Uso potencial del girasol como fitorremediador de Cr(VI): estudios

preliminares de los efectos de la concentracin de sulfatos en el

desarrollo de la planta
Estudiante: Olga Rodrguez Vallejo (Universidad de Guanajuato)
olga_nirvana@hotmail.com
Asesor: Dra. Mara Guadalupe de la Rosa lvarez (Universidad de Guanajuato)
delarosa@quijote.ugto.mx
RESUMEN
La Fitorremediacin es una tecnologa relativamente nueva que propone el
uso de plantas para restaurar ambientes contaminados con compuestos ya sean
orgnicos o inorgnicos. Para fines de fitorremediacin se prefiere el uso de plantas
llamadas hiperacumuladoras, aquellas que son capaces de absorber y acumular los
contaminantes en grandes cantidades. Helianthus annus ha sido identificado como
un hiperacumulador de Cr aunque es tambin poco tolerante a este metal. En
realidad se sabe poco acerca de los mecanismos que sta planta utiliza para
hiperacumular Cr, se conoce que en algunas plantas existe una competencia entre
cromatos y sulfatos, aunque en el caso particular del girasol, esta informacin no
est disponible. Dichos datos son importantes y necesarios para determinar en que
medida la presencia de sulfatos afectar la absorcin de Cr(VI). As que se
determin tanto los requerimientos mnimos de sulfatos como los niveles txicos de
este nutriente para la germinacin y crecimiento de la planta de girasol para obtener
datos de referencia importantes y posteriormente realizar estudios del efecto de la
concentracin de sulfatos en la tolerancia y absorcin de cromatos por H. annuus.
INTRODUCCIN
El cromo es un metal que se utiliza ampliamente en la industria, incluyendo la
curtidura, el cromado, produccin de pigmentos y pinturas y en la conservacin de
la madera, entre otros. Dichas actividades han incrementado enormemente los
niveles de Cr en el medio ambiente lo que representa un peligro potencial para la
salud. Respecto a la regin centro de Mxico, se sabe que existe una elevada
contaminacin por cromo tanto en aguas subterrneas como en suelos, lo que se
debe tanto a fuentes naturales como antropognicas (Dhillon y Dhillon, 2001). Esta
fuerte contaminacin representa un peligro potencial para los habitantes del rea por
lo que es importante tomar medidas tanto precautorias como de remediacin.
En aos recientes, el surgimiento de la tcnica llamada fitorremediacin ha
proporcionado una nueva opcin para el rescate de ambientes contaminados
mediante el uso de plantas vivas o sus biomasas. En este contexto, una de las
tareas principales para los investigadores interesados en esta tcnica es la
identificacin de plantas hiperacumuladoras, es decir, aquellas con la habilidad de
absorber y acumular grandes cantidades de contaminante. En cuanto a cromo se
refiere, una planta se considera hiperacumuladora si es capaz de acumular hasta
1000 mg kg-1 de peso seco en la parte area (Brooks R.R. 1998). El girasol

(Helianthus annuus) ha sido identificado como una planta potencialmente

hiperacumuladora de Cr, sin embargo es tambin muy sensible a este metal
mostrando signos de fitotoxicidad a ciertas concentraciones (Shahandeh, H.2000).
Por otro lado, se ha demostrado que esta planta tolera y acumula otros metales
incluyendo algunos radioactivos y se ha trabajado ya incluso en experimentos piloto
para remediar algunos sitios con problemas de contaminacin.
Respecto a Cr (VI), se ha encontrado que dicha especie es mas fcilmente
absorbida y transportada a las partes areas de algunas plantas que el Cr(III), esto
en parte debido a la diferencia de solubilidades de las especies de cromo.
Adicionalmente, se ha encontrado que la presencia de sulfato en el medio de
crecimiento afecta la absorcin de cromato en algunas especies mientras que en
otras promueve dicho proceso (Kleiman, I.D. 1997).
Lamentablemente estos estudios se han realizado en pocas plantas por lo
que una generalizacin est lejos de poder ser formulada.
OBJETIVO
Como un estudio preliminar, este proyecto propone la determinacin de las
concentraciones mnimas y mximas de sulfatos en las cuales no se afectan tanto la
germinacin como el crecimiento de la planta. De este forma se tendrn datos de
referencia importantes para posteriormente realizar estudios del efecto de la
concentracin de sulfatos en la tolerancia y absorcin de cromatos por H. annuus.
Para el desarrollo de estos experimentos se ha elegido la hidropona ya que este
medio proporciona un buen modelo para estudiar las respuestas de los organismos
en un tiempo relativamente corto
MATERIALES Y MTODOS

Preparacin de medio nutritivo y soluciones de cromo.

El medio nutritivo a emplear es la solucin de Hoagland (Peralta y col 2001).
La solucin contiene los siguientes nutrientes a las concentraciones dadas entre
parntesis: Ca(NO3)24H2O (0.35 mM); CaCl22H2O (2.1 mM); Mg(NO3)26H2O (0.91
mM); KH2PO4 (0.97 mM); KNO3 (0.255 mM) H3BO3 (23.13 M); MnCl24H2O (3.9
M); MoO3 (23.13M); Fe(NO3)39H2O (10 M); y Zn(NO3)26H2O (0.37 M); el pH se
ajust a 4.8 en todas las soluciones nutritivas. La concentracin de la sal de sulfato
de cobre se modificar de acuerdo a los requerimientos experimentales de
concentracin de sulfatos.
Determinacin del efecto de la concentracin de sulfatos en la germinacin de
Helianthus annuus
Las semillas de girasol se desinfectan (con hipoclorito de sodio) se colocaron
en cajas Petri que contienen papel humedecido con el 25% de solucin nutritiva a
diferentes concentraciones de sulfatos 0, 20, 40, 60, 80, 100mM (Kaszycki y col.
2005) y con un 50% de concentracin de la solucin nutritiva a 0, 0.001, 0.01, 0.1,
1.0, 10.0mM de sulfatos. Se realizaron observaciones diarias y se observ el tiempo
de germinacin para cada uno de los tratamientos (Carrillo-Castaeda y Col. 2002).

Se consider que una semilla germin si emite una radcula de al menos 2mm de
longitud. La concentracin de sulfatos ptima para este proceso se estableci como
aquella en la que el proceso de germinacin se lleva a cabo en un menor tiempo y a
un mayor porcentaje de germinacin. Los datos se analizaron estadsticamente para
determinar diferencias significativas. Una vez obtenidos los resultados de
germinacin se identificaron las concentraciones mnimas y mximas que no
afectan la germinacin de la semilla de girasol.
Determinacin del efecto de la concentracin de sulfatos en la produccin de
biomasa y clorofila en H. annuus
Las semillas de girasol se germinaron y se hicieron crecer a diferentes
concentraciones de sulfatos tomando como rango de referencia los resultados de la
prueba de germinacin. El tiempo de exposicin a los tratamientos se estableci
como de 10 das, periodo durante el cual se tomarn mediciones diarias de
crecimiento y de produccin de clorofila. De acuerdo a estos datos, se determinarn
las concentraciones mnima y mxima de sulfato a las cuales no se afecta el
crecimiento y la produccin de clorofila en la planta de girasol.
RESULTADOS
De acuerdo a los resultados, se observaron diferencias significativas en el
crecimiento de raz y tallo de plantas que se crecieron en solucin nutritiva completa
(SNC) en comparacin con aquellas en solucin a de fuerza (F) con y sin
sulfatos. El tamao de raz de plantas tratadas con SNC sin sulfatos fue mayor que
el de aquellas que se crecieron en todos los tratamientos de F (140+6 y 89+4mm,
respectivamente), en tanto que para tallo, se observ que la concentracin de 40mM
afecta considerablemente el crecimiento con resultados 102+6mm y 38.4+6 u de
absorcin para clorofila, mientras que el control midi 126+5mm con 66+1 u de
absorcin. En el peso seco de la raz hay diferencias significativas entre el control y
las concentraciones de 20mM y 40mM con los siguientes datos: 157+11mg del
control y 82+6mg 20mM. En el segundo experimento con concentraciones mnimas
de sulfatos, en general no se observan diferencias significativas en el crecimiento y
produccin de clorofila. Solamente la longitud de la raz se ve un poco afectada por
las concentraciones (177+8 y 137+4 mm en plantas tratadas con 0.01mM 10mM,
respectivamente).
CONCLUSIONES Y DISCUSIN
A concentraciones relativamente pequeas de sulfatos, el crecimiento de la planta
de girasol no se afecta, mientras que a concentraciones relativamente mayores es
muy probable que la planta sea mas bien sensible a la concentracin de otros
nutrientes y no tanto a la concentracin de sulfatos en el medio de crecimiento. Por
lo tanto sugerimos en primera instancia realizar experimentos de absorcin de
cromatos por planta de girasol a concentraciones de sulfatos menores a 10 mM, ya
que a mayores concentraciones, es muy probable que se afecte el crecimiento y tal
vez la capacidad de hiperacumular Cr(VI).

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Brooks, R.R. (1998), Plants that hyperaccumulate heavy metals: their role in
phytoremediation, microbiology, archeology, mineral exploration and
phytomining. CAB International, Oxon, U.K.
2. Carrillo-Castaeda, G., Jurez Muoz, J., Peralta-Videa, J.R., Gmez, E.,
Duarte-Gardea, M., Tiemann, K.J., Gardea-Torresdey, J.L. (2002), Advances
in Environmental Research. 6(3), 391-399.
3. Dhillon K.S. Dhillon S.K. (2001), Restoration of Selenium-Contaminated Soils.
Iskandar I.K. (ed) CRC Press. Boca Raton, Florida. USA p. 211-212.
4. Kaszycki, P., Gabry, H., Appenrothr, K-J. Jaglarz, A., Sedziwy, S., Walczak,
T., Koloczek, H. (2005), Plant, Cell & Environment .28, 260-268.
5. Kleiman, I.D., Cogliatti, D.H. (1997), Environmental Pollution, 97, 131-135.
6. Peralta, J.R., Gardea-Torresdey, J.L., Tiemann, K.J., Gomez, E., Arteaga, S.,
Rascon, E., Parsons, J.G. (2001), Bulletin of Environmental Contamination
and Toxicology 66, 727-734.
7. Shahandeh, H., Hossner,
Phytoremediation, 2, 3151.

L.R.

(2000),

International

Journal

of