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UNIDAD DIDCTICA III: MICROBIOLOGA Y BIOTECNOLOGA

1.- MICROORGANISMOS
A.- Concepto de Microorganismo: Con el nombre de microorganismos se designa al conjunto de
seres vivos que se caracterizan por tener un tamao tan pequeo que no pueden ser observados a
simple vista, sino slo con ayuda del microscopio ptico o electrnico.
Los hay sin estructura celular, p.e. los virus, pero la mayora son unicelulares (procariotas o
eucariotas), y existen tambin microorganismos pluricelulares (p.e. algas y mohos)
La ciencia que se dedica a su estudio se denomina Microbiologa.
B.- Principales grupos:
a.- Formas acelulares: a.- Introduccin: Desde 1892 se conoce la existencia de partculas
infecciosas, a las que se dio el nombre de grmenes filtrables, ya que traspasaban cualquier filtro
cuyo tamao de poro retuviese a los dems agentes infecciosos. Posteriormente se les denomin
virus, aunque no fue posible observarlos hasta que apareci el microscopio electrnico. Hoy se
conocen otros tipos de partculas infecciosas de organizacin acelular, aunque en algunos casos no
hay acuerdo unnime para considerarlas virus atpicos o formas totalmente distintas, aunque todas
ellas se clasifican y estudian aparte, sin adscribirlas a ningn reino. Al carecer de estructura celular,
no pueden alimentarse, ni crecer y slo se reproducen dentro de una clula husped, de la que utilizan
sus estructuras vitales.
b.-Virus: a.- Caractersticas generales: Son formas acelulares que vienen definidos por las
siguientes caractersticas:
Tamao: Oscila entre 10 y 300 nm, o sea, muy inferior al de cualquier clula y prximo al de las
macromolculas. Siempre tienen la misma forma y tamao, mientras que los de una clula
cambian a lo largo de su vida.
Estructura u organizacin: Es molecular, no celular. Consta de cido nucleico, que puede ser
ADN o ARN, pero nunca ambos a la vez, envuelto en una cubierta de protenas.
Actividades vitales: Son parsitos intracelulares obligados, pues para autoperpetuarse utilizan los
materiales y maquinaria celular de la clula husped, que, debido a esto, suele desorganizar su
propia actividad, llegando incluso a morir. Por eso la mayora de los virus causan graves
enfermedades. No poseen metabolismo ni sensibilidad.
b.- Composicin y estructura: Las partculas vricas se denominan viriones. Para que un
virus pueda infectar una clula es necesario que presente su estructura completa. sta se compone de:
cido nucleico: Tanto el ARN como el ADN, pueden ser de cadena doble o de cadena sencilla, y,
en el caso del ADN, lineales o circulares. Los genomas ARN de cadena doble y algunos de
cadena sencilla, se presentan en los viriones en forma de varias cadenas independientes, con
genes distintos (genoma segmentado). Ciertos virus con ARN simple (retrovirus) son capaces de
copiar, a partir de una hebra simple de ARN, una doble hlice de ADN.
Protenas: Son, casi todas, estructurales (aunque existen virus que poseen algunas enzimas). Cada
molcula proteica se denomina Capsmero, y se ensamblan
dando lugar a la Cpsida, una cubierta externa de forma
variada. Al conjunto de cido nucleico y cpsida se le
denomina nucleocpsida
Envoltura membranosa: No todos los virus la presentan. Se
compone de una bicapa lipdica procedente de la clula
parasitada, (de su membrana plasmtica, RE o envoltura
nuclear), y cantidades variables de glcidos, todos ellos
asociados a protenas vricas (lipoprotenas y
glucoprotenas).
c.- Tipos de virus: Los virus se clasifican atendiendo
a las caractersticas de las envolturas proteicas, al tipo de cido nucleico que contienen y
segn las clulas que infectan.
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a.- Segn las caractersticas de la cpsida:


Virus polidricos en los que los capsmeros forman un poliedro, frecuentemente de 20 o
mltiplo de 20 caras (icosaedro) (virus de la varicela, o de la polio, p.e.). Algunas veces
presentan protenas con aspecto de espinas que erizan la cpsida.
Virus helicoidales, en los que los capsmeros se enrollan en espiral, formando un cilindro
(virus del mosaico del tabaco, p.e.), dentro del cual queda el cido nucleico tambin
dispuesto helicoidalmente.
Virus complejos, en los que una zona de la cpsida, denominada cabeza, tiene forma
polidrica, y otra zona, o cola, forma helicoidal (Bacterifagos, como el fago T4, p.e.). La
cola acaba en una placa basal hexagonal de la que emergen cortas espinas de anclaje y
largas fibras caudales. Su misin es actuar como estructura de fijacin a las clulas.
Virus recubiertos: Son los que presentan envoltura membranosa (Virus de la gripe o VIH,
tambin conocido como virus del SIDA.

b.- Segn el tipo de cido nucleico:


Virus con ADN bicatenario (de cadena doble), como corticovirus y miovirus, patgenos de
bacterias o adenovirus y papovirus, que infectan a clulas animales.
Virus con ADN monocatenario, como inovirus, patgeno de bacterias.
Virus con ARN bicatenario, como reovirus, patgeno de clulas animales y vegetales
Virus con ARN monocatenario. Dentro de ellos se distinguen dos tipos, segn el ARN acte
como ARNm (poliovirus) o no (Rhabdovirus). Se hace otro grupo con aquellos que poseen
la enzima transcriptasa inversa, que, dentro de la clula husped, transcribe el ARN vrico
en una molcula de ADN bicatenaria que se incorpora al ADN de la clula husped, como
los retrovirus (virus del SIDA).
c.- Segn el tipo de clula que infectan:
Virus que infectan clulas vegetales: Aqu se incluyen virus con ARN monocatenario, como
el virus del mosaico del tabaco y otros con ARN bicatenario como el reovirus.
Virus que infectan clulas animales: La mayora poseen envolturas lipoproteicas, en las que
se encuentran protenas de reconocimiento que identifican a los receptores de las clulas
dianas que el virus puede infectar. Entre los que poseen ARN monocatenario estn los de la
rabia, sarampin y gripe. Tambin pertenecen a este grupo los retrovirus. Entre los virus de
clulas animales con ADN bicatenario se encuentran los del herpes, la hepatitis o los
resfriados (adenovirus).
Virus que infectan bacterias o Bacterifagos: Los hay con ADN monocatenario ( X174) y
bicatenario (T2 o T4) y con ARN monocatenario (levovirus, p.e.) y bicatenario (cistovirus,
p.e.).
d.- Actividad biolgica: Fuera de la clula el virin es una forma inactiva desde el punto de
vista biolgico. No desarrollan ninguna actividad ni crecen, por lo que no necesitan aporte de materia
ni de energa, es decir, no realizan las funciones de nutricin. Tampoco presentan funciones de
relacin pues, aunque parasitan clulas, el contacto con las mismas se establece de modo fortuito. Sin
embargo, s son capaces de reproducirse en el interior de la clula husped, mediante un mecanismo
muy especial: se multiplican por sntesis y posterior reunin de sus componentes. Pero al carecer de
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metabolismo propio, para ello han de utilizar las estructuras y materiales (ribosomas, ARNt, ATP,
nucletidos, aminocidos...) de la clula parasitada.
e.- Ciclo vital: Se entiende por ciclo vital o ciclo infeccioso de un virus el conjunto de
acontecimientos que tienen lugar desde su incorporacin a la clula husped hasta su salida de la
misma, y cuya finalidad es la multiplicacin del virus.
En los seres pluricelulares hay que tener en cuenta que existe una etapa previa, en la infeccin del
virus, desde que penetra en el organismo hasta que alcanza las clulas especficas en las que van a
producir el ciclo infeccioso.
Los detalles de cada etapa del ciclo vital difieren enormemente de unos tipos de virus a otros, pero, en
general, se considera que existen las siguientes etapas:
a.- Fase de adsorcin: Se establece el contacto entre la cpsida o la envoltura del virus y
la superficie de la clula, mediante receptores especficos de ambos. Esto hace que cada virus infecte
un tipo celular especfico de cada organismo.
Los bacterifagos (virus que parasitan bacterias) toman contacto a travs de los receptores de las
protenas que forman las espinas y las fibras de la placa basal con la pared bacteriana, y terminan por
anclarse a ella.
b.- Fase de penetracin: El virus supera la barrera de la membrana celular,
introducindose completo en el citoplasma o slo su genoma y
algunas protenas acompaantes.
En el caso de los bacterifagos, las espinas y fibras de la placa
basal, junto con enzimas hidrolticas de la cpsida, rompen la
pared. La cola se contrae y el cido nucleico se inyecta en la clula
husped.
En las clulas animales
normalmente entra todo el virin
mediante la fusin de las
membranas celulares y vricas. Si
no poseen envoltura penetran por un mecanismo de endocitosis
mediada por receptores. En las clulas vegetales atraviesan la pared
celular a travs de pequeas grietas producidas, sobre todo, por
picaduras de insectos.
c.- Fase de eclipse: En ella se produce la replicacin, transcripcin y traduccin del
material gentico. Se denomina as porque el virus desaparece como tal entidad y difcilmente se
puede observar al microscopio electrnico: pierde sus envueltas y se integra en el metabolismo de la
clula, sacando copias de su genoma y dirigiendo la sntesis de nuevas protenas vricas.
Segn la duracin de esta fase se distinguen dos modalidades de ciclo vital vrico:
Ciclo ltico: En cuanto el cido nucleico se encuentra en el citoplasma se inicia la replicacin y la
sntesis de protenas del virus, hasta formarse numerosas copias de los mismos.
Ciclo lisognico: En el caso de algunos bacterifagos, como el fago lambda (), el genoma del
virus, despus de la penetracin, se incorpora al ADN bacteriano y permanece en ste latente. El
virus no se manifiesta, pero su cido nucleico se duplica al mismo tiempo que el de la bacteria,
por lo que puede transmitirse a las clulas hijas durante varias generaciones. Cuando esto ocurre,
el ADN del virus recibe el nombre de profago, y la clula portadora, denominada bacteria
lisognica, es resistente a una nueva infeccin por ese virus.
Bajo ciertos estmulos externos (rayos X, ultravioleta...), puede producirse la induccin o
activacin del profago, que se separa del cromosoma bacteriano e inicia un ciclo ltico, originndose
nuevos viriones infecciosos. Existen numerosos agentes inductores, pero todos ellos tienen en comn
el producir daos en el ADN, es decir, poner en peligro la vida de la clula husped; por tanto, la
induccin sera un mecanismo de escape para el virus.

A semejanza de los profagos, algunos virus de clulas eucariotas tambin pueden integrarse en el
ADN celular. Cuando esto ocurre reciben el nombre de provirus. A diferencia de lo que ocurre con
los profagos, el ADN integrado en el de la clula husped se transcribe para sintetizar nuevas
molculas de ARN y de protenas vricas, por lo que son activos. Esto sucede, p.e. en el caso del VIH
(virus del SIDA), que son virus ARN, en concreto retrovirus, que, gracias a la enzima transcriptasa
inversa (que se encuentra dentro de la cpsida junto al ARN), sintetizan un ADN bicatenario, que es
el que se integra en el ADN de la clula infectada.
d.- Fase de ensamblaje: Consiste en la reunin de las copias del nuevo material gentico
del virus con las protenas vricas.
e.- Fase de liberacin: Los nuevos virus salen de
la clula, para infectar nuevas clulas y repetir el ciclo. Los
bacterifagos producen lisis de la clula. Los virus sin
envoltura lo hacen mediante exocitosis, aprovechando la
salida de otras sustancias; los que poseen envoltura se
ensamblan en la membrana plasmtica de la clula, y se
liberan por gemacin, llevndose consigo parte de la
membrana que formar su envoltura lipdica. Si la envoltura
se forma a partir de membranas internas, los virus llegan
embalados en ellas hasta la membrana, como si fueran
protenas transportadas por vesculas.
f.- Origen de los virus: Su sencillez estructural hizo que se consideraran durante mucho
tiempo como preclulas, es decir, organismos en las primeras etapas de la evolucin biolgica.
Actualmente se mantiene, sin embargo, que los virus podran ser restos evolutivos de
microorganismos parsitos celulares muy sencillos, que, tras perder su complejidad al adaptarse al
parasitismo, conservaron nicamente la informacin esencial para su replicacin.
Otros cientficos opinan que los virus se han originado a partir de elementos gnicos de las clulas
hospedadoras, que en el curso de la evolucin alcanzaron su independencia replicativa de la clula
inicial. Seran un ejemplo de evolucin hacia atrs, desde organismos ms complejos a entidades
ms simples.
Tambin hay que tener en cuenta la aparicin de nuevos virus, originados por cambios gnicos o
por la transferencia a otros hospedadores (el virus del SIDA humano, p.e., parece que procede de un
retrovirus que afecta al chimpanc).
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b.- Formas celulares: a.- Introduccin: Los tipos de microorganismos con estructura celular
existentes se incluyen en tres de los cinco reinos existentes: Moneras (Arqueobacterias y
Eubacterias), Protoctistas (Protozoos y Algas ) y Hongos (Mohos y Levaduras).
b.- Arqueobacterias: Son organismos unicelulares procariotas, filogenticamente separados
tanto de Eubacterias como de eucariotas, por lo que en la actualidad muchos autores ya no las
consideran bacterias, sino un grupo independiente, al que denominan Arqueas. Se caracterizan por:
En la pared celular no presentan peptidoglucano, sino glucoprotenas y protenas simples.
Los lpidos de su membrana no llevan cidos grasos, sino que el glicerol se une mediante
enlaces tipo ter a cadenas hidrofbicas derivadas del isopreno.
Viven en condiciones extremas, diferencindose tres grupos de Arqueas:
- Halofticas: Viven en ambientes de elevada salinidad (aguas saladas, como el Mar Muerto,
p.e. o salazones de carne o pescado)
- Metangenas: Viven en ambientes estrictamente anaerobios, en los que producen metano,
siendo ste el origen del denominado gas de los pantanos. Se encuentran en ambientes
ricos en materia orgnica en descomposicin, como el fondo de pantanos, aguas
estancadas, depsitos de tratamiento de aguas residuales o el tracto digestivo de
rumiantes.
- Termoacidfilos: Viven en ambientes muy cidos y de elevada temperatura, como aguas
termales cidas o zonas volcnicas submarinas, siendo su T ptima de crecimiento
superior a los 80C, pudiendo vivir incluso a temperaturas de ebullicin del agua.
c.- Eubacterias: Son microorganismos unicelulares procariotas, de dimensiones comprendidas
entre 1 y 5 de dimetro. Pueden habitar en todos los medios terrestres y acuticos, e incluso en el
interior de otros seres vivos. Su estructura celular corresponde a la de una clula procariota, que,
aunque esbozada en el tema II, vamos ahora a describir con algo ms de detalle.
a.- Estructura de la clula bacteriana: La clula
bacteriana est constituida por pared celular, membrana
plasmtica, citoplasma, y material gentico. En ocasiones
presenta diversos tipos de apndices bacterianos.
a.- Pared celular: Es una cubierta rgida, no
celulsica, compuesta fundamentalmente por murena, un
peptidoglucano formado por la unin de monmeros de Nacetilglucosamina y cido N-acetilmurmico, molculas que
se unen por medio de enlaces O-glucosdicos. Existen dos
tipos de pared celular que difieren en su grosor y forma, lo
que permite dividir a las bacterias en dos grupos:
Pared celular de las Gram positivas: Poseen una sola
capa gruesa muy rgida compuesta por murena, a cuya
estructura reticular (como la de una tela de saco) se unen
protenas, polisacridos y cidos teicoicos (polmeros de
derivados de monosacridos, aminocidos y alcoholes
como la glicerina). Contiene muy pocos lpidos.
Pared celular de las Gram negativas: Es delgada, y
formada por dos capas, una interna de murena, y otra
externa de protenas, lipoprotenas y lipopolisacridos,
organizados formando una bicapa lipdica (LPS).
Algunas bacterias poseen una cubierta de naturaleza
glucdica, denominada Cpsula bacteriana, por fuera de su
pared celular. Sirve de proteccin frente a fagocitos y
anticuerpos, actan como receptores de virus y permiten la
adherencia a clulas eucariotas previa a la invasin microbiana.
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b.- Membrana plasmtica: Posee una estructura semejante a la de las clulas eucariotas y,
al igual que sta, regula el intercambio entre el interior celular y el medio. Esta membrana puede
invaginarse, formando los mesosomas, donde se localizan numerosas enzimas que intervienen, entre
otros procesos, en la respiracin celular, la duplicacin del ADN, la fotosntesis en aquellas bacterias
que la realizan y la asimilacin del nitrgeno atmosfrico en las bacterias fijadoras de N2.
c.- Citoplasma: Su composicin es semejante al de las clulas eucariotas, pero carece de la
mayor parte de los orgnulos caractersticas de las mismas, conteniendo una gran cantidad de
ribosomas 70s, y unos grnulos denominados inclusiones, constituidos por diferentes sustancias de
reserva (glucgeno, azufre, gases, protenas...)
d.- Material gentico: Se encuentra en el nucleoide, zona situada en la regin central del
citoplasma, no protegida por una membrana nuclear. Est constituido por:
El cromosoma bacteriano, formado por una molcula de ADN bicatenario, circular y
fuertemente plegada. El plegamiento de la molcula se estabiliza por medio de protenas
estructurales, aunque no se observan histonas ni unidades de tipo nucleosoma.
Pequeos anillos de ADN, dispersos por el citoplasma, independientes del cromosoma y
capaces de duplicarse, denominados plsmidos. Pueden contener desde 2 hasta 30 genes que,
aunque no son estrictamente necesarios para la vida de la bacteria, confieren importantes
propiedades a las clulas que los albergan (no todas los presentan, o presentan los mismos).
Entre ellos destacan:
- Plsmido o factor F: Otorga a la clula la capacidad de conjugacin, proceso que permite una
recombinacin gnica, con el
consiguiente aumento de la
variabilidad
gentica.
Se
aproximan dos bacterias, una
con el plsmido F (F +) y otra sin
l (F-) y establecen un puente
citoplasmtico mediante una
fimbria, a travs del cual pasa el
plsmido de la bacteria F+ a la F. Si el plsmido se halla
incorporado al cromosoma
bacteriano, parte de ste tambin se transfiere, aunque normalmente no entero, ya que el
puente se suele romper antes. De esta manera la bacteria F- aparece con un genoma nuevo,
porque ha incorporado genes procedentes de otra bacteria.
- Plsmidos R: Codifican enzimas que proporcionan resistencia frente a los antibiticos, y un
solo plsmido puede contener hasta 10 genes de resistencia diferentes. Tales genes de
resistencia no slo pasan de la clula madre a la hija en la divisin celular, sino que tambin
pueden ser transferidos desde los plsmidos a los virus y a otras bacterias, incluso de distinta
especie que la portadora del plsmido. Esta capacidad de las bacterias para transferir genes
de resistencia a los medicamentos de una clula a otra, plantea un serio problema sanitario,
pues constituye la causa del resurgimiento actual de enfermedades infecciosas que se crean
prcticamente controladas, como es el caso de la tuberculosis.
e.- Apndices bacterianos: Son estructuras filiformes, que sobresalen en la superficie
celular, entre los que destacan:
Flagelos: Filamentos muy largos y finos, que proporcionan movilidad a las bacterias que los
poseen. Su estructura es ms sencilla que los de las clulas eucariotas, y estn compuestos por
una protena denominada Flagelina. Puede haber uno o varios en una misma clula.
Pelos y Fimbrias: Estructuras tubulares y huecas, cuya pared est compuesta de protenas. La
funcin de las fimbrias, cortas y numerosas, es adhesiva, mientras que los pelos, ms largos y
escasos, intervienen en el proceso de conjugacin, pues sirven para el paso del ADN de una
clula a otra durante este proceso.
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b.- Morfologa bacteriana: Las bacterias presentan


distintas formas. Se distingue entre:
Cocos: De forma esfrica. Pueden aparecer aisladas o
agrupadas en parejas, en ttradas, en cadenas lineales
(estreptococos) o ramificadas (estafilococos)...
Bacilos: Poseen forma alargada. Pueden tambin
aparecer aislados o asociados en cadenas.
Curvadas: Pueden ser de tres tipos:
- Vibrios, si tienen una sola curvatura (forma de coma)
- Espirilos: Con forma ondulada.
- Espiroquetas: Presentan varias curvaturas (en
espiral).
c.- Fisiologa bacteriana: La fisiologa y el
metabolismo bacterianos se caracterizan por su extraordinaria
variedad. Existen formas auttrofas (principal fuente de
carbono, el CO2) y hetertrofas (fuente de carbono, molculas
orgnicas), fotosintticas (fuente de energa la luz) y
quimiosintticas (fuente de energa reacciones oxidativas).
As, entre las bacterias podemos encontrar las siguientes
formas:
Fotoauttrofas: Fuente de energa la luz. Fuente de
materia: CO2. A veces S, H2S o NH3.
Fotohetertrofa: Fuente de energa la luz. Fuente de
materia: Compuestos orgnicos.
Quimioauttrofas: Fuente de energa: Oxidacin de
compuestos inorgnicos (NO2-, NH3, H2S). Fuente de
materia: CO2, S, H2S, NH3.
Quimiohetertrofas: Fuente de energa y materia:
Compuestos orgnicos.
Desde el punto de vista respiratorio, y segn el aceptor
final de electrones se distinguen entre bacterias aerobias
(usan el oxgeno como aceptor final) y anaerobias (utilizan
otra molcula como aceptor final).
Muchas bacterias son facultativas, es decir, tienen la
capacidad de variar su metabolismo en funcin de las
condiciones ambientales. P.e., existen bacterias anaerobias
facultativas, que pueden vivir sin oxgeno, anaerobias
estrictas, que han de vivir sin oxgeno y aerotolerantes,
que no utilizan el oxgeno, pero toleran su presencia. Esta
amplia variedad de capacidades metablicas, junto con su
pequeo tamao y su rapidez reproductiva, convierten a
las bacterias en el grupo de organismos vivientes ms
ampliamente distribuidos en la naturaleza, ya que es posible encontrarlas incluso en los ambientes
ms inhspitos para la vida (manantiales hidrotermales superficiales o submarinos, p.e.). Dentro de
las hetertrofas las hay saprofitas, simbiontes y parsitas.
En cuanto a su reproduccin, las bacterias se dividen asexualmente por biparticin (en algunos
casos por gemacin). Aunque no poseen reproduccin sexual, presentan procesos parasexuales, como
la conjugacin, la transduccin (se transfieren fragmentos gnicos de una bacteria a otra a travs de
un virus bacterifago), o la transformacin (se transfiere un fragmento de ADN de una bacteria a otra
sin contacto entre ambas clulas).
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d.- Clasificacin de bacterias: Evolutivamente se acepta en la actualidad la existencia de


12 linajes o grupos. Sin embargo, cuando se estudia la taxonoma de las bacterias se suele atender
ms a caracteres tales como el tipo de pared (Gram + o Gram -) o el tipo de nutricin. Dada la
complejidad del tema, citaremos tan slo dos grupos con un cierto inters, y desarrollaremos algo
ms la diversidad bacteriana, sobre todo en lo que se refiere a sus formas de vida, al tratar las
relaciones entre los microorganismos y el hombre.
Cianobacterias o algas verde azuladas: Son organismos con clorofila, auttrofos fotosintticos;
algunas pueden fijar el nitrgeno atmosfrico. Suelen vivir en aguas dulces o saladas, aunque
las hay que establecen simbiosis con hongos, formando lquenes.
Micoplasmas: Son las clulas ms pequeas con capacidad de divisin que se conocen.
Carecen de pared celular. Algunos son saprofitos, pero la mayora son parsitos obligados del
ser humano o de otros animales.
d.- Algas: Es un trmino sin categora taxonmica, con el que se designa a organismos
eucariotas, talofitas, auttrofos fotosintticos. La mayora de las algas son microscpicas, existiendo
individuos unicelulares y coloniales, en forma de agregados; existen tambin algas de gran tamao.
Algunas son mviles mediante flagelos (normalmente 1 2). Otras, que no poseen flagelos en su
estado vegetativo, forman gametos mviles cuando se reproducen sexualmente. Tambin se pueden
reproducir asexualmente por biparticin, siendo bastante comn la alternancia de generaciones.
Pueden tener gran diversidad de pigmentos fotosintticos (clorofila, carotenoides, xantofilas...) que
segn su proporcin relativa confieren el color caracterstico de cada tipo de alga: verdes
(Clorophyta), rojas (Rhodophyta) o pardas (Phaeophyta).
Presentan una pared celular de composicin variable. Habitualmente es de celulosa, aunque con
cantidades variables de otros polisacridos (pectina p.e.) Tambin pueden presentar quitina y
carbonato clcico (en las algas calcreas o coralinas). Las Diatomeas tienen una cubierta de slice.
Viven en medios acuticos (dulces o salados) o en terrestre muy hmedos. Algunas forman parte
de los lquenes, al asociarse simbiticamente con un hongo.
Al ser productores, constituyen la base de las cadenas trficas de los ecosistemas acuticos, como,
p.e. el plancton marino.
e.- Protozoos: Son microorganismos unicelulares eucariotas y hetertrofos. Muchos son de
vida libre, que habitan en el agua, suelo o materia orgnica en descomposicin, pero otros son
patgenos de animales y hombres (p.e. Plasmodium, Esporozoo que causa la malaria).
El movimiento que los caracteriza lo llevan a cabo mediante cilios (Ciliados como Paramecium),
flagelos (Flagelados, como Trypanosoma gambiensis) o por movimiento ameboide (Sarcodinos,
como los radiolarios, foraminferos o Entamoeba histolytica).
Se alimentan gracias a la ingestin de macromolculas en disolucin mediante pinocitosis. La
mayora son capaces, adems, de fagocitar partculas slidas e, incluso, clulas.
La reproduccin puede ser asexual por fisin binaria o por divisin mltiple (dando lugar a
multitud de esporas), o sexual, aunque se suelen dar ambos tipos en una misma especie.
f.- Hongos: Son organismos eucariotas talofitas y hetertrofos y, por tanto, carentes de
clorofila, unicelulares o pluricelulares. Se reproducen tanto sexual como asexualmente, presentando
alternancia de generaciones. Carecen de cilios y flagelos en todas las etapas de su ciclo vital.
Presentan una pared celular rgida, estructuralmente semejante a las paredes vegetales, pero no est
constituida de celulosa, sino de quitina, fundamentalmente, junto a otros polisacridos (glucanos,
mananos, galactanos...)
Viven en ambientes muy diversos. Algunos son acuticos de agua dulce o marina, pero la mayora
son terrestres. Los hay saprofitos, descomponedores que se desarrollan sobre plantas muertas,
contribuyendo a su descomposicin para formar humus; otros son parsitos, de plantas, animales o el
hombre; por ltimo, los hay simbiontes, formando lquenes al establecer simbiosis con cianobacterias
o micorrizas, al hacerlo con races de plantas.
Entre los diferentes grupos de hongos destacan, por su inters microbiolgico, los mohos y las
levaduras.
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Los mohos son hongos Cigomicetos, cuyo cuerpo vegetativo est constituido por filamentos
celulares denominados hifas; el conjunto de hifas constituye el micelio. Aguantan condiciones
ambientales extremas (altas concentraciones de azcares, acidez extrema, falta de humedad...). El
ms conocidos es el moho del pan (Rhizopus), frecuente tambin en frutas y otros vegetales
Las levaduras son Ascomicetos unicelulares y se reproducen por gemacin. Muy difundidas en la
naturaleza, son utilizadas en procesos fermentativos, como sucede con Saccharomyces cerevisiae,
responsable de la fermentacin alcohlica.
Dentro de los Deuteromicetos, de reproduccin sexual desconocida destaca el gnero Penicillium,
productor de penicilina.
Procariotas

Pared celular sin peptidoglucanos ............ Arqueobacterias


Pared celular con peptidoglucanos ........... Eubacterias
Con pared celular

Eucariotas

Con clorofila ...... Algas


Sin clorofila ....... Hongos

Sin pared celular, Hetertrofos .................. Protozoos

C.- Relaciones entre los microorganismos y la especie humana:


a.- Introduccin: Desde el descubrimiento de los
microorganismos, la Microbiologa (ciencia que se
dedica a su estudio), se ha preocupado de analizar las
relaciones de los mismos con la humanidad. Aunque en
general slo se considera a los microorganismos como
causantes de enfermedades, es mayor el n de ellos que
son inocuos o que nos reportan beneficios. As, se puede
considerar que las relaciones entre microorganismos y
humanidad se producen en cinco campos diferentes:
Sanidad, Medio ambiente, Agricultura y Ganadera,
Industria y Biotecnologa. Todos ellos van a ser tratados
en el resto del tema, aunque lo hagamos distinguiendo
entre acciones beneficiosas y perjudiciales, para dedicar
un amplio apartado a la Biotecnologa.
b.- Beneficiosas:
a.- Simbiosis: Existen microorganismos que se asocian ntima y permanentemente con otra
forma de vida, asociacin interespecfica que se denomina simbiosis. Entre ellas cabe destacar:
a.- Simbiosis entre microorganismos no fotosintticos y plantas superiores: Es el caso de
la asociacin entre bacterias (gn. Rhizobium, p.e.) y races de plantas (leguminosas, p.e.) ya
tratado en el ciclo del nitrgeno o entre hongos y plantas (micorrizas).
b.- Simbiosis en la que el microorganismo es fotosinttico: La ms conocida es la
simbiosis liqunica, formada por un hongo y un alga verde o una cianobacteria. En ms de 100
gneros de invertebrados acuticos (celentreos, moluscos, porferos...) se han encontrado algas
verdes unicelulares como simbiontes en sus tejidos.
c.- Simbiosis entre animales y microorganismos no fotosintticos: Entre ellas tenemos el
caso de los microorganismos del rumen: Los rumiantes (vacas, ovejas...) son mamferos de gran
inters en la economa humana. Su primer tramo del tubo digestivo es una gran cavidad, la panza,
donde habitan infinidad de microorganismos, principalmente protozoos ciliados y bacterias, que
con sus enzimas celulolticos descomponen la celulosa en celobiosa y glucosa, con lo que, gracias
a ellos, los rumiantes pueden usar la celulosa como fuente de nutrientes.
En el intestino humano existen tambin bacterias simbiontes, generalmente anaerobias estrictas,
que nos aportan vitamina K y B12, entre otras. Destaca Escherichia coli, anaerobia facultativa.
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b.- Microorganismos y ciclos biogeoqumicos: El nivel de los descomponedores en los


ecosistemas est constituido por hongos y bacterias que se alimentan de detritos orgnicos de otros
organismos del ecosistema, siendo responsables del reciclado de la materia orgnica en
descomposicin, volviendo a originar materia inorgnica asimilable por las plantas. En esta accin se
basa la utilizacin del estircol y otras sustancias naturales como abonado agrcola no contaminante.
a.- Ciclo del Nitrgeno:
Fijacin del nitrgeno: Consiste en la transformacin del N2 atmosfrico en Nitrgeno orgnico.
En medios acuticos es realizada por cianobacterias (Gn. Nostoc, Anabaena, p.e.), y e el terrestre
por bacterias libres aerobias, como el gn. Azotobacter, anaerobias, como el gn. Clostridium o
simbiontes, como el gn. Rhizobium (que forma ndulos en las races de las leguminosas) y
hongos, como el gn. Frankia.
Nitrificacin: Consiste en la oxidacin del amoniaco, procedente de la putrefaccin (debida a
bacterias y hongos edficos) de cadveres, hasta nitrato, por accin de bacterias auttrofa
quimiosintticas. En un primer paso el amoniaco pasa a nitritos (por accin de bacterias del gn
Nitrosomas, p.e.), y posteriormente ste es oxidado a nitratos (por bacterias del gen. Nitrobacter,
p.e.)
NH3
NO2NO3Nitrosomonas
Nitrobacter
Desnitrificacin: Es el proceso de transformacin de los nitratos en N2 atmosfrico, proceso que se
produce en condiciones anaerobias, por accin de las bacterias desnitrificantes (entre ellas las del
gn. Pseudomonas, Rhodobacter, Agrobacterium y Bacillus). De esta manera el suelo se
empobrece en nitratos.
b.- Ciclo del Carbono:
Los organismos productores auttrofos convierten CO2 en materia orgnica mediante la
fotosntesis. En condiciones aerbicas la fotosntesis la realizan plantas superiores, protistas
verdes (algas p.e.) y cianobacterias. En el mar el eslabn de los productores es ocupado por el
fitoplancton, constituido por microorganismos auttrofos. En condiciones anaerobias son las
bacterias fotosintticas y quimiosintticas los productores.
En el medio terrestre los cadveres son descompuestos por bacterias y hongos del suelo, que
liberan CO2 a la atmsfera. En condiciones anaerobias palustres, los restos vegetales se
transforman en carbn por accin bacteriana. En el mar, el plancton al morir se acumula en los
fondos marinos, y, tras ser enterrados, son reducidos por bacterias anaerobias, que originarn
petrleo.
c.- Ciclo del Azufre: Las bacterias desempean en l un papel crucial. En condiciones
aerobias, bacterias quimiosintticas utilizan los compuestos orgnicos del azufre (protenas p.e.)
produciendo sulfatos (forma en que el azufre es asimilado por las plantas). En condiciones
anaerobias, son bacterias fotosintticas las que los aprovechan, dando lugar a cido sulfhdrico
(sulfuro de hidrgeno) que, si escapan a la atmsfera, se oxidar para dar SO2 y ste a su vez, SO4H2.
c.- Para el medio ambiente: Dada la accin descomponedora y transformadora de los
microorganismos, hay ocasiones en que se aprovechan para eliminar sustancias contaminantes del
ambiente. Citaremos tres ejemplos:
a.- Biodegradacin del petrleo: Existe una gran cantidad de bacterias, mohos, levaduras
y algunas algas verdes que son capaces de oxidar los hidrocarburos, y se han empezado a utilizar
en la lucha contra los vertidos de crudo en el mar. Para la degradacin requieren determinadas
condiciones, como oxigenacin, disgregacin, pH adecuado..., que pueden ser proporcionadas por
la accin humana, de modo que la combinacin de ambos esfuerzos puede llevar a cabo una
eliminacin satisfactoria del petrleo vertido en un tiempo razonable. Los hidrocarburos voltiles
se evaporan y los componentes alifticos y aromticos de cadena larga son eliminados por accin
de los microorganismos, si se logra una disgregacin en gotculas y se aaden nutrientes
inorgnicos necesarios, tales como P y N, a las zonas afectadas por la marea negra.
10

b.- Biodegradacin de compuestos xenobiticos: Se denominan as aquellas sustancias


qumicas de origen industrial que no han existido en la naturaleza. Introducidos en ella por el
hombre, su degradacin a sustancias inorgnicas ha supuesto investigar, buscar y potenciar
microorganismos capaces de realizar esa etapa final del ciclo de la materia en el ecosistema Tierra.
Entre estos compuestos destacan, por su alta toxicidad, dos tipos:
Plsticos y similares: La investigacin realizada apunta hacia la conveniencia de utilizar los
fotobiodegradables (se alteran por la radiacin UV del sol, produciendo compuestos asimilables
por microorganismos), los que llevan almidn incorporado y los de origen microbiano (como el
polihidroxibutirano o PHB), fcilmente degradables.
Plaguicidas: Su degradacin es difcil, y pueden permanecer en los ecosistemas inalterados
durante muchos aos. Hoy se estudia la degradacin microbiana de estos compuestos, habindose
conseguido ya algunos resultados en el caso de los compuestos clorocarbonados (como el
tricloroetileno, altamente cancergeno).
c.- Depuracin de aguas residuales: Son aquellas que proceden del alcantarillado
domstico o de procesos industriales. Debido a su contenido en compuestos orgnicos e
inorgnicos no pueden verterse directamente a los ros o al mar, sino que antes deben ser tratadas
en plantas depuradoras, donde los microorganismos juegan un papel importante.
c.- Perjudiciales:
a.- Enfermedades producidas en plantas: Algunos de los microorganismos que producen
enfermedades infecciosas en plantas cultivadas por el hombre son:
a.- Bacterias: Gneros tales como Pseudomonas, Corynebacterium y Agrobacterium
originan en las plantas agallas o tumores, marchiteces, podredumbres, manchas en las hojas, cambios
de color en las partes afectadas, enanismos, deformaciones y retrasos en la maduracin de los frutos.
b.- Virus: Producen dos tipos de alteraciones: Los mosaicos, manchas amarillentas y zonas
necrticas en hojas e inflorescencias, y las deformaciones, como rizaduras de hojas, enanismos y
ramificaciones anormales.
c.- Hongos: Originan royas, podredumbres y tumores.
b.- Enfermedades producidas en animales: Muchas son las enfermedades que afectan a
animales de la cabaa ganadera, algunas de las cuales pueden ser transmitidas a la especie humana,
denominndose zoonosis. Pero en otros casi slo afectan a los animales, con las correspondientes
consecuencias econmicas. Dichas enfermedades pueden estar producidas por:
a.- Bacterias: Entre ellas destaca Clostridium chauvoei, que produce en todos los
rumiantes la enfermedad conocida como carbunco sintomtico, y que, para erradicarse, obliga a
quemar las reses muertas, pues sus esporas sobreviven en ellas; y Estafilococos y Estreptococos, que
producen mastitis, infecciones de las glndulas mamarias, que pueden llegar a destruirse, y que
ocasionan grandes prdidas en la produccin lctea.
b.- Virus: Dos enfermedades destacan: La peste porcina que origina septicemia y
hemorragias internas en los animales y la glosopeda, que afecta a animales de pezua hendida,
causando debilidad e incluso la muerte.
c.- Protozoos: son notorias las enfermedades que afectan a aves: la coccidiosis,
producida por Eimeria, que devasta gallineros, y la tricomonosis, que afecta a las palomas.
c.- Enfermedades producidas en el hombre: Las enfermedades causadas por virus y
microorganismos se denominan enfermedades infecciosas, y se manifiestan de muy diversas formas.
Es a mediados del S. XIX cuando se reconocen a los microorganismos (ya conocidos desde el S.
XVII) como causante de enfermedades. A partir de entonces se introdujeron procedimientos de
esterilizacin en hospitales y medidas de prevencin contra el contagio: potabilizacin de aguas,
erradicacin de insectos, perodos de cuarentena...
A veces la enfermedad es causada por las toxinas que producen (caso del botulismo, p.e.). En
otras ocasiones, un mismo organismo puede producir enfermedades distintas, como Streptococcus
pyogenes, que en la piel produce imptigo, en la garganta faringitis, y sus toxinas, tambin en la
garganta, escarlatina.
11

Enfermedad
Rabia

Agente
Rhabdovirus

Sarampin

Paramixovirus

Resfriado comn Rinovirus

Virus

Gripe

Ortomixovirus

Poliomielitis

Enterovirus

Paperas

Paramixovirus

Rubola

Paramixovirus

Varicela y Herpes Herpesvirus


Hepatitis A

Picornavirus

Hepatitis B

Hepadnavirus

Herpes genital

Herpesvirus

Ampollas en regin anogenital

SIDA

VIH

Depresin del sistema inmunitario

Meningitis

Meningococcus,
Haemophyllus B

Ttanos

Clostridium tetani

Faringitis

Streptococcus

Fiebre, dolor de cabeza, vmitos,


rigidez de nuca, prdida de conciencia
Contracciones dolorosas en todo el
cuerpo
Alteracin de las vas respiratorias
altas

Clera
Fiebre tifoidea
Gastroenteritis

Mycobacterium
tuberculosis
Corynebacterium
diphteriae
Bordetella pertussis
Clostridium
botulinum
Bacillus anthracis
Mycobacterium
leprae
Vibrio cholerae
Salmonella typhi
Escherichia coli

Peste

Yersinia pestis

Neumona o
pulmona

Streptococcus
pneumoniae
Neisseria
gonorrhoeae

Tuberculosis
Difteria
Tos ferina
Botulismo
Bacterias ntrax
Lepra

Gonorrea
Sfilis
Paludismo o
malaria
Disentera
Protozoos
amebiana
Tricomoniasis

Hongos

Sntomas
Excitacin, hidrofobia, parlisis
Goteo nasal, enrojecimiento de ojos,
fiebre, tos, exantema general
Goteo nasal, congestin
Fiebre, malestar general, dolor de
cabeza, vmitos y diarreas
Estado catarla inicial; a los 8 das
subida de fiebre. Parlisis
Inflamacin de glndulas salivares.
Hinchazn de cuello y mandbula
Como el sarampin, pero ms suave.
Puede afectar al feto de embarazadas
Exantema, erupciones cutneas. Dos
variedades: simple y zster
Trastornos hepticos. Color corporal
amarillo
Fiebre, dolores abdominales, vmitos
e ictericia. A veces asintomtico

Destruccin del tejido pulmonar


Pseudomembranas y destruccin de
tejidos en la garganta. Asfixia
Tos violenta en forma de pitido
Doble visin. Parlisis del diafragma.
Dificultad al hablar
Pstula rodeada de edema duro
Lesiones cutneas. Destruccin de
tejidos. Lesiones en nervios.
Diarrea aguda y deshidratacin
Trastornos digestivos, fiebre
Trastornos digestivos
Hinchazn de ganglios linfticos
(bubones)

Tratamiento
Vacuna de animales
Vacuna triple vrica
Descongestivos,
Vacuna
Vacuna
Vacuna triple vrica
Vacuna triple vrica
Globulinas
Vacuna y
gammaglobulinas
Preservativo. Vacuna
Preservativo.
Quimioterapia
Preservativo.
Quimioterapia
Antibiticos
Antitoxina. Tratamiento
sntomas
Antibiticos
Antibiticos
Vacuna
Vacuna. Antibiticos
Antitoxina botulnica
Vacuna. Antibiticos
Quimioterapia
(sulfonas)
Antibiticos
Antibiticos
Antibiticos
Antibiticos

Alteraciones respiratorias pulmonares Antibiticos

Preservativo.
Quimioterapia
Chancro en genitales. Exantema. Preservativo.
Treponema pallidum
Infeccin del sistema nervioso
Antibiticos
Infeccin de la uretra

Plasmodium sp.

Fiebre recurrente

Entamoeba
histolytica
Trichomonas
vaginalis

Diarrea fuerte con exudados de mucus


Quimioterapia
y sangre
Preservativo.
Infeccin de la uretra
Quimioterapia
Lesiones en los pliegues de la piel y
Antifngicos
mucosas con intenso picor
Placas en la piel. Cada del pelo
Antifngicos
Manchas en los pies
Antifngicos

Candidiasis

Candida albicans

Tias
Pie de atleta

Microsporum sp.
Microsporum

Vacuna. Quimioterapia

12

2.- BIOTECNOLOGA
A.- Concepto: En trminos generales, biotecnologa es el uso de organismos vivos o de algunos de
sus componentes para obtener productos de valor para el hombre.
Como tal, la biotecnologa ha sido utilizada por el hombre desde los comienzos de la historia en
actividades tales como la preparacin del pan y de bebidas alcohlicas o el mejoramiento de
cultivos y de animales domsticos. Hoy en da, los importantes avances, en ingeniera gentica y
nuevas tecnologas productivas han llevado a una redefinicin de Biotecnologa: Se entiende por
"biotecnologa moderna la que incorpora el uso de tcnicas de biologa molecular (ingeniera
gentica), y es la que, por el amplio abanico de posibilidades que ofrece, recibe actualmente mayor
atencin.
B.- Microorganismos utilizados en biotecnologa: Para alcanzar sus objetivos, la biotecnologa se
sirve de seres vivos, tales como microorganismos, clulas vegetales o animales, o constituyentes
de stas, como enzimas, cidos nucleicos, etc.
Hay tres grupos de microorganismos que tienen inters biotecnolgico: Bacterias (aerobias y
anaerobias estrictas o anaerobias facultativas, pero nunca fotosintticas), Levaduras y Mohos.
C.- Principales tcnicas empleadas en biotecnologa:
a.- Introduccin: La biotecnologa consiste en un gradiente de tecnologas que van desde las
tcnicas de la biotecnologa "tradicional", largamente establecidas y ampliamente conocidas y
utilizadas (fermentacin de alimentos o diseo de tcnicas de cultivo de microorganismos idneas
a escala industrial, p.e.), hasta la biotecnologa moderna.
Los primeros aos de la dcada de 1970 marcan un antes y un despus en la utilizacin de
seres vivos en las tecnologas humanas. A partir de esa fecha, estamos asistiendo a una revolucin
tecnolgica sin precedentes, fruto del extraordinario desarrollo de las tcnicas biotecnolgicas y,
en especial, de los avances logrados en la manipulacin gentica de los seres vivos. As, la
ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas avanzadas como la tecnologa
del ADN recombinante, la reaccin en cadena de la polimerasa y la terapia gnica, entre otras,
gracias a las cuales es posible aislar y manipular un fragmento de ADN de un organismo para
introducirlo en otro, aumentar el n de copias de un fragmento determinado de ADN o corregir un
defecto gentico hereditario reemplazando en las clulas de un organismo el gen defectuoso por
otro activo, capaz de fabricar la protena necesaria en cantidad suficiente.
b.- Clonacin de genes: Tcnicas de obtencin de ADN recombinante: Los procedimientos de
ingeniera gentica suelen comenzar con la denominada clonacin gnica, es decir, la obtencin
de un conjunto de copias de un gen determinado. Un clon de genes es, por tanto, un conjunto de
genes idnticos procedentes de un gen concreto. La clonacin de genes comprende varias etapas:
a.- Obtencin del ADN que contiene el gen: Se emplean distintos procedimientos.
Si el gen que
se
desea
clonar
procede de
una clula
procariota,
que
no
contiene
intrones, se
obtiene
directamente
del ADN de
la clula que
porta dicho gen. Se utilizan enzimas de restriccin, endonucleasas que cortan el ADN por puntos
donde existen secuencias especficas de bases nitrogenadas.

13

Si el gen que se desea clonar procede de una clula


eucariota, que posee intrones, se obtiene de un ADN
complementario del ARNm. En primer lugar se asla y
purifica el ARNm (que ya no contiene intrones) de la
protena buscada. A continuacin, y utilizando el
ARNm como molde, se emplea la transcriptasa
inversa, enzima capaz de transcribir el ARN en ADN,
para sintetizar artificialmente el ADN complementario.
b.- Insercin del gen en un vector de clonacin:
Una vez obtenido el ADN del gen elegido, debe unirse a un
vector de clonacin antes de introducirlo en la clula
hospedadora. Los vectores de clonacin son pequeas
molculas de ADN, generalmente circulares, que tienen
capacidad de autorreplicarse dentro de las clulas
hospedadoras, independientemente del o de los cromosomas
de stas. Los vectores ms utilizados son de dos tipos:
Plsmidos: Son molculas de ADN circular, presentes
en la mayora de las bacterias, con un tamao ms pequeo que el del cromosoma, y que pueden
replicarse con independencia del cromosoma bacteriano, ya que tienen su propio origen de
replicacin.
Virus bacterifagos: Durante la transduccin algunos genes de la bacteria husped pueden
incorporarse a su genoma. Cuando el fago infecte otra bacteria, puede
transferirle los genes de la primera. Tienen la ventaja de que tambin
contienen su propio origen de replicacin.
Tambin se usan otros, como cromosomas artificiales de levaduras (que
tienen la ventaja de que pueden albergar segmentos mayores de ADN de
lo que lo hacen los plsmidos o los bacterifagos) o Cromosomas
humanos artificiales (resultan tiles pues pueden mantenerse de forma
estable en clulas humanas y llevar genes que pueden ser expresados de
forma normal).
Adems del origen de replicacin, los vectores de clonacin deben portar
tambin otros genes, denominados marcadores, que identifiquen rpida y
fcilmente las clulas que contienen el vector de clonacin, como genes de
resistencia a antibiticos o genes de bioluminiscencia.
Para insertar un gen en un vector de clonacin, primero se corta el ADN
(que suele ser circular) por medio de enzimas de restriccin. La unin del
ADN que contiene el gen que se desea clonar con el vector de clonacin se
realiza por medio de otras enzimas, denominadas ADN ligasas. El resultado
es una molcula de ADN recombinante, ya que contiene fragmentos de ADN
de distinta procedencia.
c.- Introduccin del vector de clonacin en la clula hospedadora: Una vez obtenida la
molcula de ADN recombinante, es necesario introducirla en una clula hospedadora para que pueda
expresarse y producir la protena que codifica el gen que se desea clonar.
Las clulas hospedadoras deben cumplir una serie de requisitos para poder ser utilizadas en procesos
de clonacin:
Poseer un crecimiento rpido y ser estables en un medio de cultivo barato
No ser patgenas o peligrosas
Ser capaces de captar del medio molculas de ADN e incorporarlas al conjunto de su genoma
Poseer las enzimas adecuadas para permitir la replicacin del vector.
Con frecuencia se emplean clulas bacterianas como hospedadoras (p.e. Escherichia coli o Bacillus
subtilis), aunque no siempre es posible.
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Existen varios mtodos para introducir ADN en clulas vivas, que difieren en funcin de los tipos de
clula hospedadora (eucariota o procariota), y del vector de clonacin:
Transformacin: Se usa principalmente en clulas procariotas, que tienen la capacidad de captar
molculas de ADN que se encuentran en el medio externo, introducirlas en su interior e
incorporarlas a su genoma mediante recombinacin.
Transduccin: Si el vector de clonacin es
el genoma de un virus, el ADN es
introducido en la clula hospedadora por
el mismo virus. Sirve tanto para clulas
procariotas como eucariotas. Si el genoma
es de un virus ltico, es necesario suprimir
los genes responsables de la lisis celular,
ya que, de lo contrario, la clula
hospedadora se lisara como consecuencia
de la infeccin vrica. En el caso de virus
lisognicos, que insertan su genoma en
bacterias, hay que modificar tambin el
genoma vrico, para que se exprese el gen
que se desea clonar sin inducir el ciclo ltico.
d.- Deteccin del gen clonado: Ya dentro del organismo hospedador, el gen se replica. Como
no todas las clulas
contienen el gen que se
desea
clonar,
es
necesario seleccionar
aquellas
que
lo
contiene, para lo que se
utilizan los marcadores
antes
mencionados.
Una vez seleccionado
el clon deseado, al ser
alta la velocidad de
reproduccin, se puede
producir gran nmero
de clulas que lo
contengan, para su
aislamiento, estudio y
utilizacin.
c.- Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR): Es una tcnica desarrollada en 1985, mediante
la cual, y a partir de la capacidad de la ADN polimerasa para replicar el ADN, se obtienen en el
laboratorio mltiples copias de un fragmento determinado de ADN a partir de un n muy pequeo
de molculas (amplificacin del ADN in vitro), a diferencia de las tcnicas anteriores de clonacin
que amplificaban el ADN in vivo.
a.- Procedimiento: Primero se desnaturaliza la molcula o fragmento de ADN que se desea
replicar, para separar las dos hebras de la doble hlice, sometiendo el ADN a elevadas temperaturas.
Cada una de las hebras sirve como molde para sintetizar otra cadena complementaria. A fin de que la
ADN polimerasa pueda actuar copiando cada una de las cadenas complementarias, son necesarios unos
cebadores adecuados. En la mezcla de reaccin debe existir, asimismo, una concentracin suficiente de
nucletidos trifosfatos, que se utilizarn para construir las nuevas cadenas.

15

As se produce el primer ciclo de sntesis.


Si se repite el proceso ntegramente se partiran
de 4 hebras molde, y se obtendran 4 molculas
bicatenarias. Si se realiza de nuevo, se partira
de 8 hebras molde, en el siguiente de 16, y as
sucesivamente. Se trata de un proceso
exponencial, en el que se llevan a cabo tantos
ciclos como sea necesario para obtener el n de
copias deseado. Tras 20 ciclos de sntesis se
pueden obtener del orden de un milln de
copias de una molcula de ADN.
b.- Aplicaciones: Son muchas, y entre
ellas cabe destacar:
Clonacin de genes: La PCR ha resultado
muy til en la clonacin de genes, ya
que permite obtener un gran n de copias
del gen antes de la clonacin
propiamente dicha. Tambin es posible
amplificar genes mutados artificialmente
para su posterior clonacin.
Estudios evolutivos: Mediante la PCR se pueden amplificar genes de organismos ya extinguidos a
partir de cantidades muy pequeas de ADN presentes en algunos fsiles, para compararlos
posteriormente con genes semejantes de organismos actuales y estudiar la conservacin de ciertos
genes a lo largo de la evolucin.
Estudios histricos y arqueolgicos: Se han podido conocer datos referentes a enfermedades de
origen gentico amplificando ADN de muestras de individuos momificados, pertenecientes a
civilizaciones antiguas.
Huellas dactilares del ADN: Mediante esta tcnica es posible comparar muestras diferentes de
ADN para comprobar si pertenecen al mismo individuo o no, o si existe parentesco. Actualmente
se aplica en Medicina forense e investigaciones policiales, para identificar individuos a partir de
muestras biolgicas, como sangre, semen, piel o cabellos. Tambin se utiliza en pruebas de
paternidad.
D.- Algunas aplicaciones de la Biotecnologa:
a.- Farmacia y Sanidad: Los principales productos farmacuticos obtenidos por accin de los
microorganismos son:
Antibiticos: Son sustancias qumicas, sintetizadas por microorganismos, que impiden el
crecimiento de otros microorganismos o bien causan su muerte. El primero en descubrirse fue la
penicilina, por Alexander Fleming en 1929. Desde entonces, muchos ms han sido obtenidos en
la industria farmacutica, principalmente a partir de hongos filamentosos como Penicillium, o
bacterias del grupo de los Actinomicetos, como el gn. Streptomyces. Actualmente se conocen
unos 10.000 antibiticos, y se siguen descubriendo otros nuevos, aunque slo unos 100 estn
comercializados. En algunos casos son muy especficos, mientras que otros son efectivos frente a
un amplio n de agentes infecciosos (antibiticos de amplio espectro)
Vacunas: Se obtienen con preparaciones de agentes patgenos muertos y atenuados, para inducir
inmunidad frente al germen activo. Actualmente se obtienen mediante ingeniera gentica,
clonando los genes que codifican la protena que acta como antgeno. Luego esa protena se
introduce en bacterias no patgenas, que, al incorporar ese gen a su cromosoma, fabrican grandes
cantidades del antgeno, que, una vez aislado y purificado, se utiliza directamente como vacuna y
desarrollar la respuesta inmune, sin problemas de posibles infecciones, como sucede con las
vacunas tradicionales en algunas ocasiones. Este tema se desarrollar ms ampliamente en la
unidad siguiente.
16

Hormonas: Se obtienen mediante ingeniera gentica, introduciendo plsmidos recombinantes que


portan el gen que codifica la hormona deseada en bacterias apropiadas. Una vez en el interior de
la clula, los plsmidos se autorreplican al tiempo que las bacterias crecen y se dividen,
obtenindose una poblacin de clulas idnticas (clon) que contienen el gen. As se consigue,
p.e., la insulina humana (protena que permite que las clulas asimilen los glcidos que circulan
por la sangre), la hormona del crecimiento humana y la eritropoyetina (EPO) que se utiliza en
diferentes tipos de anemias, pues estimula la produccin de eritrocitos (glbulos rojos).
b.- Alimentacin: Es la biotecnologa con mayor tradicin en la historia de la civilizacin
humana, y dada la gran competitividad de la industria alimentaria, son numerosos los proyectos de
I + D que se dedican a estudiar cmo acelerar procesos de fermentacin y de mejora de los
alimentos primarios en los que las nuevas tcnicas biotecnolgicas desempean un papel crucial.
As se utilizan actualmente bacterias y levaduras genticamente manipuladas para acelerar la
elaboracin de los procesos fermentativos que dan lugar al queso, yogurt, cerveza...
a.- Fabricacin del pan: Las levaduras de la especie Saccharomyces cerevisiae llevan a cabo
una fermentacin alcohlica, que emplea como sustratos los azcares presentes en la harina de trigo.
Los productos resultantes son etanol, que se evapora en la coccin, y CO2, responsable de que la
masa suba, es decir, aumente de volumen y se esponje. La reaccin es la siguiente:
C6H12O6

2 CH3 CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP

La elaboracin del pan consiste en mezclar, en un primer paso, harina, agua, sal y levadura. Al
entrar en contacto con el agua, las amilasas presentes en la harina se activan e hidrolizan el almidn a
mono y disacridos, azcares que son rpidamente fermentados por la levadura. El CO2 resultante
queda atrapado en el interior de la masa y forma un gran n de pequeas burbujas que determinan el
aspecto esponjoso del mismo.
La coccin de la masa elimina el etanol producido en la fermentacin y destruye las clulas de
levadura. Asimismo, tiene lugar una importante reduccin en el contenido de agua.
b.- Fabricacin del vino y la cerveza: Intervienen tambin levaduras de la especie
Saccharomyces cerevisiae que llevan a cabo una fermentacin alcohlica semejante a la del pan, pero
usando como sustrato los azcares presentes en el mosto, el zumo natural de las uvas, rico en fructosa
y glucosa. La levadura se encuentra de forma natural en la piel de las uvas. Se obtiene etanol y CO2.
El proceso de fabricacin del vino se inicia con el prensado de las uvas para obtener el mosto. Las
levaduras de la uva comienzan la fermentacin rpidamente, aunque en la produccin industrial del
vino se aaden cepas de levaduras seleccionadas con el fin de acelerar el proceso y de incrementar el
contenido de etanol.
La fermentacin dura unos pocos das. Durante este tiempo es necesario controlar la velocidad
mediante la temperatura, ya que si sta aumenta mucho puede llegar a destruir las levaduras. Cuando
termina la fermentacin, el vino se aclara (mediante filtrado y aadiendo compuestos que facilitan la
precipitacin de los elementos en suspensin) y se embotella, si se desea obtener vinos jvenes, o se
somete a un proceso de maduracin en barricas apropiadas, para envejecerlo.
El vino blanco y el tinto se elaboran a partir del mosto de uvas blancas o negras. Para obtener vino
tinto hay que dejar la piel de la uva negra (el hollejo) en el vino. El alcohol producido en la fermentacin
extrae los pigmentos del hollejo que son los que dan el color al vino.
El CO2 resultante se evapora o se elimina artificialmente. En el caso de los vinos espumosos, se
les aade una cantidad extra de azcar para que se produzca una segunda fermentacin alcohlica que se
realiza a presin. En ella se libera el CO2 que constituye las burbujas.
La obtencin de cerveza es algo ms complicada, pues se elabora a partir de cereales que contienen
en sus granos almidn, que no fermenta directamente. Al germinar sus semillas producen amilasas, que
convierten el almidn en glucosa. As, la malta (granos de cebada germinados y tostados), cuando se
muele con agua, libera las amilasas que hidrolizan al almidn a glucosa, que es el sustrato para la
fermentacin alcohlica, que dura de 5 a 10 das. El producto final se consigue mediante la
17

incorporacin de algunos aditivos, como las flores de lpulo, responsables del sabor amargo de la
cerveza. Tambin se filtra y se pasteuriza, antes de que pueda ser bebida.
c.- Fabricacin del queso y leches fermentadas: En la elaboracin del queso y productos
como el yogur o la cuajada interviene las llamadas bacterias lcticas (pertenecientes a diversos gneros,
como Streptococcus, Lactobacillus y Lactococcus), que fermentan azcares sencillos para producir cido
lctico.
La reaccin de la fermentacin lctica es la siguiente:
C6H12O6
2 CH3 CHOH COOH + 2 ATP
La elaboracin del queso se lleva a cabo en 3 etapas:
Adicin a la leche de renina, tambin llamada cuajo, una enzima que se encuentra en el estmago
de los rumiantes. En combinacin con el cido lctico producido por las bacterias lcticas de la
leche, la renina precipita (coagula) las protenas lcticas, formando un producto slido, la
cuajada, que se separa posteriormente del componente lquido, el suero lcteo.
Separacin del suero y la cuajada, mediante un proceso de filtracin, haciendo pasar el conjunto a
travs de telas limpias. A continuacin se aade sal a la cuajada y se prensa para expulsar el agua.
Maduracin del queso: Segn el tipo de queso, en esta etapa final intervienen otras bacterias y
mohos, responsables del sabor y el olor propios de cada variedad de queso. Los agujeros
caractersticos de algunos de ellos son el resultado del CO2, desprendido durante la fermentacin,
que queda atrapado en la masa del queso y forma burbujas.
c.- Procesos de inters ambiental: Como ya explicamos, algunos microorganismos son tiles en
la lucha frente a la contaminacin, un proceso denominado Biorremediacin. Actualmente se
utilizan microorganismos capaces de consumir diversas sustancias txicas que pueden utilizarse
para descontaminar reas de la superficie, del subsuelo o de las aguas subterrneas.
La ingeniera gentica est empezando a estudiar diversas bacterias procedentes de medios
naturales, en las que se ha detectado la existencia de genes para la biodegradacin de desechos
txicos, como pesticidas clorados, clorobencenos, naftaleno, tolueno, anilinas... Los genes
deseados se aslan de especies como Pseudomonas y Alcaligenes y posteriormente se clonan
mediante plsmidos. As se consigue aumentar su efectividad.
Adems de las aplicaciones ya estudiadas, se estn potenciando mediante ingeniera gentica la
capacidad natural de muchas plantas para concentrar metales pesados, a fin de utilizarlas para
recuperar suelos contaminados (p.e. en el caso del cauce del ro Guadalquivir despus del vertido
de la balsa minera de Aznalcllar). Actualmente se est procediendo a la seleccin de las formas
adecuadas y a su experimentacin.

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UNIDAD DIDCTICA III: MICROBIOLOGA Y BIOTECNOLOGA


1.- MICROORGANISMOS
A.- Concepto de Microorganismo
B.- Principales grupos
a.- Formas acelulares: a.- Introduccin
b.-Virus: a.- Caractersticas generales
b.- Composicin y estructura
c.- Tipos de virus:
a.- Segn las caractersticas de la cpsida
b.- Segn el tipo de cido nucleico
c.- Segn el tipo de clula que infectan
d.- Actividad biolgica
e.- Ciclo vital: a.- Fase de adsorcin
b.- Fase de penetracin
c.- Fase de eclipse
d.- Fase de ensamblaje
e.- Fase de liberacin
f.- Origen de los virus
b.- Formas celulares: a.- Introduccin
b.- Arqueobacterias
c.- Eubacterias: a.- Estructura de la clula bacteriana
a.- Pared celular:
b.- Membrana plasmtica
c.- Citoplasma
d.- Material gentico
e.- Apndices bacterianos
b.- Morfologa bacteriana
c.- Fisiologa bacteriana
d.- Clasificacin de bacterias
d.-Algas
e.- Protozoos
f.- Hongos
C.- Relaciones entre los microorganismos y la especie humana
a.- Introduccin
b.- Beneficiosas
a.- Simbiosis: a.- Simbiosis entre microorganismos no fotosintticos y plantas superiores
b.- Simbiosis en la que el microorganismo es fotosinttico
c.- Simbiosis entre animales y microorganismos no fotosintticos
b.- Microorganismos y ciclos biogeoqumicos: a.- Ciclo del Nitrgeno
b.- Ciclo del Carbono
c.- Ciclo del Azufre
c.- Para el medio ambiente: a.- Biodegradacin del petrleo
b.- Biodegradacin de compuestos xenobiticos
c.- Depuracin de aguas residuales
c.- Perjudiciales
a.- Enfermedades producidas en plantas: a.- Bacterias
b.- Virus
c.- Hongos
b.- Enfermedades producidas en animales
a.- Bacterias
b.- Virus
c.- Protozoos
c.- Enfermedades producidas en el hombre

2.- BIOTECNOLOGA
A.- Concepto
B.- Microorganismos utilizados en biotecnologa
C.- Principales tcnicas empleadas en biotecnologa
a.- Introduccin
b.- Clonacin de genes: Tcnicas de obtencin de ADN recombinante
a.- Obtencin del ADN que contiene el gen
b.- Insercin del gen en un vector de clonacin
c.- Introduccin del vector de clonacin en la clula hospedadora
d.- Deteccin del gen clonado
c.- Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
a.- Procedimiento
b.- Aplicaciones
D.- Algunas aplicaciones de la Biotecnologa
a.- Farmacia y Sanidad
b.- Alimentacin
a.- Fabricacin del pan
b.- Fabricacin del vino y la cerveza
c.- Fabricacin del queso y leches fermentadas
c.- Procesos de inters ambiental

Respiracin Proceso metablico en el cual el oxgeno u otro compuesto Inorgnico es


utilizado como aceptor final de electrones y la produccin de ATP se realiza por
fosforilacin oxidativa.
Fermentacin: Proceso metablico anaerobio en el cual los compuestos orgnicos son
utilizados como dadores y aceptores de electrones y el ATP es producido por fosforilacin a
nivel de sustrato.
Aerobio: Organismo capaz de utilizar el oxgeno como aceptor terminal de electrones,
puede tolerar niveles de oxgeno iguales o superiores a los niveles presentes en la atmsfera
(21%), y tiene un metabolismo estrictamente respiratorio.
Anaerobio: Organismo que es incapaz de crecer en presencia de oxgeno. Pueden tener un
metabolismo fermentativo o respiratorio con aceptores terminales distintos del oxgeno.
Anaerobio facultativo: Organismo capaz de crecer en presencia y ausencia de niveles de
oxgeno atmosfrico (21%).
Microaerfilo: Organismo que tolera bajas concentraciones de oxgeno
Auttrofo: Organismo que utiliza compuestos inorgnicos como fuente de energa y CO2
como fuente de carbono.
Hetertrofo: Organismo que utiliza compuestos orgnicos como nica fuente de carbono.
Fottrofo: Organismo que utiliza la luz como fuente de energa.
Quimiolittrofo: Organismo que utiliza compuestos inorgnicos como fuente de energa.
Quimitrofo: Organismo que utiliza compuestos qumicos como fuente de Energa.
Quimiorgantrofo: Organismo que utiliza compuestos orgnicos como fuente de energa.

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