III - Paru00E1metros de Validaciu00f3n Del Tipo fisicoquu00EDmico PDF

TALLER DE VALIDACIN PARA
LABORATORIOS DE CONTROL DE
CALIDAD DE LA INDUSTRIA
FARMACEUTICA
III.- PARMETROS DE VALIDACIN DEL TIPO

FISICOQUMICO Y BIOLGICO
viernes, 04 de octubre de
Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

biolgico
Las preguntas ms comunes en un proceso

de validacin.
Por qu
Valido?
Cmo
Valido?
Qu
Valido?
Quin
Valida?
Dnde
Valido?
Cundo
Valido?
viernes, 04 de octubre de 2013

biolgico
Definiciones
Criterio de aceptacin (criterio de funcionamiento): Exigencias de una
caracterstica de funcionamiento en funcin de las cuales se puede
determinar que un mtodo analtico es adecuado para la finalidad
perseguida y ofrece resultados fiables.
Documentacin.- Conjunto de informacin que sustenta una actividad
realizada.
Especificaciones.- Descripcin del material, sustancia o producto, que
incluye la definicin de sus propiedades y caractersticas, con las tolerancias
de variacin de los parmetros de calidad.
Metodologa de prueba.- Procedimiento o grupo de procedimientos, para

determinar si un producto o materia prima cumple con las especificaciones
establecidas.

biolgico
Definiciones
Mtodo analtico.- Descripcin de la secuencia de actividades, recursos
materiales y parmetros que se deben cumplir, para llevar a cabo el anlisis
de un componente especfico de la muestra.
Mtodo analtico desarrollado internamente.- Mtodo desarrollado por el
propio laboratorio.
Mtodo analtico oficial.- Mtodo que aparece en la literatura oficial
reconocida.
Mtodo analtico no oficial.- Mtodo que no aparece en la literatura oficial
reconocida.
Parmetros de desempeo: Parmetro especfico a estudiar en un protocolo
de validacin

biolgico
Definiciones
Validacin: Es el proceso que establece, mediante estudios de laboratorio,
que las caractersticas de desempeo del mtodo, satisfacen los requisitos
para su aplicacin analtica.
Validacin parcial (confirmacin del mtodo): Evidencia objetiva para
demostrar que al aplicar un mtodo normalizado, se cumple con las
especificaciones del mismo y se cuenta con la competencia tcnica para
realizarlo adecuadamente tomando en consideracin sus propias
instalaciones, equipo y personal.

biolgico
Clasificacin de los mtodos

de ensayo
Clasificacin grado de
cuantificacin
Normalizados / No
Normalizados
Mtodos
Cualitativos
Mtodos Semi
Cuantitativos
Mtodos
Cuantitativos
Clasificacin por principio de

Deteccin
Mtodos Biolgicos
Mtodos Bioqumicos
(eje. ELISA)
Mtodos Fsico Qumicos

(TLC,CG,HPLC)

biolgico
CLASIFICACIN DE MTODOS DE
ENSAYO
Mtodo Normalizado
Normas Oficiales Mexicanas
(NOM)
Normas Mexicanas (NMX).
Farmacopea de los Estados

Unidos Mexicanos (FEUM)
Como segunda instancia:

Mtodos
Oficiales del
AOAC
Pesticide
Analytical
Manual (PAM)
Environmental
Protection
Agency (EPA)
United States
Pharmacopoeia
(USP)
British
Pharmacopoeia
(BP)
American Society
for Testing
Materials (ASTM)

biolgico
Parmetros de funcionamiento para los ensayos que involucran

mediciones analticas
(mtodos normalizados)
Porcentaje de Recuperacin o error relativo
Limite de deteccin
Lmite de Cuantificacin
Intervalo lineal y de trabajo
Reproducibilidad
Repetibilidad
Sesgo
Incertidumbre
(mtodos no normalizados)
Selectividad
Sensibilidad
Robustez

biolgico
Consideraciones para una validacin:

Debe ser llevada a cabo despus de que
el mtodo ha sido optimizado.
Aplica a un analista especfico,
laboratorio y equipo.
Aplica a un intervalo razonable de
concentracin.
Blancos de muestras (Placebos). Matriz
que no contiene el analito de inters.
Muestras adicionadas. Matriz que
contiene el analito y se le adiciona el
mismo.

biolgico
A las dos tipos de matriz se les adiciona cantidades

conocidas del analito de inters.
Seleccionar la matriz: mas solicitada, y la mas
compleja.
La matriz se analiza antes de la adicin para

determinar el contenido inicia del analito, en la
prctica se recomienda un mnimo de 6 repeticiones.
Para muestras adicionadas, se puede utilizar la
mitad de la cantidad requerida por el mtodo y
adicionar para completar el contenido del analito.
Cuando no sea posible adicionar de manera directa
el analito a la muestra, la adicin puede ser llevada a
cabo en alguna etapa del mtodo.

biolgico
% DE RECUPERACION O ERROR RELATIVO

Cantidad del analito recuperada en la porcin de muestra o muestra adicionada
cuando esta es conducida a travs del mtodo analtico completo, y que permite
evaluar la eficiencia de la extraccin, proceso de preparacin e interferencias
que puedan existir al aplicarlo. Se expresa en trminos de porcentaje.

biolgico
Consideraciones:
Es dependiente de la matriz, proceso de anlisis y concentracin del analito.
Debe demostrarse en todo el intervalo de trabajo.
A bajas concentraciones y en mtodos que involucran pasos de extraccin,
purificacin y concentracin, los recobros a menudo son bajos
Esta estrechamente relacionada con los errores sistemticos.

biolgico
LMITE DE DETECCIN
Es la concentracin ms baja a la cual puede detectarse el analito pero no
necesariamente cuantificarse bajo las condiciones experimentales establecidas.
LMITE DE CUANTIFICACIN
Es la concentracin ms baja a la cual el analito puede cuantificarse con una
precisin y veracidad aceptables bajo las condiciones experimentales
establecidas.

biolgico
LIMITES DE CUANTIFICACIN Y DETECCIN PARA EL INTERVALO

DE TRABAJO
En el anlisis de trazas (ppm, ppb, ppt), es importante saber la concentracin
ms baja del analito, que puede detectarse o cuantificarse confiable por el
mtodo.
Para propsitos de validacin es suficiente proporcionar un indicativo del nivel
al cual la deteccin resulta problemtica.
Se calcula en: Residuos, Contaminantes, Impurezas, Productos de degradacin.
No se calcula en: Composicin, Ingrediente activo.

Lmite de Cuantificacin criterio de aceptacin: valor menor o igual al nivel
inferior .

biolgico

biolgico
INTERVALO LINEAL Y DE TRABAJO

Es la capacidad de un mtodo analtico para dar resultados que son directamente
proporcionales a la concentracin del analito en la muestra dentro de un
intervalo dado.
LINEALIDAD DEL METODO

2.50
y = 1.3171x - 0.0156
R = 0.997
2.00
1.50
Y
1.00
0.50
0.00
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
-0.50
X

biolgico
Intervalo comprendido entre las concentraciones superior e inferior del analito

en la muestra (incluyendo dichas concentraciones) para las que se ha
demostrado que dicho analito es cuantificado con un nivel satisfactorio de
linealidad, repetibilidad y recuperacin.
Intervalo donde la respuesta analtica es directamente proporcional a la

concentracin del analito en la muestra.
Relacin respuesta vs concentracin repetible.
Puede ser diferente para distintas matrices.
Tipo de prueba
Respuesta
Espectrofotomtrica
Cromatogrfica
Potenciomtrica
Volumtrica
Gravimtrica
Tipo de prueba
Respuesta
Absorbancia o transmitancia
rea o altura del pico
milivolts, unidades de pH, S
mL gastados
Diferencia de peso

biolgico
EJEMPLO DE INTERVALO DE TRABAJO

biolgico
INTERVALO LINEAL Y DE TRABAJO
6
Punto de Corte de la Regresin Lineal
5
4
3
2
1
0
0
-1
Regression Lines with a Break-Point

Parameters
Slope of 1st Line1.3249441
Constant Term in 1st Line-0.0204357
Slope of 2nd Line0.9876009
Break Point3

biolgico
REPETIBILIDAD
Grado de concordancia entre resultados analticos individuales, cuando el procedimiento
se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra homognea por un solo
analista, usando los mismos instrumentos y mtodo en intervalos cortos de tiempo.
Es la fraccin del analito aadido a una muestra de ensayo (fortificado o muestra
sembrada) antes del anlisis, que es medido (recuperado) por el mtodo ensayado.
REPRODUCIBILIDAD
Grado de concordancia entre resultados analticos individuales, cuando el procedimiento
se aplica repetidamente a diferentes porciones de una muestra homognea por dos
analistas o instrumentos diferentes, usando el mismo mtodo en diferentes das.

biolgico
Consideraciones:
Miden la variabilidad del mtodo analtico en la rutina de trabajo.
Dependen slo de la distribucin de los errores aleatorios y no se relaciona con el
valor verdadero o valor especificado.
Se determinan utilizando muestras homogneas representativas de las matrices a la
cuales ser aplicado el mtodo .
Se utilizan blancos de muestras o muestras adicionadas en el laboratorio para simular
las muestras de prueba originales.
Se definen en trminos de la desviacin estndar, coeficiente de variacin o el criterio

de aceptacin del mtodo de ensayo.

biolgico

biolgico
No. Curva
Analista
0,2 PPB
0,3 PPB
0,4 PPB
Sumatoria t
Sumatoria t
BETAGONISTAS-12RECUPERACIN 3
REPLICA No. 2
REPLICA No. 3
REPRO_EQUI,BOV, REPRO_EQUI,BOV,
POR
POR
MI. MARIA
DOLORES
MARTINEZ
QI. LILIA
PEGUEROS
OSORIO
IQ. BERNARDINO
LLANOS ALVAREZ
0.19
0.17
0.19
0.18
0.18
0.23
0.18
0.20
0.23
0.17
0.19
0.24
0.17
0.18
0.23
0.17
0.19
0.23
0.19
0.20
0.23
0.31
0.25
0.30
0.29
0.26
0.28
0.28
0.32
0.29
0.27
0.26
0.27
0.29
0.28
0.32
0.28
0.28
0.32
0.28
0.26
0.29
0.36
0.43
0.47
0.35
0.47
0.34
0.35
0.45
0.36
0.42
0.47
0.37
0.39
0.44
0.43
0.38
0.46
0.41
0.34
0.43
0.37
5.840
6.370
6.400
34.106
40.577
40.960
Histogram of Paleta 1, Paleta 3, paleta 2

Normal
Variable
Paleta 1
Paleta 3
paleta 2
7
6
Frequency
REPLICA No. 1
Mean StDev N
12.31 4.408 16
12.44 9.114 16
11.81 4.902 16
5
4
3
2
1
0
-5
10
15
Data
20
25
30

biolgico
ANOVA
ESTADSTICOS
Sumatoria T
18.61000
Sumatoria T
115.6425
n
21
h
3
N
63
Cuenta
Suma
Promedio
Varianza
21
5.840
0.278095238 0.00675619
21
6.370
0.303333333 0.012873333
21
6.400
0.304761905 0.00574619
Sumatoria x
6.0143
h-1
2
h(n-1)
60
hn-1
62
RESUMEN
GRAFICA Boxplot of MEDIAS
ANLISIS DE VARIANZA
Inter. Confianza
Suma de
cuadrados
Grados de libertad
Entre grupos
Dentro de los grupos
0.00945
0.50751
2
60
Total
0.51697
62
Origen de las variaciones
95
0.05
Promedio de los
cuadrados
0.00473
0.00846
20
15
Data
Grupos
MI. MARIA DOLORES
MARTINEZ
QI. LILIA PEGUEROS
OSORIO
IQ. BERNARDINO LLANOS
ALVAREZ
F calculada
0.5587
Probabilidad
Valor crtico
para F
10
0.574925948 3.150411
0
Paleta 1
CRITERIOS DE ACEPTACIN
VALOR CRITICO
F CALCULADA
ESTATUS DE LA PRUEBA
El valor de F calculada debe ser menor o

igual al valor critica para F
3.150411
0.558652
CUMPLE EL CRITERIO
paleta 2

biolgico
SESGO
Es la diferencia entre el valor promedio obtenido de los resultados de prueba con
respecto a un valor de referencia aceptado o conocido.

biolgico
MATERIAL DE REFERENCIA CERTIFICADO

Calibracin de Equipos
Validacin de mtodos
Inter-comparaciones
Verificacin (uso correcto del mtodo)
Deteccin de errores
Constatacin de resultados
Ensayos de Aptitud

biolgico
ENSAYOS DE APTITUD
Interval Plot of Arsnico
95% CI for the Mean
2.50
ppm
2.25
2.00
Valor A signado 1.96 ppm
1.75
1.50
CONSENSO
L1
L2
L3
L4
L5
L6 REFERENCIA
ID. Laboratorios

biolgico
INCERTIDUMBRE
Estimacin que caracteriza el intervalo de valores, dentro de los cuales se encuentra el
valor convencionalmente verdadero de la magnitud medida.

biolgico
Consideraciones:
Es un parmetro nico (usualmente una desviacin estndar o un intervalo de
confianza) que expresa el intervalo de posibles valores sobre la base de los resultados
de medicin.
Su estimacin considera todos los efectos reconocidos que influyen en el resultado.
Se establece una vez que se ha efectuado la validacin o confirmacin del mtodo.
Un resultado analtico no puede ser interpretado sin el valor de incertidumbre
asociado.
TIPO A
TIPO B
Desviacin estndar de una

serie de repeticiones
Desviacin estndar basado

en certificados de anlisis y
calibracin

biolgico

biolgico

biolgico
SELECTIVIDAD
Capacidad de un mtodo analtico para obtener
una respuesta debida nicamente al analito de inters
y no a otros componentes de la muestra.

biolgico
SENSIBILIDAD
Es el cambio en la respuesta del instrumento que corresponde a un cambio en
la concentracin del analito. Es la pendiente del intervalo de trabajo y cuanto
mayor es esta, mayor es la sensibilidad del mtodo.
12
12
10
10
y=a+bx
8
6
respuesta
respuesta
6
4
2
0
y=a+bx+cx2
2
0
concentracin
10
10
concentracin

biolgico
ROBUSTEZ
Es la medida de la capacidad del mtodo analtico de permanecer inalterado
por pequeas, pero deliberadas variaciones (efecto de cambio en las
condiciones) en los parmetros del mismo, proporcionando un ndice de su
confiabilidad durante su uso normal.

biolgico
CONSIDERACIONES:
En cualquier mtodo habr ciertas etapas en las cuales, si no se llevan a cabo con
suficiente cuidado, tendrn un efecto sobre el desempeo del mismo.
Es posible identificar las variables que tienen el efecto ms significativo y en base a
ello controlarlas cuidadosamente cuando se aplica el mtodo.
Se aplica para investigar su efecto sobre la precisin y veracidad del mtodo.
Generalmente este parmetro aplica para mtodos desarrollados por el laboratorio,
en los cuales se realizan variaciones deliberadas en el mtodo y se cuantifica el efecto
en el rendimiento.

biolgico
CMO SE DETERMINA:
1. Identificar de 4 a 7 factores que puedan tener un efecto significativo en el
desempeo del mtodo y variar ligeramente cada uno ellos.
2. Efectuar una serie de 8 combinaciones de valores nominales con variaciones
deliberadas.
3. Analizar una muestra por duplicado con cada serie de combinaciones.

4. Calcular las diferencias de las mediciones de los subgrupos.
5. Graficar en una lnea los valores de las diferencias de menor a mayor.
6.Calcular la desviacin estndar de las diferencias ( sDi ).
7.Reportar los factores que mas influyen en el resultado final.

biolgico
CMO SE DETERMINA:
COMBINACION DE DETERMINACIONES
Valor del factor F
A/a
B/b
C/c
D/d
E/e
F/f
G/g
Resultados

biolgico
CMO SE DETERMINA:

biolgico
CMO SE DETERMINA:

biolgico
CMO SE DETERMINA:

biolgico
CMO SE DETERMINA:

biolgico
CMO SE DETERMINA:

biolgico
CMO SE DETERMINA:

III - Paru00E1metros de Validaciu00f3n Del Tipo fisicoquu00EDmico PDF

Загружено:

Сведения о документе

Оригинальное название

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

III - Paru00E1metros de Validaciu00f3n Del Tipo fisicoquu00EDmico PDF

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

TALLER DE VALIDACIN PARA

III.- PARMETROS DE VALIDACIN DEL TIPO

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Las preguntas ms comunes en un proceso

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Metodologa de prueba.- Procedimiento o grupo de procedimientos, para

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Clasificacin de los mtodos

Clasificacin por principio de

Mtodos Fsico Qumicos

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Normas Mexicanas (NMX).

Farmacopea de los Estados

Como segunda instancia:

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Parmetros de funcionamiento para los ensayos que involucran

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Consideraciones para una validacin:

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

A las dos tipos de matriz se les adiciona cantidades

La matriz se analiza antes de la adicin para

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

% DE RECUPERACION O ERROR RELATIVO

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

LIMITES DE CUANTIFICACIN Y DETECCIN PARA EL INTERVALO

No se calcula en: Composicin, Ingrediente activo.

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

INTERVALO LINEAL Y DE TRABAJO

LINEALIDAD DEL METODO

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Intervalo comprendido entre las concentraciones superior e inferior del analito

Intervalo donde la respuesta analtica es directamente proporcional a la

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

EJEMPLO DE INTERVALO DE TRABAJO

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Punto de Corte de la Regresin Lineal

Regression Lines with a Break-Point

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

Se definen en trminos de la desviacin estndar, coeficiente de variacin o el criterio

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y

viernes, 04 de octubre de 2013

Parmetros de validacin del tipo fisicoqumico y