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Inmunoelectroforesis en
Enfermedades del
sistema inmune
Protocolo de indicaciones e interpretacin clnica de la inmunoelectroforesis de
las inmunoglobulinas en la prctica clnica
ML Montes Ramreza L Snchez Martneza E Ruano Sorianob M Rodrguez Zapatac
aDepartamento

de Medicina. Universidad de Alcal. Servicio de Medicina Interna. Hospital Universitario de

Guadalajara.
b
Servicico de Medicina Interna. Hospital Universitario de Guadalajara.
cDepartamento de Medicina. Universidad de Alcal. Servicio de Medicina Interna. Hospital Universitario de
Guadalajara.

Introduccin
Las alteraciones cualitativas o cuantitativas de las inmunoglobulinas forman parte del
cuadro clnico de numerosas enfermedades y constituyen una caracterstica
fundamental y crtica en algunas de ellas. Para su estudio es necesario combinar
distintas pruebas de laboratorio, ya que ninguna de ellas aporta, de forma individual, una
informacin completa que permita caracterizar las diferentes situaciones patolgicas. La
electroforesis de alta resolucin de las protenas en gel de agarosa es el procedimiento
inicial y permite un anlisis cualitativo y semicuantitativo de las protenas en general y,
concretamente, de las inmunoglobulinas1. La inmunofijacin o la inmunoelectroforesis
son tcnicas
fundamentales para diferenciar entre un aumento policlonal y monoclonal de las
inmunoglobulinas.Las tcnicas de inmunodifusin radial, nefelometra y turbidometra
permiten el estudio cuantitativo de las inmunoglobulinas. Adems, en muchas
ocasiones, es necesario completar el estudio con otros procedimientos como la
determinacin de la eliminacin urinaria de protenas y la inmunodifusin en orina de 24
horas o la medicin de la viscosidad srica en pacientes con signos o sntomas
sugerentes de un sndrome de hiperviscosidad2. Dado el elevado nmero de las tcnicas
de laboratorio, es esencial su utilizacin ordenada y racional, as como establecer una
estrecha relacin entre el clnico y el laboratorio para optimizar el estudio de cada
paciente3. A continuacin describiremos las indicaciones y el significado clnico de las
principales pruebas de laboratorio implicadas en el estudio de las inmunoglobulinas.

Electroforesis de las protenas. Proteinograma

El fraccionamiento de las protenas sricas por electroforesis en gel de agarosa o
celulosa es un procedimiento sencillo y barato, mediante el cual las protenas emigran
bajo la accin de un campo elctrico y se localizan en cinco grandes regiones que se
denominan albmina, alfa-1-globulina, alfa-2-globulina, beta-globulina y gammaglobulina. Recientemente se ha desarrollado la electroforesis de alta resolucin que
permite una mayor precisin en la separacin de las protenas.
Las inmunoglobulinas (Ig) IgG, IgA, IgM, IgD, IgE estn contenidas en la fraccin gamma
del proteinograma, pero pueden encontrarse tambin en la regin beta, beta-gamma y,
ocasionalmente, en la regin alfa-23.
Alteraciones de la fraccin gamma del proteinograma

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Existen distintos patrones patolgicos en el proteinograma srico cuya descripcin
excede el contenido de este captulo, por lo que nos limitaremos a la de las alteraciones
de la fraccin gamma (fig. 1).

Fig. 1. Alteraciones de la fraccin gamma del proteinograma srico.

Hipogammaglobulinemia
La presencia de una fraccin gamma inferior a 0-6 g/dl se denomina hipogammaglobulinemia y puede ser producida bien por un defecto congnito, como es el caso de
algunas inmunodeficiencias primarias4, bien de forma adquirida formando parte del
cuadro clnico de enfermedades como el mieloma mltiple, la amiloidosis primaria, la
leucemia linftica crnica, los linfomas, el sndrome nefrtico o el tratamiento con
glucocorticoides5 (tabla 1). La existencia de una hipogammaglobulinemia debe siempre
documentarse mediante la cuantificacin de los niveles sricos de IgG, IgA e IgM.

Hipergammaglobulinemia
El aumento de la fraccin gamma en el proteinograma srico se denomina
hipergammaglobulinemia. Este aumento puede ser heterogneo (policlonal) u
homogneo (monoclonal).
La hipergammaglobulinemia policlonal aparece como una banda ancha y difusa en la
regin de la gammaglobulina. Traduce la expansin de distintos clones de clulas B, que
producen diferentes tipos de inmunoglobulinas y se caracteriza por la presencia de una
o ms clases de cadenas pesadas (*, * y ) y ambas clases de cadenas ligeras (* y *).
Se produce, habitualmente, en el seno de enfermedades inflamatorias, infecciosas o
reactivas. Ejemplos de hipergammaglo bulinemia policlonal son la hepatopata crnica,
las enfermedades del colgeno vascular, las infecciones crnicas o las enfermedades
linfoproliferativas (tabla 2). Sin embargo, en ocasiones, la presen cia de una
hipergammaglobulinemia po liclonal no se acompaa de ningn es tado patolgico
identificable clnicamente5.

Gammapatas monoclonales
El aumento homogneo de la fraccin gamma se denomina gammapata monoclonal y
se reconoce como una banda estrecha o densa en el gel de agarosa, que se localiza en
la fraccin gamma o beta, y excepcionalmente en la fraccin alfa-2 del proteinograma
srico. Las gammapatas monoclonales constituyen un grupo de enfermedades (tabla 3)
caracterizadas por la proliferacin de un nico clono de clulas B. Este clono produce
una inmunoglobulina homognea formada por dos cadenas pesadas de una misma
clase (*, *, , * o *) y dos cadenas ligeras de una nica clase (* o *) que recibe distintas
denominaciones, como paraprotena, protena monoclonal, componente M o protena M.

Indicaciones de la electroforesis de las protenas

La electroforesis de las protenas est indicada siempre que se sospeche la presencia
de mieloma mltiple, macroglobulinemia de Waldestrm, amiloidosis primaria u otra
discrasia de clulas plasmticas (tabla 4). Adems, est indicada en cualquier paciente
con signos o sntomas, por otra parte inexplicados, que sugieran la existencia de alguna

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de estas enfermedades6,7.

En presencia de alguno de estos hechos, o si se detecta una banda monoclonal en el

proteinograma srico, el estudio se debe completar mediante la realizacin de una
inmunofijacin o una inmunoelectroforesis para definir el tipo de protena anormal.
Inmunoelectroforesis
La inmunoelectroforesis es una tcnica que combina la separacin electrofortica de las
protenas con la precipitacin inmunolgica frente a antisueros especficos anti-cadenas
pesadas (*, , *, *, *) y anti-cadenas ligeras (* o *). Aunque fue la tcnica original
empleada para identificar protenas monoclonales, es menos sensible, ms lenta y,
frecuentemente, ms difcil de interpretar que la inmunofijacin o la inmunosustraccin.
Por ello, en el momento actual, la mayora de los laboratorios no la utilizan para el
estudio de protenas monoclonales en sangre u orina.

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Inmunofijacin
La inmunofijacin es el mtodo de eleccin para identificar componentes mo noclonales
por su mayor resolucin y rapidez6,7. Es una tcnica similar a la inmunoelectroforesis, en
la que despus de una electroforesis se realiza una incubacin con antisueros
especficos. La inmunofijacin es crtica para la diferenciacin entre un aumento
monoclonal o policlonal de las inmunoglobulinas5.
Indicaciones de la inmunofijacin
La inmunofijacin debe realizarse siempre que se detecte una banda estrecha o un pico
en la electroforesis en gel de agarosa o cuando se sospeche la presencia de un mieloma
mltiple, macroglobulinemia, amiloidosis primaria o enfermedades relacionadas (tabla 5).

Indicaciones adicionales de la inmunofijacin son: la deteccin de una pequea cantidad

de protena M en presencia de inmunoglobulinas normales o aumenta das1,3,6,7;
pacientes con mieloma mltiple o macroglobulinemia en los que el tratamiento haya
producido la desaparicin de la protena M en la electroforesis de rutina; el
reconocimiento y distincin de gammapatias biclonales o triclonales. Adems, se debe
estudiar la posibilidad de una IgD o IgE monoclonal en todos los pacientes con
presencia de una cadena ligera monoclonal en el suero pero sin reactividad frente a
antisueros anti-G, anti-A o anti-M.

Cuantificacin de las inmunoglobulinas

La cuantificacin de las inmunoglobulinas en suero, habitualmente por nefelometra o
por inmunodifusin radial, es una tcnica obligada ante la presencia de una gammapata
monoclonal, tanto para dosificar la Ig monoclonal como para medir la concentracin de
las Ig normales, lo que ayuda al diagnstico diferencial entre los casos de gammapata
monoclonal de origen incierto de aquellas que son expresin de una discrasia de clulas
plasmticas. Es una tcnica obligada en el estudio de una hipogammaglobulinemia.

Electroforesis e inmunofijacin de la orina concentrada

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La electroforesis de la orina concentrada es la prueba de eleccin para detectar la
eliminacin urinaria de cadenas ligeras libres (proteinuria de Bence-Jones). La medida
de la eliminacin urinaria de cadenas ligeras libres aporta una informacin importante
sobre el ndice de masa tumoral y permite la monitorizacin futura de su aumento o
disminucin. Por otra parte, es til para diferenciar una gammapata monoclonal de
significado incierto de las enfermedades proliferativas malignas de clulas plasmticas.
Indicaciones
En todo paciente con una gammapata monoclonal debe cuantificarse la proteinuria de
24 horas y efectuar una electroforesis e inmunoelectroforesis o inmunfijacin de una
muestra de orina concentrada. Est indicada, inicialmente, en todo paciente con
mieloma mltiple, macroglobulinemia de Waldestrm, amiloidosis primaria, enfermedad
de cadenas pesadas o sospecha de estas entidades, y en todos los pacientes en los que
se detecten cadenas ligeras monoclonales en suero (proteinemia de Bence-Jones).

Evaluacin y seguimiento de un paciente con una gammapata

monoclonal
Si el paciente no tiene otros datos de discrasia de clulas plasmticas y la protena M en
suero es menor de 1,5 g/dl, la electroforesis de las protenas se debe repetir a intervalos
anuales6. La mayora de las veces no es necesario hacer puncin o biopsia de mdula
sea, radiografas del esqueleto ni inmunofijacin de la orina de 24 horas (fig. 2).

Fig. 2. Evaluacin y seguimiento de un paciente con gammapata monoclonal. TAC:

tomografa axial computarizada

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Si el paciente est asintomtico y tiene una protena M de 1,5 a 2,5 g/dl, deben
realizarse estudios adicionales, como la cuantificacin de las inmunoglobulinas y
electroforesis e inmunofijacin de la orina de 24 horas. La electroforesis srica debe
repetirse en tres a seis meses y si permanece estable anualmente, o tan pronto como se
presente algn sntoma o complicaciones.
Si el pico srico de IgG o IgA es mayor de 2,5 g/dl, la posibilidad de que el paciente
presente un mieloma mltiple es mayor. Se debe hacer un estudio seo metastsico,
incluyendo la visualizacin del hmero y del fmur, electroforesis e inmunofijacin en
orina de 24 horas, aspirado de mdula sea. Si los estudios son normales, la
electroforesis se debe repetir en dos o tres meses, y si el paciente est estable en tres o
cuatro meses, y s contina estable al ao.
La presencia de una protena M de tipo IgM de ms de 2,5 g/dl sugiere la presencia de
una macroglobulinemia de Waldestrm, y se debe realizar un aspirado o biopsia de
mdula sea y una tomografa axial computarizada abdominal.
Estos comentarios sirven como una aproximacin sugerida y el mdico debe alterar sus
estudios dependiendo del cuadro clnico global.
Referencias Bibliogrficas:
1. Kyle RA, Katzman JA Immunological characterizacion of inmunoglobulinas. En: Rose NR, Conway de Macario E,
Folds JD, eds. Manual of Clinical Laboratory Immunology. (5. ed) Washington DC: American Society for Microbiology,
1997.
2. Keren DF, Alexanian R, Goeken JA, Gorevic PD, Kyle RA, Tomar RH Guidelines for clinical laboratory evaluation of
patients with monoclonal gammapathies. Arch Pathol Lab Med 1999; 123: 106-107.
3. Gallart T Principales pruebas inmunolgicas de inters clnico. En: Farreras Rozman, eds. Medicina Interna (14
ed.) Harcourt, 2000; 3.179-3.185.
4. Rosen FS, Cooper MD, Wedgwood RJ The primary immunodeficiencies. New Engl J Med 1995; 333: 431-440.
5. Alexanian R, Weber D, Liu F Differential diagnosis of monoclonal gammopathies. Arch Pathol Lab Med 1999; 123:
108-113.
6. Kyle RA Sequence of testing for monoclonal gammapa thies. Arch Pathol Lab Med 1999; 123: 114-118.
7. Keren DF Procedures for the evaluation of monoclonal inmunoglobulins. Arch Pathol Lab Med 1999; 123: 126-132