devido a sua capacidade de veiculao de princpios
ativos hidrossolveis e/ou lipossolveis, de diminuio da
irritabilidade drmica de certos frmacos e principalmente
da boa aceitao por parte do paciente (Lachman et al.,
2001).
O cetoconazol um derivado imidazlico com
amplo espectro de ao antifngica e alguma atividade
antibacteriana, utilizado no tratamento de micoses
sistmicas e tpicas (Rang et al., 2000) .
As formas farmacuticas na fase de desenvolvimento
devem passar por ensaios que visam obteno de
informaes sobre sua estabilidade, ou seja, a definio
do seu prazo de validade, perodo de utilizao em
embalagem e condies de armazenamento especificadas.
A estabilidade de produtos farmacuticos depende de
fatores ambientais como a temperatura, a umidade e a
luz, e outros relacionados ao prprio produto como as
propriedades fsicas e qumicas dos princpios e excipientes
farmacuticos, a forma farmacutica e sua composio, o
processo de fabricao, o tipo e propriedades dos materiais
de embalagem (Brasil, 2005).
As variaes de temperatura so os principais
parmetros utilizados para induzir rpidas alteraes
qumicas e fsicas nas formulaes, que so avaliadas pela
quantificao do princpio ativo e pelo comportamento
reolgico do sistema estudado no decorrer dos ensaios de
estabilidade (Guaratini et al., 2006).

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

Entre os estudos de estabilidade propostos pela

legislao vigente para produtos farmacuticos (Brasil,
2005), os estudos de estabilidade acelerada utilizando
temperaturas extremas, o doseamento do ativo e a
determinao dos parmetros reolgicos so os mais
utilizados, pois possibilitam a caracterizao de uma
formulao em perodos de tempo curtos (Di Mambro et
al., 2003; Tadros., 2004).
Estudos preliminares da estabilidade de emulses
O/A contendo cetoconazol a 2,0 % j foram realizados.
Foram preparadas oito formulaes, sendo que apenas trs
destas apresentaram-se estveis (Casteli et al., 2007).
Alm da estabilidade, durante a fase de
desenvolvimento de produtos dermatolgicos adequado
empregar os ensaios de liberao in vitro para selecionar
excipientes para as formulaes que possam propiciar uma
atividade teraputica satisfatria. Pode-se considerar que os
estudos de liberao proporcionam dados interessantes sobre
as particularidades estruturais do veculo e a capacidade
deste em liberar os frmacos (Sato et al., 2007).
Tendo em vista o exposto, o objetivo do trabalho foi
a avaliao da estabilidade acelerada de emulses contendo
cetoconazol 2,0% e a determinao do perfil de liberao
destes sistemas in vitro.
MATERIAL E MTODOS
Instrumentao
A gua utilizada foi proveniente do sistema de
Osmose Reversa Mod. 10 LTH, GEHAKA. Todas as
substncias foram pesadas nas Balanas Digitais Semianaltica e Analtica Mod. BG 2000, GEHAKA e Mod. FA
2104 N, BIOPRECISA. As emulses foram preparadas com
auxlio dos Agitadores Mecnicos Mod. 713 D, FISATOM
e Mod. RW 20 DZM, IKA. Os ensaios de estabilidade
foram realizados nas Cmaras Climticas 420 CLD, NOVA
TICA, e Refrigerador Mod. RDE 35, ELECTROLUX.
Os parmetros avaliados durante estes ensaios foram
realizados com auxlio do Medidor de pH Mod. PH 300,
ALPAX, do Remetro Brookfield DV III Ultra remetro
Mod. RV III, BROOKFIELD, do Espectrofotmetro
FEMTO 800XI e do Banho de Ultra-som Mod. USC
1400, ULTRASONIC CLEANER, UNIQUE. Os ensaios
de liberao foram realizados com o auxlio da Mesa
Agitadora com aquecimento Mod. RT 10 IKA- WERKE e
do Banho Ultratermostatizado, Mod. 521/1D- Nova tica.
Para homogeneizao das solues preparadas, utilizou-se
o Agitador para tubos tipo Vrtex Mod. Lab Dancer, IKA.
Materiais
As emulses foram formuladas com as seguintes
matrias-primas classificadas conforme a Denominao
Comum Brasileira (Brasil, 2006): cido esterico (Henrifarma Ltda, SP, Brasil), cetoconazol (98,9%) -

36

(Henrifarma Ltda, SP, Brasil), lcool ceto-estearlico e

sulfato de sdio - Polawax NF (Croda, SP, Brasil), lcool
ceto-estearlico e seu derivado etoxilado- Paramul J
(Galena, SP, Brasil), 1,2 dibromo 2,4 dicianobuteno em
2 fenoxietanol - Merguard 1200 (Pharma Special, SP,
Brasil), polmero de taurato de acriloil dimetil amnio VP;
4 - fosfato de trilauril; poli gliceril - 2 - sesquisosterato,
leo de semente de flores de vero, tetra dibutil penta
eritritil hidroxi hidrocinamato de glicerina-Hostacerin
NCB (Pharma Special, SP, Brasil), leo mineral (Henrifarma Ltda, SP, Brasil), propilenoglicol, BHT,
estearato de gliceril palmitato de Ascorbil, cido ctrico de
sdio- Oxynex 20004 (Alpax, SP, Brasil), metabissulfito
de sdio (Henrifarma Ltda, SP, Brasil), EDTA sdico (Henrifarma Ltda, SP, Brasil), propilenoglicol - (Galena
Qumica e Farmacutica Ltda, SP, Brasil) e trietanolamina
- (Henrifarma Ltda, SP, Brasil). Todos os outros reagentes
possuam grau de pureza adequada.
Mtodos
Preparao das Emulses
Foram preparadas emulses O/A que apresentaram
uma frmula farmacutica bsica composta por:
Cetoconazol 2,0 % (p/p)
EDTA Na 0,2 % (p/p)
Merguard 1200 0,6 % (p/p)
Metabissulfito de Sdio 0,2 % (p/p)
leo Mineral 5,0 % (p/p)
Oxynex 2004 0,2 % (p/p)
Propilenoglicol 3,0% (p/p)

A Tabela 1 mostra a composio especfica de
cada formulao.
Tabela 1 - Composio das emulses O/A contendo
Cetoconazol.
Formulaes

Componentes da Emulso (%) (p/p)

cido Trietanolamina Hostacerin Paramul J Polawax

esterico NCB NF

3,0 1,0 - - 8,0

- - - 10,0 -

- - 5,0 - -

As emulses foram preparadas aquecendo as fases

oleosa e aquosa a 75 oC e sob agitao constante verteu-se
a fase aquosa sobre a oleosa, mantendo a agitao (1.000
rpm) por 30 minutos. Foram preparados trs lotes de cada
formulao.

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

Ensaios de estabilidade acelerada

Aproximadamente 40 g de cada formulao foi
acondicionada em frascos plticos de poliestireno com
tampa (50 g) e submetidos a condies de temperatura
variada (Wittern et al., 1985). Geladeira (4 2 C);
Temperatura ambiente (37 2C) ; Estufa (45 C com
umidade controlada a 75 %).
As formulaes foram avaliadas a intervalos de
tempo pr-determinados: 1, 15, 30, 60 e 90 dias.
Os parmetros monitorados foram:
Determinao do pH
Em tubos de ensaio foram adicionados 1,0 g da
emulso e 9,0 g de gua destilada (Ferrari, 2002). Com
auxlio de vrtex as amostras foram homogeneizadas e a
seguir o pH foi determinado, atravs do Medidor de pH
pela insero do eletrodo.
Determinao do comportamente reolgico
A determinao da viscosidade e do comportamento
reolgico das amostras foi realizada em um Remetro tipo
cone e placa com interface a um Software Rheocalc 3.0,
utilizando um spindle CP 52 e uma quantidade de amostras
de 0,4 g, a 25C. As variveis contempladas neste estudo
dependeram da formulao obtida. Para as formulaes
1 e 2, as medidas foram feitas em velocidades de rotao
progressivamente crescentes (1-30 rpm com variao em
intervalos de 3 em 3 rpm), para obter-se a curva ascendente,
sendo o procedimento repetido no sentido inverso com
velocidades progressivamente decrescentes (30-1 rpm),
com mesmo intervalo de variao , de 3 em 3 rpm, para
obteno da curva descente. Para a formulao 3, as medidas
foram feitas em velocidade de rotao progressivamente
crescentes (1-100 rpm com variao em intervalos de 10
em 10 rpm) para obter-se a curva ascendente, sendo o
procedimento repetido no sentido inverso com velocidades
progressivamente decrescentes (100-1 rpm), com mesmo
intervalo de variao de 10 em 10 rpm para obteno da
curva descente.
Doseamento do frmaco
Validao da metodologia analtica para quantificao do
frmaco nas emulses O/A
A validao da metodologia analtica foi realizada
segundo os critrios propostos pela Resoluo da ANVISA
RE n 899, de 29/5/2003 (Brasil, 2003). Os parmetros
avaliados foram a linearidade, a preciso intermediria, a
repetibilidade, a especificidade e a exatido. A linearidade
e o intervalo foram determinados por meio da construo
da curva analtica com uma soluo padro de 250 g/mL
de cetoconazol em metanol. A partir desta soluo foram

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

realizadas diluies para obter solues do frmaco nas

concentraes de 5, 10, 15, 20 e 25 g/mL. Estas amostras
foram avaliadas empregando espectrofotmetro de UV no
comprimento de onda de 244 nm.
Preciso
Para avaliar a preciso intra corrida ou
repetibilidade, trs concentraes diferentes (5, 15 e 25
g/mL) foram quantificadas em triplicata, totalizando
nove determinaes, sendo o resultado da anlise expresso
em termos de coeficiente de variao (CV). A preciso
intermediria foi avaliada por meio da comparao entre
a quantificao de uma mesma concentrao (5, 15 e 25
g/mL) realizada em trs dias consecutivos, calculando-se
posteriormente o CV obtido.
Especificidade
O ensaio de especificidade foi realizado
atravs da anlise das formulaes sem princpio ativo
(cetoconazol) em metanol. A quantidade de formulao
contida nas solues foi equivalente a utilizada no ensaio
de doseamento do ativo nos estudos de estabilidade. Estas
solues foram avaliadas empregando espectrotmetro de
UV no comprimento de onda de 244 nm.
Exatido
Para avaliar a exatido, trs concentraes
diferentes (5, 15 e 25 g/mL) foram quantificadas em
triplicata, totalizando nove determinaes. A exatido
foi expressa pela relao entre a concentrao mdia
determinada experimentalmente e a concentrao terica
correspondente.
A preciso e exatido foram calculadas pelas
frmulas:
Preciso: % C.V. = (desvio padro/mdia) x 100
Exatido: % Bias = [concentrao mdia experimentalconcentrao terica/ concentrao terica] x 100
Determinao da quantificao de frmaco na emulso
Pesou-se 0,5 g do creme contendo o frmaco e
transferiu-se para o balo de 100 mL com auxlio da
adio de 80 mL de metanol. O balo foi sonicado por 15
minutos, o volume total do mesmo foi completado com o
mesmo solvente e homogeneizado. A seguir, o contedo foi
filtrado, sendo que os primeiros 15 mL do filtrado foram
desprezados. Coletou-se 5 mL do filtrado, transferiu-se para
um balo de 25 mL e completou-se o volume com metanol.
A amostra foi avaliada empregando-se espectrotmetro UV
no comprimento de onda de 244 nm.
Ensaios de Liberao in vitro
Aps a seleo da formulao mais estvel, por meio
do teste de estabilidade acelerada, a mesma foi submetida
ao ensaio de liberao in vitro.

37

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

Validao da metodologia analtica para quantificao do

frmaco aps experimento de liberao in vitro
Para a construo da curva analtica, utilizou-se uma
soluo padro de 1 mg/mL de cetoconazol em tampo
fosfato pH 7,4 /etanol (60:40). A partir desta soluo foram
realizadas diluies para obter solues do frmaco nas
concentraes de 10, 15, 20 , 25, 50 e 60 g/mL. Estas
amostras foram avaliadas empregando espectrofotmetro
de UV no comprimento de onda de 244 nm.

Anlise Estatstica
Os resultados dos testes de estabilidade acelerada
foram submetidos aos testes de Tamhane para amostras
heterogneas e de Tukey (Sokal & Rohlf, 1995) para as
homogneas. As anlises estatsticas foram realizadas com
programa SPSS 13.0 for Windows.
Resultados

Preciso e Exatido

Estudos de Estabilidade Acelerada

A preciso e exatido foram avaliadas conforme

descrito anteriormente.

Avaliao Macroscpica

Ensaio de liberao
Teste de liberao do frmaco in vitro
Foram utilizadas clulas de difuso vertical do
tipo Franz, com rea de liberao de 1,13 cm2. Essas clulas
so divididas em duas partes de forma que uma metade
(compartimento doador) fica sobre a outra (compartimento
receptor com volume de 9 mL) e entre elas a membrana.
A parte inferior desta clula de difuso possui trs portas,
sendo uma entrada e uma sada de lquido circulante
aquecido para manter a temperatura do compartimento a
37 2 C (banho-maria termostatizado) e uma entrada que
se comunica com o compartimento interno (compartimento
receptor) para permitir a coleta manual da soluo
receptora. A soluo receptora foi mantida a 37 2 C e
agitada a 350 rpm durante todo perodo de experimento.
A clula de difuso foi montada com membrana de acetato
celulose com reteno para macromolculas acima de
12.0000 Daltons, (SIGMA-ALDRICH, EUA) separando o
compartimento doador do receptor.
A soluo tampo fosfato de sdio pH 7,4/etanol
(60:40) foi colocada no compartimento receptor. Sobre as
extremidades das clulas foram esticadas as membranas e
o compartimento receptor foi fixado. A seguir, espalhouse uniformemente sobre a membrana 0,4 g da formulao
contendo cetoconazol 2,0%. Um volume de 3 mL foi
coletado da fase receptora a cada trs horas, seguido da
reposio do mesmo volume com meio receptor limpo.
As amostras coletadas foram quantificadas utilizando o
comprimento de onda 244 nm.
Para o clculo da quantidade liberada,
consideraram-se as diluies que ocorreram aps a primeira
coleta.
Determinao da cintica de liberao do cetoconazol
Foram avaliados trs modelos cinticos: (1) Zero
- Ordem: quantidade liberada (g/cm2) /tempo (h); (2)
Higuchi (pseudo zero ordem): quantidade liberada (g/
cm2) /tempo (h) e (3) Primeira-Ordem: Log. da quantidade
liberada (g/cm2) /tempo (h).

38

As formulaes desenvolvidas foram submetidas ao

armazenamento em condies de temperatura e umidade
especifica, 24 horas aps seu preparo e criteriosamente
avaliadas antes e aps o ensaio de estabilidade acelerada.
Os parmetros avaliados envolvem as alteraes
fsicas e fsico-qumicas, tais como: o aspecto, a cor, o
odor,o pH, o comportamento reolgico e o teor do ativo.
A anlise macroscpica das formulaes 24 horas
aps seu preparo das formulaes mostrou que todas se
apresentavam visualmente estveis. As caractersticas
organolpticas
das
formulaes
inicialmente
e
posteriormente ao ensaio de estabilidade acelerada esto
demonstradas na Tabela 2.
Tabela 2 - Observao visual das caractersticas
organolpticas das formulaes.
Formulao
1

Observao visual
Inicial

Final

A emulso apresentouse homognea e de

colorao branco
brilhante.

A emulso apresentouse homognea e de

colorao branco
opaco.

A emulso apresentouse homognea e de

colorao amarelada
brilhante.

A emulso apresentouse com consistncia

fluida e de colorao
rsea.

O gel-creme
apresentou-se
homogneo e de
colorao branco
brilhante.

O gel-creme
apresentou-se com
consistncia fluida e
de colorao rsea.

Determinao do pH
A Tabela 3 apresenta a variao do valor do pH frente
s condies propostas no estudo. Os valores apresentados
correspondem mdia dos valores de trs lotes de cada
formulao, sob cada condio proposta.
Valores calculados pelos valores originais (n=3)
expressos pela mdia desvio padro, entre parnteses
so apresentados os valores do coeficiente de variao em
porcentagem.

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

De acordo com a Tabela 3 somente a Formulao 1

mostrou-se estvel em relao ao valor de pH durante todo
perodo do ensaio, com diferenas de valores de desvio
dentro do limite de variao aceitvel 10%.
Tabela 3 - Avaliao dos pH das formulaes durante o
ensaio de estabilidade acelerada.

15

30

60

90

Temperatura Formulaes
(C)

1,4

7,93 0,27 (3,4)

7,50 0,10 (1,3)

5,77 0,06 (1,0)

37

7,78 0,15 (1,9)

7,43 0,15 (2,0)

5,83 0,06 (1,0)

45

7,87 0,24 (3,1)

7,47 0,15 (2,0)

5,80 0,00 (0)

7,77 0,25 (3,2)

6,65 0,25 (3,7)

5,83 0,10 (1,7)

37

7,77 0,25 (3,2)

6,81 0,48 (7,0)

5,80 0,13 (2,2)

45

7,77 0,25 (3,2)

6,55 0,19 (2,9)

5,47 0,03 (0,5)

7,80 0,20 (2,6)

5,65 0,03 (0,5)

37

7,70 0,20 (2,6)

5,66 0,10 (1,8)

45

7,73 0,15 (1,9)

7,70 0,40 (5,2)

37

7,80 0,15 (1,9)

45

7,60 0,25 (3,3)

8,57 0,20 (2,3)

37

8,23 0,32 (3,9)

45

8,47 0,20 (2,4)

O= oxidou.

Determinao da concentrao de cetoconazol

Tendo em vista que um dos objetivos do trabalho foi
determinar a estabilidade qumica das formulaes e avaliar
o perfil de liberao do frmaco in vitro, fez-se necessrio o
desenvolvimento e a validao de uma metodologia analtica
sensvel e reprodutvel para a realizao do doseamento do
cetoconazol. O mtodo proposto foi baseado no trabalho de
Kedor-Hackmann et al., (2006). A anlise estatstica dos dados
por regresso linear indicou uma relao de linearidade entre
as absorbncias (nm) e as concentraes do frmaco (g/mL),
de acordo com a equao y = 0,0396x - 0,1002 e r = 0,9860.
A especificidade um parmetro analtico essencial
para confiabilidade do mtodo, os resultados mostraram que
nenhum dos componentes da formulao ou mesmo o solvente
(metanol), apresentou absorbncia no mesmo comprimento de
onda do cetoconazol.

Tabela 5 -Avaliao da preciso intra-corrida (repetibilidade)

e inter-corridas (intermediria) e da exatido do mtodo
analtico.
Concentrao
(g/mL)
5
15
25

Repetibilidade
Intermediria Exatido
(%)*
(%)*
(%)*
1,0707
1,8303
0,8440

4,8435
1,2784
0,6678

2,2660
4,9046
1,3878

*valores correspondem ao coeficiente variao em porcentagem

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

Log [cetoconazol] (ug/mL)

1,6

1,2
1
4C
0,8

37C
45C

0,6
0,4
0,2
0
0

20

40

60

80

100

Tempo (dias)

Figura 1. Quantificao do cetoconazol, expresso em log

dos valores das concentraes de Cetoconazol pelo tempo,
na formulao 1 durante o ensaio de estabilidade acelerada.
As barras verticais indicam o desvio padro de 3 lotes da
formulao em cada temperatura.
600

massa de cetoconazol liberado/rea

(ug/cm2)

Tempo
(dias)

A anlise da quantidade de frmaco presente nas

emulses no decorrer do ensaio de estabilidade acelerada
foi realizada e os resultados correspondem formulao
1, pois esta foi nica que se apresentou estvel at o fim
dos trs meses.

500
400
300
200
100
0
0

10

15

20

25

30

Tempo (horas)

Figura 2. Massa de Cetoconazol acumulada na soluo

receptora de clulas de Franz equipadas com membrana
de acetato de celulose normalizada pela rea de contato
em funo do tempo. As barras verticais indicam o desvio
padro de 6 clulas.
A fim de conseguir quantificar o frmaco diretamente
na fase receptora durante os ensaios de liberao foi
validada uma nova curva analtica.
O mtodo analtico proposto mostrou-se linear, pois
a anlise estatstica dos dados por regresso linear indicou
uma relao de linearidade entre as absorbncias e as
concentraes do frmaco, de acordo com a equao y =
0,0215x - 0,0135 e r = 0,9992.
Em relao escolha do meio receptor adequado
para utilizao no experimento de liberao in vitro, os
resultados obtidos demonstram que a adio do etanol
aumentou a dissoluo do cetoconazol em tampo fosfato
pH 7,4 (13,07 g/mL para 870 g/mL), possibilitando a
garantia das condies sink durante o teste de liberao
do frmaco in vitro a partir da formulao desenvolvida.

39

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

Tabela 6 - Avaliao da quantidade de cetoconazol durante

o ensaio de estabilidade acelerada.
Tempo
Temperatura

(dias)
(C)


0
4


37



45


15
4



37


45

30
4


37


45


60
4


37


45

90
4


37


45

Concentrao de Cetoconazol
(g/mL)

19,90 0,012

19,89 0,017

20,06 0,083

18,81 0072
18,75 0,015
18,42 0,011

(%)
99,5
99,45
100,3

94,05
93,55

92,1

18,44 0,016
18,58 0,06
18,12 0,019

92,2
92,9
90,6

18,14 0,021
18,27 0,014
18,19 0,025

90,7
91,35
90,95

18,11 0,020
18,07 0,018
18,08 0,019

90,55
90,35
90,4

Valores calculados pelos valores originais (n = 3) expressos pela

mdia desvio padro

Tabela 7 - Avaliao da preciso intra-corrida (repetibilidade)

e inter-corridas (intermediria) e da exatido do mtodo
analtico.
Concentrao
(g/mL)
10
20
60

Repetibilidade

(%)*

Intermediria
(%)*

3,31
2,87
3,63

5,85
0,89
3,30

Exatido
(%)*

1,6357
0,5038
2,5969

*valores correspondem ao coeficiente variao em porcentagem.

A Figura 2 apresenta o perfil de liberao do

cetoconazol presente na formulao por meio das massas
mdias de Cetoconazol encontradas em cada tempo de
coleta de amostra da soluo receptora, normalizada pela
rea de contato da clula.
A Tabela 8 relaciona os parmetros cinticos de
liberao in vitro do cetoconazol presente na formulao
1 por meio do modelo de cintica zero ordem, Higuchi
(pseudo zero ordem e primeira ordem.
Tabela 8 - Parmetros cinticos da curva de liberao in
vitro do cetoconazol na formulao 1.
Modelo Cintico

Parmetros
J (g/cm2/min.)

0a ordem

0,428

0,991

Higuchi

2,939

0,999

1 ordem

0,028

0,935

Discusso
Os sistemas emulsionados fluidos e semi-slidos
so amplamente utilizados em produtos farmacuticos
e cosmticos para a veiculao de frmacos e ativos

40

cosmticos para pele. No passado. este sistema era

utilizado devido a sua simplicidade e elegncia como
veculo para os frmacos, mas atualmente se sabe que as
propriedades coloidais dos mesmos podem influenciar
a biodisponibilidade dos ativos de vrias formas. Estas
interaes entre o ativo/veculo e o veculo/pele conjuntas
interferem na disponibilidade que o ativo atinge na
superfcie da pele permanecendo ou penetrando atravs do
estrato crneo (Eccleston, 1997). Assim, essencial que
durante a formulao de uma forma farmacutica se avalie
as caractersticas das matrias-primas, do frmaco e do
processo produtivo, a fim de garantir a estabilidade fsica,
qumica e microbiolgica.
Os estudos de estabilidade acelerada so destinados
a aumentar a velocidade de degradao qumica e
modificao fsica de uma substncia ou alterar as
caractersticas da forma farmacutica (ANFARMAG,
2006). Tambm conhecidos como estudos de estabilidade
normal ou exploratria, tm como objetivo fornecer dados
para prever a estabilidade do produto, o tempo de vida
til e a compatibilidade da formulao com o material de
acondicionamento (Brasil, 2005).
Em relao s caractersticas fsico-qumicas
do frmaco, o cetoconazol deve ser conservado em
recipientes hermeticamente fechados e ao abrigo da luz,
pois facilmente oxidvel e fotossensvel. Assim sendo,
aconselhvel que toda formulao contendo este frmaco
contenha um sistema antioxidante composto como o
sulfito de sdio 0,2% ou o metabissulfito de sdio 0,2%.
Alm disso, recomenda-se que o ativo seja conservado em
temperatura ambiente (25C) e protegido de temperaturas
superiores a 40C (Pharmapress, 2006).
As bases auto-emulsionveis utilizadas apresentam
caractersticas distintas. De acordo com a literatura
tcnica, o Polawax NF uma cera auto-emulsionante
no-inica que permanece estvel em ampla faixa de pH,
3 a 12, como tambm na presena de altas concentraes
de eletrlitos (Croda, 2005). O Paramul J tambm
uma base auto-emulsionante no-inica, porm com uma
faixa de estabilidade em relao ao pH mais estreita, 5 a
7 (Galena, 2005). J o Hostacerin NCB uma base de
carter aninico que permanece estvel com pH entre 4 e 9
(Pharmaspecial, 2005).
Analisando em conjunto as caractersticas
fsico-qumicas da base e do ativo nas formulaes e os
resultados apresentados na Tabela 3, observou-se que
embora as formulaes 2 e 3 apresentassem valores de
pH dentro da faixa aceitvel para estabilidade das bases,
ambas demonstraram indcios de perda de sua estabilidade
no decorrer do ensaio. Este fato se deve s condies de
temperatura e umidade extremas empregadas no teste. Isto
possibilitou a degradao do cetoconazol nas formulaes
mesmo com a presena do sistema antioxidante. Peparo
(2001) apresentou resultados semelhantes em relao
formulao mais estvel fsica e quimicamente para

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

11828,96 116,93

1577,6 4,68*

1825,64 30,31*

37

45

1812,41 112,25*

45

1991,01 18,70*

2010,85 9,35*

2348,20 130,96

45

37

2162,99 74,83

2116,69 46,77

2146,45 70,71

45

37

2014,17 32,75

1964,55 159,03

37

2751,7 0

45

12945,67 684,79*

14009 204,71*

13394,5 294,64*

13927,5 188,61*

15827 256,55*

14426 255,72*

13551 232,08

18811 603,86

15779 274,35

16887 557,06

20595 294,17

16406,5 138,22

12388,5 105,5

17094 412,67

15596,5 213,75

0,47 0,16

0,39 0,01

0,43 0,007

0,4 0,03

0,41 0,05

0,43 0,03

0,51 0,05

0,37 0,007

0,41 0,02

0,43 0,07

0,36 0

0,45 0,02

0,51 0,07

0,47 0,04

0,42 0,04

IF

Valores calculados pelos valores originais (n=3) expressos pela mdia desvio padro. * p< 0,05

= viscosidade mnima; IC= ndice de consistncia, IF= ndice de Fluxo e O= oxidou.

90

60

30

15

2924,87 149,81

3125,43 60,81

(C)

(dias)

IC

Tempo

37

Temper.

Formulaes

1445,3 70,15*

1739,66 84,18*

1620,59 9,35*

1508,14 46,77*

1928,18 70,15*

1640,43 46,77*

1723,12 56,225*

1933,69 26,64*

1770,53 51,89*

3046,06 416,28

2731,86 392,89

3148,58 364,82

23534,5 201,40*

16572 206,34*

14641,5 2,12*

11963,5 427,05*

13557,5 275,06*

14980 2200,51*

10026 569*

18958 3789,5*

15149,6 284,15*

23387,5 354,26

28757,5 108,19

23194 134,35

IC

0,27 99,87

0,37 0,021

0,37 0,01

0,41 0,09

0,42 0,02

0,37 0,03

0,45 0,025

0,36 0,04

0,39 0,03

0,31 0,02

0,39 0

0,35 0

IF

677,68 29,46

782,84 18,24

769,95 0

777,99 25,87

780,86 18,24

779,64 33,97

10197,5 98,28

9108 492,14

10481,5 532,5

10238 249,3

10027 296,98

10054 258,80

IC

0,42 0

0,46 0,007

0,43 0,005

0,44 0,02

0,43 0,01

0,43 0,01

IF

A Tabela 4 apresenta o comportamento reolgico das formulaes durante o ensaio de estabilidade acelerada. Os valores apresentados correspondem mdia de trs
lotes de cada formulao sob condies especficas.

Avaliao do comportamento reolgico

Tabela 4 - Comportamento reolgico das formulaes submetidas ao teste de estabilidade acelerada.

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

41

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

veicular este frmaco (base auto-emulsionante e sistema

antioxidante). Skiba et al., (2000), estudaram a estabilidade
de formulaes aquosa contendo cetoconazol. Os resultados
obtidos mostraram que as mesmas apresentaram uma maior
estabilidade qumica quando armazenados a temperatura
ambiente (25C) durante at seis meses em faixa de pH
5,0 a 9,0. Uma taxa de degradao alta foi constatada na
formulao com pH 1,0. Este fato sugere que o cetoconazol
susceptvel especificamente a catlises cidas.
Paralelamente foi realizado um ensaio de estabilidade
acelerada (25C e 50C) com uma formulao preparada
com pH 7,0. Mesmo com neutralidade, houve uma perda
de 5,0% e 15% do cetoconazol presente nas formulaes
acondicionadas respectivamente na temperatura ambiente
e na estufa 6 meses aps o incio do ensaio
A reologia definida como a cincia que estuda o
fluxo e a maneira como os materiais respondem aplicao
de uma fora ou tenso (Tonzar, 2006). As caractersticas
reolgicas so propriedades importantes a serem
consideradas na fabricao, na estocagem e na aplicao de
produtos de uso tpico (Leonardi & Campos, 2001).
Em relao aos parmetros reolgicos avaliados,
sabe-se que o ndice de consistncia (IC) est relacionado
com a prpria viscosidade do produto, ou seja, com a
resistncia ao fluxo, enquanto o ndice de fluxo (IF) est
relacionado com o comportamento da curva, ou seja, indica
o grau de pseudoplastia do material; quanto mais prximo
de 1, menor a pseudoplastia (Leonardi et al., 2000). Outro
parmetro importante a viscosidade aparente mnima que
representa a viscosidade do produto a uma dada faixa de
taxa de deformao () (Martin, 1993).
Os valores de , IC e IF das formulaes 1 e 3 (Tabela
4), no apresentaram diferenas significativas (p< 0,05)
at o primeiro ms de estudo. Porm, aps este perodo,
a formulao 3 apresentou sinais fsicos de instabilidade
(perda visvel de sua viscosidade) o que comprometeu a
continuidade do estudo. Contrariamente, a formulao 1
apresentou-se visualmente estvel at final do estudo, mas
foi observada uma diferena significativa (p<0,05) nos
valores de , IC e IF para os perodos de 60 e 90 dias.
Pela anlise do IF e pelos reogramas obtidos, podese verificar que todas as emulses estudadas apresentaram
comportamento pseudoplstico e a presena de rea de
histerese, ou seja, os materiais apresentaram tixotropia. Os
produtos tixotrpicos tendem a ter maior vida de prateleira,
pois durante o armazenamento estes apresentam viscosidade
constante, o que dificulta a separao dos constituintes
da formulao (Martin, 1993). Alm dessa vantagem, os
produtos com essas caractersticas so de bastante interesse,
pois as formulaes se deformam durante a aplicao, ou
seja, tornam-se mais fludas facilitando o espalhamento
e recuperando a viscosidade inicial no momento em que
se encerra a aplicao, o que evita que o produto escorra
(Gaspar & Maia Campos, 2003).
Os estudos reolgico e a determinao da

42

concentrao de ativo nas formulaes representam uma

completa, racional e necessria ferramenta para predizer
o comportamento fsico das amostras durante tempo de
prateleira determinado (Tadros et al., 2004).
A validao de mtodos analticos um processo por
meio do quais estudos estatsticos so utilizados para garantir
que o mtodo proposto atenda s exigncias desejadas. Para
validar preciso definir parmetros analticos, tais como
linearidade, exatido, preciso e especificidade (Gil et al.,
2007). A linearidade um dos mais importantes passos
na anlise qumica e reflete a proporcionalidade entre a
concentrao do analito e a resposta obtida (absorbncia)
(Peng & Chiou, 1990). Para a construo da curva analtica
necessrio usar um nmero suficiente (5 amostras) de
solues padro em diferentes concentraes para definir
adequadamente a relao entre a concentrao analito (g/
mL) e a resposta obtida (absorbncia). Cada concentrao
preparada se adicionando um volume apropriado de soluo
estoque soluo secundria, sendo que este volume deve
ser sempre menor ou igual a 2 % do volume total da amostra
(Bressolle et al., 1996). As solues preparadas para a
construo da curva analtica tambm foram utilizadas para
realizao dos experimentos de preciso e exatido. Com
os resultados obtidos, realizou-se um grfico relacionando
as concentraes das solues (g/mL) e as absorbncias
obtidas (nm) e por meio da anlise de regresso linear,
obteve-se a equao da reta e o respectivo r (coeficiente
de correlao linear). Segundo critrio da RE 899/2003,
o coeficiente de correlao (r) deve ser no mnimo igual
a 0,99. O valor do coeficiente obtido experimentalmente
para a validao do mtodo analtico para a quantificao
do frmaco diretamente na formulao durante o ensaio
de estabilidade acelerada foi menor que o indicado pela
legislao. Isto pode ter ocorrido devido s caractersticas
fsico-qumicas do cetoconazol (fotoinstabilidade e fcil
oxidao) e tambm pela alta volatilidade do solvente
utilizado para a preparao das solues (metanol).
A especificidade depende de quanto o mtodo
indiferente presena na amostra de espcies que poderiam
interferir na determinao do analito (Leite, 1998).
Portanto, a especificidade analisada para certificar que o
mtodo utilizado no sofrer interferncia das formulaes
ou substncias presentes na amostra. A preciso de um
mtodo analtico corresponde medida de erro aleatrio
entre as leituras efetuadas com a mesma amostra, e pode ser
expressa como a porcentagem do coeficiente de variao
(C.V. %) ou desvio padro relativo das medidas das
replicatas. A exatido (E) uma medida de erro sistemtico
ou Bias e definida como a relao entre o valor medido
e o valor terico. De acordo com literatura tcnica, o Guia
Para Validao de Mtodos Analticos e Bioanalticos
(Brasil, 2003), os desvios mximos aceitveis em relao
preciso de um mtodo analtico devem ser definidos
de acordo com a metodologia empregada, a concentrao
do analito na amostra, o tipo de matriz e a finalidade do

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

mtodo, no se admitindo valores superiores a 5%. Embora

no esteja especificado na legislao, os valores de desvios
permitidos para exatido so os mesmos da preciso. Os
resultados da validao (Tabelas 5 e 7) mostraram que
os mtodos analticos propostos mostraram-se lineares,
especficos, precisos e exatos.
Segundo o Guia para Estabilidade de Produtos
Farmacuticos, para fins de prazo de validade provisrio
de 24 meses, ser aprovado o relatrio de estabilidade
acelerada (6 meses) ou de longa durao (12 meses) que
apresentar variao 5,0 % do valor declarado do princpio
ativo. Caso as variaes de doseamento estejam entre 5,1 e
10 % no estudo acelerado, o prazo de validade provisrio
ser reduzido para 12 meses (Brasil, 2005). Conforme
resultados descritos na Tabela 6, estima-se que o prazo
de validade para esta formulao seja de 12 meses, pois a
perda de principio ativo durante os 3 meses do ensaio de
estabilidade acelerado foi de 10 %
A avaliao da velocidade de degradao de um
medicamento possibilita estimar o seu prazo de validade.
Entende-se por prazo de validade, o tempo durante o qual
o produto poder ser utilizado e para medicamentos
caracterizado pelo tempo durante o qual o frmaco perde no
mximo 10% de sua integralidade. Os estudos de cintica
de uma reao conferem aos estudos de estabilidade
suporte fsico-qumico e matemtico, correlacionando
o prazo de validade com a velocidade das reaes. As
reaes qumicas podem ser classificadas quanto cintica
degradao qumica em: a) Zero Ordem, b) Primeira Ordem
e c) Segunda Ordem (Gil et al., 2007).
O estudo da velocidade de degradao da qumica e do
modo como influenciada por fatores como a concentrao
do frmaco ou do reagente, o solvente empregado, as
condies de temperatura e presso e a presena de outros
reagentes qumicos na formulao denominada cintica
de reao (Ansel et al., 2007). De acordo com a Figura 1,
a degradao do cetoconazol nesta emulso seguiu uma
cintica de reao de primeira ordem, o que comum para
maioria dos frmacos submetidos a testes de estabilidade.
Na cintica de primeira ordem, a perda do frmaco
diretamente proporcional concentrao remanescente.
Conseqentemente, a concentrao varia de modo
exponencial com o tempo, de forma que a representao
grfica do logaritmo da concentrao contra o tempo resulta
em uma reta (Ortega & Netz, 2002).
No desenvolvimento de uma forma farmacutica, os
estudos do perfil de liberao in vitro servem para avaliar
a quantidade de frmaco liberado em funo do tempo.
Os testes in vitro constituem um controle qualitativo e
quantitativo do sistema de liberao e fornecem informaes
para estudos posteriores in vivo e ainda para os estudos
clnicos. A realizao dos estudos in vitro importante, visto
que reduz o nmero de amostras consideradas adequadas
para a realizao dos testes in vivo (Amidon et al.,1995).
Para a avaliao das formas farmacuticas

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

emulsionadas de uso dermatolgico, a literatura cientfica

relata o uso estudos de liberao (membrana sinttica),
permeao e reteno cutnea (membrana natural) in
vitro, utilizando a clula de difuso ou de Franz (Franz,
1975, 1978). O sistema de difuso de Franz bastante
utilizado devido ao seu baixo custo, boa reprodutibilidade
dos resultados e realizao em pequeno espao de tempo,
comparativamente a outras tcnicas (Leveque et al., 2003).
Uma terapia efetiva nas enfermidades cutneas
requer que o agente ativo seja liberado no stio de infeco,
em concentraes adequadas para produzir o efeito
farmacolgico. No caso de infeces superficiais da pele,
onde o agente patognico reside sobre ou entre as camadas
mais externas da pele, o produto teraputico deve ser
liberado no estrato crneo em concentraes adequadas
para inibir o crescimento do agente patognico (Pershing
et al., 1994). Para produtos dermatolgicos, estes estudos
so realizados de modo que o frmaco seja liberado da
formulao onde est veiculado, e se difunda atravs de
uma membrana que pode ser de origem artificial ou natural
(humana ou animal) para uma soluo receptora (OECD,
2004).
Nos estudos de liberao in vitro, os parmetros
devem ser escolhidos com critrio, simulando as condies
in vivo. necessria a escolha da membrana sinttica
adequada, a manuteno da temperatura prxima
fisiolgica (37C), a agitao constante do fluido receptor
e a escolha do fluido receptor ideal, considerando-se o pH,
a isotonicidade e as condies sink. Neste ensaio foi
empregada uma membrana sinttica de acetato de celulose
que recomendada pelo FDA (U.S. FDA/CDER, 1997),
pois no reage com a formulao ou o meio receptor,
permevel ao frmaco e no determinante da taxa de
liberao (Shah et al., 1998).
Na Figura 2, possvel observar que o perfil de
liberao permaneceu linear com o tempo. importante
ressaltar que o desvio padro entre as seis clulas de cada
experimento foi adequado, indicando boa preciso do
mtodo, ou seja, baixa variabilidade entre as rplicas dos
ensaios de liberao.
A taxa de liberao de um frmaco a partir
de determinada formulao depende diretamente das
caractersticas fsico-qumicas do veculo e do frmaco
(Santoyo et al., 1996). A liberao do frmaco a partir do
veculo que o contm prerrogativa para a penetrao
na pele. O frmaco deve estar disponvel na superfcie
da pele para que haja difuso atravs do estrato crneo.
As principais caractersticas da formulao que iro
governar essa etapa so a solubilidade do frmaco no
veculo e a atividade termodinmica. Entretanto, uma
vez disponvel para penetrao na superfcie da pele, a
penetrao e a permeao iro depender da capacidade
do frmaco de atravessar a camada crnea da pele, e de
caractersticas como lipofilicidade e tamanho da molcula,
alm de modulao da formulao por meio da adio de

43

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

promotores de penetrao (Bemvindo, 2006). Outro fator

importante para a velocidade de liberao a viscosidade
da formulao, pois quanto maior for a viscosidade da
preparao, maior a probabilidade de que esse frmaco
seja liberado lentamente.
De acordo com Tabela 8, a liberao in vitro do
cetoconazol na formulao 1 segue o modelo cintico de
Higuchi ou pseudo zero ordem, indicando que a liberao
do frmaco a partir do sistema ocorre por mecanismo de
difuso (Serra, 1998).
O grfico de quantidade de frmaco acumulado
no meio receptor em funo do tempo fornece o perfil de
liberao e o fluxo de passagem do frmaco a partir da
formulao para a soluo receptora representado pela
inclinao da parte reta da curva (Shah et al., 1989). O
tempo lag outro parmetro avaliado, pois determina o
tempo necessrio para que o sistema entre em equilbrio e
calculado por extrapolao da reta de regresso linear at
o eixo do tempo (Zatz, 1993). Assim sendo, aplicando o
tratamento matemtico de regresso linear no intervalo de
tempo de coleta de trs a 12 horas (trs em trs horas) foi
possvel determinar o fluxo (22,492 g/cm2 X h) e o tempo
lag (duas horas).
Entre as emulses desenvolvidas, somente a
formulao 1 apresentou estabilidade fsica e qumica
satisfatria durante os ensaios de estabilidade acelerada.
O perfil de liberao in vitro foi adequado para sistema
proposto, pois o frmaco foi liberado em concentraes
e tempo pertinentes com o uso proposto. Uma prxima
etapa do trabalho avaliar a reteno e permeao do
sistema desenvolvido, utilizando membranas biolgicas
provenientes de orelha de porco.

Tests, over 3 months at 3 different temperatures (4C,

37C and 45C). The characteristics assessed during the
test were the organoleptic properties, pH, rheological
behavior and drug concentration. The most stable
emulsion was subjected to an in vitro release test in a
Franz diffusion cell system. The ketoconazole in both
the formulation and receptor phase was determined by
UV spectrophotometry at 244 nm. The O/W emulsion
prepared with cetearyl alcohol and polyethylene glycol
(PEG20) stearate was the only one that maintained its
physicochemical characteristics throughout the test.
The in vitro release test demonstrated that the drug
was released gradually, exhibiting pseudo zero-order
kinetics.
Keywords: Ketoconazole. Accelerated stability. O/W
emulsions. In vitro release test.
REFERNCIAS
Amidon GL, Lennerns H, Vinod PS, Crison JR. A
theoretical basic for a biopharmaceutical drug classification:
the correlation of in vitro drug product dissolution and in
vitro bioavailability. Pharm Res. 1995; 12: 413-20.
ANFARMAG - Associao Nacional dos Farmacuticos
Magistrais. Encar te Tcnico Ed 61. Formas farmacuticas
emulsionadas: sinais de instabilidade e ensaios de
estabilidade acelerada. [citado 2006 Out 20]. Disponvel
em: http://www.anfarmag.org.br.
Ansel HC, Popovich NG, Allen Jr. LV. Farmacotcnica:
formas farmacuticas e sistemas de liberao de frmacos.
6.ed. So Paulo: Editorial Premier; 2000.

AGRADECIMENTOS

Ansel HC, Popovich NG, Allen Jr. LV. Pharmaceutical

dosage forms and drug delivery systems. 8th ed Londres:
Lippincott Willians & Wilkins; 2007.

A Fundao de Amparo Pesquisa do Mato Grosso

(FAPEMAT) pelo apoio financeiro ao projeto e pelas
bolsas de Iniciao Cientficas concedidas aos alunos. A
Faculdade de Farmcia da Universidade de Cuiab pelo
apoio financeiro.

Bemvindo, CS. Estudo comparativo da liberao e

penetrao cutnea de nitrato de miconazol de emulses
tpicas. [Tese] Rio de Janeiro: Faculdade de Farmcia,
UFRJ, 2006.

ABSTRACT
O/W Emulsion Containing 2.0% Ketoconazole:
Accelerated Stability Test and in vitro Release
The goal of this work was to develop and assess the
physicochemical stability of O/W emulsions containing
2.0% ketoconazole and to determine their in vitro
release profile. These formulations were prepared with
self-emulsifying bases that differed in their chemical
characteristics. The stability of the system was assessed,
as recommended in the Guide to Drug Product Stability

44

Brasil. Resoluo n 1 de 29 de Julho de 2005. Agncia

Nacional de Vigilncia Sanitria, no uso de suas atribuies
autoriza ad referendum, a publicao do Guia para a
Realizao de Estudos de Estabilidade. Dirio Oficial da
Unio, 01 ago. 2005. Seo 1, Suplemento 146, p1.
Brasil. Resoluo RDC n 211 de 17 de novembro
de 2006. Aprova as instrues para utilizao da lista
das Denominaes Comuns Brasileiras e a lista das
Denominaes Comuns Brasileiras -DCB 2004 para
substncias farmacuticas. Dirio Oficial da Unio, 20 nov
2006. Seo 1, Suplemento 221, p1.
Brasil. Resoluo RE n 899 de 29 de Maio de 2003.
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria, determina a

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

publicao do Guia para validao de mtodos analticos e

bioanalticos. [citado 2005 maio 08]. Disponvel em: http://
www.anvisa.gov.br.
Bressolle F, Bromet-Petit M, Audram M. Validation of
liquid chromatographic and gas chromatographic methods.
Applications to phamacokinetics. J Chromatogr B Biomed
Sci Appl. 1996; 686: 3-10.
Castelli VC, Mendona CC, Silva LCI, Campos LAM,
Medeiros MMC, Ferrari M, Machado SRP. Development
and evaluation of the preliminary stability of O/W emulsion
containing ketoconazole 2.0%. In: 6 Internacional
Congress of Pharmaceutical Sciences; 2007 fev., Ribeiro
Preto, SP, 2007.
CRODA. Encarte Tcnico. [citado 2005 jun 05]. Disponvel
em: http/:www.croda.com.br.

Kedor-Hackmann ERM, Santoro MIR, Singh AK, Peparo

AC. First-derivate ultraviolet spectrophotometric and high
performance liquid chromatographic determination of
Ketoconazole in pharmaceutical emulsions. Rev Bras Cin
Farm. 2006; 42: 91-8.
Lachman L, Lierberman H, Kanig JA. Teoria e prtica
na indstria farmacutica. Lisboa: Fundao Calouste
Gulbenkian; 2001. v.2.
Leite F. Validao em anlise qumica. Campinas: Editora
tomo; 1998.
Leonardi GR, Beraldi P, Freitas PCD, Maia Campos
PMBG. Produtos de uso tpico com Aloe Vera. Cosmet
Toilet. (Ed. Port.) 2000; 12: 44-53.
Leonardi GR, Campos PMM. Estabilidade de formulaes
cosmticas. Int J Pharm Comp. 2001; 3: 154-6.

Di Mambro VM, Borin MF, Fonseca MJ. Topical formulation

with superoxide dismutase: influence of formulation
composition on physical stability and enzymatic activity. J
Pharm Biomed Anal. 2003; 32: 97-105.

Leveque N, Makki S, Hafgraft J, Humbert P. Comparidon

of Franz cells and microdialysis for assessing salilylic
acid penetration through human skin. Int J Pharm. 2003;
269: 323-8.

Eccleston GM. Fuctions of mixed emulsifiers.and emulsifying

waves in dermatological lotions and creams. Colloids Surf A
Physicochem Eng Asp. 1997; 123-124: 161-82.

Martin A. Physical pharmacy. 4th. ed. Filadelfia : Lea &

Febiger; 1993.

Ferrari M. Desenvolvimento e avaliao da eficcia

fotoprotetora
de
emulses
mltiplas
contendo
metoxicinamato de etilexila e leo de andiroba (Carapa
guyanensis) [Tese] Ribeiro Preto: Faculdade de Cincias
Farmacuticas de Ribeiro Preto,USP; 2002.

OECD-Environment Directorate, Joint Meeting of the

Chemicals Comittee and the Working Party on Chemicals,
Pesticides and Biotechnology. Guidance for the Conduct
of Skin Absorption Studies, OECD series on testing and
assessment. n. 28, 05 mar,[S.I.:s.n], 2004.

Franz TJ. Percutaneous absorption on the relevance of in

vitro data. J Invest Dermatol. 1975; 64 (3): 190-5.

Ortega GG, Netz PA. Fundamentos da fsico-qumica.

uma abordagem para cincias farmacuticas. So Paulo:
Artmed; 2002.

Franz TJ. The finite dose technique as a valid in vitro model

for the study of percutaneous absoption in man. Curr Probl
Dermatol. 1978; 7: 58-68.

Peng GM, Chiou WL. Analysis of drugs and others toxic

substances in biological samples for pharmacokinetic
studies. J Chromatogr. 1990; 531: 3-50.

Galena - Qumica e Farmacutica Ltda. Encarte Tcnico. [citado

2005 jun 05]. Disponvel em: http://www.galena.com.br.

Peparo AC. Estabilidade fsica e metodologia analtica

para formulaes farmacuticas contendo cetoconazol.
[Dissertao] So Paulo: Faculdade de Cincias
Farmacuticas da USP; 2001.

Gaspar LRP, Maia Campos MBG. Rheological behavior

and the SPF of sunscreens. Int J Pharm. 2003; 205: 35-44.
Gil ES, Orlando RM, Serrano SHP, Fischer DCH, Machado
SAS, Matias R, Bara MTF, Cirilo HNC, Figueiredo G,
Barbosa WG. Controle fsico-qumico de qualidade de
medicamentos. 2.ed. So Paulo: Pharmabooks; 2007.

Pershing LK, Corlett J, Jorgensen C. In vivo

pharmacokinetics and pharmacodynamics of topical
ketoconazole and miconazole in human stratum corneum.
Antimicrob Agents Chemother. 1994; 38 (1): 90-5.

Guaratini T, Gianet MD, Campos, PM. Stability of

cosmetic formulations containing steres of Vitamins E
and A chemical and physical aspects. Int J Pharm. 2006;
327: 12-6.

Pharmapress. Uma publicao mensal de acesso magistral.

Manipulao de Formulaes com Cetoconazol. Vmaro/2006. [citado 2006 abr. 16]. Disponvel em: http://
www.pharmapress.com.br.

Gupta P, Garg S. Recent Advances in semisolid Dosage

Forms for Dermatological Application. Pharm Tecnol N
Am. 2002; 26: 144-62.

Pharmaspecial- Informativo Tcnico Hostacerin NCB.

[citado 2005 jun 15].
Disponvel em: http://www.
pharmaspecial.com.br/imagens/literatura.

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46

45

Estabilidade Liberao Emulses Cetoconazol

Rang HP, Dale MM, Ritter JM. Farmacologia. 4.ed. Rio de

Janeiro: Guanabara Koogan; 2000.

Sokal RR, Rohlf FJ. Biometry. 3rd. ed. Nova York : W.H.
Freeman & Co.; 1995. 887 p.

Santoyo S, Arellano A, Ygartua P, Martin C. In vitro

percutaneous absorption of piroxicam through synthetic
membranes and abdominal rat skin. Pharm Acta Helv.
1996; 71: 141-6.

Tadros T. Application of rheology for assessmente and a

prediction of the long-term physical stability of emulsions.
Adv Colloid Interface Sci. 2004; 108-109: 227-58.

Sato MEO, Gomara F, Pontarolo R, Andreazza IF, Zaroni

M. Permeao cutnea in vitro do cido kjico. Rev Bras
Cin Farm. 2007; 43: 195-204.
Serra CHR. Avaliao biofarmatcnica de comprimidos
contendo cefalexina: cintica de dissoluo e
bioequivalncia. [Tese] So Paulo: Faculdade de Farmcia
de So Paulo, USP; 1998.
Shah VP, Elkins J, Seeyan L, Skelly JP. Determination of in
vitro drug release form hidrocortisone creams. Int J Pharm.
1989; 53: 53-9.
Shah VP, Flynn GL, Yacobi A, Maibach HI, Bom C, Fleischer
NM, Franz TJ, Kaplan SA, Kawamoto J, Lesko LJ, Marty JP,.
Pershing LK, Schaefer H, Sequeira JA, Shrivastava SP, Wilkin
J, Williams RL. Bioequivalence of topical dermatological
dosage forms methods of evaluation of bioequivalence.
Pharm Res. 1998; 15: 167-71.

Tadros T, Izquierdo P, Esquema J, Solans C. Formation

and stability of nano-emulsions. Adv Colloid Interface Sci.
2004; 108/109: 303-18.
Tonzar AC. Medies de viscosidade e reologia em
cosmticos. Cosmet Toilet. (Ed. Port.) 2006; 18: 56.
U.S. FDA/CDER. Nonsterile Semisolid Dosage Forms
Scale-Up and Postapproval Changes: Chemistry,
Manufacturing, and Controls; In vitro Release Testing and
In vivo Bioequivalence Documentation. 1997.
Wittern KP, Ansmann A, Huttinger R, Billek D, Charlet
E, Hoenen L, Kuczera K, Mottichke L, Quack J, Selb K,
Umbach I, Wolf G. Stability testing of cosmetic emulsions.
Cosmet. Toilet. 1985; 10: 33-9.

Zatz JL. Skin Permeation - Fundamentals and

Application. Carol Stream: Wheaton: Allured Publishing
Corporation, 1993.

Skiba M, Skiba-Lahiani M, Marchais H, Duclos R,

Arnaud P. Stability assessment of ketoconazole in aqueous
formulations. Int J Pharm. 2000; 198: 1-6.

46

Rev Cinc Farm Bsica Apl.,2009;30(1):35-46