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Objetivos
Diferenciar los procesos metablicos que
ocurren en la clula procariota y su
aplicacin en el cultivo y aislamiento
bacteriano.
Analizar los principales factores que
influyen en el crecimiento microbiano.
Bibliografa
CRECIMIENTO
Es el aumento
ordenado en la
suma de todos
los componentes
qumicos de un
microorganismo
CRECIMIENTO
CICLO CELULAR
POBLACIN MICROBIANA
Requerimientos
Materia
Orgnica
Carbono
Hidrgeno
Nitrgeno
Oxigeno
Fsforo
Azufre
Potasio
Sodio
Hierro
Magnesio
Calcio
Cloruro
Iones
Anabolismo
Catlisis
Fuente
de
Energa
Fuentes de
Carbono
Fuentes de energa
Sntesis de elementos celulares
Sntesis de enzimas , protenas
y cidos nucleicos.
Fuentes de
Nitrgeno
Fuentes de
Azufre y
Fsforo
Elementos
Trazas
Vitaminas
Elaboracin de protenas
y coenzimas
Sntesis de ATP, fosfolpidos
y cidos nucleicos
FACTORES AMBIENTALES
AFECTAN EL CRECIMIENTO
QUE
I-Factores fsicos:
-La temperatura
-Concentracin de iones de hidrogeno(pH)
-Aireacin
-Presin hidrosttica
-Presin osmtica
-Humedad
II-Factores nutricionales
Tiempo
Metabolismo microbiano.
Todas las transformaciones qumicas que ocurren
en una clula, encaminadas a la formacin de
estructuras bioqumicas complejas a partir de
elementos preformados o sintetizados por la
propia clula, requiriendo una fuente de energa.
Se divide en:
Catabolismo. Reacciones de
energa.
generacin
de
CULTIVO
proceso de proliferacin
de microorganismos al
proporcionarles
un
entorno con condiciones
apropiadas.
MTODOS DE CULTIVO
- aislamiento de un microorganismo
bacteriano.
ELECCIN DE UN MEDIO DE
CULTIVO ADECUADO.
Elementos a considerar:
-Diagnstico clnico
-Regin anatmica a estudiar.
-Existencia de flora normal o residente.
-Microorganismos patgenos a diagnosticar.
-Tipo de muestra a tomar
Medios de cultivo
Son preparados estriles que
contienen sustancias necesarias para
el
desarrollo
de
los
microorganismos.
AISLAMIENTO
DE MICROORGANISMOS
Colonias aisladas
Color
Blancas
Amarillas
Grises
Rosadas
Verdes
Pigmento
Consistencia
Mucoide
Seca
Circular
Puntiforme
Irregular
Rizoide
Bordes
Entero
Ondulado
Lobado
Filamentoso
Ondeado
Superficie
Aplanada
Elevada
Cncava
Convexa
Cupuliforme
Umbilicada
ORIENTACIONES
Estudio Independiente.
Metabolismo. Concepto. Vas biosintticas.
Vas o rutas catablicas comunes en el
metabolismo fermentativo y respiratorio.
Mecanismos de regulacin.
CONFERENCIA
Conferencia
Unidad II. Clula bacteriana.
Tema: Fisiologa microbiana. Crecimiento,
nutricin y metabolismo microbiano. Cultivo de
microorganismos
-Factores necesarios para la nutricin .
-Factores ambientales que afectan el crecimiento.
-Metabolismo
Bibliografa
-Brooks,G.F.(2011) Microbiologa Mdica.
Mxico,DF.: McGraw-Hill. Captulos 4,5 y 6
OBJETIVOS
-Analizar los principales factores que influyen
en el crecimiento microbiano.
-Diferenciar los procesos metablicos que
ocurren en la clula procariota y su aplicacin
en el cultivo y aislamiento bacteriano.
CRECIMIENTO
Es el aumento ordenado en la suma de todos
los componentes de un microorganismo.
CICLO CELULAR
CICLO CELULAR
-la replicacin del material de la bacteria
-la sntesis de sus componentes celulares
-el crecimiento para alcanzar un tamao doble
del inicial y su divisin por biparticin para dar
lugar a dos clulas hijas.
CRECIMIENTO MICROBIANO
Aumento del nmero de microorganismos
a lo largo del tiempo.
CURVA DE CRECIMIENTO
FASES O ETAPAS
Fase 1: etapa latente .
Adaptacin a un nuevo medio ambiente, de clulas con un arsenal
metablico empobrecido, carentes de sustratos, como resultados de
condiciones desfavorables al final del cultivo.
Existe un cese parcial de las funciones metablicas.
Formacin de enzimas y metabolitos , necesarios para la reanudacin del
crecimiento
Fase 2: etapa exponencial
Proceso de catlisis que conlleva al aumento en forma exponencial de la
masa bacteriana.
-Se agoten nutrientes.
-Se acumulen sustancias txicas.
-Se pongan de manifiesto las propiedades mas importantes de la clula.
FASES O ETAPAS
Fase 3: etapa estacionaria mxima.
-Cese completo del crecimiento por agotamiento
de nutrientes y acumulo de sustancias toxicas.
-Prdida lenta por muerte compensada debido a la formacin de clulas
nuevas mediante su divisin.
Fase 4: fase o etapa de declinacin o muerte.
-Aumento de la tasa de mortalidad hasta un nivel sostenido.
-persiste un pequeo numero de sobrevivientes, a expensas de los
nutrientes de las que mueren.
-La clula pierde toda la capacidad de para los procesos degradativos.
Auttrofos:nutrientes inorgnicos
FUENTES DE CARBONO
Hetertrofos: nutrientes orgnicos
FUENTES
FUENTES DE
DE NITRGENO
NITRGENO
QU NECESITA UN
MICROORGANISMO
PARA CRECER?
AZUFRE Y FSFORO
NH4+
NO3NO2-Sales
inorgnicas
de sulfato
-AA
-PO4-
ELEMENTOS TRAZAS
VITAMINAS
Vitamina B12
Vitamina K
Acido flico
NA
CL
K
Zinc
Manganeso
FACTORES AMBIENTALES
QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO
I-Factores fsicos:
-La temperatura
-Concentracion de iones de hidrogeno(pH)
-Aireacin
-Presin hidrosttica
-Presin osmtica
-Humedad
II-Factores nutricionales
TEMPERATURA
temperatura
hipertermfilos
50 a 60C
30 a 37C
15 a 20C
psicrfilos
mesfilos
termfilos
CONCENTRACIN
DE IONES HIDRGENO
AIREACIN
AEROBIOS. Microorganismos que viven en ambientes con tensiones
normales de oxgeno( 21 % de O2)
MICROAEROFLICOS. Microorganismos que se desarrollan mejor
presencia de niveles de oxgeno bajos( <21 % de O2)
en
PRESIN OSMTICA
HUMEDAD
METABOLISMO
El metabolismo se refiere a la suma de
reacciones bioqumicas requeridas para la
generacin de energa y el uso de la energa
para sintetizar material celular a partir de
molculas del medio ambiente.
El metabolismo se divide en:
Catabolismo. Reacciones de generacin de
energa.
Anabolismo. Reacciones de sntesis que
requieren de energa.
PROCESOS
CATABLICOS Y ANABLICOS
Cultivo
Proceso de propagar
los
microorganismos,
proporcionndoles
las
condiciones ambientales
adecuadas
MTODOS DE CULTIVO
Deben considerarse dos problemas:
ELECCIN DE UN MEDIO DE
CULTIVO ADECUADO.
Elementos a considerar:
-Diagnstico clnico
-Regin anatmica a estudiar.
CLASIFICACIN
AISLAMIENTO
DE MICROORGANISMOS
-Sembrado o aislamiento en placa
ORIENTACIONES
Practica No 3.Preparacin de medios de
cultivos.
Conferencia
Unidad IV . Bacteriologa
Sumario: Bacilos Gram positivos esporulados
(Bacillus, Clostridium) y no esporulados
(Corynebacterium)
-Caractersticas generales.
-Estructura antignica.
-Patogenia.
-Mtodos de diagnostico.
-Epidemiologia. Tratamiento.
Bibliografa
-Brooks,G.F.(2010) Microbiologa Mdica. Mxico,DF.:
McGraw-Hill. Capitulo 11. Bacilos grampositivos
formadores de esporas: especies de Bacillus y
Clostridium y 12. Bacilos grampositivos aerobios no
esporulantes
Objetivos
Conocer
caractersticas
generales,
patogenicidad, cuadro clnico, diagnstico y
tratamiento de bacilos Gram positivos
esporulados y no esporulados aerobios y
anaerobios
Microorganismos G (+)
formadores de esporas
1-Bacillus
2-Clostridium.
Gnero Bacillus
Microorganismos G (+) esporulados
aerobios
Especies:
-B. anthracis
-Bacillus cereus
-Bacillus subtilis
Caractersticas Generales
Genero Bacillus
-Bacterias en forma de bacilos grandes
-Gram positivos
-Crecimiento en forma de cadenas
-Aerobios
-Inmviles
-Esporulados (con espora de localizacin central)
-Se destruyen por ebullicin durante 10 minutos y en calor
seco a 140 C durante 3 horas
-Son resistentes a los cambios ambientales
-Soportan el calor seco
-Soportan la accin de desinfectantes qumicos
-Persisten durante varios aos en la tierra seca.
BACILLUS ANTHRACIS
1-Antigenos somticos:
-polisacrido de la pared celular
-polisacrido capsular
La
capsula
ejerce
un
efecto
antifagocitico
y
protege
al
microorganismo de la lisis mediada por
anticuerpos
BACILLUS ANTHRACIS
2-Toxina, consta de tres protenas:
-antgeno protector (PA)
-factor de edema (EF)
-factor mortal (LF)
El LF con el PA forman la toxina mortal, que
constituye el principal factor de virulencia y
provoca la muerte de los animales y seres
humanos infectados.
Patologa
ntrax o carbunco es una patologa bsicamente
de animales herbvoros:
Cabras
Ovejas
Caballos
Ganado vacuno
Patologa
En las personas la infeccin casi siempre se
adquiere cuando las esporas penetran:
-a travs de la piel lesionada (carbunco
cutneo)
-por inhalacin de las esporas (carbunco
pulmonar)
-por las mucosas (carbunco digestivo)
Patologa
Las esporas germinan en el tejido en el sitio de
entrada
y
la
proliferacin
de
los
microorganismos vegetativos tiene como
resultado la formacin de un edema gelatinoso
y congestin.
Cuadro clnico
Formas clnicas de presentacin
Cuadro clinico
Carbunco cutneo: por lo general aparece en
superficies expuestas de los brazos o manos,
seguidos por orden de frecuencia por la cara y
el cuello.
Entre 1 y 7 das despus de la penetracin de
los microorganismos o esporas a travs de un
rasguo, aparece una ppula pruriginosa. Al
principio es similar a la mordedura de un
insecto. Sin embargo, la ppula se transforma
rpidamente en vescula o un anillo pequeo de
vesculas que se unen formando una lcera
Cuadro clnico
Las lesiones miden entre 1 y 3 cm de dimetro
y poseen una escara negra central
caracterstica.
Se acompaan de edema pronunciado. Algunas
veces tambin existe linfangitis y linfadenopata
y signos y sntomas generales como:
fiebre
malestar general
cefalea.
Cuadro clnico
Despus de siete a 10 das, la escara alcanza
su mximo desarrollo.
Finalmente se seca, se debilita y se desprende.
La cicatrizacin se lleva a cabo por granulacin
y deja una cicatriz.
Algunas veces la lesin tarda varias semanas
en cicatrizar y el edema en desaparecer.
Cuadro clnico
Complicaciones:
Cuadro clnico
Carbunco respiratorio: periodo de incubacin de
hasta de seis semanas.
Las primeras manifestaciones clnicas son las
de necrosis hemorrgica pronunciada y edema
mediastnico.
En algunos pacientes el dolor retroesternal es
intenso y en la radiografa de trax se observa
ensanchamiento pronunciado del mediastino.
Cuadro clnico
Una vez que se extiende a la pleura, aparecen
derrames pleurales hemorrgicos; la tos es
secundaria a sus efectos sobre la trquea.
Cuadro clnico
Una vez que se extiende a la pleura, aparecen
derrames pleurales hemorrgicos
Tos, secundaria a los efectos sobre la trquea.
Sepsis, el microorganismo se disemina por va
hematgena hacia el aparato digestivo
provocando lceras intestinales o hacia las
meninges causando meningitis hemorrgica.
Tasa de mortalidad mas alta.
Cuadro clnico
Carbunco digestivo: se caracteriza por
-dolor abdominal
-vmito
-diarrea hemorrgica.
DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
1-Muestras:
Liquido de lesiones locales(ppulas o vesculas)
-Pus
-Sangre
-Esputo
DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
3-Cultivo:
DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
-B. anthracis (inmvil)
-Bacillus cereus (mvil)
-Bacillus subtilis (mvil)
Diagnstico serolgico
Inmunofluorescencia
para
diferenciar
especies
-B. anthracis
-Bacillus cereus
En muestras de suero de
enfermos y convalescientes
Epidemiologa
La tierra se contamina con esporas de
carbunco provenientes de los cuerpos de
animales muertos.
Permanecen viables durante varias dcadas.
Germinan en la tierra a un pH de 6.5 cuando la
temperatura es adecuada.
Epidemiologa
-Los animales que pastan y que se infectan a
travs de las mucosas lesionadas sirven para
perpetuar la cadena de la infeccin.
-El contacto con los animales infectados o con
su piel, pelo y cerdas, constituye el origen de la
infeccin en el ser humano.
Medidas de control
1) eliminacin de los cadveres de animales
por cremacin o enterrarlos en pozos de cal
profundos.
2) descontaminacin (casi siempre por medio
de autoclave) de los productos animales.
3) uso de ropa protectora y guantes al
manipular
materiales
potencialmente
infectados.
4) inmunizacin de animales domsticos con
vacunas de bacilos vivos atenuados. Las
personas con un riesgo laboral elevado deben
Tratamiento
-Ciprofloxacina
-Caso de contacto potencial con B. anthracis
como arma biolgica: profilaxis con ciprofloxacina
o doxiciclina se prolonga durante cuatro semanas
mientras se administran tres dosis de vacunas, o
durante ocho semanas si no se administra
vacuna.
Bacillus cereus
Produce intoxicacin alimentaria con 2 formas
de presentacin:
-la variedad emtica, desencadenada por
ingerir arroz frito.
Empieza entre 1 y 5 h despus de ingerir arroz
y algunas veces platillos a base de pasta.
Se caracteriza por nusea, vmito, clicos
abdominales y en ocasiones diarrea y remite
espontneamente con una recuperacin dentro
de las primeras 24 h.
Bacillus cereus
-la variedad diarreica, por ingerir platillos con
carne y salsas.
El periodo de incubacin de la variedad
diarreica es de 1 a 24 h y se manifiesta por
diarrea abundante con dolor y clicos
abdominales; rara vez se acompaa de fiebre y
vmito.
La enterotoxina viene preformada en el
alimento o bien se produce en el intestino.
Otras enfermedades
I-Infecciones oculares
2-Endocarditis
3-Meningitis
4-Osteomielitis
5-Neumona
Tratamiento
-Infecciones
transmitidas
por
alimentos:
doxiciclina, eritromicina o ciprofloxacina.
Seminario
Genero Clostridium:
-Clostridium botulinum
-Clostridium tetani
-Clostridium perfringes
-Clostridium difficile
.Diferenciar segn localizacin de esporas.
Caractersticas generales
-Bacilos G(+)
-Forma en palillo de tambor", dentro del bacilo (a
menudo cerca de los polos) se encuentran
dilataciones irregulares, les dan apariencia de
maza.
Caractersticas generales
-Bacilo individuales: apariencia de letra china
-Aerobio obligado
-Producen acido , pero no gas de glucosa y
maltosa
Estructura antignica
Cepas de C. diphtheriae toxignico: elaboran
exotoxina (las que portan el profago beta)
Su produccin in vitro depende de:
-concentracin de hierro.
-presin osmtica
-concentracin de aminocidos
-pH
-disponibilidad de fuentes adecuadas
carbono y nitrgeno.
de
Estructura antignica
Toxina de C. diphteriae:
Acta causando dao celular por interferencia con
la sntesis proteica .
La toxina de la difteria se absorbe hacia las mucosas y
produce destruccin del epitelio y una respuesta inflamatoria
superficial.
Patologa
El epitelio necrtico queda embebido en la
fibrina exudativa y los eritrocitos y leucocitos,
de manera que se forma una seudomembrana
griscea, por lo general sobre amgdalas,
faringe o laringe.
Cualquier
tentativa
de
eliminar
seudomembrana expone y desgarra
capilares y por tanto produce hemorragia.
la
los
Patologa
sta se absorbe y da lugar a una lesin txica a
distancia,
sobre
todo
degeneracin
parenquimatosa, infiltracin adiposa y necrosis
de msculo cardiaco, hgado, riones y
suprarrenales, que a veces se acompaa de
hemorragia abundante.
La toxina tambin produce lesin nerviosa, lo
que a menudo resulta en parlisis del paladar
blando, los msculos oculares o las
extremidades.
Cuadro clnico
Difteria
-respiratoria
-cutnea (se presenta en el trpico, las formas
no toxgenas no invaden tejidos profundos ni la
sangre)
Cuadro clnico
1-Faringitis:fiebre
-postracin
-disnea
-asfixia
-trastornos del ritmo cardiaco
-dificultades visuales
-de lenguaje
-de la deglucin
-del movimiento de los brazos o las
piernas.
Complicaciones
En pacientes inmunodeprimidos:
-neumona
-endocarditis
-infecciones seas
Diagnostico
1-Muestras:
-Hisopados nasales
- Hisopados farngeos
-de otras lesiones sospechosas (por debajo de
cualquier membrana visible).
Diagnstico
2- Examen directo:
Diagnstico
Cultivo:
-placa de agar sangre(descartar estreptococo B
hemoltico)
Diagnstico
En un trmino de 12 a 18 h, el cultivo inclinado
de Loeffler puede producir microorganismos de
morfologa difteroide caracterstica (colonias
pequeas , granulares , grisceas, con bordes
irregulares)
Diagnstico
-En agar sangre las colonias de C. diphtheriae
son pequeas, granulosas y grises, con bordes
irregulares y pueden tener pequeas zonas de
hemlisis.
-En telurito de potasio que contiene agar las
colonias son de color pardo a negro con un halo
negro pardusco debido a que el telurito se
reduce dentro de la clula (puede aadirse a
agar sangre o chocolate)
Diagnostico
Pruebas de toxigenicidad:
-Prueba in vivo (administracin del microorganismo
a animales de experimentacin)
Epidemiologa
-Aislar a los pacientes enfermos.
-Inmunizacin en la infancia y refuerzos segn
esquema de vacunacin.
Tratamiento
-Penicilina, eritromicina: inhiben el crecimiento
de los bacilos de la difteria.
Inhiben el crecimiento del bacilo, detienen la
produccin de toxina.
Tambin ayudan a eliminar estreptococos y C.
diphtheriae
concomitantes
del
sistema
respiratorio de pacientes o portadores.
-Administracin de antitoxina.
Tratamiento
-Inmunizacin: vacuna DPT
CONFERENCIA
Objetivos
Bibliografa
Desarrollo de la Quimioterapia
Paul Ehrlich
conductor de los experimentos con los arsenicales para el tratamiento
de la sfilis.
los principios de la toxicidad selectiva
reconocimiento de las relaciones qumicas especficas entre los
parsitos y las drogas.
la funcin de la terapia combinada
Alexander Fleming
Descubrimiento de la penicilina
Gerhard Domagk
Sntesis de las sulfonamidas
Quimioterpico: Medicamento
obtenido por sntesis qumica.
Antimicrobiano: Medicamentos
de origen natural, semisinttico
o sinttico , tiles en el
tratamiento de enfermedades
infecciosas.
Toxicidad Selectiva
Ser nocivo para el microorganismo patgeno
sin daar al hospedador.
Es una funcin de un receptor especfico
necesario para la fijacin del frmaco o bien
depende de la inhibicin de algn
acontecimiento bioqumico indispensable para
el microorganismo patgeno pero no para el
hospedador.
CLASIFICACIN
Biolgico
Sinttico
Semisinttico
Origen
Espectro de
accin
Estructura
qumica
Bajo espectro
Amplio espectro
Bacteriostticos
Bactericidas.
Bactericidas:
Inhibicin
de
sntesis de pared,
membrana celular,
protenas, cidos
nuclecos.
Beta- lactmicos
Macrlidos
Glicopptidos
Tetraciclinas.
Aminoglucsidos
Quinolonas
Sulfamidas y otros
ORIGEN NO GENTICO
ORIGEN DE LA
RESISTENCIA
DE LAS
BACTERIAS A
LOS
ANTIBITICOS
ORIGEN GENTICO
ORIGEN NO GENTICO
1-Resistencia fenotpica.
2-Prdida de su sitio de accin especfico para
un frmaco durante varias generaciones.
3-Localizacion en el hospedero en sitios donde
los antimicrobianos no penetran o no son
activos.
ORIGEN GENTICO
Resistencia
cromosmica
Resistencia
extracromosmica
1.Transduccin
2. Transformacin
3. Conjugacin
4. Transposicin
de
un
antimicrobiano
en
pH ambiental
Componentes del medio
Tamao del inculo
Estabilidad del frmaco
Intervalo de incubacin
Actividad metablica de los microorganismos
Antibiograma
Determinacin de la susceptibilidad de
los microorganismos a una variedad de
agentes
antimicrobianos
,
bajo
condiciones de laboratorio especficas y
estandarizadas.
1.Mtodos cualitativos:
-por difusin.
2. Mtodos cuantitativos:
-dilucin en caldo.
-dilucin de Agar.
-E-test.
-Concentracin o Break points.
Difusin en agar
Mtodo tambin
llamado difusin
por disco o
Kirby-Bauer
Difusin en agar
El microorganismo es inoculado en la
superficie de una placa de agar, sobre el cual
se colocan discos impregnados con una
concentracin conocida del antibitico.Las
placas se incuban por 16-18 horas a 37 C.
Durante la incubacin, el antibitico difunde
radialmente desde el disco a travs del agar,
por lo que su concentracin va
disminuyendo a medida que se aleja del
disco.
Ventajas
-Es el mtodo mas usado.
-Es practico y sencillo de
implementar y realizar
-Es un mtodo estandarizado.
-Permite analizar un gran numero
de antibiticos.
Dilucin en caldo
Lectura e interpretacin
E-test
Ventajas
-Mtodo de eleccin para
hacer
estudios
de
susceptibilidad en grmenes
problemticos
o
con
requerimientos especiales,
Ej: Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pyogenes.
Haemophilus influenzae
Grmenes anaerbicos.
uso