BIOTECNOLOGIA: Es el empleo de organismos vivos para

la obtencin de un bien o servicio til para el hombre.

Multidisciplinaria: Microbiologa, Ing. Gentica. Bioqumica,
Biologa molecular y celular
TRADICIONAL: Uso de organismos o microorganismos para
el mejoramiento gentico de organismos, 7000 AC
MODERNA: Uso de clulas, organismos vivos o
microorganismos basada en la ingeniera gentica. ADN
recombinante 1970
BIOTECNOLOGA VEGETAL
-Nuevas variedades con caractersticas mejoradas
-Que produzcan en mayores cantidades
-Tolerancia a condiciones adversas. Resistencia a herbicidas
especficos
-Control de plagas, cultivo durante todo el ao
BIOTECNOLOGA ALIMENTARIA
-Los Alimentos transgnicos pasan por un nmero mayor de
evaluaciones sanitarias antes de su comercializacin a
comparacin de uno natural.
Alimentos Transgnicos son derivados de organismos
genticamente modificados, por ejemplo: caf
descafeinado, tomate con mayor contenido de licopeno,
yuca con menos glucsidos, arroz dorado.
BIOTECNOLOGA INDUSTRIAL
-Produccin de vacunas recombinantes y medicinas
(insulina, hormonas..)
-Plantas silvestres debido a sus componentes y principios
activos
BIOTECNOLOGA ANIMAL
-Uso de tecnologas reproductivas, nuevas vacunas.
-Nuevas bacterias y cultivos celulares que producen
hormonas. Ejm: tilapias transg para hormonas de crec, vaca

transg resistente a la mastitis.

BIOTECNOLOGA AMBIENTAL
-Aplicacin de procesos biolgicos modernos para la
proteccin y restauracin del ambiente. BIORREMEDIACIN:
uso de microorganismos para el tratamiento y control de
contaminacin: aire, agua y suelos.
MICROPROPAGACIN: micropropagacin masiva de
individuos que a travs de su fragmentacin y posterior
desarrollo permitirn la formacin de plantas completas
asegurando la homogeneidad de la produccin.
BOTACIN DE YEMAS AXILARES:
1) ELECCIN Y PREPARACIN DE LA PLANTA MADRE:
crecimiento en condiciones de sanidad controladas con
tratamientos de rejuvenecimiento y pretratamientos con
reguladores de crecimiento.
2) ESTABLECIMIENTO DEL CULTIVO EN CONDICIONES
DE ASEPSIA
-Cortar brotes con caractersticas juveniles de la planta
madre. Lavar
-Descartar las hojas dejando solo los peciolos
-realizar la desinfeccin con etanol, enjuagar 3 veces con
agua destilada
-Cortar segmentos nodales, descartando los extremos basal
y apical.
-Introducir un segmento nodal con un medio de cultivo en
un tubo
-Tapar y colocar en cmara de crecimiento. Tarafina ingreso
de O2
LIMITANTES:
CONTAMINACIN: hongos(candida,aspergillus)
Bacterias(Pseudomonas, Staphylococcus) no sobreviven a la
aclimatacin, sntomas no visibles, virus

Sol: Hongos-desinfeccin Bacterias-Antibiticos Virus-Cltivod

meristemas
OXIDACIN: Amarronamiento del expalnto y/o el medio.
Inhibicin del crecimiento y muerte del explanto.
Causas: Accin de enzimas oxidasas liberadas en respuesta
a heridas
sol: Agua esteril 2-3 H previo a la introduccin. Empleo de
antioxidantes
3) MULTIPLICACIN
-Extraer los explantos que brotaron
-cortar separando brotes individuales o segmentos nodales
-Separar los brotes por tamao. Colocar en medio de
Multiplicacin
Limitantes:
-VARIACIN SOMACIONAL: variacin gentica heredable
sol: Reduccin del n d repiques. Uso racional de
reguladores d crecimiento
-HIBERHIBRICIDAD (VITRIFICACIN): desorde fisiolgico,
metablico y morf inducido por las condiciones de estrs
durante el cultivo invitro.
4) ELONGACIN Y ENRAIZAMIENTO
ELONGACIN: necesaria en especies con hbito de
multiplicacin en roseta
Tratamientos: medio sin citoquinina, Crecimiento en
oscuridad
ENRAIZAMIENTO: Invitro o Exvitro, sustratos
Problemtica: Capacidad de enraizamiento dependiente del
genotipo. Conexin de la raz
5) ACLIMATACIN
-Optimizar la transferencia del ambiente invitro a
condiciones de invernculo o campo. Minimizar prdidas y

acelerar el proceso
-------------------------------------------------------------------------------------------------ADN RECOMBINANTE (herramienta fundamental de la Ing.
Gentica)
Contiene partes de genes diferentes, genes completos o de
organismos diferentes y en muchos casos de especies
distintas. ETAPAS:
PREPARACIN DE LA SECUENCIA DEL ADN PARA SU
CLONACIN
-Partimos de clulas con ncleo, que deben ser lisadas
(rotas)
-Las protenas estructurales, enzimas, ARN y restos
moleculares deber separarse del ADN
-El ADN obtenido se conecta y se fragmenta por accin de
enzimas de restriccin.
* Las enzimas de restriccin son enzimas muy especficas
que reconocen una secuencia de ADN dplex rompiendo las
2 hebras en los sitios de reconocimiento o de restriccin.
PREPARACIN DE UN VECTOR DE CLONACIN
El vector es el portador de la secuencia de ADN que se
desea clonar.CARcT:
-Presentar una pequea secuencia de ADN fcil de aislar,
como un plsmido, tambin puede usarse un csmido, un
virus
-Contener dif puntos de ataque a enzimas de restriccin
-Poder ser incluido en la clula anfitriona con facilidad.
-Replicarse de forma independiente al ADN de la clula
anfitriona
-Poseer un gen marcador. Ejm: resistencia a un antibitico
FORMACIN DE ADN RECOMBINANTE: En esta etapa se
produce la unin covalente del vector y el ADN inserto

mediante una ligasa. As se realiza el sellado de la llamada

MELLA, MUESCA o NICK
INTRODUCCIN DEL ADN RECOMBINANTE EN LA
CLULA ANFITRIONA
Introducir el ADN recombinante en una clula anfitriona.
Clula en la que se introduce un vector que contiene ADN
inserto.
PROPAGACIN DEL CULTIVO: Primero se efecta una
siembra en placas Petri con agar como medio de cultivo. Se
dejan crecer las colonias. Cada una de ellas ser
seleccionada y transferida a distintos medios lquidos,
donde seguir aumentando el nmero de individuos de la
colonia.
DETECCIN Y SELECCIN DE LOS CLONES
RECOMBINANTES: Se realizan en los medios de Cultivo, ya
que se obtienen clulas anfitrionas que no han incluido el
vector y clulas recombinantes.
Mtodo de Hibridacin: se utiliza una sonda marcada que
hibrida con el ADN recombinante o con el ARN mensajero
que se transcribe a partir de l
Mtodo Inmunolgico: Se detecta la protena codificada en
el ADN recombinante mediante anticuerpos especficos.
Mtodos Genticos: Los vectores de clonacin deben llevar
genes llamados marcadores, que sirven para identificar las
clulas que contienen el vector

TRANSGNICOS
-Debe existir un mtodo eficiente de introduccin de ADN en
el tejido vegetal.
-Debe existir un marcador que permita seleccionar
eficazmente los tejidos transformados.
-Proceso de transformacin simple, eficaz, reproducible,
econmico e independiente del genotipo del organismo
utilizado.
-Proceso corto en el tiempo para evitar en lo posible la
variacin somacional y la esterilidad.

ADN EXGENO: requiere los siguientes componentes:

Promotor -> Transgen -> Marcador de seleccin -> Marcador
testigo
METODOS DE TRANSFORMACIN:
BIOLGICA: Transformacin con Agrobacterium
Agrobacterium tumefaciens: es un patgeno vegetal que
da lugar a un proceso tumoral en la corona de diversas
especies vegetales.
Agrobacterium rhizogenes: es un patgeno vegetal que
da lugar a una proliferacin radicular anormal en las plantas
infectadas.
Otro mtodo es proveer resistencia a las plantas,
incorporando genes de la toxina natural de la bacteria
Bacillus Thuringiensis para el control de plagas

FSICOS: transformacin de tropoplastos mediantes los

mtodos de: Electroporacin: Se basa en la aplicacin de
pulsos elctricos cortos y de alto voltaje en la membrana
celular, esto hace que aparezcan de forma temporal poros
que van a permitir la entrada en el interior de la clula de
macromolculas presentes en la solucin extracelular.
Tratamiento con Polietilenglicol: Un agente fusagnico
que modifica qumicamente las membranas al interaccionar
con los fosfolpidos que las componen, permite la entrada
del ADN exgeno en suspensin presente en el medio.
Transformacin con Liposomas: Se emplean liposomas
artificiales en cuyo interior viaja la suspensin de molculas
de ADN.
Biolstica: Consiste en propulsar los genes de inters
dentro de las clulas con la ayuda de un can de ADN, con
lo cual se modifica el ADN de las clulas.
Transformacin mediada por lser: Esta tcnica supone
la apertura de microorificios mediante un haz de lser, por
los que se facilita la penetracin de ADN desnudo en el
interior de la clula.
Femtoinyeccin: La transferencia del transgn es

mediante una microinyeccin de ADN con una femtojeringa

de expansin con galinstano
Abrasin con fibras: Consiste en la apertura de entradas
permanentes en las paredes y membranas celulares
mediante la mezcla a alta velocidad de clulas vegetales y
fibras abrasivas, generalmente de carburo de silicona,
recubiertas de ADN.

ADN ENDGENO
SILENCIAMIENTO GENTICO: Son tcnicas capaces de
impedir la expresin de un gen endgeno.
ARN antisentido.- Consiste en la sntesis de ARNm
complementario al del gen cuya expresin se desea
inactivar. Apartir del ARN antisentido se generan molculas
de ARN bicatenario que son escindidas y actan como
ARNm que no pueden ser traducidos.
Ribozimas.- Por ingeniera gentica se sintetiza ribozimas
especificas capaces de degradar ARNm de cualquier gen
que se desea silenciar en forma especfica.