|UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y METALURGIA

ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

ASIGNATURA: QU-243 QUMICA ORGNICA II

PRCTICA N 6: Identificacin y reacciones de los
aminocidos y protenas
Profesor de teora: Ing. Alcira Irene CRDOVA MIRANDA.
Profesor de Prctica: Ing. Vila de la Cruz Luis Alberto
Da y hora de prctica : martes 7am-10am
Fecha de ejecucin
Mayo

: 17 de Mayo

Fecha de entrega: 31 de

Alumno participante: Ruiz Balden Paul Enrique

AYACUCHO PER
2016

Identificacin y reacciones de los aminocidos y

protenas

I.

OBJETIVOS:
Identificar y obtener los aminocidos y protenas mediante
reacciones.
Conocer las propiedades fsicas y qumicas de los aminocidos y
protenas.
Diferenciar aminocidos y pptidos mediante diversos reactivos.

II.

REVISION BIBLIOGRFICA:

AMINOCIDO
Un aminocido es una molcula que contiene un grupo carboxilo (COOH) y un grupo amino (-NH2) libres. Pueden representarse en general
por NH2-CHR-COOH, siendo R un radical o cadena lateral caracterstica
de cada aminocido. Estos grupos R son muy variados qumicamente.
Desde el punto de vista qumico, los aminocidos (AA) son cidos
orgnicos con un grupo amino en posicin alfa. Segn esta definicin,
los cuatro sustituyentes del carbono alfa (C) en un aminocido son:
Un grupo carboxilo
Un grupo amino
Un tomo de hidrgeno
Una cadena lateral R, que es caracterstica de cada AA

Constituye una excepcin el AA prolina, con un anillo pirrolidnico, que

puede considerarse como un -aminocido que est N-sustituido por su
propia cadena lateral (Figura de la izquierda).

En todos los AA proteicos, excepto en la glicina

(Gly), el carbono es asimtrico y por lo tanto,
son pticamente activos. Esto indica que existen
dos enantimeros (ismeros pticos), uno de la
serie D y otro de la serie L. Los AA proteicos son
invariablemente de la serie L. En algunos casos
muy concretos se pueden encontrar AA de la serie
D: en los peptidoglicanos de la pared celular, en ciertos pptidos con
accin antibitica y en pptidos opioides de anfibios y reptiles.
Se sabe que de los 20 aminocidos proteicos conocidos, 8 resultan
indispensables (o esenciales) para la vida humana y 2 resultan "semi
indispensables". Son estos 10 aminocidos los que requieren ser
incorporados al organismo en su cotidiana alimentacin y, con ms
razn, en los momentos en que el organismo ms los necesita: en la
disfuncin o enfermedad. Los aminocidos esenciales ms problemticos
son el triptfano, la lisina y la metionina. Es tpica su carencia en
poblaciones en las que los cereales o los tubrculos constituyen la base
de la alimentacin. El dficit de aminocidos esenciales afectan mucho
ms a los nios que a los adultos.
Existen 20 aminocidos diferentes y todos ellos tienen una parte comn
en su molcula que consisten en un grupo amino (NH 3) y un grupo cido,
(COOH) como puede verse en el dibujo de los aminocidos, que aparece
a continuacin:

LAS PROTENAS
Las protenas son los compuestos nitrogenados ms abundantes del
organismo, a la vez que fundamento mismo de la vida. En efecto, debido
a la gran variedad de protenas existentes y como consecuencia de su
estructura, las protenas cumplen funciones sumamente diversas,
participando en todos los procesos biolgicos y constituyendo
estructuras fundamentales en los seres vivos. De este modo, actan
acelerando reacciones qumicas que de otro modo no podran producirse
en los tiempos necesarios para la vida (enzimas), transportando
sustancias (como la hemoglobina de la sangre, que transporta oxgeno a
los tejidos), cumpliendo funciones estructurales (como la queratina del
pelo), sirviendo como reserva (albmina de huevo), etc.

Las protenas son biopolmeros de los alfa aminocidos; las propiedades

fsicas y orgnicas de una protena estn determinadas por los
aminocidos que las constituyen. Las subunidades individuales de
aminocido se unen por enlaces amida, llamadas enlaces peptdico.

COAGULACIN
A partir de cierta complejidad molecular, las protenas en solucin son
coaguladas por el calor en medio dbilmente cido y en presencia de
electrolitos.
Se considera, en general, esta coagulacin como un proceso de
hidratacin con apertura de ciertas ligaduras y con modificacines
estructurales. Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas,
forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden
precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas
a temperaturas superiores a los 70:C o al ser tratadas
con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de
las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin
por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan
por la destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria
FUNDAMENTO TERICO DEL REACTIVO DE BIURET

El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de protenas,

pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en
sustancias de composicin desconocida.
Est hecho de hidrxido potsico (KOH) o hidrxido de sodio (NaOH) y
sulfato cprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio
(KNaC4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en
presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con
polipptidos de cadena corta. El Hidrxido no participa en la reaccin,
pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico
que permite determinar la concentracin de protenas de una muestra

mediante espectroscopa ultravioleta-visible a una longitud de onda de

540 nm (para detectar el in Cu2+).
Positivo:

FUNDAMENTO TERICO DE LA REACCIN XANTOPROTEICA:

La reaccin xantoproteica es la nitracin del anillo bencnico. Es un
mtodo que se puede utilizar para determinar la cantidad de protena
soluble en una solucin, empleando cido ntrico concentrado. La prueba
da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores
de grupos aromticos (bencnicos). Es debida a la formacin de un
compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son
tratadas con cido ntrico concentrado. Si una vez realizada la prueba se
neutraliza con un lcali, se torna color amarillo oscuro.
PRECIPITACIN DE LAS PROTENAS
Las protenas, debido al gran tamao de sus
molculas, forman con el agua soluciones
coloidales. Estas soluciones pueden precipitar
con formacin de cogulos al ser calentadas a
temperaturas superiores a los 70C o al ser
tratadas con soluciones salinas, cidos,
alcohol, etc. La coagulacin de las protenas
es un
Proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes
indicados, que al actuar sobre la proteina la desordenan por la
destruccin de su estructura terciaria y cuaternaria.
REACCIN CON LA NINHIDRINA

El grupo alfa-amino de los aminocidos forma complejos coloreados con

la ninhidrina: violeta azuloso en la mayora de los aminocidos cuyo
grupo amino es primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y caf
para la Asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral. Esta
reaccin tambin identifica los grupos alfa-amino libres presentes en
pptidos y protenas.
FUNDAMENTO TERICO DE LA REACCIN DE MILLN
El Reactivo de Millon se prepara disolviendo una parte de mercurio (Hg)
en una parte de cido ntrico fumante (HNO3). De esta forma, la
presencia de cantidades relativamente altas de mercurio conduce a la
formacin de Nitrato de mercurio (I) Hg2(NO3)2 el cual en medio
fuertemente cido reacciona con el grupo -OH de la tirosina produciendo
una coloracin roja caracterstica. Al finalizar la reaccin, durante la cual
se desprende gran cantidad de xidos de nitrgeno, el reactivo se puede
diluir con dos veces su volumen en agua y deber ser decantada
algunas horas despus la solucin clara sobrenadante. Se deben tomar
precauciones para la correcta eliminacin de los residuos de mercurio.

III.

MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO Y

REACTIVOS QUMICOS:

Materiales y equipos

Vaso Precipitado.
Mechero de Bunsen.
Tubos de ensayo.
Cocina elctrica pequea

Reactivos:

Solucin de Albumina.
Solucin de Casena.
Biuret.
Xantoprotica.
Ninhidrina.
Millon.

IV.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

Ensayo N1. Coagulacin:

Disponer de 6 tubos de ensayo, a cada uno echar 2mL de la solucin de
clara de huevo. El primer tubo calentar lentamente y observar, al
segundo tuvo agregar 4mL de etanol, al tercero aadir gotas de cido
clorhdrico concentrado, al cuarto agregar cido ntrico concentrado y al
quinto agregar 1mL de NaOH al 40%.El sexto tubo se usa para comparar.
Observar y anotar en qu casos se ha formado la coagulacin.

Prueba con Albumina:

Resultados:
Solucin clara de huevo
Sometido a bao mara
Con etanol
Con HCl
Con HNO3
Con NaOH al 40%

Resultado
Si coagula
Si coagula
Si coagula
Si coagula
Si coagula

Discusin de resultados:
Las cadenas de protenas que hay en la clara de huevo se encuentran
enrolladas adoptando una forma esfrica. Se denominan protenas
globulares. Al frer o en este caso someter a calor la solucin de
albmina de huevo, el calor hace que las cadenas de protena se
desenrollen y se formen enlaces que unen unas cadenas con otras.
Asimismo al aadir a esta albmina de huevo a cido ntrico (HNO3) o
hidrxido de sodio (NaOH) ocurre la misma reaccin de coagulacin pero
en diferentes proporciones

Prueba con Casena:

Resultados:
Solucin Casena
Sometido a bao mara
Con etanol
Con HCl
Con HNO3
Con NaOH al 40%

Resultado
Si coagula
No reacciona
Si coagula
Si coagula
Si coagula

Discusin de resultados:
La casena en el primer tubo de ensayo reacciona en presencia de calor,
formando coagulo blanco, en el segundo tubo no reacciona con el
etanol, en el tercer tubo reacciona con cido clorhdrico formando un
coagulo de color blanco, en el cuarto tubo reacciona con cido ntrico
formando un coagulo de color blanco, en el quinto tubo reacciona con el
hidrxido de sodio formando un coagulo blanco.
Ensayo N2. Reaccin de Biuret:
En un tubo de ensayo echar 1mL de clara de huevo, agregar 1mL de
NaOH al 40%, luego aadir gota a gota una solucin de sulfito cprico al
1%, agitar y continuar aadiendo hasta notar el cambio.

Prueba de Biuret
Reactivo usado

Resultado

Albmina

Positivo

Casena

Positivo

Serina

Negativo

Leucina

Negativo

Asparagina

Negativo

Glicina

Negativo

Discusin del resultado:

 En la casena y la albmina el ensayo de Biuret nos da una

muestra de color violeta, por lo tanto podemos decir que existen
enlaces peptdico y por tanto protena.
El ensayo de Biuret para la glicina, Serina, leucina, Asparagina nos
dio una solucin de color azul, por lo tanto no hay presencia de
protena.

Conclusin:
La reaccin o prueba de Biuret es un mtodo que detecta la
presencia de compuestos con dos o ms enlaces.
El reactivo de Biuret consiste en una solucin acuosa de sulfato
cprico (CuSO4) en medio alcalino (NaOH). Este reactivo da un
ensayo positivo con los enlaces peptdicos entre aminocidos,
cuando la solucin queda de color violeta. Esto se debe a que el
cobre tiene la propiedad de formar iones complejos,
especialmente entre los enlaces peptdicos.

Ensayo N3. Reaccin Xantoprotica:

Echar en un tubo de ensayo 1 mL de la solucin de clara de huevo,
aadir mL de HNO3 concentrado, calentar en bao mara por 2-3
minutos, enfriar y aadir NaOH al 40% hasta que la solucin sea
fuertemente alcalina. Observar los cambios de coloracin y otros
detalles.

Reaccin Xantoprotica
Reactivo usado
Resultado
Albumina
Positivo
Casena
Positivo
Serina
Negativo
Leucina
Negativo
Asparagina
Negativo
Glicina
Negativo

Discusin del resultado:

 El ensayo Xantoprotico con casena y albmina nos da una

muestra de tono amarillo (positivo) por lo tanto contiene
aminocidos con restos aromticos.
El ensayo Xantoprotico con serina, leucina. Asparagina, glicina
nos dio negativo lo que nos indica que no hay restos aromticos

Conclusin:
La reaccin Xantoprotica es un mtodo que se puede utilizar para
determinar la presencia de protenas solubles en una solucin,
empleando ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en
aquellas protenas con aminocidos portadores de
grupos aromticos, especialmente en presencia de tirosina. Si una
vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali, se torna color
amarillo oscuro.
Ensayo N4. Precipitacin de protenas:
Disponer de 6 tubos de ensayo, al primero echar 2.5mL de agua, al
segundo2.5 mL de la solucin de clara de huevo, al tercero 5mL de
agua y 4 gotas de HCl al 10%, al cuarto 5mL de solucin de clara de
huevo y 4 gotas HCl al 10%, al quinto 5mL de agua y 4 gotas de
solucin de NaOH al 10%, al sexto 5mL de solucin de clara de huevo y
4 gotas de NaOH al 10%. A cada tubo agregar 2mL de solucin de
sulfato de cobre al 10% y observar los resultados.

Prueba con Albumina:

Solucin de albumina
Con sulfato de cobre al 10%
HCl + sulfato de cobre
Agua + NaOH + sulfato de cobre
NaOH + sulfato de cobre

Resultado
Reacciona
Reacciona
Reacciona
Reacciona

Conclusin:
La reaccin de la albmina frente al CuSO4 (tubo 2) nos dio un
precipitado de color celeste, frente al HCl (tubo 4) precipit de color
azul claro, y frente al NaOH (tubo 6) precipito de color violeta.
De esto deducimos que las protenas precipitan en tono azul - violeta
con CuSO4 en medio cido y bsico respectivamente, caracterizando
este ensayo para la identificacin de las protenas.

Prueba con Casena:

Solucin de Casena
Con sulfato de cobre al 10%
HCl + sulfato de cobre
Agua + NaOH + sulfato de cobre
NaOH + sulfato de cobre

Resultado
Reacciona
Reacciona
Reacciona
Reacciona

Ensayo N5. Reaccin con la ninhidrina:

En un tubo de ensayo echar 1mL de una solucin de aminocidos, luego
agregar 5 gotas de la solucin de ninhidrina, calentar a ebullicin por 2-5
minutos. Una coloracin azul o violeta indica presencia de un
aminocido.

Prueba con la ninhidrina

Aminocido usado
Resultado
Serina
Positivo
Leucina
Positivo
Asparagina
Positivo
Glicina
Positivo
Albumina
Positivo
Casena
Positivo

Discusion de Resultados:
Todas las pruebas nos dieron positivo con una coloracin azulvioleta lo que nos indica la presencia de un -aminocido,

Conclusiones:

Esta reaccin es empleada para detectar cualitativamente y

cuantitativamente a los aminocidos. Para los aminocidos estas
es la nica reaccin de color, verdaderamente importante. La
Ninhidrina es una agente oxidante de 1 de los grupos alfa-amino,
liberando amoniaco, CO2 y el correspondiente aldehdo, as como
la forma reducida de la Ninhidrina. Una coloracin violeta
determina positiva la prueba y para este caso tambin un color
Vino tinto la determinara como positiva

Ensayo N6. Reaccin con de Millon:

En un tubo de ensayo echar 2mL de la solucin de clara de huevo,

agregar 5 gotas del reactivo de Millon y calentar en un bao maria po 10
minutos, enfriar a temperatura ambiente y agregar 5 gotas de solucin
de nitrato de sodio. La aparicin de un color rojo ladrillo indica un
resultado positivo.

Prueba de Millon
Protena usada

Resultado

Albumina

Positivo

Casena

Positivo

Discusin de resultados:
La solucin de albumina y de casena dieron resultado positivo lo que
nos indica la presencia de tirosina en la cadena

Conclusin:

 El anillo fenlico tiene un comportamiento caracterstico frente a las

sales de Mercurio a pH cido, formando complejos color rojo ladrillo
con el anillo fenlico de la tirosina y las protenas que la contienen.

V)

BIBLIOGRAFA:

QUIMICA ORGNICA, Jhon Mac Murry. Edicin 5ta. Pgs. 748 698, 545
QUIMICA ORGNICA. L. Finar. Edt. Alahambra. s.a. Pps .587 597
http://www.arrakis.es/~lluengo/proteinas.html
http://es.wikipedia.org/wiki/Amino%C3%A1cido
http://www.zonadiet.com/nutricion/amacido.htm
http://www.geocities.ws/todolostrabajossallo/orgaII_4.pdf

VI) Cuestionario:
1. Es adecuada la reaccin de ninhidrina para distinguir aminocidos
de protenas? Explique
Esta reaccin es empleada para detectar cualitativamente y
cuantitativamente a los aminocidos. Para los aminocidos estas es la
nica reaccin de color, verdaderamente importante. La Ninhidrina es
una agente oxidante de 1 de los grupos alfa-amino, liberando amoniaco,
CO2 y el correspondiente aldehdo, as como la forma reducida de la
Ninhidrina. Una coloracin violeta determina positiva la prueba y para
este caso tambin un color Vino tinto la determinara como positiva

2. Explique el uso y la importancia de la reaccin de Biuret?

La reaccin o prueba de BIURET es un mtodo que detecta la presencia

de compuestos con dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para
todas las protenas y pptidos cortos.
El reactivo del Biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con
los enlaces del pptido y cambia el color cuando entra en contacto con
otra sustancia, tornndose VIOLETA. Mientras ms cantidad de protena
est presente en la solucin, ms oscuro es el color.

3. Con que reaccin distinguira ud. Un aminocido de una protena

Con la reaccin de Biuret dado que este reactivo reacciona con
compuestos que contienen dos o ms enlaces peptdicos dando un
complejo de coloracin violeta. La intensidad del color obtenido es una
medida del nmero de enlaces peptdicos presentes en la protenas.
En aminocidos da resultado negativo debido a que no existe enlaces
peptdicos.

4. Escriba la formula estructural de la tirosina e identifique el grupo

responsable de la reaccin de Millon

la presencia de cantidades relativamente altas de mercurio conduce a la

formacin de Nitrato de mercurio (I) Hg2(NO3)2 el cual en un medio
fuertemente cido reacciona con el grupo -OH de la tirosina produciendo
una coloracin roja caracterstica.

5. Que otros aminocidos dan positivo a la reaccin de Millon?

El nico que da prueba positiva es la tirosina ya que contiene el grupo
fenlico.

6. La lisina podra dar positiva a la reaccin Xantoprotica? Porque.

No debido que en la estructura de la lisina no hay presencia de un
compuesto aromtico.