UNIVERSIDAD AUTNOMA DE AGUASCALIENTES

CENTRO DE CIENCIAS BSICAS

DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA Y FARMACOLOGA.

LABORATORIO DE FISIOLOGA.
PRACTICA 4:
LA PREPARACIN NEUROMUSCULAR.

Jos Salvador Rubalcava Rodrguez

2 Semestre. Lic. En Psicologa.

Introduccin
Los msculos esquelticos estn compuestos de fibras musculares individuales
que se contraen cuando son estimuladas por una neurona motora somtica. Cada
neurona motora se ramifica para inervar varias fibras musculares. La activacin de
nmeros variables de neuronas motoras da por resultado la contraccin del
msculo. Cuando un msculo se contrae, impone presin sobre sus tendones y
huesos fijos. La tensin muscular causa movimiento de los huesos en una
articulacin, donde uno de los huesos fijos por lo general se mueve ms que el
otro. La fijacin sea ms movible del msculo, conocida como insercin, es tirada
hacia su fijacin menos movible conocida como su origen. Dependiendo del tipo de
articulacin comprendida, y de las fijaciones de los msculos, diversos
movimientos esquelticos son posibles. El principal movedor de cualquier
movimiento esqueltico se llama el msculo agonista. Los flexores y extensores
que actan sobre la misma articulacin para producir acciones opuestas son
msculos antagonistas
Cada fibra muscular recibe una terminal de axn nica proveniente de una
neurona motora somtica. La neurona motora estimula la fibra muscular para que
se contraiga al liberar acetilcolina en la unin neuromuscular. La regin
especializada del sarcolema de la fibra muscular en la unin neuromuscular se
conoce como una placa terminal motora.
El cuerpo celular de una neurona motora somtica est ubicado en el asta ventral
de la sustancia gris de la mdula espinal, y da lugar a un axn nico que surge en
la raz ventral de un nervio espinal. Sin embargo, cada axn puede producir varias
ramas colaterales para inervar un nmero igual de fibras musculares. Cada
neurona motora somtica, junto con todas las fibras musculares que inerva, se
conoce como una unidad motora.
Siempre que se activa una neurona motora somtica, estimula la contraccin de
todas las fibras musculares que inerva. Las contracciones graduadas (en las
cuales la fuerza de la contraccin es variada) de msculos enteros se producen
por variaciones del nmero de unidades motoras que se activan. Para que estas
contracciones graduadas sean uniformes y sostenidas, diferentes unidades
motoras deben activarse median te estimulacin rpida y asincrnica.
El control neural fino sobre la fuerza de la contraccin muscular es ptimo cuando
hay muchas unidades motoras pequeas involucradas La estimulacin de estas
unidades motoras da por resultado contracciones ms potentes.
Una neurona que inerva menos fibras musculares tiene un cuerpo celular de
menor tamao, y es estimulada por magnitudes menores de aferencias
excitadoras que una neurona de mayor tamao que inerva un mayor nmero de
fibras musculares.
Regulacin de la contraccin: Cuando los puentes se unen a la actina, pasan por
golpes de energa y causan contraccin muscular; por ende, para que un msculo
se relaje debe evitarse la fijacin de puentes de miosina a actina. La regulacin de
la fijacin de puentes a la actina es una funcin de dos protenas que se asocian
con la actina en los filamentos delgados.

La troponina y la tropomiosina trabajan juntas para regular la fijacin de puentes

transversos a la actina y, as, sirven como un conmutador para la contraccin y
relajacin musculares. En un msculo relajado, la posicin de la tropomiosina en
los filamentos delgados es tal que bloquea fsicamente la unin de los puentes a
sitios de fijacin especficos en la actina. As, para que los puentes de miosina se
fijen a la actina, la tropomiosina debe moverse. (Fox, 2003)

Objetivos
Caracterizar las propiedades de la unin neuromuscular esqueltica de la rana, realizando
las siguientes maniobras:
1. Estimular al nervio citico con estmulos aislados para encontrar los estmulos
subumbral, umbral, mximo y supramximos capaces de provocar la
contraccin mnima y mxima respectivamente del msculo gastrocnemio.
2. Estimular al msculo directamente con estmulos aislados para encontrar los
estmulos subumbral, umbral, mximo y supramximo.
3. Caracterizar las contracciones musculares al estimular repetitivamente al
nervio.
4. Determinar la fatiga del msculo.
5. Observar el efecto del bloqueo farmacolgico (d-tubocurarina) de la unin
neuromuscular sobre la actividad muscular.

Mtodos.
MATERIAL Y REACTIVOS:
BIOLGICO: Rana
EQUIPO:
1) Computadora con el programa MP150 AcqKnowledge.
2) Transductor de tensin (TSD105A).
3) Amplificador Diferencial (DA100C).
4) Mdulo de Interfase Universal.
5) Unidad de Adquisicin de Datos MP150.
6) Estimulador elctrico SI-10 con el cable conector para la UIM.
7) Canalizador de pulsos con electrodos de estmulo de ganchillo y de alfiler.
8) Juego de pesas.
9) Estativo.
10) Tornillo de tensin.
11) Estuche de disecciones.
12) Disectores de vidrio.
13) Estilete.
14) Hilo fuerte
15) Jeringas de 1 y 3 ml.
16) Cmara fotogrfica.
17) Guantes.
SOLUCIONES:
Ringer rana a temperatura ambiente. Y d-Tubocurarina (1 mg/ml) (Sigma).

PROCEDIMIENTO:
Utilizando el programa MP150 (Biopac Systems Inc.), instalado en la computadora, calibre
el canal 1 utilizando el transductor de fuerza en el punto 200 g, y con una pesa adecuada
calibre la amplitud del registro a 30 g/divisin. Prepare el canal 2 y conecte el estimulador
SI-10 al canal 2 de la UIM. De esta manera se pueden establecer los voltajes aplicados
con la magnitud de las respuestas y las relaciones temporales entre los estmulos y las
respuestas: fuerza de contraccin, periodos de latencia, frecuencia de estimulacin,
duracin de los estmulos. Se supone que usted es capaz de manejar el equipo de una
manera segura. Si no es as, pida asesora al instructor o maestro responsable.
NOTA. Para calibrar los voltajes del estimulador, siga el procedimiento descrito en la
prctica de Propiedades del msculo esqueltico.
Preparacin neuromuscular. Destruya el cerebro y la mdula espinal de una rana y
colquela sobre la mesa de disecciones. Corte circularmente la piel de la porcin proximal
de uno de los muslos. Jlela hacia abajo para retirar toda la piel del muslo y de la pierna
(sale como si fuera un calcetn). Con los disectores de vidrio diseque el msculo
gastrocnemio en toda su longitud. Amarre el tendn de Aquiles (porcin distal) con un hilo
doble de unos 15 cm de longitud, deje un pequeo espacio entre el hilo y el tendn para
que el hilo no se resbale durante las maniobras experimentales. Con la solucin de Ringer
rana mantenga hmeda la preparacin a lo largo del experimento. Corte el tendn entre el
nudo del hilo y su insercin en el hueso calcneo y eleve el msculo gastrocnemio.
Coloque a la rana en decbito ventral. Utilizando los disectores de vidrio, con cuidado
diseque, a todo lo largo del muslo el nervio citico, localizado entre los msculos
semimembranoso y glteo. Antes de fijar la rana asegrese que la tabla para rana est
firmemente atornillada al estativo. Pase un hilo de camo doble cero, alrededor de la
parte proximal de la pierna (rodilla) y amrrela fuertemente, en seguida, pase el extremo
opuesto del hilo por la hendidura de la tabla para rana y enrllelo firmemente a la rondana
lateral de la mesa. Repita la maniobra para amarrar la parte distal de la pata de la rana y
fjela firmemente a la rondana lateral de la mesa. Tome el cabo suelto del hilo amarrado al
tendn y haga un asa e introdzcala en la palanca del transductor de fuerza. Inserte los
electrodos de estmulo de alfiler en los extremos distal y proximal de la masa muscular.
Con cuidado monte el nervio citico sobre los electrodos de ganchillo, teniendo cuidado
que el electrodo no toque ningn otro tejido de la rana.
Establezca la velocidad del registro a 20 seg/divisin y realice las siguientes maniobras:
NOTA: a) Pueden cambiarse la sensibilidad y la velocidad del registro segn las
caractersticas particulares del experimento, b) Asegrese de conocer las posiciones de la
palanca del canalizador de pulsos para dirigir los estmulos elctricos al nervio o al
msculo.
1) Estimulando al nervio. Determinacin de la intensidad de los estmulos;
subumbral, umbral, mximo y supramximo del nervio a travs de su efecto sobre
la contraccin muscular (sumacin espacial). Con el tornillo de tensin ajuste la
tensin del msculo y estimule el nervio con estmulos aislados de 2 mseg de
duracin y con voltaje creciente, desde cero hasta observar las respuestas mnima
(umbral) y mxima del msculo (estmulo mximo). Anote la intensidad de los
diferentes estmulos aplicados y la magnitud de las contracciones. Con los datos
llene la Tabla 1 e identifique los voltajes de los estmulos; umbral, mximo y
supramximos.

2) Estimulando al msculo. Determinacin de la intensidad de los estmulos;

subumbral, umbral, mximo y supramximo estimulando directamente al msculo
(sumacin espacial). Estimule directamente al msculo con estmulos nicos de 2
m/seg de duracin y con voltaje creciente desde cero hasta observar las
respuestas: mnima (umbral) y mxima del msculo. Anote la intensidad de los
diferentes estmulos aplicados y la magnitud de las contracciones. Con los datos
llene la Tabla 2 e identifique los estmulos umbral, mximo y supramximo.
3) Efecto de estmulos repetitivos al nervio (sumacin temporal). Con el estmulo
mximo del nervio, estimule con frecuencias de 3, 5, 7.5, 10, 15, 20 y 25
pulsos/seg durante 3 seg en cada punto. Permita que la preparacin descanse 5
seg entre cada tren de estmulos. Observe la suma de las contracciones y
determine si se han presentado el ttanos y la fatiga.
4) Fatiga de la unin neuromuscular (efecto de estmulos repetitivos al nervio):
Asegrese de que el canalizador de pulsos este conectado al nervio
a) Seleccione en el estimulador, estmulos de 2 mseg de duracin, cero de
frecuencia y el voltaje del estmulo mximo al nervio.
b) Iniciando con 0 de frecuencia, incremente gradualmente la frecuencia de
los estmulos hasta alcanzar una contraccin tetnica sostenida. Mantenga
el ttanos hasta que la fuerza de la contraccin del msculo haya cado a la
mitad de la amplitud mxima.
c) Rpidamente ajuste el voltaje del estmulo mximo al msculo y cambie
la palanca del canalizador de pulsos para que los estmulos pasen
directamente al msculo. Observe como se incrementa la amplitud de la
contraccin tetnica. Esta mayor capacidad de respuesta del msculo a la
estimulacin directa se debe a que fue la unin neuromuscular la que se
fatig y no el msculo. Para comprobarlo, cambie al voltaje del estmulo
mximo al nervio y cambie el canalizador de pulsos para estimular al nervio
y observe como la amplitud de la contraccin tetnica disminuye an ms.
Pase de nueva cuenta a estimular el msculo directamente y compruebe
que el msculo no se ha fatigado. Con cuidado desmonte la preparacin
neuromuscular y vuelva a montarla en la otra pata. Antes de continuar
ajuste la tensin de reposo adecuada para obtener una respuesta mxima
del msculo y encuentre los estmulos mximo al nervio y al msculo,
capaces de provocar una contraccin muscular mxima. Ajuste la velocidad
del registro a 10 seg/divisin.
5) Bloqueo de la unin Neuro-muscular
a) En el canalizador de estmulos seleccione NERVIO
b) En el estimulador ajuste los siguientes parmetros: voltaje del estmulo
mximo al nervio; duracin del estmulos, 2 mseg; frecuencia 2/seg
c) Con la jeringa de 1 ml, inyecte 100 l de la solucin de tubocurarina
directamente en la porcin media del msculo e inicie la estimulacin
directa al nervio con trenes de estimulacin de 3 segundos de estimulacin
por 10 segundos de descanso. Observe la respuesta contrctil conforme

avanza el tiempo y contine estimulando hasta que ya no haya ms

contracciones.
d) Para demostrar que la desaparicin de la respuesta contrctil se debe al
bloqueo de la unin neuromuscular y no a la fatiga del msculo, con el
canalizador de estmulos pase a estimular directamente al msculo con el
estmulo mximo del msculo y observe la amplitud de las contracciones.
Como un control, reestimule al nervio con el mismo voltaje usado en el
msculo. Observe el bloqueo completo de la unin neuromuscular.

Resultados
1.
Estimular al nervio citico con estmulos aislados para encontrar los
estmulos subumbral, umbral, mximo y supramximos capaces de
provocar la contraccin mnima y mxima respectivamente del msculo
gastrocnemio.
Fuerza mxima de la contraccin de la sacudida simple: al estimular el
nervio 67.06 g
Frecuencia

Duracin
(ms)
2

Intensidad
(A)
0.05
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5

Contraccin

Si
Si
Si
Si
Si
Si

Fuerza de
contraccin
(gr.)
0
21.53
24.61
25.38
25.38
24.61

Estmulo.

subumbral
Umbral
Umbral
Mximo
Mximo
Supramximo

Estimulacin del nervio

30
25
20
Fuerza de contraccin gr.

15
10
5
0
0.05

0.1

0.2

0.3

Intensidad (A)

0.4

0.5

Fuerza de contraccin basal: 12.75 g. x

2.
Estimular al msculo directamente con estmulos aislados para
encontrar los estmulos subumbral, umbral, mximo y supramximo.
Fuerza mxima de la contraccin de la sacudida simple:
directamente al msculo 22.18g.
Frecuencia

Duracin
(ms)
2

Intensidad
(A)
0.2
0.4
0.55
0.6
0.7
0.8
0.9
1.0

Contraccin

No
No
Si
Si
Si
Si
Si
Si

Fuerza de
contraccin
(gr.)
0
0
8.46
8.46
9.23
10.76
13.84
13.84

al estimular
Estmulo.

subumbral
Subumbral
Umbral
Umbral
Umbral
Umbral
Mximo
Supramxim
o

Estimular msculos.
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Fuerza de contraccin gr.

Intensidad (A)

3.

Retardo sinptico :0.1 ms

4.
Cuando la contraccin sostenida en un 100% disminuye un 37% de la misma se le
conoce como fatiga muscular .

En el nervio a .3mv con una duracin de .2 ms

La sntesis de acetilcolina es muy lenta y la re captacin es ms rpida.

5. Bloqueo

Se utilizo el curare para el musculo donde ocupo el lugar de la acetilcolina bloqueando

canales.
Bloqueo de la acetilcolina a sus receptores
Observamos que:

Cuando se estimula en nervio no hay fuerza de contraccin.

Cuando se estimulo el musculo hubo una apenas notable fuerza de contraccin.

Discusin

Los umbrales de los axones individuales en el nervio y su distancia desde los

electrodos estimulantes varan. Con los estmulos inferiores al umbral, ninguno de los
axones se estimula y no se obtiene una respuesta. Cuando los estmulos alcanzan el
umbral de intensidad, los axones con umbrales bajos se activan y se observa un
pequeo cambio de potencia La respuesta elctrica aumenta en forma proporcional
hasta que el estmulo es lo bastante fuerte para excitar a todos los axones del nervio;
estmulo mximo, y la aplicacin de un estmulo mayor al mximo no produce un
aumento adicional en el grado del potencial observado. (Barret, Barman, Boitana,
Brooks, 2010)
1. Estimular al nervio citico: Subumbral, fue menor de 1 gramo con una intensidad de
0.2 A, el estmulo es inferior al umbral y no hay contraccin, por eso aqu es
subumbral. Umbral, fue de 21.53gr con una intensidad de 0.2 A, este fue el estmulo
mnimo que llevo a una contraccin. Mximo, fue de 25.38gr con una intensidad de 0.3
A, aqu fue cuando se estimularon todas las fibras nerviosas del msculo, y al
aumentar ms la intensidad ya no aumento la fuerza de contraccin aqu se dio la
contraccin mxima. Supramximos, fueron todos los estmulos dados con una
intensidad superior a 0.3 A, este estmulo puede causar daos.
2. Estimular al msculo: Subumbral, fue menos de 1gr con una intensidad de .2 y .4 A.
Umbral, fue de 8.46g con una intensidad de 0.55 A, podemos ver que la intensidad
que se aplico fue mayor pero la fuerza de contraccin fue menor al estimular el
musculo que al estimular el nervio. Ya que el nervio est especializado para la
conduccin de estimulos. Mximo, fue de 13.84g con una intensidad de 0.9 A, aqu
fue cuando se estimularon todas las fibras nerviosas igualmente en esta parte se
aplic ms intensidad pero la fuerza de contraccin ya no aumento. Supramximos,
los estmulos que se dieron (1.0 A de intensidad) no hubo aumento de la fuerza de
contraccin por lo contrario este disminuyo, ya que algunas de la fibras estimuladas
por el estmulo mximo entraron en reposo, y otra de las razones por la que no
aumento fue porque en el estmulo anterior se activaron todas la fibras.
3. Caracterizar las contracciones musculares al estimular repetitivamente al nervio y al
musculo.
Como el mecanismo de contraccin no tiene un periodo refractario, la estimulacin
repetida antes que ocurra la relajacin produce activacin adicional de los elementos
contrctiles y una respuesta que se agrega a la contraccin ya presente: suma de
contracciones Con la estimulacin repetida rpida, la activacin del mecanismo
contrctil se produce en repetidas ocasiones antes de que haya cualquier relajacin, y las
respuestas individuales se fusionan en una contraccin continua. Esta respuesta se llama
tetania (contraccin tetnica). Es una tetania completa cuando no hay relajacin entre los
estmulos, y una tetania incompleta cuando existen periodos de relajacin incompleta
entre los estmulos sumados. (Barret, Barman, Boitana, Brooks, 2010)
Los estmulos dados en el nervio y en el msculo, se realizaron con los del estmulo
mximo de cada uno y con frecuencias de 3, 5, 10 y 15, los resultados fueron parecidos
en el nervio y en el msculo, en las frecuencias 3, 5 y 10, se dio un tetanos incompleto lo
cual se puede observar en los resultados en la grfica ya que existen unos periodos,
poco a poco ms pequeos de relajacin pero an no existe sumacion es algo sencillo de
ver en las imgenes a y b. Pero en la frecuencia de 15, se da la sumacion o tetanos
completo o tetanizacion ya no existen ni una minima de relajacin, es una contraccin
continua.

4. Determinar la fatiga del msculo.

La fatiga muscular; una disminucin reversible, de la capacidad de un msculo para
generar fuerza. La fatiga durante una contraccin mxima sostenida, cuando se usan
todas las unidades motoras y el ndice de activacin neural es mximo, parece deberse a
acumulacin de K+ extracelular. Las concentraciones de K+ pueden hacerse en particular
altas en los espacios estrechos de los tbulos transversos. Esto disminuye el potencial de
membrana de fibras musculares, e interfiere con su capacidad para producir potenciales
de accin. En estas circunstancias la fatiga slo dura un tiempo breve, y la tensin
mxima puede producirse de nuevo despus de menos de un minuto de reposo. (Fox,
2003).
5. Observar el efecto del bloqueo farmacolgico (d-tubocurarina) de la unin
neuromuscular sobre la actividad muscular.
D-tubocurarina: Es una benzilisoquinolina. El bloqueo de los receptores colinrgicos no
es selectivo sobre la unin neuromuscular y el bloqueo de los ganglios autnomos
simpticos produce hipotensin. Puede liberar histamina a dosis de uso corriente.
Produce bloqueo simptico. (http://www.anestesianet.com/unal/rnm.htm)
El curare disminuyo la cantidad y la calidad de contracciones al estimular el nervio ya que
al aplicar cuarare se bloquean los receptores de acetil colina no hay entrada de sodio no
hay despolarizacin por lo tanto existe contraccin, claro que de pende de la cantidad
utilizada por lo tanto de esto depende la hipotensin, pero como los canales se
encuentran en las terminales nerviosas al estimular el musculo si existe una contraccin
ya que la estimulacin es directa.

Conclusin
En este momento repasaremos los objetivos que si se cumplieron: Al inicio estimulamos
en nervio citico de la rana y se localizaron los estmulos subumbral, umbral, mximo y
supramximos, a parte se agreg el estmulo supraumbral, que tambin se puedo
observar, encontramos que la contraccin que est relacionada con dichos estmulos,
contracciones mximas y mnimas en el msculo gastronemio. En la siguiente parte que
fue la de estimular al msculo directamente se observaron los estmulos subumbral,
umbral, mximo y supramximo. Comprobando con esto que por medio de estimulos
elctricos se dan las contracciones de los msculos la liberar la Ach ya que tambin se
comprob el Ach con el uso del curare y bloqueando los canales de la misma.

Bibliografa

Barret, K. Barman, S. Boitana, S. Brooks, H. (2010). GANONG. Fisiologa Mdica.

Mxico: MCGraw.

Fox, S. (2003). Fisiologa Humana. (12 Edicin). Mxico, DF; Mc Graw Hill
Quintanar, A. Castillo, L. Espino, M. (2012). LA PREPARACIN
NEUROMUSCULAR. Universidad Autnoma de Aguascalientes, Centro de
Ciencias Bsicas, Departamento de fisiologa y farmacologa. Aguascalientes.
ARIZA, M. (2003). UNIN NEUROMUSCULAR Y RELAJANTES MUSCULARES.
http://www.anestesianet.com/unal/rnm.htm
Biopac
Systems.
(2011)
Biopac
Systems.
Bionic.
http://www.bionic.es/portfolio_item/biopac-systems/